專利名稱：：陽(yáng)離子黏附型霉酚酸酯納米滴眼液的制作方法陽(yáng)離子黏附型霉酚酸酯納米滴眼液本發(fā)明涉及一種霉酚酸酯滴眼液，特別涉及到一種陽(yáng)離:？1柳趣霉酚酸酯納米滴眼液。背景駄在我國(guó)的致盲眼病中，角鵬僅次于白內(nèi)障居第二位。目前，角膜移l翻訴反應(yīng)成為導(dǎo)致移植娜的首要原因。在》管的1誠(chéng)，排斥反應(yīng)的發(fā)生率為510%，而在高危角膜移植，排斥反應(yīng)的發(fā)生率可高達(dá)65%以上。如f賄效防治穿透性角膜移植術(shù)后的免疫排斥皿、提高lt^的成活率已成為眼科學(xué)者研究的焦點(diǎn)之一。霉酚酸酯(MMF)是一種有效的抗免疫排斥藥物，但目前只有口月蹄蜊?？诜斫o藥后不良反,重，文獻(xiàn)t隨接受霉酚酸酯的患者中有18Q/^因藥物毒副作用而被迫中斷用藥；iJ^卜，^L-目,P韓影響，藥物口服后!歐MA眼部組織而超陏效藥物濃度，這些均限制了已有霉酚酸酯在眼科中的進(jìn)一步的應(yīng)用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是^^一種陽(yáng)離子黏附型霉酚酸酯納米滴眼液，以增強(qiáng)藥物粒子角膜滯留性，延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間、提高角m藥物的吸收、>給藥次數(shù)、提高患者的j鵬人性，彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足。本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思將霉酚酸酉識(shí)J備成眼局部給藥新齊鵬如滴眼液，貝何以避免現(xiàn)有的霉酚酸酯口服制劑^Z用中存在的嚴(yán)重不良反應(yīng)。但普通滴眼液因?yàn)槭芙悄の照系K的限制，生物利用激艮低。霉酚酸酯愚隹溶性藥物，適合開發(fā)滴眼用溫懸劑。對(duì)于在淚液中難溶的藥物，如果斷氐混懸劑中藥物粒子的粒徑，由普通溫懸劑(粒徑在1-10，)制備成納米溫懸劑(粒徑在10-1000nm)，可增^X隹溶性藥物的溶解度，改變藥物的角膜吸收特征，提高安全性和有效性。另外，考慮到樹可一種聚合物溶液或溫懸液滴入眼部，首先與角膜和結(jié)膜表面的粘蛋白結(jié)合，粘蛋白主要為酸性糖蛋白，偵鴉il^^是硫酸或唾液酸基團(tuán)，呈負(fù)電荷性。普通的溫懸劑和納米溫懸劑呈負(fù)電荷(約-30-50mV)，和角膜上的正電荷存在電荷相斥，妨礙藥物吸收，因此，如果將普通的納米混懸劑的藥物粒子進(jìn)行^t布使其帶正電荷，就有利于正負(fù)電荷相吸，有助于提高角ilM藥物的吸收，并延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間，而達(dá)至伏，強(qiáng)藥效。本發(fā)明魏已有普通霉酚酸酯的齊趣進(jìn)行創(chuàng)新，即將藥物納米技禍畔立子傲嫩術(shù)相結(jié)合，具體說(shuō)是將霉酚酸酉識(shí)1」備皿有黏附作用、帶正電荷的納米級(jí)藥物粒子的滴眼液，^f吏霉酚酸酯的粒徑在100-700nm的納米級(jí)范圍內(nèi)。本發(fā)明的技術(shù)方案包括質(zhì)量百分比濃度1%的霉酚酸酯，適量的滲艦調(diào)節(jié)劑和PH調(diào)節(jié)劑，其特征^aS包括殼聚糖、普朗尼克F-68、磷脂，其中磷脂在滴眼液中的質(zhì)量百分比濃度0.2%-2%、普朗尼克F"68在滴眼液中的質(zhì)量百分比濃度0.5X-4Q/^、殼聚糖在滴眼液中的質(zhì)量百分比濃度0.5-4%，且殼聚糖W量為5000300000，脫乙>85%，其中霉酚酸酯的粒徑在100-700nm范圍內(nèi)。本發(fā)明中的磷脂是藥用輔禾職別的旭卵磷脂或蛋黃卵磷脂。本發(fā)明中的霉酚酸酯的粒徑和審U備過(guò)程中的勻質(zhì)機(jī)的壓強(qiáng)和循環(huán)7，有關(guān)，壓強(qiáng)增大，粒徑減小，循環(huán)7M^加，粒徑也減小，但題強(qiáng)增加到一定禾雖如1500bar、循環(huán)次f[ii加到一定禾號(hào)如15次后，壓^^循環(huán)7M[再增加，粒徑?jīng)]有明顯的減小，而是趨于穩(wěn)定，因此，本發(fā)明中iiffi勻質(zhì)l幾壓強(qiáng)1500bar循環(huán)157皿一步細(xì)化粉碎的固定工藝。霉酚酸酯的粒^3S與普朗尼克F-68、磷脂和殼聚糖濃度有關(guān)。普朗尼克F"68、卿旨和殼聚糖三者的濃度共同作用影響著霉酚酸酯的粒徑。本發(fā)明中的霉酚酸酯的正電荷的電荷大小與殼聚糖在滴眼液中的質(zhì)量百分比濃度有關(guān)，殼聚糖濃^^大，霉酚酸酯的正電荷的電^^大。本發(fā)明制備的方法如下首先，將霉酚酸酯和磷賸溶解與乙醚中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)充分去除乙醚，得到藥物和磷脂的均勻分散薄膜，然后加入殼聚糖溶液和普朗尼效-68溶液，充分(殼聚糖和磷脂包裹的粒子結(jié)合使得其粒，面帶上+20^-+50mV電位的正電荷，同時(shí)具有殼聚糖的黏附性)，、M結(jié)束后，將鵬聲分麟勻后得至IJ乳液，將乳艦高壓勻艦，細(xì)壓強(qiáng)500bar循環(huán)5^a行初次粉碎，再用壓強(qiáng)1500bar循環(huán)15^S—步細(xì)化粉碎，粒徑在100-700nm，然后將勻質(zhì)的學(xué)L液調(diào)節(jié)滲ffi至等滲，調(diào)節(jié)pW旌5.5-8.O即得。用激j^立度電位分析測(cè)定儀測(cè)得納米溫懸劑的粒徑在100-700nm。因此，本發(fā)明基本上是一個(gè)薄膜分散—高壓勻質(zhì)方法。本發(fā)明的特點(diǎn)是將霉酚酸酉識(shí)j備成納米瓶懸劑(粒徑在100-700nm)，增大藥物的溶解度，改變藥物的角膜吸收特征，提高^(guò)性和有效性。此外，將溫懸劑的霉酚酸酯藥物粒子M31磷脂和殼聚lia行斷布，使其帶正電荷，有利于正負(fù)電荷相吸，有助于提高藥物的角膜吸收，并延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間而大，強(qiáng)藥效，其中的殼聚糖具有生物黏附作用，使霉酚酸酯藥物粒子角膜黏附性增強(qiáng)，延長(zhǎng)藥物作用的時(shí)間。相比于霉酚酸酯口服制劑，本發(fā)明具有眼部藥物生物利用度高，不存在不良反應(yīng)，特別魏免了全身用藥的不良反應(yīng)，為霉酚酸酯在眼科的廣Si^用掛共了保證。這種新劑型會(huì)的多增強(qiáng)藥物粒子角膜滯留性，延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間、提高角)3M藥物的吸收、淘沙給藥次數(shù)、提高患者的順從性，本發(fā)明包括霉酚酸酯，適量的滲透壓調(diào)節(jié)劑和ph調(diào)節(jié)劑，^if征在于還包括殼聚糖、普朗尼克F-68、磷脂，其中磷脂在滴眼液中的質(zhì)量百分比濃度O.2%-2%、普朗尼克^68在滴眼液中的質(zhì)量百分比濃度0.5%-4%、殼聚糖在滴眼液中的質(zhì)量百分比濃度0.5-4%，且殼聚糖好量為5000300000，脫乙驗(yàn)〉8諷，其中霉酚酸酯的粒徑在100-700nm范圍內(nèi)。本發(fā)明中的磷脂為藥用輔料級(jí)另啲旭卵磷脂或蛋黃卵磷脂，主要起納米混懸劑的助懸劑和電荷傲布劑的作用，還可超樓似脂質(zhì)體的作用，增加霉酚酸酯的溶解度。本發(fā)明中的濃度O.5%-4%普朗尼彌~68是作為助懸劑和穩(wěn)定劑，延長(zhǎng)滴眼航角膜的滯留時(shí)間。濃度低刊.5%，貝U審恪的滴眼液不穩(wěn)定，容易絮凝，濃度高于4%，貝跑J備的滴眼艦于茅戰(zhàn)周，機(jī)胡視力。本發(fā)明的滲透壓調(diào)節(jié)劑為已有的WH、右旋蹄、山梨醇、甘露醇及氯化鈉中的—種構(gòu)成，調(diào)節(jié)至激本發(fā)明的pH調(diào)節(jié)劑為已有的鹽酸、豐繊酸、,化鈉、,化鉀、碳M鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉中的一種，調(diào)節(jié)pH至5.5—8.0。鄉(xiāng)例l將O.3g霉酚酸酯和60mg磷臘溶解于50ml乙醚中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)充分去除乙醚，得到藥物和磷脂的均勻分散薄膜，然后加入2%殼聚糖(^量5000、脫乙酰度85%)溶液7.5ml和2X的F-68溶液7.5ml，充分淵莫，超聲分,勻后得到乳液，將乳艦高壓勻Mt幾，先用壓強(qiáng)500bar循環(huán)5次進(jìn)行初次粉碎，然后用壓強(qiáng)1500bar循環(huán)15次謝TS—步細(xì)化粉碎，然后將勻質(zhì)的乳OT、Mt用7jC定容至30ml，用氯化鈉調(diào)節(jié)^tHM驗(yàn)，稀鹽酸pH值至6.5，得陽(yáng)離子黏附型霉酚酸酉謝米溫懸劑滴眼液。激光粒度電位分析測(cè)定儀測(cè)得納米混懸劑的粒徑范圍為腦700nm，平均粒徑為480nm，霉酚酸酯納^*立子表面電位為+37.5mV。將得到的納米溫懸劑在4。C閉光保存6個(gè)月，粒徑電位沒(méi)有實(shí)質(zhì)性變化。鄉(xiāng)例2將0.3g霉酚酸酯和0.6g磷臘溶解于50ml乙醚中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)充分去除乙醚，得到藥物和磷脂的均勻分散薄膜，然后加^量130000、脫乙,91%的殼聚糖1.2g和F~681.2g溶解于25ml注射用水中充分溶解，用殼聚糖和F~68的溶角^5分洗膜，超聲分散均勻后得到乳液，將乳M高壓勻^m，先用500bar壓強(qiáng)循環(huán)5:fcit行初次粉碎，然后用1500bar壓強(qiáng)循環(huán)157^Sfi^—步細(xì)化粉碎，然后將勻質(zhì)的乳OT繼寸用水定容至30ml，用氯化鈉調(diào)節(jié)滲透iS等滲，稀鹽酸pH值至6.5，得陽(yáng)離子黏附型霉酚酸酯納米溫懸劑滴眼液。激光茅鍍電位分析測(cè)定儀測(cè)得納米溫懸劑的粒徑范圍為100700nm，平均粒徑為410nm，粒子表面電位為+43mV。))射尋到的納米溫懸劑在4°C閉光保存6個(gè)月，粒徑電位沒(méi)有實(shí)質(zhì)性變化。鄉(xiāng)例3將實(shí)施例1中的殼聚糖換用M量為300000、脫乙酰度為85%的殼聚糖，也可得到本發(fā)明。光粒度電位分析測(cè)定儀測(cè)得納米溫懸劑的粒徑范圍為100700nm，平均粒徑為427nm，粒賴面電位為+49mV。將得到的納米龍懸劑在4r閉光保存6個(gè)月，粒徑電位沒(méi)有實(shí)質(zhì)性變化。鄉(xiāng)例4將0.3g霉酚酸酯和0.3g磷臘溶解于50ml乙醚中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)充分去除乙醚，得到藥物和磷脂的均勻分散薄膜，然后加M量175000、脫乙酰度95%的殼聚糖0.6g和F^680.6g溶解于25ml掛用水中充分溶解，用殼聚糖和F"68的溶M^5分鵬，超聲分散均勻后得到乳液，將乳M:高壓勻Ml，先用500bar壓力循環(huán)5^t行初次粉碎，然后用1500bar壓力循環(huán)157^^TiS—步細(xì)化粉碎，然后將勻質(zhì)的乳^fflftl寸用水定容至30ml,用氯化鈉調(diào)節(jié)滲mi!M雜，稀鹽酸pH蛭6.5，得陽(yáng)離子黏附型霉酚酸酯納米溫懸劑滴眼液。激^f鍍電位分析測(cè)定儀測(cè)得納米溫懸劑的粒徑范圍為腦700nm，平均粒徑為466nm，粒賴面電位為+45mV。4射尋歪啲納米瓶懸劑在4t:閉光保存6個(gè)月，粒徑電位沒(méi)有實(shí)質(zhì)性變化。^ffl本發(fā)明進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)之1咖下取M^i西蘭大白兔56只，隨機(jī)分為2組，一組為1%霉酚酸酯溫懸液，每只兔子50iilf商目艮，于5min、15min、30min、45min、lh、2h、4h、6h抽鵬水，HPLC分析藥物濃度。另一組為1%陽(yáng)離:？1占附型霉酚酸酯納米滴眼液^^且。每只兔子50"5%陽(yáng)離子黏附型霉酚酸酯納米滴眼液滴眼，于5min、15min、30min、45min、lh、2h、4h、6h、8h、10h、12h、24h抽，水，HPLC分析藥物濃度。房水中藥^T濃度見下表。藥物濃麟水藥物濃衝則定結(jié)果為1%陽(yáng)離:？1柳趣霉酚酸酯納米滴眼液會(huì)腺水藥物濃腿著高于1%霉酚酸酯瓶懸液組，且作用時(shí)間顯著延長(zhǎng)。表1房水中霉酚酸酯濃度(n=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>權(quán)利要求1、一種陽(yáng)離子黏附型霉酚酸酯納米滴眼液，其包括質(zhì)量百分比濃度1％的霉酚酸酯，適量的滲透壓調(diào)節(jié)劑和pH調(diào)節(jié)劑，其特征在于該滴眼液還包括殼聚糖、普朗尼克F-68、磷脂，其中磷脂在滴眼液中的質(zhì)量百分比濃度在0.2％-2％范圍內(nèi)、普朗尼克F-68在滴眼液中的質(zhì)量百分比濃度在0.5％-4％范圍內(nèi)、殼聚糖在滴眼液中的質(zhì)量百分比濃度在0.5-4％范圍內(nèi)，殼聚糖分子量為5000～300000，脫乙酰度＞85％，其中霉酚酸酯的粒徑在100-700nm范圍內(nèi)，其粒子表面有+20mV-+50mV電位的正電荷。2、如權(quán)利要求1所述的陽(yáng)離子黏附型霉酚酸酯納米滴眼液，其特征在于上述的磷脂為藥用輔料級(jí)別的大豆卵磷脂或蛋黃卵磷脂。3、制備陽(yáng)離子黏附型霉酚酸酯納米滴眼液的方法如下首先，將霉酚酸酯和磷脂溶解于乙醚中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)充分去除乙醚，在容器內(nèi)壁得到霉酚酸酯和磷脂的均勻分散的薄膜，然后加入殼聚糖溶液和普朗尼克F-68溶液，洗脫上述薄膜后，并將該薄膜超聲粉碎后得到的混合液經(jīng)由高壓勻質(zhì)機(jī)，先用壓強(qiáng)500bar循環(huán)5次進(jìn)一步粉碎，然后再用壓強(qiáng)1500bar循環(huán)15次細(xì)化粉碎得到勻質(zhì)的混合液，其中霉酚酸酯的粒徑在100-700nm范圍內(nèi)，最后將勻質(zhì)的混合液調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，又調(diào)節(jié)pH值至5.5-8.0即得。全文摘要本發(fā)明涉及一種陽(yáng)離子黏附型霉酚酸酯納米滴眼液。包括質(zhì)量百分比濃度1％的霉酚酸酯，適量的滲透壓調(diào)節(jié)劑和pH調(diào)節(jié)劑，其特征在于還包括殼聚糖、普朗尼克F-68、磷脂，其中磷脂在滴眼液中的質(zhì)量百分比濃度0.2％-2％、普朗尼克F-68在滴眼液中的質(zhì)量百分比濃度0.5％-4％、殼聚糖在滴眼液中的質(zhì)量百分比濃度0.5-4％，殼聚糖分子量為5000～300000，脫乙酰度＞85％，且霉酚酸酯的粒徑在10-700nm范圍內(nèi)。本發(fā)明的特點(diǎn)是納米粒徑的霉酚酸酯增大藥物的溶解度，提高安全性和有效性。又使霉酚酸酯藥粒子帶正電荷，以助于提高藥物的角膜吸收，增強(qiáng)藥效并延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間，大大增強(qiáng)角膜黏附性。文檔編號(hào)A61P37/06GK101590015SQ20091001634公開日2009年12月2日申請(qǐng)日期2009年6月11日優(yōu)先權(quán)日2009年6月11日發(fā)明者史偉云,吳祥根,萌辛申請(qǐng)人:山東省眼科研究所