專利名稱：6-(吡咯并吡啶基)嘧啶-2-基胺及其治療癌癥和艾滋病的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及式I化合物及其鹽，并涉及制備權(quán)利要求1-13所述的式I化合物及其可藥用的衍生物、鹽、溶劑合物和立體異構(gòu)體的方法，其特征為 a)將式II的化合物
其中R1表示吲哚保護基， R2、R3和R4具有權(quán)利要求1中表示的含義， 與胍反應(yīng)， 且同時或隨后去除吲哚保護基 或者 b)將式I化合物中的基團R2轉(zhuǎn)化成另一個R2 通過 i)去除氨基保護基， ii)將二酰亞胺裂解得到胺， iii)進行烷基化， 和/或?qū)⑹絀的堿或酸轉(zhuǎn)化為其鹽的一種。
除非另外說明，上下文中的基團R1、R2、R3和R4具有式I所說明的含義。
A表示烷基，其是具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個C原子的直鏈(線形)或支鏈的烷基。A優(yōu)選表示甲基，還可以為乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基，另外還可以為戊基、1-、2-或3-甲基丁基、1，1-、1，2-或2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、己基、1-、2-、3-或4-甲基戊基、1，1-、1，2-、1，3-、2，2-、2，3-或3，3-二甲基丁基、1-或2-乙基丁基、1-乙基-1-甲基丙基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-或1，2，2-三甲基丙基，而且優(yōu)選例如三氟甲基。
A特別優(yōu)選表示具有1、2、3、4、5或6個C原子的烷基，優(yōu)選為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、三氟甲基、五氟乙基或1，1，1-三氟乙基。
A中的一個或兩個CH2基團也可被O或S原子替代，和/或被-CH＝CH-基團替代。因此A還表示例如2-甲氧基乙基。
環(huán)烷基優(yōu)選表示環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基。
Ar表示例如苯基；鄰、間或?qū)妆交?；鄰、間或?qū)σ一交?；鄰、間或?qū)Ρ交?；鄰、間或?qū)Ξ惐交?；鄰、間或?qū)κ宥』交?；鄰、間或?qū)θ谆交?；鄰、間或?qū)Ψ交?；鄰、間或?qū)︿灞交?；鄰、間或?qū)β缺交?；鄰、間或?qū)αu基苯基；鄰、間或?qū)籽趸交?；鄰、間或?qū)谆酋；交秽?、間或?qū)ο趸交?；鄰、間或?qū)Π被交?；鄰、間或?qū)谆被交?；鄰、間或?qū)Χ谆被交秽?、間或?qū)Π被酋；交?；鄰、間或?qū)谆被酋；交?；鄰、間或?qū)︳驶交秽?、間或?qū)︳然交秽?、間或?qū)籽趸驶交秽?、間或?qū)σ已趸驶交?；鄰、間或?qū)σ阴；交?；鄰、間或?qū)柞；交秽彙㈤g或?qū)η杌交?；還優(yōu)選2，3-、2，4-、2，5-、2，6-、3，4-或3，5-二氟苯基；2，3-、2，4-、2，5-、2，6-、3，4-或3，5-二氯苯基；2，3-、2，4-、2，5-、2，6-、3，4-或3，5-二溴苯基；2，3，4-、2，3，5-、2，3，6-、2，4，6-或3，4，5-三氯苯基；對碘苯基；4-氟-3-氯苯基；2-氟-4-溴苯基；2，5-二氟-4-溴苯基或2，5-二甲基-4-氯苯基。
Ar特別優(yōu)選地表示未取代的或被A、NO2、N(R5)2、CN和/或COOR5單、二或三取代的苯基。
不考慮進一步取代，Het表示例如2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噁唑基、2-、4-或5-噻唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、3-或4-吡啶基、2-、4-、5-或6-嘧啶基，另外更優(yōu)選1，2，3-三唑-1-、-4-或-5-基、1，2，4-三唑-1-、-3-或5-基、1-或5-四唑基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，3，4-噻二唑-2-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、3-或4-噠嗪基、吡嗪基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、4-或5-異吲哚基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基、4-、5-、6-或7-苯并2，1，3-噁二唑基、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基、1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-異喹啉基、3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基、5-或6-喹喔啉基、2-、3-、5-、6-、7-或8-2H-苯并-1，4-噁嗪基，另外還優(yōu)選1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基、1，4-苯并二噁烷-6-基、2，1，3-苯并噻二唑-4-或-5-基、2，1，3-苯并噁二唑-5-基。
所述雜環(huán)基團也可以部分地或全部被氫化。因此未取代的Het還表示例如2，3-二氫-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基、2，5-二氫-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基、四氫-2-或-3-呋喃基、1，3-二氧戊環(huán)-4-基、四氫-2-或-3-噻吩基、2，3-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基、2，5-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基、1-、-2-或-3-吡咯烷基、四氫-1-、-2-或-4-咪唑基、2，3-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡唑基、四氫-1-、-3-或-4-吡唑基、1，4-二氫-1-、-2-、-3-或-4-吡啶基、1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-或-6-吡啶基、1-、2-、3-或4-哌啶基、2-、3-或4-嗎啉基、四氫-2-、-3-或-4-吡喃基、1，4-二噁烷基、1，3-二噁烷-2-、-4-或-5-基、六氫-1-、-3-或-4-噠嗪基、六氫-1-、-2-、-4-或-5-嘧啶基、1-、2-或3-哌嗪基、1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-喹啉基、1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-異喹啉基、2-、3-、5-、6-、7-或8-3，4-二氫-2H-苯并-1，4-噁嗪基，另外優(yōu)選2，3-亞甲基二氧基苯基、3，4-亞甲基二氧基苯基、2，3-亞乙基二氧基苯基、3，4-亞乙基二氧基苯基、3，4-(二氟亞甲基二氧基)苯基、2，3-二氫苯并呋喃-5-或-6-基、2，3-(2-氧代亞甲基二氧基)苯基或者3，4-二氫-2H-1，5-苯并二氧雜

-6-或-7-基，另外還優(yōu)選2，3-二氫苯并呋喃基、2，3-二氫-2-氧代呋喃基。
Het更優(yōu)選地表示具有1至3個N和/或O原子的單或雙環(huán)飽和的、不飽和的或芳香雜環(huán)，其為未取代的或被以下基團單或二或三取代A、OH、OA、Hal、CON(R5)2、N(R5)2和/或＝O(羰基氧)； 另外特別優(yōu)選為二氫吡咯基、吡咯烷基、四氫咪唑基、二氫吡唑基、四氫吡唑基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、哌啶基、嗎啉基、六氫噠嗪基、六氫嘧啶基、哌嗪基、1，2，3，4-四氫喹啉基、1，2，3，4-四氫異喹啉基、3，4-二氫苯并-1，4-噁嗪基、2，3-二氫異吲哚基、2，3-二氫吲哚基、噁唑烷基，異噁唑烷基、噁二唑烷基、噻唑烷基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噁唑基，異噁唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、三唑基、四唑基、噻二唑、噠嗪基、吡嗪基、吲哚基、異吲哚基、苯并咪唑基、吲唑基、喹啉基或1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯基，其中每個為未取代的或被以下基團單、二或三取代A、OH、OA、Hal、CON(R5)2、N(R5)2和/或＝O。
Het非常優(yōu)選地表示二氫吡咯基、吡咯烷基、四氫咪唑基、二氫吡唑基、四氫吡唑基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、哌啶基、嗎啉基、六氫噠嗪基、六氫嘧啶基、哌嗪基、1，2，3，4-四氫喹啉基、1，2，3，4-四氫異喹啉基、3，4-二氫苯并-1，4-噁嗪基、2，3-二氫異吲哚基或2，3-二氫吲哚基、吡唑基、吡啶基、呋喃基或異噁唑，其中每個為未取代的或被A、CON(R5)2、N(R5)2或F和/或＝O單、二或三取代。
R1優(yōu)選地表示H或-[C(R5)2]nAr。
R2表示A、-[C(R5)2]nAr、-[C(R5)2]nHet、-[C(R5)2]n環(huán)烷基、-[C(R5)2]nOR5、-[C(R5)2]nN(R5)2或-[C(R5)2]nCOOR5 優(yōu)選為甲基、乙基、丙基、丁基、芐基、苯基、鄰、間或?qū)?甲苯基、鄰、間或?qū)?乙基苯基、鄰、間或?qū)?丙基苯基、鄰、間或?qū)?異丙基苯基、鄰、間或?qū)?丁基苯基、鄰、間或?qū)?叔丁基苯基、鄰、間或?qū)?三氟甲基苯基、4-丙基環(huán)己基、甲氧基甲基、羥基甲基、1，3-二氧代異吲哚-2-基甲基、1，3-二氧代異吲哚-2-基乙基、1，3-二氧代異吲哚-2-基丙基、1，3-二氧代異吲哚-2-基丁基、氨基甲基、氨基乙基、氨基丙基、氨基丁基、二甲基氨基甲基、二甲基氨基丙基、吡咯烷-1-基丙基、哌啶-4-基甲基、1-甲基哌啶-4-基甲基、哌啶-4-基丙基、1-甲基哌啶-4-基甲基、吡咯烷-2-基乙基或3-嗎啉-4-基丙基、3-哌嗪-1-基丙基、氨基苯基、3-羧基丙基、硝基苯基、4-羥基丁基、3-羥基丙基、羥基甲基、2-羧基乙基或3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基。
R3優(yōu)選地表示H、Br、Cl、CN、Ar或Het。
R4優(yōu)選地表示H或A。
R5優(yōu)選地表示H或A。
Hal優(yōu)選地表示F、Cl或Br以及I，特別優(yōu)選F或Cl。
在整個本發(fā)明中，出現(xiàn)一次以上的所有基團可以相同或不同，即相互是獨立的。
式I化合物可具有一個或多個手性中心，且因此可以出現(xiàn)不同的立體異構(gòu)體形式。式I包括所有的這些形式。
相應(yīng)地，本發(fā)明特別涉及式I化合物，其中至少一個所述基團具有上述優(yōu)選含義的一種?；衔锏囊恍﹥?yōu)選的基團可通過以下子式Ia至II表示，它們符合式I，且其中未非常詳細定義的基團具有式I所述的含義，但是其中 在Ia中，R1表示H或-[C(R5)2]nAr； 在Ib中R2表示甲基、乙基、丙基、丁基、芐基、苯基、鄰、間或?qū)?甲苯基、鄰、間或?qū)?乙基苯基、鄰、間或?qū)?丙基苯基、鄰、間或?qū)?異丙基苯基、鄰、間或?qū)?丁基苯基、鄰、間或?qū)?叔丁基苯基、鄰、間或?qū)?三氟甲基苯基、4-丙基環(huán)己基、甲氧基甲基、羥基甲基、1，3-二氧代異吲哚-2-基甲基、1，3-二氧代異吲哚-2-基乙基、1，3-二氧代異吲哚-2-基丙基、1，3-二氧代異吲哚-2-基丁基、氨基甲基、氨基乙基、氨基丙基、氨基丁基、二甲基氨基甲基、二甲基氨基丙基、吡咯烷-1-基丙基、哌啶-4-基甲基、1-甲基哌啶-4-基甲基、哌啶-4-基丙基、1-甲基哌啶-4-基甲基、吡 咯烷-2-基乙基或3-嗎啉-4-基丙基、3-哌嗪-1-基丙基、氨基苯基、3-羧基丙基、硝基苯基、4-羥基丁基、3-羥基丙基、羥基甲基、2-羧基乙基或3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基； 在Ic中R3表示H、Br、Cl、CN、Ar或Het； 在Id中R4表示H或A； 在Ie中R5表示H或A； 在If中A表示具有1-8個C原子的非支鏈或支鏈烷基，其中一個或兩個CH2基團可被氧替換且/或另外1-7個H原子可被F替換； 在Ig中A表示具有1-6個C原子的非支鏈或支鏈烷基，其中一個或兩個CH2基團可被氧替換且/或另外1-7個H原子可被F替換； 在Ih中Ar表示未取代的或被A、NO2、N(R5)2、CN和/或COOR5單、二或三取代的苯基； 在Ii中Het表示未取代的或被A、OH、OA、Hal、CON(R5)2、N(R5)2和/或＝O(羰基氧)單或二或三取代的具有1至3個N和/或O原子的單或雙環(huán)飽和的、不飽和的或芳香雜環(huán)； 在Ij中Het表示二氫吡咯基、吡咯烷基、四氫咪唑基、二氫吡唑基、四氫吡唑基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、哌啶基、嗎啉基、六氫噠嗪基、六氫嘧啶基、哌嗪基、1，2，3，4-四氫喹啉基、1，2，3，4-四氫異喹啉基、3，4-二氫苯并-1，4-噁嗪基、2，3-二氫異吲哚基、2，3-二氫吲哚基、噁唑烷基，異噁唑烷基、噁二唑烷基、噻唑烷基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噁唑基，異噁唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、三唑基、四唑基、噻二唑基、噠嗪基、吡嗪基、吲哚基、異吲哚基、苯并咪唑基、吲唑基、喹啉基或1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯基，其中每個為未取代的或被A、OH、OA、Hal、CON(R5)2、N(R5)2和/或＝O單或二或三取代； 在Ik中Het表示二氫吡咯基、吡咯烷基、四氫咪唑基、二氫吡唑基、四氫吡唑基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、哌啶基、嗎啉基、六氫噠嗪基、六氫嘧啶基、哌嗪基、1，2，3，4-四氫喹啉基、1，2，3，4-四氫異喹啉基、3，4-二氫苯并-1，4-噁嗪基、2，3-二氫異吲哚基或2，3-二氫吲哚基、吡唑基、吡啶基、呋喃基或異噁唑，其中每個為未取代或被A、CON(R5)2、N(R5)2或F和/或＝O單、二或三取代； 在II中R1表示H或-[C(R5)2]nAr， R2表示A、-[C(R5)2]nAr、-[C(R5)2]nHet、-[C(R5)2]n環(huán)烷基、-[C(R5)2]nOR5、-[C(R5)2]nN(R5)2或-[C(R5)2]nCOOR5 -[C(R5)2]nCOOR5 R3表示H、Br、Cl、CN、Ar或Het R4表示H或A， R5表示H或A， A表示具有1-6個C原子的非支鏈或支鏈烷基，其中一個或兩個CH2基團可被氧替換和/或1-7個H可被F替換， Ar表示未取代的或被A、NO2、N(R5)2、CN和/或COOR5單、二、或三取代的苯基， Het表示二氫吡咯基、吡咯烷基、四氫咪唑基、二氫吡唑基、四氫吡唑基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、哌啶基、嗎啉基、六氫噠嗪基、六氫嘧啶基、哌嗪基、1，2，3，4-四氫喹啉基、1，2，3，4-四氫異喹啉基、3，4-二氫苯并-1，4-噁嗪基、2，3-二氫異吲哚`基或2，3-二氫吲哚基、吡唑基、吡啶基、呋喃基或異噁唑基，其中每個為未取代的或被A、CON(R5)2、N(R5)2或F和/或＝O單、二、或三取代 n 表示0、1、2、3或4；及其可藥用衍生物、鹽、溶劑合物、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物。
另外，式I化合物以及用于制備它們的原料可以采用如文獻中所述的本身已知的方法(例如在標準專著中所述的方法，如Houben-Weyl，Methoden der organischen Chemie[有機化學方法]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)，在已知并且適于所述反應(yīng)的反應(yīng)條件下進行制備。也可以采用此處并未更詳細說明的本身已知的變通方法進行制備。
式I化合物可優(yōu)選通過使式II化合物與胍鹽反應(yīng)而獲得，諸如例如碳酸胍。
式II的化合物通常是已知的。當然，如果它們是新的，它們可以通過其本身已知的方法制備。
該反應(yīng)通常在存在酸結(jié)合劑，優(yōu)選有機堿，如DIPEA、三乙胺、二甲基苯胺、吡啶或喹啉的情況下進行。
還可有利地加入堿金屬或堿土金屬氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽或堿金屬或堿土金屬的其它弱酸鹽，優(yōu)選鉀、鈉、鈣或銫的鹽。
根據(jù)所用的條件，反應(yīng)時間為幾分鐘至14天，反應(yīng)溫度在約-15℃和150℃之間，通常在40℃和130℃之間，特別優(yōu)選在約60℃和約110℃之間。
適當?shù)亩栊匀軇闊N類，如己烷、石油醚、苯、甲苯或二甲苯；氯代烴類，如三氯乙烯、1，2-二氯乙烷、四氯化碳、氯仿或二氯甲烷；醇類，例如甲醇、乙醇、異丙醇、正丙醇、正丁醇或叔丁醇；醚類，如乙醚、二異丙醚、四氫呋喃(THF)或二噁烷；乙二醇醚，如乙二醇單甲醚或單乙醚、乙二醇二甲醚(二甘醇二甲醚)；酮類，如丙酮或丁酮；酰胺類，如乙酰胺、二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺(DMF)；腈類，如乙腈；亞砜類，如二甲基亞砜(DMSO)；二硫化碳；羧酸類，如甲酸或乙酸；硝基化合物，如硝基甲烷或硝基苯；酯類，如乙酸乙酯，或所述溶劑的混合物。
特別優(yōu)選的是乙二醇醚類諸如乙二醇單甲醚、THF、二氯甲烷和/或DMF。
優(yōu)選的吲哚保護基團例如是磺?；?保護基團，如甲苯磺?；蚣谆酋；渌Ｗo基團例如BOC。
醚的裂解通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法進行。
醚裂解的標準方法、例如甲基醚的裂解是使用三溴化硼。
氫解可除去的基團、例如芐基醚的裂解，可以例如通過在催化劑(例如貴金屬催化劑如鈀，有利地在支持劑如碳上)存在下用氫處理來裂解。此處適宜的溶劑是上文所述的那些，特別是例如醇類如甲醇或乙醇或者酰胺類如DMF。氫解通常是在約0至100℃的溫度以及在約1至200巴的壓力下進行，優(yōu)選為20-30℃和1-10巴。
酯類可以例如使用乙酸或使用NaOH或KOH水溶液、水/THF或水/二氧雜環(huán)己烷、在溫度0至100℃被皂化。
氮上的烷基化在標準條件下進行，如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。
式I的化合物還可以通過經(jīng)由溶劑分解(特別是水解)或者經(jīng)由氫解從其功能衍生物中被釋放出來而獲得。
溶劑分解或氫解的優(yōu)選起始材料為那些包含相應(yīng)已保護的氨基和/或羥基而不是包含一個或多個游離氨基和/或羥基的物質(zhì)，優(yōu)選那些攜帶氨基保護基團而不是與N原子結(jié)合的H原子的物質(zhì)，例如那些符合式I，但是不包含NH2基團而是包含NHR’基團(其中R′是氨基保護基團，例如BOC或CBZ)的物質(zhì)。
還優(yōu)選攜帶羥基保護基團而不是羥基的H原子的起始材料，例如那些符合式I，但是不包含羥基-苯基而是包含R”O(jiān)-苯基(其中R”是羥基保護基團)的物質(zhì)。
在起始材料分子中可能存在許多相同或不同的被保護的氨基和/或羥基。如果存在的保護基團彼此不同，則其在許多情況中可被選擇性裂解。
術(shù)語“氨基保護基團”是已知的術(shù)語并且是指適于保護(阻斷)氨基不參加化學反應(yīng)、但是在已經(jīng)在該分子其它地方進行所需化學反應(yīng)后易于除去的基團。典型的該類基團特別是未被取代或被取代的?；?、芳基、芳烷氧基甲基或芳烷基。因為氨基保護基團在所需反應(yīng)(或反應(yīng)序列)后被除去，因此其類型和大小并不關(guān)鍵；但是，優(yōu)選具有1-20個，特別是1-8個碳原子的基團。術(shù)語“?；痹诒景l(fā)明方法中在最廣義上被理解。其包括得自脂族、芳族脂族、芳族或雜環(huán)羧酸或磺酸的?；?，并且特別是烷氧基羰基、芳氧基羰基并且尤其是芳烷氧基羰基。該類?；膶嵗型轷；缫阴；?、丙?；投□；环纪轷；绫揭阴；环减；绫郊柞；图妆郊柞；?；芳氧基烷酰基如POA；烷氧基羰基如甲氧基羰基、乙氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、BOC和2-碘乙氧基羰基；芳烷氧基羰基如CBZ(“芐氧羰基”)、4-甲氧基芐氧基羰基、FMOC；芳基磺酰基如Mtr、Pbf和Pmc。優(yōu)選的氨基保護基團是BOC和Mtr，此外還優(yōu)選CBZ、Fmoc、芐基和乙酰基。
術(shù)語“羥基保護基團”同樣是已知的術(shù)語并且是指適于保護羥基不進行化學反應(yīng)，但是在已經(jīng)在該分子其它地方進行所需化學反應(yīng)后易于除去的基團。典型的該類基團有上述未被取代或被取代的芳基、芳烷基或?；送膺€可以是烷基。因為其在所需化學反應(yīng)或反應(yīng)序列后被除去，因此其性質(zhì)和大小并不關(guān)鍵；優(yōu)選具有1-20個，特別是1-10個碳原子的基團。羥基保護基團的實例特別是叔-丁氧基羰基、芐基、對-硝基苯甲?；妆交酋；?、叔-丁基和乙酰基，其中特別優(yōu)選芐基和叔-丁基。天門冬氨酸和谷氨酸中的COOH基團優(yōu)選地以其叔-丁酯的形式被保護(例如Asp(OBut))。
根據(jù)所用的保護基團，可以用強酸，有利地用TFA或高氯酸將式I的化合物從其功能衍生物中釋放出來，但是也可以使用其它強無機酸，如鹽酸或硫酸，強有機羧酸，如三氯乙酸或磺酸，如苯磺酸或?qū)妆交撬帷？纱嬖诹硗獾亩栊匀軇?，但是其不總是必需的。適宜的惰性溶劑優(yōu)選地是有機酸，例如羧酸，如乙酸、醚類，如四氫呋喃或二噁烷、酰胺類，如DMF、鹵代烴類，如二氯甲烷，還可以是醇類，如甲醇、乙醇或異丙醇、以及水。此外，還可使用上述溶劑的混合物。TFA優(yōu)選地在不加入其它溶劑的情況下過量使用，高氯酸優(yōu)選地以比例為9∶1的乙酸和70％高氯酸混合物的形式使用。裂解的反應(yīng)溫度有利地為約0至約50℃，優(yōu)選地為15至30℃(室溫)。
BOC、OBut、Pbf、Pmc和Mtr基團可以例如用TFA在二氯甲烷中裂解或用大約3至5N HCl的二噁烷溶液在15-30℃下裂解，F(xiàn)MOC基團可以用大約5至50％二甲胺、二乙胺或哌啶在DMF中的溶液在15-30℃下裂解。
可氫解除去的保護基團(例如CBZ或芐基)例如可以通過用氫在存在催化劑(例如貴金屬催化劑，例如鈀，有利地位于支撐物，如碳上)的情況下進行處理而被除去。在這里，適宜的溶劑是上面所示的溶劑，特別是例如醇類，如甲醇或乙醇，或酰胺類，如DMF。氫解通常在約0至100℃的溫度和約1至200巴的壓力，優(yōu)選20-30℃和1-10巴下進行。CBZ基團的氫解例如可在5至10％Pd/C上在甲醇中或者用甲酸銨(代替氫)在Pd/C上在甲醇/DMF中在20-30℃下良好進行。
藥用的鹽和其它形式 所述本發(fā)明的化合物可以以它們最終的非鹽形式應(yīng)用。另一方面，本發(fā)明也包括可藥用鹽形式的這些化合物的用途，所述鹽可以通過本領(lǐng)域已知的方法衍生自多種有機和無機酸和堿。大部分式I化合物的可藥用鹽形式可以通過常規(guī)方法制備。如果式I化合物包含羧基基團，它的適當?shù)柠}之一可以通過將該化合物與適當?shù)膲A反應(yīng)得到相應(yīng)的堿加成鹽來形成。此類堿為例如堿金屬氫氧化物，包括氫氧化鉀、氫氧化鈉和氫氧化鋰；堿土金屬氫氧化物，如氫氧化鋇和氫氧化鈣；堿金屬醇鹽，例如乙醇鉀和丙醇鈉；以及多種有機堿，如哌啶、二乙醇胺和N-甲基谷氨酰胺。也包括式I化合物的鋁鹽。在某些式I化合物的情況中，酸加成鹽可以通過將這些化合物用可藥用的有機和無機酸處理來形成，所述酸例如氫鹵酸，如鹽酸、氫溴酸或氫碘酸；其它無機酸和它們相應(yīng)的鹽，如硫酸鹽、硝酸鹽或磷酸鹽等；以及烷基-和單芳基磺酸鹽，如乙磺酸鹽、甲苯磺酸鹽和苯磺酸鹽；以及其它有機酸和它們相應(yīng)的鹽，如乙酸鹽、三氟乙酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、抗壞血酸鹽等。因此，式I化合物的可藥用酸加成鹽包括下列乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、精氨酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸氫鹽、溴化物、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、辛酸鹽、氯化物、氯苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、磷酸二氫鹽、二硝基苯甲酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、半乳糖酸鹽(得自半乳糖二酸)、半乳糖醛酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、甘油磷酸鹽、半琥珀酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、馬尿酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、碘化物、羥乙基磺酸鹽、異丁酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、扁桃酸鹽、偏磷酸鹽、甲磺酸鹽、甲基苯甲酸鹽、磷酸一氫鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、苯基乙酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、膦酸鹽、鄰苯二甲酸鹽，但本發(fā)明不限于這些鹽。
另外，本發(fā)明的化合物的堿鹽包括鋁、銨、鈣、銅、鐵(III)、鐵(II)、鋰、鎂、錳(III)、錳(II)、鉀、鈉和鋅鹽，但本發(fā)明不限于這些鹽。對于上文所述的鹽，優(yōu)選為銨鹽；堿金屬鈉和鉀的鹽，以及堿土金屬鈣和鎂的鹽。衍生自可藥用的有機無毒堿的式I化合物的鹽包括伯胺、仲胺和叔胺的鹽，被取代的胺的鹽，也包括天然存在的被取代的胺，環(huán)胺和堿性的離子交換樹脂的鹽，例如精氨酸、甜菜堿、咖啡因、氯普魯卡因、膽堿、N，N′-二芐基乙二胺(芐星)、二環(huán)己基胺、二乙醇胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、組氨酸、海巴明(hydrabamine)、異丙基胺、利多卡因、賴氨酸、葡甲胺、N-甲基-D-葡糖胺、嗎啉、哌嗪、哌啶、聚胺樹脂、普魯卡因、嘌呤、可可堿、三乙醇胺、三乙胺、三甲胺、三丙胺和三(羥甲基)甲胺(氨基丁三醇)的鹽，但這并不用于限制本發(fā)明。
包含堿性含氮基團的本發(fā)明的化合物可以用如下物質(zhì)將其季銨化(C1-C4)烷基鹵化物，例如甲基、乙基、異丙基和叔丁基氯化物、溴化物和碘化物；二(C1-C4)烷基硫酸酯，例如二甲基、二乙基和二戊基硫酸酯；(C10-C18)烷基鹵化物，例如癸基、十二烷基、月桂基、肉豆蔻基和十八烷基氯化物、溴化物和碘化物；以及芳基(C1-C4)烷基鹵化物，例如芐基氯化物和苯乙基溴化物。水溶性和油溶性的本發(fā)明的化合物均可使用此類鹽制備。
優(yōu)選的上文所述的藥用鹽包括乙酸鹽、三氟乙酸鹽、苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、葡糖酸鹽、半琥珀酸鹽、馬尿酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、羥乙基磺酸鹽、扁桃酸鹽、葡甲胺、硝酸鹽、油酸鹽、膦酸鹽、新戊酸鹽、磷酸鈉、硬脂酸鹽、硫酸鹽、磺基水楊酸鹽、酒石酸鹽、硫代蘋果酸鹽、甲苯磺酸鹽和氨基丁三醇，但這并不用于限制本發(fā)明。
堿性的式I化合物的酸加成鹽可以以常規(guī)方法，通過將游離堿形式與足量的所需酸反應(yīng)來形成鹽。游離堿可以以常規(guī)方法，通過將該鹽形式與堿反應(yīng)并且將游離堿分離而再生。游離堿形式在某些方面不同于它們相應(yīng)的鹽形式，如某些物理性質(zhì)(例如在極性溶劑中的溶解度)；然而，就本發(fā)明的目的而言，鹽與它們各自的游離堿形式是相當?shù)摹?br> 如前文所述，可藥用的式I化合物的堿加成鹽可以由金屬或胺形成，例如堿金屬和堿土金屬或有機胺。優(yōu)選的金屬為鈉、鉀、鎂和鈣。優(yōu)選的有機胺為N，N’-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺和普魯卡因。
酸性的本發(fā)明的化合物的堿加成鹽可以以常規(guī)方法，通過將游離酸形式與足量的所需堿反應(yīng)來形成鹽。游離酸可以以常規(guī)方法，通過將該鹽形式與酸反應(yīng)并且將游離酸分離而再生。游離酸形式在某些方面不同于它們相應(yīng)的鹽形式，如某些物理性質(zhì)(例如在極性溶劑中的溶解度)；然而，就本發(fā)明的目的而言，鹽與它們各自的游離酸形式是相當?shù)摹?br> 如果本發(fā)明的化合物包含一個以上能形成此類可藥用鹽的基團，那么本發(fā)明也包含多鹽。典型的多鹽形式包括例如二酒石酸鹽、二乙酸鹽、二富馬酸鹽、二葡甲胺、二磷酸鹽、二鈉鹽和三鹽酸鹽，但這并不用于限制本發(fā)明。
如上文所述，可知本文中的術(shù)語“可藥用鹽”是指包含一種鹽形式的式I化合物的活性成分，特別是如果這種鹽形式使活性成分的藥代動力學性質(zhì)與之前使用的活性成分的游離形式或活性成分的任何其它鹽形式相比有所改善時?；钚猿煞值目伤幱名}形式可以為該活性成分首次提供之前沒有的所需藥代動力學性質(zhì)，并且甚至可以對該活性成分關(guān)于其體內(nèi)治療效果方面的藥效學具有積極的作用。
另外，本發(fā)明涉及包含至少一種式I化合物和/或其可藥用的衍生物、溶劑合物和立體異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，以及任選的賦形劑和/或輔劑。
藥物制劑可以以劑量單位的形式施用，該劑量單位包含每劑量單位預定量的活性成分。該劑量單位可以包含例如0.5mg-1g、優(yōu)選1mg-700mg、特別優(yōu)選5mg-100mg的本發(fā)明化合物，具體劑量取決于所治療的疾病、施用方式和患者的年齡、體重和狀況，或者藥物制劑可以以劑量單位的形式施用，該劑量單位包含每劑量單位預定量的活性成分。優(yōu)選的劑量單位制劑為包含上文所述日劑量或分份劑量或其相應(yīng)部分的活性成分的那些制劑。另外，此類藥物制劑可以應(yīng)用藥學領(lǐng)域所熟知的方法來制備。
藥物制劑可以通過任何所需的適當方法施用，例如通過口服(包括口腔或舌下)、直腸、鼻、局部(包括口腔、舌下或經(jīng)皮)、陰道或非胃腸(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)或真皮內(nèi))方式施用。此類制劑可以應(yīng)用所有藥學領(lǐng)域已知的方法通過例如將活性成分與賦形劑或輔劑混合來制備。
適用于口服施用的藥物制劑可以以分開的單位施用，如膠囊劑或片劑；散劑或顆粒劑；在水或非水液體中的溶液劑或混懸劑；可食用的泡沫劑或泡沫食物；或者水包油液體乳劑或油包水液體乳劑。
因此，例如，在以片劑或膠囊劑形式口服施用的情況下，可以將活性成分與口服、無毒并且可藥用的惰性賦形劑如乙醇、甘油、水等混合。散劑可以通過將化合物粉碎成適當?shù)募毞勰┎⑵渑c以類似方法粉碎的藥物賦形劑混合來制備，所述賦形劑是例如可食用的碳水化合物，如淀粉或甘露醇。也可以應(yīng)用矯味劑、防腐劑、分散劑和染料等。
膠囊劑可以通過制備如上所述的粉末混合物并且將其填入成形的明膠殼中來制備。助流劑和潤滑劑如高分散硅酸、滑石粉、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或固體形式的聚乙二醇，可以在填充操作前加入到粉末混合物中。同樣可以加入崩解劑或增溶劑例如瓊脂、碳酸鈣或碳酸鈉，以便在服用膠囊劑后提高藥物的利用度。
另外，如果需要或必須，也可以向混合物中摻入適當?shù)恼澈蟿?、潤滑劑和崩解劑以及染料。適當?shù)恼澈蟿┌ǖ矸?、明膠、天然糖(如葡萄糖或β-乳糖、用玉米制備的甜味劑)、天然的和合成的膠(如阿拉伯膠、黃蓍膠或海藻酸鈉)、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟等。這些劑型中所用的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括但不限于淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠等。片劑通過例如制備粉末混合物、制粒或干法壓制混合物、加入潤滑劑和崩解劑并壓制全部混合物以得到片劑來配制。粉末混合物可以通過如上文所述將以適當方法粉碎的化合物與稀釋劑或基質(zhì)混合，并任選地與粘合劑(例如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯烷酮)、溶解阻滯劑(如石蠟)、吸收加速劑(如季鹽)和/或吸附劑(如膨潤土、高嶺土或磷酸二鈣)混合來制備。粉末混合物可以通過用粘合劑(如糖漿、淀粉漿、阿拉伯膠漿或纖維素或聚合物材料的溶液)將其潤濕并且擠壓過篩來制粒。作為制粒的替代方案，粉末混合物可以通過壓片機操作，壓制成形狀不一的團塊，該團塊粉碎后形成顆粒。顆粒可以通過加入硬脂酸、硬脂酸鹽、滑石粉或礦物油來潤滑，以避免其粘附于片劑沖模。然后壓制已潤滑的混合物以得到片劑。本發(fā)明的化合物也可以與自由流動的惰性賦形劑混合，然后不經(jīng)制?；蚋煞▔褐撇襟E直接壓制得到片劑?？梢源嬖谕该鞯幕虿煌该鞯谋Ｗo層，該保護層包括紫膠密封層、糖或聚合物材料層和蠟拋光層?？梢韵蜻@些包衣劑中加入染料以便區(qū)分不同的劑量單位。
口服的液體例如溶液劑、糖漿劑和酏劑，可以以劑量單位形式制備，以使其包含預定量的化合物。糖漿劑可以通過將化合物溶于含有合適矯味劑的水溶液中來制備，而酏劑可以應(yīng)用無毒醇介質(zhì)制備。混懸劑可以通過將化合物分散于無毒介質(zhì)中來制備。也可以加入增溶劑和乳化劑(如乙氧基化的異十八烷醇和聚氧乙烯山梨醇醚)、防腐劑、矯味添加劑(如薄荷油或天然的甜味劑或糖精)或者其它的人工甜味劑等。
如果需要，口服施用的劑量單位制劑可以裝入微囊中。該制劑也可以以延長或延緩釋放的方式制備，例如通過包衣或?qū)⑽⒘２牧习裼诰酆衔?、蠟等中?br> 式I化合物及其鹽、溶劑合物以及有生理學功能的衍生物也可以以脂質(zhì)體傳遞系統(tǒng)的形式施用，例如小單室脂質(zhì)體、大單室脂質(zhì)體和多復層脂質(zhì)體。脂質(zhì)體可以由各種磷脂例如膽固醇、硬脂胺或磷脂酰膽堿形成。
式I化合物及其鹽、溶劑合物和有生理學功能的衍生物可以用與該化合物分子偶聯(lián)的單克隆抗體作為單一載體來傳遞?；衔镆部梢耘c作為靶向藥物載體的可溶性聚合物偶聯(lián)。此類聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯酰氨基苯酚、聚羥乙基天冬氨酰氨基苯酚或聚氧乙烯聚賴氨酸，其可以被棕櫚?；〈Ａ硗?，化合物還可以與一類適合獲得藥物控釋的可生物降解的聚合物偶聯(lián)，該聚合物是例如聚乳酸、聚-ε-己內(nèi)酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二羥基吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝膠的交聯(lián)或兩親的嵌段共聚物。
適于經(jīng)皮施用的藥物制劑可以以用于長時間緊密接觸受體表皮的獨立硬膏劑的形式施用。因此，例如活性成分可以從硬膏劑通過如Pharmaceutical Research，3(6)，318(1986)中所述的離子電滲療法傳遞。
適于局部施用的藥用化合物可以配制為軟膏劑、乳膏劑、混懸劑、洗劑、散劑、溶液劑、糊劑、凝膠劑、噴霧劑、氣霧劑或油劑。
對于眼或其它外部組織例如口腔和皮膚的治療而言，制劑優(yōu)選以局部軟膏劑或乳膏劑的形式來應(yīng)用。在制劑為軟膏劑的情況下，活性成分可以與石蠟或易與水混溶的軟膏劑基質(zhì)共同應(yīng)用?；蛘?，活性成分可以用水包油型乳膏劑基質(zhì)或油包水型乳膏劑基質(zhì)配制成乳膏劑。
適于局部應(yīng)用于眼部的藥物制劑包括滴眼劑，其中活性成分溶于或混懸于合適載體中，特別是水性溶劑中。
適于局部應(yīng)用于口腔的藥物制劑包括錠劑、軟錠劑和漱口劑。
適于直腸施用的藥物制劑可以以栓劑或灌腸劑的形式施用。
適于鼻腔施用的藥物制劑(其中載體物質(zhì)為固體)包括具有粒徑例如20-500微米范圍內(nèi)的粗粉劑，其以鼻吸的方式施用，即通過鼻道從接近鼻腔的裝有粉末的容器內(nèi)快速吸入。用液體作為載體物質(zhì)的適于以鼻噴霧劑或滴鼻劑的形式施用的制劑包括活性成分的水或油溶液。
適于吸入施用的藥物制劑包括細顆粒的粉末或噴霧，其可以通過多種類型的具有氣霧劑、噴霧器或吹入器的加壓分散器來產(chǎn)生。
適于陰道施用的藥物制劑可以以陰道栓劑、陰道塞、乳膏劑、凝膠劑、糊劑、泡沫劑或噴霧制劑施用。
適于胃腸外施用的藥物制劑包括含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和溶質(zhì)的水性和非水無菌注射液，通過所述溶質(zhì)使該制劑與被治療的患者的血液等張；以及水性和非水無菌混懸液，其可以包含助懸介質(zhì)和增稠劑。這些制劑可以以單劑量或多劑量的容器進行施用，例如密封的安瓿和小瓶，并存貯于冷凍干燥(凍干)狀態(tài)下，從而僅需在臨用之前加入無菌液體載體，例如注射用水。依照處方制備的注射溶液和混懸液可以由無菌粉末、顆粒和片劑制備。
不言而喻，除了上文所特別指出的組分外，對于特定類型的制劑而言，制劑中也可以包含本領(lǐng)域常用的其它物質(zhì)；因此，例如適于口服施用的制劑可以包含矯味劑。
式I化合物的治療有效量取決于多種因素，包括例如動物的年齡和體重、需要治療的具體病癥及其嚴重性、制劑的性質(zhì)以及施用方法，并且最終由主治醫(yī)生或獸醫(yī)確定。然而，本發(fā)明的化合物用于治療腫瘤生長(例如結(jié)腸或乳腺癌)的有效量，通常為每日0.1-100mg/kg受體(哺乳動物)體重，特別是每日1-10mg/kg體重。因此，對于體重為70kg的成年哺乳動物而言，每日的實際量通常為70-700mg，其中該劑量可以作為單劑量每日施用，或者通常以一系列的部分劑量(如2、3、4、5或6次)每日施用，以使總的日劑量不變。其鹽或溶劑合物或有生理學功能的衍生物的有效量可以確定為本發(fā)明化合物本身的有效量的分數(shù)?？梢酝茢噙m于上述其它病癥的治療的類似劑量。
本發(fā)明還涉及包含至少一種式I化合物和/或其可藥用的衍生物、溶劑合物和立體異構(gòu)體(包括其所有比例的混合物)以及至少一種其他藥物活性成分的藥物。
本發(fā)明也涉及藥盒，該藥盒包括單獨包裝的 (a)有效量的式I化合物和/或其可藥用的衍生物、溶劑合物和立體異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物， 以及 (b)有效量的其他藥物活性成分。
所述藥盒包括適當?shù)娜萜?，如盒、單獨的瓶、袋或安瓿。該藥盒可以包括例如單獨的安瓿，每個安瓿包含有效量的式I化合物和/或其可藥用的衍生物、溶劑合物和立體異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物， 以及有效量的溶解或凍干形式的其他藥物活性成分。
用途 本發(fā)明的化合物作為藥物活性成分適合用于哺乳動物尤其是人類以治療和控制癌癥疾病。
本發(fā)明包括式I化合物和/或其生理學可接受的鹽和溶劑合物用于制備治療或預防癌癥的藥物的應(yīng)用。所治療的癌癥優(yōu)選選自腦癌、泌尿生殖道癌癥、淋巴系統(tǒng)癌、胃癌、喉癌和肺癌腸癌。另一組優(yōu)選的癌癥類型是單核細胞白血病、肺腺癌、小細胞肺癌、胰腺癌、成膠質(zhì)細胞瘤和乳腺癌。
還包括式I化合物和/或生理學可接受的鹽及其溶劑合物在制備用于治療和/或控制哺乳動物中腫瘤誘發(fā)的疾病的藥物中的用途，其中在此方法中，治療有效量的本發(fā)明化合物被施用于有此治療需要的患病哺乳動物。該治療量根據(jù)具體疾病而改變，且可由本領(lǐng)域技術(shù)人員無需過多努力即可確定。
特別優(yōu)選的是治療疾病的用途，其中該疾病是實體瘤。
實體瘤優(yōu)選地選自下組腫瘤鱗狀上皮、膀胱、胃、腎、頭頸、食道、宮頸、甲狀腺、腸、肝、腦、前列腺、生殖泌尿道、淋巴系統(tǒng)、胃、喉和/或肺。
實體瘤還優(yōu)選地選自肺腺癌、小細胞肺癌、胰腺癌、膠質(zhì)母細胞瘤、結(jié)腸癌和乳癌。
還優(yōu)選治療血液和免疫系統(tǒng)腫瘤的用途，優(yōu)選治療選自以下腫瘤的用途急性髓樣白血病、慢性髓樣白血病、急性淋巴細胞性白血病和/或慢性淋巴細胞性白血病。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明化合物治療骨病的用途，其中該骨病產(chǎn)生于骨肉瘤、骨關(guān)節(jié)炎和佝僂病。
式I化合物還可與其它公知治療劑同時施用，所述其它公知治療劑是針對它們對待治療病癥的特定有用性而選擇。
本發(fā)明化合物還適合于與已知抗癌劑組合。這些已知的抗癌劑包括下列雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類視黃醇受體調(diào)節(jié)劑、細胞毒性劑、抗增殖劑、異戊二烯基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和其它血管生成抑制劑。本發(fā)明化合物特別適合與放射治療同時施用。
“雌激素受體調(diào)節(jié)劑”是指干擾或抑制雌激素與受體結(jié)合的化合物，無論機理如何。雌激素受體調(diào)節(jié)劑的實例包括但不限于他莫昔芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY 117081、托瑞米芬、氟維司群、2，2-二甲基丙酸4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基苯酯、4，4′-二羥基二苯酮-2，4-二硝基苯基腙和SH646。
“雄激素受體調(diào)節(jié)劑”是指干擾或抑制雄激素類物質(zhì)與受體結(jié)合的化合物，無論其機理如何。雄激素受體調(diào)節(jié)劑的實例包括非那雄胺和其它5α-還原酶抑制劑、尼魯米特、氟他胺、比卡魯胺、利阿唑和醋酸阿比特龍。
“類視色素受體調(diào)節(jié)劑”是指干擾或抑制類視色素類物質(zhì)與受體結(jié)合的化合物，無論其機理如何。這類類視色素受體調(diào)節(jié)劑的實例包括貝沙羅汀、維甲酸、13-順式-視黃酸、9-順式-視黃酸、α-二氟甲基鳥氨酸、ILX23-7553、反式-N-(4′-羥基苯基)視黃酰胺和N-4-羧基苯基視黃酰胺。
“細胞毒藥物”是指主要通過直接作用于細胞功能而導致細胞死亡或者抑制或干擾細胞有絲分裂的化合物，包括烷化劑、腫瘤壞死因子、嵌入劑、微管蛋白抑制劑和拓撲異構(gòu)酶抑制劑。
細胞毒藥物的實例包括但不限于替拉扎明(triapazimine)、色替納弗(sertenef)、惡液質(zhì)素、異環(huán)磷酰胺、他索納明、氯尼達明、卡鉑、六甲密胺、潑尼莫司汀、二溴衛(wèi)矛醇、雷莫司汀、福莫司汀、奈達鉑、奧沙利鉑、替莫唑胺、庚鉑(heptaplatin)、雌莫司汀、甲苯磺酸英丙舒凡、曲磷胺、尼莫司汀、二溴螺氯銨、嘌嘧替派、洛鉑、沙鉑、甲基絲裂霉素(profiromycin)、順鉑、伊羅夫文、右旋異環(huán)磷酰胺(dexifosfamide)、順式-胺二氯(2-甲基吡啶)鉑、芐基鳥嘌呤、葡磷酰胺、GPX100、(反式，反式，反式)雙-mu-(己烷-1，6-二胺)-mu[二胺鉑(II)]雙[二胺(氯)鉑(II)]四氯化物、diarisidinylspermine、三氧化二砷、1-(11-十二烷基氨基-10-羥基十一烷基)-3，7-二甲基黃嘌呤、佐柔比星、伊達比星、柔紅霉素、比生群、米托蒽醌、吡柔比星、吡萘非特、戊柔比星、氨柔比星、抗瘤酮、3′-脫氨基-3′-嗎啉代-13-去氧-10-羥基洋紅霉素、annamycin、加柔比星、依利奈法德、MEN10755和4-脫甲氧基-3-脫氨基-3-吖丙啶基-4-甲基磺酰基柔紅霉素(參見WO00/50032)。
微管蛋白抑制劑的實例包括紫杉醇、硫酸長春地辛、3′，4′-二脫氫-4′-脫氧-8′-去甲長春堿、多西他賽(docetaxol)、根霉素、多拉司他汀、羥乙基磺酸米伏布林、auristatin、西馬多丁、RPR109881、BMS184476、長春氟寧、cryptophycin、2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脫水長春堿(anhydrovinblastine)、N，N-二甲基-L-纈氨酰-L-纈氨酰-N-甲基-L-纈氨酰-L-脯氨酰-L-脯氨酸-叔-丁基酰胺、TDX258和BMS188797。
拓撲異構(gòu)酶抑制劑的一些實例有拓撲替康、hycaptamine、伊立替康、盧比替康、6-乙氧基丙?；?3′，4′-O-外亞芐基教酒菌素、9-甲氧基-N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-kl]吖啶-2-(6H)丙胺、1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氫-9-羥基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]吡喃并[3′，4′b，7]吲嗪并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)-二酮、勒托替康、7-[2-(N-異丙基氨基)乙基]-(20S)喜樹堿、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索布佐生、2′-二甲氨基-2′-脫氧依托泊苷、GL331、N-[2-(二甲氨基)乙基]-9-羥基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-甲酰胺、asulacrine、(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-羥基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氫呋喃并(3′，4′6，7)萘并(2，3-d)-1，3-間二氧雜環(huán)戊烯-6-酮、2，3-(亞甲二氧基)-5-甲基-7-羥基-8-甲氧基苯并[c]菲啶鎓、6，9-雙[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]異喹啉-5，10-二酮、5-(3-氨基丙基氨基)-7，10-二羥基-2-(2-羥基乙氨基甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2(二乙氨基)乙氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻噸-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲基氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺、6-[[2-(二甲氨基)乙基]氨基]-3-羥基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮和地美司鈉。
“抗增殖劑”包括反義RNA和DNA寡核苷酸如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001和抗代謝物如依諾他濱、卡莫氟、喃氟啶、噴司他丁、去氧氟尿苷、三甲曲沙、氟達拉濱、卡培他濱、加洛他濱、阿糖胞苷十八烷基磷酸鈉(cytarabine ocfosfate)、法司替濱鈉水合物(fosteabine sodium hydrate)、雷替曲塞、paltitrexid、乙嘧替氟、噻唑呋林、地西他濱、諾拉曲塞、培美曲塞、nelzarabine、2′-脫氧-2′-亞甲基胞苷、2′-氟亞甲基-2′-脫氧胞苷、N-[5-(2，3-二氫苯并呋喃基)磺酰基]-N′-(3，4-二氯苯基)脲、N6-[4-脫氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四二烯?；鵠甘氨酰氨基]-L-甘油基-B-L-甘露庚糖(mannohepto)吡喃糖基]腺嘌呤、aplidine、海鞘素(ecteinascidin)、曲沙他濱、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8-四氫-3H-嘧啶并[5，4-b]-1，4-噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩?；?L-谷氨酸、氨基蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿拉諾新、11-乙酰基-8-(氨基甲酰氧基甲基)-4-甲?；?6-甲氧基-14-氧雜-1，11-二氮雜四環(huán)(7.4.1.0.0)十四-2，4，6-三烯-9-基乙酸酯、八氫吲嗪三醇、洛美曲索、右雷佐生、甲硫氨酸酶、2′-氰基-2′-脫氧-N4-棕櫚酰基-1-B-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶和3-氨基吡啶-2-甲醛氨硫脲?！翱乖鲋硠边€包括針對生長因子的沒有列入“血管發(fā)生抑制劑”的單克隆抗體如曲妥單抗和腫瘤抑制基因如p53，其可以經(jīng)由重組病毒介導的基因轉(zhuǎn)移來遞送(例如，參見美國專利6,069,134)。
藥理抑制劑對體外腫瘤細胞的增殖/存活作用的證據(jù) 1.0背景 在本試驗描述中，描述了活性成分對腫瘤細胞增殖/腫瘤細胞存活的抑制作用。
將細胞以適宜的細胞密度播種到微量滴定板(96-孔模式)中，以濃度系列形式加入測試物質(zhì)。在含血清的介質(zhì)中培養(yǎng)另外4天后，可通過AlamarBlue測試系統(tǒng)的方式確定腫瘤細胞增殖/腫瘤細胞存活。
2.0試驗操作 2.1細胞培養(yǎng) 例如商購可得的結(jié)腸癌細胞系、卵巢細胞系、前列腺細胞系或乳腺細胞系等。
將細胞在介質(zhì)中培養(yǎng)。間隔數(shù)天后，借助胰蛋白酶溶液將細胞從培養(yǎng)皿中分離，再以適宜的稀釋度播種到新鮮介質(zhì)中。將細胞在37℃和10％CO2處培養(yǎng)。
2.2.細胞播種 使用多通道移液管，將180μl體積培養(yǎng)基中的確定數(shù)目細胞(例如2000個細胞)每培養(yǎng)物/孔播種到微量滴定板(96孔細胞培養(yǎng)板)中。接著將細胞在CO2培養(yǎng)箱(37℃和10％CO2)中培養(yǎng)。
2.3.添加測試物質(zhì) 將測試物質(zhì)溶解在例如DMSO中，接著用細胞培養(yǎng)介質(zhì)制成相應(yīng)的濃度(如果需要，以稀釋系列)?？梢愿鶕?jù)活性成分的效能以及所需的濃度范圍來調(diào)整稀釋步驟。將細胞培養(yǎng)介質(zhì)以相應(yīng)的濃度加至測試物質(zhì)中。向細胞中添加測試物質(zhì)可以在播種細胞的同一天進行。為此，在每一情況下，將來自預稀釋板中的20μl物質(zhì)溶液加至培養(yǎng)物/孔中。在37℃和10％CO2下將細胞培養(yǎng)另外4天。
2.4.顯色反應(yīng)的測定 在每一情況下，將20μl的Alamar Blue試劑加入每孔中，在CO2培養(yǎng)箱(37℃和10％CO2)中將微量滴定板孵育例如另外7小時。在具有熒光過濾器的讀數(shù)器中以540nm波長測定這些板?？稍跍y定前即刻將板輕輕振搖。
3.評價 從全部其它吸收值中減去介質(zhì)對照(未使用細胞和測試物質(zhì))的吸收值。將對照(無測試物質(zhì)的細胞)設(shè)定為100％，全部其它吸收值設(shè)定為其相對值(例如對照的％) 計算
IC50值(50％抑制)借助統(tǒng)計程序例如RSI測定。
本發(fā)明化合物的IC50數(shù)據(jù)顯示于表1。
4.0PDK1抑制試驗 試驗批在384孔/微量板的閃板系統(tǒng)中進行。
在每種情況下，每孔50μl的傳統(tǒng)試驗溶液中包含PDK1樣品His6-PDK1(Δ1-50)(3.4nM)、PDK1底物生物素-bA-bA-KTFCGTPEYLAPEVRREPRILSEEEQEMFRDFDYIADWC(400nM)、4μM ATP(0.2μCi的33P-ATP/孔)和試驗物質(zhì)，在30℃下孵育60min。在相應(yīng)的濃度下使用試驗物質(zhì)(如果需要可系列稀釋)。對照在無試驗物質(zhì)下進行。使用標準方法停止反應(yīng)并清洗。激酶的活性通過合并的放射活性在多功能同位素/發(fā)光測定儀中進行測定。為了測定非特異性激酶反應(yīng)(空白值)，試驗批在100nM星孢菌素存在下進行。
5.0評價 空白(在星孢菌素存在下未使用試驗物質(zhì))的放射性(每分鐘衰減)數(shù)值從全部其他放射性數(shù)值中扣除。將對照(未加試驗物質(zhì)的激酶活性)設(shè)定為100％，且所有其他放射性數(shù)值(扣除空白值以后)以與之關(guān)系表示(例如對照的％)。
計算

IC50值(50％抑制)借助統(tǒng)計程序例如RSI測定。本發(fā)明化合物的IC50數(shù)據(jù)顯示于表1。

APCI-MS(大氣壓化學電離-質(zhì)譜)(M+H)+。
HPLC梯度系統(tǒng) 柱ChromolithPerformance RP-18e(Merck KGaA，Cat.1.02129.0001) 洗脫液 洗脫液A0.1M NaH2PO4水溶液 洗脫液B乙腈+10％水 流速4ml/min 梯度0min 1％B 1min 1％B 7min 99％B 8min 99％B 實施例1 4-丁基-6-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基胺(″A1″)的制備與以下方案類似地進行
1.1將526mg(0.75mmol)的雙(三苯基膦)氯化鈀(II)和57.2mg(0.30mmol)的碘化銅(I)加至5.16g(15.0mmol)的3-碘代吡咯并[2，3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯在100ml四氫呋喃溶液中，在高壓釜中將一氧化碳通入到該溶液中。然后加入1.85g(22.5mmol)的1-己炔和1.52g(15mmol)的三乙胺。在高壓釜中在1個大氣壓的一氧化碳下攪拌反應(yīng)混合物48小時。反應(yīng)混合物用飽和氯化鈉溶液洗滌，水相用二氯甲烷萃取。合并的有機相用硫酸鈉干燥并揮干。殘留物在硅膠柱上用石油醚/乙酸乙酯作為洗脫劑進行色譜分離，得到無色油狀的3-庚-2-炔?；量┎2，3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯；ESI 327。
1.2將278mg(2.0mmol)的碳酸鈉加至314mg(0.96mmol)的3-庚-2-炔?；量┎2，3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯和130mg(0.72mmol)的碳酸胍在2ml的乙二醇單甲醚的溶液中，并將混合物在沸騰下加熱24小時。冷卻后，混合物在水及乙酸乙酯之間分配。有機相用硫酸鈉干燥，揮發(fā)，殘留物用制備型HPLC進行色譜分離，得到無色固體狀的4-丁基-6-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基胺(″A1″)；ESI269； 1H NMR(DMSO-d6)δ[ppm]0.92(t，J＝7.3Hz，3H)，1.35(sextet，J＝7.3Hz，2H)，1.66(quintet，J＝7.3Hz，2H)，2.49(t，J＝7.3Hz，2H)，6.35(s，2H)，6.97(s，1H)，7.17(dd，J1＝8.0Hz，J2＝4.5Hz，1H)，8.27(dd，J1＝4.5Hz，J2＝1Hz，1H)，8.30(d，J＝3Hz，1H)，8.90(dd，J1＝4.5Hz，J2＝8Hz，J2＝1Hz，1H)，12.1(bs，1H)。
類似地獲得下列的化合物


實施例2 4-乙基-6-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基胺(″A5″)的制備與以下方案類似地進行
2.1將5.6g(42.0mmol)的三氯化鋁加至1.0g(8.47mmol)吡咯并[2，3-b]吡啶在100ml二氯甲烷的溶液中，混合物在室溫下攪拌2h。然后將溶解在二氯甲烷中的52ml(0.2M，10.09mmol)的戊-2-炔基酰氯緩慢滴加至反應(yīng)溶液中。將混合物再在室溫下攪拌16h。飽和碳酸氫鈉溶液加至反應(yīng)混合物中直至中性，抽濾除去鋁鹽沉淀物。分離水相并用二氯甲烷萃取兩次。合并的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鎂干燥并揮干。殘留物無需進一步純化用于下一步反應(yīng)。得到無色油狀的1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)戊-2-炔-1-酮(74％純度)；ESI199。
2.2將2.1g(15.12mmol)的碳酸鉀加至600mg(3.03mmol)的(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)戊-2-炔-1-酮和660mg(3.66mmol)的碳酸胍在10ml的乙二醇單甲醚溶液中，將混合物在沸騰下加熱4小時。冷卻后，混合物在水與乙酸乙酯之間分配。有機相用硫酸鈉干燥，揮干，殘留物使用制備型HPLC進行色譜分離，得到無色固體狀的4-乙基-6-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基胺(″A5″)；ESI240； 1H NMR(DMSO-d6)δ[ppm]1.22(t，J＝7.56Hz，3H)，2.50(dq，J1＝4.0Hz，J2＝1Hz，2H)，6.38(s，2H)，6.97(s，1H)，7.17(dd，J1＝8.14Hz，J2＝4.68Hz，1H)，8.27(dd，J1＝4.9Hz，J2＝1.73Hz，1H)，8.32(d，J＝2.89Hz，1H)，8.91(dd，J1＝7.95Hz，J2＝1.56Hz，1H)，12.12(bs，1H)。
類似地獲得下列的化合物



實施例3 4-(1-芐基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)-6-丁基嘧啶-2-基胺(″A7″)的制備與以下方案類似地進行
3.1將1.04g(5.00mmol)的N-芐基-7-氮雜吲哚在氮氣下溶解在25ml的1，2-二甲氧基乙烷中并冷卻至0℃。然后在0℃下滴加0.44ml(5.00mmol)的草酰氯，在沸騰下加熱反應(yīng)混合物2小時。然后相繼加入35mg(0.05mmol)的雙(三苯基膦)氯化鈀(II)、10mg(0.05mmol)的碘化銅(I)、0.59ml(5.00mmo l)的1-己炔和1.38ml(10.0mmol)的三乙胺，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時。反應(yīng)混合物用飽和氯化鈉溶液稀釋并用20ml二氯甲烷萃取。合并的有機相用硫酸鈉干燥并揮干。殘留物在硅膠柱上用石油醚/乙酸乙酯進行色譜分離得到橙黃色油狀的1-(1-芐基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)庚-2-炔-1-酮；ESI 317。
3.2與實施例1類似地進行，使用碳酸胍環(huán)合得到4-(1-芐基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)-6-丁基嘧啶-2-基胺(″A7″)(無色結(jié)晶；ESI358)。
類似地獲得下列的化合物

實施例4 4-羥基甲基-6-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基胺(″A11″)的制備與以下方案類似地進行
類似地獲得下列的化合物
實施例5 2-[2-氨基-6-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基甲基]異吲哚-1，3-二酮(″A12″)、4-氨基甲基-6-(吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基胺(″A15)和4-(N，N-二甲基氨基甲基)-6-(吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基胺(″A18″)的制備與以下方案類似地進行
類似地獲得下列的化合物

實施例6 4-(吡咯烷-1-基丙基)-6-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基胺(″A20″)的制備與以下方案類似地進行
實施例7 4-(哌啶-4-基甲基)-6-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基胺(″A21″)和4-(1-甲基哌啶-4-基甲基)-6-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基胺(″A22″)的制備與以下方案類似地進行
中間體4-丙-2-炔基哌啶-1-甲酸叔丁酯的制備是按照WO00/59503(第215頁)中的描述進行。
類似地獲得下列的化合物

實施例8 4-乙基-6-{5-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基}嘧啶-2-基胺的制備按照以下方案進行
8.1將1.00g(5.0mmol)的5-溴-7-氮雜吲哚、2.00g(9.1mmol)的1-甲基吡唑-4-硼酸頻哪醇酯、300mg(0.26mmol)的Pd[(PPh3)4和9ml的Na2CO3(以2M溶液加入)在12ml的DMF中的混懸液在120℃下在微波條件下加熱30min。將反應(yīng)混合物濾過，并將濾液揮干。殘留物在硅膠柱上用二氯甲烷/甲醇作為洗脫劑進行純化，得到黃色固體狀的5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶，ESI 199。
8.2將1.125g(4.4mmol)的碘在16ml DMF中的溶液在RT下緩慢滴加至901mg(4.4mmol)的5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶和620mg(11.1mmol)的KOH在12ml DMF中的混懸液中。當?shù)渭咏Y(jié)束時，混合物在RT下再攪拌30min。接下來將反應(yīng)混合物傾至300ml冰冷的飽和亞硫酸鈉溶液中。抽濾出黃色沉淀，并用10ml冰水洗滌。將過濾的殘留物干燥，得到褐色結(jié)晶狀的3-碘-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶，ESI 325。
8.3將0.3ml(2.28mmol)的三乙胺和9mg(0.07mmol)的4-(二甲基氨基)吡啶加至238mg(0.736mmol)的3-碘-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶在2ml的二氯甲烷中的溶液中。0.158ml(0783mmol)的二碳酸二叔丁酯在2.5ml的二氯甲烷中的溶液隨后滴加至反應(yīng)溶液中。混合物在RT下攪拌16h。反應(yīng)混合物用5ml的飽和亞硫酸鈉溶液萃取兩次并用水萃取一次。合并的有機相用MgSO4干燥，分離固體，并真空除去溶劑。殘留物在硅膠柱上用環(huán)己烷/乙酸乙酯作為洗脫劑分離，得到棕色凝膠狀物質(zhì)3-碘-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡咯并[2，3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯，ESI 425。
8.4將69mg(0.10mmol)的雙(三苯基膦)氯化鈀(II)和19mg(0.10mmol)的碘化銅(I)加至417mg(0.9mmol)的5-甲基吡唑-3-碘代吡咯并[2，3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯在7.5ml的四氫呋喃溶液中。在高壓釜中將一氧化碳通入該溶液中。然后加入315mg(0.145mmol)的2-戊-4-炔基異吲哚-1，3-二酮和0.137ml(0.925mmol)的三乙胺。反應(yīng)混合物在高壓釜中在5巴的一氧化碳壓力下攪拌4天。反應(yīng)混合物真空揮干，殘留物用制備型HPLC純化，得到黃色固體狀的2-{6-[5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基]-6-氧代己-4-炔基}異吲哚-1，3-二酮；ESI 438。
8.5將0.92ml(6.7mmol)的三乙胺加至116mg(0.265mmol)的2-{6-[5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基]-6-氧代己-4-炔基}異吲哚-1，3-二酮和70mg(0.39mmol)的碳酸胍在4ml的乙二醇單甲醚中的溶液中，并將混合物在沸騰下加熱6小時。冷卻后，混合物揮干，將殘留物用制備型HPLC純化，得到棕色固體狀的2-(3-{2-氨基-6-[5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基]嘧啶-4-基}丙基)異吲哚-1，3-二酮；ESI 479，EMD 1183586。
8.6將0.003ml(0.06mmol)的氫氧化肼鎓在RT下加至29mg(0.06mmol)的2-(3-{2-氨基-6-[5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基]嘧啶-4-基}丙基)異吲哚-1，3-二酮在0.5ml甲醇中的溶液中。該反應(yīng)溶液在60℃下微波加熱5min。反應(yīng)混合物真空揮干，殘留物用制備型HPLC純化，得到黃色固體狀的4-(3-氨基丙基)-6-[5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基]嘧啶-2-基胺，ESI 349。
類似地獲得下列的化合物
實施例9 4-乙基-6-[5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基]嘧啶-2-基胺的制備按照以下方案進行
EMD 1126600的制備與實施例2類似地進行。
將50mg(0.157mmol)的4-(5-溴-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)-6-乙基嘧啶-2-基胺、56mg(0.282mmol)的甲基吡唑-4-硼酸頻哪醇酯、9mg(0.008mmol)的四(三苯基膦)鈀(0)和0.45ml的2M Na2CO3溶液(0.900mmol)在0.6ml的DMF中的混懸液在120℃下微波加熱30min。將反應(yīng)混合物濾過，濾餅用MeOH洗滌，濾液真空揮干。殘留物用制備型HPLC純化，得到無色固體狀的4-乙基-6-[5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基]嘧啶-2-基胺，ESI 320。
類似地獲得下列的化合物






表1 腫瘤細胞增殖作用/活力的抑制作用/PDK1的抑制作用 本發(fā)明化合物的IC50 IC5010nM-1μM＝A 1μM-10μM＝B ＞10μM＝C 下列實施例涉及藥物 實施例A注射小瓶 用2N的鹽酸將100g式I的活性成分和5g磷酸氫二鈉在3L重蒸水中的溶液調(diào)節(jié)至pH 6.5，無菌過濾，轉(zhuǎn)移至注射小瓶內(nèi)，在無菌條件下凍干并在無菌條件下密封。每個注射小瓶含有5mg活性成分。
實施例B栓劑 將20g式I的活性成分與100g大豆卵磷脂和1400g可可脂的混合物融化，倒入模具中并使之冷卻。每個栓劑含有20mg活性成分。
實施例C溶液劑 通過將1g式I的活性成分、9.38g的NaH2PO4·2H2O、28.48g的Na2HPO4·12H2O和0.1g的苯扎氯銨溶于940ml重蒸水中來制備溶液劑。將pH調(diào)至6.8，將該溶液配制到1L并通過輻射消毒。該溶液可以用作滴眼液。
實施例D軟膏劑 在無菌條件下將500mg式I的活性成分與99.5g凡士林混合。
實施例E片劑 將1kg式I的活性成分、4kg乳糖、1.2kg土豆淀粉、0.2kg滑石粉和0.1kg硬脂酸鎂的混合物按照常規(guī)方法壓制獲得片劑，按此種方法制備的片劑每片包含10mg活性成分。
實施例F糖錠劑 按照類似于實施例E的方法壓制片劑并隨后按照常規(guī)方法用蔗糖、土豆淀粉、滑石粉、西黃蓍膠和染色劑的包衣劑進行包衣。
實施例G膠囊劑 將2kg式I的活性成分按照常規(guī)方法裝入硬明膠膠囊中，按此種方法制備的每粒膠囊包含20mg活性成分。
實施例H安瓿劑 將1kg式I的活性成分在60L重蒸水中的溶液進行無菌過濾，轉(zhuǎn)移至安瓿中，在無菌條件下凍干并在無菌條件下密封。每個安瓿包含10mg活性成分。
權(quán)利要求
1.式I化合物
其中
R1表示H、A或-[C(R5)2]nAr，
R2表示A、-[C(R5)2]nAr、-[C(R5)2]nHet、-[C(R5)2]n環(huán)烷基、-[C(R5)2]nOR5、-[C(R5)2]nN(R5)2或-[C(R5)2]nCOOR5，
R3表示H、A、Hal、CN、-[C(R5)2]nAr、-[C(R5)2]nHet或-[C(R5)2]n環(huán)烷基或-[C(R5)2]nN(R5)2，
R4表示H、A、-[C(R5)2]nAr、-[C(R5)2]nHet或-[C(R5)2]n環(huán)烷基，
R5表示H或有1-6個C原子的烷基，
A表示具有1-10個C原子的非支鏈或支鏈烷基，其中一個或兩個CH2基團可被O或S原子和/或被-CH＝CH-基團替換，且/或另外1-7個H原子可被F替換，
環(huán)烷基表示具有3-7個C原子的環(huán)狀烷基，其可另外被具有1-6個C原子的烷基取代，
Hal表示F、Cl、Br或I，
Ar表示未取代的或被以下基團單、二或三取代的苯基Hal、A、OR5、N(R5)2、NO2、CN、COOR5、CON(R5)2、NR5COA、NR5SO2A、COR5、SO2N(R5)2和/或S(O)pA，
Het表示具有1至4個N和/或O和/或S原子的單或雙環(huán)飽和、不飽和或芳香雜環(huán)，其是未取代的或被以下基團單、二或三取代Hal、A、OR5、N(R5)2、NO2、CN、COOR5、CON(R5)2、NR5COA、NR5SO2A、COR5、SO2NR5、S(O)pA和/或＝O(羰基氧)，
n表示0、1、2、3或4，
p表示0、1或2，
及其可藥用衍生物、溶劑合物、鹽、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其以所有比率的混合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中
R1表示H或-[C(R5)2]nAr，
及其可藥用衍生物、溶劑合物、鹽、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其以所有比率的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中
R3表示H、Br、Cl、CN、Ar或Het，
及其可藥用衍生物、溶劑合物、鹽、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其以所有比率的混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3的化合物，其中
R4表示H或A，
及其可藥用衍生物、溶劑合物、鹽、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其以所有比率的混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中的一項或多項的化合物，其中
R5表示H或A，
及其可藥用衍生物、溶劑合物、鹽、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其以所有比率的混合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中的一項或多項的化合物，其中
A表示具有1-8個C原子的非支鏈或支鏈烷基，其中一個或兩個CH2基團可被O替換，且/或另外1-7個H原子可被F替換，
及其可藥用衍生物、溶劑合物、鹽、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其以所有比率的混合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中的一項或多項的化合物，其中
A表示具有1-6個C原子的非支鏈或支鏈烷基，其中一個或兩個CH2基團可被O替換，且/或另外1-7個H原子可被F替換，
及其可藥用衍生物、溶劑合物、鹽、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其以所有比率的混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中的一項或多項的化合物，其中
Ar表示未取代的或被A、NO2、N(R5)2、CN和/或COOR5單、二、或三取代的苯基，
及其可藥用衍生物、溶劑合物、鹽、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其以所有比率的混合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中的一項或多項的化合物，其中
Het表示具有1至3個N和/或O原子的單或雙環(huán)飽和的、不飽和的或芳香雜環(huán)，其為未取代的或被以下基團單、二或三取代A、OH、OA、Hal、CON(R5)2、N(R5)2和/或＝O(羰基氧)，
及其可藥用衍生物、溶劑合物、鹽、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其以所有比率的混合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中的一項或多項的化合物，其中
Het表示二氫吡咯基、吡咯烷基、四氫咪唑基、二氫吡唑基、四氫吡唑基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、哌啶基、嗎啉基、六氫噠嗪基、六氫嘧啶基、哌嗪基、1，2，3，4-四氫喹啉基、1，2，3，4-四氫異喹啉基、3，4-二氫苯并-1，4-噁嗪基、2，3-二氫異吲哚基、2，3-二氫吲哚基、噁唑烷基，異噁唑烷基、噁二唑烷基、噻唑烷基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噁唑基，異噁唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、三唑基、四唑基、噻二唑基、噠嗪基、吡嗪基、吲哚基、異吲哚基、苯并咪唑基、吲唑基、喹啉基或1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯基，其中每個為未取代的或被A、OH、OA、Hal、CON(R5)2、N(R5)2和/或＝O單或二或三取代，
及其可藥用衍生物、溶劑合物、鹽、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其以所有比率的混合物。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-10中的一項或多項的化合物，其中
Het表示二氫吡咯基、吡咯烷基、四氫咪唑基、二氫吡唑基、四氫吡唑基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、哌啶基、嗎啉基、六氫噠嗪基、六氫嘧啶基、哌嗪基、1，2，3，4-四氫喹啉基、1，2，3，4-四氫異喹啉基、3，4-二氫苯并-1，4-噁嗪基、2，3-二氫異吲哚基或2，3-二氫吲哚基、吡唑基、吡啶基、呋喃基或異噁唑基，其中每個為未取代的或被A、CON(R5)2、N(R5)2或F和/或＝O單、二、或三取代，
及其可藥用衍生物、溶劑合物、鹽、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其以所有比率的混合物。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-11中的一項或多項的化合物，其中
R1表示H或-[C(R5)2]nAr，
R2表示A、-[C(R5)2]nAr、-[C(R5)2]nHet、-[C(R5)2]n環(huán)烷基、-[C(R5)2]nOR5、-[C(R5)2]nN(R5)2或-[C(R5)2]nCOOR5
R3表示H、Br、Cl、CN、Ar或Het，
R4表示H或A，
R5表示H或A，
A表示具有1-6個C原子的非支鏈或支鏈烷基，其中一個或兩個CH2基團可被氧替換和/或1-7個H可被F替換，
Ar表示未取代的或被A、NO2、N(R5)2、CN和/或COOR5單、二、或三取代的苯基，
Het表示二氫吡咯基、吡咯烷基、四氫咪唑基、二氫吡唑基、四氫吡唑基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、哌啶基、嗎啉基、六氫噠嗪基、六氫嘧啶基、哌嗪基、1，2，3，4-四氫喹啉基、1，2，3，4-四氫異喹啉基、3，4-二氫苯并-1，4-噁嗪基、2，3-二氫異吲哚基、2，3-二氫吲哚基、吡唑基、吡啶基、呋喃基或異噁唑基，其中每個為未取代的或被A、CON(R5)2、N(R5)2或F和/或＝O單、二、或三取代，
N表示0、1、2、3或4，
及其可藥用衍生物、溶劑合物、鹽、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其選自
及其可藥用衍生物、溶劑合物、鹽、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物。
14.制備根據(jù)權(quán)利要求1-13的式I化合物及其可藥用的衍生物、鹽、溶劑合物、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體的方法，其特征為
a)將式II的化合物
其中R1表示吲哚保護基，
R2、R3和R4具有權(quán)利要求1中表示的含義，
與胍反應(yīng)，
且同時或隨后去除吲哚保護基
或者
b)將式I化合物中的基團R2轉(zhuǎn)化成另一個R2
通過
iv)去除氨基保護基，
v)將二酰亞胺裂解得到胺，
vi)進行烷基化，
和/或?qū)⑹絀的堿或酸轉(zhuǎn)化為其鹽的一種。
15.藥物，其包含至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-13的式I化合物和/或其可藥用衍生物、鹽、溶劑合物、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其以任何比率的混合物，以及任選的賦形劑和/或輔劑。
16.根據(jù)權(quán)利要求1-13的化合物及其可藥用衍生物、鹽、溶劑合物、互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括其以任何比率的混合物在制備用于治療腫瘤、腫瘤生長、腫瘤轉(zhuǎn)移和/或AIDS的藥物中的用途。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的用途，其中該腫瘤起源于以下的腫瘤鱗狀上皮、膀胱、胃、腎、頭頸、食道、宮頸、甲狀腺、腸、肝、腦、前列腺、生殖泌尿道、淋巴系統(tǒng)、胃、喉和/或肺。
18.根據(jù)權(quán)利要求16的用途，其中該腫瘤起源于單核細胞性白血病、肺腺癌、小細胞肺癌、胰腺癌、結(jié)腸癌、膠質(zhì)母細胞瘤和/或乳癌。
19.根據(jù)權(quán)利要求16的用途，其中該腫瘤是血液和免疫系統(tǒng)腫瘤。
20.根據(jù)權(quán)利要求16的用途，其中該腫瘤起源于急性髓樣白血病、慢性髓樣白血病、急性淋巴細胞性白血病和/或慢性淋巴細胞性白血病。
21.根據(jù)權(quán)利要求1-13的式I化合物和/或其生理學可接受的鹽和溶劑合物在制備用于治療腫瘤的藥物中的用途，其中治療有效量的式I化合物與下列化合物組合施用1)雌激素受體調(diào)節(jié)劑、2)雄激素受體調(diào)節(jié)劑、3)類視黃醇受體調(diào)節(jié)劑、4)細胞毒藥物、5)抗增殖劑、6)異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、7)HMG-CoA還原酶抑制劑、8)HIV蛋白酶抑制劑、9)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和10)其它血管生成抑制劑。
22.根據(jù)權(quán)利要求1-13的式I化合物和/或其生理學可接受的鹽和溶劑合物在制備用于治療腫瘤的藥物中的用途，其中治療有效量的式I化合物與放射治療和下列化合物組合施用1)雌激素受體調(diào)節(jié)劑、2)雄激素受體調(diào)節(jié)劑、3)類視黃醇受體調(diào)節(jié)劑、4)細胞毒藥物、5)抗增殖劑、6)異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、7)HMG-CoA還原酶抑制劑、8)HIV蛋白酶抑制劑、9)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和10)其它血管生成抑制劑。
全文摘要
式(I)化合物，其中R1、R2、R3、R4和R5具有權(quán)利要求1所述含義，是細胞增殖/細胞存活抑制劑，且可用于治療腫瘤。
文檔編號A61P25/00GK101679425SQ200880019710
公開日2010年3月24日 申請日期2008年5月23日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月21日
發(fā)明者D·多施, M·武赫雷爾, L·T·布格多夫, C·西倫貝格, C·埃斯達爾, T·J·J·穆勒, E·莫庫爾 申請人:默克專利有限公司