專利名稱：包含酵母的藥物產(chǎn)品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物產(chǎn)品，其能可控釋放其所含的藥物活性成分，該藥物產(chǎn)品包
含能夠發(fā)酵的酵母，發(fā)酵產(chǎn)生的二氧化碳使藥物活性成分從該藥物產(chǎn)品中釋放出。
背景技術(shù)：
在許多疾病的藥物治療中，例如傳染病、心血管系統(tǒng)疾病、過(guò)敏、疼痛或激素平衡失調(diào)的情況下，希望將血液或組織中的藥物活性成分長(zhǎng)時(shí)間維持在恒定的水平。為達(dá)到這一目的，特別是對(duì)于在血漿中無(wú)較長(zhǎng)半衰期的藥物活性成分，正在使用具有改良活性成分釋放體系的劑型。這種劑型包括具有長(zhǎng)期活性成分釋放的體系、具有延遲釋放的體系和具有活性成分脈沖釋放的體系。這里的主要目的是減少個(gè)體內(nèi)和個(gè)體間血漿水平的差異。具體而言，其目的是避免出現(xiàn)血漿水平峰值和由此帶來(lái)的副作用風(fēng)險(xiǎn)的增加。此外，通過(guò)使用這些劑型，特別是由于易于控制并減少了服藥的頻率，可以避免錯(cuò)誤服藥，并能夠改善病人的依從性。 具有改良活性成分釋放體系的劑型也被用于受生理節(jié)律影響的疾病狀態(tài)的藥物治療中，其中的癥狀往往在一天的某些時(shí)間內(nèi)發(fā)生得更頻繁或更嚴(yán)重。 在現(xiàn)有技術(shù)中，已知有多種可能來(lái)影響由藥物產(chǎn)品中釋放藥物活性成分。例如，可以改變藥物活性成分的理化性質(zhì)從而改變其溶出速率。除此之外，現(xiàn)有技術(shù)包括將藥物活性成分與離子交換樹(shù)脂結(jié)合或選擇粒徑大小。藥學(xué)工藝措施涉及到賦形劑的選擇和劑型的設(shè)計(jì)。因此，通過(guò)包衣或基質(zhì)形成劑的性質(zhì)或劑型的結(jié)構(gòu)能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)藥物活性成分釋放的改變。關(guān)于活性成分釋放的動(dòng)力學(xué)， 一般可分為擴(kuò)散受控、侵蝕受控和滲透受控的釋放體系。

發(fā)明內(nèi)容
然而，在已知的藥物活性成分可控釋放的藥物產(chǎn)品中，藥物活性成分的釋放并非不受環(huán)境條件的影響，因此活性成分的釋放可能會(huì)受到不可預(yù)測(cè)的波動(dòng)的影響。因此，本發(fā)明的目的是開(kāi)發(fā)一種藥物產(chǎn)品，其中，藥物活性成分的釋放盡可能不受環(huán)境條件的影響。
這個(gè)目的是通過(guò)提供含有能夠成醇發(fā)酵的可藥用微生物(例如酵母)的藥物產(chǎn)品來(lái)實(shí)現(xiàn)的。施用該藥物產(chǎn)品以后，通過(guò)成醇發(fā)酵開(kāi)始時(shí)發(fā)生的二氧化碳的產(chǎn)生過(guò)程來(lái)控制在所述藥物產(chǎn)品中所含的藥物活性成分的釋放。含有酵母細(xì)胞的藥物產(chǎn)品已經(jīng)是已知的。例如，可使用商品名稱為Perentero產(chǎn)和
Yomagi⑧的膠囊，其包含藥用酵母布拉酵母(Saccharomycesboulardii)。在這些用于治療
腹瀉疾病的藥物產(chǎn)品中，由于其功能是重建腸道菌群從而對(duì)抗腹瀉，酵母本身被視為該藥物產(chǎn)品的治療活性成分。 此外，現(xiàn)有技術(shù)中已知的藥物產(chǎn)品中，施用所述的藥物產(chǎn)品后在其內(nèi)部形成二氧化碳。因此，例如，在公開(kāi)的申請(qǐng)WO 03/0112 Al和US2006/003003 Al中描述了胃內(nèi)滯留體系(gastroretentive system)，其利用了通過(guò)形成二氧化碳而產(chǎn)生的浮力來(lái)浮在胃內(nèi)含
3有的食糜或液體上。這樣，可以實(shí)現(xiàn)藥物產(chǎn)品在胃內(nèi)滯留時(shí)間的延長(zhǎng)。 根據(jù)W0 2006/024638 A2，在施用藥物產(chǎn)品以后形成的二氧化碳也可用于在胃中
混合藥物活性成分和食物，這引起了延遲效應(yīng)(retarding effect)。 例如，在JP 2003 231629 A中所述，也可利用在藥物產(chǎn)品內(nèi)產(chǎn)生二氧化碳來(lái)加速 劑型在其施用后的崩解。 在使用在其施用后生成的二氧化碳的已知藥物產(chǎn)品中，二氧化碳的生成是通過(guò)將 鹽，通常是碳酸鈉，暴露于酸而引起的。在任何可能的情況下，該化學(xué)反應(yīng)都難以控制。
本發(fā)明是基于下面的思考，根據(jù)該思考，要使藥物活性成分的釋放很大程度上不 受環(huán)境條件的影響，則必須使二氧化碳的產(chǎn)生可控，而根據(jù)該思考，在藥物產(chǎn)品中的成醇發(fā) 酵過(guò)程中發(fā)生的二氧化碳的產(chǎn)生可能是可控的。 令人驚訝的是，申請(qǐng)人進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)已經(jīng)顯示出，藥物產(chǎn)品中的藥物活性成分釋放 的動(dòng)力學(xué)確實(shí)能夠通過(guò)在酵母發(fā)酵中形成的二氧化碳來(lái)控制。


圖1顯示了由酵母發(fā)酵過(guò)程中形成的二氧化碳引起的20毫升01111^6乂@注射器中
體積膨脹的時(shí)間相關(guān)性過(guò)程。 圖2顯示了由酵母發(fā)酵過(guò)程中形成的二氧化碳引起的從模型藥物釋放撲熱息痛 的時(shí)間相關(guān)性過(guò)程。 圖3顯示了用于藥物活性成分的帶包衣釋放體系整體的示意圖，所述體系基于糖 漿、酵母和藥物活性成分。
具體實(shí)施例方式
因此，本發(fā)明的主題是藥物產(chǎn)品，除了其所含的藥物活性成分，該藥物產(chǎn)品還包含 可藥用的能夠發(fā)酵的酵母細(xì)胞。在本發(fā)明的含義中，即使在下文中術(shù)語(yǔ)"酵母"以其單數(shù)形 式使用，在藥物產(chǎn)品中含有的酵母細(xì)胞總是指多個(gè)酵母細(xì)胞。 酵母，或芽生菌，屬于原子囊菌亞綱。在最廣泛的認(rèn)識(shí)中，酵母典型的無(wú)性繁殖類 型是細(xì)胞發(fā)芽。然而，有些酵母通過(guò)分裂或分裂和發(fā)芽之間的過(guò)渡形式繁殖。因此，芽苞可 保持互相連接而作為芽的附聚物或作為假菌絲體，或者他們可以彼此完全分離，大量的酵 母種形成不分離的或分離的菌絲。 特別適用于根據(jù)本發(fā)明的藥物產(chǎn)品中的酵母是那些在烘培、釀造和酒業(yè)中所使用 的酵母。酵母菌屬釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、卡爾斯伯酵母(Saccharomyces carlsbergensis)、葡萄汁酵母(Saccharomyces uvarum)、布拉酵母、少孢酵母 (Saccharomyces exig皿s)禾口路德類酵母(Saccharomycesludwigii)可以作為這禾中酵母的 實(shí)例。但也可使用非酵母菌屬如無(wú)名假絲酵母(Candida famala)、星形假絲酵母(Candida stellate) 、 Dekkera br證llensis、漢遜氏酵母(Hane固la證進(jìn))、乳酸克魯維酵母 (Kluyveromyces lactis)、而f熱克魯維酵母(Kluyveromyces thermotolerans)、美極梅奇 酵母(Metschnikowi即ulcherrima)或德?tīng)柌加墟呓湍?Torulaspora delbrueckii)。
優(yōu)選地，在根據(jù)本發(fā)明的藥物產(chǎn)品中使用純酵母菌株。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，藥物 產(chǎn)品包含面包酵母(釀酒酵母)。然而，還可以互相組合使用兩種以上的酵母菌株，以控制
4藥物產(chǎn)品中的發(fā)酵過(guò)程。 大體上，藥物產(chǎn)品中含有的酵母可以為新鮮酵母。然而，特別優(yōu)選使用速干酵母 (instant dry yeast)形式的酵母來(lái)制備藥物產(chǎn)品。 在成醇發(fā)酵中，葡萄糖在厭氧條件下通過(guò)酵母代謝，生成乙醇和二氧化碳
C6H1206 — 2C2H50H+2C02 因此，葡萄糖是成醇發(fā)酵的基本離析物。根據(jù)本發(fā)明的藥物產(chǎn)品的具體實(shí)施方式
可利用這樣的事實(shí)消化道內(nèi)的食糜含有通過(guò)在藥物產(chǎn)品中含有的酵母能夠用于發(fā)酵的碳 水化合物，特別是葡萄糖。在這些實(shí)施方式中，如果在食糜中包含的糖能夠進(jìn)入藥物產(chǎn)品， 本發(fā)明的藥物產(chǎn)品就不需要同時(shí)包含發(fā)酵所需的糖。 然而，在優(yōu)選的實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的藥物產(chǎn)品還包含了發(fā)酵所需的碳水化 合物。特別優(yōu)選地，藥物產(chǎn)品含有葡萄糖。 除了葡萄糖，或者作為葡萄糖的補(bǔ)充，也可將其他的糖或其混合物用于通過(guò)藥物
產(chǎn)品中包含的酵母的發(fā)酵。例如，在藥物產(chǎn)品中可以使用果糖、半乳糖、蔗糖、麥芽糖、麥芽
三糖、棉子糖或這些糖的任意混合物。此外還可以使用糖或淀粉的衍生物，例如糊精。
藥物產(chǎn)品包括包衣。以下是適合制作包衣的材料-纖維素醚，例如 羥丙基甲基纖維素或乙基纖維素；-纖維素酯，例如乙酸纖維素、乙酸丁酸纖維素或乙酸丙酸纖維素；-聚丙烯酸酯和聚甲基丙烯酸酯，例如，商標(biāo)為Eudragit②RS 、Eudragit⑧RL或
Eudragit^的市售可得的產(chǎn)品；-聚乙烯基衍生物，例如，聚乙酸乙烯酯；-聚甲基乙烯基醚與丙二酸的共聚物，或與丙二酸的乙基酯、異丙基酯和正丁基酯 的共聚物，例如，商標(biāo)為0&11加2@八1\[的市售可得的產(chǎn)品。 也可將上述聚合物的混合物用于包衣，例如重量比為60 : 40的乙基纖維素和羥
丙基纖維素。 此外，可以向包衣添加合適的賦形劑，通過(guò)賦形劑能夠改善包衣的性質(zhì)。例如，適 合的賦形劑為增塑劑、潤(rùn)濕劑或色素?？捎玫脑鏊軇┑睦訛轷?，如檸檬酸三乙酯、檸檬酸 三丁酯、檸檬酸乙?；阴?、酒石酸二丁酯、癸二酸二乙酯、鄰苯二甲酸二甲酯、鄰苯二甲 酸二乙酯、鄰苯二甲酸二辛酯、蓖麻油、芝麻油、三乙酸甘油酯、二乙酸甘油酯；高級(jí)醇，如甘 油或1，2-丙二醇；或聚醚，如聚乙二醇。 合適的潤(rùn)濕劑為，例如，PEG400硬脂酸酯、去水山梨糖醇單油酸酯和PEG去水山梨 糖醇單油酸酯。 合適的色素為，例如，二氧化鈦和氧化鐵。 由于包衣的機(jī)械性能，如彈性、脆性和強(qiáng)度，以及包衣層的厚度對(duì)藥物活性成分的 釋放有影響，因此通過(guò)加入上述賦形劑可以改變包衣的特性。 因此，在一個(gè)實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的藥物產(chǎn)品可具有與滲透性可控釋放體系 相類似的結(jié)構(gòu)，這樣作為發(fā)酵結(jié)果而形成的二氧化碳將會(huì)迫使活性成分溶液或活性成分懸 浮液通過(guò)藥物產(chǎn)品中的釋放孔到外部。這樣就可以實(shí)現(xiàn)藥物活性成分的在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)的持
5續(xù)釋放。 該實(shí)施方式的優(yōu)選包衣是乙酸纖維素的包衣，因?yàn)槠涮卣鳛閺?qiáng)度特別高。
在其他的實(shí)施方式中，藥物產(chǎn)品可為以沖擊(burst)或脈沖方式釋放藥物活性成 分的釋放體系。在這些情況下，釋放可以相對(duì)快速地發(fā)生或延遲一定時(shí)間后發(fā)生。為確定 藥物活性成分的釋放，該體系可為整體的或由多個(gè)單獨(dú)單元(多元單元)組成。如果所有 的多元單元都具有相同的釋放特性，則可以實(shí)現(xiàn)多元單元中所含有的藥物活性成分的沖擊 釋放(burst release)。如果多元單元有不同的釋放特性，則藥物活性成份可以脈沖釋放。
根據(jù)包衣的特性，酵母可以在施用劑型以后立即開(kāi)始發(fā)酵，或者延遲一定時(shí)間后 發(fā)酵，這樣根據(jù)本發(fā)明的藥物產(chǎn)品也可以延遲釋放藥物活性成分。 用于沖擊、脈沖和/或延遲釋放藥物活性成分的釋放體系的優(yōu)選包衣為乙基纖維 素或基于乙基纖維素的包衣，其特性可以通過(guò)增塑劑和/或改變包衣層的厚度來(lái)改變。例 如，加入如檸檬酸三乙酯的增塑劑比加入癸二酸二丁酯會(huì)在更大程度上增加包衣的彈性和 強(qiáng)度。 特別是使用干酵母時(shí)，需要水來(lái)實(shí)現(xiàn)酵母的再水化。水可以在服用劑型時(shí)，或者以 已經(jīng)在胃腸道內(nèi)存在的水的形式，由外部進(jìn)入劑型內(nèi)。在具體的實(shí)施方式中，再水化所需的 水已經(jīng)包含在劑型中。為了避免劑型中酵母的過(guò)早活化及其發(fā)酵，最初必須通過(guò)將水置于 分開(kāi)的間隔內(nèi)與酵母分開(kāi)。要活化酵母，必須破壞(例如通過(guò)粉碎)含水間隔的壁。這樣， 水進(jìn)入與酵母接觸，從而能夠使酵母再水化并引發(fā)發(fā)酵。
實(shí)施例1 為了檢驗(yàn)是否少量的離析物就已經(jīng)足以產(chǎn)生足夠的二氧化碳而能夠?qū)崿F(xiàn)藥物活 性成分的釋放，將25mg至100mg的酵母，最多為100mg的一水合葡萄糖和500 y 1的純凈水
互相混合，并將其加入至20ml的一次性注射器(Omnifb^)中，并將注射器的注射孔封閉。
插入內(nèi)芯后，將填充的注射器在37t:下培養(yǎng)。記錄內(nèi)芯的移動(dòng)，其表明注射器內(nèi)體積的增
加，作為產(chǎn)生二氧化碳的量度。 本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果如圖l所示，其中使用的酵母(Y)的量是以mg標(biāo)明，以mg給出使用 的一水合葡萄糖(G)的量，且以Pl給出純凈水(A)的量。標(biāo)明的值是6個(gè)單獨(dú)值的平均 值。除了時(shí)間相關(guān)的體積膨脹過(guò)程，很明顯地，使用的酵母和葡萄糖的量的比例對(duì)二氧化碳 產(chǎn)生的動(dòng)力學(xué)有影響。在藥物產(chǎn)品的制備中可利用這一現(xiàn)象，用于調(diào)節(jié)在藥物產(chǎn)品中所含 的藥物活性成分的釋放速率。
實(shí)施例2 更深入的實(shí)驗(yàn)的目的是證實(shí)通過(guò)發(fā)酵過(guò)程中形成的二氧化碳是否可以在足夠長(zhǎng) 的時(shí)間釋放藥物活性成分。為此目的，將在聚乙二醇和高度分散的二氧化硅的混合物中的 撲熱息痛填入到一次性注射器中。用插入到注射器中的小片覆蓋該混合物；隨后，將酵母、 葡萄糖和水的混合物置于小片上，并在填充孔封閉該注射器。從圖2的圖例中可以看出，酵 母(Y)和一水合葡萄糖(G)的量分別以mg、mg計(jì)。用于激活的水的量為125 iU。
將由此建立的模型劑型在溶解測(cè)試儀中在100rpm和37t:下在900ml水中培養(yǎng)，并 在不同的時(shí)間點(diǎn)測(cè)定釋放到周圍水中的撲熱息痛的量。 上述實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示在表2中。所示的測(cè)量結(jié)果為n = 3的平均值。 發(fā)現(xiàn)借助發(fā)酵產(chǎn)生的二氧化碳，可以從模型藥物產(chǎn)品中持續(xù)較長(zhǎng)的時(shí)間釋放藥物
6活性成分。此外，藥物活性成分釋放的動(dòng)力學(xué)取決于酵母的用量。因此，通過(guò)藥物產(chǎn)品中酵
母和/或葡萄糖的量可以控制活性成分的釋放速率。 實(shí)施例3"滲透性"可控的釋放體系 與滲透性可控的釋放體系類似，形成的二氧化碳可在劑型內(nèi)部產(chǎn)生壓力，該壓力 迫使藥物活性成分的溶液/懸浮液通過(guò)釋放開(kāi)口到達(dá)外部。如下所述制備這樣的釋放體 系










活性成分層 內(nèi)部相
外部相
膨脹層 內(nèi)部相
活性成分
羥丙基甲基纖維素
聚氧化乙烯
硬脂酸鎂
高度分散的二氧化硅
聚氧化乙烯 一水合葡萄糖 干酵母 硬脂酸鎂
22. 5% it. 6. 0% it. 70. 0% it. 1. 0% it. 0. 5% it.
49. 0% 40. 0% 10. 0%
-wt. -wt. —wt.
1. 0% it.
隨后，加入各自的外部相并將兩種顆粒壓
外部相
將兩層各自的內(nèi)部相的組分分別制粒' 成兩面凸的雙層片。為這樣得到的藥片提供透水不透氣的包衣，將已經(jīng)溶于970ml丙酮的 20g乙酸纖維素與已經(jīng)溶于30ml水的4. 5g聚乙二醇400混合包覆形成該包衣。此后，為釋 放活性成分，在雙層片的含活性成分層區(qū)域的包衣上鉆孔。
實(shí)施例4 如下所述制備活性成分沖擊釋放的釋放體系
糖漿 —水合葡萄糖 71.4%
純凈水 28.6%
劑型 糖漿 40%
微粒化的干酵母 40%
藥物活性成分撲熱息痛20% 首先，制備糖漿。在冷卻時(shí)，將干酵母和藥物活性成分摻入糖漿中并形成小球，隨 后為其提供盡可能不透氣的透水包衣，包覆已經(jīng)溶解于200ml乙醇的20g乙基纖維素和4g 癸二酸二丁酯形成該包衣。在圖3中顯示了包含酵母(▲)和藥物活性成分(o)的該藥物 活性成分釋放體系。
權(quán)利要求
一種藥物產(chǎn)品，用于可控釋放其所含的藥物活性成分，其特征在于，所述藥物產(chǎn)品包含能夠發(fā)酵的可藥用的酵母。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物產(chǎn)品，其特征在于，所述酵母選自釀酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae)、卡爾斯伯酵母(Saccharomycescarlsbergensis)、葡萄 汁酵母(Saccharomyces uvarum)、布拉酵母(Saccharomyces boulardii)、少孢酵母 (Saccharomyces exig皿s)禾口路德類酵母(Saccharomyces ludwigii)、無(wú)名假絲酵母 (Candida f塞la)、星形假絲酵母(Candida stellate) 、 Dekkera br證llensis、漢遜氏 酵母(Hane固la證進(jìn))、乳酸克魯維酵母(Kluyveromyces lactis)、耐熱克魯維酵母 (Kluyveromycesthermotolerans)、美極梅奇酵母(Metschnikowia pulcherrima)、德?tīng)柌?有孢酵母(Torulaspora delbrueckii)和其混合物中。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物產(chǎn)品，其特征在于，所述酵母為新鮮酵母或干酵母。
4. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的藥物產(chǎn)品，其特征在于，所述藥物產(chǎn)品還包含一 種或多種碳水化合物，該碳水化合物優(yōu)選選自葡萄糖、果糖、半乳糖、蔗糖、麥芽糖、麥芽三 糖、棉子糖、淀粉、淀粉衍生物和糊精中。
5. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的藥物產(chǎn)品，其特征在于，所述藥物產(chǎn)品另外在分 開(kāi)的間隔內(nèi)包含水。
6. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的藥物產(chǎn)品，其特征在于，所述藥物產(chǎn)品具有包衣， 該包衣優(yōu)選包含選自纖維素醚、纖維素酯、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚乙烯基衍生物 或聚甲基乙烯基醚和丙二酸的共聚物中的材料。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物產(chǎn)品，其特征在于，所述用于包衣的材料包括一種或多 種賦形劑，該賦形劑優(yōu)選選自增塑劑、潤(rùn)濕劑和色素中。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物產(chǎn)品，其特征在于，所述增塑劑選自檸檬酸三乙酯、檸 檬酸三丁酯、檸檬酸乙?；阴?、酒石酸二丁酯、癸二酸二乙酯、鄰苯二甲酸二甲酯、鄰苯 二甲酸二乙酯、鄰苯二甲酸二辛酯、蓖麻油、芝麻油、三乙酸甘油酯、二乙酸甘油酯、甘油、1， 2-丙二醇和聚乙二醇中。
9. 根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的藥物產(chǎn)品，其特征在于，所述潤(rùn)濕劑選自PEG400硬脂酸 酯、去水山梨糖醇單油酸酯和PEG去水山梨糖醇單油酸酯中。
10. 根據(jù)權(quán)利要求7 9中任一項(xiàng)所述的藥物產(chǎn)品，其特征在于，所述色素選自二氧化 鈦和氧化鐵中。
11. 一種用于持續(xù)釋放藥物活性成分的藥物產(chǎn)品的制備方法，其特征在于，將含活性成 分層和含酵母層壓成雙層片，為該雙層片制備水可滲透而不透氣的包衣，以及在所述含活 性成分層的區(qū)域內(nèi)的包衣上鉆孔。
12. —種用于沖擊釋放藥物活性成分的藥物產(chǎn)品的制備方法，其特征在于，將藥物活性 成分和酵母摻入糖漿中，并且在形成小球后為這樣得到的混合物制備水可滲透的包衣，該 包衣盡可能不透氣。
13. 能夠成醇發(fā)酵的可藥用的酵母在制備藥物產(chǎn)品中的用途，所述藥物產(chǎn)品用于可控 釋放在該藥物產(chǎn)品中所含的藥物活性成分。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藥物產(chǎn)品，該藥物產(chǎn)品能可控釋放其所含的藥物活性成分，所述藥物產(chǎn)品包含能夠發(fā)酵的酵母，發(fā)酵產(chǎn)生的二氧化碳使藥物活性成分從藥物產(chǎn)品中釋放出。
文檔編號(hào)A61K36/064GK101795676SQ200880105075
公開(kāi)日2010年8月4日 申請(qǐng)日期2008年8月21日 優(yōu)先權(quán)日2007年9月1日
發(fā)明者克里斯蒂安妮·席勒, 博多·阿斯穆森, 斯特凡·納格爾, 格雷戈?duì)枴じ郀桋U茨, 維爾納·韋茨切斯, 馬哈茂德·A·奧默-亞當(dāng) 申請(qǐng)人:Lts羅曼治療方法有限公司