專利名稱：：齊墩果醇型苯并呋喃及其苷的制藥新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種通式化合物的新用途，具體地說，本發(fā)明涉及齊墩果醇型苯并呋喃及其苷在制備預(yù)防和/或治療心絞痛、心肌梗塞、腦梗塞、腦中風(fēng)、阿耳茨海默氏病、急性冠狀綜合癥、PTCA或支架放置后冠狀動脈再狹窄，以及油性皮膚、痤瘡、皮脂溢出、皮質(zhì)類固醇導(dǎo)致的痤瘡樣損害等疾病的藥物中的用途。
背景技術(shù)：
：膽固醇酯在血管大面積的蓄積會產(chǎn)生動脈粥樣化病變，形成富脂斑，富脂斑的破壞會形成血栓、產(chǎn)生冠狀動脈腔管的堵塞，從而導(dǎo)致急性冠狀動脈綜合癥、心絞痛、心肌梗塞等疾病。動脈粥樣化病變形成的斑塊在頸動脈和腦內(nèi)血管形成則會導(dǎo)致腦梗塞或腦中風(fēng)，因此這些疾病和動脈粥樣硬化、高脂血癥是緊密相關(guān)的。?；o酶A:膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(Acyl-CoA:CholesterolAcyltransferase,ACAT)是細(xì)胞內(nèi)唯一催化游離膽固醇與脂肪酸生成膽固醇酯的酶，是膽固醇及其酯類代謝平衡的關(guān)鍵酶之一。抑制該酶活性的ACAT抑制劑可以對膽固醇吸收、轉(zhuǎn)運、分布和代謝等生理過程中均發(fā)揮影響，從而降低血脂，且能夠阻止動脈粥樣硬化的早期病變。另外，已有文獻(xiàn)如US6133326，CN1863521A，報道ACAT抑制劑可以抑制皮脂腺皮脂生成，其可以作為調(diào)節(jié)皮脂腺機(jī)能、抑制皮脂過度生成的治療劑，用于治療油性皮膚、痤瘡、皮脂溢出、皮質(zhì)類固醇導(dǎo)致的痤瘡樣損害等疾病。齊墩果醇型苯并呋喃及其苷存在于某些天然植物中(如瓦山安息香、祿春安息香等)，并可從這些天然植物中分離獲得。有研究報道齊墩果醇型苯并呋喃類成分具有抗菌和抗腫瘤活性(PaulettiPM,AraujoARetal.P/^tocAem&^y2000;597-601;TsaiIL,HsiehCF,DuhCY.尸/^tocAemW^1998;48:1371—1375;TsaiIL,HsiehCF,DuhCY,ChenIS.尸/^toc/^m&^y1996;43:1261—1263;CuiB，ChaiHetal.r"raAWraw1997;53:17625—17632);專利CN1830435,CN1830976,CN1830980、WO2006094456等公開了齊墩果醇型苯并呋喃類成分在預(yù)防或治療卵巢功能早衰、更年期綜合征、骨質(zhì)疏松以及青春期卵巢功能低下、多囊卵巢綜合癥、不孕癥以及因雌激素缺乏或相對不足引起的疾病中的應(yīng)用。迄今為止尚未見有關(guān)齊墩果醇型苯并呋喃及其苷作為ACAT抑制劑用于上述疾病的文獻(xiàn)記載或研究報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的技術(shù)方案是提供一種齊墩果醇型苯并呋喃及其苷在制備制備?；o酶A:膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶抑制劑類藥物中的用途。本發(fā)明提供了通式為I的齊墩果醇型苯并呋喃及其苷在制備制備?；o酶A:膽固醇?；D(zhuǎn)移酶抑制劑類藥物中的用途。其中R4為畫H，隱OH，-OCH3;R2為-H，-COCH3，-CO(CH2)2CH3，P-D畫葡萄糖基，龍膽雙糖基，龍膽三糖基，R3-R7為-H，-OH，-0013及其他含氧取代基團(tuán)。所述的藥物是預(yù)防和/或治療心絞痛、心肌梗塞、腦梗塞、腦中風(fēng)、阿耳茨海默氏病、急性冠狀綜合癥、經(jīng)皮冠脈腔內(nèi)成形術(shù)或支架放置后冠狀動脈再狹窄，以及油性皮膚、痤瘡、皮脂溢出、皮質(zhì)類固醇導(dǎo)致的痤瘡樣損害等疾病的藥物。優(yōu)選的，當(dāng)R!是-0CH3，R2是-H，R4-Rs為二氧亞甲基，R3、&、R^均為-H，即為5-(3-羥基)丙基-7-甲氧基-2-(3，4-二氧亞甲基苯基)苯并呋喃(即egonol，亦即齊墩果醇，以下簡稱為化合物A)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>5-(3-羥基)丙基-7-甲氧基-2-(3，4-二氧亞甲基苯基)苯并呋喃當(dāng)f^是-H，R2是-H，R4-R5為二氧亞甲基，R3、R6、R7均為-H，即為5-(3-羥基)丙基-2-(3，4-二氧亞甲基苯基)苯并呋喃(去甲氧基齊墩果醇，以下簡稱為化合物B)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>5-(3-羥基)丙基-2-(3，4-二氧亞甲基苯基)苯并呋喃(即去甲氧基齊墩果醇)當(dāng)Ri為-OH，R2為-H，R4-Rs為二氧亞甲基，R3、Re、R7均為-H，即為5-(3-羥基兩基-7-羥基-2-(3，4-二氧亞甲基苯基)苯并呋喃(去甲基齊墩果醇，以下簡稱為化合物C)。OH5-(3-羥基)丙基-7-羥基-2-(3，4-二氧亞甲基苯基)苯并呋喃(即去甲基齊墩果醇)當(dāng)R4為-OCH3，R2為-COCH3，R4-R5為二氧亞甲基，R3、Re、R7均為-H，即為齊墩果醇乙酸酯(以下簡稱為化合物D)。OCH齊墩果醇乙酸酯當(dāng)Ri為-H，R2為-COCH3，R4-Rs為二氧亞甲基，R3、R6、R7均為-H，即為去甲氧基齊墩果醇乙酸酯(以下簡稱為化合物E)。去甲氧基齊墩果醇乙酸酯當(dāng)Ri為-OCHs，R2為-CO(CH2)2CH3，R4-Rs為二氧亞甲基，R3、&、R.均為-H，即為齊墩果醇丁酸酯(以下簡稱為化合物F)。OCH3齊墩果醇丁酸酯當(dāng)E^為-OCH3，R2為P-D-葡萄糖基，R4-Rs為二氧亞甲基，R3、&、R7均為-H，即為齊墩果醇-葡萄糖苷(以下簡稱為化合物G)。OCH3齊墩果醇-葡萄糖苷當(dāng)Ri為-OCH3，R2為龍膽雙糖基，R4-Rs為二氧亞甲基，R3、&、R均為-H，即為齊墩果醇-龍膽雙糖苷(以下簡稱為化合物H)。OCH3齊墩果醇-龍膽雙糖苷當(dāng)R!為-OCH3，R2為龍膽三糖基，R4-Rs為二氧亞甲基，R3、Re、^均為-H，即為齊墩果醇-龍膽三糖苷(以下簡稱為化合物I)。齊墩果醇-龍膽三糖苷當(dāng)R!為-H，R2為龍膽雙糖基，R4-Rs為二氧亞甲基，R3、Re、R7均為-H，即為去甲氧基齊墩果醇-龍膽雙糖苷(以下簡稱為化合物J)。HOHC去甲氧基齊墩果醇-龍膽雙糖苷化合物A、B、C、D、E、F、G、H、I、J參見下表l:表1.化合物A、B、C、D、E、F、G、H、I、J<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>本發(fā)明還提供一種具有ACAT抑制活性的藥物組合物，含有上述通式I齊墩果醇型苯并呋喃及其苷的任意一種或幾種為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或載體組成。所述的藥物組合物的劑型為口服劑型或注射劑。其中所述的齊墩果醇型苯并呋喃及其苷的臨床用量范圍是1itig500iig/kg/日/人。通式為I的齊墩果醇型苯并呋喃及其苷及上述優(yōu)選的化合物A、B、C、D、E、F、G、H、I、J，可以從天然植物瓦山安息香[5^raxpwh7^ae]，祿春安息香[又macraw^船Perk.]，楚雄安息香[S./z'w/n.c/^//LingelshetBorza]，越南安息香towh"m^(Pierre)CraibetHartw.]，浙江安息香z/^/7awgew57.sS.M.HwangetL.L.Yu]，芬芳安,窗、香[51.oi/ora^sw/mtwChamp.],中華安息香[S.c/n'we/w/sHuetS.Y.Liang]，滇南安息香[S.6e"zoZ朋zWesGraib],蘇門答臘安息香[S.Z^wzo/wDryand]，銀花安息香[S.H.L.Li]，灰葉野茉莉[51.ca/v^ce"sPerk]，嘉賜葉野茉莉[5".ca化an/o/^sCraib]，黃果安息香[S.cA^socw;wsH.L.Li]，賽山梅[51.cow/urnsHemsl]，垂珠花[S.d考fl"^zusPerk]，白花龍[51.Perk]，大花野茉莉[jS.gra"di/7omsGriff]，老鴰鈴[5:/^/^/^fl"wsDiels]，西藏野茉莉[^.Aoo/^n'C.B.Clarke],野茉莉[S.j'apom'cMsSieb.etZucc]，大籽野茉莉[S.廳cra5pgr扁sC.Y.Wu]，桐葉野茉莉[5*.C.Y.Wu]，粉花野茉莉[Xmy^yDunn]，皺葉野茉莉[S.n/gow5Kurz]，齒葉野茉莉[51.Roxb]，栓葉安息香[S.犯Z^n/o/z'^Hook,etArn]，小葉安息香[51.w/Zswh7Rehd]，as.y^rwgiwe,51.oJ^c/w"fo，5".oZa肌VzSieb.etZucc等中任意一種或幾種中分離獲得；也可以通過化學(xué)方法合成獲得。具體化學(xué)提取分離方法可按文獻(xiàn)方法進(jìn)行[AkgulYY,AnilH.P/^toc/^m^^v2003;63:939—943;AnilH.尸/^toc/z^w's^v1980;19:2784~2786;TakanashiM,TakizawaY.P/^toc/^mzs^v1988;27:1224~1226;LiQL,LiBQQiHY,GaoXPandZhangGLFourNewBenzofiiransfromSeedsof浙rax/erh>wz'ae./VawtoMeAcfl,2005;71(9):847-851]。因此為實際治療過程提供了多種可能的藥效物質(zhì)來源，可以使用含有上述齊墩果醇型苯并呋喃及其苷的任意一種或任意幾種的混合物，或使用大量含有此類化合物的植物有效部位或粗提物。通式為I的齊墩果醇型苯并呋喃及其苷的任意一種或任意幾種混合物，加上藥學(xué)上可接受的輔料或載體，可以制備成為多種口服制劑或注射劑型，即可制成片劑、膠囊、顆粒劑、丸劑、口服液、注射液等多種劑型。在制備方法上，可以將齊墩果醇型苯并呋喃及其苷這些活性成分與淀粉、乳糖、葡萄糖、蔗糖、糊精、纖維素類、瓊脂、硬脂酸鎂、滑石、阿拉伯橡膠、明膠、水、植物油等混和，制備成為適當(dāng)?shù)膭┬?。齊墩果醇型苯并呋喃及其苷的使用有效劑量極低，達(dá)到微克級，依患者的年齡、體重而定，通常按成人計算，其臨床用量范圍為l嗎500嗎/kg/日/人，優(yōu)選的臨床用量為10嗎100fig/kg/日/人，臨床應(yīng)用極為有效和方便。將齊墩果醇型苯并呋喃及其苷與其它化學(xué)藥物和/或其它中藥提取物共同組成中藥、西藥或中西復(fù)方制劑，并按照常規(guī)方法制成片劑、膠囊、顆粒劑、丸劑、口服液、注射液等多種劑型。由于齊墩果醇型苯并呋喃及其苷具有良好的ACAT抑制作用，可將其制成片劑、膠囊等多種劑型，適用于心絞痛、心肌梗塞、腦梗塞、腦中風(fēng)、阿耳茨海默氏病、急性冠狀綜合癥、PTCA(經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動脈成形術(shù))或支架放置后冠狀動脈再狹窄，以及油性皮膚、痤瘡、皮脂溢出、皮質(zhì)類固醇導(dǎo)致的痤瘡樣損害等疾病的治療，具有療效顯著、使用劑量微小，價格低廉、使用方便等優(yōu)點。顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。具體實施例方式實施例1:齊墩果醇型苯并呋喃及其苷A、B、C、D、E、F、G、H、I、J的提取分離和結(jié)構(gòu)確認(rèn)提取與分離取瓦山安息香(6^wjc;erh'"w'"e，采自云南永德縣)的果實2.2kg(干重)，粉碎后用80-90%工業(yè)酒精25L在室溫下浸提3次，每次7天。浸提液經(jīng)真空濃縮后得總浸膏550g，將其懸浮于5L熱水中，依次用石油醚、氯仿和正丁醇各萃取5次，每次5L溶劑，分別濃縮萃取液得浸膏石油醚部分16g，氯仿部分200g，正丁醇部分120g。取樣進(jìn)行體外活性篩選，氯仿和正丁醇部分均顯示具有促進(jìn)雌激素生成活性。將氯仿部分上硅膠層析柱，依次用石油醚:丙酮=10:1,5:1,0:1洗脫，將其分為三段Fr.l-3。Fr.l(30g)上硅膠柱，用石油醚:丙酮=10:1洗脫，得到化合物F(60mg)、DGOmg)和E(20mg)。Fr.2(150g)上硅膠柱，用石油醚:丙酮=5:1洗脫，得到化合物A(95g)、B(5g)。Fr.3(15g)上硅膠柱，用CHCl3:MeOH=50:1洗脫，得到化合物C(45mg)。正丁醇部分先用D101大孔樹脂脫糖后得55g浸膏，上硅膠層析柱，依次用CHCl3:MeOH=20:1,10:1,5:1,0:1洗脫，得到化合物G(4.2g)、H(33g)和I(2.8g)。用上述同樣的方法，從祿春安息香(S^ra;cmacraw^i^Perk.)果實中也分離得到了化合物A、B、G、H，同時還得到化合物J。結(jié)構(gòu)確認(rèn)上述化合物中，化合物A、B、D、E、G、H、I的碳譜和氫譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)研究報道的一致(AkgulYY,AnilH.尸/^tocAem&"2003;63:939—943;TakanashiM,TakizawaY，MitsuhashiT.ChemLett1974;869-871;TakanashiM,TakizawaY.Phytochemistry1988;27:1224—1226;AnilH.尸/^toc/^w'5^y1980;19:2784-2786)，即化合物A為5-(3-羥基)丙基-7-甲氧基-2_(3，4-二氧亞甲基苯基)苯并呋喃，即egonol，亦即齊墩果醇；化合物B為5-(3-羥基)丙基-2-(3，4-二氧亞甲基苯萄苯并呋喃，即去甲氧基齊墩果醇；化合物D為齊墩果醇乙酸酯；化合物E為去甲氧基齊墩果醇乙酸酯；化合物G為齊墩果醇-葡萄糖苷；化合物H為齊墩果醇-龍膽雙糖苷；化合物I為齊墩果醇-龍膽三糖苷?；衔顲、F、J為新化合物，其特征分述于下化合物C的特征在于顏色和形狀白色無定形粉末；mp196-199。C;紅外光譜主要的特征譜帶位于3456,2946,2919，1600,1504,1482,1459,1236,1042,928cm";紫外光譜(MeOH):Xmax(logs)=204(4.69),302(4.47),317(4.54)nm;質(zhì)譜(HRESIMS):w/z=335.0886[M+Na]+(calcd.:335.0890);核磁共振氫譜(600MHz,DMSO-A):56.83(1H,s,H-3)，7.45(1H,(!，/=1.6Hz,H-4)，6.57(1H,d,/=1.6Hz,H-6),9.88(1H，s,H-7-OH),7.17(1H,d,/=1.6Hz,H-2'),7.05(1H,d,/=8.0Hz，H-5'),7.42(1H，dd,J=8.0,1.6Hz,H-6')，2.60(2H,t,/=7.4Hz,H-l〃)，1.72(2H，m，H-2〃)，3.42(2H,m，H-3〃),4.46(1H,t,/=5.0Hz,H誦3〃陽OH)，6.10(2H,s,H-(-0-CH2-0-));核磁共振碳譜(150MHz,DMSO-A):S32.2(C-2〃)，35.2(C-l"),60.6(C-3〃),101.9(-0-CH2-0-)，105.4(C-2'),111.0(C隱5'),119.1(C-6')，124.8(C-l'),148.2(C-4')，148.4(C-3'),101.5(C-3)，109.3(C-6),111.6(C-4),131.1(C-9)，138.4(C-5),141.8(C隱8);142.3(C-7),155.3(C-2)。從化合物C的高分辨質(zhì)譜準(zhǔn)分子離子峰m/z=335.0886[M+Na]+推算出其分子式為C18H1605;紫外光譜在^ax=204,302,317nm處出現(xiàn)最大吸收峰，與齊墩果醇的紫外吸收光譜相似，提示為苯并呋喃衍生物。化合物C的iH-NMR信號也與齊墩果醇的相似，只是比齊墩果醇多一個酚羥基信號S9.88(1H，s,H-7-OH)，而少一個甲基信號?；衔顲的甲基化反應(yīng)(KOH-(CH3)2S04)得到了齊墩果醇，表明其酚羥基在C-7位。因此化合物C為5-(3-羥基)丙基-7-羥基-2-(3,4-二氧亞甲基苯基)苯并呋喃，即去甲基齊墩果醇，亦即去甲基齊墩果醇?；衔颋的特征在于顏色和形狀淺黃色固體；mp76-79°C;紅外光譜主要的特征譜帶位于2959,1729，1599，1504，1477，1449,1236，1186,1042,930cm";紫外光譜(MeOH):入鵬(logs)=220(3.97),300(3.86)，315(4.01)nm;質(zhì)譜(HRESIMS):m/z=419.1459[M+Na]+(calcd.:419.1465);核磁共振氫譜(600MHz,CDC13):S6.74(1H,s,H-3)，7.28(1H，d,/=1.2Hz，H-4),6.55(1H,d,/=1.2Hz,H-6)，6.90(1H,d，/=1.6Hz，H-2')，6.82(1H,d,/=8.2Hz,H-5'),7.35(1H，dd,/=8.2,1.6Hz，H隱6')，2.70(2H,t，/=7.4Hz,H-l〃),1.95(2H，m,H-2〃),4.07(2H,t,■/=6.5Hz,H-3"),5.96(2H,s,H-(-0-CH2-0-))，3.98(3H,s,H-7-OMe),2.26(2H,t，J=7.8Hz，H-2〃')，1.62(2Hm,H-3〃')，0.92(3H,t,/=8.5Hz,H-4〃')；核磁共振碳譜(150MHz,CDC13):513.9(C-4'〃)，18.7(C-3'〃)，36.5(C-2'〃)，31.0(C畫2〃)，32.7(C-l〃)，63.8(C-3〃)，56.4(OMe-7),101.5(-0-CH2-O)，105.8(C-2'),108.8(C陽5')，119.4(C-6'),124.9(C-l'),148.2(C-4'),148.3(C-3')，100.6(C-3),107.6(C畫6),112.6(C-4)，131.3(C陽9),137.2(C-5),142.7(C-8);145.0(C腸7),156.3(C陽2)，174.0(C-l'〃)?；衔颋的紫外光譜在人m^=220,300,315nm處出現(xiàn)最大吸收峰，與齊墩果醇的紫外吸收光譜相似，提示為苯并呋喃衍生物?；衔颋的大部分&、"C-NMR信號與齊墩果醇的相似，只是比齊墩果醇多出tH-NMR信號S0.92(3H，■/=8.2Hz,H-4'〃),2.26(2H,t,/=7.8Hz,H-2'〃),1.62(2H，m,H-3'〃)和相應(yīng)的^C-NMR信號S13.9(C-4〃'),36.5(C陽2〃'),18.7(C-3'〃),174.0(C-l〃')(據(jù)HMQC)，表明化合物F比齊墩果醇多出一個丁酸酯基。化合物F堿水解(10%KOH乙醇溶液)得到齊墩果醇，因此，該化合物的結(jié)構(gòu)為5-(3-丁酰氧丙基)-7-甲氧基-2-(3，4-二氧亞甲基苯基)苯并呋喃，即齊墩果醇丁酸酯。高分辨質(zhì)譜準(zhǔn)分子離子峰附么=419.1459[M+Na]+推算出其分子式為C23H2406，進(jìn)一步確證了該結(jié)構(gòu)的正確性。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>化合物F化合物J的特征在于顏色和形狀白色無定形粉末；mp110-113。C;紅外光譜主要的特征譜帶位于3427,2924，1620，1503，1474，1363，1256,1232,1074,1038,929,810cm";紫外光譜(MeOH):Xmax(logs)=216(4.52),302(4.47),317(4.10),331(3.72)nm;質(zhì)譜(HRESIMS):w/z=620.0546[M+Na]+(calcd.:620.0539);核磁共振氫譜(600MHz,DMSO-A):S7.41(1H，d，/=8.4Hz,H-7),7.38(1H,dd，/=7.9，1.8Hz,H-6'),7.39(1H,d,/=1.6Hz,H-4),7.17(1H,s,H-2'),7.01(1H,d,■/=8.0Hz,H陽5')，6.99(1H,s,H-3),6.77(1H，s,H-6),6.07[2H,s,H-(-0-CH2-0-)]，3.45(2H,t,/=6.4Hz,H-3〃)，2.71(2H,t，/=7.6Hz,H隱l"),1.86(2H,m,H-2〃)，5.04(1H,d,J=5.0Hz,glc-H畫l')，4.90(1H,d,/=4.8Hz,glc-H畫l〃)；核磁共振碳譜(150MHz,DMSO-^):5155.6(C-2),101.5(C-3),112.6(C-4):138.3(C-5),108.3(C-6),120.2(C-7),142.1(C-8),130.9(C-9),124.5(C-r),105.4(C-2'),148.4(C-3')，148.2(C-4'),109.3(C陽5')，119.2(C-6'),101.9[C-(-0-CH2-0-)]，32.3(C陽l〃);31.9(C-2〃),68.3(C陽3〃)，103.3(glc-l'),73.9(glc-2')，77.3(glc-3'),70.5(glc-4'),76.2(glc隱5'),68.8(glc隱6'),103.8(glc-l〃),74.0(glc-2")，77.4(glc-3"),70.5(glc-4〃)，77.3(glc-5〃)，61.6(glc-6〃)；化合物J的相對旋光值為[a]2D。-27.6°(c0.1,MeOH);ESI-MS中的分子離子峰m/z621[M+H]+和619[M-H]—提示其分子量為620，碎片峰m/z459[M+H-162]+，m/z297[M+H-162-162]+提示分子中存在2個六碳糖單元。UV譜中出現(xiàn)與齊墩果醇的相似的特征吸收(Xmax=218,302,318nm)，提示其為齊墩果醇類苷。該化合物經(jīng)薄層酸水解后，只檢測出葡萄糖和去甲氧基齊墩果醇。NMR譜中Sc103.3，103.8和5h5.04(lH,d,/=5.0Hz)，4.90(1H，d,/=4.8Hz)顯示化合物J存在2個)3構(gòu)型的葡萄糖基?；衔颙的13CNMR數(shù)據(jù)與化合物B(去甲氧基齊墩果醇)的比較，多出二個葡萄糖基的12個碳信號，其余部分化學(xué)位移基本一致。直接與去甲氧基齊墩果醇相連的葡萄糖基中C-6向低場位移57.2(61.6—68.8)，C-5向高場位移51.0(77.2—76.2)，表明兩個糖基的聯(lián)結(jié)方式為1—6，是龍膽雙糖苷。因此將化合物J鑒定為去甲氧基齊墩果醇龍膽雙糖苷。HOHC'化合物J實施例2片劑的制備片劑組成化合物A300mgHPMC腦o28.7g乳糖70g硬脂酸鎂lg(共制成1000片)取化合物A、HPMC、乳糖，混勻，以75%乙醇為粘合劑制濕顆粒，過22目篩，50'C干燥3h，22目篩整粒，加入硬脂酸鎂混勻壓片，每片重100mg，用于動脈粥樣硬化或高脂血癥患者，口服，每日兩次，每次1片，一月為一療程。實施例3膠囊劑的制備膠囊組成化合物B淀粉取化合物B、淀粉、硬脂酸鎂，脈粥樣硬化或高脂血癥患者，口服，實施例4注射液的制備注射液組成化合物I吐溫80氯化鈉300mg98.8glg(共制成1000粒)混勻，裝膠套。每粒裝100mg，用于動每曰兩次，每次1片，一月為一療程。200mg10mL8g(共制成1000ml)取化合物C，力Q10%Na2COOJ5pH至7.0-7.5，冷藏濾過，加吐溫-80，NaCl，加注射用水至1000mL，G3垂熔漏斗(玻璃)濾過，分裝，灌封，100°C流通蒸氣滅菌30min即得。實施例5復(fù)方片劑或膠囊的制備取化合物D、E、F各150mg加入相應(yīng)輔料，制成片劑或膠囊1000粒，每粒裝200mg，用于動脈粥樣硬化或高脂血癥患者，口服，每日一次，每次l片或l粒，一月為一療程。以下通過藥效學(xué)試驗證明本發(fā)明的有益效果。試驗例1齊墩果醇型苯并呋喃及其苷A、B、C、D、E、F、G、H、I、J對ACAT的抑制活性按照Rudel等人類似的方法(IdentificationofACAT1-andACAT2-specificinhibitorsusinganovel,cell-basedfluorescenceassay,JournalofLipidResearch,Volume45,2004)，使用一種細(xì)胞水平上的熒光學(xué)方法來鑒定化合物對ACAT的抑制活性。NBD-cholesterol是一種新型的熒光底物，NBD賦予膽固醇以熒光特性卻不影響膽固醇的吸收和體內(nèi)代謝功能。NBD-cholesterol還有一種非常重要的特性NBD-cholesterol的熒光強(qiáng)度取決于它所處的環(huán)境，當(dāng)處于一種極性的環(huán)境時NBD-cholesterol幾乎不發(fā)出熒光或發(fā)出極弱的熒光，而當(dāng)處于一種非極性的環(huán)境時NBD-cholesterol就可以發(fā)出很強(qiáng)的熒光。NBD-cholesterol本身是一種極性分子，但當(dāng)它被吸收進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，在ACAT的催化下生成相應(yīng)的膽固醇酯，就由一種極性分子變成了非極性分子，并聚集成脂小粒，形成一種非極性的環(huán)境。這就提供了一種檢測ACAT活性的十分簡便的方法。膽固醇合成和代謝主要在肝臟中進(jìn)行。本實驗選擇HepG2作為供篩選細(xì)胞，并通過RT-PCR等方法檢測了HepG2細(xì)胞ACAT的表達(dá)水平。ACAT抑制活性測定的具體方案接種HepG2細(xì)胞于96孔板，20，000個/孔，37。C培養(yǎng)過夜，吸棄培養(yǎng)基，每孔先加入160pL新鮮的低糖DMEM培養(yǎng)基，空白對照和陰性對照孔中加入20^iLPBS，受試孔分別加入預(yù)先配制好的化合物AJ樣品和陽性對照藥物SANDOZ58-035(Sigma公司提供)20pL(每個樣品作10個孑L，起始孔濃度為30pg/ml，按3倍稀釋度依次稀釋，作10個濃度梯度)，37"C再培養(yǎng)1小時，空白組加入20pLPBS，其余各孔加入預(yù)先配制好的底物NBD-cholesterol20pL，終濃度為2嗎/ml，37°C培養(yǎng)過夜，PBS洗3次，使用WALLACVictor2測定熒光值，激發(fā)波長為485nm，發(fā)射波長為535nm，根據(jù)熒光值計算抑制率，抑制率=(陰性-樣品)/(陰性-空白)X100%。根據(jù)抑制率，應(yīng)用Xlfit軟件中的4ParameterLogisticModel計算IQ。值。結(jié)果如表l所示表1齊墩果醇型苯并呋喃及其苷對ACAT的抑制作用化合物IC50(ng/mL)A7.82B9.34C10.04D16.79E25.12F13.59G9.05H8.44I3.21J12.42SANDOZ58-0358.72從表1結(jié)果可以看出，化合物AJ及SANDOZ58-035均對ACAT表現(xiàn)14出抑制作用，其中化合物I的抑制作用最強(qiáng)，其ICs。值低于SANDOZ58-035的IC5。值，化合物A、B、G、H的作用與SANDOZ58-035大致相當(dāng)。以上結(jié)果表明，本發(fā)明齊墩果醇型苯并呋喃及其苷具有ACAT抑制作用，可以作為制備ACAT抑制劑藥物的一種新選擇。權(quán)利要求1、通式為I的齊墩果醇型苯并呋喃及其苷在制備?；o酶A膽固醇?；D(zhuǎn)移酶抑制劑類藥物中的用途。其中R1為-H，-OH，-OCH3；R2為-H，-COCH3，-CO(CH2)2CH3，β-D-葡萄糖基，龍膽雙糖基，龍膽三糖基，R3-R7為-H，-OH，-OCH3或其他含氧取代基團(tuán)。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述的藥物是治療或預(yù)防動脈粥樣硬化、高脂血癥的藥物。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述的藥物是治療或預(yù)防心絞痛、心肌梗塞、腦梗塞、阿耳茨海默氏病、急性冠狀綜合癥、PTCA或支架放置后冠狀動脈再狹窄的藥物。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述的藥物是用于調(diào)節(jié)皮脂腺機(jī)能、抑制皮脂過度生成的藥物。5、根據(jù)權(quán)利要求l-4任一項所述的用途，其特征在于所述通式為I的化合物Ri是-OCH3，R2是-H，R4-R5為二氧亞甲基，R3、Re、R7均為-H，即為-5-(3-羥基)丙基-7-甲氧基-2-(3，4-二氧亞甲基苯基)苯并呋喃(即egonol，亦即齊墩果醇)；R4是-H，R2是-H，R4-R5為二氧亞甲基，R3、Re、R7均為-H，即為-5-(3-羥基)丙基-2-(3，4-二氧亞甲基苯基)苯并呋喃(亦即去甲氧基齊墩果醇)；Ri為-OH，R2為-H，R4-Rs為二氧亞甲基，R3、R6、R7均為-H，即為-5-(3-羥基)丙基-7-羥基-2-(3，4-二氧亞甲基苯基)苯并呋喃(亦即去甲基齊墩果醇)；Ri為-OCH3，R2為-COCH3，R4-Rs為二氧亞甲基，R3、R6、R7均為-H，即為齊墩果醇乙酸酯；Ri為-H，R2為-COCH3，R4-Rs為二氧亞甲基，R3、R6、R7均為-H，即為去甲氧基齊墩果醇乙酸酯；R,為-OCH3，R2為-CO(CH2)2CH3，&-115為二氧亞甲基，R3、&、R7均為-H，即為齊墩果醇丁酸酯；R!為-OCH3，R2為(3-D-葡萄糖基，RrR5為二氧亞甲基，R3、&、R7均為-H，即為齊墩果醇-葡萄糖苷；R,為OCH3，R2為龍膽雙糖基，RrR5為二氧亞甲基，R3、&、R7均為-H，即為齊墩果醇-龍膽雙糖苷；R,為OCH3，R2為龍膽三糖基，R4-R5為二氧亞甲基，R3、&、R7均為-H，即為齊燉果醇-龍膽三糖苷；R,為-H，R2為龍膽雙糖基，R4-Rs為二氧亞甲基，R3、R6、R7均為-H，即為去甲氧基齊墩果醇-龍膽雙糖苷。6、一種具有抑制?；o酶A:膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶作用的藥物組合物，其特征在于含有活性成分如權(quán)利要求l一5任一項所述的齊墩果醇型苯并呋喃及其苷的任意一種或幾種。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于是由齊墩果醇型苯并呋喃及其苷的任意一種或幾種為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或載體組成。8、根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥物組合物的劑型為口服劑型或注射劑。全文摘要本發(fā)明公開了齊墩果醇型苯并呋喃及其苷在制備?；o酶A膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(ACAT)抑制劑中的應(yīng)用。提供了通式為I的齊墩果醇型苯并呋喃及其苷在制備ACAT抑制劑中的用途；還提供了一種ACAT抑制劑的藥物組合物，其含有活性成分為通式I的齊墩果醇型苯并呋喃及其苷。由于齊墩果醇型苯并呋喃及其苷具有良好的ACAT抑制劑作用，可將齊墩果醇型苯并呋喃及其苷制成片劑、膠囊等多種劑型，適用于心絞痛、心肌梗塞、腦梗塞、阿耳茨海默氏病、急性冠狀綜合癥、PTCA或支架放置后冠狀動脈再狹窄等疾病的預(yù)防或治療，其還可以作為調(diào)節(jié)皮脂腺機(jī)能、抑制皮脂過度生成的治療劑，用于治療油性皮膚、痤瘡、皮脂溢出、皮質(zhì)類固醇導(dǎo)致的痤瘡樣損害等疾病。文檔編號A61P25/28GK101502507SQ200910005630公開日2009年8月12日申請日期2009年1月20日優(yōu)先權(quán)日2008年2月4日發(fā)明者建孫,晏菊芳,李麒麟,王曉琴,欣陳,顏永紅申請人:成都地奧九泓制藥廠