專利名稱：一種鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑及其制備方法，尤其涉及 一種鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
鹿瓜多肽藥物組合物中含有多種骨代謝的活性肽類物質(zhì)以及4丐、磷、鐵 等無機元素，甜瓜籽提取物及多種游離氨基酸等，其藥理作用是調(diào)節(jié)骨代謝 和鈣磷代謝，刺激成骨細胞增殖，促進新骨形成以及調(diào)節(jié)4丐、磷代謝，增加 骨鈣、磷沉積，防止骨質(zhì)疏+>,具有鎮(zhèn)痛、抗炎作用；能明顯降低骨折局部 毛細血管的通透性，減少炎性滲出，促進局部血液循環(huán)，為骨細胞提供一個 良好的供血環(huán)境。鹿瓜多肽藥物組合物能夠促成骨細胞生長，促進膜內(nèi)骨化 及軟骨化，對骨折療效顯著，對多種骨損傷性疾病有顯著療效。
國內(nèi)關(guān)于鹿瓜多肽藥物組合物的發(fā)明專利有200510108157.7以下稱為 對比文件1, 200410013602.7以下稱為只于比文件2和02125357.9的以下稱為 對比文件3。對比文件1采用的制備方法是將鹿骨與甜瓜籽分別熱壓提取、 離心、超濾制備而成，在該提取方法中，既沒有調(diào)節(jié)鹿骨提取液pH值，也 沒有調(diào)節(jié)甜瓜籽提取液的pH值，因此該方法中不包括雜質(zhì)蛋白的去除方法。 對比文件2采用的制備方法是將鹿骨經(jīng)熱壓提取、酸堿去除雜質(zhì)蛋白、離心、 超濾，甜瓜籽經(jīng)熱壓提取、離心、超濾制備而成，該發(fā)明僅對鹿骨中含有的 雜質(zhì)蛋白進行了去除，未對甜瓜籽提取液進行pH值的調(diào)節(jié)，因此沒有去除 甜瓜籽提取液的雜質(zhì)蛋白。對比文件3采用的制備方法是將鹿骨進行加熱提 取，鹽酸調(diào)節(jié)提取液的pH值，再進行冷凍靜止，加熱煮沸酸提取液，再用 堿調(diào)節(jié)過濾上清液，冷凍靜止得到鹿骨提取液；該發(fā)明甜瓜籽提取液的制備 方法與鹿骨提取液的制備方法相同，將得到的鹿骨提取液和甜瓜籽提取液混 合濃縮，調(diào)節(jié)濃縮液的pH值，接著進行超濾過濾，制得鹿瓜多肽藥物組合 物。本申請發(fā)明人發(fā)現(xiàn)采用上述對比文件1和對比文件2的方法制備鹿瓜多 肽藥物組合物時，由于其中的雜質(zhì)蛋白含量高，產(chǎn)品的保存期受到影響；采用對比文件3的方法制備鹿骨多肽藥物組合物時，由于在才喿作中既需要冷凍 保存，又需要加熱煮沸，操作方法過于復雜，藥物組合物質(zhì)量難以控制。
目前，鹿瓜多肽藥物組合物的制劑已經(jīng)廣泛應用于臨床，但是在實踐中
發(fā)現(xiàn)隨著鹿瓜多肽藥物組合物制劑貯藏時間的延長，部分成品會有沉淀析 出，從而導致了可見異物、不溶性微粒不符合中國藥典的規(guī)定。這不但影響 藥品的質(zhì)量，而且也給臨床應用帶來了巨大的危險性。發(fā)生此問題的原因是 鹿骨與甜瓜籽中均含有大量的無藥效活性的雜質(zhì)蛋白，如果不將雜質(zhì)蛋白除 去不但會影響藥品的療效，而且會影響藥品的質(zhì)量，從而會給臨床應用帶來 巨大的危險。上述的對比文件1與對比文件2均沒有完全將雜質(zhì)蛋白去除。 為了解決這個問題，本發(fā)明研究人員經(jīng)過反復的試驗驗證，^莫索出一種既能 保證成品質(zhì)量，又容易控制的操作方法，同時可以確保制劑的穩(wěn)定性的鹿瓜 多肽藥物組合物的制備方法，同時在此基礎(chǔ)上發(fā)明了鹿瓜多肽藥物組合物口 服制劑，從而為廣大患者提供了一種質(zhì)量更穩(wěn)定、更安全、更有效、服用方 便的鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明一方面提供一種鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑，其具有保質(zhì)期 長、質(zhì)量穩(wěn)定性好、安全、有效、服用方便的優(yōu)點。
本發(fā)明另一方面提供了一種所述鹿瓜多肽藥物組合物的制備方法。
本發(fā)明 一方面提供了 一種鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑的制備方法， 該方法包括以下步驟
1.鹿骨提取液的制備
a. 首先對鹿骨進行預處理；
b. 將預處理后的鹿骨粉碎，接著加入3-5倍鹿骨重量的注射用水，在 120-123°C、 0.1-0.11MPa壓力下提取3-5小時，過濾，收集濾液；
c. 將濾液的pH值調(diào)節(jié)到4.5-6.0;
d. 將調(diào)節(jié)pH值后的濾液在室溫下力丈置1-4小時，過濾，收集濾液， 再將濾液進行離心分離，收集上清液I ,調(diào)節(jié)上清液I的pH值為10.0-11.0;
e. 將調(diào)節(jié)pH值后的上清液I室溫放置1-4小時，過濾，收集濾液， 再將濾液進行離心分離，收集上清液n,調(diào)節(jié)上清液II的pH值為中性；
f. 將步驟e得到的中性上清液II依次經(jīng)分子量為10萬、l萬和5000 道爾頓的超濾膜過濾，收集超濾液，得到所述的鹿骨提取液；2. 甜瓜籽提取液的制備
g. 首先對甜瓜籽進行預處理；
h. 將預處理后的甜瓜籽粉碎，接著加入3-5倍甜瓜籽重量的注射用水， 在120-123。C、 0.1-0.11MPa壓力下提取3-5小時，過濾，收集濾液；
i. 重復上迷步驟c-f，得到所述的甜瓜籽提取液；
3. 鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑的制備
j.將所述的鹿骨提取液和所述的甜瓜籽提取液以1-2: 1的重量比合 并，還向合并后鹿骨提取液和所述的甜瓜籽提取液中加入藥學上可接受的 矯味劑，調(diào)節(jié)pH值為4.5-7.5，用微孔膜過濾，收集濾液，得到所述的鹿 瓜多肽藥物組合物口服制劑。
優(yōu)選地，在所述的步驟b和c之間還包括步驟k,所述的步驟k為向 步驟b過濾得到的濾渣中加入濾渣重量3-5倍的注射用水，在120-123°C、 0.1-0.11MPa壓力下提取3-5小時，過濾，收集濾液I,并將濾液I和步驟 b得到的濾液合并。
優(yōu)選地，在所述的步驟j中，所述的微孔膜為孔徑為0.22-0.45pm的 微孔膜。
更優(yōu)選地，所述的微孔膜為孔徑為0.22 n m的微孔膜。 優(yōu)選地，在所述的步驟f中，還將超濾液用微孔過濾膜過濾。 優(yōu)選地，步驟g中預處理的甜瓜籽與步驟a中預處理的鹿骨的重量比 為0.25-4: 1。
優(yōu)選地，在步驟a中對所述的鹿骨進行預處理為，首先去除新鮮健康
的鹿骨表面的結(jié)締組織，接著洗凈鹿骨；在所述的步驟g中對甜瓜籽進行
預處理為將成熟的甜瓜籽洗凈。
優(yōu)選地，所述的藥學上可接受的矯味劑為蔗糖、單糖漿、蜂蜜、果汁 糖漿、甜葉菊素、甜蜜素、蛋白糖、糖精鈉、山梨醇和麥芽糖漿中的一種
或幾種。
優(yōu)選地，步驟c中用鹽酸將濾液的pH值調(diào)節(jié)到4.5-6.0,步驟d中用 NaOH調(diào)節(jié)上清液的pH值為10.0-11.0。 優(yōu)選地，所述的口服制劑為口服溶液。 優(yōu)選地，其中所述的鹿骨為梅花鹿的鹿骨。
本發(fā)明再一方面還提供了 一種鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑的制備 方法，該方法由以下步驟組成1. 鹿骨提取液的制備
a. 首先對鹿骨進行預處理；
b. 將預處理后的鹿骨粉碎，接著加入3-5倍鹿骨重量的注射用水，在 120-123°C、 0.1-0.11MPa壓力下提取3-5小時，過濾，收集濾液；
c. 將濾液的pH值調(diào)節(jié)到4.5-6.0;
d. 將調(diào)節(jié)pH值后的濾液在室溫下放置1-4小時，過濾，收集濾液， 再將濾液進行離心分離，收集上清液I ,調(diào)節(jié)上清液I的pH值為10.0-11.0;
e. 將調(diào)節(jié)pH值后的上清液I室溫;改置1-4小時，過濾，收集濾液， 再將濾液進行離心分離，收集上清液II,調(diào)節(jié)上清液II的pH值為中性；
f. 將步驟e得到的中性上清液II依次經(jīng)分子量為10萬、l萬和5000 道爾頓的超濾膜過濾，收集超濾液，得到所述的鹿骨提取液；
2. 甜瓜籽提取液的制備
g. 首先對甜瓜籽進行預處理；
h. 將預處理后的甜瓜籽粉碎，接著加入3-5倍甜瓜籽重量的注射用水， 在120隱123。C、 O.l-O.llMPa壓力下提取3-5小時,過濾，收集濾液；
i. 重復上述步驟c-f,得到所述的甜瓜籽提取液；
3. 鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑的制備
j.將所述的鹿骨提取液和所述的甜瓜籽提取液以1-2: 1的重量比合 并，還向合并后鹿骨提取液和所述的甜瓜籽提取液中加入藥學上可接受的 矯味劑，調(diào)節(jié)pH值為4.5-7.5,用微孔膜過濾，收集濾液，得到所述的鹿 瓜多肽藥物組合物口服制劑。
優(yōu)選地，在所述的步驟b和c之間還包括步驟k,所述的步驟k為向 步驟b過濾得到的濾渣中加入濾渣重量3-5倍的注射用水，在120-123°C、 0.1-0.11MPa壓力下提取3-5小時，過濾，收集濾液I，并將濾液I和步驟 b得到的濾液合并。
優(yōu)選地，在所述的步驟j中，所述的微孔膜為孔徑為0.22-0.45(im的 微孔膜。
更優(yōu)選地，所述的微孔膜為孔徑為0.22pm的微孔膜。 優(yōu)選地，在所述的步驟f中，還將超濾液用微孔過濾膜過濾。 優(yōu)選地，步驟g中預處理的甜瓜籽與步驟a中預處理的鹿骨的重量比 為0.25-4: 1。
優(yōu)選地，在步驟a中對所述的鹿骨進行預處理為，首先去除新鮮健康
7的鹿骨表面的結(jié)締組織，接著洗凈鹿骨；在所述的步驟g中對甜瓜籽進行 預處理為將成熟的甜瓜籽洗凈。
優(yōu)選地，所述的藥學上可接受的矯味劑為蔗糖、單糖漿、蜂蜜、果汁 糖漿、甜葉菊素、甜蜜素、蛋白糖、糖精鈉、山梨醇和麥芽糖漿中的一種 或幾種。
優(yōu)選地，步驟c中用鹽酸將濾液的pH值調(diào)節(jié)到4.5-6.0,步驟d中用 NaOH調(diào)節(jié)上清液的pH值為10.0-11.0。
優(yōu)選地，所述的口服制劑為口服溶液劑。
優(yōu)選地，其中所述的鹿骨為梅花鹿的鹿骨。
本發(fā)明再一方面提供了一種由所述的方法制備而成的鹿瓜多肽藥物 組合物口服制劑。
本發(fā)明的優(yōu)點在于1 .本發(fā)明方法中在制備鹿骨提取液和甜瓜籽提取液 時都進行了調(diào)節(jié)pH值的操作，同時本發(fā)明在調(diào)節(jié)提取液pH值時，將pH值 控制在一個相對窄的范圍內(nèi)。這是因為本申請發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，如此操作 的目的在調(diào)節(jié)pH值的操作中，去除提取液中的雜質(zhì)蛋白，同時保留提取液 中的有用的蛋白，在保留鹿瓜多肽藥物組合物藥用效果的前^^下，該藥物組 合物保存期得以延長，同時將pH值控制在此范圍內(nèi)，省去了現(xiàn)有技術(shù)中后 續(xù)的通過冷凍靜止和加熱煮沸去除沉淀物的操作，既保證了產(chǎn)品穩(wěn)定性，又 筒化了制備工藝，此外本發(fā)明的制備工藝簡單而且便于控制。通過此操作去 除了提取液中的雜質(zhì)蛋白，從而保證了產(chǎn)品的質(zhì)量，增加了產(chǎn)品的穩(wěn)定性，保 證了產(chǎn)品的安全性。
5000道爾頓的超濾膜超濾，收集了分子量小于5000道爾頓的超濾液，經(jīng)過 藥效學試驗證明了此分子量范圍的超濾液與其他分子量范圍的溶液相比醫(yī) 療效果更好，同時制備而成的藥物組合物的穩(wěn)定性也好于其他分子量范圍的 溶液。
3. 本發(fā)明的口服制劑優(yōu)選口服溶液劑，仍為液態(tài)制劑，具有作用迅速， 療效好的特點。因單劑量包裝，故攜帶、服用方便。
4. 本發(fā)明分劑量準確，服用量小，味道好容易為病人接受。本發(fā)明是無 菌狀態(tài)密封于口服液標準瓶中，具有貯存期長，質(zhì)量穩(wěn)定，不易變質(zhì)的特點。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例來進一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點和特點將會隨 著描述而更為清楚。但這些實施例僅是范例性的，并不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成 任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下 可以對本發(fā)明技術(shù)方案的細節(jié)和形式進行修改或替換，但這些修改和替換均 落入本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。
實施例1
(1) 鹿骨提取液的制備取新鮮健康鹿骨20kg,去除表面的結(jié)締組織， 洗凈，打碎成小塊，加入3倍重量的注射用水，即60kg,于121。C、 O.lMPa 壓力下提取3個小時，過濾，收集濾液。同樣方法將提取剩余殘渣，過濾， 收集濾液I 、合并鹿骨濾液和濾液I 。向合并后的溶液中加入3mol/L鹽酸 溶液調(diào)節(jié)pH值至4.5,在室溫下，放置1小時，過濾，收集濾液，再將濾 液進行離心分離，收集上清液I。向上清液I中加入3mol/L氫氧化鈉溶液 調(diào)節(jié)pH值至10.0，在室溫下，放置l小時，過濾，收集濾液，離心，收集 上清液II。調(diào)節(jié)上清液II的pH值至中性，即7.0,中性上清液II分別依次經(jīng) 分子量為10萬、1萬、5000道爾頓的超濾膜超濾，收集超濾液，制得鹿骨 提取液。
(2) 甜瓜籽提取液的制備取成熟的甜瓜籽SOkg,洗凈，粉碎成粉，加 入3倍重量的注射用水，即240kg,于121°C、 O.lMPa壓力下提取3個小時， 過濾，收集濾液。同樣方法將剩余殘渣熱壓提取，過濾，收集濾液I,合并 甜瓜籽濾液和濾液I 。向合并后的溶液中加入3mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至 4.5，在室溫下，放置l小時，過濾，收集濾液，離心，收集上清液I。向上 清液I中加入3mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至10.0,放置1小時，過濾， 收集濾液，離心，收集上清液II。調(diào)節(jié)上清液II的pH值至中性，即7.0，中 性液分別依次經(jīng)分子量為10萬、1萬、5000道爾頓的超濾膜超濾，收集超 濾液，制得甜瓜籽提取液。
(3) 按照1:1的重量比合并鹿骨提取液與甜瓜籽提取液，加入適量的蔗 糖或者單糖漿，調(diào)節(jié)溶液的pH值為4.5，用0.22)im的微孔濾膜過濾，收集 濾液，制得鹿瓜多肽藥物組合物口服溶液劑。
實施例2
(1)鹿骨提取液的制備取新鮮健康鹿骨50kg,除去表面的結(jié)締組織，洗凈，打碎成小塊，加入4倍重量的注射用水，即200kg,于121 。C、 O.llMPa 壓力下提取4個小時，過濾，收集鹿骨濾液。同樣方法提取剩余殘渣，過濾， 收集濾液I ,合并鹿骨濾液和濾液I 。向合并后的溶液中加入4mol/L鹽酸 溶液調(diào)節(jié)pH值至5.0,在室溫下，放置3小時，過濾，收集濾液，再將濾 液進行離心分離，收集上清液I 。向上清液I中加入4mol/L氳氧化鈉溶液 調(diào)節(jié)pH值至ll.O,在室溫下，放置3小時，過濾，收集濾液，離心，收集
上清液n。調(diào)節(jié)上清液n的pH值至7.0，中性上清液n分別依次經(jīng)分子量為
10萬、l萬、5000道爾頓的超濾膜超濾，收集超濾液。濾液用0.22iim的微 孔濾膜過濾，收集濾液，制得鹿骨提取液。
(2) 甜瓜籽提取液的制備取成熟的甜瓜籽25kg,洗凈，粉碎成粉加入 4倍重量的注射用水，即100kg,于121。C壓力下O.llMPa提取4個小時， 過濾，收集甜瓜籽濾液。同樣方法將剩余殘渣熱壓提取，過濾，收集濾液I ， 合并甜瓜籽濾液和濾液I 。向合并后的溶液中加入4mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH 值至5.0，在室溫下，；改置3小時，過濾，收集濾液，離心，收集上清液I。 向上清液I中加入4mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至11.0，在室溫下，放置 3小時，過濾，收集濾液，離心，收集上清液II。調(diào)節(jié)上清液II的pH值至 7.0,中性上清液分別依次經(jīng)分子量為10萬、1萬、5000道爾頓的超濾膜超 濾，收集超濾液。濾液用0.22pm的微孔濾膜過濾，收集濾液，制得甜瓜籽 提取液。
(3) 按照2:1比例合并鹿骨提取液與甜瓜籽提取液，加入適量的蔗糖和 糖精鈉，調(diào)節(jié)溶液的pH值為6.0,用0.22fim的微孔濾膜過濾，收集濾液， 按照口服液常規(guī)的制備方法進行制備，制得鹿瓜多肽藥物組合物口服溶液 劑。
實施例3
(1)鹿骨提取液的制備取新鮮健康鹿骨100kg,除去表面的結(jié)締組織， 洗凈，打碎成小塊，加入5倍重量的注射用水500kg,于121°C、 O.llMPa 壓力下提取5個小時，過濾，收集鹿骨濾液。同樣方法將剩余殘渣熱壓提耳又， 過濾，收集濾液I ,合并濾液I和鹿骨濾液。向合并后的溶液中加入5mol/L 鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至6.0，室溫;故置4小時，過濾，收集濾液，再將濾液 進行離心分離，收集上清液I。向上清液I中加入5mol/L氫氧化鈉溶液調(diào) 節(jié)pH值至ll.O,室溫放置4小時，過濾，收集濾液，離心，收集上清液II。調(diào)節(jié)上清液II的pH值至7.0，中性上清液II分別經(jīng)分子量為10萬、1萬、 5000道爾頓的超濾膜超濾，收集超濾液。濾液用0.22jim的微孔濾膜過濾， 收集濾液，制得鹿骨提取液。
(2) 甜瓜籽提取液的制備取成熟的甜瓜籽25kg,洗凈，粉碎成粉，加 入5倍重量的注射用水，即125kg,于121。C、 0.11MPa壓力下^是耳又5個小 時，過濾，收集甜瓜籽濾液。同樣方法將剩余殘渣熱壓4是取，過濾，收集濾 液I ，合并甜瓜籽濾液和濾液I 。向合并后的溶液中加入5mol/L鹽酸溶液 調(diào)節(jié)pH值至6.0，室溫放置4小時，過濾，收集濾液，離心，收集上清液I。 向上清液I中加入5mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至11.0,放置4小時，過 濾，收集濾液，離心，收集上清液II。調(diào)節(jié)上清液II的pH值至7.0,中性液 分別經(jīng)分子量為10萬、1萬、5000道爾頓的超濾膜超濾，收集超濾液。濾 液用0.22pm的微孔濾膜過濾，收集濾液，制得甜瓜籽提取液。
(3) 按照4:1比例合并鹿骨提取液與甜瓜籽提取液，加入適量的甜葉菊 素或者山梨醇，調(diào)節(jié)溶液的pH值為7.5,用0.22pm的微孔濾膜過濾，收集 濾液，按照口服液的常規(guī)的制備方法進行制備，制得鹿瓜多肽藥物組合物口 服溶液劑。
試驗例 穩(wěn)定性試驗
為了考查本發(fā)明方法所制備的鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑的質(zhì)量穩(wěn) 定性，將樣品按長期試驗條件;改置，溫度25。C,按照中國藥典2005年版二 部附錄相關(guān)檢驗要求，考察48個月內(nèi)樣品中的可見異物和不溶性微粒的穩(wěn) 定性情況，具體結(jié)果如下
樣品穩(wěn)定性試驗結(jié)果
考察時間(月)考察項目 不溶性微?？梢姰愇?br> 0符合規(guī)定符合規(guī)定
3符合規(guī)定符合規(guī)定
6符合規(guī)定符合規(guī)定
9符合規(guī)定符合規(guī)定
12符合規(guī)定符合規(guī)定
18符合規(guī)定符合規(guī)定
1124 符合規(guī)定 符合規(guī)定
36 符合規(guī)定 符合規(guī)定
__符合規(guī)定 符合規(guī)定
結(jié)果樣品按照加速試驗條件放置48個月，樣品的可見異物和不溶性 微粒檢查均符合藥典的規(guī)定，證明本發(fā)明產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，發(fā)明工藝可以控制 產(chǎn)品的質(zhì)量。
藥效學試驗
為了考查本發(fā)明方法所制備的鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑是否安 全、有效，進行了以下藥效學試驗，具體試驗如下
一、鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑的抗炎作用研究
1. 試驗材料
動物Wistar大鼠。
樣品鹿瓜多肽口服溶液劑(規(guī)格2mg/ml) 阿司匹才木腸;容片
2. 試驗方法
大鼠角叉菜膠足跖肺脹試驗
Wistar大鼠50只，根據(jù)體重隨機分為5組，即才莫型對照組(蒸餾水)， 鹿瓜多肽藥物組合物口服溶液劑低、中、高劑量(3.5、 7、 14mg/kg)組， 陽性對照藥阿司匹林腸溶片(150mg/kg)組，每組10片。在大鼠右后足跖 皮下注射新鮮配制的1%角叉菜膠混懸液O.lml致炎，接著將鹿瓜多肽藥物 組合物口服溶液劑按5ml/100g給各組大鼠灌胃藥，每天l次，連續(xù)7天。 末次藥后lh采用大鼠足跖容積測量儀測定致炎前及致炎后0.5h、 lh、 1.5h、 2h、 2.5h、 3h、 4h、 5h、 6h大鼠右后足跖容積，并計算腫脹抑制率。
3. 試驗結(jié)果 試驗結(jié)果見下表l。
表1鹿瓜多肽口服溶液劑對角叉菜膠致足腫脹大鼠腫脹抑制率的影響 (% , x±s, n=10)
時間 才莫型 阿司匹林 鹿瓜多肽 鹿瓜多肽 鹿瓜多肽
(150mg/kg) (3. 5mg/kg) ( 7 mg/kg) (14mg/kg)
0.5h14.82± 7.7314.27 ±8.7715.13±6.09 17.10± 7.9013.49 ±S.27lh22. 27 ± 6. 9613.52± 13. 51*18. 17 ± 15. 5323.04 ± 7. 3318. 60±9. 45
1. 5h26. 20 ± 10. 1616.62 ± 8. 20**23. 75 ± 12. 8118.81 ±9. 19*16.64±11.64*
2h33. 09 ± 15. 0917.73 ±11. 77**28. 27 ± 12. 8422.25 ±11.94*14. 88 ± 15. 69**
2. 5h41. 58 ± 12. 7324.51 ±9. 73***36. 84 ±20. 3031.63 ± 5.26**29. 03 ±9. 93**
3h46. 94 ±12. 1131.17 ±14. 66**39. 76 ± 16. 0237,.44 ±12. 05*30. 77 ±13. 77**
4h68. 79 ±16. 7139.57 ±21. 64*50. 65 ±21. 25*50.60± 20. 69*47. 02 ± 25. 02**
5h66. 81 ± 15. 0648.06 ± 23. 27*56. 96 ±18. 8351.07 ± 20. 82*47. 23 ±18. 98**
6h70. 41 ±17. 74復37 ±19. 70**56. 27 ± 30. 0651■ 85±20.11*44. 14 ± 24. 41氺*
與模型組相比*P<0. 05， **P<0. 01, ***P<0. 001
由上表可知，與模型對照組相比，鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑
3.5mg/kg在致炎后4h,鹿瓜多肽口服制劑7mg/kg在致炎后1.5h、2h、2.5h、 3h、 4h、 5h、 6h，鹿瓜多肽口服制劑14mg/kg在致炎后1.5h、 2h、 2.5h、 3h、 4h、 5h、 6h均可顯著抑制角叉菜膠引起的足腫脹(P〈0.05或PO.01 )。 二、急毒試-險
樣品鹿瓜多肽口服液(規(guī)格2mg/ml)
根據(jù)中藥新藥研究指導原則，對鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑進行了 小鼠靜脈和灌胃給藥的急性毒性觀察，因無法測出LD50，故進行最大給藥量 測定。小鼠靜脈注射給藥2次，累積劑量為400mg/kg，相當于臨床人用推 薦劑量(20mg/60kg人/天)的1200倍，未發(fā)現(xiàn)不良反應及死亡；小鼠灌胃 給藥l次，劑量為400mg/kg,相當于臨床人用推薦劑量(20mg/60kg人/天) 的1200倍，未發(fā)現(xiàn)不良反應及死亡。
結(jié)論以上試驗結(jié)果表明，本發(fā)明質(zhì)量穩(wěn)定、使用安全、有效。
1權(quán)利要求
1. 一種鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑的制備方法，該方法包括以下步驟(1)鹿骨提取液的制備a. 首先對鹿骨進行預處理；b. 將預處理后的鹿骨粉碎，接著加入3-5倍鹿骨重量的注射用水，在120-123℃、0.1-0.11MPa壓力下提取3-5小時，過濾，收集濾液；c. 將濾液的pH值調(diào)節(jié)到4.5-6.0；d. 將調(diào)節(jié)pH值后的濾液在室溫下放置1-4小時，過濾，收集濾液，再將濾液進行離心分離，收集上清液I，調(diào)節(jié)上清液I的pH值為10.0-11.0；e. 將調(diào)節(jié)pH值后的上清液I室溫放置1-4小時，過濾，收集濾液，再將濾液進行離心分離，收集上清液II，調(diào)節(jié)上清液II的pH值為中性；f. 將步驟e得到的中性上清液II依次經(jīng)分子量為10萬、1萬和5000道爾頓的超濾膜過濾，收集超濾液，得到所述的鹿骨提取液；(2)甜瓜籽提取液的制備g. 首先對甜瓜籽進行預處理；h. 將預處理后的甜瓜籽粉碎，接著加入3-5倍甜瓜籽重量的注射用水，在120-123℃、0.1-0.11MPa壓力下提取3-5小時，過濾，收集濾液；i. 重復上述步驟c-f，得到所述的甜瓜籽提取液；(3)鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑的制備j. 將所述的鹿骨提取液和所述的甜瓜籽提取液以1-2:1的重量比合并，還向合并后鹿骨提取液和所述的甜瓜籽提取液中加入藥學上可接受的矯味劑，調(diào)節(jié)pH值為4.5-7.5，用微孔膜過濾，收集濾液，得到所述的鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在所述的步驟b和c之間還包括步驟k,所述的步驟k為向步驟b過濾得到的濾渣中加入濾渣重量3-5倍的注射用水，在120-123°C、 0.1-0.11MPa壓力下提取3-5小時，過濾，收集濾液I ,并將濾液I和步驟b得到的濾液合并。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中在所述的步驟j中，所述的微孔膜為孔徑為0.22-0.45 jum的微孔膜，更優(yōu)選地，所述的孩t孔膜為孔徑為0.22jum的微孔膜。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項所述的方法，其中在所述的步驟f中，還將超濾液用微孔過濾膜過濾。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項所述的方法，其中步驟g中預處理的甜瓜籽與步驟a中預處理的鹿骨的重量比為0.25-4: 1。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項所述的方法，其中在步驟a中對所述的鹿骨進行預處理為，首先去除新鮮健康的鹿骨表面的結(jié)締組織，接著洗凈鹿骨；在所述的步驟g中對甜瓜籽進行預處理為將成熟的甜瓜籽洗凈。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的方法，其中所述的藥學上可接受的矯味劑為蔗糖、單糖漿、蜂蜜、果汁糖漿、甜葉菊素、甜蜜素、蛋白糖、糖精鈉、山梨醇和麥芽糖漿中的一種或幾種。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中步驟c中用鹽酸將合并后濾液的pH值調(diào)節(jié)到4.5-6.0，步驟d中用NaOH調(diào)節(jié)上清液的pH值為10.0-11.0。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項所述的方法，其中所述的口服制劑為口服溶液。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項所述的方法，其中所述的鹿骨為梅花鹿的鹿骨。
11. 一種由權(quán)利要求1-10中任一項所述的方法制備而成的鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑。
全文摘要
本發(fā)明一方面提供了一種鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑的制備方法，該方法首先制備鹿骨提取液，接著制備甜瓜籽提取液，最后將鹿骨提取液和所述的甜瓜籽提取液合并，得到所述的鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑。本發(fā)明還提供了采用以上方法制備而成的鹿瓜多肽藥物組合物。相對于現(xiàn)有的鹿瓜多肽藥物組合物口服制劑的制備方法，本發(fā)明的優(yōu)點在于本發(fā)明方法中在制備鹿骨提取液和甜瓜籽提取液時進行了調(diào)節(jié)pH值的操作，超濾膜超濾，通過此操作去除了提取液中的雜質(zhì)蛋白，從而保證了產(chǎn)品的質(zhì)量，增加了產(chǎn)品的穩(wěn)定性和醫(yī)療效果，保證了產(chǎn)品的安全性。
文檔編號A61K36/42GK101461834SQ20091000079
公開日2009年6月24日 申請日期2009年1月9日 優(yōu)先權(quán)日2009年1月9日
發(fā)明者朱吉滿 申請人:哈爾濱譽衡藥業(yè)股份有限公司