專利名稱：螺吲哚滿酮衍生物的制作方法
螺吲哚滿酮衍生物
p53蛋白是在防止癌癥發(fā)生中起關(guān)鍵作用的腫瘤抑制蛋白。它保護(hù)細(xì)
胞的完整性并通過(guò)誘導(dǎo)生長(zhǎng)抑制或編程性細(xì)胞死亡預(yù)防細(xì)胞永久性損害
的克隆的增殖。在分子水平上，p53是可以激活一組涉及調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和編程性細(xì)胞死亡的基因的轉(zhuǎn)錄因子。p53是在細(xì)胞水平上受MDM2緊密調(diào)節(jié)的有效細(xì)胞周期抑制劑。MDM2與p53形成反饋控制環(huán)。MDM2可以結(jié)合p53并抑制其反式激活p53-調(diào)節(jié)基因的能力。此外，.MDM2介導(dǎo)依賴遍在蛋白的p53降解。p53可以激活MDM2基因表達(dá)，由此增加MDM2蛋白的細(xì)胞水平。這種反饋控制環(huán)確保了 MDM2與p53在正常增殖細(xì)胞中均保持在低水平上。MDM2也是E2F的輔因子，它在細(xì)胞周期調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用。
MDM2與p53(E2F)之比在許多癌癥中受到異常調(diào)節(jié)。例如，已經(jīng)證實(shí)pl6INK4/pl9ARF基因座上通常發(fā)生分子缺損影響了 MDM2蛋白降解。抑制MDM2-p53在腫瘤細(xì)胞中與野生型p53的相互作用應(yīng)導(dǎo)致p53累積、細(xì)胞周期抑制和/或編程性細(xì)胞死亡。因此，MDM2拮抗劑作為單一活性劑可以為癌癥療法提供新手段或與廣泛的其它抗腫瘤療法聯(lián)用。已經(jīng)通過(guò)使用用于抑制MDM2-p53相互作用的不同大分子工具(例如抗體、反義寡核苷酸、肽類)證實(shí)了這種策略的可行性。MDM2還通過(guò)作為p53的保守結(jié)合區(qū)結(jié)合E2F并激活細(xì)胞周期蛋白A的E2F-依賴性轉(zhuǎn)錄，由此提示MDM2拮抗劑可能在p53突變體細(xì)胞中具有作用。
在J.AmChem. Soc.， 2005， 127， 10130中先前公開(kāi)了作為MDM2拮抗劑的系列螺吲哚滿酮。
本發(fā)明提供螺吲哚滿酮衍生物，其是MDM2-p53相互作用的小分子抑制劑。在無(wú)細(xì)胞和基于細(xì)胞的試驗(yàn)中，本發(fā)明的化合物顯示出抑制MDM2蛋白與p53-樣肽的相互作用。在基于細(xì)胞的試驗(yàn)中，這些化合物證明了機(jī)制活性(mechanistic activity)。將癌細(xì)胞與野生型p53 —起溫育導(dǎo)致p53蛋白累積，誘導(dǎo)p53-調(diào)節(jié)的p21基因，和細(xì)胞周期停滯在G1和G2期，導(dǎo)致
9了在體外對(duì)野生型p53細(xì)胞的有效的抗增殖活性。相反，在相當(dāng)?shù)幕衔餄舛认?，在帶有突變體p53的癌細(xì)胞中沒(méi)有觀察到這些活性。因此，MDM2拮抗劑的活性很可能與其作用機(jī)制有關(guān)。這些化合物可以是有效和選擇性的抗癌劑。
本發(fā)明涉及式I的螺吲哚滿酮
g巾
X選自氫，鹵素，氰基，硝基，乙炔基，環(huán)丙基，甲基，乙基，異丙基，甲氧基和乙烯基，
R,和R2中的一個(gè)選自低級(jí)烷基，
取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，取代的低級(jí)鏈烯基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基，并且另一個(gè)是氫，
R3和R4中的一個(gè)選自低級(jí)垸基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，取代的低級(jí)鏈烯基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基，并且另一個(gè)是氫，
R選自氫，低級(jí)烷基和取代的低級(jí)垸基及其藥用鹽和酯。
優(yōu)選的是式I化合物，其具有如式II所示的立體化學(xué)結(jié)構(gòu)<formula>formula see original document page 11</formula>
其中
X是氫，卣素，氰基，硝基，乙炔基，環(huán)丙基，甲基，乙基，異丙基，甲氧基，和乙烯基，R,是氫，
R3是氫，
R2/R4獨(dú)立地選自低級(jí)垸基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，取代的低級(jí)鏈烯基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)垸基，環(huán)烯基和取代的環(huán)烯基，并且R是氫，低級(jí)垸基或取代的低級(jí)烷基，及其藥用鹽和酯。
進(jìn)一步優(yōu)選的是式II化合物，其中X是氯或溴，R是氫，
R3是氫，
R4是取代的苯基或取代的雜芳基，其中所述取代的苯基或取代的雜芳基選自<formula>formula see original document page 11</formula>
R2獨(dú)立地選自低級(jí)鏈烯基，取代的低級(jí)鏈烯基，芳基，取代的芳基，雜
芳基，取代的雜芳基，環(huán)烯基和取代的環(huán)烯基，并且
R是氫，低級(jí)烷基或取代的低級(jí)垸基。
在根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，提供根據(jù)式i或n的化合物，其中
X是-C1;
R4和R3是氫； R4是3-氯-苯基；
R2是-苯基，其是未取代的或被取代基取代1或2次的，所述的取代 基獨(dú)立地選自鹵素，-OH， -C2.6炔基，-0-C2.8鏈烯基， 或-C,.s垸基和-0-C,—8垸基，其中所述d.8烷基可以是 未取代的或被-OH取代1或2次的，或
《2_8鏈烯基；并且
R是氫，或
Cm烷基，其是未取代的或被以下基團(tuán)取代的
-N-(d.8烷基)2，
-O-Ci—8烷基，
-O-C(O)-d.s烷基， -OH，
-NH-CCCO-C^垸基， -C(O)-OH，
-C(0)-NH-d-8烷基，所述垸基是未取代的或被 -OH取代1或2次的，
-C(0)-NH-C3—6環(huán)烷基， -C(0)-NH2,
-C(O)-NH-哌啶基，所述哌啶基是未取代的或被
-S(0)2-CH3取代的；禾口
其藥用鹽和酯。
最優(yōu)選的是下列式的化合物
外消旋(6，R，3R,8，S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6，-(5-氟-2-甲基苯基)-2，-甲基 -6，,7，,8，,9，-四氫螺[311-吲哚-3,7，-(211-吡啶并[2,1-(:][1,2,4]三嗪)]-2，3'(1H)-
二酮，
手性(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(5-氟-2-甲基苯基)-2，-甲基 -6，,7，,8，,9，-四氫螺[311-吲哚-3,7，-(211[-吡啶并[2,1-0)[1，2,4]三嗪)]-2,3，(111)-二酮，
外消旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6'-(5-氟-2-甲基苯基)-6',7，，8，，9'-四
氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l，2,4]三嗪)]-2,3，(1H)-二酮，
外消旋(6，R，3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-2，-甲基
-6，，7，，8，，9，-四氫螺[311-剛哚-3,7，-(211陽(yáng)卩比啶并[2,1-0][1,2，4]三嗪)]-2,3，(111)-
二酮，
手性(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-2，-甲基 -6，，7，，8，,9，-四氫螺[31€-吲哚-3,7，-(2^1-吡啶并[2,1-01[1,2,4]三嗪)]-2，3，(111)-
二酮，
外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫
螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(1H)-二酮，
手性(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，，9，-四氫螺[l，2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，
外消旋(6，R，3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(3-二甲基氨基丙基)-6，-(l-亞甲
基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][ 1,2,4]三
嗪)]-2，3，(lH)-二酮，
外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2，-(2-甲氧基乙基)-6，-(1-亞甲基-丙 基)-6，，7，,8，,9，-四氫螺[3H-卩引哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三 嗪)]-2,3，(lH)-二酮，
外消旋(6，11,311,8，8)-2，-(2-乙酰氧基乙基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7,,8,，9,-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][ 1,2,4]三 嗪)]-2，3，(lH)-二酮，
外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-羥基乙基)-6，-(l-亞甲基-丙 基)-6，,7，,8，，9，-四氫螺[3H-卩引哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三 嗪)]-2,3，(lH)-二酮，
手性(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-羥基乙基)-6，-(1-亞甲基-丙 基)-6，，7，,8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三 嗪)]-2,3,(lH)-二酮，
外消旋(6，R,3R,8，S)-2，-(2-乙?；被一?-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲 基 - 丙基)-6，,7，，8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮，
外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-羥基羰基-甲基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6,,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三 嗪)]-2，3'(lH)-二酮，
外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-氟羰基-甲基)-6，-(l-亞甲基-丙 基)-6，，7，,8，,9,扁四氫螺[3H-卩引哚-3,7,-(2H-吡啶并[2，l-c][ 1,2,4]三 嗪)]-2，3，(lH)-二酮，
外消旋(6，R，3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(2-羥基乙基氨基)羰基-甲 基]-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2,3,(lH)-二酮，
手性(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(2-羥基乙基氨基)羰基-甲 基J-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，，7，，8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l，2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮，
外消旋(6'R,3R,8'S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2'-[(2-環(huán)丙基氨基)羰基-甲 基]_6，—(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l，2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮，
手性(6'11,311,8'8)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2'-[(2-環(huán)丙基氨基)羰基-甲基]-6'-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2,4]三 嗪)]-2,3，(1H)-二酮，
外消旋(6，11,311,8，8)-2，-(2-氨基羰基-甲基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三 嗪)]-2,3，(lH)-二酮，
外消旋(6，R,3R,8，S)-2，-(2-氨基羰基-甲基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7,,8,,9,-四氫螺[3H-吲哚畫(huà)3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三 嗪)]-2,3，(lH)-二酮，
外消旋(6'R，3R,8'S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2'-[(l-甲磺?；?哌啶-4-基)氨基羰 基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l，2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，
外消旋(6'R，3R，8'S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2'-[(l-甲磺?；?哌啶-4-基)氨基羰 基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,1 -c][l ,2,4]三嗪)]-2,3 ，(lH)-二酮，
外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-2，-甲基-6，，7，,8，,9，-四
氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(m)-二酮，
手性(6，R，3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-2，-甲基-6，,7，，8',9，-四氫
螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮，
外消旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-6，,7，，8',9，-四氫螺[3H-
吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，
外消旋(6，8,311,8，11)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-6，,7，,8，，9，-四氫螺[311-
吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，
外消旋(6，R,3R,8，S)-6，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2'-甲基
-6',7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,1-0][1,2,4]三嗪)]-2,3，(1印-
二酮，
外消旋(6，R，3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(5-乙炔基-2-羥基-苯基)-2，-甲基 -6，,7，,8，，9，-四氫螺[311-吲哚-3,7，-(211-吡啶并[2,1-01[1,2，4]三嗪)]-2,3，(11"1)-
二酮，
外消旋(6，R，3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-[2-(2,3-二羥基-丙氧基)-5-碘-苯 基)-2，-甲基-6，,7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三 嗪)]-2，3，(lH)-二酮，禾口
外消旋(6，R，3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-[2-(2,3-二羥基-丙氧基)-5-乙炔基 —苯基)-2，-甲基-6，,7，，8，,9，-四氫螺[3H』引哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三 嗪)]-2,3,(lH)-二酮。
在說(shuō)明書(shū)中，在指示時(shí)，各種取代基(R值)可以被1-5個(gè)或優(yōu)選1-3 個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自低級(jí)烷基，低級(jí)-鏈烯基，低級(jí) -炔基，二氧代-低級(jí)-亞垸基(形成例如苯并二氧基)，鹵素，羥基，CN， CF3， NH2， N(H，低級(jí)-烷基)，N(低級(jí)-烷基)2，氨基羰基，羧基，N02， 低級(jí)-垸氧基，硫代-低級(jí)-垸氧基，低級(jí)-烷基磺酰基，氨基磺?；?，低級(jí)-烷基羰基，低級(jí)-烷基羰氧基，低級(jí)-垸氧基羰基，低級(jí)-垸基-羰基-NH，氟 -低級(jí)-烷基，氟-低級(jí)-烷氧基，低級(jí)-烷氧基-羰基-低級(jí)-垸氧基，羧基-低級(jí) -烷氧基，氨基甲?；?低級(jí)-烷氧基，羥基-低級(jí)-烷氧基，NH2-低級(jí)-烷氧基， N(H，低級(jí)-垸基)-低級(jí)-烷氧基，N(低級(jí)-烷基)2-低級(jí)-烷氧基，芐氧基-低級(jí)
15-垸氧基，單-或二-低級(jí)烷基取代的氨基-磺酰基和可以被鹵素，羥基，NH2，
N(H，低級(jí)-垸基)或N(低級(jí)-烷基)2任選取代的低級(jí)-烷基。用于所述芳基， 雜芳基和雜環(huán)的優(yōu)選取代基是鹵素，低級(jí)烷氧基，低級(jí)烷基和氨基。
如果垸基，鏈烯基，炔基或類似基團(tuán)的兩端連接到相同的部分上，則 可以得到環(huán)狀結(jié)構(gòu)，其中所述部分的兩個(gè)氫被烷基，鏈烯基，炔基或類似 基團(tuán)的兩端代替，由此產(chǎn)生環(huán)狀結(jié)構(gòu)如四氫化萘、大環(huán)或螺環(huán)化合物。
術(shù)語(yǔ)"烷基"是指具有1至約20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基。在
一些實(shí)施方案中，垸基取代基可以是低級(jí)垸基取代基。術(shù)語(yǔ)"低級(jí)烷基"是
指具有1至8個(gè)碳原子的垸基，并且在一些實(shí)施方案中，是指具有1至4
個(gè)碳原子的烷基。烷基的實(shí)例包括但不限于甲基，乙基，正丙基，異丙
基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正戊基和仲戊基。
如本文所用的，"環(huán)垸基"意欲表示任何穩(wěn)定的、只由碳原子，優(yōu)選3 至6個(gè)碳原子組成的單環(huán)或多環(huán)體系，它的任何一個(gè)環(huán)都是飽和的。環(huán)烷
基的實(shí)例包括但不限于環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，金
剛垸基，環(huán)辛基，雙環(huán)烷基，包括雙環(huán)辛烷如[2.2.2]雙環(huán)辛垸或[3.3.0]雙 環(huán)辛烷，雙環(huán)壬垸如[4.3.0]雙環(huán)壬烷和雙環(huán)癸垸如[4.4.0]雙環(huán)癸垸(萘垸)，
或螺環(huán)化合物。
如本文所用的術(shù)語(yǔ)"鏈烯基"是指未飽和的直鏈或支鏈脂肪族烴基，其 含有一個(gè)雙鍵并且具有2至8，優(yōu)選2至6個(gè)碳原子。這樣的"烯基"的實(shí) 例是乙烯基(vinyl)(乙烯基(ethenyl))，烯丙基，異丙烯基，1-丙烯基，2-甲 基-l-丙烯基，l-丁烯基，2-丁烯基，3-丁烯基，2-乙基-l-丁烯基，3-甲基-2-丁烯基，l-戊烯基，2-戊烯基，3-戊烯基，4-戊烯基，4-甲基-3-戊烯基，1-己烯基，2-己烯基，3-己烯基，4-己烯基和5-己烯基。
術(shù)語(yǔ)"環(huán)烯基"意欲是指任何穩(wěn)定的、只由碳原子組成的單環(huán)或多環(huán) 體系，其中它的至少一個(gè)環(huán)是部分未飽和的。
環(huán)烯基的實(shí)例包括但不限于環(huán)戊烯基或環(huán)己烯基。
如本文所用的術(shù)語(yǔ)"炔基"是指未飽和的直鏈或支鏈脂肪族烴基，其含 有一個(gè)叁鍵并且具有2至6，優(yōu)選2至4個(gè)碳原子。這樣的"炔基"的實(shí)例 是乙炔基，l-丙炔基，2-丙炔基，l-丁炔基，2-丁炔基，3-丁炔基，1-戊炔 基，2-戊炔基，3-戊炔基，4-戊炔基，l-己炔基，2-己炔基，3-己炔基，4-
16己炔基和5-己炔基。
如在定義中所用的術(shù)語(yǔ)"鹵素"是指氟、氯、碘或溴，優(yōu)選氟和氯。
"芳基"是指一價(jià)單環(huán)或雙環(huán)的芳香族碳環(huán)烴基，優(yōu)選6-10元芳香族環(huán) 系統(tǒng)。優(yōu)選的芳基包括但不限于苯基，萘基，甲苯基和二甲苯基。
"雜芳基"是指含有至多兩個(gè)環(huán)的芳香族雜環(huán)系統(tǒng)。優(yōu)選的雜芳基包括 但不限于噻吩基，呋喃基，吲哚基，吡咯基，吡啶基，吡嗪基，瞎、唑基， 噻唑基，喹啉基，嘧啶基，咪唑和四唑基。
在作為雙環(huán)的芳基或雜芳基的情況下，應(yīng)當(dāng)理解一個(gè)環(huán)可以是芳基，
而另一是雜芳基，并且兩個(gè)都是取代或未取代的。
"雜T工"縣;m甘:^屮u^牛T&7/f+的s芬8 ;幽成卯漢的芏未古fe成4l^芏苯方fe
烴，其中l(wèi)至3個(gè)碳原子被選自氮、氧或硫原子的雜原子代替。實(shí)例包括
吡咯烷-2-基；吡咯烷-3-基；哌啶基；嗎啉-4-基等。 "雜原子"是指選自N， O和S中的原子。
"烷氧，垸氧基或低級(jí)烷氧基"是指連接到氧原子上的任何上述低級(jí)烷 基。典型的低級(jí)烷氧基包括甲氧基，乙氧基，異丙氧基或丙氧基，丁氧 基等。在垸氧基的含義內(nèi)進(jìn)一步包括的是多個(gè)垸氧基側(cè)鏈，例如乙氧基乙 氧基，甲氧基乙氧基，甲氧基乙氧基乙氧基等；和取代的烷氧基側(cè)鏈，例 如二甲基氨基乙氧基，二乙基氨基乙氧基，二甲氧基-磷?；籽趸?。
"藥用的"如藥用載體、賦形劑等是指對(duì)給予特定化合物的受試者而 言是藥理上可接受的且基本上無(wú)毒性的。
"藥用鹽"是指保留本發(fā)明化合物的生物有效性和特性且由適宜的無(wú) 毒性有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸或有機(jī)堿或無(wú)機(jī)堿形成的常規(guī)酸加成鹽或堿加成鹽。 酸加成鹽的實(shí)例包括那些來(lái)源于無(wú)機(jī)酸、諸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫 酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸的鹽以及那些來(lái)源于有機(jī)酸、諸如對(duì)甲苯磺酸、 水楊酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、檸檬酸、蘋果酸、乳酸、富馬酸、三氟 乙酸等的鹽。堿加成鹽的實(shí)例包括那些來(lái)源于銨、鉀、鈉和季銨氫氧化物 的鹽、諸如氫氫氧化四甲銨。將藥物化合物(即藥物)化學(xué)修飾成鹽是藥物 師眾所周知的獲得化合物改善的物理和化學(xué)穩(wěn)定性、吸濕性、流動(dòng)性和溶
解性的技術(shù)。例如，參見(jiàn)Ansel等《藥物劑型和藥物轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)》 (Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems)(第6版1995) 196和1456-1457頁(yè)。
式I或II化合物及它們的鹽具有至少一個(gè)不對(duì)稱碳原子，因此可以作 為外消旋混合物或不同的立體異構(gòu)體存在?？梢杂梢阎姆蛛x方法如色譜 分離各種異構(gòu)體。本發(fā)明包括所有的立體異構(gòu)體。
本發(fā)明的化合物用于治療或控制細(xì)胞增殖性疾病，特別是腫瘤疾病。 這些化合物和含有這些化合物的制劑可以用于治療或控制實(shí)體瘤，諸如乳 腺、結(jié)腸、肺和前列腺腫瘤。
因此，本發(fā)明還提供用作藥物的式I或II化合物。特別是本發(fā)明提供
用作藥物的式i或n化合物，所述的藥物用于治療癌癥，更具體地是實(shí)體
瘤，并且特別是乳腺、結(jié)腸、肺和前列腺腫瘤。
根據(jù)本發(fā)明的化合物的治療有效量指的是有效預(yù)防、緩解或改善疾病 癥狀或延長(zhǎng)所治療受試者存活的用量。治療有效量的測(cè)定屬于本領(lǐng)域技術(shù) 的范圍。
本發(fā)明化合物的治療有效量可以在寬限內(nèi)改變，并可以按照本領(lǐng)域公 知的方式測(cè)定。可以在每種特定情況中根據(jù)個(gè)體需要調(diào)整這類劑量，包括 所給予的具體化合物、給藥途徑、所治療的疾病和所治療的患者。 一般來(lái)
說(shuō)，就對(duì)體重約為70Kg的成年人的口服或非腸道給藥而言，約10mg至 約10,000 mg，優(yōu)選約200 mg至約1,000 mg的每日劑量應(yīng)是合適的，不過(guò)， 當(dāng)需要時(shí)，可以超過(guò)上限?？梢詫⒚咳談┝孔鳛閱蝿┝炕蚍謩┝拷o藥，或 就非腸道給藥而言，可以作為連續(xù)輸注給藥。
本發(fā)明的制劑包括適宜于以下的那些口服、鼻、局部(包括口腔和舌
下)、直腸、陰道和/或胃腸外給藥。該制劑可以方便地以單位劑量形式存 在，并且可以由制藥學(xué)領(lǐng)域中周知的方法制備?？梢耘c載體材料組合以產(chǎn) 生單一劑量形式的活性成分的量將根據(jù)將治療的主體以及給藥的特殊方 式而變化。可以與載體材料組合以產(chǎn)生單一劑量形式的活性成分的量通常
將是產(chǎn)生治療效果的式i或n化合物的量。通常，在ioo百分比中，該量
的范圍為約1百分比至約99百分比活性成分，優(yōu)選約5百分比至約70百 分比，最優(yōu)選約10百分比至約30百分比。
制備這些制劑或組合物的方法包括以下步驟將本發(fā)明的化合物與載 體，以及任選的一種或多種輔助成分組合。通常，通這將本發(fā)明的化合物與液體載體或細(xì)碎的固體載體，或它們兩者，均勻并且密切地組合，然后，如果需要，成型為產(chǎn)品，來(lái)制備這些制劑。
本發(fā)明適宜于口服給藥的制劑可以是以下形式膠囊劑、扁囊劑、小
藥囊、丸劑、片劑、錠劑(使用矯味的基質(zhì)(flavored basis),通常是蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠)、粉劑、顆粒劑或作為在水性或非水性液體中的溶液劑或懸浮劑，或作為水包油或油包水液體乳劑，或作為酏劑或糖漿劑，或作為軟錠齊U(使用惰性基質(zhì)(inert base)，如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠)和/或漱口劑等，各自含有預(yù)定量的本發(fā)明化合物作為活性成分。還可以將本發(fā)明的化合物作為大丸劑(bolus)、藥糖劑或糊劑給藥。
"有效量"是指對(duì)于預(yù)防、減輕或消除疾病的癥狀或延長(zhǎng)被治療的患者生存有效的量。
"ICs()"是指對(duì)于抑制具體測(cè)量活性的50%所需要的特定化合物的濃
度。IC5。尤其可以如后面所述測(cè)量。
"藥用酯"是指常規(guī)酯化的帶有羧基或羥基的式I或II化合物，該酯類保留了通式I化合物的生物有效性和特性且在體內(nèi)(在生物體內(nèi))分別被裂解成相應(yīng)的活性羧酸或酯。
本發(fā)明式I或II中的化合物可以根據(jù)下面的通用方案合成。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員容易明白的是，式I-II中的化合物可以通過(guò)取代在通用合成路線中的試劑(reagents)或藥劑(agents)來(lái)制備。原料是可商購(gòu)的或者可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員知道的沿用已久的文獻(xiàn)方法合成。使用手性色譜的純化，式II中的化合物可以作為旋光純的或富集的對(duì)映異構(gòu)體存在。
1) LIHMDS
方案1
19通常，適宜選擇的醛I可以與六甲基二硅氨基鋰，氯三烷基硅垸和乙酰氯在單罐中，以多步方式反應(yīng)，產(chǎn)生2-氮雜-l，3-丁二烯II (方案I)，并
且可以用作粗制產(chǎn)物。Ghosez， L.等人報(bào)道了2-氮雜-l,3-丁二烯的制備及它們?cè)诘s第爾斯-阿爾德反應(yīng)中的應(yīng)用，以形成雜環(huán)(參考7^m/ze^W21995， 11021; /j附.C/^m.Soc. 1999， 2617;和其中引用的文獻(xiàn))。適宜選擇的醛I可商購(gòu)或可以由沿用己久的多種文獻(xiàn)方法合成。
R4
O
■R3
IV
V
方案2
v'
外消旋混合物
在堿存在下，在加熱條件下，在質(zhì)子溶劑如甲醇，乙醇或非質(zhì)子溶劑
如甲苯，鄰二甲苯中，羥n引哚III可以與適宜取代的醛或酮反應(yīng)，得到中間體IV。通常使用的堿是吡咯烷或哌啶。然后，在甲苯或鄰二甲苯中，在110。C至160。C的加熱下，并且在無(wú)水條件下，中間體IV可以與2-氮雜-1,3-丁二烯反應(yīng)，以提供如上所示的作為主要產(chǎn)物的螺吲哚滿酮V和V'
的外消旋混合物，以及其它較少的立體異構(gòu)體。6-取代的羥吲哚m原料可
商購(gòu)或可以根據(jù)文獻(xiàn)方法如Kraynack， E.A.; Dalgard， J.E.; Gaeta， R C.A. r"ra/z^/rawZe故w， 1998， 39， 7679 — 7682制備(方案2)。
20外消旋混合物
方案3
可以保護(hù)中間體IV，得到中間體VI?？梢愿鶕?jù)沿用已久的文獻(xiàn)方法，通過(guò)使用氯甲酸乙酯，二碳酸二叔丁酯，SEM-C1，芐基溴和堿如4-(二甲基胺)吡啶(DMAP)，三乙胺，NaH，或LiH，連接保護(hù)基。保護(hù)基形成和它們的脫保護(hù)的實(shí)例已經(jīng)由Greene， T.W.等描述并且綜述于"ProtectiveGroups in Organic Synthesis,第二版.John Wiley & Sons Inc中。以類似的方式，在甲苯或鄰二甲苯中，在110 。C至160 。C的加熱下，并且在無(wú)水條件下，中間體IV可以與方案1中制備的選定2-氮雜-丁二烯II反應(yīng)，
以形成如上所示的作為主要產(chǎn)物的中間體vn和vn'，其是兩種異對(duì)映異
構(gòu)體的外消旋混合物，以及其它較少的立體異構(gòu)體(方案3)。 V和V，或
VII和vn'的外消旋混合物通過(guò)手性超級(jí)液相色譜(SFC)或手性HPLC或
手性柱色譜分離可以容易地解析成為兩種手性對(duì)映異構(gòu)體，從而得到兩種手性對(duì)映異構(gòu)體。
21在受控的條件下，可以選擇性保護(hù)V，得到VII。在此情況下，這里有用的保護(hù)基Pg可以是氨基甲酸乙酯或氨基甲酸叔丁酯(BOC)(方案4)。
類似于方案3中從IV至VI的轉(zhuǎn)變，在二氯甲垸中，在室溫或低溫，通過(guò)使用氯甲酸乙酯或二碳酸二叔丁酯和堿如4-(二甲基胺)吡啶(DMAP)，可
以連接保護(hù)基。<formula>formula see original document page 22</formula>V VII
方案4
三嗪酮XII的合成描述于方案5中。通過(guò)使用有機(jī)堿或無(wú)機(jī)堿如Cs2C03， LiH或NaH，和可商購(gòu)試劑溴乙酸烷基酯(BrCH2COOR，， R， = Me，Et， tBu) ， N-垸基化物中間體Vni可以由VII以良好的收率制備。
由Lawesson試劑，在甲苯中，在加熱條件下，選擇性將在內(nèi)酰胺羰基轉(zhuǎn)化為硫代羰基的隨后反應(yīng)以高收率提供中間體IX。在密封管中，在加熱條件下，在甲醇中，IX用一水合肼或無(wú)水肼的處理得到中間體X?？梢詫③噭㏑-L和堿如LiH或NaH用來(lái)將X轉(zhuǎn)化成中間體XI。 R是低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)環(huán)烷基，取代的低級(jí)環(huán)烷基。L是良好的離去基團(tuán)如C，Br， I， OMs， OTf， OTs等。在從VII至XI的這些轉(zhuǎn)變中，有用的Pg基團(tuán)是三甲基甲硅烷氧基乙氧基甲基(SEM)。三甲基甲硅烷氧基乙氧基甲基(SEM)基團(tuán)可以通過(guò)脫保護(hù)反應(yīng)以兩步方式除去，以形成式II的化合物XII: l)在二氯甲烷中，于室溫條件下的三氟乙酸；2)在甲醇中，在加熱(100。C)條件下的Hunig堿(iPr2NEt<formula>formula see original document page 23</formula>
當(dāng)R2選自被乙炔基，l-丙炔基取代的苯基時(shí)，可以使用備選合成方法，
以可以使用化合物xn-b。典型地，具有相應(yīng)碘-或溴-取代的苯基112的類
似物XII-a首先根據(jù)方案1- 5中的方法制備，隨后是催化鈀介導(dǎo)的 Sonogashira反應(yīng)，得到其中R2為相應(yīng)的被乙炔基或基它的取代的炔基取 代的苯基的那些XII-b (方案6)。A
或B
Y = I或Br
W是H或任選取代基團(tuán) XH國(guó)a
R6 = H, Me, CF3,乙基，異丙基， 環(huán)丙基，叔丁基
Xll隱b
試劑和條件A) Cul, NEt3， PdCI2(PPh3)2 (cat.)'100 °C ^~R6
B)如果R6 = H: CuI,NEt3， 貝ij NaOH/MeOH， rt
三甲代甲硅烷基乙炔，PdCI2(PPh3)2 (cat.), 100 。C;
方案6
以與方案5中所述的方法類似的方式，式I中的XII和XII'的外消旋
混合物可以通過(guò)用vn和vn'的外消旋混合物代替原料vn制備?；衔?xii禾nxir，中間體v和v，，或中間體vn和vn'全部最初以外消旋混合 物的形式產(chǎn)生。在上述反應(yīng)方案中的所有這些外消旋混合物也可以與方案 7中的方法類似的方式容易地分離成手性對(duì)映異構(gòu)體對(duì)。
手竺 分離
xii xir
外消旋混合物
方案7
實(shí)施例
提供下列實(shí)施例和參考例以幫助理解本發(fā)明，本發(fā)明的真實(shí)范圍如后 附權(quán)利要求所述。
實(shí)施例la
制備中間體E/Z-6-氯-3-(3-氯-苯亞甲基)-1 ，3-二氫』引哚-2-酮
24M.W. 290.15 C15H9C12N0
向6-氯羥吲哚(16.2 g， 92 mmol) (Crescent)和3-氯-苯甲醛(12.9 g, 92 mmol) (Aldrich)在甲醇(109 mL)中的混合物中，滴加吡咯垸(6.55 g， 92 mmol) (Aldrich)。然后，將混合物于70 。C加熱3 h。在冷卻至4。C后，將 混合物過(guò)濾并且收集得到的沉淀物，干燥，得到E/Z-6-氯-3-(3-氯-苯亞甲 基)-l,3-二氫』引哚-2-酮的混合物，為亮黃色固體(產(chǎn)量25.2g， 95%)。
實(shí)施例lb
制備中間體E/Z-6-氯-3-(3-氯-苯亞甲基)-1 -(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲
基)-l，3-二氫』引哚-2-酮
Cl
、/
Si、
/
M.W. 420.41 C21H23Cl2N02Si
向在實(shí)施例la中制備的E/Z-6-氯-3-(3-氯-苯亞甲基)-l，3-二氫-卩引哚-2-酮(2.3 g， 7.9 mmol)在N,N-二甲基-甲酰胺(20mL)中的溶液中，于0 。C 加入NaH(60。/。，在礦物油中)(0.32g， 7.9 mmol) (Aldrich)，接著滴加在四 氫呋喃(20 mL)中的2-(三甲代甲硅烷基)乙氧基甲基氯(1.32 g， 7.9 mmol)。將反應(yīng)混合物于0。C攪拌0.5h，然后傾倒入冰水中。將粗制物用 乙酸乙酯萃取兩次。將合并的有機(jī)層用Na2S04干燥。除去溶劑，并且將 剩余物由色譜(EtOAc:己烷=1: 5)純化，得到E/Z-6-氯-3-(3-氯-苯亞甲
25基)-l-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-l，3-二氫』引哚-2-酮，為黃色油狀物 (產(chǎn)量3.0g， 90%)。
實(shí)施例lc
制備中間體l-(5-氟-2-甲基苯基)-3-三甲基甲硅烷氧基-2-氮雜-l,3-丁二烯
M.W. 251.38 C13H18FNOSi
在氮?dú)庀?，?，1,3，3,3-六甲基二硅氮烷(1.61 g， 10 mmol) (Aldrich) 中，于室溫加入正丁基鋰(2.5 M， 4mL， 10 mmol) (Aldrich)。將反應(yīng)混合 物于室溫?cái)嚢?0分鐘。然后加入無(wú)水四氫呋喃(30 mL)，接著加入5-氟-2-甲基-苯甲醛(1.38g， 10 mmol) (Platte)。在將混合物于室溫?cái)嚢?.5 h后， 滴加氯化三甲基硅烷(1.1 g, 10 mmol) (Aldrich)。然后在冷卻冰浴上將混 合物的溫度降低至0。C。向此混合物中，以一份加入三乙胺(1.4 g， 13.6 mmol)，接著滴加乙酰氯(lg， 13.6mmol)在二乙醚(50mL)中的溶液。移 走冷卻浴，并且將混合物于室溫?cái)嚢? h。在氮?dú)庀?，將混合物迅速地?硅藻土上過(guò)濾，并且將濾液在減壓下濃縮，得到粗制的l-(5-氟-2-甲基苯 基)-3-三甲基甲硅烷氧基-2-氮雜-l,3-丁二烯，為黃色膠，并且在沒(méi)有進(jìn)一 步純化的情況下用于下一步驟。
類似的轉(zhuǎn)化已經(jīng)由Ghosez， L.， Bayard， Ph.， Nshimyumukiza， P.， Gouverneur， V.， Sainte， F.， Beaudegnies， R.， Rivers, M.， Frique-Hesbain， A,M.和Wynants， C.報(bào)道于7^ra/ e&朋1995， 11021-11042。
實(shí)施例ld
制備中間體外消旋(2，R，3R,4'S)-6-氯-4'-(3-氯苯基)-2'-(5-氟-2-甲基苯 基)-2,3-二氫-2,6，-二氧代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸o
一Si /
M.W. 599.61 C31H33Cl2FN203Si
向在實(shí)施例lc中制備的1-(5-氟-2-甲基苯基)-3-三甲基甲硅垸氧基-2-氮雜-l,3-丁二烯在甲苯(50 mL)中的溶液中，加入在實(shí)施例lb中制備的E/Z-6-氯-3-(3-氯-苯亞甲基)-l-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-l，3-二氫-吲哚-2-酮(3.0 g， 7.14 mmol)。將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀?，在密封管中，?48。C攪拌40min。在將溶液冷卻至室溫后，加入甲醇(50mL)，然后將混合物濃縮。將剩余物由色譜(EtOAc:己烷=2: l)純化，得到外消旋(2，民311,4，8)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-(5-氟-2-甲基苯基)-2,3-二氫-2，6，-二氧代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷，為灰白色固體(產(chǎn)量2.1g， 49%)。
實(shí)施例le
制備中間體外消旋(2'R，3R,4'S)-6-氯-4'-(3-氯苯基)-2，-(5-氟-2-甲基苯基)-2,3-二氫-1，-[(叔-丁氧基羰基)甲基]-2,6，-二氧代螺[!1引哚-3,3，-哌啶]—1-
甲氧基乙基三甲基硅垸
M.W. 713.76 C37H43Cl2FN205Si
27向在實(shí)施例Id中制備的外消旋(2，11,311，4，8)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-(5-氟-2-甲基苯基)-2,3-二氫-2,6，-二氧代螺[卩引哚-3,3，-哌徒]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷(l.Og， 1.67mmol)在N,N-二甲基-甲酰胺(20mL)中的溶液中，于室溫加入溴-乙酸叔丁酯(0.8 g， 4.1mmol)和碳酸銫(3.0 g， 9.20mmo1)。將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀聰嚢? h，然后傾倒入飽和NH4C1水溶液。將混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層合并，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由色譜(EtOAc:己烷=1: 4)純化，得到外消旋(2，R,3R，4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-(5-氟-2-甲基苯基)-2,3-二氫-r-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2,6'-二氧代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷，為白色泡沬(產(chǎn)量0.58 g，48.7%)。
實(shí)施例lf
制備中間體外消旋(2'R,3R，4'S)-6-氯-4'-(3-氯苯基)-2'-(5-氟-2-甲基苯基)-2，3-二氫-l，-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2-氧代-6，-硫代螺[剛哚-3,3，-哌
啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷
M.W. 729.82 C37H43Cl2FN204SSi
將在實(shí)施例le中制備的外消旋(2，R,3R，4'S)-6-氯-4'-(3-氯苯基)-2，-(5-氟_2-甲基苯基)-2,3-二氫-1，-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2,6，-二氧代螺[fl引哚-3,3，-哌啶]-1-甲氧基乙基三甲基硅垸(1 g， 1.4mmol)禾卩2，4-雙-(4-甲氧基苯基)-l，3-二硫雜-2，4-二磷雜環(huán)丁烷2，4-二硫化物(1.5 g，3.75 mmol) (Aldrich)在甲苯(20 mL)中的混合物于120 。C加熱0.5 h。將混合物冷卻至室溫然
28后濃縮。將剩余物由色譜(EtOAc:己烷=1: l)純化，得到外消旋
(2'R,3R，4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2'-(5-氟-2-甲基苯基)-2,3-二氫-l'-[(叔丁氧 基羰基)甲基]-2-氧代-6，-硫代螺[n引哚-3，3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅 烷，為灰白色泡沬(產(chǎn)量1.0g， 92%)。
實(shí)施例lg
制備中間體外消旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6'-(5-氟-2-甲基苯 基)-6，,7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2,4]三嗪
-3 ，-酮)]-1 -甲氧基乙基三甲基硅垸<formula>formula see original document page 29</formula>
將在實(shí)施例lf中制備的外消旋(2，民311，4，8)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-(5-氟-2-甲基苯基)-2,3-二氫-r-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2-氧代-6'-硫代螺[n引哚 -3,3，-哌啶]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷(1 g， 1.37mmol)和一水合肼(5 g， 64 mmol) (Aldrich， 64-65%)在甲醇(50 ml)中的混合物密封在管中，并且 于110 。C加熱24 h。將混合物冷卻至室溫然后濃縮。將剩余物由色譜 (EtOAc)純化，得到外消旋(6'R，3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6'-(5-氟-2-甲基 苯基)-6，,7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪 -3，-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷，為灰白色固體(產(chǎn)量0.3g， 34%)。
制備中間體外消旋(6'R,3R,8，S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6'-(5-氟-2-甲基苯 基)-2，-甲基-6，，7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][1,2，4]
M.W. 653.66 C33H35Cl2FN403Si
實(shí)施例lh
嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷M.W. 667.69 C34H37Cl2FN403Si
向在實(shí)施例lg中制備的外消旋(6，R,3R,8'S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6'-(5-氟-2-甲基苯基)-6，，7，，8',9'-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3，7'-(2H-吡啶并 [2,l-c][l，2，4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷(0.15 g， 0.23mmol)在 N,N-二甲基-甲酰胺(20 mL)中的溶液中，于0 。C加入LiH (0.2 g， 25 mmol) (Aldrich)，接著加入碘甲烷(0.39 g， 2.74mmo1)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦?溫并且于室溫?cái)嚢?h。將混合物用乙酸乙酯稀釋，然后用飽和NH4C1溶 液洗滌。將水層用乙酸乙酯萃取，并且將合并的有機(jī)層用MgS04干燥。 除去溶劑，并且將剩余物由色譜(EtOAc)純化，得到外消旋(6%311,8，8)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6'-(5-氟-2-甲基苯基)-2'-甲基-6',7',8'，9'-四氫-2-氧代螺 [3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2，4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅 烷(產(chǎn)量0.15g， 98%)。
實(shí)施例li
制備外消旋(6'R，3R,8'S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6'-(5-氟-2-甲基苯基)-2'-甲基 -6，，7，，8，,9，-四氫螺[311-吲哚-3，7，-(211-吡啶并[2，1-0|[1,2,4〗三嗪)]-2，3，(111)-
二酮
M.W. 537.43 C28H23C12FN40
30向在實(shí)施例lh中制備的外消旋(6，R,m,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(5-氟-2-甲基苯基)-2'-甲基-6，，7',8',9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶 并[2，l-c][l,2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷(0.15 g， 0.22mmo1) 在二氯甲烷(20mL)中的溶液中，加入三氟乙酸(10mL)。將反應(yīng)混合物于 室溫?cái)嚢? h。將反應(yīng)混合物濃縮。將剩余物用飽和NaHC03水溶液中和， 然后用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層分離，用MgS04干燥并且濃縮。
向剩余物中，加入甲醇(20 mL)和N,N，-二異丙基乙胺(l mL， 6.6 mmol)。將反應(yīng)混合物于IOO 。C加熱l h，然后冷卻至室溫，濃縮。將剩 余物在乙酸乙酯和水之間分配。將有機(jī)層分離，并且濃縮。將剩余物由色 譜(EtOAc: NEt3=100: O.l)純化，得到外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯 苯基)-6，-(5-氟-2-甲基苯基)-2'-甲基-6，,7',8',9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7'-(2H-吡 啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體(產(chǎn)量85mg， 72%)。
HRMS(ES+) w/z對(duì)于C28H23C12FN402+H [(M+H)+]計(jì)算值537.1255 。 實(shí)測(cè)值537.1255。
實(shí)施例lj
制備手性(6，R,3R,8，S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6，-(5-氟-2-甲基苯基)-2'-甲基 -6，，7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮
/
M.W. 537.43 C28H23C12FN402
由手性SFC從在實(shí)施例li中制備的外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯 苯基)-6，-(5-氟-2-甲基苯基)-2'-甲基-6',7，，8，,9'-四氫螺[3H-吲哚-3,7'-(2H-吡 啶并[2，l-c][l,2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮(80 mg)進(jìn)行兩種對(duì)映異構(gòu)體的分
31離，以提供手性(6'R,3R，8，S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6，-(5-氟-2-甲基苯基)-2，-甲 基-6，,7，，8，,9,-四氫螺[3H-吲哚-3,7'-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2,4]三 嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體(34 mg， 42%) (RO5170566-000)和手性 (6，S,3S,8，R)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6，-(5-氟-2-甲基苯基)-2，-甲基-6，，7，,8，，9，-四 氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2,3，(1H)-二酮，為白色固 體(33mg， 41%) (R05170579-000)。
實(shí)施例2
制備外消旋(6'R,3R，8，S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6'-(5-氟-2-甲基苯 基)-6，,7，,8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4〗三
嗪)]-2,3，(lH)-二酮
M.W. 523.40 C27H21C12FN402
以與實(shí)施例li中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例lg中制備的外消 旋(6，R，3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(5-氟-2-甲基苯基)-6',7，，8，，9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l，2,4]三嗪-3，-酮)]-1-甲氧基乙基三 甲基硅垸(65 mg， 0.1 mmol)與三氟乙酸(10 mL)反應(yīng)，然后與N，N，-二異丙 基乙胺(1 mL)反應(yīng)，得到外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(5-氟 -2-甲基苯基)-6，，7，,8，，9，-四氫螺[311-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，1-c][l，2,4]三 嗪)]-2，3，(lH)-二酮，為白色固4本(25mg， 47%)。
HRMS(ES+) m/z對(duì)于C27H21C12FN402 + H [(M+H)+]計(jì)算值523.1099。 實(shí)測(cè)值523.1099。
實(shí)施例3a
制備中間體l-(l-亞甲基-丙基)-3-三甲基甲硅烷氧基-2-氮雜-l，3-丁二烯M.W. 197.36 C10H19NOSi
以與實(shí)施例lc中所述的方法類似的方式，乙基丙烯醛(2.1 g，22mmo1) (TCI-US)用作原料以代替5-氟-2-甲基-苯甲醛，以與1,1，1,3,3,3-六甲基二硅 氮垸(3.2 g， 20mmo1)，正丁基鋰(2.5 M， 8mL， 20 mmol)，氯化三甲基 硅烷(2.2 g， 20mmo1)，三乙胺(2.9 g， 27mmol)和乙酰氯(2 g， 27 mmol) 反應(yīng)，得到l-(l-亞甲基-丙基)-3-三甲基甲硅烷氧基-2-氮雜-l,3-丁二烯，并 且在沒(méi)有進(jìn)一步純化的情況下用于下一步驟。
實(shí)施例3b
制備中間體外消旋(2，R,3R,4'S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-(1-亞甲基-丙 基)-2,3-二氫-2,6'-二氧代-螺[B引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷
<formula>formula see original document page 33</formula>
M.W. 545.59 C28H34Cl2N203Si
以與實(shí)施例ld中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例lb中制備的E/Z-6-氯-3-(3-氯-苯亞甲基)-1-(2-三甲基甲硅垸基-乙氧基甲基)-1,3-二氫-卩引哚-2-酮(3 g， 7.1 mmol)與在實(shí)施例3a中制備的l-(l-亞甲基-丙基)-3-三甲基甲 硅烷氧基-2-氮雜-l,3-丁二烯(19 g， 96mmol)在甲苯(200mL)中反應(yīng)，得 到外消旋(2，R,3R,4，S)-6-氯-4，-(3-氯-苯基)-2，-(l-亞甲基-丙基)-2,3-二氫 -2,6，-二氧代螺[8引哚-3,3，-哌啶]-1-甲氧基乙基三甲基硅垸，為白色泡沫(產(chǎn) 量3.5g， 90%)。實(shí)施例3c
制備中間體外消旋(2，R，3R,4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-(l-亞甲基-丙基)-2,3-二氫-l，-[(叔丁氧基羰基)甲萄-2，6，-二氧代螺[卩引哚-3，3，-哌啶]-1-甲氧基乙
基三甲基硅烷
M.W. 659.73 C34H44Cl2N205Si
以與實(shí)施例le中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例3b中制備的外消 旋(2，R,3R,4，S)-6-氯-4，-(3-氯-苯基)-2，-(l-亞甲基-丙基)-2，3-二氫-2，6，-二氧 代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸(7g， 12.8mmo1)與溴-乙 酸叔丁酯(10 g， 51mmol)和碳酸銫(11 g， 34 mmol)在N,N-二甲基-甲酰 胺(50 mL)中，于室溫反應(yīng)，得到外消旋(2，R,3R，4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯 基)-2，-(1-亞甲基-丙基)-2,3-二氫-l，-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2,6，-二氧代螺 [口引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷，為黃色泡沫(產(chǎn)量5.7g，67。/0)。
實(shí)施例3d
制備中間體外消旋(2，11，311,4，8)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-(1-亞甲基-丙基)-2，3-二氫-l，-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2-氧代-6，-硫代螺[卩引哚-3，3，-哌啶]-1-甲氧
基乙基三甲基硅烷
34M.W. 675.80 C34H44Cl2N204SSi
以與實(shí)施例If中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例3c中制備的外消 旋(2，R，3R，4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-(l-亞甲基-丙基)-2,3-二氫-l，-[(叔丁氧 基羰基)甲基]-2,6，-二氧代螺[n引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷 (4.7 g， 7.1 mmol)與2，4-雙-(4-甲氧基苯基)-1，3-二硫雜-2,4-二磷雜環(huán)丁烷 2,4-二硫化物(6 g， 15 mmol) (Aldrich)在甲苯(100 mL)中，于120 。C反應(yīng)， 得到外消旋(2，R,3R,4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-(l-亞甲基-丙基)-2，3-二氫 -l，-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2-氧代-6，-硫代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙 基三甲基硅烷，為白色泡沬(產(chǎn)量3.5g， 73%)。
實(shí)施例3e
制備中間體外消旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙 基)-6，,7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三嗪
-3，-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷
0
—Si /
M.W. 599,64 C30H36Cl2N4O3Si
35以與實(shí)施例lg中所述的方法類似的方式，在密封管中，實(shí)施例3d中
制備的外消旋(2，R,3R，4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-(l-亞甲基-丙基)-2,3-二氫 -l，-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2-氧代-6，-硫代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙 基三甲基硅烷(1.9 g， 2.8 mmol)與一水合肼(4 g， ~51 mmol) (Aldrich， 64-65%)在甲醇(50 ml)中于120 。C反應(yīng)，得到外消旋(6'R，3R,8，S)-6-氯 -8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，，9，-四氫-2-氧代螺[311-吲哚 -3,7，-(211-吡啶并[2,1-0][1，2,4]三嗪-3，-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷，為白 色泡沫(產(chǎn)量1.2 g， 71%)。
制備中間體外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-2，-甲基-6，，7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪
以與實(shí)施例lh中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例3e中制備的外消 旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫-2-氧 代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2，4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲 基硅烷(0.11 g， 0.18 mmol)與LiH (0.2 g， 25 mmol)(AIdrich)和碘甲烷(3 g， 21 mmol)在N,N-二甲基-甲酰胺(20 mL)中反應(yīng)，得到外消旋 (6'R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-2，-甲基-6，,7，,8，,9，-四 氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l，2，4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基 乙基三甲基硅烷，為白色泡沫(產(chǎn)量0.11g， 99%)。
實(shí)施例3f
-3 ，-酮)]-1 -甲氧基乙基三甲基硅垸
M.W. 613.67 C31H38Cl2N403Si實(shí)施例3g
制備外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-2，-甲基 -6，,7，，8，,9，-四氫螺[311-吲哚-3,7，-(2&吡啶并[2，1-01[1,2,4]三嗪)]-2,3，(1印-
以與實(shí)施例li中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例3f中制備的 (6'R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-2，-甲基-6',7，,8，,9，-四 氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2,4]三嗪-3，-酮)]-1-甲氧基 乙基三甲基硅烷(0.11 g， 0.18 mmol)與三氟乙酸反應(yīng)，接著與N,N'-二異 丙基乙胺在甲醇中反應(yīng)，得到外消旋(6，11，311，8，8)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-2'-甲基-6，,7，，8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l，2,4]三嗪)]-2，3，(m)-二酮，為白色固體(產(chǎn)量61mg， 70%)。
HRMS(ES+) m/z對(duì)于C25H24C12N402+H [(M+H)+]計(jì)算值483.1349。 實(shí)測(cè)值483.1348。
制備手性(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-2，-甲基 -6，,7，，8，，9，-四氫螺[31"1-吲哚-3，7，-(2&吡啶并[2,1-01[1,2,4]三嗪)]-2,3，(1印-
M.W. 483.40 C25H24C12N40
實(shí)施例3h
M.W. 483.40
C25H24C12N402 <formula>formula see original document page 37</formula>由手性SFC從在實(shí)施例3g中制備的外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯 苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-2，-甲基-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡 啶并[2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮(58 mg)進(jìn)行兩種對(duì)映異構(gòu)體的分 離，以提供手性(6，R，3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-2，-甲基 -6，,7，,8，,9，-四氫螺[3&吲哚-3，7，-(211-吡啶并[2,1-01[1,2,4]三嗪)]-2,3，(1; )-二酮，為白色固體(19 mg， 33%) (RO5174040-000)和手性(6，S，3S,8，R)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-2'-甲基-6，,7，，8，,9'-四氫螺[3H-吲哚 -3，7，-(211-吡啶并[2,1-01[1,2,4]三嗪)]-2,3，(1印陽(yáng)二酮，為白色固體(23 mg， 40%) (R05174041-000)。
制備外消旋(6，!1,311，8，8)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，，7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,1-c][l,2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮
以與實(shí)施例li中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例3e中制備的外消 旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，，9，-四氫-2-氧 代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2，4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲 基硅烷(0.11 g， 0.18 mmol) (100 mg， 0.17 mmol)與三氟乙酸反應(yīng)，然后與 N，N，-二異丙基乙胺在甲醇中反應(yīng)，得到外消旋(6'R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯 苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9'-四氫螺[3H-吲哚-3,7'-(2H-吡啶并 [2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮，為白色固體(43mg， 55%)。
HRMS(ES+) m/z對(duì)于C24H22C12N402 + H [(M+H)+]計(jì)算值469.1193。 實(shí)測(cè)值469.1189。
實(shí)施例4a
M.W. 469.37
C24H22C12N402
38實(shí)施例4b
制備手性(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，,9，-四 氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2，3，(1H)-二酮
M.W. 469.37 C24H22C12N402
由手性SFC從在實(shí)施例4a中制備的外消旋(6'R，3R,8'S)-6-氯-8'-(3-氯 苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7',8，,9'-四氫螺[3H-吲哚-3，7'-(2H-吡啶并 [2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮(43mg)進(jìn)行兩種對(duì)映異構(gòu)體的分離，以 提供手性(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四 氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮，為白色固 體(21 mg， 50%) (RO5186112-000)和手性(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯 基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，,9,-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體(18mg， 42%)。
實(shí)施例5a
制備中間體外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(3-二甲基氨基丙 基)—6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，，9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l，2,4]三嗪-3，-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅垸M.W. 684.79 C35H47Cl2N503Si
以與實(shí)施例lh中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例3e中制備的外消 旋(6，R，3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫-2-氧 代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲 基硅垸(0.12 g， 0.20 mmol)與LiH (0.3 g， 38 mmol) (Aldrich)禾口 3-二甲基 氨基丙基氯鹽酸鹽(0.8g，5mmol)(Aldrich)在N,N-二甲基-甲酰胺(10mL) 中，于100。C反應(yīng)3h，得到外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(3-二甲基氨基丙基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚 -3，7，-(211-吡啶并[2,1-0|[1,2，4]三嗪-3'-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅垸，為白 色泡沫(產(chǎn)量0.12g， 88%)。
制備外消旋(6，R，3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(3-二甲基氨基丙基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三
以與實(shí)施例li中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例5a中制備的外消 旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(3-二甲基氨基丙基)-6，-(l-亞甲基-丙 基)-6，,7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2，4]三嗪 -3，-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅垸(0.12 g， 0.18mmol)與三氟乙酸反應(yīng)，接 著與N，N，-二異丙基乙胺在甲醇中反應(yīng)，得到外消旋(6，R,3R，8，S)-6-氯 -8，-(3-氯苯基)-2，-(3-二甲基氨基丙基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫 螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體
實(shí)施例5b
嗪)]-2，3，(lH)-二酮
M.W. 554.52 C29H33C12N50(產(chǎn)量57mg， 57%)。
HRMS(ES+) m/z對(duì)于C29H33C12N502+H [(M+H)+]計(jì)算值554.2084。 實(shí)測(cè)值554.2083。
制備中間體外消旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-甲氧基乙 基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，，7，，8',9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l,2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸<formula>formula see original document page 41</formula>以與實(shí)施例lh中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例3e中制備的外消 旋(6，R，3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫-2-氧 代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2，4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲 基硅烷((Ug， (X17mmol)與LiH(0.3g， 38 mmol) (AMrich)和2-溴乙基甲 基醚(5 g， 36 mmol) (Aldrich)在N,N-二甲基-甲酰胺(10 mL)中，于室溫 反應(yīng)10 h，得到外消旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-甲氧基乙 基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，，9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2，l-c][l,2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸，為白色泡沫(產(chǎn)量O.l g， 89%)。
制備外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2，-(2-甲氧基乙基)-6，-(l-亞甲 基-丙基)-6，，7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2，4]三
實(shí)施例6a
MW. 657.72 C H42Cl2N404Si
實(shí)施例6b嗪)]-2，3'(lH)-二酮
o
M.W, 527.46 C27H28C12N403
以與實(shí)施例li中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例6a中制備的外消 旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(3-二甲基氨基丙基)-6，-(l-亞甲基-丙 基)-6，,7，，8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2,4]三嗪 -3，-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷(0.1 g， 0.18mmol)與三氟乙酸反應(yīng)，接 著與N,N，-二異丙基乙胺在甲醇中反應(yīng)，得到外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯 -8，-(3-氯苯基)-2，-(2-甲氧基乙基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺 [3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體 (產(chǎn)量38mg， 47%)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C27H28Cl2N403+H[(M+H)+]計(jì)算值527.1611。實(shí) 測(cè)值:527.1610。
實(shí)施例7a
制備中間體外消旋(6，R，3R,8，S)-2，-(2-乙酰氧基乙基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2，l-c][l,2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸
42M.W. 685.73 C34H42Cl2N405Si
以與實(shí)施例lh中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例3e中制備的外消 旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫-2-氧 代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲 基硅烷(0,5 g， 0.83 mmol)與LiH (0.2 g, 25 mmo〗)(Aldrich)和乙酸2-溴乙 酯(1.2 g， 7mmol)(Aldrich)在N,N-二甲基-甲酰胺(30mL)中，于室溫反 應(yīng)72 h，得到外消旋(6，尺,311,8，8)-2，-(2-乙酰氧基乙基)-6-氯-8，-(3-氯苯基> 6'-(l-亞甲基-丙基)-6，，7，，8，，9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l,2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷，為白色泡沫(產(chǎn)量 0.51 g， 90%)。
制備外消旋(6，R,3R,8，S)-2，-(2-乙酰氧基乙基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞 甲基-丙基)-6，，7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三
以與實(shí)施例li中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例6a中制備的外消 旋(6，11,311，8，8)-2，-(2-乙酰氧基乙基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙 基)-6',7，,8',9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三嗪 -3，-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷(0.51 g， 0.74 mmol)與三氟乙酸在二氯甲 烷中，于室溫反應(yīng)5h，接著與N,N，-二異丙基乙胺在甲醇中，于100 。C 反應(yīng)0.5 h，得到外消旋(6，R，3R,8，S)-2，-(2-乙酰氧基乙基)-6-氯-8，-(3-氯苯 基)-6,-(1-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，，9，-四氫螺[3H- tl引哚-3,7，-(2H-妣啶并
實(shí)施例7b
嗪)]-2,3，(lH)-二酮
M.W. 555.47 C28H28C12N40.[2，l-c][l，2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體(產(chǎn)量0.35g， 85%)。
HRMS(ES+)附/z對(duì)于C28H28C12N404+H [(M+H)+]計(jì)算值555.1561。 實(shí)測(cè)值555.1558。
實(shí)施例8a
制備外消旋(6，11,311,8，8)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-羥基乙基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三
嗪)]-2,3'(lH)-二酮
<formula>formula see original document page 44</formula>
向在實(shí)施例7b中制備的外消旋(6，R，3R，8，S)-2，-(2-乙酰氧基乙基)-6-氯 -8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫螺[311-吲哚-3,7，-(211-吡 啶并[2,l-c][l，2，4]三嗪)]-2,3，(m)-二酮(0.3 g， 0.54 mmol)在四氫呋喃(25 mL)和甲醇(15mL)中的溶液中，加入氫氧化鈉水溶液(1N， 10mL)。將反 應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?h，然后由HCl水溶液中和至"pH" 7。然后，將混 合物用乙酸乙酯萃取.將有機(jī)層分離，用MgS04干燥，濃縮，并且真空中 干燥，得到外消旋外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-羥基乙 基)_6，—(1_亞甲基—丙基)_6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2，l-c][l,2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮，為白色固體(0.22 g， 79%)
HRMS(ES+)w/z對(duì)于C26H26Cl2N403+H[(M+H)+]計(jì)算值513.1455。 實(shí)測(cè)值513.1452。
實(shí)施例8b
制備手性(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-羥基乙基)-6，-(l-亞甲基-丙 基)-6，，7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮
OH
M.W. 513.43 C26H26C12N403
由手性SFC從在實(shí)施例8a中制備的外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8'-(3-氯 苯基)-2，-(2-羥基乙基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，，7',8，,9，-四氫螺[3H-吲哚 -3，7，-(211-吡啶并[2,1-(:][1，2,4]三嗪)]-2,3，(111)-二酮(220 mg)進(jìn)行兩種對(duì)映 異構(gòu)體的分離，以提供手性(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-羥基乙 基)_6，_(1_亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2，l-c][l,2，4]三嗪)]-2,3，(lH)- 二酮，為白色固體(卯mg ， 41%) (R05184375-000)和手性(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-羥基乙 基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2,l-c〗[l,2,4〗三嗪)]-2,3，(lH)- 二酮，為白色固體 (98 mg ， 45%) (R05174422-000)。
實(shí)施例9a
制備中間體外消旋(6，民311,8，8)-2，-(2-乙酰基氨基乙基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6'-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l,2，4]三嗪-3，-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅垸M.W, 684.74 C34H43Cl2N504Si
以與實(shí)施例lh中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例3e中制備的外消 旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫-2-氧 代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲 基硅烷(50 mg， 0.083 mmol)與LiH (0.2 g， 25 mmol) (Aldrich)， Nal (0.2 g)， 和N-(2-氯乙基)乙酰胺(lg，8mmol)(Alfa)在N,N-二甲基-甲酰胺(30 mL) 中，于室溫反應(yīng)72 h，得到外消旋(6，R，3R,8，S)-2，-(2-乙酰基氨基乙基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6'-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚 -3,7，-(211-吡啶并[2,1-01[1,2,4]三嗪-3，-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷，為白 色泡沬(產(chǎn)量32mg， 56%)。
實(shí)施例9b
制備外消旋(6，R，3R,8，S)-2，-(2-乙酰基氨基乙基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l，2,4]三
嗪)]-2，3，(m)-二酮<formula>formula see original document page 46</formula>M.W. 554.48 C28H29C12N503
以與實(shí)施例li中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例9a中制備的外消 旋(6%3民8，8)-2，-(2-乙?；被一?-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙 基)-6，,7，，8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪 -3，-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷(32mg， 0.047 mmol)與三氟乙酸在二氯 甲烷中，于室溫反應(yīng)1 11，得到外消旋(6，11,3民8，8)-2，-(2-乙?；被一?-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體(產(chǎn)量15mg， 57%)。HRMS(ES+) w/z對(duì)于C2sH29Cl2N503+H [(M+H)+]計(jì)算值554.1720。 實(shí)測(cè)值554.1716。
實(shí)施例10a
制備中間體外消旋(6，R,3R，8'S)-2，-(2-叔丁氧基羰基-甲基)-6-氯-8'-(3-氯苯 基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶 并[2，l-c][l,2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷
向在實(shí)施例3e中制備的外消旋(6'11,3尺,8'8)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6'-(1-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l,2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸(0.75 g， 1.25 mmol)在 N,N-二甲基-甲酰胺(50mL)中的溶液中，于室溫加入溴-乙酸叔丁酯(3 g， 15mmol)和碳酸銫(lg， 3.1mmo1)。將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀聰嚢? h，然 后傾倒入飽和NH4C1水溶液。將混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層合并， 用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由色譜(EtOAc:己垸=1: 2)純化，得 到外消旋(6，仗,3&,8，8)-2，-(2-叔丁氧基羰基-甲基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，,9'-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2，l-c][l，2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷，為白色固體(產(chǎn)量0.7 g， 78%)。
—Si
/
M.W. 713.78 C36H46Cl2N405Si
實(shí)施例10b
47制備外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-羥基羰基-甲基)-6，-(1-亞 甲基-丙基)-6，，7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三
嗪)]-2，3'(lH)-二酮
以與實(shí)施例li中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例10a中制備的外消 旋(6，R,3R，8，S)-2，-(2-叔丁氧基羰基-甲基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基 -丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺[311-吲哚-3,7，-(211-吡啶并[2,1-01[1,2,4]三 嗪-3，-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷(0.59 g， 0.83 mmol)與三氟乙酸(10 mL) 在二氯甲烷(20mL)中，于室溫反應(yīng)18h，接著與N,N，-二異丙基乙胺(1 mL)在甲醇(10mL)中，于100 °C反應(yīng)1 h，得到外消旋(6'R,3R，8，S)-6-氯 -8，-(3-氯苯基)-2，-(2-羥基羰基-甲基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺 [3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體 (產(chǎn)量0.3g， 69%)。
HRMS(ES+) w々對(duì)于C26H24C12N404+H [(M+H)+]計(jì)算值527.1248。 實(shí)測(cè)值527.1247。
制備外消旋(6，R，3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-氟羰基-甲基)-6，-(l-亞甲 基-丙基)-6，，7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l，2，4〗三
M.W. 527.41 C26H24C12N40,
實(shí)施例lla
嗪)]-2,3，(m)-二酮
48M.W. 529.40 C26H23C12FN403
向在實(shí)施例10b中制備的外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2'-(2-羥基羰基-甲基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，，7，,8、9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡 啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮(1 g， 1.9mmol)在二氯甲垸(30 mL) 中的溶液中，于0。C加入氰尿酰氟(lg， 7.3mmol)(Alfa)和吡啶(2 g， 25 mmol)。在將混合物于0。C攪拌2h后，將混合物在H20和二氯甲垸之間 分配。將有機(jī)層分離并且將水層用二氯甲垸萃取。將有機(jī)層合并，用MgS04 干燥，濃縮，得到外消旋(6'R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2'-(2-氟羰基-甲 基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為黃色固體，并且在沒(méi)有進(jìn)一步純化的 情況下用于下一步驟(產(chǎn)量0.61 g， 60%)。
實(shí)施例lib
制備外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(2-羥基乙基氨基)羰基-甲 基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6',7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2，l-c][l,2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮
M.W. 570.48 C28H29C12N504
向在密封管中的在lla中制備的外消旋(6'R,3R，8'S)-6-氯-8'-(3-氯苯 基)-2，-(2-氟羰基-甲基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，，7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚 -3,7，-(211-吡啶并[2,1-0][1，2,4]三嗪)]-2,3，(1印-二酮(0.2 g， 0.57 mmol)在四 氫呋喃(30mL)中的溶液中，加入2-氨基乙醇(0.3 g， 4，9 mmol) (Aldrich)， N-甲基嗎啉(0.3 g， 3 mmol)和4-二甲基氨基吡啶(7 mg， 0.075 mmol)。 在將混合物在微波輻照下，于100 。C加熱30 min后，將混合物用乙酸乙酯稀釋，用&0洗滌。將有機(jī)層分離，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余 物由色譜(MeOH: EtOAc= 1: 8)純化，得到外消旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(2-羥基乙基氨基)羰基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，,9，-四 氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮，為白色固 體(產(chǎn)量92mg， 28%)。
HRMS(ES+) m/z對(duì)于C28H29C12N504+H [(M+H)+]計(jì)算值570.1670。 實(shí)測(cè)值570.1671。
實(shí)施例llc
制備手性(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(2-羥基乙基氨基)羰基-甲 基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8',9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮
M.W. 570.48 C28H29C12N504
由手性SFC從在實(shí)施例lib中制備的外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(2-羥基乙基氨基)羰基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四 氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮(80 mg) 進(jìn)行兩種對(duì)映異構(gòu)體的分離，以提供手性(6'R，3R,8'S)-6-氯-8'-(3-氯苯 基)-2，-[(2-羥基乙基氨基)羰基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，,9，-四氫螺 [3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體 (28 mg， 35%) (R05185374-000)和手性(6，S,3S,8，R)-6-氯-8，-(3-氯苯 基)-2，-[(2-羥基乙基氨基)羰基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，，9，-四氫螺 [3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮，為白色固體 (30mg， 38%) (R05185375-000)。
50實(shí)施例12a
制備外消旋(6'R，3R,8'S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2'-[(2-環(huán)丙基氨基)羰基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮
以與實(shí)施例lib中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例lla中制備的外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-氟羰基-甲基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8,,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2，4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮(0.15 g， 0.28 mmol)與環(huán)丙基胺(Aldrich)， N-甲基嗎啉和4-二甲基氨基吡啶反應(yīng)，得到外消旋((6'R,3R，8'S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2，-[(2-環(huán)丙基氨基)羰基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為黃色固體(產(chǎn)量85mg， 54%)。
HRMS(ES+) m/z對(duì)于C29H29C12N503+H [(M+H)+]計(jì)算值566.1720。實(shí)測(cè)值566.1721。
實(shí)施例12b
制備手性(6，R,3R，8'S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2'-[(2-環(huán)丙基氨基)羰基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2，4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮
M.W. 566.49 C29H29C12N50:M.W. 566.49 C29H29C12N503
由手性SFC從在實(shí)施例12a中制備的外消旋(6%3民8'8)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2，-[(2-環(huán)丙基氨基)羰基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮(75 mg)進(jìn)行兩種對(duì)映異構(gòu)體的分離，以提供手性(6'R，3R,8'S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2，-[(2-環(huán)丙基氨基)羰基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮，為白色固體(27 mg， 36%) (RO5185379-000)和手性(6，S,3S,8，R)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(2-環(huán)丙基氨基)羰基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體(23mg， 31%)。
實(shí)施例13a
制備外消旋(6，R,3R,8，S)-2，-(2-氨基羰基-甲基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三
嗪)]-2,3,(lH)-二酮
M.W. 526.43 C26H25C12N503將在實(shí)施例lla中制備的外消旋(6'11，311,8'8)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2'-(2-氟羰基-甲基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7'-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮(0.2 g， 0.38 mmol)在氨的甲醇溶液(7N， 20mL)中，于室溫?cái)嚢?4h。將反應(yīng)混合物濃縮，并且將剩余物由色譜(EtOAc: MeOH=9: l)純化，得到外消旋(6，R,3R,8，S)-2，-(2-氨基羰基-甲基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體(產(chǎn)量98mg， 49%)。
H腹S(ES+)w/z對(duì)于C26H25Cl2N503+H[(M+H)+]計(jì)算值526.1407。實(shí)測(cè)值526.1408。
制備外消旋(6，R，3R,8，S)-2，-(2-氨基羰基-甲基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H』引哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三
由手性SFC從在實(shí)施例13a中制備的外消旋(6'R,3R,8，S)-2'-(2-氨基羰基-甲基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2^吡啶并[2，1-(:][1，2,4]三嗉)]-2,3，(111)-二酮(90 mg)進(jìn)行兩種對(duì)映異構(gòu)體的分離，以提供手性(6，11，311,8，8)-2，-(2-氨基羰基-甲基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l，2，4]三嗪)]-2,3，(lH)- 二酮，為白色固體 (36 mg ， 40%)(RO5185390-000)和手性(6，S,3S，8，R)-2，-(2-氨基羰基-甲基)-6-氯-8，-(3-氯苯基w—G-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2，3，(lH)- 二酮，為白色固體 (38 mg ， 42%)
實(shí)施例13b
嗪)]-2,3'(lH)-二酮
M.W. 526.43 C26H25C12N50
53(R05185391-000)。
實(shí)施例14a
制備外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(l-甲磺?；?哌啶-4-基)氨基羰基-甲基]-6，-(1-亞甲基-丙基)-6',7，，8',9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶
并[2，l-c][l，2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮
M.W. 687.65 C32H36C12N605S
以與實(shí)施例lib中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例lla中制備的外消旋(6，R，3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-氟羰基-乙基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6,,7，，8，,9，-四氫螺[3H-卩引哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮(0.2 g， 0.3S mmol)與1-甲磺?；?哌啶-4-基胺三氟乙酸鹽(0.2 g)， N-甲基嗎啉和4-二甲基氨基吡啶反應(yīng)，得到外消旋(6'11,311,8'8)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2'-[(1-甲磺?；?哌啶-4-基)氨基羰基-甲基]-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(1H)-二酮，為白色固體(產(chǎn)量45mg， 17%)。
HRMS(ES+) m/z對(duì)于C32H36C12N605S+ H [(M+H)+]計(jì)算值687.1918。實(shí)測(cè)值687.1918。
實(shí)施例14b
制備外消旋(6'R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2'-[(l-甲磺?；?哌啶-4-基)氨基羰基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H』引哚-3，7，-(2H-吡啶
并[2，l-c][l,2,4]三嗪)]-2，3,(lH)-二酮M.W. 687.65 C32H36C12N605S
由手性SFC從在實(shí)施例14a中制備的外消旋(6，11,311,8，8)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(1-甲磺?；?哌啶-4-基)氨基羰基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙 基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H- B引哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三 嗪)]-2,3'(lH)-二酮(40 mg)進(jìn)行兩種對(duì)映異構(gòu)體的分離，以提供手性 (6'R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(l-甲磺?；?哌啶-4-基)氨基羰基-甲 基]-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l，2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體 (15 mg， 38%) (尺05185394-000)和手性(6，8,38，8，!1)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(1-甲磺?；?哌啶-4-基)氨基羰基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚 -3，7，-(211-吡啶并[2,1-(:][1,2,4]三嗪)]-2,3，(111)-二酮，為白色固體(15 mg， 38%) (R05185395-000)。
實(shí)施例15a
制備中間體1-異丙烯基-3-三甲基甲硅烷氧基-2-氮雜-l,3-丁二烯
/
M.W. 183.33 C9H17NOSi
以與實(shí)施例lc中所述的方法類似的方式，2-甲基丙烯醛(2g，20mmd) (Acros)用作原料以代替5-氟-2-甲基-苯甲醛，以與1,1,1，3,3,3-六甲基二硅 氮烷(3.2 g， 20mmo1)，正丁基鋰(2.5 M， 8 mL， 20mmo1)，氯化三甲基硅烷(2.2 g， 20 mmol)，三乙胺(2.7 g， 27 mmol)和乙酰氯(2.0 g， 27 mmol) 反應(yīng)，得到1-異丙烯基-3-三甲基甲硅烷氧基-2-氮雜-l,3-丁二烯，并且在 沒(méi)有進(jìn)一步純化的情況下用于下一步驟。
實(shí)施例15b
制備中間體外消旋(2，R，3R,4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2'-異丙烯基-2,3-二氫 -2,6，-二氧代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-1-甲氧基乙基三甲基硅垸<formula>formula see original document page 56</formula>M.W. 531.56 C27H32Cl2N203Si
以與實(shí)施例ld中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例lb中制備的E/Z-6-氯-3-(3-氯苯亞甲基)-l-(2-三甲基甲硅烷氧基-乙氧基甲基)-l，3-二氫-吲哚 -2-酮(8 g， 20 mmol)與在實(shí)施例15a中制備的l-異丙烯基-3-三甲基甲硅 烷氧基-2-氮雜-l，3-丁二烯(21 g， 99mmol)在甲苯(200mL)中反應(yīng)，得到 外消旋(2，R,3R，4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-異丙烯基-2,3-二氫-2，6，-二氧代 螺[P引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷，為白色膠(3.5 g， 33%)
實(shí)施例15c
制備中間體外消旋(2，R,3R,4'S)-6-氯-4'-(3-氯苯基)-2'-異丙烯基-2,3-二氫 -l，-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2,6，-二氧代螺[卩引哚-3，3，-哌啶H-甲氧基乙基三
甲基硅烷M.W. 645.71 C33H42Cl2N205Si
以與實(shí)施例le中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例15b中制備的外 消旋(2，R,3R，4'S)-6-氯-4'-(3-氯苯基)-2'-異丙烯基-2,3-二氫-2,6'-二氧代螺 [卩引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷(3g， 5.64mmol)與溴-乙酸叔丁 酯和碳酸銫在N,N-二甲基-甲酰胺中反應(yīng)，得到外消旋(2'R,3R,4'S)-6-氯 -4，-(3-氯苯基)-2，-異丙烯基-2,3-二氫-1'-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2，6'-二氧 代螺[卩引哚-3，3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸，為白色泡沫(產(chǎn)量2.98 g， 79%)。
實(shí)施例15d
制備中間體外消旋(2，R，3R，4'S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2'-異丙烯基-2,3-二氫 -l，-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2-氧代-6，-硫代螺[B引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙
基三甲基硅垸
0
—Si /
M,W. 661.77 C33H42Cl2N204SSi
以與實(shí)施例If中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例15c中制備的外消旋(2，R，3R，4'S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2'-異丙烯基-2,3-二氫-l，-[(叔丁氧基羰 基)甲基]-2，6，-二氧代螺[B引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸(1.6 g， .2.48 mmol)與2,4-雙-(4-甲氧基苯基)-1,3-二硫雜-2,4-二磷雜環(huán)丁垸2，4-二硫 化物(3g， 7.5mmol)(Aldrich)在甲苯(100mL)中，于120。C反應(yīng)，得到 外消旋(2，R，3R,4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-異丙烯基-2,3-二氫-r-[(叔丁氧 基羰基)甲基]-2-氧代-6，-硫代螺[卩引哚-3，3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅 垸，為白色泡沫(產(chǎn)量1.5g， 91%)。
實(shí)施例15e
制備中間體外消旋(6，民311,8，3)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6'-異丙烯基-6',7'，8'，9'-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2，4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧
基乙基三甲基硅垸
以與實(shí)施例lg中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例15d中制備的外 消旋(2'R，3R,4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-異丙烯基-2,3-二氫-l，-[(叔丁氧基 羰基)甲基]-2-氧代-6，-硫代螺[n引哚-3，3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸 (1.5 g， 2.27 mmol)與一水合肼(9 g， 0.1 mol) (Aldrich， 64-65%)在甲醇(20 ml)中，在密封管中，于120。C反應(yīng)，得到外消旋(6'11,311，8'8)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-6，，7，,8，，9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l,2，4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸，為白色固體(產(chǎn)量0.9 g， 68%)。
M.W. 585.61 C29H34Cl2N403Si
實(shí)施例15fM.W. 599.64 C30H36Cl2N4O3Si
以與實(shí)施例m中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例15e中制備的外 消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-6，,7，，8，，9，-四氫-2-氧代螺 [3H-卩引哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅 烷(0.9 g， 1.54mmol)與LiH(Aldrich)和碘甲垸在N,N-二甲基-甲酰胺中反 應(yīng)，得到外消旋(6'R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6'-異丙烯基-2'-甲基 -6，,7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺[311-吲哚-3,7，-(211-吡啶并[2,1-0|[1,2，4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷，為灰白色固體(產(chǎn)量0.9g， 97%)。
實(shí)施例15g
制備外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-2，-甲基 -6，，7，,8，,9，-四氫螺[3: -吲哚-3，7，-(211-吡啶并[2,1-c][l，2，4]三嗪)]-2，3，(lH)-
二酮
M.W. 469.37 C24H22C12N40
制備中間體外消旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-2，-甲基 -6，,7，，8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,1-c][l,2，4]三嗪-3，-
酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷
59以與實(shí)施例li中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例15f中制備的
(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-2，-甲基-6，，7，,8，,9，-四氫-2-氧 代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2，4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲 基硅烷(0.9g， 1.5 mmol)與三氟乙酸反應(yīng)，接著與N,N，-二異丙基乙胺在 甲醇中反應(yīng)，得到外消旋(6'R，3R,8'S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6'-異丙烯基-2'-甲基-6，，7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三 嗪)]-2,3'(lH)-二酮，為白色固體(產(chǎn)量0.6g， 85%)。
HRMS(ES+) m/z對(duì)于C24H22C12N402+H [(M+H)+]計(jì)算值469.1193。實(shí) 測(cè)值469.1189。
制備手性(6，R，3R,8'S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-2，-甲基-6，，7，,8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮
由手性SFC從在實(shí)施例15g中制備的外消旋(6%311,8，8)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-2，-甲基-6，，7，，8',9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2，l-c][l，2,4]三嗪)]-2，3，(m)-二酮(0.6g)進(jìn)行兩種對(duì)映異構(gòu)體的分離，以提 供手性(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6'-異丙烯基-2，-甲基-6，,7，，8，,9，-四 氫螺[3H-吲哚-3，7'-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固 體(0.24 g， 40%) (RO5202217-000)和手性(6，S,3S,8，R)-6-氯-8，-(3-氯苯 基)-6，-異丙烯基-2，-甲基-6'，7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7'-(2H-吡啶并 [2,l-c〗[l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)- 二酮，為白色固體 (0.24 g ， 40%) (RO5202218-000)。
實(shí)施例15h
M.W. 469.37
C24H22C12N40:
實(shí)施例16
60制備外消旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-6，，7，,8，，9，-四氫螺 [3H』引哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮
M.W. 455.35 C23H20Cl2N4O2
以與實(shí)施例li中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例15e中制備的外消 旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-6，,7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺 [3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l，2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅 烷(24mg， 0.04 mmol)與三氟乙酸反應(yīng)，然后與N，N，-二異丙基乙胺在甲 醇中反應(yīng)，得到外消旋(6'R,3R，8'S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙 基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-卩比啶并[2,l-c][l,2，4〗三 嗪)]-2，3，(lH)-二酮，為白色固體(18mg， 99%)。
H固S(ES十)w/z對(duì)于C23H2。C12N402+ H [(M+H)+]計(jì)算值455.1036。 實(shí)測(cè)值455.1038。
實(shí)施例17a
制備中間體外消旋(2，S，3R,4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-異丙烯基-2,3-二氫 -2，6，-二氧代螺[卩引哚-3，3，-哌啶]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷
M.W. 531.56 C27H32Cl2N203Si 以與實(shí)施例15b中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例lb中制備的
61E/Z-6-氯-3-(3-氯苯亞甲基)-1-(2-三甲基甲硅垸氧基-乙氧基甲基)-1,3-二氫-吲哚-2-酮(420 mg， 1 mmol)與在實(shí)施例15a中制備的l-異丙烯基-3-三甲 基甲硅垸氧基-2-氮雜-l,3-丁二烯(2g， 10.5mmol)在甲苯(10mL)中反應(yīng)， 得到外消旋(2，R,3R,4，S)-6-氯-4'-(3-氯苯基)-2，-異丙烯基-2,3-二氫-2，6'-二 氧代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷，為白色膠(170 mg， 32%)。
得到的另一種產(chǎn)物是外消旋(2'S，3R,4，S)-6-氯-4'-(3-氯苯基)-2'-異丙烯 基-2,3-二氫-2,6，-二氧代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷白色 泡沫(160mg， 30%)。
實(shí)施例17b
制備中間體外消旋(2，S,3R,4'S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-異丙烯基-2,3-二氫 -l，-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2,6，-二氧代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-1-甲氧基乙基三
甲基硅垸
M.W. 645.71 C33H42Cl2N205Si
以與實(shí)施例15c中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例17a中制備的外 消旋(2，S,3R，4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-異丙烯基-2,3-二氫-2，6，-二氧代螺 [口引哚-3,3'-哌啶]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷(160 mg， 0.3 mmol)與溴-乙酸 叔丁酯和碳酸銫在N,N-二甲基-甲酰胺中反應(yīng)，得到外消旋(2'8，311,4'8)-6-氯-4'-(3-氯苯基)-2'-異丙烯基-2,3-二氫-l'-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2,6'-二 氧代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷，為白色泡沫(產(chǎn)量110 mg， 56%)。實(shí)施例17c
制備中間體外消旋(2，S,3R,4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2'-異丙烯基-2,3-二氫 -l，-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2-氧代-6，-硫代螺[H引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙
基三甲基硅烷
以與實(shí)施例15d中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例17b中制備的外 消旋(2'S,3R,4，S)-6-氯-4'-(3-氯苯基)-2，-異丙烯基-2,3-二氫-l'-[(叔丁氧基 羰基)甲基]-2,6，-二氧代螺[剛哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷(110 mg， 0.17 mmol)與2,4-雙-(4-甲氧基苯基)-l,3-二硫雜-2,4-二磷雜環(huán)丁烷 2,4-二硫化物(Aldrich)在甲苯中，于110 。C反應(yīng)，得到外消旋 (2'S，3R,4'S)-6-氯-4'-(3-氯苯基)-2'-異丙烯基-2,3-二氫-r-[(叔丁氧基羰基) 甲基]-2-氧代-6，-硫代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷，為白色 泡沫(產(chǎn)量70mg， 62%)。
制備中間體外消旋(6，S,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-6，，7，，8，，9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧
—Si~-
/
M.W. 661.77 C33H42Cl2N204SSi
實(shí)施例17d
基乙基三甲基硅烷
63<formula>formula see original document page 64</formula>
M,W. 585.61 C29H34Cl2N403Si
以與實(shí)施例15e中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例17c中制備的外 消旋(2，S，3R，4，S)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，-異丙烯基-2,3-二氫-r-[(叔丁氧基 羰基)甲基]-2-氧代-6，-硫代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷 (70mg， 0.11 mmol)與一水合肼(6g， 2.1 mmol) (Aldrich， 64-65%)在甲醇 (2 ml)中，在密封管中，于120 。C反應(yīng)24 h，得到外消旋(6，S,3R,8'S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-6',7，,8'，9'-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3,7'-(2H-吡啶并[2，l-C][l，2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸， 為白色固體 (產(chǎn)量33mg， 51%)。
實(shí)施例17e
制備外消旋(6，S,3R,8，R)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-6，,7，,8，，9，-四氫螺 [3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮<formula>formula see original document page 64</formula>M.W. 455.35 C23H20Cl2N4O2
以與實(shí)施例16中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例17d中制備的外 消旋(6，S，3R,8，S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-6，，7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺 〖3H-吲哚-3，7'-(2H-吡啶并[2，l-c][l，2，4]三嗪-3，-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅 烷(33mg， 0.056 mmol)與三氟乙酸反應(yīng)，然后與N，N，-二異丙基乙胺在甲M.W. 288.09 C10H9IO2
向2-羥基-5-碘-苯甲醛(16 g， 64.5 mmol) (Aldrich)在N,N-二甲基甲酰 胺(100mL)中的溶液中，加入K2C03(16g， 115 mmo)和烯丙溴(20 g， 165 mmol) (Aldrich)。將反應(yīng)混合物于100 。C攪拌3 h，然后冷卻至室溫，并 且傾倒入水中，用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層合并，用水，鹽水洗滌，用 MgS04干燥，過(guò)濾并且濃縮，得到2-烯丙氧基-5-碘-苯甲醛，為白色固體 (產(chǎn)量18 g， 97%)。
實(shí)施例18b
制備中間體1 -(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-3-三甲基甲硅烷氧基-2-氮雜-1,3-丁
二烯
M.W. 401.32 C15H20INO2Si
醇中，于100 。C反應(yīng)，得到外消旋(6，S,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7'-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三 嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體(21mg， 82%)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C23H2oCl2N402 + H[(M+H)+]計(jì)算值455.1036。 實(shí)測(cè)值455.1036。
實(shí)施例18a 制備中間體2-烯丙氧基-5-碘-苯甲醛以與實(shí)施例lc中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例18a中制備的2-烯丙氧基-5-碘-苯甲醛(19 g， 65 mmol)用作原料以代替5-氟-2-甲基-苯甲 醛，以與1,1,1,3,3,3-六甲基二硅氮垸(11 g， 68mmo1)，正丁基鋰(2.5 M， 17mL， 68mmo1)，氯化三甲基硅烷(7.4 g， 68 mmol)，三乙胺(9.4 g， 92 mmol)和乙酰氯(7.2 g， 92 mmol)反應(yīng)，得到1-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-3-三甲基甲硅烷氧基-2-氮雜-l,3-丁二烯，并且在沒(méi)有進(jìn)一步純化的情況下用 于下一步驟。
制備中間體外消旋(2，R，3R,4，S)-2'-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-6-氯-4'-(3-氯苯 基)-2,3-二氫-2，6，-二氧代螺[B引哚-3，3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸
以與實(shí)施例ld中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例lb中制備的E/Z-6-氯-3-(3-氯苯亞甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1,3-二氫』引哚-2-酮(6 g， 15 mmol)與在實(shí)施例18b中制備的1-(2-烯丙氧基-5_碘-苯基)-3-三甲基甲硅烷氧基-2-氮雜-l，3-丁二烯(26 g， 65mmol)在甲苯(100mL)中 反應(yīng)，得到外消旋(2，R,3R,4，S)-2，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-6-氯-4'-(3-氯苯 基)-2,3-二氫-2,6，-二氧代螺[剛哚-3，3，-哌啶]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷，為 白色泡沫(5g， 44%)
制備中間體外消旋(2'R,3R,4'S)-2，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-l'-[(叔丁氧基 羰基)甲基]-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，3-二氫-2,6，-二氧代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-1-
實(shí)施例18c
M.W. 749.55 C33H35Cl2IN204Si
實(shí)施例18d甲氧基乙基三甲基硅烷
M.W. 863.70 C39H45Cl2IN206Si
以與實(shí)施例le中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例18c中制備的外 消旋(2，R，3R,4，S)-2，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2,3-二氫 -2,6，-二氧代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-1-甲氧基乙基三甲基硅烷(5g， 6.6 mmol) 與溴-乙酸叔丁酯和碳酸銫在N，N-二甲基-甲酰胺中反應(yīng)，得到外消旋 (2，R,3R,fS)-2，-P-烯丙氧基-5-碘-苯基)-r-[(叔丁氧基羰基)甲基]-6-氯 -4，-(3-氯苯基)-2,3-二氫-2,6，-二氧代螺[卩引哚-3,3，-哌啶]-l-甲氧基乙基三甲 基硅焼，為白色泡沫(產(chǎn)量2.8 g， 49%)。
實(shí)施例18e
制備中間體外消旋(2，R,3R,4，S)-2，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-l，-[(叔丁氧基 羰基)甲基]-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，3-二氫-2-二氧代-6，-硫代螺[卩引哚-3,3，-哌
啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸
<formula>formula see original document page 67</formula>以與實(shí)施例lf中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例18d中制備的外消 旋(2，R,3R，4，S)-2，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-l，-[(叔丁氧基羰基)甲基]-6-氯 —4，-(3-氯苯基)-2,3-二氫-2,6，-二氧代螺[^哚-3，3，-哌啶]-1-甲氧基乙基三甲 基硅垸(2.8 g， 3.3 mmol)與2，4-雙-(4-甲氧基苯基)-l,3-二硫雜-2，4-二磷雜 環(huán)丁烷2,4-二硫化物(2g， 5mmol)(Aldrich)在甲苯(50mL)中，于120 。C 反應(yīng)，得到外消旋(2，R,3R,4，S)-2，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-1，-[(叔丁氧基羰 基)甲基]-6-氯-4，-(3-氯苯基)-2，3-二氫-2-二氧代-6，-硫代螺[H引哚-3,3，-哌 啶]-l-甲氧基乙基三甲基硅烷，為白色泡沫(產(chǎn)量1.8g， 62%)。
實(shí)施例18f
制備中間體外消旋(6，R,3R,8，S)-6，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-6-氯-8，-(3-氯苯 基)-6，，7，,8，,9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2，4]三嗪
-3，-酮)]-1-甲氧基乙基三甲基硅垸
飛
M.W, 803.61 C35H37Cl2IN404Si
以與實(shí)施例lg中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例18e中制備的外 消旋(2，R,3R,4，S)-2，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-l，-[(叔丁氧基羰基)甲基]-6-氯_4'—(3-氯苯基)-2,3-二氫-2-二氧代-6，-硫代螺[fl引哚-3，3，-哌啶]-l-甲氧基 乙基三甲基硅烷(1.8 g， 2.0mmol)與一水合肼(8 g， 89 mmol) (Aldrich， 64-65%)在甲醇(20 ml)中，在密封管中，于120 。C反應(yīng)，得到外消旋 (6'R，3R,8，S)-6'-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6，，7，，8，，9，-四氫 -2-氧代螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2，4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙 基三甲基硅烷，為白色固體(產(chǎn)量0.73g， 45%)。M.W. 817.63 C36H39Cl2IN404Si
以與實(shí)施例lh中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例18f中制備的外消 旋(6，R，3R，8，S)-6，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，,7，，8，，9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧 基乙基三甲基硅烷(0.73 g， 0.9 mmol)與LiH (Aldrich)和碘甲垸在N,N-二 甲基-甲酰胺中反應(yīng)，得到外消旋(6^,3&8，8)-6，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-甲基-6，,7，,8，，9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶 并[2,l-c][l,2,4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸，為白色固體(產(chǎn)量 0.66 g， 90%)。
實(shí)施例18g
制備外消旋(6，11,311，8，8)-6，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-甲基-6，，7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2，4]三
嗪)]-2,3，(lH)-二酮
實(shí)施例18g
制備中間體外消旋(6，R,3R,8，S)-6，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-6-氯-8'-(3-氯苯 基)-2，-甲基-6，，7，,8，，9，-四氫-2-氧代螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][1,2,4]
三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸M.W. 687.37 C30H25Cl2IN4O:
以與實(shí)施例li中所述的方法類似的方式，在實(shí)施例18g中制備的 (6，R,3R,8，S)-6，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-甲基 -6，,7，，8，,.9，-四氫-2-氧代螺[311-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2，4]三嗪-3，-酮)]-l-甲氧基乙基三甲基硅垸(0.41 g， 0.5mmol)與三氟乙酸反應(yīng)，接著與 N,N，-二異丙基乙胺在甲醇中反應(yīng)，得到外消旋(6'R，3R，8，S)-6'-(2-烯丙氧基 -5-碘-苯基)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2，-甲基-6，,7，,8，，9，-四氫螺[3H-吲哚 -3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，為白色固體(產(chǎn)量0.31 g，卯％)。
HRMS(ES+) m/z對(duì)于C3。H25C12IN403+H [(M+H)+]計(jì)算值687.0421 。 實(shí)測(cè)值687.0421。
制備外消旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(5-乙炔基-2-羥基-苯基)-2，-甲基-6，,7，,8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2，4]三
向在實(shí)施例18g中制備的外消旋(6'R,3R,8'S)-6'-(2-烯丙氧基-5-碘-苯 基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2'-甲基-6',7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并
實(shí)施例19
嗪)]-2,3，(lH)-二酮
M.W. 545.43 C29H22C12N40[2,1-c][l,2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮(70 mg， 0.1 mmol)在無(wú)水四氫呋喃(14 mL)中的溶液中，加入三甲代甲硅烷基乙炔(20mg， 0.2 mmol) (Alfa)， Cul (39mg， 0.2 mmol) (Aldrich)和三乙胺(21 mg， 0.2 mmol)。在將反應(yīng)混合 物在氮?dú)庀旅摎?0 min后，加入二(三苯膦)二氯化鈀(II) (14 mg， 0.02 mmol)(Strem)，并且在氮?dú)庀?，將反?yīng)混合物于100 。C加熱3 h。將反應(yīng) 混合物冷卻至室溫，并且用水稀釋，用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層合并，用 水，鹽水洗滌，用MgS04干燥，過(guò)濾并且濃縮。
向剩余物中，加入甲醇(2mL)，并且加入NaOH水溶液(1 N， 2ml， 20 mmol)。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢? h。除去溶劑，并且將剩余物用水 稀釋，且用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層合并，用水，鹽水洗滌，用MgS04 干燥，過(guò)濾并且濃縮。剩余物由色譜(EtOAc)純化，得到外消旋 (6'R，3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(5-乙炔基-2-羥基-苯基)-2，-甲基 -6，,7，，8，，9，-四氫螺[311-吲哚-3,7，-(211-吡啶并[2，1-(;][1,2,4]三嗪)]-2,3，(111)-二酮，為灰白色固體(產(chǎn)量21mg， 38%)。
HRMS(ES+) m/z對(duì)于C29H22C12N403+H [(M+H)+]計(jì)算值545.1142。 實(shí)測(cè)值545.1142。
實(shí)施例20
制備外消旋(6'R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-[2-(2,3-二羥基-丙氧基)-5-碘 —苯基)-2，-甲基-6，，7，,8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2,4]三
嗪)]-2，3，(lH)-二酮
/
M.W. 721.38 C30H27Cl2IN4O5
向在實(shí)施例18 g中制備的外消旋(6'R,3R,8'S)-6-氯-8，-(3-氯苯 基)-6'-(2-羥基-5-碘-苯基)-2，-甲基-6，,7',8',9'-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮(118 mg， 0.17 mmol)的溶液中，加 入Os04 (4%在H20中，0.22 g， 0.03 mmol)， N-甲基嗎啉N-氧化物(40 mg， 0.34 mmol) (Aldrich)。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?8 h。將混合物濃縮，并 且將剩余物由色譜(EtOAc: MeOEN9: l)純化，得到外消旋(6，11，311，8，8)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6，-[2-(2,3-二羥基-丙氧基)-5-碘-苯基)-2，-甲基-6，，7',8，，9'-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,1-c][l，2,4]三嗪)]-2,3，(m)-二酮，為白色 固體(產(chǎn)量80mg， 65%)
HRMS(ES+) m/z對(duì)于C3QH27C12IN405+H [(M+H)+]計(jì)算值721.0476。 實(shí)測(cè)值721.0478
制備外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-[2-(2,3-二羥基-丙氧基)-5-乙 炔基-苯基)-2，-甲基-6，,7，,8',9'-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并
向在實(shí)施例20中制備的、為白色固體的外消旋(6%3民8'8)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6，-[2-(2,3-二羥基-丙氧基)-5-碘-苯基)-2'-甲基-6'，7'，8，,9'-四氫螺 [3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮(80 mg， 0.11 mmol)在無(wú)水四氫呋喃(20 mL)中的溶液中，加入三甲代甲硅烷基乙炔 (22 mg， 0.22 mmol) (Alfa)， Cul (42 mg， 0.22 mmol) (Aldrich)，和三乙胺(22 mg， 0.22mmo1)。在氮?dú)庀聦⒎磻?yīng)混合物脫氣10 min后，加入雙(三苯膦) 二氯化鈀(II) (15 mg， 0.02 mmol) (Strem)，并且在氮?dú)庀?，將反?yīng)混合物 于100。C加熱lh。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，且用水稀釋，用乙酸乙酯 萃取。將有機(jī)層合并，用水，鹽水洗滌，用MgS04干燥，過(guò)濾并且濃縮。
向剩余物中，加入甲醇(10mL)，并且加入NaOH水溶液(1 N， 1 ml，
實(shí)施例21[l,2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮
M.W. 619.51 C32H28C12N40510 mmol)。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢? h。除去溶劑，并且將剩余物用水 稀釋，且用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層合并，用水，鹽水洗滌，用MgS04 干燥，過(guò)濾并且濃縮。剩余物用色譜(EtOAc)純化，得到外消旋 (6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-[2-(2,3-二羥基-丙氧基)-5-乙炔基-苯 基)-2，-甲基-6，,7，，8，，9，-四氫螺[3H-n引哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2，4]三 嗪)]-2，3，(lH)-二酮，為灰白色固體(產(chǎn)量51mg， 64%)。
HRMS(ES+)附/z對(duì)于C32H28Cl2N40s+H[(M+H)+]計(jì)算值619.1510。 實(shí)測(cè)值619.1505。
實(shí)施例22
A L 、、,工協(xié)」4 77A
.|外、7|，伯1土1<1\巡
由HTRF (均相時(shí)間分辨熒光)試驗(yàn)，測(cè)量化合物抑制p53和MDM2 蛋白之間相互作用的能力，在HTRF (均相時(shí)間分辨熒光)試驗(yàn)中，重組 GST-標(biāo)記的MDM2結(jié)合到肽上，所述的肽類似于p53的MDM2-相互作用 區(qū)(Lane等)。GST-MDM2蛋白和p53-肽(在其N-末端上生物素?；?的結(jié) 合是由在銪(Eu)-標(biāo)記的抗-GST抗體和鏈酶抗生物素-結(jié)合的別藻藍(lán)蛋白 (APC)之間的FRET (熒光共振能量傳遞)記錄的。
在總?cè)莘e為40 uL，容納有90 nM生物素?；模?60 ng/ml GST-MDM2， 20 nM鏈酶抗生物素-APC (PerkinElmerWallac)， 2 nM Eu-標(biāo)記的抗-GST-抗體(PerkinElmerWallac), 0.2%牛血清清蛋白(BSA)， 1 mM 二硫蘇糖醇(DTT)和20 mM Tris-硼酸鹽鹽水(TBS)緩沖液的黑色平 底384-孔板(Costar)中，如下進(jìn)行測(cè)試將10 uL在反應(yīng)緩沖液中的 GST-MDM2 (640 ng/ml工作溶液)加入到每個(gè)孔中。將10 uL稀釋的化合
物(在反應(yīng)緩沖液中以1: 5稀釋)加入到每個(gè)孔中，通過(guò)振動(dòng)混合。將
20 uL在反應(yīng)緩沖液中的生物素?；痯53肽(180 nM工作溶液)加入到每個(gè) 孔中，并且在振動(dòng)器上混合。于37。C溫育1 h。加入20 uL在含有0.2% BSA 的TBS緩沖液中的鏈酶抗生物素-APC和Eu-抗-GST抗體混合物(6 nM Eu-抗-GST和60 nM鏈酶抗生物素-APC工作溶液)，于室溫振動(dòng)30分鐘， 并且使用能夠TRF的板讀數(shù)器于665禾n 615 nm (Victor 5， Perkin ElmerWallac)讀數(shù)。如果沒(méi)有指定，試劑購(gòu)自Sigma Chemical Co.。于約lOliM的活性。 生物值的實(shí)例如下
實(shí)施例No. IC5q, nM li 0.191 5b 0.1001 7b 0.89 llc 0.293 18g 0.27權(quán)利要求
1.式I化合物 id="icf0001" file="A2008800166850002C1.tif" wi="80" he="65" top= "49" left = "74" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>其中X選自氫，鹵素，氰基，硝基，乙炔基，環(huán)丙基，甲基，乙基，異丙基，甲氧基和乙烯基；R1和R2中的一個(gè)選自低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，取代的低級(jí)鏈烯基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基，并且另一個(gè)是氫；R3和R4中的一個(gè)選自低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，取代的低級(jí)鏈烯基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基，并且另一個(gè)是氫；R選自氫，低級(jí)烷基和取代的低級(jí)烷基，及其藥用鹽和酯。
2.根據(jù)權(quán)利要求l的化合物，其為式II化合物<formula>formula see original document page 3</formula>其中X選自氫，卣素，氰基，硝基，乙炔基，環(huán)丙基，甲基，乙基，異丙基， 甲氧基和乙烯基；R,和R2中的一個(gè)選自低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，取代的低級(jí)鏈烯基，芳基，取代的芳基， 雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)垸基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基，并且另一個(gè)是氫；R3和R4中的一個(gè)選自低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，取代的低級(jí)鏈烯基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基，并且另一個(gè)是氫； R選自氫，低級(jí)烷基和取代的低級(jí)烷基； 及其藥用鹽和酯。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中 X選自氫，卣素，氰基，硝基，乙炔基，環(huán)丙基，甲基，乙基，異丙基，甲氧基和乙烯基，是氫，R3是氫，R2/R4獨(dú)立地選自低級(jí)烷基，取代的低級(jí)垸基，低級(jí)鏈烯基，取代的低級(jí)鏈烯基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜 環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基和取代的環(huán)烯基，并且R選自氫，低級(jí)烷基和取代的低級(jí)垸基。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中x是氯或溴，R4是取代的苯基或取代的雜芳基，其中所述取代的苯基或取代的雜芳基選自并且R2獨(dú)立地選自低級(jí)鏈烯基，取代的低級(jí)鏈烯基，芳基，取代的芳基，雜 芳基，取代的雜芳基，環(huán)烯基和取代的環(huán)烯基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中 X是-C1;和R3是氫； R4是3-氯-苯基；R2是-苯基，其是未取代的或被取代基取代1或2次的，所述的取代 基獨(dú)立地選自鹵素，-OH， -C2.6炔基，-0-C2.8鏈烯基，或-CL8烷基和-0-d—8烷基，其中所述C,.8烷基可以是未取代的或被-OH取代1或2次的，或《2.8鏈烯基；并且R是氫，或Cl8垸基，其是未取代的或被以下基團(tuán)取代的-N-(d.8烷基)2,-0-C"8燒基，-O-C(O)-烷基， -OH,-NH-CXOH^s烷基， -C(O)-OH，-C(0)-NH-d—8烷基，所述烷基是未取代或被-OH取代1或2次的，-C(0)-NH-C3—6環(huán)烷基，-C(0)-NH2，-C(O)-NH-哌啶基，所述哌啶基是未取代的或被-S(0)2-CH3取代的；以及其藥用鹽和酯。
6.根據(jù)權(quán)利要求l的化合物，其選自外消旋(6，R，3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(5-氟-2-甲基苯基)-2，-甲基 -6，，7，，8，，9，-四氫螺[311-吲哚-3,7，-(211-吡啶并[2,1-0|[1,2,4]三嗪)]-2,3，(1印-二酮，手性(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(5-氟-2-甲基苯基)-2，-甲基 -6，,7，,8，,9，-四氫螺[311-吲哚-3,7，-(211-吡啶并[2,1-01[1,2,4]三嗪)]-2,3，(1印-二酮，外消旋(6，R，3R，8'S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6'-(5-氟-2-甲基苯基)-6',7',8',9'-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-2，-甲基-6，,7，,8，,9，-四氫螺[311-吲哚-3,7，-(211-吡啶并[2,1-01[1,2,4]三嗪)]-2,3，(111)-二酮，手性(6'R，3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-2，-甲基 -6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，外消旋(6，R，3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，，8，,9，-四氫螺[3H』引哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，手性(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮，外消旋(6'R，3R，8'S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2'-(3-二甲基氨基丙基)-6'-(l-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，外消旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-甲氧基乙基)-6，-(l-亞甲基-丙 基)-6，,7，，8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][ 1,2,4]三 嗪)]-2,3，(lH)-二酮，禾口外消旋(6，11,311,8，8)-2，-(2-乙酰氧基乙基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三嗪)]-2,3，(m)-二酮。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其選自 外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-羥基乙基)-6，-(l-亞甲基-丙 基)-6，,7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三 嗪)]-2，3，(lH)-二酮，手性(6，R,3R，8，S)-6-氯-8,-(3-氯苯基)-2，-(2-羥基乙基)-6,-(1-亞甲基-丙 基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H- 口引哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三 嗪)]-2,3'(lH)-二酮，外消旋(6，R，3R,8，S)-2，-(2-乙?；被一?-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(l-亞甲 基-丙基)-6，，7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三 嗪)]-2,3，(lH)-二酮，外消旋(6%311,8，8)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-羥基羰基-甲基)-6，-(1-亞甲基-丙基)陽(yáng)6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l，2,4]三 嗪)]-2,3，(lH)-二酮，外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-(2-氟羰基-甲基)-6，-(l-亞甲基-丙 基)-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-卩引哚-3,7，-(2H-卩比啶并[2,l-c][l，2,4]三 嗪)]-2，3'(lH)-二酮，外消旋(6，R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(2-羥基乙基氨基)羰基-甲 基]-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2,1 -c][l ,2,4]三嗪)]-2,3 ，(1H)-二酮，手性(6，R,3R，8，S)陽(yáng)6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(2-羥基乙基氨基)羰基-甲 基]-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7,,8,,9，-四氫螺[3H-吲哚畫(huà)3，7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2,-[(2-環(huán)丙基氨基)羰基-甲 基]-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，，7，，8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并 [2,1-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，手性(6'11,311,8'8)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-2，-[(2-環(huán)丙基氨基)羰基-甲基]-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8',9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三 嗪)]-2,3，(lH)-二酮，和外消旋(6，R,3R，8，S)-2，-(2-氨基羰基-甲基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，，7，，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2，4]三 嗪)]-2,3,(lH)陽(yáng)二酮。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其選自 外消旋(6，11,311，8，8)-2，-(2-氨基羰基-甲基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(1-亞甲基-丙基)-6，,7，,8，，9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l，2，4]三 嗪)〗-2,3，(lH)-二酮，外消旋(6'R,3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2'-[(l-甲磺?；?哌啶-4-基)氨基羰 基-甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，，7',8，,9'-四氫螺[3H-吲哚-3，7'-(2H-吡啶并 [2,l-c][l，2,4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮，外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-[(l-甲磺?；?哌啶-4-基)氨基羰 基—甲基]-6，-(l-亞甲基-丙基)-6，，7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并 [2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2，3，(lH)-二酮，外消旋(6，11,311,8，8)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-2，-甲基二6，,7',8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(m)-二酮，手性(6'R,3R,8，S)-6-氯-8'-(3-氯苯基)-6'-異丙烯基-2，-甲基-6，，7'，8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，外消旋(611，311,8，8)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-異丙烯基-6，,7，,8，,9，-四氫螺[311-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2，4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，外消旋(6'8,311,8，11)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6'-異丙烯基-6，，7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3，7，-(2H-吡啶并[2,l-c][l,2,4]三嗪)]-2,3，(lH)-二酮，外消旋(6，R,3R，8，S)-6，-(2-烯丙氧基-5-碘-苯基)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-2，-甲基-6，，7，，8，,9，-四氫螺[311-吲哚-3,7，-(211-吡啶并[2,1-(:][1,2,4]三嗪)]-2,3，(1印-二酮，外消旋(6，R，3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-(5-乙炔基-2-羥基-苯基)-2，-甲基 -6，,7，，8，,9，-四氫螺[3&吲哚-3,7，-(211-吡啶并[2，1-(:][1,2,4]三嗪)]-2,3，(1印-二酮，外消旋(6，R,3R,8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-[2-(2，3-二羥基-丙氧基)-5-碘-苯 基)-2，-甲基-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H- B引哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l，2,4]三 嗪)]-2，3，(lH)-二酮，禾口外消旋(6，R，3R，8，S)-6-氯-8，-(3-氯苯基)-6，-[2-(2,3-二羥基-丙氧基)-5-乙炔基 —苯基)-2，-甲基-6，,7，,8，,9，-四氫螺[3H-吲哚-3,7，-(2H-吡啶并[2，l-c][l,2，4]三 嗪)〗-2，3，(lH)-二酮。
9. 一種藥物制劑，其包含式II化合物及其藥用鹽和酯和藥用賦形劑<formula>formula see original document page 8</formula>X選自氫，鹵素，氰基，硝基，乙炔基，環(huán)丙基，甲基，乙基，異丙基， 甲氧基和乙烯基，K4和R2中的一個(gè)選自低級(jí)烷基，取代的低級(jí)垸基，低級(jí)鏈烯基，取代的低級(jí)鏈烯基，芳基，取代的芳基， 雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)垸基，取代的環(huán)烷基，環(huán) 烯基，和取代的環(huán)烯基，并且另一個(gè)是氫，R3和R4中的一個(gè)選自低級(jí)垸基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，取代 的低級(jí)鏈烯基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán) 烯基，和取代的環(huán)烯基，并且另一個(gè)是氫， R選自氫，低級(jí)烷基和取代的低級(jí)垸基。
10. 用作藥物的權(quán)利要求1至8中任何一項(xiàng)的化合物。
11. 用作藥物的權(quán)利要求1至8中任何一項(xiàng)的化合物，所述的藥物用于 治療癌癥，特別是實(shí)體瘤，更具體地是乳腺、結(jié)腸、肺和前列腺腫瘤。
12. 權(quán)利要求1至8中任何一項(xiàng)的化合物在制備藥物中的應(yīng)用，所述的藥物用于治療癌癥，特別是實(shí)體瘤，更具體地是乳腺、結(jié)腸、肺和前列腺 腫瘤。
13. 基本上如上所述的新化合物、方法、工藝和應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供式(I)的螺吲哚滿酮衍生物及其藥用鹽和酯，其中X，R₁，R₂，R₃，R₄和R如本文中所述。本發(fā)明的化合物可以用于治療或控制細(xì)胞增殖疾病，特別是腫瘤疾病。
文檔編號(hào)A61P35/00GK101679448SQ200880016685
公開(kāi)日2010年3月24日 申請(qǐng)日期2008年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月23日
發(fā)明者劉進(jìn)軍, 張筑明 申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司