專利名稱：拮抗tsh受體的四氫喹啉化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有TSH受體拮抗劑活性的化合物，特別是四氫喹啉衍生物及其在治 療和預(yù)防TSH受體應(yīng)答疾病中的應(yīng)用和藥物組合物和包含它的試劑盒。
背景技術(shù)：
促甲狀腺素或甲狀腺剌激激素(TSH)在調(diào)節(jié)代謝和發(fā)育中起重要作用。TSH在促 甲狀腺素釋放激素的影響下從垂體前葉釋放。它靶向甲狀腺以剌激甲狀腺激素類三碘甲狀 腺氨酸和甲狀腺素的釋放和甲狀腺生長(zhǎng)。TSH的作用由特異性G蛋白偶合受體介導(dǎo)，該受體 優(yōu)先與導(dǎo)致腺苷酸環(huán)化酶活化的Gs蛋白偶合。這種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑主要負(fù)責(zé)產(chǎn)生甲狀腺激 素類和甲狀腺細(xì)胞增殖(Krohn等(2005) Endocrine Rev. 26， 504-524)。
甲狀腺上的TSH受體還直接涉及格雷夫斯病的發(fā)病機(jī)制和病理生理學(xué)。格雷夫 斯病的特征在于甲狀腺超剌激作為剌激循環(huán)TSH受體的持續(xù)活化該受體的免疫球蛋白類 (TSI)的結(jié)果(Gerding等(2000)Clin. Endocrinol. 52， 267-271) 。TSI還直接參與格雷夫斯 眼病和與格雷夫斯病相關(guān)的脛骨前皮膚病的發(fā)病機(jī)制和病理生理學(xué)，因?yàn)門SH受體分別存 在于這些患者眼眶組織和受侵害的皮膚區(qū)域中(Gerding等(2000)Clin. Endocrinol. 52， 267-271 ;Da聽rie等(2002)Eur. J. Endocrinol. 146,35-38)。此外，TSH受體在毒性和非 毒性結(jié)節(jié)性甲狀腺腫中起關(guān)鍵作用。在(毒性)結(jié)節(jié)性甲狀腺腫中，甲狀腺含有自主功能 性甲狀腺結(jié)節(jié)，它們分泌過量的甲狀腺激素作為TSH受體突變的結(jié)果，這些TSH受體的突 變賦予它們具有顯著增加的cAMP水平的組成型活性(Krohn等(2005)Endocrine Rev. 26， 504-524)。 阻斷TSH受體或抑制由TSH-或TSI-介導(dǎo)的受體剌激后誘導(dǎo)的、或作為TSH受體的 組成型活性突變結(jié)果的信號(hào)傳導(dǎo)會(huì)抑制甲狀腺激素分泌和甲狀腺細(xì)胞增殖。低分子量TSH 受體拮抗劑由此可以用于治療或預(yù)防甲狀腺功能亢進(jìn)，格雷夫斯病，結(jié)節(jié)性甲狀腺腫，格雷 夫斯眼病和格雷夫斯_相關(guān)脛骨前皮膚病。此外，低分子量TSH受體拮抗劑可以用于預(yù)防 甲狀腺癌的殘留物或轉(zhuǎn)移灶的生長(zhǎng)剌激，認(rèn)為它是由TSH受體的(過度)剌激促進(jìn)的。在 更一般的意義上，TSH受體拮抗劑可以用于預(yù)防或治療所有那些其中TSH受體(過度)活 化起作用的疾病。 四氫喹啉衍生物化合物描述在W02003/004028，W02004/056779和W02004/056780
中。這些化合物可以用于調(diào)節(jié)生育。 文獻(xiàn)中報(bào)告的FSH受體調(diào)節(jié)劑對(duì)FSH受體具有高度特異性。Yanof sky等 (2006， J. Biol. Chem. 281，13226-13233)和Pelletier等(2005， Bioorg. & Med. Chem. 13， 5986-5995)證實(shí)低納摩爾有效的具有噻唑烷酮骨架的L麗FSH受體激動(dòng)劑既不是TSH受體 拮抗劑，也不是TSH受體激動(dòng)劑。另外，(雙)磺酸，(雙)苯甲酰胺類化合物已經(jīng)被鑒定為 FSH受體拮抗劑，但它們顯示沒有或幾乎沒有抑制TSH受體活性的能力(Wrobel等，2002， Biorg. Med. Chem. 10,639-656)。另一系列的低微摩爾FSH受體拮抗劑(重氮基萘磺酸衍生 物)未表現(xiàn)出對(duì)TSH受體的親和力(Arey等，2002， Endocrinology 143， 3822-3829)。
此外，對(duì)FSH受體和TSH受體的誘變研究已經(jīng)證實(shí)TSH受體活化不同于FSH受 體活化，表明FSH受體拮抗劑也不一定抑制TSH受體(Schulz等，1999， Mol Endocrinol 13,181-190)。這種活性差別歸因于如下知識(shí)與FSH受體具有極大差異的TSH受體也 通過Gq蛋白，即甲狀腺激素合成所需的途徑有效偶合磷脂酶C(Kero等，2007， J. Clin. Invest. 117， 2399-2407)，并且還被格雷夫斯病中的TSI活化。 本發(fā)明描述了抑制TSH受體活化的四氫喹啉化合物。本發(fā)明的化合物可以用作 TSH受體的(部分)拮抗劑。

發(fā)明內(nèi)容
目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)下列類型的式I的四氫喹啉化合物或其藥學(xué)可接受的鹽具有TSH受
體拮抗活性
其中 W是H或甲基； X是鍵，0，NH或N((1-4C)烷基)； R2是(l-4C)烷基，R5(1-4C)烷基或R9(2_4C)烷基， 如果X是NH，則R2是R8(1-2C)烷氧羰基；或， 如果X是鍵，則f是H，鹵素或(2-5C)雜芳基或苯基，后兩種基團(tuán)任選被一個(gè)或多 個(gè)選自(l-3C)烷基，(l-3C)烷氧基或鹵素的取代基取代；
Y是鍵，O或NH，而 如果Y是鍵，則R3是苯基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素，羥基，甲氧基，苯氧基， 苯基，(l-4C)烷基，硝基，氨基或(二) [(l-4C)烷基]氨基的取代基取代，或
R3是R6(1-6C)烷基，R6(3-6C)環(huán)烷基，R7氧基(1-6C)烷基，或2_妣啶基或
R3是5-元雜芳基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自(l-3C)烷氧基，(l-3C)烷基或鹵素 的取代基取代； 如果Y是0，則R3是R6 (l-6C)烷基，R7氧基(2-6C)烷基或(3-7C)環(huán)烷基；且
如果Y是NH，則R3是R6 (1-6C)烷基，R7氧基(2-6C)烷基;
R4是H， ( 二 ) [ (l-3C)烷基]氨基或(l-3C)烷氧基;
R5是CN或吡啶基；
R6是H，或(3-5C)環(huán)烷基，(2_5C)雜芳基或苯基，后三種基團(tuán)任選被一個(gè)或多個(gè)選 自鹵素，(l-4C)烷氧基或(l-4C)烷基的取代基取代，后兩種基團(tuán)任選被一個(gè)或多個(gè)鹵素取 代； R7是(2-5C)雜芳基或苯基，它們?nèi)芜x被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素，(l-4C)烷氧基或 (l-4C)烷基的取代基取代； R8是H或(2-5C)雜芳基或苯基，它們?nèi)芜x被一個(gè)或多個(gè)選自(1_3C)烷基，(1_3C) 烷氧基或鹵素的取代基取代；且 R9是(二 ) [ (l-4C)烷基]氨基或(2-6C)雜環(huán)烷基。
在上述式l中，兩個(gè)W基團(tuán)始終相同且是H或甲基。
特別地，本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出拮抗TSH受體的活性。 因此，本發(fā)明的TSH受體拮抗化合物可以用于治療具有對(duì)TSH受體介導(dǎo)的途徑有 應(yīng)答的疾病的哺乳動(dòng)物，包括人。它們還可以用于預(yù)防這樣的TSH受體介導(dǎo)的障礙。本發(fā) 明的TSH受體拮抗化合物還以等同的效力完全抑制TSH受體-介導(dǎo)的磷脂酶C活性。
具體實(shí)施例方式
下列術(shù)語(yǔ)指定具有如下所示用于本說(shuō)明書和權(quán)利要求中的所示含義。 定義中使用的術(shù)語(yǔ)(l-3C)烷基意旨具有l(wèi)-3個(gè)碳原子的支鏈或非支鏈烷基，是甲
基、乙基、丙基或異丙基。 定義中使用的術(shù)語(yǔ)(l-4C)烷基意旨具有l(wèi)-4個(gè)碳原子的支鏈或非支鏈烷基，是甲 基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。 定義中使用的術(shù)語(yǔ)(2-4C)烷基意旨具有2-4個(gè)碳原子的支鏈或非支鏈烷基，是乙 基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。 定義中使用的術(shù)語(yǔ)(l-6C)烷基意旨具有l(wèi)-6個(gè)碳原子的支鏈或非支鏈烷基，例如
甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、正戊基和正己基。優(yōu)選(l-5C)烷基。 定義中使用的術(shù)語(yǔ)(2-6C)烷基意旨具有2-6個(gè)碳原子的支鏈或非支鏈烷基，例如
乙基、丙基、異丙基、丁基、戊基或己基。 術(shù)語(yǔ)(3-6C)環(huán)烷基意旨具有3-6個(gè)碳原子的環(huán)烷基，是環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基和 環(huán)己基。 術(shù)語(yǔ)(3-5C)環(huán)烷基意旨具有3-5個(gè)碳原子的環(huán)烷基，是環(huán)丙基，環(huán)丁基和環(huán)戊基。
術(shù)語(yǔ)(3-7C)環(huán)烷基意旨具有3-7個(gè)碳原子的單或雙環(huán)烷基，例如環(huán)丙基，環(huán)丁基， 環(huán)戊基，環(huán)己基和降冰片基 術(shù)語(yǔ)(2-5C)雜芳基意旨具有2-5個(gè)碳原子和至少包括一個(gè)選自N， 0和/或S的 雜原子的芳族基團(tuán)。如果適宜，則可以包括一個(gè)以上雜原子，包括不同的雜原子。優(yōu)選的雜 芳基是噻吩基、呋喃基、吡啶基、異噁唑基、嘧啶基、吡咯基。如果適宜，則(2-5C)雜芳基可 以通過碳原子或雜原子連接。 術(shù)語(yǔ)5-元雜芳基意旨具有2-4個(gè)碳原子和至少包括一個(gè)選自N， 0和/或S的雜 原子的芳族基團(tuán)。如果適宜，則可以包括一個(gè)以上雜原子，包括不同的雜原子。優(yōu)選的雜芳 基是噻吩基、呋喃基、咪唑基、異噁唑基、吡唑基、吡咯基、噁二唑基、噁唑基或噻唑基。如果 適宜，則5-元雜芳基可以通過碳原子或雜原子連接。
術(shù)語(yǔ)(l-3C)烷氧基意旨具有l(wèi)-3個(gè)碳原子的烷氧基，烷基部分具有與上述定義相 同的含義。 術(shù)語(yǔ)(l-4C)烷氧基意旨具有l(wèi)-4個(gè)碳原子的烷氧基，烷基部分具有與上述定義相 同的含義。優(yōu)選(l-2C)烷氧基。 術(shù)語(yǔ)(1-2)烷氧羰基意旨帶有具有1-2個(gè)碳原子的烷氧基的羰基。
術(shù)語(yǔ)(2-6C)雜環(huán)烷基意旨具有2-6個(gè)碳原子和至少包括一個(gè)選自N， 0和/或S的 雜原子的雜環(huán)烷基，如果適宜，則可以通過雜原子連接，或C原子連接。如果適宜，則可以包 括一個(gè)以上雜原子，包括不同的雜原子。優(yōu)選的雜原子數(shù)是l-2。 C-原子的優(yōu)選數(shù)是3-6。 優(yōu)選的基團(tuán)是嗎啉基、高嗎啉基、哌啶基和高哌啶基。最優(yōu)選嗎啉基。 術(shù)語(yǔ)氧基(l-6C)烷基意旨具有l(wèi)-6個(gè)碳原子的氧基烷基，烷基部分具有與上述定 義相同的含義。 術(shù)語(yǔ)氧基(2-6C)烷基意旨具有2-6個(gè)碳原子的氧基烷基，烷基部分具有與上述定 義相同的含義。 本文所用的術(shù)語(yǔ)(二) [(l-4C)烷基]氨基意旨被烷基單取代或二取代的氨基，所 述烷基各自包含1-4個(gè)碳原子并且具有與上述定義相同的含義。 本文所用的術(shù)語(yǔ)(二) [(l-3C)]烷基氨基意旨被烷基單取代或二取代的氨基，所 述烷基各自包含1-3個(gè)碳原子并且具有與上述定義相同的含義。
術(shù)語(yǔ)鹵素意旨氟、氯、溴或碘。 術(shù)語(yǔ)"藥學(xué)可接受的鹽"表示在合理醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)適用于接觸人和/或動(dòng)物組 織、而沒有過度毒性、剌激、過敏反應(yīng)等，具有相當(dāng)?shù)暮侠淼氖找?風(fēng)險(xiǎn)比的鹽。藥學(xué)可接受 的鹽是本領(lǐng)域眾所周知的。 本發(fā)明的化合物具有至少一個(gè)手性碳原子且由此可以作為純的對(duì)映體，或?qū)τ丑w 混合物或非對(duì)映體混合物得到。 本發(fā)明的混合物可以形成水合物或溶劑合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知帶電荷的化合 物在凍干時(shí)與水形成水化種類，或在溶液中濃縮時(shí)與適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑形成溶劑化種類。本 發(fā)明的化合物包括所列化合物的水合物或溶劑合物。 本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及式I的化合物和化合物的應(yīng)用，其中Y是鍵，0或NH，而
如果Y是鍵，則RS是苯基，其任選被鹵素，羥基，甲氧基，苯氧基，苯基，(l-4C)烷 基，硝基，氨基或(二)[(1-4C)烷基]氨基單/二取代，或 R3是R6(1-6C)烷基，R6(3-6C)環(huán)烷基，R7氧基(1-6C)烷基，或2_妣啶基，或
R3是5-元雜芳基，其任選被(l-3C)烷氧基，(l-3C)烷基或鹵素取代；
如果Y是0，則R3是R6 (l-6C)烷基或R7氧基(2-6C)烷基；且
如果Y是NH，則R3是R6 (2-6C)烷基，R7氧基(2-6C)烷基; 其中Y是鍵，0或NH，而如果Y是0，則W是R6(1-60烷基或R7氧基(2-6C)烷基， 且其中如果Y是NH，則R3是R6 (2-6C)烷基或R7氧基(2-6C)烷基。
本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及式I的化合物和化合物的應(yīng)用，其中X是鍵或0。
本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及式I的化合物和化合物的應(yīng)用，其中R2是H和X是鍵。
本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及式I的化合物和化合物的應(yīng)用，其中R2是R5(1-4C)烷 基、X = 0。
本發(fā)明還提供了式I的化合物和化合物的應(yīng)用，其中R4是H，或(二 ) [(l-3C)烷
基]氨基。 本發(fā)明還提供了式I的化合物和化合物的應(yīng)用，其中X是鍵，0或NH。 本發(fā)明還提供了式I的化合物和化合物的應(yīng)用，所述化合物是表現(xiàn)出(+)旋光性
的對(duì)映體。 本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及所述化合物和化合物的應(yīng)用，其中將如本文所定義的基 團(tuán)W-R9和X和Y的所有具體定義合并在式I的化合物中。
將制備本發(fā)明化合物的適當(dāng)方法概括如下。 如果Rl = Me，則可以從得到充分記錄的Skraup反應(yīng)開始制備式I的化合物。對(duì) N-叔-丁氧羰基(N-Boc)保護(hù)的l，4-苯二胺l進(jìn)行該反應(yīng)，得到l，2-二氫喹啉衍生物 2。上述反應(yīng)一般在升溫下，在丙酮或異亞丙基丙酮中，在碘或質(zhì)子酸，例如鹽酸，對(duì)-甲苯 磺酸或碘化氫水溶液存在下進(jìn)行?；蛘?，可以在MgS04， 4-叔-丁基兒茶酚和碘存在下使化 合物1與丙酮反應(yīng)制備化合物2 (L. G. Hamann， R. I. Higuchi， L. Zhi， J. P. Edwards和X. _N. Wang， J. (1998)Med.Chem. 41,623-639)。在另一種方法中，該反應(yīng)在丙酮中，使用鑭系元素 三氟甲磺酸鹽(例如三氟甲磺酸鈧)作為催化劑進(jìn)行。在這種情況中，該反應(yīng)在室溫或升 溫下使用常規(guī)加熱或微波照射進(jìn)行(M. E. Theoclitou和L. A. Robinson (2002) Tetrahedron Lett. 43 :3907-3910)。 然后，可以使用標(biāo)準(zhǔn)條件進(jìn)行化合物2的1-N-乙?；??？梢栽谌軇?，例如四氫呋 喃中，使用乙酰氯，在堿，例如吡啶存在下?；衔?，得到1-N-乙酰基-4-甲基-1 ， 2- 二 氫喹啉3。 在本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的條件下裂解Boc保護(hù)基，得到6-氨基-1 ， 2- 二氫喹
啉4。該反應(yīng)一般在二氯甲烷中，在三氟乙酸存在下進(jìn)行。 在二氫喹啉骨架的4位上引入必要的取代的苯基可以通過使用化合物4的苯、茴 香醚或溴苯的Friedel-Crafts烷基化進(jìn)行，得到式5的化合物。該反應(yīng)在環(huán)境溫度或升溫 下，在苯、茴香醚或溴苯中，在路易斯酸(例如A1C1》催化下進(jìn)行。 然后，可以使用標(biāo)準(zhǔn)條件對(duì)式5的化合物進(jìn)行6-N-官能化，得到式6的化合物，其 中R3如上述定義。例如，可以使式5的化合物在溶劑，例如二氯甲烷、四氫呋喃或甲苯中與 酰基鹵(R3-C(0)-hal，其中hal 二Cl，Br或I)在堿，例如N， N-二異丙基乙胺或吡啶存在下 反應(yīng)?；蛘撸梢酝ㄟ^與適當(dāng)?shù)聂人?R3-C02H)在偶合劑，例如0-(苯并三唑-l-基)-N，N， N' ，N' _四甲基脲四氟硼酸鹽(TBTU)或0-(7-氮雜苯并三唑-l-基)-N，N，N' ，N'-四 甲基脲六氟磷酸鹽(HATU)和叔堿，例如N，N-二異丙基乙胺的存在下，在溶劑，例如N，N-二 甲基甲酰胺或二氯甲烷中，在環(huán)境溫度或升溫下反應(yīng)進(jìn)行?；?。此外，可以通過異氰酸酯7 將式5的化合物轉(zhuǎn)化成氨基甲酸酯類化合物6b或脲類化合物6c。在典型的反應(yīng)中，在溶 劑，例如乙酸乙酯中使用氯甲酸三氯甲酯在活性炭存在下，在升溫下將化合物5轉(zhuǎn)化成異 氰酸酯7。在溶劑，例如四氫呋喃或二氯甲烷中，在堿，例如三乙胺或N，N-二異丙基乙胺存 在下，在環(huán)境溫度或升溫下，使用適當(dāng)?shù)拇碱惢衔颮3-0H將異氰酸酯7轉(zhuǎn)化成氨基甲酸酯 類化合物6b (其中R3如上述定義)、或使用適當(dāng)?shù)陌奉惢衔颮3_NH2，將異氰酸酯7轉(zhuǎn)化成 脲類化合物6c(其中R3如上述定義)?；蛘?，在溶劑，例如四氫呋喃，二氯甲烷或N， N-二 甲基甲酰胺中，使用適當(dāng)?shù)穆燃姿狨ヮ惢衔颮3-0-C(0)-Cl或異氰酸酯類化合物R3-N =C = O，在環(huán)境溫度或升溫下將式5的化合物分別轉(zhuǎn)化成氨基甲酸酯類化合物6b或脲類化
合物6c，其中R3是如上述定義。<formula>formula see original document page 11</formula> 如果R1 = H，則可以從維蒂希反應(yīng)開始制備式I的化合物。使用(二乙氧基-磷 ?；?_乙酸乙酯進(jìn)行這種與式8的酮的反應(yīng)，得到式9的a ， |3 _不飽和酯類化合物，可以 在室溫在乙醇中用氫氧化鈉(2N)將其轉(zhuǎn)化成式10的羧酸類化合物。 然后使用標(biāo)準(zhǔn)條件用式10的酸類化合物酰化苯胺得到式11的化合物?？梢栽谂?合劑，例如O-(苯并三唑-l-基)-N，N，N' ，N' _四甲基脲四氟硼酸鹽(TBTU)或0-(7-氮 雜苯并三唑-1-基)-N， N， N' ， N'-四甲基脲六氟磷酸鹽(HATU)和叔堿，例如N， N_ 二異 丙基乙胺存在下，在溶劑，例如N， N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷中，在環(huán)境溫度或升溫下反 應(yīng)進(jìn)行?；?。 可以使用濃H2S04在室溫下對(duì)式11的化合物進(jìn)行閉環(huán)，得到式12的化合物，然后
使用BH3_S(CH3)2在甲苯中，在升溫下進(jìn)行還原，得到式13的四氫喹啉類化合物。 可以使用標(biāo)準(zhǔn)條件對(duì)式13的化合物進(jìn)行乙?；Ｔ诘湫偷膶?shí)驗(yàn)中，使式13的化
合物在溶劑，例如二氯甲烷或四氫呋喃中與乙酰氯在堿，例如三乙胺或吡啶存在下反應(yīng)，得
到式14的化合物。 可以通過使用硝酸和乙酐在二氯甲烷中的混合物作為溶劑，在室溫下將硝基引入 四氫喹啉類化合物14的6位?？梢酝ㄟ^使用鋅在作為溶劑的乙酸和四氫呋喃的存在下，在 (TC下還原，將得到的式15的化合物轉(zhuǎn)化成苯胺衍生物16。
B-N
然后如對(duì)?；?的化合物所述，可以使用標(biāo)準(zhǔn)條件，對(duì)式16的化合物進(jìn)行 6-N-?；?，得到式17a的化合物，其中R3如上述定義。類似地，可以如對(duì)氨基甲酸酯類化合 物6b和脲類化合物6c所述，以式16的化合物為原料，制備氨基甲酸酯類化合物17b(其中 R3如上述定義)和脲類化合物17c (其中R3如上述定義)。 此外，如分別對(duì)式30和33的化合物所述，以式17的化合物為原料制備式20和23 的化合物。 可以通過與硼酸或硼酸酯類化合物的Suzuki反應(yīng)將式17和6的化合物(如果R =Br)轉(zhuǎn)化成式24的化合物。在典型的實(shí)驗(yàn)中，可以使式17或6的溴化物與硼酸或硼酸 酯類化合物在溶劑，例如二氯甲烷或二噁烷中使用作為堿的氟化銫或磷酸鉀和靶催化劑， 例如四(三苯膦)鈀和二氯二 (三苯膦)鈀，在三苯膦和三苯胂存在下，在升溫下反應(yīng)。此 外，可以通過Buchwald化學(xué)反應(yīng)將式17和6的化合物(如果R = Br)轉(zhuǎn)化成式25的苯胺 類化合物。可以使式17或6的化合物在二甲氧基乙烷中與二苯甲酮亞胺在叔丁醇鈉作為
堿，三(二亞芐基丙酮)二鈀作為催化劑和2，2'-雙(二苯基膦基)-i，r -聯(lián)萘存在下，
在升溫下反應(yīng)，然后使用在四氫呋喃中的鹽酸水溶液在環(huán)境溫度下水解，得到式25的苯胺 衍生物。 可以使用適當(dāng)?shù)耐榛u(R2-hal，其中hal 二Cl，Br或I)，在溶齊U，例如乙醇，四氫 呋喃或N， N-二甲基甲酰胺中，使用堿，例如三乙胺、碳酸鉀、碳酸銫或碳酸氫鈉，在碘化鈉 或碘化鉀作為催化劑存在下，使式25的化合物烷基化，得到式27a的化合物，其中R2如上 述定義。此外，可以通過式26的異氰酸酯類化合物將式25的化合物轉(zhuǎn)化成式27b的氨基甲酸酯類化合物。在典型的反應(yīng)中，可以在溶劑，例如乙酸乙酯中使用氯甲酸三氯甲酯在活性 炭存在下，在升溫下將式25的化合物轉(zhuǎn)化成式26的異氰酸酯類化合物?？梢栽谌軇?，例如 四氫呋喃或二氯甲烷中使用適當(dāng)?shù)拇?，在堿，例如三乙胺或N， N-二異丙基乙胺存在下將式 26的異氰酸酯類化合物轉(zhuǎn)化成式27b的氨基甲酸酯類化合物，其中R2如上述定義?；蛘撸?可以在溶劑，例如四氫呋喃，二氯甲烷或N， N-二甲基甲酰胺中，使用適當(dāng)?shù)穆燃姿狨?，在環(huán) 境溫度或升溫下，將式25的化合物轉(zhuǎn)化成式27b的氨基甲酸酯類化合物，其中R2如上述定 義。 可以在環(huán)境溫度或升溫下通過使用(發(fā)煙)硝酸和冰醋酸在二氯甲烷或濃硫酸中 的混合物進(jìn)行硝化，在式27的化合物上引入硝基，得到式28的化合物?？梢栽诃h(huán)境溫度 或升溫下通過使用鋅在四氫呋喃中，在冰醋酸存在下還原式28的化合物，得到苯胺衍生物 29。可以通過使用脂族醛類化合物在甲醇中，使用氰基硼氫化鈉在冰醋酸存在下進(jìn)行還原 烷基化，將式29的化合物上的伯胺官能團(tuán)轉(zhuǎn)化成式30的烷基化苯胺類。
此外，可以通過使用本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的方法經(jīng)式31的重氮鹽將式29的 化合物轉(zhuǎn)化成式32的醇類化合物。在典型的實(shí)驗(yàn)中，使式29的化合物在溶劑，例如水中與 NaN02和H2S04反應(yīng)，然后在(TC或環(huán)境溫度下添加脲，Cu (N03) 2和0120，得到式32的醇類化 合物。 可以使用烷基卣，在溶齊U，例如乙醇、四氫呋喃或N， N-二甲基甲酰胺中，用堿，例 如三乙胺、碳酸鉀、碳酸銫或碳酸氫鈉，在碘化鈉或碘化鉀作為催化劑存在下，對(duì)式32的化 合物進(jìn)行烷基化，得到式33的化合物。
<formula>formula see original document page 13</formula>
得到式39的化合物的方法從在(TC下用氯甲酸9-荷基甲酯(Fmoc-Cl)在二氯甲烷中，在三乙胺存在下轉(zhuǎn)化式5或16的化合物開始，得到式34的化合物。
然后通過在環(huán)境溫度下使用發(fā)煙硝酸和冰醋酸在二氯甲烷中的混合物硝化來(lái)引 入硝基，得到式35的化合物?？梢栽诃h(huán)境溫度下通過使用鋅在四氫呋喃中，在冰醋酸存在 下還原式35的化合物得到苯胺衍生物36。可以通過使用脂族醛類化合物在甲醇中，使用氰 基硼氫化鈉在冰醋酸存在下，進(jìn)行還原烷基化，將式36的化合物上的伯胺官能團(tuán)轉(zhuǎn)化成式 37的烷基化苯胺類。可以用哌啶在二氯甲烷中除去Fmoc-基團(tuán)，得到式38的苯胺衍生物。
然后如對(duì)式5的化合物所述，可以使用標(biāo)準(zhǔn)條件對(duì)式38的化合物進(jìn)行6-N-?；?， 得到式39a的化合物，其中R3如上述定義。類似地，可以如對(duì)氨基甲酸酯類化合物6b和脲 類化合物6c所述，以式38的化合物為起始物，制備氨基甲酸酯類化合物39b (其中R3如上 述定義)和脲類化合物39c (其中R3如上述定義)。
39a:Y"鍵 39b:Y = O 39c : Y = N 或者，可以以式35的化合物為原料制備式39的化合物。可以用哌啶在二氯甲烷 中除去Fmoc-基團(tuán)，得到式40的苯胺衍生物。 然后如對(duì)制備式6的化合物所述，使用標(biāo)準(zhǔn)條件對(duì)式40的化合物進(jìn)行6-N-官能 化，得到式41的化合物，其中R3如上述定義。可以在環(huán)境溫度下通過使用鋅在四氫呋喃 中，在冰醋酸存在下還原式41的化合物，得到苯胺衍生物42?？梢酝ㄟ^使用醛類化合物在 甲醇中使用氰基硼氫化鈉，在冰醋酸存在下進(jìn)行還原烷基化，將式42的化合物上的伯胺官 能團(tuán)轉(zhuǎn)化成式39的烷基化苯胺類。
得到式51和52的化合物的方法從在0t:下使化合物43與氯甲酸9-荷基甲酯 (Fmoc-Cl)在四氫呋喃中，在吡啶存在下反應(yīng)開始，得到式44的化合物?？梢栽诃h(huán)境溫度下 通過使用鋅在四氫呋喃中，在冰醋酸存在下還原式44的化合物，得到苯胺衍生物45?？梢?通過上述Skraup反應(yīng)制備二氫喹啉衍生物46，然后使用在吡啶/二氯甲烷(1/1)中的乙酰 氯作為溶劑，在N， N-二甲基苯胺存在下進(jìn)行N-酰化，得到化合物47?？梢允褂眠哙ぴ诙?氯甲烷中除去Fmoc基團(tuán)，得到苯胺衍生物48。可以使用如制備式6的化合物所述的條件將 6_氨基修飾成酰胺49a、氨基甲酸酯49b和脲49c。 可以通過苯與式49的化合物的Friedel-Crafts烷基化，在二氫喹啉骨架的4位 上引入苯基。該反應(yīng)在環(huán)境溫度或升溫下在苯中，在路易斯酸(例如A1C1》催化下進(jìn)行。 在這些條件下，發(fā)生去甲基化，得到式50的化合物。如果反應(yīng)在茴香醚中進(jìn)行，可得到式52 的化合物。 可以使用烷基鹵在溶齊U，例如乙腈、四氫呋喃或N， N-二甲基甲酰胺中，在堿，例如
碳酸鉀、叔丁醇鉀或氫化鈉存在下對(duì)式50的醇類化合物進(jìn)行烷基化，得到式51的化合物。
/ 41a:^鍵 Z 41b:Y = 0 41c:Y = N
+丫0 HN、
坑基、 39
v 、N'
烷基 ?！?
11
15
得到式54和57的化合物的方法從式6或17化合物的去甲基化開始，其中R = 0Me。如果R = OMe，則去甲基化可以在溶齊U，例如二氯甲烷中，在三溴化硼(BBr3)存在下， 在環(huán)境溫度或升溫下進(jìn)行，得到式53的醇類化合物。可以使用烷基鹵(R2-hal)，在溶劑，例 如乙醇、四氫呋喃或N， N-二甲基甲酰胺中與堿，例如三乙胺、碳酸鉀、碳酸銫或碳酸氫鈉一 起，在碘化鈉或碘化鉀作為催化劑存在下，對(duì)式53的化合物進(jìn)行烷基化，得到式54的化合 物?？梢允褂萌鐚?duì)將式27的化合物轉(zhuǎn)化成式30的化合物所述的條件在式54的化合物上 引入硝基，得到式55的化合物，然后將硝基還原而得到式56的化合物，再進(jìn)行氨基烷基化 得到式57的化合物。
R-Y .r *玩
R-Y
另夕卜，制備本發(fā)明某些化合物的適當(dāng)制備方法描述在W02004/056779和 W02004/056780中。 可以從藥學(xué)可接受的鹽形式的反應(yīng)混合物中分離可以為游離堿形式的本發(fā)明的 某些化合物。還可以通過使用有機(jī)或無(wú)機(jī)酸處理式I的游離堿得到藥學(xué)可接受的鹽，所述 的有機(jī)或無(wú)機(jī)酸例如是氯化氫、溴化氫、碘化氫、硫酸、磷酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、馬來(lái)酸、丙 二酸、甲磺酸、富馬酸、琥珀酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸和抗壞血酸。 得到純對(duì)映體的方法是本領(lǐng)域眾所周知的，例如使獲自旋光酸和外消旋混合物的 鹽結(jié)晶，或使用手性柱的色譜法。就非對(duì)映體而言，可以使用正相或反相柱。例如用偏光計(jì) 易于測(cè)定旋光度。 本發(fā)明的化合物抑制TSH受體。本領(lǐng)域技術(shù)人員公認(rèn)期望的ICs。值依賴于測(cè)試的 化合物。例如，一般將具有低于lE-5M的ICs。值的化合物視為藥物篩選的候選者。 一般而 言ICs。值優(yōu)選低于1E-7M。然而，具有較大1(:5。值，但對(duì)特定受體更具選擇性的化合物甚至 可以是更好的候選者。本發(fā)明的化合物還可以具有FSH受體活性，但它們不具有超過TSH 受體的FSH受體選擇性。 一般而言，可以認(rèn)為本發(fā)明的化合物具有高TSH受體活性和至少 對(duì)FSH和TSH受體是等效的。 測(cè)定受體結(jié)合的方法以及測(cè)定促甲狀腺素或TSH受體的生物活性的體外和體內(nèi) 測(cè)定法是眾所周知的。在體外測(cè)定中，將表達(dá)的TSH受體與測(cè)試化合物一起孵育并且測(cè)定 官能反應(yīng)的受體結(jié)合或剌激/抑制?？梢允褂秒x體人或動(dòng)物甲狀腺細(xì)胞/甲狀腺切片或甲 狀腺細(xì)胞系(Fuhrer等(2003)Endocrinology 144,4018-4030)。或者，可以在適當(dāng)宿主細(xì) 胞，例如中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞中異源性表達(dá)編碼TSH受體的cDNA，但其它細(xì)胞系，優(yōu)選哺乳動(dòng) 物來(lái)源的細(xì)胞系也是合適的(Fuhrer等(2003)Endocrinology 144， 4018-4030)。表達(dá)重組 TSHR的細(xì)胞的構(gòu)建方法是本領(lǐng)域眾所周知的。 用于位點(diǎn)定向DNA誘變、DNA連接、PCR和適當(dāng)表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建的技術(shù)是本領(lǐng)域眾所 周知的。可以使用標(biāo)準(zhǔn)固相技術(shù)以合成方式構(gòu)建編碼所需受體的部分或全部DNA，優(yōu)選包括 易于連接的限制位點(diǎn)。可以將用于所插入的編碼序列的轉(zhuǎn)錄和翻譯的適當(dāng)控制元件與DNA 編碼序列連接。正如眾所周知的，表達(dá)系統(tǒng)是可得到的，它們與各種宿主，包括細(xì)菌和真核
17宿主，例如酵母、昆蟲細(xì)胞、鳥類、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等相容。 將表達(dá)TSH受體的細(xì)胞與測(cè)試化合物一起孵育，以觀察官能反應(yīng)的結(jié)合、剌激或 抑制。或者，可以將包含表達(dá)受體的分離細(xì)胞膜用于測(cè)定測(cè)試化合物的結(jié)合。為了測(cè)定結(jié) 合，可以使用放射性標(biāo)記或熒光標(biāo)記的化合物。還可以進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合測(cè)定。另一種生化 測(cè)定法包括篩選TSH受體-介導(dǎo)的cAMP蓄積。這樣的測(cè)定法包括將表達(dá)TSH受體的細(xì)胞 與測(cè)試化合物一起孵育足夠時(shí)間期限，并測(cè)定cAMP (通常在cAMP磷酸二酯酶抑制劑存在下 進(jìn)行以阻斷cAMP降解)。cAMP的量可以減少或增加，這取決于結(jié)合受體時(shí)測(cè)試化合物的抑 制或剌激效果。篩選TSH受體拮抗劑包括將表達(dá)TSH受體的細(xì)胞與在固定的、次最大有效 的TSH濃度(即在沒有化合物存在下誘導(dǎo)cAMP蓄積最大剌激的約80%的TSH濃度)存在 下的濃度范圍的測(cè)試化合物一起孵育。代替TSH，用來(lái)自格雷夫斯病患者的血清，或(部分) 純化的TSI來(lái)剌激TSH受體(Gerding等(2000) Clin. Endocrinol. 52， 267-271)?；蛘?，可 以異源表達(dá)組成型活性TSH受體，且測(cè)試化合物對(duì)活性受體的拮抗作用可以導(dǎo)致基礎(chǔ)cAMP 水平的增加下降(Fuhrer等(2003)Endocrinology 144,4018-4030)。從濃度-效應(yīng)曲線 中，可以測(cè)定各測(cè)試化合物的IC50值和TSH受體-誘導(dǎo)的cAMP蓄積的抑制百分比。
除直接測(cè)定cAMP夕卜，還可以使用細(xì)胞系，除用受體cDNA轉(zhuǎn)染外，還使用編碼報(bào)道 基因的第二種cDNA轉(zhuǎn)染，所述報(bào)道基因的表達(dá)依賴于cAMP胞內(nèi)水平。這樣的報(bào)道基因可 以是cAMP-誘導(dǎo)型或可以以使它們與新cAMP效應(yīng)元件連接的方式構(gòu)建。 一般而言，報(bào)道 基因表達(dá)可以通過使cAMP改變水平的任何效應(yīng)元件反應(yīng)來(lái)控制。合適的報(bào)道基因是，例 如編碼熒火蟲熒光素酶、P-半乳糖苷酶、堿性磷酸酶或e-內(nèi)酰胺酶的基因。這樣的反式 激活測(cè)定原理是本領(lǐng)域眾所周知的并且描述在，例如Evans等(1999) J. Clin. Endocrinol. Metab. 84， 374-377中。作為參比化合物，可以使用人(重組)TSH或牛TSH。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，其包含具有式I的四氫喹啉衍生物或其藥學(xué)可接受的 鹽與藥學(xué)可接受助劑和任選其它治療劑的混合物。所述助劑必須是"可接受的"，其含義是 與組合物的其它成分相容并且對(duì)其接受者而言無(wú)害。 組合物包括，例如適合于口服、眼用、舌下、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、局部或直腸給藥等 的所有適于給藥的單位劑型的組合物。 就口服給藥而言，可以將活性成分制成分散單位，例如片齊U、膠囊、粉末、顆粒、溶 液、混懸液等。 就胃腸外給藥而言，可以將本發(fā)明的藥物組合物提供在單位劑量或多劑量容器 中，例如預(yù)定量的注射液體，例如在密封小瓶和安瓿中，并且還可以將它們貯存在僅需要在 使用前添加無(wú)菌液體載體，例如水的冷凍干燥(凍干)條件下。 就眼用制劑而言，可以將活性成分制成施用于結(jié)膜或角膜或用于眼球后注射的溶 液、混懸液、軟膏劑或凝膠。 由于與例如如標(biāo)準(zhǔn)參考書Gennaro， A. R.等，Remington :TheScience and Practice of Pharmacy (第20版，Lippincott Williams& Wilkins， 2000，尤其是參見Part 5 -Pharmaceutical Manufacturing)中所述的藥學(xué)可接受的助劑混合，所以可以將活性劑 壓制成固體單位劑型，例如丸劑、片劑或加工成膠囊或栓劑。借助于藥學(xué)可接受的液體，可 以將活性劑作為流體組合物，例如作為注射制劑，以溶液、混懸液、乳劑或噴霧劑，例如噴鼻 劑的形式施用。
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為了制備固體單位劑型，可以使用常用添加劑，例如填充劑、著色劑、聚合物粘合
劑等。 一般而言，可以使用不干擾活性化合物功能的任意藥學(xué)可接受的添加劑。可以作為
固體組合物與本發(fā)明活性劑一起給予的合適的載體包括適量使用的乳糖、淀粉、纖維素衍
生物等或其混合物。就胃腸外給藥而言，可以使用含水混懸液、等滲鹽水溶液和無(wú)菌可注射
溶液，它們包含藥學(xué)可接受的分散劑和/或濕潤(rùn)劑，例如丙二醇或丁二醇。 本發(fā)明進(jìn)一步包括如上文所述的藥物組合物與適合于該組合物的包裝材料的組
合，所述包裝材料包括用于說(shuō)明如本文所述的組合物的應(yīng)用的說(shuō)明書。 因此，本發(fā)明還提供了治療對(duì)TSH受體介導(dǎo)的途徑有應(yīng)答的疾病的試劑盒。
該試劑盒包含A)包含式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽的藥物組合物；和B)描
述使用該藥物組合物治療對(duì)TSH受體介導(dǎo)的途徑有應(yīng)答的疾病的方法的說(shuō)明書。 在另一個(gè)方面中，該試劑盒可以用于預(yù)防對(duì)TSH受體介導(dǎo)的途徑有應(yīng)答的疾病。 本申請(qǐng)中使用的"試劑盒"包括用于包含所述藥物組合物的容器，并且還可以包括
分開的容器，例如分開的瓶或分開的箔袋。該容器可以是任意常規(guī)的形狀或本領(lǐng)域公知的
形式，由藥學(xué)可接受的材料制成。 本發(fā)明的四氫喹啉衍生物還可以以可植入藥用裝置的形式給予，它由活性物質(zhì)芯
組成，外面包有調(diào)節(jié)釋放速率的膜。將這樣的植入物經(jīng)皮下或局部施用，且在相對(duì)長(zhǎng)時(shí)間
內(nèi)，例如數(shù)周至數(shù)年，以近似恒定的速率釋放活性成分。制備可植入的藥用裝置的方法為本
領(lǐng)域公知的，例如如歐洲專利EP0， 303， 306(AKZ0 Nobel N. V.)中所述。 活性成分或其藥物組合物的確切給藥劑量和給藥方案必然依賴于所要實(shí)現(xiàn)的治
療效果，并且隨具體化合物、給藥途徑和所施藥的受試者個(gè)體的年齡和病情而改變。 —般而言，胃腸外給藥需要低于更依賴于吸收的給藥方法的劑量。然而，用于人體
的劑量?jī)?yōu)選包含O. 0001-25mg/kg體重?？梢詫⑺鑴┝恐瞥梢淮蝿┝炕蚨啻蝸唲┝?，在全
天內(nèi)的適當(dāng)間隔給予。 本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及具有式I的四氫喹啉衍生物化合物在制備用于治療對(duì) TSH受體介導(dǎo)的途徑有應(yīng)答的疾病的藥物中的應(yīng)用。因此，可以使用適量的本發(fā)明化合物給 予有此需要的患者。 本發(fā)明在另一個(gè)方面中涉及具有式I的四氫喹啉衍生物化合物在制備用于治療 需要抑制TSH受體的TSH、 TSI或TSH受體組成型活性的作用的患者的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明在另一個(gè)方面中涉及具有式I的四氫喹啉衍生物化合物在治療甲狀腺功 能亢進(jìn)中的應(yīng)用。 本發(fā)明在另一個(gè)方面中涉及具有式I的四氫喹啉衍生物化合物在治療格雷夫斯 病中的應(yīng)用。 本發(fā)明在另一個(gè)方面中涉及具有式I的四氫喹啉衍生物化合物在治療格雷夫斯 眼病中的應(yīng)用。 本發(fā)明在另一個(gè)方面中涉及具有式I的四氫喹啉衍生物化合物在治療與格雷夫 斯病相關(guān)的脛骨前皮膚病中的應(yīng)用。 本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及具有式I的四氫喹啉衍生物化合物在治療結(jié)節(jié)性甲狀 腺腫中的應(yīng)用。 本發(fā)明的化合物還可以用于治療甲狀腺癌。
本發(fā)明在另一個(gè)方面中涉及具有式I的四氫喹啉衍生物化合物在預(yù)防上文給鑒
定的疾病中的應(yīng)用。 本發(fā)明通過下列實(shí)施例示例。 實(shí)施例 —般注釋 下列縮寫用于實(shí)施例DMA = N， N-二甲基苯胺，DIPEA = N， N-二異丙基乙胺；TFA =三氟乙酸，DtBAD =偶氮二甲酸二 _叔丁酯；TBTU = 0-苯并三唑_1_基_N， N， N'，N' _四甲基脲四氟硼酸鹽；HATU = 0-(7-氮雜苯并三唑-l-基)-N， N， N' ， N'-四甲基脲六氟磷酸鹽；Fmoc = 9-芴基甲氧羰基；Fmoc-Cl = 9-芴基甲氧羰酰氯；DMF = N，N-二甲基甲酰胺；Boc =叔丁氧羰基；THF =四氫呋喃；DMAP =二甲基-吡啶_4_基-胺；HOAc =乙酸；Et3N =三乙胺；EtOAc =乙酸乙酯；DCM =二氯甲烷；MeOH =甲醇；MeI =碘甲烷；DME=1，2-二甲氧基乙烷。 使用Beilstein Autonom程序(版本4. 01. 304)生成實(shí)施例中所述終產(chǎn)物的名稱。 除非另作陳述，否則下列實(shí)施例的全部終產(chǎn)物從水/1， 4- 二噁烷混合物或水/乙腈混合物中凍干。如果將化合物制備成HC1鹽或TFA鹽的形式，則在凍干前向溶劑混合物中加入適量的相應(yīng)酸。
實(shí)施例1 己酸(1-乙酰某-2, 2,4-三甲某-4-苯某-1, 2, 3,4-四氡-喹啉-6-某)-酰胺
(a) (2， 2， 4-三甲基-1， 2- 二氫-喹啉-6-基)-甲酸叔-丁酯
在5分鐘內(nèi)向在N2氣氣氛中的N-boc-l，4-苯二胺(13. 33g，63. 9mmo1)在異亞丙基丙酮(40ml，367mmo1)中的攪拌溶液中逐步加入碘(3. 47g， 12. 8mmo1)。將該反應(yīng)體系在10(TC下攪拌3小時(shí)，然后冷卻至環(huán)境溫度，減少至得到標(biāo)題化合物，為粗的褐色油狀物(18. 4g， 100% )。將該產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。 (b) (1-乙酰基-2， 2，4_三甲基-1， 2- 二氫-喹啉-6-基)_氨基甲酸叔_ 丁酯
將在N2氣氣氛中的實(shí)施例1 (a)所述的化合物(16. 4g， 57mmol)在THF (200ml)和吡啶(5.07ml，63mmo1)中的攪拌溶液冷卻至Ot:(冰/水浴)。然后在15分鐘內(nèi)滴加在THF(50ml)中的乙酰氯(4. 46ml， 63mmo1)。除去冷卻，將該反應(yīng)混合物緩慢溫至環(huán)境溫度，攪拌3小時(shí)。然后用水使反應(yīng)停止。用EtOAc萃取有機(jī)相，用水洗滌，干燥(Na^0》，過濾，減少至得到油狀物。通過快速色譜法純化該油狀物(庚烷/EtOAc 8 : 2)，得到標(biāo)題化合物(11. 95g，57% )。 (c) 1- (6-氨基-2， 2， 4-三甲基_2H_喹啉_1_基)_乙酮 將在N2氣氣氛中的實(shí)施例l(b)所述的化合物(11. 95g，36mmo1)在DCM(250ml)中的攪拌溶液冷卻至0°C (冰/水浴)。然后在15分鐘內(nèi)滴加三氟乙酸(27. 7ml， 360mmo1)。除去冷卻，將該反應(yīng)混合物緩慢溫至環(huán)境溫度，攪拌1小時(shí)。然后在劇烈攪拌下通過添加碳酸鈉使反應(yīng)停止，加入水。用EtOAc萃取有機(jī)相，用水洗滌，干燥(Na2S04)，過濾，減少至得到油狀物。通過快速色譜法純化該油狀物(庚烷/EtOAc6 : 4)，得到標(biāo)題化合物(2.67g，32% )。 (d) 1- (6-氨基-2， 2， 4-三甲基-4-苯基_3， 4_ 二氫_2H_喹啉_1_基)_乙酮
將在N2氣氣氛中的實(shí)施例1(c)所述的化合物(100mg，494iimo1)在干苯(2ml)
中的攪拌溶液冷卻至Ot:(冰/水浴)。然后在15分鐘內(nèi)逐步加入三氯化鋁(198mg，
1.48mmo1)。除去冷卻，將該反應(yīng)混合物緩慢溫至環(huán)境溫度，攪拌16小時(shí)。然后用氯化銨水
溶液使反應(yīng)停止。用EtOAc萃取有機(jī)相，用水洗滌，干燥(Na^O》，過濾，減少至得到標(biāo)題化
合物，為粗的褐色泡沫(124mg，81%)。將產(chǎn)物泡沫不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。 (e)己酸(1-乙酰某-2, 2,4-三甲某-4-苯某-1, 2, 3, 4-四氡-喹啉_6_某)-酰
腔 將在N2氣氣氛中的實(shí)施例1 (d)所述的化合物(880mg， 2. 85mmo1)和三乙胺(477iiL，3.42mmo1)在干DCM(7. 5ml))中的攪拌溶液冷卻至0。C (冰/水浴)。然后在15分鐘內(nèi)滴加己酰氯(479iiL，3.42mmo1)在DCM(2. 5ml)中的溶液。除去冷卻，將該反應(yīng)混合物緩慢溫至環(huán)境溫度，攪拌1小時(shí)。然后用1N鹽酸水溶液使反應(yīng)停止。用DCM萃取有機(jī)相，用NaHC03的水溶液，然后用水洗滌，然后干燥(PE濾膜)，減少至得到油狀物。通過快速色譜法純化該油狀物，然后將該產(chǎn)物從EtOAc中結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(871mg，75 % )。數(shù)據(jù):(m/z) = 407. 3 (M+H) +。
實(shí)施例2 1-甲某-lH-吡咯-2-羧酸(1-乙酰某-2,2,4-三甲某-4-苯某-1,2,3,4-四
氫_喹啉-6-某)-酰胺 在N2氣中將在干DCM(O. 75ml)中的DIPEA (70. 6 ii L， 405 ii mol) ， HATU (46. 2 ii L，122 ii mol)和N-甲基吡咯-2-羧酸(15. 2mg， 122 y mol) 一起攪拌15分鐘。然后將該反應(yīng)混合物冷卻至0°C (冰/水浴)，然后在3分鐘內(nèi)滴加實(shí)施例1 (d)所述的化合物(25mg，81. liimol)在于DCM(O. 25ml)中的溶液。除去冷卻，將該反應(yīng)混合物緩慢溫至環(huán)境溫度，攪拌1小時(shí)，然后用1N鹽酸水溶液使反應(yīng)停止。用DCM萃取有機(jī)相，用NaHC03的水溶液、然后用水洗滌，然后干燥(PE濾膜)，減少至得到油狀物。通過快速色譜法純化該油狀物，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(15mg，46% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 416. 3(M+H)+。
實(shí)施例3N- (1-乙?；?2， 2， 4-三甲基-4-苯基-1 ， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基)-5-溴_2_甲
氨某-苯甲ffi胺 按照與實(shí)施例2所述相同的方式，由實(shí)施例l(d)所述的化合物制備該化合物(264mg，78%)。數(shù)據(jù)(m/z) =521(M+H)+。
實(shí)施例4 吡啶-2-羧酸(1-乙酰基_2，2，4-三甲基-4-苯基_1，2，3，4_四氫_喹啉-6-某)-酰胺 按照與實(shí)施例2所述相同的方式，由實(shí)施例l(d)所述的化合物制備該化合物(320mg，46%)。數(shù)據(jù)(m/z) =414(M+H)+。
實(shí)施例5 N-(1-乙?；?2， 2， 4-三甲基-4-苯基_1， 2， 3， 4_四氫-喹啉_6_基)_3， 4_ 二甲
某-苯甲ffi胺 按照與實(shí)施例1所述相同的方式，由實(shí)施例l(d)所述的化合物制備該化合物，得到標(biāo)題化合物(320mg，46% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 414(M+H) + 。
21
實(shí)施例6 (1-乙酰某-2,2,4-三甲某-4_苯某-1,2,3,4-四氡-喹啉-6_某)-甲酸2_苯 氧某-乙酉旨 向在N2氣氣氛中的實(shí)施例l(d)所述的化合物(124mg，402iimo1)和催化劑量的 活性炭在干EtOAc(4.6ml)中的攪拌溶液中加入氯甲酸三氯甲酯(97 yl， 804 y mol)。將該 反應(yīng)體系在回流狀態(tài)下攪拌2小時(shí)，然后冷卻至環(huán)境溫度，用dikalite過濾，減壓濃縮，得 到異氰酸酯，為粗油狀物(134mg， 100% )。 然后在N2氣氣氛中將在THF(lml)中的異氰酸酯(48. 8mg， 146 y mol)加入到2-苯 氧基乙醇(182 ii 1， 1. 46,1)和TEA (211 ii 1， 1. 46,1)在THF(2ml)中的溶液中。將該反 應(yīng)體系在環(huán)境溫度下攪拌15小時(shí)，然后用水使反應(yīng)停止，用EtOAc萃取，用鹽水洗滌，干燥 (Na^O》，過濾，減少至得到油狀物。通過快速色譜法純化該油狀物(庚烷/EtOAc)，得到標(biāo) 題化合物(51mg，74% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 473. 5(M+H)+。
實(shí)施例7 (l-乙酰某-2,2,4-三甲某-4_苯某-l,2,3,4-四氡-喹啉-6-某)-氨某甲酸丁 跑 將在N2氣氣氛中的實(shí)施例1 (d)所述的化合物(20mg，65 y mol)在DCM(2ml)中的 攪拌溶液冷卻至0°C (冰/水浴)。加入N- 丁基氯甲酸酯(16. 7 iU， 130 ii mol)，除去冷卻， 將該反應(yīng)混合物緩慢溫至環(huán)境溫度，攪拌16小時(shí)。然后用水使反應(yīng)停止。用EtOAc萃取， 用鹽水洗滌，干燥(Na^O》，過濾，減少至得到油狀物。通過快速色譜法純化該油狀物(庚 烷/EtOAc)，得到標(biāo)題化合物(10mg，37% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 409. 3(M+H)+。
實(shí)施例8 乙酰某-2,2,4-三甲某-4-苯某-1,2,3,4-四氡_喹啉_6_某)_3_環(huán)戊
某_脲 將在N2氣氣氛中的實(shí)施例l(d)所述的化合物(25mg，81. liimol)和三乙胺 (16. 9 ii L， 122 ii mol)在干DCM(O. 75m1))中的攪拌溶液冷卻至(TC (冰/水浴)。然后在3 分鐘內(nèi)滴加異氰酸環(huán)戊酯(11.0mg，97. 3iimo1)在DCM(O. 25ml)中的溶液。除去冷卻，將該 反應(yīng)混合物緩慢溫至環(huán)境溫度，攪拌1小時(shí)。然后用1N鹽酸水溶液使反應(yīng)停止。用DCM萃取 有機(jī)相，用NaHC03的水溶液和水洗滌，然后干燥(PE濾膜)，減少至得到油狀物。通過快速色 譜法純化該油狀物，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(3mg，9% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 420. 5(M+H)+。
實(shí)施例9 己酸「1-乙?；?4-(4_溴-苯基)-4-甲基-1， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基V酰 胺 (a) (E) -3- (4-溴-苯基)-丁 _2_烯酸乙酯 在氮?dú)鈿夥罩袛嚢枋宥〈尖?10. 45g，90. 43mmo1)在THF(250ml)中的溶液。然 后加入膦酰乙酸三乙酯(18. lml，90.43mmo1)在THF(100ml)中的溶液，將該反應(yīng)混合物 在室溫下攪拌30分鐘。然后在5分鐘內(nèi)滴加1-(4-溴-苯基)-乙酮(6g，30. 14mmo1)在 THF(100ml)中的溶液。將該反應(yīng)混合物加熱至回流。3小時(shí)后，將該反應(yīng)混合物冷卻至環(huán) 境溫度，減壓除去THF。將該反應(yīng)混合物溶于H20，用EtOAc萃取，用H20和鹽水洗滌，干燥 (Na2S0》，減壓濃縮。通過硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物(H印t : EtOAc 8 : 2)，得到標(biāo)題化合物(8. lg，99% )。 (b) (E) -3- (4-浪-苯某)-丁 -2-烯酸 向?qū)嵤├?(a)所述的化合物(8. 16g，30. 3mmo1)在乙醇(50ml)中的攪拌溶液中加入2N氫氧化鈉水溶液(50ml)。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。冷卻該反應(yīng)混合物，用2N鹽酸水溶液猝滅。將有機(jī)相萃取入EtOAc，用H20和鹽水洗滌，干燥(Na2S04)，減壓濃縮，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(7.42g，99%)。將產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。
(c) (E) -3- (4-媳-苯某)-丁 -2-烯酸苯某酰胺 向在N2氣氣氛中的實(shí)施例9(b)所述的化合物(2g，8. 296mmol)在CH2Cl2(40ml)中的攪拌溶液中加入DIPEA(2. 89ml， 16. 59,1)和o_(7_氮雜苯并三唑+基)_1， 1，3，3_四甲基脲六氟磷酸鹽(3. 79g， 9. 96mmol)。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘，滴加苯胺(910iil，9.96mmo1)在CH2C12 (30ml)中的溶液。將該反應(yīng)混合物攪拌3. 5小時(shí)，然后用3%檸檬酸水溶液(100ml)猝滅，用(^2(:12取，用1120洗滌，干燥(Na2S04)，減壓濃縮。通過硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物(H印t : EtOAc8 : 2)，得到標(biāo)題化合物(2.48g，95% )。
(d) 4-(4-浪-苯某)-4-甲某-3,4- 二氡_1H_喹啉_2_酮 將實(shí)施例9 (c)所述的化合物(2. 28g， 7. 2mmo1)溶于濃硫酸(20ml)，攪拌45分鐘。將該反應(yīng)混合物傾入冰/水混合物，將有機(jī)相萃取入CH2C12，用NaHC03水溶液和H20洗滌，干燥(Na2S0》，減壓濃縮。通過硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物(H印t : EtOAc 8 : 2)，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(1.9g，83% )。 (6)4-(4-浪-苯某)-4_甲某-1,2,3,4-四氡-喹啉在20分鐘內(nèi)向在N2氣氣氛中的實(shí)施例9(d)所述的化合物(9. 09g，28. 75mmol)
在甲苯(475ml)中的溶液中滴加硼烷-甲基硫復(fù)合物在甲苯中的2M溶液(37.4ml，
74. 74mmol)。將該反應(yīng)混合物加熱至回流2小時(shí)，然后冷卻至環(huán)境溫度，用H20猝滅，在室
溫下攪拌50分鐘。將有機(jī)相萃取入CH2C12，用H20洗滌，干燥(Na2S04)，減壓濃縮，得到標(biāo)題
化合物，為油狀物(8.6g，99%)。將產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。 (f)l-「4-(4-溴-苯基)-4-甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-l-基V乙酮 向在N2氣氣氛中的實(shí)施例9 (e)所述的化合物(8. 69g， 28. 75mmol)在
CH2C12 (240ml)中的攪拌溶液中加入吡啶(4. 64ml，57. 5,1)和乙酰氯(3. 08ml ，
43. 13mmol)，在室溫下攪拌3小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物傾入冰水。將有機(jī)相萃取入CH2C12，
用H20洗滌，干燥(Na2S04)，減壓濃縮，得到標(biāo)題化合物，為油狀物(9. 8g， 99% )。將產(chǎn)物不
經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。 (g) l-「4_(4-溴-苯基)_4-甲基-6-硝基-3， 4- 二氫_2H_喹啉_1_基V乙酮
向在N2氣氣氛中的實(shí)施例9(f)所述的化合物(9. 8g，28. 47mmol)在(^2(]12(210ml)中的攪拌溶液中加入乙酐(267iU，2. 85mmol)。然后在15分鐘內(nèi)滴加發(fā)煙硝酸(7. 17ml，0. 17mol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液，將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。然后將該反應(yīng)混合物傾入冰水。將有機(jī)相萃取入CH2C12，用NaHC03水溶液和H20洗滌，干燥(Na2S04)，減壓濃縮。通過硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物(H印t : EtOAc 9 : l)，得到標(biāo)題化合物(7. 2g，65%)。
(h) 1- 「6-氨基-4- (4-溴-苯基)-4-甲基-3， 4- 二氫_2H_喹啉_1_基1 -乙酮
將在N2氣氣氛中的實(shí)施例9(g)所述的化合物(7. 3g， 18. 8mmo1)和乙酸(10. 73ml，187. 6mmo1)在THF (690ml)中的攪拌溶液冷卻至0°C (冰/水浴)。然后在15分鐘內(nèi)逐步加入鋅(粉)(38. lg， 0. 56mol)。將該反應(yīng)混合物在0"C下攪拌30分鐘。然后除去冷卻，將該反應(yīng)混合物緩慢溫至環(huán)境溫度，攪拌16小時(shí)。過濾出固體，用EtOAc和水稀釋濾液。用NaHC03水溶液和H20洗滌有機(jī)層，干燥(Na2S04)，減壓濃縮，得到標(biāo)題化合物，為橙色油狀物(6. 67g，99% )。將產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。 (i)己酸「l-乙酰某-4-(4-浪-苯某)-4-甲某-l,2,3,4-四氡-喹啉-6-某1-酰腔 將在N2氣氣氛中的實(shí)施例9 (h)所述的化合物(7. 54g， 21. Ommol)和三乙胺(3. 52ml，25. 2mmo1)在CH2Cl2(750ml)中的攪拌溶液冷卻至0。C (冰/水浴)。然后在5分鐘內(nèi)滴加N-己酰氯(3. 54ml，25. 2mmo1)，將該反應(yīng)混合物在(TC下攪拌1小時(shí)。然后除去冷卻，將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。然后用NaHC03水溶液使反應(yīng)停止。將有機(jī)相萃取入(^2(:12，用1120洗滌，干燥(Na2S0》，減壓濃縮。通過硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物(H印t : EtOAc1 : 1)，得到標(biāo)題化合物，為黃色泡沫(5. 66g，59% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 457. 3/459. 3 (M+H)+。
實(shí)施例10 N- (1-乙酰某-4-甲某-4-苯某-1, 2, 3,4-四氡-喹啉_6_某)_2_苯氧某-乙酰腔 (a)l-(6-氨某-4-甲某_4_苯某-3,4-二氡_2!1-喹啉-l-某)-乙酮
按照與實(shí)施例9(h)所述相同的方式制備該化合物。 (b)N-(l-乙酰某-4-甲某-4-苯某-l,2,3,4-四氡-喹啉-6-某)-2-苯氧某-乙鍾 向苯氧基乙酸(19. 5mg，0. 13mmo1)在DCM(lml)中的溶液中加入TBTU(52mg，0. 16,1)和DIPEA(26 iil，O. 15mmo1)，在室溫?cái)嚢柙摲磻?yīng)混合物。10分鐘后，加入實(shí)施例10(a)所述的化合物(30mg，0. llmmol)在DCM(lml)中的溶液。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。用飽和NaHC03水溶液使反應(yīng)停止，用DCM萃取。干燥有機(jī)層(Na2S04)，減壓濃縮。通過硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(36mg，81% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 415. 5(M+H)+。
實(shí)施例11 N-(l-乙酰基_4-甲基-4-苯基-1，2，3，4_四氫_喹啉_6_基)_3_(3-氯-苯
某)-丙酰胺 按照與實(shí)施例10所述相同的方式，由實(shí)施例10(a)所述的化合物制備該化合物，得到標(biāo)題化合物(15mg，32% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 447. 3(M+H)+。
實(shí)施例12 N- (1-乙?；?4-甲基-4-苯基-1 ， 2， 3， 4-四氫-喹啉_6_基)_3_噻吩_2_基-丙鍾 按照與實(shí)施例11所述相同的方式，由實(shí)施例10(a)所述的化合物制備該化合物，得到標(biāo)題化合物(21mg，47% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 419(M+H)+。
實(shí)施例13 l-(l-乙酰基_4-甲基-4-苯基-1，2，3，4_四氫_喹啉_6_基)_3_(4-氯-芐某)-脲 按照與實(shí)施例19(d)所述相同的方式，由實(shí)施例10(a)所述的化合物制備該化合物，得到標(biāo)題化合物(55mg，87% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 448(M+H)+。
實(shí)施例14 己酸{1-乙酰某-4- 「4- (3-氟-吡啶-4-某)-苯某V4-甲某-1, 2, 3,4-四氡-喹 啉-6-某卜酰胺 將在N2氣氣氛中的實(shí)施例9中所述的化合物(50mg，0. llmmol) ， 3_氟吡啶_4_硼 酸(42mg，0. 30mmol)，磷酸三鉀七水合物(44mg，0. 13mmol)，雙(三苯膦)鈀(II)氯化物 (4. 6mg， 6. 6 ii mol)，三苯月申(2. 3mg， 7. 6 y mol)和H20 (0. 5ml)在二噁烷(3ml)中的攪拌溶液 加熱至回流5小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度，用NaHC03水溶液猝滅，用EtOAc 稀釋。用40和鹽水洗滌有機(jī)層，干燥(Na^0》，減壓濃縮。通過硅膠柱色譜法、然后用制備 型HPLC純化粗產(chǎn)物。冷凍干燥得到標(biāo)題化合物(10mg， 19% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 474. 5 (M+H)+。
實(shí)施例15 「4- (1-乙酰某-6-己酰氨某-4-甲某-1, 2, 3,4-四氡-喹啉-4-某)-苯某V氨
某甲酸3-氯-芐酯 (a)己酸「1-乙酰某_4-(4-氨某-苯某)_4_甲某-1,2,3,4-四氡-喹
啉-6-某y酰胺 向在N2氣氣氛中的實(shí)施例9所述的化合物(5.08g，ll. lmmol)，三(二亞節(jié)基丙 酮)二鈀(0)氯仿加合物(850mg，0.82mmol)，2，2'-雙(二苯基膦)-1， 1'-聯(lián)萘(850mg， 1.37,1)和叔丁醇鈉(2. 13g，22.2翻l)在DME(200ml)中的攪拌溶液中加入二苯甲酮亞 胺(2. 8ml， 16. 8mmo1)，加熱至8(TC下16小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度，用 EtOAc稀釋，過濾出固體。減壓濃縮濾液，通過硅膠柱色譜法純化(H印t : EtOAc 7:3)， 得到橙色固體。向在N2氣氣氛中的該橙色固體在THF中的攪拌溶液(21ml)中加入2N鹽酸 水溶液。3小時(shí)后，用EtOAc使反應(yīng)混合物猝滅，用2N氫氧化鈉水溶液使其呈堿性，用H20 和鹽水洗滌，干燥(Na2S0》，減壓濃縮，得到標(biāo)題化合物，為橙色油狀物(3.95g，90%)。將 產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。 (b) 4- (1-乙?；?6-己酰氨基-4-甲基-1 ， 2 ， 3 ， 4-四氫-喹啉-4-基)-苯基V氨
某甲酸3-氯-芐酯 按照與實(shí)施例6所述相同的方式，由實(shí)施例15(a)所述的化合物制備該化合物，得 到標(biāo)題化合物(16mg，54% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 562(M+H)+。
實(shí)施例16 「4- (1-乙?；?6-己酰氨基-4-甲基-1， 2， 3， 4-四氫-喹啉-4-基)-苯基V氨
某甲酸甲酯 按照與實(shí)施例6所述相同的方式，由實(shí)施例15(a)所述的化合物制備該化合物，得 到標(biāo)題化合物(10mg，41% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 452(M+H)+。
實(shí)施例17 環(huán)戊烷羧酸(l-乙?；?7-二甲氨基-2，2，4-三甲基-4-苯基-l，2，3，4-四氫-喹 啉-6-某)-酰胺 (a) (1-乙酰基-2， 2，4_三甲基-4-苯基-1， 2， 3，4_四氫-喹啉-6-基)_氨基甲 酸9H-芴-9-某甲酯 將在N2氣氣氛中的實(shí)施例1 (d)所述的化合物(2. 39g， 7. 75mmo1)和吡啶(660 y L， 8. 14mmo1)在干DCM(15ml)中的攪拌溶液冷卻至(TC (冰/水浴)。然后在15分鐘內(nèi)滴加氯甲酸9-芴基甲酯(2. llg，8. 14,1)在于DCM(10ml)中的溶液。30分鐘后，用1120使反應(yīng)停止。萃取有機(jī)相，減少至得到油狀物。通過快速色譜法純化該油狀物。使產(chǎn)物從MeOH/DCM中結(jié)晶，然后過濾出來(lái)，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(3. 94g，96% )。
(b) (1-乙酰某-2,2,4-三甲某-7-硝某-4-苯某-1,2,3,4-四氡-喹啉-6-某)-氡某甲酸9H-茹-9-某甲酯 在3分鐘內(nèi)向在N2氣氣氛中的實(shí)施例17 (a)所述的化合物(3. 94g， 7. 42mmol)在冰醋酸(20ml)和干DCM(10ml)中的攪拌溶液中滴加濃硝酸(310y L，7. 42mmol)。在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘，然后加入濃硝酸(100 ii L， 2. 36mmol)。在環(huán)境溫度下攪拌15分鐘，然后用H^使反應(yīng)停止。萃取有機(jī)相。向有機(jī)相中加入MeOH(2ml)，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去DCM。使產(chǎn)物從MeOH/DCM中結(jié)晶，然后過濾出來(lái)，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(2. 62g，61% )。
(c) (1-乙酰某-7-氨某-2,2,4-三甲某-4-苯某-1,2,3,4-四氡-喹啉-6-某)-氡某甲酸9H-茹-9-某甲酯 將在N2氣氣氛中的實(shí)施例17(b)所述的化合物(100mg，173iimo1)和冰醋酸(100 ii L， 1. 73mmo1)在干THF(3ml)中的攪拌溶液冷卻至(TC (冰/水浴)。在10分鐘內(nèi)逐步加入鋅粉(227mg，3.47mmo1)。除去冷卻，將該反應(yīng)體系溫至環(huán)境溫度，攪拌2小時(shí)。加入新鮮冰醋酸(100 ii L， 1. 73,1)和鋅粉(227mg，3. 47,1) 。 10分鐘后，通過C鹽過濾該反應(yīng)體系。加入DCM。用NaHC03，鹽水洗滌有機(jī)相，干燥(MgS04)，過濾，減少至得到標(biāo)題化合物，為橙色油狀物(95mg， 100% )。 (d) (1-乙酰某-7- 二甲氨某-2, 2,4-三甲某-4-苯某-1, 2, 3,4-四氡-喹
啉-6-某)-氨某甲酸9H-芴-9-某甲酯 向?qū)嵤├?7 (c)所述的化合物(103mg， 189 y mol)在甲醇(2ml)和冰醋酸(135iiL，2.36mmo1)中的攪拌溶液中加入氰基硼氫化鈉(18. 8mg， 302 y mol)，然后加入甲醛在水中的37%溶液(14iiL，189iimo1)。 2小時(shí)后，用NaHC03使反應(yīng)停止，將有機(jī)相萃取入EtOAc。然后用鹽水洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO》，過濾，減少至得到標(biāo)題化合物，為紅色固體(106mg， 100% )。 (e)l-(6-氨基-7-二甲氨基-2，2，4-三甲基_4_苯基_3， 4_ 二氫_2H_喹啉-l-某)-乙酮 向?qū)嵤├?7(d)所述的化合物(380mg，662iimo1)在干DCM(5ml)中的攪拌溶液中加入哌啶(lml)。 2分鐘后，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)使該反應(yīng)混合物減少至得到油狀物。通過快速色譜法純化該油狀物，得到標(biāo)題化合物，為粉紅色固體(232mg， 100% )。 環(huán)戊烷羧酸(l-乙?；?7-二甲氨基-2，2，4-三甲基-4-苯基-l，2，3，4-四氫-喹啉-6-某)-酰胺 向HATU(224mg，590iimo1)和DIPEA (340 ii L， 1. 96mmo1)在DCM(5ml)中的攪拌溶液中加入環(huán)戊烷羰酰氯(128iiL，1. 18mmo1)。在N2氣氣氛中攪拌15分鐘，然后滴加實(shí)施例17(e)所述的化合物(138mg，393踐o1)在DCM(5ml)中的溶液。18小時(shí)后，用0. 5N鹽酸使反應(yīng)停止。用化110)3、1120洗滌有機(jī)相，然后干燥(PE-濾膜)，減少至得到油狀物。通過快速色譜法純化該油狀物，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(147mg，85%)。數(shù)據(jù)(m/z)=448. 5(M+H)+。
實(shí)施例18
N-(l-乙酰某-7- 二甲氨某-4-甲某-4-苯某-1,2,3,4-四氡-喹 啉-6-某)-3- (4-氯-苯某)-丙酰胺 按照與實(shí)施例17所述相同的方式，由實(shí)施例10a所述的化合物制備該化合物，得 到標(biāo)題化合物(14mg，46% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 490(M+H) + 。
實(shí)施例19 乙酰某-7- 二甲氨某-4-甲某-4-苯某-1,2,3,4-四氡-喹
啉-6-某)-3- (2-甲氧某-芐某)-脲 (a) (1-乙酰某-4_甲某-4-苯某-1,2,3,4-四氡-喹啉-6-某)_氨某甲酸 9H-芴-9-某甲酯 按照與實(shí)施例17(a)所述相同的方式，由實(shí)施例10(a)所述的化合物制備該化合 物，得到標(biāo)題化合物(2. 2g，82% ) (b) (1-乙酰某-4-甲某-7-硝某-4-苯某-1, 2, 3,4-四氡-喹啉_6_某)-氨某 甲酸9H-茹-9-某甲酯 按照與實(shí)施例17(b)所述相同的方式，由實(shí)施例19a所述的化合物制備該化合物， 得到標(biāo)題化合物(1. lg，58% ) (c) 1-(6-氨某-4-甲某-7-硝某_4_苯某-3,4_ 二氡_2H_喹啉_1_某)-乙酮
向?qū)嵤├?9(b)所述的化合物(112mg，0. 2mmo1)在CH2Cl2(2ml)中的攪拌溶液中 加入哌啶(0. 2ml，2mmo1)。將該反應(yīng)體系在室溫下攪拌過夜。將該反應(yīng)混合物傾入H20，萃 取入CH^1"用！120和鹽水洗滌有機(jī)相，干燥(Na^0》，減壓濃縮。通過硅膠柱色譜法純化 產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(50mg，76% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 326(M+H)+。 (d)l-(l-乙酰某-4-甲某-7-硝某-4-苯某-1,2,3,4-四氡-喹
啉-6-某)-3- (2-甲氧某-芐某)-脲 向?qū)嵤├?9(c)所述的化合物(20mg，61. 5iimo1)在EtOAc(3ml)中的攪拌溶液中 加入催化劑量的活性炭和雙光氣(15 yl， 123 ii mol)。將該反應(yīng)體系在回流狀態(tài)下加熱4小 時(shí)，然后用C鹽過濾，減壓濃縮。將粗的異氰酸酯溶于CH2C12 (lml)，加入到2-甲氧基芐胺 (16iil，123iimo1) t3N(17iil，123iimol) ^H2Cl2(2ml)中的攪拌溶液中。將該反應(yīng)體 系在室溫下攪拌3天。用H20使該反應(yīng)混合物猝滅，用2NHC1酸化。將產(chǎn)物萃取入CH2C12， 干燥，通過硅膠柱色譜法純化，得到標(biāo)題化合物(23mg，77% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 489(M+H)+。
(e)l-(l-乙酰基-7-氨基_4_甲基_4_苯基_1，2，3，4_四氫_喹 啉-6-某)-3- (2-甲氧某-芐某)-脲 向?qū)嵤├?9(d)所述的化合物(23mg，47iimo1)在干THF(2ml)中的攪拌溶液中加 入H0Ac(27iil，470iimo1)和鋅(62mg， 940 y mol)。將該反應(yīng)體系在室溫下攪拌3小時(shí)。用 C鹽過濾該反應(yīng)混合物，傾倒入H20。將產(chǎn)物萃取入EtOAc。用NaHC03水溶液和鹽水洗滌有 機(jī)相，干燥(Na2S04)，減壓濃縮，得到標(biāo)題化合物(22mg， 100% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 459(M+H)+。
(f)l-(l-乙?；?7- 二甲氨基-4-甲基-4-苯基_1，2，3，4-四氫_喹 啉-6-某)-3- (2-甲氧某-芐某)-脲 向?qū)嵤├?9 (e)所述的化合物(22mg， 47 ii mol)在MeOH (3ml)和HOAc (30 ii 1 ， 588iimo1)中的攪拌溶液中加入甲醛(37%，在1120中，(8 yl， 94 y mol))和NaCNBH3 (6mg， 94 ii mol)。將該反應(yīng)體系在室溫下攪拌過夜。將該反應(yīng)混合物傾倒入H20，萃取入EtOAc。
27(Na^0》，減壓濃縮。通過硅膠柱色譜法純化產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(15. 7mg，69% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 487(M+H)+。
實(shí)施例20 (1-乙酰某-7- 二甲氨某-4-甲某-4-苯某-1, 2, 3,4-四氡-喹啉_6_某)-氨某甲酸噻吩-2-某甲酯 按照與實(shí)施例19所述相同的方式，由實(shí)施例19(c)所述的化合物，使用第一步中的2-噻吩甲醇制備該化合物，得到標(biāo)題化合物(12mg，56% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 464(M+H) + 。
實(shí)施例21 聯(lián)苯-4-羧酸(l-乙酰某-7-甲氧某-2,2,4-三甲某-4-苯某-l,2,3,4-四氡-喹啉-6-某)-酰胺 (a) (2-甲氧某_4_硝某_苯某)_氨某甲酸9H_芴_9_某甲酯將2-甲氧基-4-硝基苯胺(3g，17.8翻l)溶于THF(60ml)，加入吡啶(1.6ml，
19. 6mmo1)。將該反應(yīng)混合物冷卻至0°C ，分小部分加入Fmoc-Cl (5. 07g， 19. 6mmo1)。使該
反應(yīng)體系達(dá)到環(huán)境溫度，保持5小時(shí)。減壓濃縮該反應(yīng)混合物。通過從CH2C12和MeOH中重
結(jié)晶而純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(6.08g，88%)。數(shù)據(jù)(m/z) =391(M+H)+。 (b) (4-氨某-2-甲氧某_苯某)_氨某甲酸9H-芴_9_某甲酯 將實(shí)施例21(a)所述的化合物(64.8g，0. 17mol)溶于THF(1. 51)，加入乙酸
(95ml，1.7mo1)。將該反應(yīng)混合物冷卻至0°C ，分小部分加入新鋅(217. lg， 3. 4mol)。使該
反應(yīng)體系達(dá)到環(huán)境溫度，保持0. 5小時(shí)。用C鹽過濾該反應(yīng)混合物，用飽和NaHC03水溶液
(2x)和鹽水(lx)洗滌濾液，干燥(MgS04)，減壓濃縮。通過從CH2Cl2和Me0H中重結(jié)晶來(lái)純
化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(55. 6g，93% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 361 (M+H)+。 (c) (7-甲氧基-2，2，4-三甲基-l，2-二氫-喹啉-6-基)-氨基甲酸9H-芴-9-基
MM 將實(shí)施例21 (b)所述的化合物(4. 45g， 12. 4,1) ， I2(157mg，0. 62,1)，MgS04(7. 4g，62mmo1)和兒茶酚(61mg，0. 37mmol)溶于/混懸于丙酮(350ml)中。將該反應(yīng)混合物加熱至回流，保持5h。將該反應(yīng)體系冷卻至環(huán)境溫度，用C鹽過濾。減壓濃縮濾液。通過硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(4. 24g，78% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 441 (M+H)+。
(d) (1-乙?；?7-甲氧基-2， 2，4_三甲基-1， 2- 二氫-喹啉_6_基)_氨基甲酸9H-芴-9-某甲酯 將實(shí)施例21 (c)所述的化合物(4. 24g， 9. 5mmo1)溶于CH2C12 (25ml)。首先加入吡啶(25ml)和催化劑量的DMAP，然后滴加乙酰氯(2. 0ml， 28. 5,1)在CH2C12 (20ml)中的溶液。將該反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下保持15分鐘。用(^2(]12稀釋該反應(yīng)混合物，用1120(3力，0. 1MHC1水溶液(3x) ，0. 5M HC1水溶液(lx)萃取，干燥(MgS04)，減壓濃縮。通過硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(3.91g，85% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 483(M+H)+。
(e)l-(6-氨基_7_甲氧基-2， 2， 4_三甲基_2H_喹啉-l-基)-乙酮
將實(shí)施例21 (d)所述的化合物(236mg，0. 49mmol)溶于CH2Cl2(4ml)。加入哌啶(485 1，4. 9mmo1)，將該反應(yīng)混合物保持在環(huán)境溫度下1小時(shí)。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，與甲苯(2x)共蒸發(fā)。通過硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(90mg，71% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 261(M+H)+。
28
(f)聯(lián)苯-4-羧酸(1-乙酰某-7_甲氧某-2,2,4-三甲某-l,2-二氡-喹啉-6-某)-酰胺 將實(shí)施例21 (e)所述的化合物(2. 22g，8. 5,1)溶于甲苯(48ml)和妣啶(2ml)。加入4-聯(lián)苯羰酰氯(2. 21g， 10. 2mmo1)，將該反應(yīng)體系保持在環(huán)境溫度下3小時(shí)。再加入等當(dāng)量的4-聯(lián)苯羰酰氯，將該反應(yīng)體系保持在環(huán)境溫度下1小時(shí)。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，與甲苯(2x)共蒸發(fā)。將殘余物溶于Et0Ac，用飽和NaHC03水溶液，1120和1M HC1水溶液萃取，干燥(MgS04)，減壓濃縮。通過從CH2C12和MeOH中重結(jié)晶來(lái)純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(3. lg，82% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 441(M+H) + 。 (g)聯(lián)苯-4-羧酸(1-乙酰某-7-羥某-2,2,4-三甲某-4-苯某-1,2,3,4-四氫_喹啉-6-某)-酰胺 將實(shí)施例21 (f)所述的化合物(3. lg， 7. 05mmol)溶于苯(100ml)。力口入A1C13(5. 6g，42. 3mmo1)，將該反應(yīng)體系保持在環(huán)境溫度下20小時(shí)。用!120使反應(yīng)停止，通過添加2M NaOH水溶液(63ml)使該反應(yīng)混合物達(dá)到pH 8，萃取。用H20和鹽水洗滌有機(jī)相，干燥(MgS0》，減壓濃縮。通過從乙腈中重結(jié)晶來(lái)純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(195mg，5%)。數(shù)據(jù):(m/z) = 505(M+H)+。 聯(lián)苯-4-羧酸(l-乙酰某-7-甲氧某-2,2,4-三甲某-4-苯某-l,2,3,4-四氡-喹啉-6-某)-酰胺 將實(shí)施例21 (g)所述的化合物(600mg， 1. 2mmo1)溶于乙腈(50ml)。加入K2C03 (821mg， 5. 9,1)，將該反應(yīng)混合物加熱至45 °C ，保持15分鐘。加入Mel (84 ，1. 3mmo1)，將該反應(yīng)混合物保持在45°CT 3小時(shí)。再加入0. 2當(dāng)量的Mel，反應(yīng)在0. 5小時(shí)內(nèi)完成。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，溶于EtOAc，用H20和鹽水洗滌，干燥(MgS04)，減壓濃縮。通過從庚烷/EtOAc中重結(jié)晶來(lái)純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(351mg，56% )。數(shù)據(jù)(m/z)=519(M+H)+。
實(shí)施例22 呋喃_2-羧酸「1-乙?；鵢7-甲氧基-4-(4_甲氧基-苯基)-2， 2， 4_三甲基_1，2 ， 3 ， 4-四氫-喹啉-6-基V酰胺 (a)呋喃-2_羧酸(1_乙?；鵢7_甲氧基_2， 2， 4_三甲基_1 ， 2_ 二氫-喹啉-6-某)-酰胺 將實(shí)施例21 (e)所述的化合物(406mg， 1. 56mmol)溶于CH2Cl2(5ml)。加入2_呋喃羰酰氯(170 iil， 1. 72,1)和DIPEA(815 iU，4. 68mmol)，將該反應(yīng)混合物保持在環(huán)境溫度下15小時(shí)。用H^使反應(yīng)停止，萃取。減壓濃縮有機(jī)相，通過硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(370mg，67% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 355(M+H)+。 呋喃-2_羧酸「1-乙?；鵢7-甲氧基-4-(4_甲氧基-苯基)-2， 2， 4_三甲基_1，2 ， 3 ， 4-四氫-喹啉-6-基V酰胺 將實(shí)施例22 (a)所述的化合物(260mg， 0. 73mmol)和A1C13 (催化劑量)溶于苯甲醚(5ml)，保持在環(huán)境溫度下15小時(shí)。用H20和EtOAc萃取該反應(yīng)混合物。通過硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(301mg，89% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 463(M+H)+。
實(shí)施例23 聯(lián)苯-4-羧酸「1-乙?；?4-(4-氰基甲氧基-苯基)-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-某]-酰胺 (a)聯(lián)苯-4-羧酸「1_乙酰某_4_ (4_甲氧某-苯某)_2, 2,4_三甲某_1, 2, 3,4_四
氫-喹啉-6-某y酰胺 按照與實(shí)施例22所述相同的方式，由實(shí)施例lc所述的化合物制備該化合物，得到標(biāo)題化合物(466mg，60% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 519(M+H)+。 (b)聯(lián)苯-4_羧酸「1-乙酰某-4-(4-羥某-苯某)-2,2,4-三甲某-1,2,3,4-四
氫-喹啉-6-某y酰 將實(shí)施例23 (a)所述的化合物(466mg， 0. 9mmo1)溶于CH2C12 (7ml)，將該反應(yīng)混合物冷卻至0°C 。加入BBr3 (680mg， 2. 7mmo1)，使該反應(yīng)體系達(dá)到環(huán)境溫度，保持3小時(shí)。將該反應(yīng)混合物冷卻至0°C ，緩慢加入1M NaOH在H20和EtOAc中的溶液。酸化該混合物，萃取。干燥有機(jī)相(MgS0》，減壓濃縮。通過硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(125mg，28% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 505(M+H)+。 聯(lián)苯-4-羧酸「1-乙酰某-4-(4-氰某甲氧某-苯某)-2,2,4-三甲某-1,2,3,4-四氫-喹啉-6-某]-酰胺將實(shí)施例23(b)所述的化合物(118mg，0. 2mmo1)溶于DMF(5ml)。力口入
CsC03(325mg， 0.84,1)和(2-氯-乙基)-二乙胺鹽酸鹽(43. 3mg，0. 25mmol)，將該反應(yīng)
混合物保持在環(huán)境溫度下15小時(shí)。用水使反應(yīng)停止，用EtOAc萃取。干燥有機(jī)相(MgS04)，
減壓濃縮。通過制備型HPLC純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(61mg，51% )。數(shù)據(jù)(m/z)=
596(M+H)+。 實(shí)施例24 聯(lián)苯-4-羧酸U-乙?；?2，2，4-三甲基-4-「4-(吡啶-4-基甲氧基)-苯基Vl，2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺 按照與實(shí)施例23所述相同的方式，由實(shí)施例23(b)所述的化合物制備該化合物，得到標(biāo)題化合物(320mg，46% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 414(M+H)+。
實(shí)施例25 「4- (1-乙?；?6-己酰氨基-4-甲基-1， 2， 3， 4-四氫-喹啉-4-基)-苯基V氨某甲酸呋喃_2-某甲酯 按照與實(shí)施例6所述相同的方式，由實(shí)施例實(shí)施例15(a)所述的化合物制備該化合物，得到標(biāo)題化合物(13mg，47% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 518(M+H) + 。
實(shí)施例26 N-(l-乙?；鵢2，2，4-三甲基_4_苯基_1，2，3，4_四氫_喹
啉-6-某)-3- (3-氯-苯某)-丙酰胺 按照與實(shí)施例2所述相同的方式，由實(shí)施例l(d)所述的化合物制備該化合物(12mg，4% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 475 (M+H)。
實(shí)施例27 (1-乙?；鵢4-甲基-4-苯基-1，2，3，4_四氫_喹啉_6_基)-氨基甲酸3_甲
某_丁酯 向在N2氣氣氛中的實(shí)施例10(a)所述的化合物(124mg， 402 y mol)和催化劑量的活性炭在干EtOAc(4.6ml)中的攪拌溶液中加入氯甲酸三氯甲酯(97 yl， 804 y mo)。將該反應(yīng)體系回流攪拌2小時(shí)，然后冷卻至環(huán)境溫度，用dikalite過濾，減壓濃縮，得到粗油狀物(134mg，100% )。在^氣氣氛中，將該油狀物(20mg，0. 065mmol)溶于THF(lml)，加入到3-甲基-l-丁醇(70.8ii 1,0.65,1)禾PTEA(94ii 1,0.65,1)在THF (2ml)中的溶液中。將該反應(yīng)體系在環(huán)境溫度下攪拌過夜，然后用水使反應(yīng)停止，用EtOAc萃取，用鹽水洗滌，干燥(Na^O》，過濾，減少至得到油狀物。通過快速色譜法純化該油狀物(庚烷/EtOAc)，得到標(biāo)題化合物(10. 9mg，42. 5% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 395 (M+H)。
實(shí)施例28 (1-乙酰某-4_甲某-4-苯某-1,2,3,4-四氡_喹啉_6_某)-氨某甲酸1_甲
;S-柳卿酉旨 按照與實(shí)施例27所述相同的方式，使用1-甲基環(huán)丙烷甲醇制備該化合物(19. lmg，68% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 393 (M+H)。
實(shí)施例29 (1-乙酰某-4-甲某-4-苯某-1, 2, 3,4-四氡-喹啉_6_某)-氨某甲酸環(huán)丁某甲跑 按照與實(shí)施例27所述相同的方式，使用環(huán)丁烷甲醇制備該化合物(llmg，40% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 393 (M+H)。
實(shí)施例30 (1-乙酰某-4_甲某-4-苯某-1,2,3,4-四氡_喹啉_6_某)-氨某甲酸(R)-l,
2- 二甲某-丙酯 按照與實(shí)施例27所述相同的方式，使用(R)-(-)_3-甲基_2_ 丁醇制備該化合物(6mg， 2% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 395 (M+H)。
實(shí)施例31 (1-乙?；?4-甲基-4-苯基-1， 2， 3， 4-四氫-喹啉_6_基)-氨基甲酸(1R， 2S，4S)-雙環(huán)「2.2.1]庚-2-某酯 按照與實(shí)施例27所述相同的方式，使用內(nèi)_降冰片制備該化合物(8mg， 27% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 419(M+H)。
實(shí)施例32 (1-乙?；?4-甲基-4-苯基-1， 2， 3， 4， 4a， 8a_六氫-喹啉_6_基)-氨基甲酸環(huán)鵬 按照與實(shí)施例27所述相同的方式，使用戊烯醇制備該化合物(46% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 393 (M+H)。
實(shí)施例33 N-(l-乙酰基_4-甲基-4-苯基-1，2，3，4_四氫_喹啉_6_基)_3_(3-三氟甲
某-苯某)-丙ffi胺 按照與實(shí)施例10所述相同的方式，由實(shí)施例10(a)所述的化合物制備該化合物，得到標(biāo)題化合物(35% )。數(shù)據(jù)(m/z) = 481 (M+H)+。
實(shí)施例34 (1-乙?；鵢4-甲基-4-苯基-1，2，3，4_四氫_喹啉_6_基)-氨基甲酸
3- 氯-4-氟-芐酯
按照與實(shí)施例27所述相同的方式，使用(3-氯-4-氟-苯基)_甲醇制備該化合 物(73. 3% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 467 (M+H)。
實(shí)施例35 5-媳-噻吩-2-羧酸(1-乙酰某-4-甲某-4-苯某_1，2，3，4_四氫-喹 啉-6-某)-酰胺 按照與實(shí)施例10所述相同的方式，使用5-溴_噻吩-2-羧酸制備該化合物 (66% )。數(shù)據(jù):(m/z) = 470 (M+H)。
實(shí)施例36 (+) -1- (1-乙酰某-4-甲某-4-苯某-1, 2, 3,4-四氡-喹啉_6_某)_3_ (4-氯-芐
以實(shí)施例13為原料，通過手性HPLC得到該化合物。柱AD_H(5 ii ) 25x0. 46cm。洗 脫劑庚烷/異丙醇90/10。保留時(shí)間26. 8min。
+ 243。(乙醇，5mg/ml) 實(shí)施例37 (+)-N_(l-乙酰某-2,2,4-三甲某_4_苯某-1,2,3,4-四氡-喹
啉-6-某)-3- (3-氯-苯某)-丙酰胺 以實(shí)施例26為原料，通過手性HPLC得到該化合物。柱AD_H(5 ii ) 25x0. 46cm。洗 脫劑庚烷/異丙醇80/20。保留時(shí)間7. 0min。
+ 349。(乙醇，5mg/ml) 實(shí)施例38 (+)-N_(l-乙酰某-4-甲某-4_苯某-1,2,3,4-四氡-喹啉_6_某)_3_(3-三氟 鴨-錢)-碰月安 以實(shí)施例33為原料，通過手性HPLC得到該化合物。柱AD_H(5 ii ) 25x0. 46cm。洗 脫劑庚烷/異丙醇90/10。保留時(shí)間26. 8min。
[a？ = + 229° (乙醇，5mg/ml)
實(shí)施例39 (+) - (1-乙?；?4-甲基-4-苯基-1 ， 2， 3， 4， 4a， 8a_六氫-喹啉_6_基)-氨基甲 酸環(huán)戊酯 以實(shí)施例32為原料，通過手性HPLC得到該化合物。柱0D_H(5 ii ) 25x 0. 46cm。洗 脫劑庚烷/乙醇85/15。保留時(shí)間6. 6min。["^°= + 278° (乙醇，5mg/m1)
實(shí)施例40 (+)-(1-乙酰基_4-甲基-4-苯基-1，2，3，4_四氫-喹啉-6-基)_氨基甲酸 3-氯-4-氟-芐酯 以實(shí)施例34為原料，通過手性HPLC得到該化合物。柱OD (10 y ) 25x0. 46cm。洗脫 劑庚烷/乙醇80/20。保留時(shí)間8. lmin。
= + 236。(乙醇，5mg/ml) 實(shí)施例41
32
化合物對(duì)在CH0細(xì)胞中表汰的人TSH受體上的TSH的拮抗活件
在使用編碼人TSH受體的質(zhì)粒和具有指導(dǎo)熒火蟲熒光素酶報(bào)道基因表達(dá)的cAMP 效應(yīng)元件(CRE)/啟動(dòng)子的第二種質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞中測(cè)定化合物 對(duì)人TSH受體上的TSH的拮抗活性。牛TSH與Gs-偶合的TSH受體的結(jié)合導(dǎo)致cAMP增加， 由此誘導(dǎo)熒光素酶報(bào)道基因的反式激活增加。使用發(fā)光計(jì)數(shù)器對(duì)熒光素酶活性進(jìn)行定量。 將細(xì)胞與測(cè)試化合物(濃度在0. 316nM-10 ii M)和18nM牛TSH(在該濃度和沒有測(cè)試化合 物存在下誘導(dǎo)80%的最大熒光素酶剌激) 一起孵育。使用軟件程序XLfit (Excel版4.1， ID Business SolutionsLimited)測(cè)定IC5。(測(cè)試化合物導(dǎo)致熒光素酶剌激最大可獲得的 抑制的半數(shù)最大(50% )抑制時(shí)的測(cè)試化合物濃度)和化合物效力。上述實(shí)施例所述的化 合物均具有低于10—6M的IC5。。實(shí)施例12， 13,23， 18， 1， 4， 20， 7， 6， 11， 26， 27， 28， 29， 30， 33， 31， 32， 34， 35， 36， 37， 38， 39和40均表現(xiàn)出IC5。低于1E_7M。
實(shí)施例42 化合物對(duì)在CHO細(xì)胞中表汰的人TSH受體上的人TSI的拮抗活件
在穩(wěn)定表達(dá)人TSH受體和CRE-驅(qū)動(dòng)的熒火蟲熒光素酶報(bào)道基因的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢 (CHO)細(xì)胞(在測(cè)定前在沒有血清存在下培養(yǎng)16h)中測(cè)試3種測(cè)試化合物對(duì)人TSH受體上 的人TSI的拮抗活性。TSI通過下列步驟部分純化自GD患者的血清用0. 45mm濾膜過濾， 蛋白質(zhì)G-瓊脂糖柱色譜，用磷酸鹽緩沖鹽水透析，然后在10K超濾膜上濃縮。證實(shí)TSI制 品在缺乏人TSHR的對(duì)照組CHO細(xì)胞中不會(huì)活化熒光素酶活性。在測(cè)定培養(yǎng)基中包括cAMP 磷酸二酯酶抑制劑咯利普蘭(10 yM)以增加TSHR-誘導(dǎo)的CRE-熒光素酶合成，使用發(fā)光 計(jì)數(shù)器對(duì)其進(jìn)行定量。將細(xì)胞與化合物A， B或C(O. 316nM-10 y M)禾P 3. 16mg/ml TSI (或 18nM等效濃度的牛TSH) —起孵育?；衔顰是己酸(1_乙酰基-2， 2， 4-三甲基-4-苯 基-l，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-酰胺(參見實(shí)施例l)。化合物B是(l-乙?；?4-甲 基-4-苯基-1， 2， 3， 4， 4a， 8a_六氫-喹啉_6_基)-氨基甲酸環(huán)戊酯的對(duì)映體(參見實(shí)施 例39)?；衔顲是(1-乙?；?4-甲基-4-苯基-1 ， 2， 3， 4-四氫-喹啉_6_基)-氨基甲 酸3-氯-4-氟-芐酯的對(duì)映體(參見實(shí)施例40)。全部3種化合物均為完全拮抗劑并且顯 示出低于10—6M的IQ。(表I)。
表I IC50(TSI) IC50(bTSH) 化合物A 88nM 368nM
化合物B 12nM 48nM
化合物C 47nM 192nM
實(shí)施例43 化合物對(duì)CHO細(xì)胞中表達(dá)的組成型活性人TSH受體的拮抗活性
在對(duì)導(dǎo)致甲狀腺功能亢進(jìn)的自主功能性甲狀腺結(jié)節(jié)中鑒定的5種最普遍的組 成型活性人TSHR突變體(Thr632Ile， Ala623Val， 11e568Thr， Asp619Gly和Asp633Glu) (vanSande等(1995) J. CI in. Endocrinol. Metabol. 80， 2577-2585)之 一 進(jìn)行編碼的質(zhì)粒 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞中測(cè)定了兩種化合物的拮抗活性。將細(xì)胞與10—、的 實(shí)施例35或?qū)嵤├?的化合物一起在10 ii M咯利普蘭存在下孵育。使用Packard cAMP Alphascreen測(cè)定法對(duì)TSH受體突變體的活性進(jìn)行定量。兩種化合物在10—6M濃度下抑制了全部5種受體突變體的組成型活性達(dá)> 80% 。
權(quán)利要求
通式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽在制備用于治療或預(yù)防對(duì)TSH受體介導(dǎo)的途徑有應(yīng)答的疾病中的應(yīng)用，式I其中R1是H或甲基；X是鍵，O，NH或N((1-4C)烷基)；R2是(1-4C)烷基，R5(1-4C)烷基或R9(2-4C)烷基，如果X是NH，則R2是R8(1-2C)烷氧羰基；或，如果X是鍵，則R2是H，鹵素或(2-5C)雜芳基或苯基，后兩種基團(tuán)任選被一個(gè)或多個(gè)選自(1-3C)烷基，(1-3C)烷氧基或鹵素的取代基取代；Y是鍵，O或NH，而如果Y是鍵，則R3是苯基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素，羥基，甲氧基，苯氧基，苯基，(1-4C)烷基，硝基，氨基或(二)[(1-4C)烷基]氨基的取代基取代，或R3是R6(1-6C)烷基，R6(3-6C)環(huán)烷基，R7氧基(1-6C)烷基，或2-吡啶基或R3是5-元雜芳基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自(1-3C)烷氧基，(1-3C)烷基或鹵素的取代基取代；如果Y是O，則R3是R6(1-6C)烷基，R7氧基(2-6C)烷基或(3-7C)環(huán)烷基；且如果Y是NH，則R3是R6(1-6C)烷基，R7氧基(2-6C)烷基；R4是H，(二)[(1-3C)烷基]氨基或(1-3C)烷氧基；R5是N或吡啶基；R6是H，或(3-5C)環(huán)烷基，(2-5C)雜芳基或苯基，后三種基團(tuán)任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素，(1-4C)烷氧基或(1-4C)烷基的取代基取代，后兩種基團(tuán)任選被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代；R7是(2-5C)雜芳基或苯基，它們?nèi)芜x被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素，(1-4C)烷氧基或(1-4C)烷基的取代基取代；R8是H或(2-5C)雜芳基或苯基，后兩種基團(tuán)任選被一個(gè)或多個(gè)選自(1-3C)烷基，(1-3C)烷氧基或鹵素的取代基取代；且R9是(二)[(1-4C)烷基]氨基或(2-6C)雜環(huán)烷基。FPA00001037920800011.tif
2. 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其中式I上的X是鍵或O。
3. 權(quán)利要求2的應(yīng)用，其中X是鍵，且式I上的f是H。
4. 權(quán)利要求1和2的應(yīng)用，其中式I上的I^是RS(1-4C)烷基，且X是O。
5. 權(quán)利要求1-4的應(yīng)用，其中式I上的W是H或(二)[(1-3C)烷基]氨基。
6. 權(quán)利要求1-5的應(yīng)用，其中式I的化合物具有(+)旋光性。
7. 如權(quán)利要求1-5中所述的式I的化合物，該化合物具有(+)旋光性。
8. —種化合物，選自己酸(1-乙?；鵢2， 2， 4-三甲基-4-苯基-1， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基)-酰胺，1-甲基-lH-吡咯-2-羧酸(1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-苯基-1，2，3，4-四氫_喹啉-6-基)-酰胺，N- (1-乙?；?2， 2， 4-三甲基-4-苯基-1， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基)-5-溴-2-甲氨基-苯甲酰胺，吡啶_2-羧酸(1-乙?；?2， 2， 4-三甲基-4-苯基-1， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基)-酰胺，N-(l-乙?；?2，2，4-三甲基-4-苯基-l，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-3，4-二甲基-苯甲酰胺，(1-乙?；鵢2， 2， 4-三甲基-4-苯基-1， 2， 3， 4-四氫-喹啉_6_基)-氨基甲酸2-苯氧基-乙酯，(1-乙酰基-2， 2， 4-三甲基-4-苯基-1， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基)-氨基甲酸丁酯，l-(l-乙?；?2，2，4-三甲基-4-苯基-l，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-3-環(huán)戊基-脲，己酸[1-乙?；鵢4-(4-溴-苯基)-4-甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基]-酰胺，N-(l-乙?；?4-甲基-4-苯基-1，2，3，4-四氫-喹啉_6-基)-2-苯氧基-乙酰胺，N- (1-乙?；?4-甲基-4-苯基-1 ， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基)-3- (3-氯-苯基)-丙酰胺，N- (1-乙?；?4-甲基-4-苯基-1， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基)-3-噻吩-2-基-丙酰胺，1- (1-乙?；鵢4-甲基-4-苯基-1 ， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基)-3- (4-氯-芐基)-脲，己酸{1-乙?；?4-[4-(3-氟-吡啶-4-基)-苯基]-4-甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺，[4- (1-乙?；?6-己酰氨基-4-甲基-1 ， 2， 3， 4-四氫-喹啉-4-基)-苯基]-氨基甲酸3-氯-芐酯，[4- (1-乙?；?6-己酰氨基-4-甲基-1 ， 2， 3， 4-四氫-喹啉-4-基)-苯基]-氨基甲酸甲酯，環(huán)戊烷羧酸(1-乙?；鵢7- 二甲氨基-2， 2， 4-三甲基-4-苯基-1， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基)-酰胺，N-(l-乙酰基-7- 二甲氨基-4-甲基-4-苯基_1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)_3-(4-氯-苯基)_丙酰胺，1- (1-乙酰基-7- 二甲氨基-4-甲基-4-苯基-1 ， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基)-3- (2-甲氧基-芐基)-脲，(1-乙?；?7- 二甲氨基-4-甲基-4-苯基-1 ， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基)-氨基甲酸噻吩-2-基甲酯聯(lián)苯基-4-羧酸(1-乙酰基-7-甲氧基-2， 2， 4-三甲基-4-苯基-1， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基)-酰胺，呋喃_2-羧酸[1-乙?；鵢7-甲氧基-4-(4-甲氧基-苯基)-2， 2， 4-三甲基-1， 2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基]-酰胺，聯(lián)苯-4-羧酸[l-乙?；?4-(4-氰基甲氧基-苯基)-2，2，4-三甲基-l，2，3，4-四 氫-喹啉-6-基]-酰胺，聯(lián)苯_4-羧酸{1-乙?；鵢2，2，4-三甲基_4-[4-(妣啶-4-基甲氧基)-苯基]-1，2， 3， 4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺，[4- (1-乙?；?6-己酰氨基-4-甲基-1 ， 2， 3， 4-四氫-喹啉-4-基)-苯基]-氨基甲 酸呋喃_2-基甲酯，N-(l-乙?；?2，2，4-三甲基 基)-丙酰胺，(1-乙?；?4-甲基-4-苯基酯，(1-乙酰基-4-甲基-4-苯基 丙基甲酯，(1-乙酰基-4-甲基-4-苯基(1-乙?；?4-甲基-4-苯基 甲基-丙酯，(l-乙?；?4-甲基-4-苯基-l，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-氨基甲酸(1R，2S，4S)-雙 環(huán)[2. 2. 1]庚-2-基酯，(1-乙?；?4-甲基-4-苯基-1 ， 2， 3， 4， 4a， 8a_六氫-喹啉_6_基)-氨基甲酸環(huán)戊酯，N-(l-乙?；?4-甲基-4-苯基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-3-(3-基)-丙酰胺，(l-乙酰基-4-甲基-4-苯基-l，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-氨基甲酸3酯，5-溴-噻吩-2-羧酸(1-乙?；?4- S胺，(+)-1-(1-乙?；鵢4-甲基-4-苯基 基)-脲，(+)-N-(l-乙酰基-2， 2， 4-三 啉-6-基)-3- (3-氯-苯基)-丙酰胺，(+)-N-(l-乙?；鵢4-甲基-4-苯基 基-苯基)-丙酰胺，(+) _ (1-乙?；?4-甲基-4-苯基-1， 2， 3， 4， 4a， 8a_六氫-喹啉_6_基)-氨基甲酸環(huán) 戊酯，或(+)-(1-乙?；鵢4-甲基-4-苯基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-氨基甲酸 3-氯-4-氟-芐酯。
9. 一種藥物組合物，包含權(quán)利要求1-8中定義的化合物和藥學(xué)可接受的助劑，該藥物-4-苯基-1，2，3，4-四氫-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-1，2，3，4-四氫-喹啉-6 -1，2，3，4-四氫-喹啉-6喹啉-6-基)-3-(3-氯-苯基)-氨基甲酸3-甲基-丁基)-氨基甲酸l-甲基-環(huán)基)-氨基甲酸環(huán)丁基甲酯， 基)-氨基甲酸(R)-l，2-二三氟甲基-苯 -氯-4-氟-芐3基-4-苯基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-酰 -1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-3-(4-氯-芐 甲基-4-苯基-1，2，3，4-四氫_喹 -1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-3-(3-三氟甲組合物用于治療或預(yù)防對(duì)TSH， TSI或TSH受體的組成型活性的作用有應(yīng)答的疾病。
10. 權(quán)利要求1-6的應(yīng)用，其中所述疾病、病癥或障礙選自甲狀腺功能亢進(jìn)，格雷夫斯 病，格雷夫斯眼病，與格雷夫斯病相關(guān)的脛骨前皮膚病，結(jié)節(jié)性甲狀腺腫和甲狀腺癌。
11. 用于治療或預(yù)防對(duì)TSH受體介導(dǎo)的途徑有應(yīng)答的疾病的試劑盒，該試劑盒包括A) 包含如權(quán)利要求1-8中定義的式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽的藥物組合物；和B)描述 使用該藥物組合物治療或預(yù)防對(duì)TSH受體介導(dǎo)的途徑有應(yīng)答的疾病的方法的說(shuō)明書。
全文摘要
本發(fā)明涉及化合物、藥物組合物和試劑盒在治療或預(yù)防對(duì)TSH受體介導(dǎo)的途徑有應(yīng)答的哺乳動(dòng)物的疾病中的應(yīng)用，所述疾病包括，例如甲狀腺功能亢進(jìn)，格雷夫斯病，格雷夫斯眼病，與格雷夫斯病相關(guān)的脛骨前皮膚病，結(jié)節(jié)性甲狀腺腫和甲狀腺癌等疾病，該應(yīng)用包括對(duì)所述哺乳動(dòng)物給予有效量的式(I)的四氫喹啉化合物或其藥學(xué)可接受的鹽。
文檔編號(hào)A61K31/47GK101790376SQ200880104589
公開日2010年7月28日 申請(qǐng)日期2008年8月28日 優(yōu)先權(quán)日2007年8月31日
發(fā)明者C·J·范科彭, C·M·蒂默斯, P·G·M·康蒂, R·普拉特, W·F·J·卡斯坦斯 申請(qǐng)人:歐加農(nóng)股份有限公司