專利名稱：：胖大海提取物的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及胖大海提取物的新用途。
背景技術(shù)：
：中藥胖大海為梧桐科植物胖大海的(&wcw//fl(yc/mc^/wraHance)的干燥成熟種子，具有清熱潤(rùn)肺，利咽解毒，潤(rùn)腸通便的功效，是傳統(tǒng)的清咽潤(rùn)喉的中藥，是衛(wèi)生部公布的第三批藥食兩宜的資源。用于肺熱聲啞，干咳無(wú)痰，咽喉干痛，熱結(jié)便閉，頭痛目赤。臨床用于肺熱聲啞、干咳無(wú)痰、咽喉干痛、熱結(jié)便閉、頭痛目赤的治療。胖大海中含有多酚、黃酮、萜類、等各類成分。美國(guó)霍普金斯大學(xué)Loftus等對(duì)小鼠脂肪酸合成酶的研究結(jié)果證明，抑制脂肪酸合成酶可造成丙二酰輔酶A的積累，而后者抑制與進(jìn)食相關(guān)的下丘腦神經(jīng)肽Y的表達(dá)，在不影響小鼠活動(dòng)能力的情況下使食欲下降，體重降低。T.Loftus等指出，脂肪酸合成酶可以作為控制體重潛在的治療靶位(Loftus.T.M.etal.,2000.Science,288(5475):2379-2381)。以上結(jié)果表明，抑制脂肪酸合成酶的活性，可抑制體內(nèi)脂肪的合成，而且還能抑制動(dòng)物的食欲，限制攝入的脂肪量并消耗體內(nèi)脂肪。因此，研制和開發(fā)脂肪酸合成酶的抑制劑具有重大的減肥降脂肪的潛力。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供胖大海提取物的一種新用途。本發(fā)明所提供的減肥藥物，它的活性成分是胖大海提取物;所述胖大海提取物按照如下方法制備以胖大海為原料，用丙酮-水或乙醇-水混合溶劑浸取得到的。其中所述丙酮-水混合溶劑中丙酮的體積百分?jǐn)?shù)可為50-70%;所述乙醇-水混合溶劑中乙醇的體積百分?jǐn)?shù)可為50-70%;所述混合溶劑與胖大海的重量份數(shù)比可為8-30:1。所述浸取的方法可為在25-7(TC下攪拌，或80-10(TC下加熱回流；所述在25-70°C下攪拌浸取的時(shí)間可為3-24小時(shí)；所述80-100"C下加熱回流的時(shí)間可為2-3小時(shí)。為了提高所述提取物的純度，所述浸取后還進(jìn)行過濾和濃縮；所述濃縮的方法為除去濾液中的丙酮或乙醇，然后用乙酸乙酯從水相中萃取，收集乙酸乙酯提取液，再除去所述乙酸乙酯提取液中的乙酸乙酯，得到胖大海提取物。需要的時(shí)候，在上述藥物中還可以加入一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。所述載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體、潤(rùn)滑劑等，必要時(shí)還可以加入香味劑、甜味劑、和著色劑等。本發(fā)明的減肥藥物可以制成注射液、片劑、粉劑、粒劑、膠囊、口服液、膏劑、3霜?jiǎng)┑榷喾N形式。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。上述藥物的用量一般為18—10mg/kg體重/天，療程為30至50天。實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明的減肥藥物對(duì)大鼠的體重增長(zhǎng)有抑制作用，可以顯著減少大鼠體內(nèi)脂肪重量。具體實(shí)施例方式減肥藥物的制備1、胖大海提取物的制備將在北京同仁堂購(gòu)買的胖大海粉碎,用下述方法提取有效物用乙醇-水混合溶劑(乙醇的體積百分?jǐn)?shù)為50%)與上述粉碎的胖大海按重量份數(shù)比8:1混合，室溫25'C下攪拌浸取12小時(shí)，用普通濾紙過濾；在同樣條件下再浸取12小時(shí)，然后用普通濾紙過濾，將兩次濾液合并。在0.09MPa，40°C(減壓)低溫蒸發(fā)除去乙醇，得到含有效物質(zhì)的水相，用等體積的石油醚脫去其中的脂類物質(zhì)，再用等體積乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯層，如上減壓低溫蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，得到浸膏，將該浸膏(真空)干燥(5(TC)得到固態(tài)的胖大海提取物，將該固態(tài)胖大海提取物稱為胖大海提取物A。三次重復(fù)實(shí)驗(yàn)的胖大海提取物A的提取率(提取率=胖大海提取物A的質(zhì)量/胖大海的質(zhì)量)為58土2g/kg胖大海。2、減肥藥物的制備將胖大海提取物A直接作為減肥藥物。實(shí)雄2、減雄激游劍姿1、胖大海提取物的制備將在北京同仁堂購(gòu)買的胖大海粉碎,用下述方法提取有效物用丙酮-水混合溶劑(丙酮的體積百分?jǐn)?shù)為70%)與上述粉碎的胖大海按重量份數(shù)比為15:1混合，8(TC加熱回流3小時(shí)，進(jìn)行普通濾紙的過濾；在同樣條件下再加熱回流2小時(shí)，進(jìn)行普通濾紙的過濾，將兩次濾液合并。在0.09MPa，4(TC左右(減壓)低溫蒸發(fā)濃縮，除去其中的有機(jī)溶劑，得到有效物質(zhì)水相，對(duì)水相中的有效物進(jìn)一步濃縮,具體方法為:先用等體積的石油醚分3-4次進(jìn)行萃取，除去其中的脂類物質(zhì)，再用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，將乙酸乙酯提取液在0.09MPa，4(TC左右(減壓)低溫蒸發(fā)濃縮，除去有機(jī)溶劑得到經(jīng)濃縮的有效物浸膏，即胖大海提取物。將此浸膏進(jìn)一步在40-5(TC(真空)干燥得到固態(tài)的胖大海提取物，將該固態(tài)胖大海提取物稱為胖大海提取物B。三次重復(fù)實(shí)驗(yàn)的胖大海提取物B的提取率(提取率=胖大海提取物B的質(zhì)量/胖大海的質(zhì)量)為60±2.2g/kg胖大海。2、減肥藥物的制備將胖大海提取物B直接作為減肥藥物。減,秀儲(chǔ)劍吝1、胖大海提取物的制備將在北京同仁堂購(gòu)買的胖大海粉碎,用下述方法提取有效物用乙醇-水混合溶齊'」(乙醇與水的體積份數(shù)比為70:30)與上述粉碎的胖大海按重量份數(shù)比為20:1混合，10(TC加熱回流3小時(shí)，然后進(jìn)行普通濾紙的過濾，在同樣條件下再加熱回流2小時(shí)，然后進(jìn)行普通濾紙的過濾，將兩次濾液合并。在0.09MPa，4(TC左右(減壓)低溫蒸發(fā)濃縮，除去其中的有機(jī)溶劑，得到含有效物質(zhì)的水相，即胖大海提取物。對(duì)水相中的有效物進(jìn)一步濃縮,具體方法為:用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，將乙酸乙酯提取液在0.09MPa，40°C(減壓)低溫蒸發(fā)濃縮，除去有機(jī)溶劑得到經(jīng)濃縮的有效物浸膏，將此浸膏在4(TC進(jìn)一步(真空)干燥得到固態(tài)的胖大海提取物，將該固態(tài)胖大海提取物稱為胖大海提取物C。三次重復(fù)實(shí)驗(yàn)的胖大海提取物C的提取率(提取率^胖大海提取物C的質(zhì)量/胖大海的質(zhì)量)為58士2.3g/kg胖大海。2、減肥膠囊的制備(1)制備膠囊內(nèi)容物將胖大海提取物C作為活性成分，按照如下方法制備減肥藥物膠囊將120g胖大海提取物C，3000g核桃油和3000g氫化油混合，加熱到40'C，均質(zhì)；再加入5g維生素E，5g維生素C和lg迷迭香，100g葡萄糖和100gNaCl，在4(TC溫度下均質(zhì)，得到本發(fā)明的中藥組合物(膠囊內(nèi)容物)。(2)制備膠囊殼液將46g明膠(已脫去臭味)溶于35g水中，加熱到65i:，再加入16g丙三醇，2.3g聚乙二醇-400混合，得到膠囊殼液。(3)將300mg膠囊內(nèi)容物和200mg囊殼液利用旋轉(zhuǎn)式自動(dòng)軟膠囊成型機(jī)，制作軟膠囊，每粒軟膠囊重500mg，其中內(nèi)容物300mg。實(shí)盧,、減雄雄激吝1、胖大海提取物的制備將在北京同仁堂購(gòu)買的胖大海粉碎,用下述方法提取有效物用丙酮-水混合溶劑(丙酮與水的體積份數(shù)比為50:50)與上述粉碎的胖大海按重量份數(shù)比為25:1混合，9(TC加熱回流3小時(shí)，然后進(jìn)行普通濾紙的過濾，在同樣條件下再加熱回流2小時(shí),進(jìn)行普通濾紙的過濾。將兩次濾液合并，在0.09MPa，40°C左右(減壓)低溫蒸發(fā)濃縮，除去其中的有機(jī)溶劑，得到含有效物質(zhì)的水相，即胖大海提取物。對(duì)水相中的有效物進(jìn)一步濃縮,具體方法為先用等體積的石油醚脫去5其中脂溶性物質(zhì)，再用乙酸乙酯進(jìn)行萃取3次，將合并的乙酸乙酯提取液在0.09MPa，4(TC左右(減壓)低溫蒸發(fā)濃縮，除去有機(jī)溶劑得到經(jīng)濃縮的有效物浸膏，將此浸膏在〈5(TC進(jìn)一步(真空)干燥得到固態(tài)的胖大海葉提取物，將該固態(tài)胖大海提取物稱為胖大海提取物D。三次重復(fù)實(shí)驗(yàn)的胖大海提取物D的提取率(提取率=胖大海提取物D的質(zhì)量/胖大海的質(zhì)量)為58±2.3g/kg胖大海。2、減肥藥物的制備將6重量份淀粉與50重量份胖大海提取物D混合均勻，制粒、干燥、，得到減肥藥物。實(shí)施例5、胖大海提取物對(duì)脂肪酸合成酶抑制活性的檢測(cè)所用的脂肪酸合酶按照文獻(xiàn)(W.X.Tianetal.，1985.J.Biol.Chem.，260(20):11375-11387;田維熙等，1996.不同生長(zhǎng)期蛋雞的體脂水平和肝臟脂肪酸合成酶活性的關(guān)系.生物化學(xué)雜志，12(2):234-236)中描述的方法自新鮮鴨肝中分離提純的，并經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳(聚丙烯酰胺凝膠的濃度為分離膠濃度5%;濃縮膠3.5%，Tris甘氨酸緩沖液pH8.0)檢測(cè)為單一帶。脂肪酸合酶活性采用乙酰輔酶A、丙二酸單酰輔酶A、NADPH為底物的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)活方法測(cè)定(W.X.Tianetal.，1985.J.Biol.Chem.，260(20):11375-11387;田維熙等，1996.不同生長(zhǎng)期蛋雞的體脂水平和肝臟脂肪酸合成酶活性的關(guān)系.生物化學(xué)雜志，12(2):234-236)。具體方法如下在37。C下，在2毫升石英比色皿中加入脂肪酸合酶底物0.2mM乙酰輔酶A溶液25微升，0.4mM丙二酰輔酶A溶液50微升和1.3mMNADPH溶液50微升；再加入O.IM，pH7.0磷酸鹽緩沖液1.85毫升及脂肪酸合酶溶液30微升混勻，啟動(dòng)酶促反應(yīng)。用分光光度計(jì)監(jiān)測(cè)單位時(shí)間內(nèi)340nm波長(zhǎng)處吸光值A(chǔ)的變化(AA/min)來(lái)表示脂肪酸合酶的活力。胖大海提取物對(duì)脂肪酸合酶的抑制活性測(cè)定方法如下在37"C下，在2毫升石英比色皿中加入脂肪酸合酶底物0.2mM乙酰輔酶A溶液25微升，0.4mM丙二酰輔酶A溶液50微升和1.3mMNADPH溶液50微升；再分別加入實(shí)施例1至4中的胖大海提取物A、B、C、D水溶液；再加入0.1M，pH7.0磷酸鹽緩沖液1.85毫升及脂肪酸合酶溶液30微升，使脂肪酸合酶的終濃度為7微克/毫升，混勻，啟動(dòng)酶促反應(yīng)。同時(shí)以不加胖大海提取物的反應(yīng)體系作為空白對(duì)照。用分光光度計(jì)監(jiān)測(cè)單位時(shí)間內(nèi)340nm波長(zhǎng)處吸光值A(chǔ)的變化(AA/min)來(lái)表示脂肪酸合酶的活力。在一定濃度胖大海提取物存在下，脂肪酸合酶反應(yīng)的活力下降，當(dāng)其活力下降至對(duì)照活力的一半時(shí)所需胖大海提取物的濃度即為IC5o,用該數(shù)值表示胖大海提取物對(duì)脂肪酸合酶的抑制能力。三次重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明實(shí)施例1中的胖大海提取物A的ICso為3.5微克/毫升，實(shí)施例2中的胖大海提取物B的IC5o為3.4微克/毫升，實(shí)施例3中的胖大海提取物C的IQo為3.5微克/毫升，實(shí)施例4中的胖大海提取物D的ICso為3.5微克/毫升。實(shí)施例6、本發(fā)明減肥藥物對(duì)肥胖大鼠的抑重減肥作用普通飼料(購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物繁殖中心)。高脂飼料購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物繁殖中心。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物7周齡，體重為200-220g的Wista雄性大鼠，SPF級(jí)，購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁殖中心，許可證SCXK(京)2004-0001。1、樣品的制備用含5%。(質(zhì)量百分含量)的羧甲基纖維素的生理鹽水(羧甲基纖維素作為藥物的分散劑)，將實(shí)施例1至4中的減肥藥物分別制成混懸液，作為大鼠灌胃的實(shí)驗(yàn)樣品，每次灌胃2毫升。模型對(duì)照組喂以等量的含5%。的羧甲基纖維素生理鹽水，陽(yáng)性曲美對(duì)照組喂以市售減肥藥曲美膠囊(國(guó)藥準(zhǔn)字X20010279號(hào)(5mg/粒)，用含5%。的羧甲基纖維素生理鹽水配制成溶液。動(dòng)物劑量計(jì)算人的劑量+體重X5即10mg/60kgX5=0.8mg/kg。考慮到胖大海為植物藥，劑量應(yīng)大，因而將對(duì)照組動(dòng)物的曲美劑量也加大為1.6mg/kg。2、大鼠育肥實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)大鼠240只，隨機(jī)抽取40只做空白對(duì)照組?？瞻讓?duì)照組從實(shí)驗(yàn)自始至終一直給予普通飼料喂養(yǎng)；高脂組給予高脂飼料喂養(yǎng)育肥30天。實(shí)驗(yàn)期間每天觀察大鼠進(jìn)食量，每周稱一次體重，每周量一次身長(zhǎng)，并計(jì)算Lees指數(shù)((體重(g)^xlO"體長(zhǎng)(cm))。育肥實(shí)驗(yàn)結(jié)束處死3、大鼠減肥實(shí)驗(yàn)育肥終末，將高脂組中育肥的200只大鼠隨機(jī)分為4批，每批5組，每組10只，即實(shí)施例l-4的減肥藥物實(shí)驗(yàn)。分別設(shè)陽(yáng)性曲美對(duì)照組(曲美組，1.6mg/kg體重)、模型對(duì)照組、樣品高劑量組(120mg/kg體重)、中劑量組(40mg/kg體重)、低劑量組(15mg/kg體重)組，每?jī)芍伙曫B(yǎng)于一只籠子里，大鼠自由進(jìn)食和飲水。用圓頭灌胃器灌胃給藥，每日每只一次灌胃2.0ml樣品。其中，陽(yáng)性對(duì)照組每日每只灌胃2.0ml曲美膠囊溶液一次，劑量為1.6mg曲美/kg體重；模型對(duì)照組每日每只灌胃2.0ml生理鹽水一次;樣品高劑量組每日每只灌胃2.0ml的實(shí)施例1或2或3或4的減肥藥物混懸液一次，使用劑量為每千克體重120mg胖大海提取物A或B或C或D;樣品中劑量組每日每只灌胃2.0ml的實(shí)施例1或2或3或4的減肥藥物混懸液一次，劑量為每千克體重40mg胖大海提取物A或B或C或D;樣品低劑量組每日每只灌胃2.0ml7的實(shí)施例1或2或3或4的減肥藥物混懸液一次，劑量為每千克體重15mg胖大海提取物A或B或C或D。每周測(cè)定大鼠體重，每天測(cè)定單籠的攝食量。減肥持續(xù)21天。減肥實(shí)驗(yàn)結(jié)束，處死前10小時(shí)停止喂食。處死后立即打開腹腔，取腹腔脂肪組織稱重并取全部肝臟，稱重并迅速在冰浴中降溫，作測(cè)定肝臟脂肪酸合酶活性用。大鼠肝臟脂肪酸合酶的制備新鮮肝臟lg，按l:1.8的體積比加入4'C的抽提緩沖液(0.1MKH2P04-K2HP04緩沖液，pH7.0,含lmMEDTA，lmMDTT，1%甘油)，先低速勻漿30秒鐘，再高速勻漿1分鐘，上清液再以18000轉(zhuǎn)/分離心1小時(shí)。上清液低溫冷凍保存，作FAS(脂肪酸合酶)活性測(cè)量用。兩次離心均保持4X:恒溫。脂肪酸合酶活性采用乙酰輔酶A、丙二酰輔酶A、NADPH為底物的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)活方法測(cè)定(W.X.Tianetal.，1985.J.Biol.Chem.，260(20):11375-11387;田維熙等，1996.不同生長(zhǎng)期蛋雞的體脂水平和肝臟脂肪酸合成酶活性的關(guān)系.生物化學(xué)雜志，12(2):234-236)。具體方法如下在37"下，在2毫升石英比色皿中加入脂肪酸合酶底物:0.2mM乙酰輔酶A溶液25微升，0.4mM丙二酰輔酶A溶液50微升和1.3mMNADPH溶液50微升；再加入O.IM，pH7.0磷酸鹽緩沖液1.85毫升及脂肪酸合酶溶液30微升混勻，啟動(dòng)酶促反應(yīng)。用分光光度計(jì)監(jiān)測(cè)單位時(shí)間內(nèi)340nm波長(zhǎng)處吸光值A(chǔ)的變化(AA34Q/min)來(lái)表示脂肪酸合酶的活力。4、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS軟件包,組間比較采用F檢驗(yàn)。高脂飼料對(duì)大鼠體重、Lees指數(shù)的影響結(jié)果如表1所示，表1中的模型對(duì)照組、陽(yáng)性曲美對(duì)照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組均來(lái)自高脂組，這5個(gè)組每組10只，共50只。表1表明高脂飼料可以引起大鼠營(yíng)養(yǎng)性肥胖,高脂飼料喂養(yǎng)的大鼠體重高于普通飼料喂養(yǎng)大鼠的13%，顯示造模成功。同時(shí),高脂飼料喂養(yǎng)的大鼠與普通飼料喂養(yǎng)的大鼠在Lee's指數(shù)方面的比較均有顯著性差異(PO.05),高脂組明顯高于空白對(duì)照組。表l高脂飼料對(duì)大鼠體重、Lees指數(shù)的影響育肥前體重(g)育肥后體重(g)育肥后Lees指數(shù)空白對(duì)照組201.5±5.21378.23±5.13331.23±1.56模型對(duì)照組202.7±4.14428.2±11.01340.63±4.35曲美對(duì)照組204.7±8.14434.25±13.18**342.30±3.42**樣品低劑量組202.5±6.03430±17.02**343.08±3.87**樣品中劑量組202,02±7,63433.1±12.13**343.98士2，樣品高劑量組203.6±6.44434.2±12.01**344,87±2.80**與空白對(duì)照組比較"表示P〈0.01(有顯著性差異)，*表示？<0.05實(shí)施例1的減肥藥物對(duì)肥胖性大鼠體重和Lees指數(shù)的影響結(jié)果如表2所示，表明給以不同劑量的藥物后，與模型對(duì)照組相比，不同劑量的減肥藥物對(duì)肥胖大鼠的體重增長(zhǎng)有不同程度的抑制作用，其中高劑量的本發(fā)明減肥藥物對(duì)肥胖大鼠的體重增長(zhǎng)抑制作用最強(qiáng)，低劑量的抑制作用最弱。與陽(yáng)性對(duì)照藥曲美相比，高劑量的本發(fā)明減肥藥物對(duì)大鼠體重增長(zhǎng)的抑制作用不亞于曲美。尤其是3個(gè)劑量組均能有效減低大鼠體內(nèi)脂肪含量，且作用不亞于曲美。增重方面，曲美組、高劑量組與模型組之間有顯著差異，*表示？<0.05;曲美組與高劑量組無(wú)顯著差異。說(shuō)明實(shí)施例1的減肥藥物高劑量與曲美同樣可以減緩體重增加。體內(nèi)脂肪與體重比值(脂/體)方面，曲美組、空白組及實(shí)施例1的減肥藥物中，高劑量組均與模型組有著顯著差異，(**)P<0.01，(*)P<0.05.表2實(shí)施例1的減肥藥物對(duì)肥胖大鼠體重和體脂的影響藥物劑量(mg/kg)給藥前體重(g)均值士SD給藥后體重(g)均值±SD脂/體比值(均值)體重增加%給藥前Lees指數(shù)給藥后Lees指數(shù)空白對(duì)照組無(wú)378.62±5.26440±10.090.03267"±0.0051216.4330.24±2.13319.01±1.78模型對(duì)照組生理鹽水429.3±10.11494.23±12.380.04608±0.001%15.1342.79±1.67340.02±1.31曲美對(duì)照組曲美l'6mg/kg434.6±11.26475.46土14.20*0.03382**±0.003389.4342.11±2.33323.7±1.23低劑量組15mg/kg430±9.3484±6.040.03779±0.0065212.5343.0±2.36324.23±1.35中劑量組40mg/kg432.5±6.244肌65±6.380.03300*土0.0051211.1343.2±5.63325.15±8.329<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>所示實(shí)施例2的減肥藥物對(duì)肥胖性大鼠體重和Lees指數(shù)的影響結(jié)果如表3所示，表明給以不同劑量的藥物后，與模型對(duì)照組相比，不同劑量的減肥藥物對(duì)肥胖大鼠的體重增長(zhǎng)有不同程度的抑制作用，其中高劑量的本發(fā)明減肥藥物對(duì)肥胖大鼠的體重增長(zhǎng)抑制作用最強(qiáng)，低劑量的抑制作用最弱。與陽(yáng)性對(duì)照藥曲美相比，高劑量的本發(fā)明減肥藥物對(duì)大鼠體重增長(zhǎng)的抑制作用不亞于曲美。尤其是3個(gè)劑量組均能有效減低大鼠體內(nèi)脂肪含量，且作用不亞于曲美。增重方面，曲美組、實(shí)施例2的減肥藥物高劑量組與模型組之間有顯著差異，4表示P〈0.05;曲美組與高劑量組無(wú)顯著差異。說(shuō)明實(shí)施例2的減肥藥物高齊慢與曲美同樣可以減緩體重增力口。體內(nèi)脂肪與體重比值(脂/體)方面，曲美組、空白組及實(shí)施例2的減肥藥物中，高劑量組均與模型組有著顯著差異，(**)P<0.01，(*)P<0.05.表3實(shí)施例2的減肥藥物對(duì)肥胖大鼠體重和體脂的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實(shí)施例3的減肥藥物對(duì)肥胖性大鼠體重和Lees指數(shù)的影響結(jié)果如表4所示，表明給以不同劑量的藥物后，與模型對(duì)照組相比，不同劑量的減肥藥物對(duì)肥胖大鼠的體重增長(zhǎng)有不同程度的抑制作用，其中高劑量的本發(fā)明減肥藥物對(duì)肥胖大鼠的體重增長(zhǎng)抑制作用最強(qiáng)，低劑量的抑制作用最弱。與陽(yáng)性對(duì)照藥曲美相比，高劑量的本發(fā)明減肥藥物對(duì)大鼠體重增長(zhǎng)的抑制作用不亞于曲美。尤其是3個(gè)劑量組均能有效減低大鼠體內(nèi)脂肪含量，且作用不亞于曲美。增重方面，曲美組、高劑量組與模型組之間有顯著差異，*表示？<0.05;曲美組與高劑量組無(wú)顯著差異。說(shuō)明實(shí)施例3的減肥藥物高劑量與曲美同樣可以減緩體重增加。體內(nèi)脂肪與體重比值(脂/體)方面，曲美組、空白組及實(shí)施例3的減肥藥物中，高劑量組均與模型組有著顯著差異，(**)P<0.01，(*)P<0.05.表4實(shí)施例3的減肥藥物對(duì)肥胖大鼠體重和體脂的影響藥物劑量(mg/kg給藥前體重(g)均值土SD給藥后體重(g)均值±SD脂/體比值(均值)體重增加%給藥前Lees指數(shù)給藥后Lees指數(shù)空白對(duì)照組無(wú)376.52±9.67439±11.290.03307**±0.0031516.5330.17±3.19318.11士2.78模型對(duì)照組生理鹽水423.3土9.11487.3±16.320.04708±0.0046915.0341.23±1.52339.23±1.41曲美對(duì)照組曲美1.6mg/kg434.8±9.68475.4±8.52*0.03342**±0.006359.3342.02±8.52325.2±1.68低劑量組15mg/kg復(fù)5±10.27483.21±14.040.03839±0.0052212.7341.0±3.61325.62±2.95中劑量組40mg/kg438.25±9.31488.32±8.450.03351*±0.0052311.4342.6±3.54323.1±3.43高劑量組120mg/kg432,1±13.21472.2±13.46*0.03352**±0.007319.3342:3±8.25323.25±2.23實(shí)施例4的減肥藥物對(duì)肥胖性大鼠體重和Lees指數(shù)的影響結(jié)果如表5所示，表明給以不伺劑量的藥物后，與模型對(duì)照組相比，不同劑量的減肥藥物對(duì)肥胖大鼠的體重增長(zhǎng)有不同程度的抑制作用，其中高劑量的本發(fā)明減肥藥物對(duì)肥胖大鼠的體重增長(zhǎng)抑制作用最強(qiáng)，低劑量的抑制作用最弱。與陽(yáng)性對(duì)照藥曲美相比，高劑量的本發(fā)明減肥藥物對(duì)大鼠體重增長(zhǎng)的抑制作用不亞于曲美。尤其是3個(gè)劑量組均能有效減低大鼠體內(nèi)脂肪含量，且作用不亞于曲美。增重方面，曲美組、高劑量組與模型組之間有顯著差異，*表示？<0.05;曲美組與高劑量組無(wú)顯著差異。說(shuō)明實(shí)施例4的減肥藥物高劑量與曲美同樣可以減緩體重增加。體內(nèi)脂肪與體重比值(脂/體)方面，曲美組、空白組及實(shí)施例4的減肥藥物中，高劑量組均與模型組有著顯著差異，(**)P<0.01，(*)P<0.05.表5實(shí)施例4的減肥藥物對(duì)肥胖大鼠體l和體脂的影響藥物劑量(mg/kg)給藥前體重(g)均值土SD給藥后體重(g)均值±SD脂/體比值(均值)體重增加%給藥前Lees指數(shù)給藥后Lees指數(shù)11<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>在肝臟FAS(脂肪酸合酶)活性上，與模型對(duì)照組相比，實(shí)施例l-4減肥藥物的高、中劑量組與之有顯著性差異，即高、中劑量的實(shí)施例1-4的減肥藥物能顯著的降低大鼠肝臟中的FAS活性。表6.實(shí)施例1-4的減肥藥物對(duì)肥胖大鼠肝臟脂肪酸合成酶活力的影響(如前所述FAS活力表示為AA340/min)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注與模型組對(duì)照比較，*P<0.03因此實(shí)施例1至4的減肥藥物對(duì)肥胖大鼠的體重，以及脂/體比指標(biāo)的影響可能和胖大海提取物對(duì)大鼠肝臟中的FAS活性的影響有關(guān)，可能是胖大海減重的機(jī)理之一。權(quán)利要求1、胖大海提取物在制備減肥藥物中的應(yīng)用；所述胖大海提取物按照如下方法制備以胖大海為原料，用丙酮-水或乙醇-水混合溶劑浸取得到的。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于所述丙酮-水混合溶劑中丙酮的體積百分?jǐn)?shù)為50-70%。3、根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于所述乙醇-水混合溶劑中乙醇的體積百分?jǐn)?shù)為50-70%。4、根據(jù)權(quán)利要求l、2或3所述的應(yīng)用，其特征在于所述混合溶劑與胖大海的重量份數(shù)比為8-30:1。5、根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于所述浸取的方法為在25-70。C下攪拌。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述在25-7(TC下攪拌浸取的時(shí)間為3-24小時(shí)。7、根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于所述浸取的方法為在80-10(TC下加熱回流。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于所述80-10(TC下加熱回流的時(shí)間為2-3小時(shí)。9、根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于所述浸取后還進(jìn)行過濾和濃縮。10、根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于所述濃縮的方法為除去濾液中的丙酮或乙醇，然后用乙酸乙酯從水相中萃取，收集乙酸乙酯提取液，再除去所述乙酸乙酯提取液中的乙酸乙酯，得到胖大海提取物。全文摘要本發(fā)明公開了一種胖大海提取物在制備減肥藥物中的應(yīng)用。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)胖大海提取物可以用于制備減肥藥物；所述胖大海提取物按照如下方法制備以胖大海為原料，用丙酮-水或乙醇-水混合溶劑浸取得到的。本發(fā)明的減肥藥物對(duì)大鼠的體重增長(zhǎng)有抑制作用，可以顯著減少大鼠體內(nèi)脂肪重量。文檔編號(hào)A61K36/185GK101485698SQ20091000926公開日2009年7月22日申請(qǐng)日期2009年2月26日優(yōu)先權(quán)日2009年2月26日發(fā)明者宋學(xué)英,廖家旺,張英俠,華楊,田維熙,趙文華申請(qǐng)人:首都醫(yī)科大學(xué)