專利名稱：一種結(jié)腸癌化療藥物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種癌癥化療制劑的制備方法，具體地說是一種結(jié)腸癌化療藥物的制 備方法。
背景技術(shù)：
隨著環(huán)境污染的加劇和飲食結(jié)構(gòu)的變化，結(jié)腸癌發(fā)病率和死亡率逐年增加，嚴(yán)重 危害人民群眾健康。在結(jié)腸癌的治療方案中，化療仍然是目前其綜合治療措施中的主要手 段。目前在各種腫瘤的化療過程中所使用的化療藥物普遍存在的不足是抗腫瘤的化療藥物 缺乏選擇性，在殺滅癌細(xì)胞的同時也損傷了健康細(xì)胞，降低人體的免疫功能，出現(xiàn)許多毒副 作用，影響化療藥物的臨床應(yīng)用，為了提高抗腫瘤藥物的療效，并減輕對正常細(xì)胞的損傷和 毒性作用，醫(yī)學(xué)界多次嘗試把抗體、脂質(zhì)體、激素和其他大分子作為腫瘤化療藥物的載體， 以便增加藥物的靶向性，即“靶向治療”。但在實際臨床應(yīng)用過程中存在的一個主要問題是 肝臟和脾臟的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)把血液中的這些復(fù)合物作為外來有害物而迅速從血流中清除， 從而減少了藥物-大分子復(fù)合物對腫瘤細(xì)胞的作時間而影響了藥物的治療效果。因此將藥 與其他物質(zhì)結(jié)合，使其象制導(dǎo)導(dǎo)彈一樣精確，只殺死腫瘤細(xì)胞，對正常肌體無毒副作用，將 是攻克癌癥的又一里程碑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一種治療結(jié)腸癌復(fù)合注射制劑的制備方法，是按以下方式實現(xiàn)的，根據(jù) 不同血型分別取血庫原料血漿，通過離心和密度調(diào)整處理，從中提取出低密度脂蛋白，經(jīng)過 對低密度脂蛋白的提純制得靶向藥物的載體，然后與治療癌癥的阿克拉霉素靶向藥物進(jìn)行 復(fù)合，將復(fù)合后低密度脂蛋白_阿克拉霉素藥物注射到與藥物原料血漿血型相同的患者體 內(nèi)達(dá)到治療結(jié)腸癌的目的。具體制備步驟如下1)低密度脂蛋白的制備(1) KBr-NaEDPA 溶液的制備稱取 KBr 1. 080g,加入 0. 0022mol/L 的 NaEDPAlOOml 的水溶液中溶解攪拌均勻；(2)根據(jù)不同血型，分別取血庫血漿200ml，300r/m離心10分鐘，取上清液，用 KBr-NaEDPA溶液調(diào)密度為1. 01 P，溫度控制在4°C，用離心機(jī)于47000r/m的轉(zhuǎn)速離心18小 時，吸除上層的VLDL，剩余部分備用；(3)將吸除上層的VLDL后的剩余液體混勻，再用KBr-NaEDPA溶液調(diào)整密度為 1. 063 P，控制溫度4°C，用離心機(jī)于47000r/m的轉(zhuǎn)速，離心20小時，吸取上面的低密度脂蛋 白備用；2)對低密度脂蛋白進(jìn)行透析提純(1)透析液的制備稱取 Na2 HPO4. 12H20 179g，NaCl 58. 44g, EDTAlOOOmg 溶于蒸 餾水中調(diào)整體積至1000ml，再用2mol/L HCl調(diào)PH = 7. 4備用；
(2)將低密度脂蛋白裝入透析袋，再將透析袋浸在500ml透析液中，控制溫度4°C， 電磁攪拌透析24-48小時備用，透析過程中要換6次透析液，每次更換透析液500ml ；(3)向透析后的溶液中加入20μ g/ml凝血酶，溫度升至24°C，攪拌處理10分鐘，用0. 22 μ m微孔濾膜過濾除菌，分瓶裝，每瓶含LDL 40mg,置4°C溫度下保存?zhèn)溆茫?)低密度脂蛋白_阿克拉霉素復(fù)合注射劑的制備，采用溫育交換法，精稱ACM原 料藥80mg，加入到含有40mg低密度脂蛋白的溶液中，加蒸餾水調(diào)整總體積為20ml，40°C水 浴，恒溫振蕩3小時，然后將溶液裝透析袋中置于500ml透析液中，控制溫度4°C，避光透析 48小時，除去游離ACM,再經(jīng)0. 22 μ m微孔濾膜過濾除菌后，制成低密度脂蛋白-阿克拉霉 素復(fù)合注射劑，包裝瓶上標(biāo)注血漿原料血型，置溫度4°C下保存?zhèn)溆?。本發(fā)明的有益效果如下通過臨床實踐證明，低密度脂蛋白_阿克拉霉素復(fù)合注射劑治療結(jié)腸癌已獲得滿 意療效，且無明顯化療毒副作用。包括結(jié)腸癌在內(nèi)的多種腫瘤細(xì)胞特別是耐藥性腫瘤細(xì)胞 膜上，低密度脂蛋白受體的活性明顯增強(qiáng)，腫瘤細(xì)胞對低密度脂蛋白的攝取明顯增加。低密 度脂蛋白作為抗腫瘤藥物阿克拉霉素的載體實現(xiàn)治療腫瘤的藥物靶向作用的可行性引起 了廣泛的關(guān)注。低密度脂蛋白較其他人工合成的載體具有更多的優(yōu)點(1)對于具有細(xì)胞毒付作 用的高親脂性藥物來說，低密度脂蛋白是一種適合的傳輸載體；另一方面，在其內(nèi)藥物也避 免了血漿中酶的水解；(2)低密度脂蛋白是一種生理的載體，不會被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)清除，從 而延長了抗腫瘤藥物的血漿半衰期；(3)腫瘤細(xì)胞通過低密度脂蛋白受體途徑內(nèi)在化和代 謝細(xì)胞外的低密度脂蛋白，這種高效的過程可以引起不同的藥理性作用，可是消除一些抗 藥性的機(jī)制。
具體實施例方式本發(fā)明的化療結(jié)腸癌復(fù)合劑的制備方法，其制備步驟如下1)低密度脂蛋白的制備(1)制備 KBr-NaEDPA 溶液稱取 KBrl. 080g,加入 0. 0022mol/L 的 NaEDPAlOOml 的 水溶液中溶解攪拌均勻備用。(2)根據(jù)血庫存放的血漿原料血型，分別取血漿200ml，300r/m離心10分鐘，取上 清液，用KBr-NaEDPA溶液調(diào)密度為1. 01 P，溫度控制在4°C，用離心機(jī)于47000r/m的轉(zhuǎn)速 離心18小時，吸除上層的VLDL溶液，留下剩余部分備用；(3)將吸除上層的VLDL后的剩余液體混勻，再用KBr-NaEDPA溶液調(diào)整密度為 1. 063 P，控制溫度4°C，用離心機(jī)于47000r/m的轉(zhuǎn)速，離心20小時，吸取上面的低密度脂蛋 白備用；2)對低密度脂蛋白進(jìn)行透析提純(1)透析液的制備稱取 Na2 HPO4. 12H20 179g，NaCl 58. 44g, EDTAlOOOmg 溶于蒸 餾水調(diào)整體積至1000ml，用2mol/L HCl調(diào)PH = 7. 4備用；(2)將低密度脂蛋白裝入透析袋，再將透析袋浸在500ml透析液中，加電磁攪拌， 控制溫度4°C，攪拌透析24-48小時，透析過程中更換6次透析液500ml ；(3)向透析后的溶液中加入20 μ g/ml凝血酶，溫度升至24°C，攪拌處理10分鐘， 用0. 22 μ m微孔濾膜過濾除菌，分瓶包裝，每瓶含低密度脂蛋白40mg，置4°C溫度下保存?zhèn)溆茫?)低密度脂蛋白_阿克拉霉素復(fù)合注射劑的制備采用溫育交換法精稱阿克拉 霉素原料藥80mg，加入到含有40mg低密度脂蛋白的溶液中，加蒸餾水調(diào)整總體積為20ml， 置40°C水浴恒溫振蕩3小時，然后將溶液裝透析袋中于溫度4°C避光透析48小時，除去游 離阿克拉霉素，再經(jīng)0. 22 μ m微孔濾膜過濾除菌后，制成本發(fā)明的低密度脂蛋白-阿克拉霉 素復(fù)合靜脈注射，包裝瓶上標(biāo)注血漿原料血型，置溫度4°C下保存?zhèn)溆?。臨床應(yīng)用每天靜脈輸注低密度脂蛋白_阿克拉霉素復(fù)合靜脈注射藥物一次，20 天為一療程，需要3-5個療程，療程之間間隔10天。臨床典型病例1、楊XX，男，72歲，結(jié)腸癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)腹腔內(nèi)淋巴結(jié)廣泛轉(zhuǎn)移， 術(shù)后15天，給予低密度脂蛋白-阿克拉霉素復(fù)合注射劑靜脈注射每天一次，治療3個療程， 隨訪3年，未復(fù)發(fā)。2、崔XX，女，結(jié)腸癌晚期，給予低密度脂蛋白_阿克拉霉素復(fù)合注射劑靜脈注射治療3個療程，腫瘤組織逐漸縮小，治療5個療程，腫瘤組織逐漸消失，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。3、劉XX，男，66歲，結(jié)腸癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)縱膈及主動脈轉(zhuǎn)移，術(shù)后 15天給予低密度脂蛋白_阿克拉霉素復(fù)合注射劑靜脈注射治療3個療程，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。4、李XX，女，75歲，結(jié)腸癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)廣泛腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，術(shù) 后15天低密度脂蛋白_阿克拉霉素復(fù)合注射劑靜脈注射治療3個療程，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。5、李XX，男，57歲，結(jié)腸癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)腹膜后轉(zhuǎn)移，術(shù)后15天給 予低密度脂蛋白_阿克拉霉素復(fù)合注射劑靜脈注射治療3個療程，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。6、張XX，男，78歲，結(jié)腸癌晚期，給予低密度脂蛋白-阿克拉霉素復(fù)合注射劑靜脈 注射治療3個療程，腫瘤組織逐漸縮小，治療5個療程，腫瘤組織逐漸消失，隨訪3年，未復(fù) 發(fā)。7、馬XX，女，64歲，結(jié)腸癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，術(shù)后15 天給予低密度脂蛋白_阿克拉霉素復(fù)合注射劑靜脈注射治療3個療程，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。8、吳XX，男，72歲，結(jié)腸癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)胸腔內(nèi)轉(zhuǎn)移，術(shù)后15天給 予低密度脂蛋白_阿克拉霉素復(fù)合注射劑靜脈注射治療3個療程，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。9、馬XX，女，74歲，結(jié)腸癌晚期，給予低密度脂蛋白-阿克拉霉素復(fù)合注射劑靜脈 注射治療3個療程，腫瘤組織逐漸縮小，治療5個療程，腫瘤組織逐漸消失，隨訪3年，未復(fù) 發(fā)。10、曹XX，男，72歲，結(jié)腸癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)縱膈轉(zhuǎn)移，術(shù)后15天給 予低密度脂蛋白_阿克拉霉素復(fù)合注射劑靜脈注射治療3個療程，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。療效統(tǒng)計使用本發(fā)明的低密度脂蛋白_阿克拉霉素復(fù)合注射劑，共治療結(jié)腸癌 患者185人，有效率達(dá)100%，3年存活率達(dá)96%以上。
權(quán)利要求
一種結(jié)腸癌化療藥物的制備方法，其特征在于根據(jù)不同血型分別取血庫原料血漿，通過離心和密度調(diào)整處理，從中提取出低密度脂蛋白，經(jīng)過對低密度脂蛋白的提純制得靶向藥物的載體，然后與治療癌癥的阿克拉霉素靶向藥物進(jìn)行復(fù)合，將復(fù)合后低密度脂蛋白-阿克拉霉素藥物注射到與藥物原料血漿血型相同的患者體內(nèi)達(dá)到治療結(jié)腸癌的目的，制備步驟如下1)低密度脂蛋白的制備(1)KBr-NaEDPA溶液的制備稱取KBr 1.080g，加入0.0022mol/L的NaEDPA100ml的水溶液中溶解攪拌均勻；(2)根據(jù)不同血型，分別取血庫血漿200ml，300r/m離心10分鐘，取上清液，用KBr-NaEDPA溶液調(diào)密度為1.01ρ，溫度控制在4℃，用離心機(jī)于47000r/m的轉(zhuǎn)速離心18小時，吸除上層的VLDL，剩余部分備用；(3)將吸除上層的VLDL后的剩余液體混勻，再用KBr-NaEDPA溶液調(diào)整密度為1.063ρ，控制溫度4℃，用離心機(jī)于47000r/m的轉(zhuǎn)速，離心20小時，吸取上面的低密度脂蛋白備用；2)對低密度脂蛋白進(jìn)行透析提純(1)透析液的制備稱取Na2 HPO4.12H2O 179g，NaCl 58.44g，EDTA1000mg溶于蒸餾水中調(diào)整體積至1000ml，再用2mol/L HCl調(diào)PH＝7.4備用；(2)將低密度脂蛋白裝入透析袋，再將透析袋浸在500ml透析液中，控制溫度4℃，電磁攪拌透析24-48小時備用，透析過程中要換6次透析液，每次更換透析液500ml；(3)向透析后的溶液中加入20μg/ml凝血酶，溫度升至24℃，攪拌處理10分鐘，用0.22μm微孔濾膜過濾除菌，分瓶裝，每瓶含低密度脂蛋白40mg，置4℃溫度下保存?zhèn)溆茫?)低密度脂蛋白-阿克拉霉素復(fù)合注射制劑的制備，采用溫育交換法，精稱阿克拉霉素原料藥80mg，加入到含有40mg低密度脂蛋白的溶液中，加蒸餾水調(diào)整總體積為20ml，40℃水浴，恒溫振蕩3小時，然后將溶液裝透析袋中置于500ml透析液中，控制溫度4℃，避光透析48小時，除去游離阿克拉霉素，再經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾除菌后，制成低密度脂蛋白-阿克拉霉素復(fù)合注射制劑，包裝瓶上標(biāo)注血漿原料血型，置溫度4℃下保存?zhèn)溆谩?br> 全文摘要
本發(fā)明提供一種結(jié)腸癌化療藥物的制備方法，該根據(jù)不同血型分別取血庫原料血漿，通過離心和密度調(diào)整處理，從中提取出低密度脂蛋白，經(jīng)過對低密度脂蛋白的提純制得靶向藥物的載體，然后與治療癌癥的阿克拉霉素靶向藥物進(jìn)行復(fù)合，將復(fù)合后低密度脂蛋白-阿克拉霉素藥物注射到與藥物原料血漿血型相同的患者體內(nèi)達(dá)到治療結(jié)腸癌的目的。通過臨床實踐證明，本發(fā)明的低密度脂蛋白-阿克拉霉素復(fù)合注射制劑在臨床治療結(jié)腸癌上已獲得滿意療效，且無明顯化療毒副作用，共治療結(jié)腸癌患者185人，有效率達(dá)100％，3年存活率達(dá)96％以上，具有很好的推廣使用價值。
文檔編號A61P35/00GK101797389SQ200910013670
公開日2010年8月11日 申請日期2009年1月19日 優(yōu)先權(quán)日2009年1月19日
發(fā)明者曹瑩瑩 申請人:曹瑩瑩