專利名稱：：芪天滴丸提取物和芪天滴丸及其生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，是一種芪天滴丸提取物和芪天滴丸及其生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
：冠心病即冠狀動(dòng)脈粥樣硬化心臟病，是一種嚴(yán)重危害人類健康的疾病。資料表明，冠心病多發(fā)生在40多歲以后，患病率隨年齡的增長(zhǎng)而增高，程度隨年齡的增長(zhǎng)而加重，自40歲開(kāi)始，每增加10歲，患病率增加l倍。冠心病的發(fā)病率男性多于女性、腦力勞動(dòng)者多于體力勞動(dòng)者。冠心病在歐美國(guó)家極為常見(jiàn)，美國(guó)約有700萬(wàn)人患有冠心病，每年約有50余萬(wàn)人因冠心病發(fā)作而導(dǎo)致死亡，占人口死亡數(shù)的1/31/2。近年來(lái)，隨著人口老齡化的加速，人民生活水平的提高，生活節(jié)奏的加快，飲食結(jié)構(gòu)向高熱、高脂化的發(fā)展，冠心病在我國(guó)的發(fā)病率和死亡率呈迅速上升趨勢(shì)且發(fā)病趨勢(shì)呈現(xiàn)年輕化勢(shì)頭。冠心病在中國(guó)每小時(shí)奪取300人的性命，在全世界每小時(shí)大約要奪走1500人的性命，這一統(tǒng)計(jì)數(shù)字震驚了醫(yī)藥界。最新統(tǒng)計(jì)資料顯示，目前我國(guó)患有不同程度的冠心病人超過(guò)一億人，冠心病造成的死亡人數(shù)已超過(guò)死亡總?cè)藬?shù)的50%。專家估計(jì)，在今后10年內(nèi)，我國(guó)男性冠心病發(fā)病率將增加26.1%，女性將增加19.0%。由于冠心病的高發(fā)病率和高死亡率，已經(jīng)嚴(yán)重危害了和仍然危害著人類的身體健康，給無(wú)數(shù)家庭帶來(lái)了和仍將帶來(lái)巨大的痛苦，己成為危害人類健康及生命的"頭號(hào)殺手"。現(xiàn)在，冠心病已被現(xiàn)代西醫(yī)列為不可治愈的病癥，已受到全世界醫(yī)學(xué)界的高度重視，引起了全社會(huì)的廣泛關(guān)注。冠心病是目前影響人類健康、造成死亡的最重要因素之一，被稱為危害人類健康的頭號(hào)"殺手"，因此國(guó)外排名靠前的制藥公司多有自己的拳頭產(chǎn)品，冠心病用藥物是這些藥業(yè)巨頭的主要利潤(rùn)來(lái)源。冠心病的防治是目前世界醫(yī)藥科學(xué)研究的重大課題，傳統(tǒng)中醫(yī)藥學(xué)在治療冠心病方面積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，中醫(yī)更強(qiáng)調(diào)整體的治療，標(biāo)本兼治預(yù)防為主，中藥以不良反應(yīng)小而著稱，國(guó)內(nèi)冠心病藥物市場(chǎng)總的格局是中西藥各占一半。在我國(guó)的同類產(chǎn)品中，目前冠心病產(chǎn)品市場(chǎng)表現(xiàn)活躍，據(jù)中華商務(wù)網(wǎng)2004年3月5日?qǐng)?bào)道，目前國(guó)內(nèi)冠心病藥物市場(chǎng)的規(guī)模為158億元，總的市場(chǎng)格局是中西藥各占一半。盡管治療冠心病的中成藥品種繁多，但不外乎三大種類，分別以活血化瘀、扶正寧心、芳香溫通為主。重在活血化瘀者，如復(fù)方丹參片及滴丸、速效救心丸、心可舒片、步長(zhǎng)腦心通、通心絡(luò)膠囊等；重在扶正寧心者，如心元膠囊、養(yǎng)心氏片、補(bǔ)心氣與滋心陰口服液、參麥液等；重在芳香溫通者，如冠心蘇合丸、麝香保心丸、心寶等，除以上三類藥物外，還有一些從中草藥中提取有效成份的制劑，如銀杏天寶，心達(dá)康，地奧心康等。在中成藥產(chǎn)品中，除了"地奧心血康"、"步長(zhǎng)腦心通"和"復(fù)方丹參滴丸"三大品種外，石家莊以嶺藥業(yè)的"通心絡(luò)膠囊"、山西中遠(yuǎn)威藥業(yè)集團(tuán)的"溶栓膠囊"、天津六中藥的"速效救心丸"以及"天保寧銀杏葉"等新老品種也在市場(chǎng)上占有舉足輕重的地位，對(duì)冠心病中成藥市場(chǎng)起主導(dǎo)和控制作用。由于冠心病屬于中醫(yī)學(xué)胸痹范疇，以血瘀為其主要癥候，故上述3個(gè)主要品種中，復(fù)方丹參滴丸在中、西醫(yī)院的市場(chǎng)占有率均高于其他同類藥，其銷售、利潤(rùn)連年翻番，呈現(xiàn)出強(qiáng)勁的上升勢(shì)頭，并取代了地奧心血康連續(xù)多年占據(jù)全國(guó)心腦血管疾病用藥榜首位置，成為新霸主。但復(fù)方丹參滴丸中所含的冰片成分，對(duì)胃腸道有刺激作用，使得伴有"胃寒"癥狀的慢性胃炎、消化性潰瘍患者難以接受。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供一種芪天滴丸提取物和芪天滴丸及其生產(chǎn)方法，其克服了上述現(xiàn)有技術(shù)之不足，所得提取物含有的黃芪甲苷、芍藥苷、紅景天苷和羥基紅花黃色素較高，該提取物的生產(chǎn)方法易操作，所得芪天滴丸有明顯活血化瘀、益氣養(yǎng)陰、補(bǔ)益正氣，養(yǎng)治結(jié)合，補(bǔ)治兼行之功效，用于治療心肌缺血，效果顯著，該芪天滴丸的生產(chǎn)方法易操作。本發(fā)明的技術(shù)方案之一是通過(guò)以下方式得到的一種芪天滴丸提取物，其按原料重量百分比組成為黃芪30%至40%，赤芍20%至25%，紅景天20%至25%，紅花20%至25%。下面是對(duì)上述技術(shù)方案之一的進(jìn)一步優(yōu)化和/或選擇上述芪天滴丸提取物可按重量百分比含有O.024%至0.032%的黃芪甲苷、1.05%至1.20%的芍藥苷、0.30%至0.45%的紅景天苷和0.25%至0.40%的羥基紅花黃色素。上述芪天滴丸提取物可按下述步驟得到(1)取所需要量的紅景天、赤芍，粉碎，過(guò)篩，成最粗粉，放入提取罐中，加10倍量75%的乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮并回收乙醇至每lml濃縮液含紅景天藥材O.25g和赤芍藥材0.25g;取所需要量的紅花飲片，加15倍量水，7(TC水浴浸泡提取三次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮至每lml濃縮液含紅花飲片藥材O.25g，用P/。鹽酸溶液調(diào)節(jié)提取液pH值為2;將上述兩提取液等體積比混合，得到提取液l;取上述提取液l，過(guò)DIOI、HPDIOO、HPD400和HPD600中的一種或一種以上的大孔吸附樹(shù)脂，樹(shù)脂徑高比為l:3至1:9，上樣液濃度為每lml濃縮液含紅景天藥材O.25g和赤芍藥材O.25g，吸附速度為O.5BV至3BV/h，吸附時(shí)間為6小時(shí)至12小時(shí)，先用2BV至4BV水以3BV至6BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用8BV至10BV的20。/。乙醇溶液以3BV至5BV/h的洗脫速度洗脫，收集洗脫液，將洗脫液減壓回收乙醇濃縮至2(TC相對(duì)密度為1.05至1.20的稠膏或制成干膏粉，即得第一芪天滴丸提取物；(2)另取所需要量的黃芪，粉碎，過(guò)篩，成最粗粉，放入提取罐中，力陽(yáng)倍量70%的乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮并回收乙醇至每lml濃縮液含黃芪藥材lg，得提取液2;取上述提取液2，過(guò)DIOI、HPDIOO、HPD400和HPD600中的一種或一種以上的大孔吸附樹(shù)脂，樹(shù)脂徑高比為1:3至1:9，上樣液濃度為每lml濃縮液含黃芪藥材lg，吸附速度為3BV至5BV/h，吸附時(shí)間為6小時(shí)至12小時(shí)，先用5BV至7BV水以3BV至5BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用5BV至7BV的80。/。的乙醇以3BV至5BV/h的流速洗脫，收集洗脫液，將洗脫液減壓回收乙醇濃縮至2(TC相對(duì)密度為1.05至1.20的稠膏或制成干膏粉，即得第二芪天滴丸提取物；(3)將上述第一芪天滴丸提取物和第二芪天滴丸提取物混合均勻，即得芪天滴丸提取物。本發(fā)明的技術(shù)方案之二是通過(guò)以下方式得到的一種上述芪天滴丸提取物的生產(chǎn)方法，其按下述步驟進(jìn)行(1)取所需要量的紅景天、赤芍，粉碎，過(guò)篩，成最粗粉，放入提取罐中，加10倍量75%的乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮并回收乙醇至每lml濃縮液含紅景天藥材O.25g和赤芍藥材0.25g;取所需要量的紅花飲片，加15倍量水，7(TC水浴浸泡提取三次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮至每lml濃縮液含紅花飲片藥材O.25g，用P/。鹽酸溶液調(diào)節(jié)提取液pH值為2;將上述兩提取液等體積比混合，得到提取液l;取上述提取液l，過(guò)DIOI、HPDIOO、HPD400和HPD600中的一種或一種以上的大孔吸附樹(shù)脂，樹(shù)脂徑高比為l:3至1:9，上樣液濃度為每lml濃縮液含紅景天藥材0.25g和赤芍藥材0.25g，吸附速度為O.5BV至3BV/h，吸附時(shí)間為6小時(shí)至12小時(shí)，先用2BV至4BV水以3BV至6BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用8BV至10BV的20。/。乙醇溶液以3BV至5BV/h的洗脫速度洗脫，收集洗脫液，將洗脫液減壓回收乙醇濃縮至2(TC相對(duì)密度為1.05至1.20的稠膏或制成干膏粉，即得第一芪天滴丸提取物；(2)另取所需要量的黃芪，粉碎，過(guò)篩，成最粗粉，放入提取罐中，力陽(yáng)倍量70%的乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮并回收乙醇至每lml濃縮液含黃芪藥材lg，得提取液2;取上述提取液2，過(guò)DIOI、HPDIOO、HPD400和HPD600中的一種或一種以上的大孔吸附樹(shù)脂，樹(shù)脂徑高比為1:3至1:9，上樣液濃度為每lml濃縮液含黃芪藥材lg，吸附速度為3BV至5BV/h，吸附時(shí)間為6小時(shí)至12小時(shí)，先用5BV至7BV水以3BV至5BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用5BV至7BV的80%的乙醇以3BV至5BV/h的流速洗脫，收集洗脫液，將洗脫液減壓回收乙醇濃縮至2(TC相對(duì)密度為1.05至1.20的稠膏或制成干膏粉，即得第二芪天滴丸提取物；(3)將上述第一芪天滴丸提取物和第二芪天滴丸提取物混合均勻，即得芪天滴丸提取物。本發(fā)明的技術(shù)方案之三是通過(guò)以下方式得到的一種根據(jù)上述芪天滴丸提取物為原料之一的芪天滴丸，其芪天滴丸提取物與藥用基質(zhì)比例按重量份計(jì)為l:l至l:3。本發(fā)明的技術(shù)方案之四是通過(guò)以下方式得到的一種上述芪天滴丸的生產(chǎn)方法，其按下述步驟得到稱取藥用基質(zhì)聚乙二醇，其重量與芪天滴丸提取物比例按重量份計(jì)為l:l至3:1，于7(TC至10(TC水浴鍋上完全熔融后，加入芪天滴丸提取物，攪拌混勻后，倒入滴丸機(jī)的裝料槽中，攪拌，使藥液溫度達(dá)95。C，保溫30分鐘后，在8厘米至10厘米的滴距下，以50滴/分鐘至60滴/分鐘的速度滴入冷卻液中，待滴丸完全收縮冷凝成型后，取出，用甩油機(jī)除去滴丸表面的冷卻液即得。本發(fā)明所得芪天滴丸為新疆一老中醫(yī)多年臨床有效驗(yàn)方，由黃芪、赤芍、紅景天、紅花四味藥組成，具有活血化瘀、益氣養(yǎng)陰、補(bǔ)益正氣，養(yǎng)治結(jié)合，補(bǔ)治兼行之功效，用于治療心肌缺血，效果顯著。本發(fā)明所得芪天滴丸提取物含有的羥基紅花黃色素、芍藥苷、紅景天苷和黃芪甲苷都有提高，該芪天滴丸提取物的生產(chǎn)方法易操作。本發(fā)明所得芪天滴丸的藥效學(xué)試驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)大鼠心肌缺血損傷，復(fù)方丹參滴丸與芪天滴丸各劑量組均有不同程度的保護(hù)作用，其中復(fù)方丹參滴丸與芪天滴丸中劑量組效果相近，說(shuō)明芪天滴丸有顯著的治療心肌缺血的作用。本發(fā)明所得芪天滴丸是一種使用方便和依從性好的新型制劑，該芪天滴丸的生產(chǎn)方法易操作。附圖1至3為芍藥苷對(duì)照品、芍藥苷純化后、芍藥苷純化前測(cè)定的色譜圖。附圖4至6為羥基紅花黃色素對(duì)照品、羥基紅花黃色素純化后、羥基紅花黃色素純化前測(cè)定的色譜圖。附圖7至9為紅景天苷對(duì)照品、紅景天苷純化后、紅景天苷純化前測(cè)定的色譜圖。附圖10至12為黃芪甲苷對(duì)照品、黃芪甲苷純化后、黃芪甲苷純化前測(cè)定的色譜圖。具體實(shí)施例方式本發(fā)明不受下述實(shí)施例的限制，可根據(jù)上述本發(fā)明的技術(shù)方案和實(shí)際情況來(lái)確定具體的實(shí)施方式。下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步論述實(shí)施例l，該芪天滴丸提取物其組分按原料重量百分比組成為黃芪30%，赤芍20%，紅景天25%，紅花25%。實(shí)施例2，該芪天滴丸提取物其組分按原料重量百分比組成為黃芪40%，赤芍20%，紅景天20%，紅花20%。實(shí)施例3，該芪天滴丸提取物其組分按原料重量百分比組成為黃芪30%，赤芍25%，紅景天20%，紅花25%。實(shí)施例4，該芪天滴丸提取物其組分按原料重量百分比組成為黃芪35%，赤芍25%，紅景天20%，紅花20%。實(shí)施例5，該芪天滴丸提取物其組分按原料重量百分比組成為黃芪30%，赤芍25%，紅景天25%，紅花20%。實(shí)施例6，該芪天滴丸提取物按重量百分比含有0.024%的黃芪甲苷、1.05%的芍藥苷、0.30%的紅景天苷和0.25%的羥基紅花黃色素。實(shí)施例7，該芪天滴丸提取物按重量百分比含有0.030%的黃芪甲苷、1.10%的芍藥苷、0.35%的紅景天苷和0.30%的羥基紅花黃色素。實(shí)施例8，該芪天滴丸提取物按重量百分比含有0.032%的黃芪甲苷、1.20%的芍藥苷、0.45%的紅景天苷和0.40%的羥基紅花黃色素。在上述實(shí)施例6至8的芪天滴丸提取物還含有黃芪、赤芍、紅景天和紅花的其它遺留物。上述實(shí)施例1至8可通過(guò)以下生產(chǎn)方法得到實(shí)施例7，該芪天滴丸提取物的生產(chǎn)方法按下述步驟進(jìn)行取所需要量的紅景天和赤芍各粉碎成最粗粉，力的倍量95%乙醇回流提取三次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓回收乙醇并濃縮至每lml濃縮液含紅景天藥材0.25g和赤芍藥材0.25g，備用；取紅花飲片20g，力Q9倍量水，7(TC水浴浸泡提取三次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮至每lml濃縮液含紅花O.25g，用P/。鹽酸溶液調(diào)節(jié)提取液pH值為2，與濃度為每lml濃縮液含紅景天藥材O.25g和赤芍藥材0.25g的紅景天、赤芍混合濃縮液以等體積比混合后，上D101型大孔樹(shù)吸附脂柱，柱徑高比為1:3，上樣體積為2BV，吸附速度為O.5BV/h，吸附時(shí)間為6小時(shí)，先用2BV水以3BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用8BV的20。/。乙醇溶液以3BV/h的洗脫速度洗脫，收集洗脫液，將洗脫液回收乙醇濃縮成稠膏或干燥成浸膏，即得第一芪天滴丸提取物。取所需要量的黃芪粉碎成最粗粉，力的倍量90%乙醇回流提取三次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓回收乙醇并濃縮至每lml濃縮液含黃芪藥材lg，上HPD100型大孔吸附樹(shù)脂，樹(shù)脂徑高比為1:3，上樣體積為2BV，吸附速度為3BV/h，吸附時(shí)間為6小時(shí)，先用5BV水以3BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用5BV的80。/。的乙醇以3BV/h的流速洗脫，收集洗脫液，將洗脫液回收乙醇濃縮成稠膏或干燥成浸膏，即得第二芪天滴丸提取物。將提取物1和提取物2混合均勻，即得芪天滴丸提取物。將該芪天滴丸提取物用甲醇適當(dāng)稀釋后測(cè)定，其中黃芪甲苷的轉(zhuǎn)移率為60%、芍藥苷的轉(zhuǎn)移率為70%、紅景天苷的轉(zhuǎn)移率為60%、羥基紅花黃色素的轉(zhuǎn)移率為25%。實(shí)施例8，該芪天滴丸提取物的生產(chǎn)方法按下述步驟進(jìn)行取所需要量的紅景天和赤芍各粉碎成最粗粉，力陽(yáng)倍量85%乙醇回流提取三次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓回收乙醇并濃縮至每lml濃縮液含紅景天藥材0.25g和赤芍藥材0.25g，備用；取紅花飲片23g，加12倍量水，7(TC水浴浸泡提取兩次，每次2.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮至每lml濃縮液含紅花O.25g，用P/。鹽酸溶液調(diào)節(jié)提取液pH值為2，與濃度為每lml濃縮液含紅景天藥材O.25g和赤芍藥材0.25g的紅景天、赤芍混合濃縮液以等體積比混合后，上HPD100型大孔樹(shù)吸附脂柱，柱徑高比為1:6，上樣體積為3BV，吸附速度為lBV/h，吸附時(shí)間為8小時(shí)，先用3BV水以4BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用9BV的20。/。乙醇溶液以4BV/h的洗脫速度洗脫，收集洗脫液，將洗脫液回收乙醇濃縮成稠膏或干燥成浸膏，即得第一芪天滴丸提取物。取所需要量的黃芪粉碎成最粗粉，力陽(yáng)倍量70%乙醇回流提取兩次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓回收乙醇并濃縮至lml濃縮液含黃芪藥材lg，上HPD600型大孔吸附樹(shù)脂，樹(shù)脂徑高比為1:6，上樣體積為3BV，吸附速度為4BV/h，吸附時(shí)間為8小時(shí)，先用6BV水以4BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用6BV的80。/。的乙醇以4BV/h的流速洗脫，收集洗脫液，將洗脫液回收乙醇濃縮成稠膏或干燥成浸膏，即得第二芪天滴丸提取物。將提取物1和提取物2混合均勻，即得芪天滴丸提取物。將該芪天滴丸提取物用甲醇適當(dāng)稀釋后測(cè)定，其中黃芪甲苷的轉(zhuǎn)移率為65%、芍藥苷的轉(zhuǎn)移率為75%、紅景天苷的轉(zhuǎn)移率為70%、羥基紅花黃色素的轉(zhuǎn)移率為30%。實(shí)施例9，該芪天滴丸提取物的生產(chǎn)方法按下述步驟進(jìn)行取所需要量的紅景天和赤芍各粉碎成最粗粉，加10倍量75%乙醇回流提取兩次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液減壓回收乙醇并濃縮至每lml濃縮液含紅景天藥材0.25g和赤芍藥材0.25g，備用；取紅花飲片25g，加15倍量水，7(TC水浴浸泡提取三次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液減壓濃縮至每lml濃縮液含紅花O.25g，用P/。鹽酸溶液調(diào)節(jié)提取液pH值為2，與濃度為每lml濃縮液含紅景天藥材O.25g和赤芍藥材0.25g的紅景天、赤芍混合濃縮液以等體積比混合后，上HPD400型大孔樹(shù)吸附脂柱，柱徑高比為1:9，上樣體積為4BV，吸附速度為2BV/h，吸附時(shí)間為10小時(shí)，先用4BV水以5BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用10BV的20。/。乙醇溶液以5BV/h的洗脫速度洗脫，收集洗脫液，回收乙醇濃縮成稠膏或干燥成浸膏，即得第一芪天滴丸提取物。取所需要量的黃芪粉碎成最粗粉，加10倍量80%乙醇回流提取三次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，，濾過(guò)，濾液離心，取上清液減壓回收乙醇并濃縮至lml濃縮液含黃芪藥材lg，上D101型大孔吸附樹(shù)脂，樹(shù)脂徑高比為1:9，上樣體積為4BV，吸附速度為5BV/h，吸附時(shí)間為IO小時(shí)，先用7BV水以5BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用7BV的80。/。的乙醇以5BV/h的流速洗脫，收集洗脫液，將洗脫液回收乙醇濃縮成稠膏或干燥成浸膏，即得第二芪天滴丸提取物。將提取物1和提取物2混合均勻，即得芪天滴丸提取物。將該芪天滴丸提取物用甲醇適當(dāng)稀釋后測(cè)定，其中黃芪甲苷的轉(zhuǎn)移率為75%、芍藥苷的轉(zhuǎn)移率為78%、紅景天苷的轉(zhuǎn)移率為80%、羥基紅花黃色素的轉(zhuǎn)移率為35%。實(shí)施例IO，該芪天滴丸提取物的生產(chǎn)方法按下述步驟進(jìn)行取取所需要量的紅景天和赤芍各粉碎成最粗粉，加12倍量60%乙醇回流提取三次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液減壓回收乙醇并濃縮至每lml濃縮液含紅景天藥材0.25g和赤芍藥材0.25g，備用；取紅花飲片25g，加18倍量水，7(TC水浴浸泡提取一次，5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液減壓濃縮至每lml濃縮液含紅花O.25g，用P/。鹽酸溶液調(diào)節(jié)提取液pH值為2，與濃度為每lml濃縮液含紅景天藥材O.25g和赤芍藥材0.25g的紅景天、赤芍混合濃縮液以等體積比混合后，上HPD600型大孔樹(shù)吸附脂柱，柱徑高比為1:9，上樣體積為5BV，吸附速度為3BV/h，吸附時(shí)間為12小時(shí)，先用4BV水以6BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用10BV的20。/。乙醇溶液以5BV/h的洗脫速度洗脫，收集洗脫液，將洗脫液回收乙醇濃縮成稠膏或干燥成浸膏，即得第一芪天滴丸提取物。取所需要量的黃芪粉碎成最粗粉，加12倍量60%乙醇回流提取三次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液減壓回收乙醇并濃縮至lml濃縮液含黃芪藥材lg，上HPD400型大孔吸附樹(shù)脂，樹(shù)脂徑高比為1:9，上樣體積為5BV，吸附速度為5BV/h，吸附時(shí)間為12小時(shí)，先用7BV水以5BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用6BV的80。/。的乙醇以4BV/h的流速洗脫，收集洗脫液，將洗脫液回收乙醇濃縮成稠膏或干燥成浸膏，即得第二芪天滴丸提取物。將提取物1和提取物2混合均勻，即得芪天滴丸提取物。將該芪天滴丸提取物用甲醇適當(dāng)稀釋后測(cè)定，其中黃芪甲苷的轉(zhuǎn)移率為80%、芍藥苷的轉(zhuǎn)移率為80%、紅景天苷的轉(zhuǎn)移率為90%、羥基紅花黃色素的轉(zhuǎn)移率為40%。對(duì)上述所得芪天滴丸提取物中黃芪甲苷、芍藥苷、紅景天苷和羥基紅花黃色素的檢測(cè)分析方法如下實(shí)驗(yàn)藥物黃芪甲苷、芍藥苷、紅景天苷和羥基紅花黃色素對(duì)照品(均購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所)I.芍藥苷的測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005版附錄VID)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(40:65)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm。理論板數(shù)以芍藥苷計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥器中干燥36小時(shí)的芍藥苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，即得。供試品溶液的制備精密稱取芪天滴丸提取物O.lg，置10ml量瓶中，甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，即得。測(cè)定方法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。II.HSYA(羥基紅花黃色素)的測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005版一部附錄VID)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(26:2:72)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為403nm。理論板數(shù)以HSYA計(jì)算應(yīng)不低于2000。對(duì)照品溶液的制備精密稱取HSYA對(duì)照品，力n25y。甲醇制成每lml含0.13mg的溶液，即得。供試品溶液的制備精密稱取芪天滴丸提取物O.lg，置10ml量瓶中，甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。III.紅景天苷的測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005版一部附錄VID)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(15:85)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為275nm。理論板數(shù)以紅景天苷計(jì)算應(yīng)不低于2000。對(duì)照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，即得。供試品溶液的制備精密稱取芪天滴丸提取物O.lg，置10ml量瓶中，甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。IV.黃芪甲苷的測(cè)定照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005版一部附錄VIB)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水(32:68)為流動(dòng)相；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，理論板數(shù)以黃芪甲苷計(jì)算應(yīng)不低于4000。對(duì)照品溶液的制備精密稱取黃芪甲苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，即得。供試品溶液的制備精密稱取芪天滴丸提取物O.lg，置10ml量瓶中，甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，即得。結(jié)果，芪天滴丸提取物中黃芪甲苷占總浸膏量的0.024%0.032%、芍藥苷占總浸膏量的1.05%1.20%、紅景天苷占總浸膏量的O.30%0.45%、羥基紅花黃色素占總浸膏量的O.25%0.40%。實(shí)施例ll，該芪天滴丸及其生產(chǎn)方法如下芪天滴丸提取物10g，藥用基質(zhì)PEG4000:20g;化料溫度7crc油浴溫度上限70°C下限65°C;底盤(pán)溫度上限70°C下限65°C;制冷溫度上限15°C下限10°C;冷卻劑二甲基硅油；滴距10cm，滴速50士3滴/min;具體生產(chǎn)方法稱取藥用基質(zhì)PEG4000量為20g，于7(TC水浴鍋上完全熔融后，第一芪天滴丸提取物10g，攪拌混勻后，倒入滴丸機(jī)的裝料槽中，攪拌、保溫30分鐘后，在10cm的滴距下，以50滴/min的速度滴入二甲基硅油冷卻液中，待滴丸完全收縮冷凝成型后，取出，用甩油機(jī)除去滴丸表面的冷卻液即得。實(shí)施例12，該芪天滴丸及其生產(chǎn)方法如下芪天滴丸提取物10g，藥用基質(zhì)PEG4000:20g;化料溫度sere油浴溫度上限80°C下限75°C;底盤(pán)溫度上限80°C下限75°C;制冷溫度上限10°C下限5°C;冷卻劑液體石蠟；滴距8cm，滴速55士3滴/min;具體生產(chǎn)方法稱取藥用基質(zhì)PEG4000量為20g，于8(TC水浴鍋上完全熔融后，第一芪天滴丸提取物10g，攪拌混勻后，倒入滴丸機(jī)的裝料槽中，攪拌、保溫30分鐘后，在8cm的滴距下，以55滴/min的速度滴入二甲基硅油冷卻液中，待滴丸完全收縮冷凝成型后，取出，用甩油機(jī)除去滴丸表面的冷卻液即得。實(shí)施例13，該芪天滴丸及其生產(chǎn)方法如下芪天滴丸提取物10g，藥用基質(zhì)PEG4000:20g;化料溫度85°C油浴溫度上限85°C下限80°C;底盤(pán)溫度上限85°C下限80°C;制冷溫度上限5°C下限0°C;冷卻劑二甲基硅油；滴距9cm，滴速55士3滴/min;具體生產(chǎn)方法稱取藥用基質(zhì)PEG4000量為20g，于85。C水浴鍋上完全熔融后，第一芪天滴丸提取物10g，攪拌混勻后，倒入滴丸機(jī)的裝料槽中，攪拌、保溫30分鐘后，在9cm的滴距下，以55滴/min的速度滴入二甲基硅油冷卻液中，待滴丸完全收縮冷凝成型后，取出，用甩油機(jī)除去滴丸表面的冷卻液即得。實(shí)施例14，該芪天滴丸及其生產(chǎn)方法如下芪天滴丸提取物10g，藥用基質(zhì)PEG4000:20g;化料溫度IO(TC油浴溫度上限IO(TC下限95°C;底盤(pán)溫度上限IO(TC下限95°C制冷溫度上限15°C下限10°C;冷卻劑二甲基硅油；滴距10cm，滴速60士3滴/min;具體生產(chǎn)方法稱取藥用基質(zhì)PEG4000量為20g，于10(TC水浴鍋上完全熔融后，第一芪天滴丸提取物10g，攪拌混勻后，倒入滴丸機(jī)的裝料槽中，攪拌、保溫30分鐘后，在10cm的滴距下，以60滴/min的速度滴入二甲基硅油冷卻液中，待滴丸完全收縮冷凝成型后，取出，用甩油機(jī)除去滴丸表面的冷卻液即得。上述芪天滴丸經(jīng)藥效學(xué)試驗(yàn)上述所得芪天滴丸對(duì)大鼠心肌缺血損傷保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)研究1、儀器半自動(dòng)生化分析儀300(荷蘭威圖科學(xué)公司)2、試劑與藥物肌酸激酶(CK)、血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脫氫酶(LDH)活性、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)試劑盒購(gòu)于南京建成生物試劑公司。3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Wistar大鼠，購(gòu)于北京維通利華公司，SPF級(jí)，雄性，體重200-250g。4、實(shí)驗(yàn)分組Wistar大鼠130只，隨機(jī)分為7組，其中正常對(duì)照組10只，其余6組均為20只。復(fù)方丹參滴丸和本發(fā)明芪天滴丸中劑量組給藥劑量以臨床成人給藥劑量為基礎(chǔ)，按體表面積比(人和大鼠體表面積比為0.018)折合為大鼠給藥劑量。各給藥組給藥劑量具體如表1。5、大鼠心肌缺血模型的復(fù)制大鼠冠脈結(jié)扎按文獻(xiàn)方法稍加改進(jìn)，在乙醚麻醉下抑位固定于手術(shù)臺(tái)，自左側(cè)3-4肋間開(kāi)胸，暴露心臟，于肺動(dòng)脈圓錐及左心耳間以O(shè)號(hào)線立即結(jié)扎冠脈左前降支，將心臟送回胸腔，并擠出胸腔內(nèi)血液和氣體，迅速關(guān)閉胸腔，開(kāi)胸時(shí)間不超過(guò)30s。6、藥物干預(yù)中藥組按成人劑量標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)體表面積換算每天給藥3次，預(yù)給藥3天，復(fù)制心肌缺血模型再連續(xù)給藥3天，取血及心臟，進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)。7、指標(biāo)檢測(cè)7.1、血生化指標(biāo)檢測(cè)末次給藥后l小時(shí)，球后靜脈叢取血半自動(dòng)生化分析儀參照試劑盒說(shuō)明書(shū)檢測(cè)血清肌酸激酶(CK)、血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脫氫酶(LDH)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。7.2、心肌梗死范圍測(cè)定末次給藥后l小時(shí)，球后靜脈叢取血，后處死動(dòng)物，取出心臟，除去血污，從心尖到心基底部平行將大鼠心室切為均等的三塊心肌，參照Shatney等的N齣T染色方法將心肌染色，微距照相，相片輸入圖象處理系統(tǒng)，比較各組缺血心肌面積占總面積的百分比。8、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以X士S表示，進(jìn)行方差分析，F(xiàn)檢驗(yàn)，組間比較，q檢驗(yàn)。結(jié)果見(jiàn)表2。由表2顯示各中藥組與模型組比較，梗死面積均有明顯降低(p〈0.01)，其中，本發(fā)明芪天滴丸中劑量組與復(fù)方丹參滴丸組效果相當(dāng)，對(duì)心肌梗死面積降低最為明顯。本發(fā)明芪天滴丸高劑量組和芪天滴丸低劑量組相對(duì)效果較差。[注]:各給藥組梗死面積(％)與模型對(duì)照組18.3士8.32比較，其值越小，表明其治療效果越好。由表3顯示與模型組比較，復(fù)方丹參滴丸與本發(fā)明芪天滴丸中劑量組效果較好，本發(fā)明芪天滴丸中劑量組對(duì)LDH有明顯下降(p〈0.05)，復(fù)方丹參滴丸有顯著下降(p〈0.01);CK與C-MB各給藥組與模型組比較均無(wú)顯著差異。[注]:對(duì)于有治療效果的藥物應(yīng)該是能降低LDH、CK、CK-MB值，本實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路是先用藥物導(dǎo)致LDH、CK、CK-MB值比正常值(即空白對(duì)照組)高，再給藥后篩選藥物，如果所篩選藥物有效，應(yīng)能把這幾個(gè)增高值降至一定水平。由表4顯示與模型組比較，各中藥組血清SOD均有明顯升高(p〈0.01)，其中，以復(fù)方丹參滴丸升高最為明顯，其次為本發(fā)明芪天滴丸中劑量組；各給藥組除芪天滴丸低劑量組對(duì)MDA下降無(wú)明顯(p〈0.01)作用外，其他三組對(duì)MDA下降均較為明顯。[注]:對(duì)于有治療效果的藥物應(yīng)該是能降低MDA值，增高S0D值。本實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路是先用藥物導(dǎo)致MDA值比正常值(即空白對(duì)照組)偏高，SOD值比正常值減低，再給藥所篩選藥物，如所篩選藥物有效，應(yīng)能降低MDA值，增高S0D值。以上藥效實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)大鼠心肌缺血損傷，復(fù)方丹參滴丸與芪天滴丸各劑量組均有不同程度的保護(hù)作用，其中復(fù)方丹參滴丸與芪天滴丸中劑量組效果相近；本發(fā)明所得芪天滴丸是一種使用方便和依從性好的新型制劑。表i雪蓮.巴布刑對(duì)小H耳，脹的豕響(j±a<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>權(quán)利要求1.一種芪天滴丸提取物，其特征在于按原料重量百分比組成為黃芪30％至40％，赤芍20％至25％，紅景天20％至25％，紅花20％至25％。2、一種根據(jù)權(quán)利要求l所述的芪天滴丸提取物，其特征在于按重量百分比含有O.024%至0.032%的黃芪甲苷、1.05%至1.20%的芍藥苷、0.30%至0.45%的紅景天苷和O.25%至0.40%的羥基紅花黃色素。3、根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的芪天滴丸提取物，其特征在于該芪天滴丸提取物按下述步驟得到(1)取所需要量的紅景天、赤芍，粉碎，過(guò)篩，成最粗粉，放入提取罐中，加10倍量75%的乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮并回收乙醇至每lml濃縮液含紅景天藥材O.25g和赤芍藥材0.25g;取所需要量的紅花飲片，加15倍量水，7(TC水浴浸泡提取三次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮至每lml濃縮液含紅花飲片藥材O.25g，用P/。鹽酸溶液調(diào)節(jié)提取液pH值為2;將上述兩提取液等體積比混合，得到提取液l;取上述提取液l，過(guò)DIOI、HPDIOO、HPD400和HPD600中的一種或一種以上的大孔吸附樹(shù)脂，樹(shù)脂徑高比為l:3至1:9，上樣液濃度為每lml濃縮液含紅景天藥材0.25g和赤芍藥材0.25g，吸附速度為O.5BV至3BV/h，吸附時(shí)間為6小時(shí)至12小時(shí)，先用2BV至4BV水以3BV至6BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用8BV至10BV的20。/。乙醇溶液以3BV至5BV/h的洗脫速度洗脫，收集洗脫液，將洗脫液減壓回收乙醇濃縮至2(TC相對(duì)密度為1.05至1.20的稠膏或制成干膏粉，即得第一芪天滴丸提取物；(2)另取所需要量的黃芪，粉碎，過(guò)篩，成最粗粉，放入提取罐中，力陽(yáng)倍量70%的乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮并回收乙醇至每lml濃縮液含黃芪藥材lg，得提取液2;取上述提取液2，過(guò)DIOI、HPDIOO、HPD400和HPD600中的一種或一種以上的大孔吸附樹(shù)脂，樹(shù)脂徑高比為1:3至1:9，上樣液濃度為每lml濃縮液含黃芪藥材lg，吸附速度為3BV至5BV/h，吸附時(shí)間為6小時(shí)至12小時(shí)，先用5BV至7BV水以3BV至5BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用5BV至7BV的80。/。的乙醇以3BV至5BV/h的流速洗脫，收集洗脫液，將洗脫液減壓回收乙醇濃縮至2(TC相對(duì)密度為1.05至1.20的稠膏或制成干膏粉，即得第二芪天滴丸提取物；(3)將上述第一芪天滴丸提取物和第二芪天滴丸提取物混合均勻，即得芪天滴丸提取物。4、一種根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的芪天滴丸提取物的生產(chǎn)方法，其特征在于按下述步驟進(jìn)行(1)取所需要量的紅景天、赤芍，粉碎，過(guò)篩，成最粗粉，放入提取罐中，加10倍量75%的乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮并回收乙醇至每lml濃縮液含紅景天藥材O.25g和赤芍藥材0.25g;取所需要量的紅花飲片，加15倍量水，7(TC水浴浸泡提取三次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮至每lml濃縮液含紅花飲片藥材O.25g，用P/。鹽酸溶液調(diào)節(jié)提取液pH值為2;將上述兩提取液等體積比混合，得到提取液l;取上述提取液l，過(guò)DIOI、HPDIOO、HPD400和HPD600中的一種或一種以上的大孔吸附樹(shù)脂，樹(shù)脂徑高比為l:3至1:9，上樣液濃度為每lml濃縮液含紅景天藥材0.25g和赤芍藥材0.25g，吸附速度為O.5BV至3BV/h，吸附時(shí)間為6小時(shí)至12小時(shí)，先用2BV至4BV水以3BV至6BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用8BV至10BV的20。/。乙醇溶液以3BV至5BV/h的洗脫速度洗脫，收集洗脫液，將洗脫液減壓回收乙醇濃縮至2(TC相對(duì)密度為1.05至1.20的稠膏或制成干膏粉，即得第一芪天滴丸提取物；(2)另取所需要量的黃芪，粉碎，過(guò)篩，成最粗粉，放入提取罐中，力陽(yáng)倍量70%的乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液離心，取上清液，減壓濃縮并回收乙醇至每lml濃縮液含黃芪藥材lg，得提取液2;取上述提取液2，過(guò)DIOI、HPDIOO、HPD400和HPD600中的一種或一種以上的大孔吸附樹(shù)脂，樹(shù)脂徑高比為1:3至1:9，上樣液濃度為每lml濃縮液含黃芪藥材lg，吸附速度為3BV至5BV/h，吸附時(shí)間為6小時(shí)至12小時(shí)，先用5BV至7BV水以3BV至5BV/h的流速洗脫，洗去水溶性雜質(zhì)，再用5BV至7BV的80。/。的乙醇以3BV至5BV/h的流速洗脫，收集洗脫液，將洗脫液減壓回收乙醇濃縮至2(TC相對(duì)密度為1.05至1.20的稠膏或制成干膏粉，即得第二芪天滴丸提取物；(3)將上述第一芪天滴丸提取物和第二芪天滴丸提取物混合均勻，即得芪天滴丸提取物。5、一種根據(jù)權(quán)利要求1或2所述芪天滴丸提取物為原料之一的芪天滴丸，其特征在于芪天滴丸提取物與藥用基質(zhì)比例按重量份計(jì)為l:l至l:3。6、一種根據(jù)權(quán)利要求3所述芪天滴丸提取物為原料之一的芪天滴丸，其特征在于芪天滴丸提取物與藥用基質(zhì)比例按重量份計(jì)為l:l至l:3。7、一種根據(jù)權(quán)利要求5所述芪天滴丸的生產(chǎn)方法，其特征在于按下述步驟得到稱取藥用基質(zhì)聚乙二醇，其重量與芪天滴丸提取物比例按重量份計(jì)為l:l至3:1，于7(TC至10(TC水浴鍋上完全熔融后，加入芪天滴丸提取物，攪拌混勻后，倒入滴丸機(jī)的裝料槽中，攪拌，使藥液溫度達(dá)95。C，保溫30分鐘后，在8厘米至10厘米的滴距下，以50滴/分鐘至60滴/分鐘的速度滴入冷卻液中，待滴丸完全收縮冷凝成型后，取出，用甩油機(jī)除去滴丸表面的冷卻液即得。8、一種根據(jù)權(quán)利要求6所述芪天滴丸的生產(chǎn)方法，其特征在于按下述步驟得到稱取藥用基質(zhì)聚乙二醇，其重量與芪天滴丸提取物比例按重量份計(jì)為l:l至3:1，于7(TC至10(TC水浴鍋上完全熔融后，加入芪天滴丸提取物，攪拌混勻后，倒入滴丸機(jī)的裝料槽中，攪拌，使藥液溫度達(dá)95。C，保溫30分鐘后，在8厘米至10厘米的滴距下，以50滴/分鐘至60滴/分鐘的速度滴入冷卻液中，待滴丸完全收縮冷凝成型后，取出，用甩油機(jī)除去滴丸表面的冷卻液即得。全文摘要一種芪天滴丸提取物和芪天滴丸及其生產(chǎn)方法，該芪天滴丸提取物按原料組成為黃芪，赤芍，紅景天和紅花。該芪天滴丸按芪天滴丸提取物與藥用基質(zhì)組成。本發(fā)明所得芪天滴丸提取物含有的羥基紅花黃色素、芍藥苷、紅景天苷和黃芪甲苷都有提高，該芪天滴丸提取物的生產(chǎn)方法易操作。本發(fā)明所得芪天滴丸的藥效學(xué)試驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)大鼠心肌缺血損傷，本發(fā)明所得芪天滴丸各劑量組均有不同程度的保護(hù)作用，其中本發(fā)明芪天滴丸中劑量組療效和復(fù)方丹參滴丸療效相近。該芪天滴丸的生產(chǎn)方法易操作。文檔編號(hào)A61K47/34GK101371877SQ20081030459公開(kāi)日2009年2月25日申請(qǐng)日期2008年9月19日優(yōu)先權(quán)日2008年9月19日發(fā)明者何承輝,劉宣麟,王新春,薛桂蓬,邢建國(guó)申請(qǐng)人:新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所