專利名稱：：一種用于治療消化系腫瘤的中藥組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中藥制劑及其制備方法，具體涉及一種治療消化系腫瘤的中藥復(fù)方制劑及其制備方法。背景支持腫瘤已逐漸取代心腦血管疾病成為全球頭號(hào)殺手，2007年全球有760萬(wàn)人死于惡性腫瘤。在發(fā)達(dá)國(guó)家，腫瘤病死率已占其總死亡人數(shù)的21.6%。在中國(guó)，惡性腫瘤發(fā)病率上升尤其迅猛，以上海為例，2005年男性和女性居民的惡性腫瘤發(fā)病率分別比14年前上升了30.6%和61.8%;其占我國(guó)總死因的百分率已從70年代的12.6%上升至2007年的26.7°/。。預(yù)計(jì)2020年發(fā)病率和死亡人數(shù)將比2002年上升60%。目前臨床上惡性腫瘤的治療仍以傳統(tǒng)的手術(shù)、放療及化療為主?；瘜W(xué)藥物治療腫瘤，多數(shù)抑瘤效果肯定，但毒副作用廣泛而且嚴(yán)重，既有骨髓抑制，消化道癥狀，粘膜、毛發(fā)損害，心、肝、肺、腎、神經(jīng)毒性以至整體免疫功能損害，常導(dǎo)致病人機(jī)體狀況的惡化及生命質(zhì)量的降低，嚴(yán)重時(shí)致患者因不能忍受而放棄治療甚至死于治療。加之腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的產(chǎn)生，西藥臨床應(yīng)用長(zhǎng)期效果并不很理想。致使惡性腫瘤治療陷于一個(gè)很尷尬的境地患者花巨大的費(fèi)用將壽命痛苦的(化藥副作用)延長(zhǎng)半年到1年半。例如化療對(duì)晚期NSCLC生存期的影響，國(guó)際上有隨機(jī)對(duì)照臨床研究將第三代新藥(泰索帝、健擇、泰素)與最佳支持治療(BSC)比較，結(jié)果泰索帝化療7個(gè)月，一年生存率為29%,泰素+BSC化療6.8月，一年生存率為41%，健擇+BSC化療5.7月，一年生存率為25%,雖然這些藥4勿單藥或聯(lián)用BSC化療可以延長(zhǎng)晚期肺癌患者的生存期，但病人都不同程度承受著毒副反應(yīng)帶來(lái)的痛苦。晚期/轉(zhuǎn)移性胃癌化療，盡管胃癌是相對(duì)化療敏感(RR3040。/。),但與BSC相比化療僅使晚期胃癌患者生存延長(zhǎng)46月(從34月延長(zhǎng)至710月)。中醫(yī)藥治療腫瘤歷史比較久，特別是最近幾十年來(lái)，經(jīng)過(guò)臨床的驗(yàn)證證明中醫(yī)藥治療腫瘤占有重要的地位。它的優(yōu)勢(shì)和特色，在于中醫(yī)藥能調(diào)節(jié)和提高機(jī)體的各種抗癌機(jī)能，以此來(lái)達(dá)到抑制腫瘤的生長(zhǎng)，提高腫瘤患者的生存質(zhì)量和延長(zhǎng)腫瘤患者的生存期。中藥治療腫瘤與化療、放療一起用，有減輕化、放療毒副反應(yīng)的作用，還可以增加療效，提高抑瘤率、提高生存率。與此同時(shí)還可防止腫瘤包括手術(shù)后的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。這些方面目前都得到了國(guó)內(nèi)外一些學(xué)者以及患者的廣泛認(rèn)可，不少中藥已成為治療癌癥的新藥。因此，中藥復(fù)方是腫瘤綜合治療的有效手段之一，抗腫瘤中藥新藥的研發(fā)和發(fā)明對(duì)人類和社會(huì)具有十分重要意義。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于根據(jù)中醫(yī)"仙鶴草之清熱解毒，散瘀消癰功效治腫瘤之本，強(qiáng)患者之體，以治"形衰體弱"之標(biāo)。輔以白花蛇舌草和半枝蓮加強(qiáng)清熱解毒，散瘀消癰之功的辨證論治理論，提供一種質(zhì)量穩(wěn)定、療效確切、安全廉價(jià)的治療消化系腫瘤的中藥復(fù)方制劑。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是基于傳統(tǒng)中醫(yī)對(duì)治療各種腫瘤疾病機(jī)理的認(rèn)識(shí)及治療原則，以中醫(yī)基礎(chǔ)理論為指導(dǎo)，依托臨床應(yīng)用基礎(chǔ)，采用現(xiàn)代科技手段研究方法，以仙鶴草、白花蛇舌草和半枝蓮藥材的提取物和有效部位配伍組成中藥組合物，該中藥組合物加適宜的輔料制備為顆粒劑、口服液等多種劑型供臨床應(yīng)用。本發(fā)明解決其技術(shù)問題采用如下的技術(shù)方案本發(fā)明提供的用于治療消化系腫瘤如食管癌、胃癌、肝癌、結(jié)直腸癌為主及各種晚期癌癥的治療和止痛的復(fù)方仙鶴草抗癌顆粒，主要由以下原料配伍組成仙鶴草水提取物5~25份、白花蛇舌草有效部位0.510份、半枝蓮0.510份，適宜的輔料，可以是淀粉、糊精等制備顆粒劑。本發(fā)明提供的制備上述治療以消化系腫瘤為主的疾病，具有安全、有效便于攜帶、服用方便的復(fù)方仙鶴草抗癌顆粒的方法，其包括以下步驟1、仙鶴草藥材，加510倍重量的水提取2d次，每次1.5~2小時(shí)，合并提取液，濃縮至流浸膏，為仙鶴草水提取物。2、白花蛇舌草藥材，加水或40%~95%乙醇5~10量提取2~3次，每次1~2小時(shí)，提取液回收乙醇，濃縮液上大孔吸附樹脂或聚酰胺樹脂吸附，吸附完畢，用去離子水洗脫23倍柱體積至Molish反應(yīng)陰性，繼續(xù)用10%~95%乙醇梯度洗脫，洗脫液回收乙醇，濃縮液噴霧干燥或真空干燥得白花蛇舌草總黃酮有效部位。3、半枝蓮藥材，用水或40°/^95%乙醇5~10量提取2~3次，每次1~2小時(shí)，提取液回收乙醇，濃縮液上大孔吸附樹脂或聚酰胺樹脂吸附，吸附完畢，用去離子水洗脫23倍柱體積至Molish反應(yīng)陰性，繼續(xù)用10%~95%乙醇梯度洗脫，洗脫液回收乙醇，濃縮液噴霧干燥或真空干燥得半枝蓮總黃酮有效部位。4、經(jīng)體內(nèi)外藥效學(xué)篩選仙鶴草水提取物與白花蛇舌草總黃酮有效部位、半枝蓮總黃酮有效部位的配伍比例，經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究仙鶴草水提物與白花蛇舌草有效部位、半枝蓮有效部位的比例為1:(0.1~10):(0.1~10)。5、仙鶴草水提物、白花蛇舌草有效部位、半枝蓮有效部位按上述優(yōu)選比例組合，加入糊精適量，按常規(guī)方法制備顆粒劑，或采用噴霧干燥法一步制備顆粒，整粒，包裝即得。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比較具有如下主要優(yōu)點(diǎn)-本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于依從傳統(tǒng)中醫(yī)理論的指導(dǎo)，以提取物和有效部位配伍組方，以增強(qiáng)體質(zhì)、清熱解毒、散瘀消癰和利尿消腫的功效作用，對(duì)癥治療腫瘤患者的"毒、結(jié)、腫、弱"。既不脫離傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論指導(dǎo)，乂采用現(xiàn)代科技手段研究提高產(chǎn)品質(zhì)量和療效。體現(xiàn)中藥多組分、多靶點(diǎn)起效的特點(diǎn)。現(xiàn)代藥理研究表明組合物中三味中藥作用于不同的靶點(diǎn)，呈現(xiàn)不同的抗癌機(jī)理仙鶴草抗腫瘤作用的機(jī)理可能與其直接的細(xì)胞毒作用及通過(guò)某些免疫細(xì)胞的作用而增強(qiáng)宿主免疫功能有關(guān)。通過(guò)誘導(dǎo)癌細(xì)胞加速凋亡，直接殺傷癌細(xì)胞，拮抗致癌物質(zhì)，調(diào)節(jié)宿主NK細(xì)胞、TNF、IL-2以及紅細(xì)胞免疫等多種途徑，發(fā)揮抗腫瘤作用。白花蛇舌草總黃酮具有增強(qiáng)機(jī)體特異性免疫功能和非特異性免疫功能的作用?？赡苁峭ㄟ^(guò)增強(qiáng)免疫發(fā)揮抗腫瘤作用。而半枝蓮能有效抑制腫瘤血管生成，其機(jī)制可能與阻斷內(nèi)皮細(xì)胞遷移、下調(diào)VEGF蛋白表達(dá)有關(guān)。因此，本方多成分多靶點(diǎn)治療，可能顯著優(yōu)于已經(jīng)上市的化學(xué)藥物，成為中成藥治療惡性腫瘤的突破占。本發(fā)明的體外抗腫瘤活性研究如下材料仙鶴草水提取物、白花蛇舌草總黃酮(含量53%)、半枝蓮總黃酮(含量55%)，制備10mg/ml溶液；腫瘤細(xì)胞株人胃癌細(xì)胞株BGC823、人食管癌細(xì)胞株TE13、人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721、人結(jié)直腸癌細(xì)胞株SW480;方法將腫瘤細(xì)胞株懸液接種于96孔培養(yǎng)板(美國(guó)Costar公司產(chǎn)品)，每孔100ul(含lX104個(gè)細(xì)胞)，分別加入陰性對(duì)照劑(水溶液)、陽(yáng)性對(duì)照(順鉑，DDP，濃度為200ug/ml)和羥基喜樹堿(HCPI，濃度為250ug/ml)以及不同濃度仙鶴草提取物溶液(10mg/ml)、白花蛇舌草總黃酮溶液(10mg/ml)、半枝蓮總黃酮溶液U0mg/ml)及三者組合物溶液(10mg/ml)各10ul，每組均設(shè)3個(gè)復(fù)孔。置于飽和濕度、37C、5。/。C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h,于培養(yǎng)結(jié)束前4h各培養(yǎng)孔加入5mg/ml四氮唑藍(lán)(MTT)10ul，培養(yǎng)結(jié)束后，離心棄去上清，每孔加入15%(SDS)100ul，過(guò)夜。次日用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀檢測(cè)各孔吸光度(OD)值，測(cè)定波長(zhǎng)=570nm，參考波長(zhǎng)=630nm，并計(jì)算抑制率。計(jì)算公式為抑制率(％)=(陰性對(duì)照組OD值-實(shí)驗(yàn)組OD值)/對(duì)照組OD值X100X。數(shù)據(jù)處理統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(iis)表示，組間數(shù)據(jù)用成組t檢驗(yàn)，應(yīng)用TheSASsystem6.12統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算。結(jié)果對(duì)體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞的抑制作用見表l。5表1提取物對(duì)BGC823、TE13、SMMC-7721、SW480腫瘤細(xì)胞增殖作用的影響0D，3f±s(抑制率％)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>與陰性對(duì)照比，*P<0.05，**P<0.001;具體實(shí)施例方式實(shí)施例]以仙鶴草水提物、白花蛇舌草總黃酮有效部位、半枝蓮有效部位按5:1:l配伍形成組合物，粉碎、加入輔料淀粉、糊精混勻，用50%乙醇制粒，干燥，整粒得仙鶴草復(fù)方抗癌顆粒。實(shí)施例2仙鶴草水提物制備取仙鶴草500g，置10000ml燒瓶中加水5000ml，提取2次，每次2小時(shí)，過(guò)濾、合并濾液，減壓濃縮至稠膏，60'C真空干燥，得仙鶴草水提物80g。實(shí)施例3白花蛇舌草總黃酮有效部位提取取白花蛇舌草500g,置10000ml燒瓶中加80%乙醇5000ml，回流提取2次，每次2小時(shí)，過(guò)濾、合并濾液，減壓濃縮至500ml,相當(dāng)于每毫升含原藥材lg。取提取液250ml動(dòng)態(tài)上樣吸附至已處理好的DM-130大孔吸附樹脂柱上，先以3BV水洗脫至molish反應(yīng)陰性，然后用70%的乙醇洗脫總黃酮，流速2.5BV/h，收集洗脫液，回收溶劑，減壓干燥，得總黃酮5g。以蘆丁為對(duì)照，總黃酮含量為53%。另取提取液250ml，動(dòng)態(tài)上樣吸附至己處理好的聚酰胺樹脂柱上，先以3BV水洗脫至molish反應(yīng)陰性，然后用95%的乙醇洗脫總黃酮，流速2.5BV/h，收集洗脫液，回收溶劑，減壓干燥，得總黃酮4.7g。以蘆丁為對(duì)照，總黃酮含量為55%。實(shí)施例4半枝蓮總黃酮提取取半枝蓮500g，置10000ml燒瓶中加75%乙醇5000ml,回流提取2次，每次2小時(shí)，過(guò)濾、合并濾液，減壓濃縮至500ml，相當(dāng)于每毫升含原藥材lg。取提取液250ml動(dòng)態(tài)上樣吸附至已處理好的AB-8大孔吸附樹脂柱上，先以3BV水洗脫至molish反應(yīng)陰性，然后用80%的乙醇洗脫總黃酮，流速2.5BV/h，收集洗脫液，回收溶劑，減壓千燥，得總黃酮10g。以野黃芩苷為對(duì)照，總黃酮含量為55%。另取提取液250ml，動(dòng)態(tài)上樣吸附至己處理好的DIOI大孔吸附樹脂柱上，先以3BV水洗脫至molish反應(yīng)陰性，然后用70%的乙醇洗脫總黃酮，流速2.5BV/h，收集洗脫液，回收溶劑，減壓干燥，得總黃酮9.6g。以野黃萃苷為對(duì)照，總黃酮含量為57%。實(shí)施例5復(fù)方仙鶴草抗癌顆粒制備取仙鶴草水提物200g，白花蛇舌草總黃酮20g，半枝蓮總黃酮20g，加入淀粉20g,糊精40g混勻，粉碎，以50%乙醇為潤(rùn)濕劑，制備軟才，用擠出制粒法制備顆粒，干燥，整粒得顆粒280g，包裝。實(shí)施例6復(fù)方仙鶴草抗癌顆粒體內(nèi)藥效學(xué)研究1、藥品與試劑復(fù)方仙鶴草抗癌顆粒由山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所天然藥物室制備，10mg/ml溶于水中，4°C冰箱中保存，臨用時(shí)再稀釋。2、動(dòng)物及細(xì)胞株68周齡的BABL/C裸鼠，體重1618g，雌雄各半。由本所藥理中心提供，為SPF級(jí)動(dòng)物。裸鼠在SPF層流柜中飼養(yǎng)。3、裸鼠移植腫瘤模型的建立在無(wú)菌條件下，收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的腫瘤細(xì)胞，在每只裸鼠右后背側(cè)皮下接種0.2ml細(xì)胞懸液(5乂106個(gè)細(xì)胞/只)，接種后在無(wú)菌層流棚內(nèi)常規(guī)飼養(yǎng)。接種一周左右，選擇無(wú)出血、壞死、感染、腫瘤直徑為0.30.5cm的裸鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。4、實(shí)驗(yàn)分組及給藥方案將荷瘤裸鼠隨機(jī)分為生理鹽水陰性對(duì)照組、復(fù)方斑蝥膠囊陽(yáng)性對(duì)照組及高、中、低三個(gè)劑量藥物組，每組6只裸鼠。高、中、低濃度組分別按10mg/kg，20mg/kg，40mg/kg進(jìn)行灌胃給藥，陰性對(duì)照組以等量生理鹽水灌胃，陽(yáng)性對(duì)照組按20mg/kg灌胃，沒天給藥1次，共兩周。末次給藥后24小時(shí)，頸椎脫臼處死裸鼠，立即完整剝離瘤塊，稱量離題瘤塊重量、計(jì)算各組平均瘤重及抑瘤率。抑瘤率(％)=(l—實(shí)驗(yàn)組平均瘤重/對(duì)照組平均瘤重)X100%。結(jié)果4.1各組抑瘤情況見表l、表2、表37表2復(fù)方仙鶴草抗癌顆粒對(duì)結(jié)腸癌SW480裸鼠移植瘤作用效果(f±S，n=6)組別平均瘤重抑瘤率(％)與陰性對(duì)照組比較與陽(yáng)性對(duì)照組比較陰性對(duì)照組0.81±0.41陽(yáng)性對(duì)照組0.23±0.1071.5PO.01高劑量組0.05±0.0393.7P<0.01P<0.01中劑量組0.14±0.0882.5P<0.01P>0.05低劑量組0.35±0.1956.2PO.05P>0.05表3復(fù)方仙鶴草抗癌顆粒對(duì)結(jié)腸癌HT-29裸鼠移植瘤作用效果(3f±s，n=6)組別平均瘤重抑瘤率(％)與陰性對(duì)照組比較與陽(yáng)性對(duì)照組比較陰性對(duì)照組0.73±0.20陽(yáng)性對(duì)照組0.30±0.1058.7P<0.01高劑量組0.04±0.0194.5P<0.01P<0.01中劑量組0.22±0.1069.8P<0.01P>0.05低劑量組0.35±0.1052.5P<0.01P>0.05表4復(fù)方仙鶴草抗癌顆粒對(duì)胃癌MGC803裸鼠移植瘤作用效果(f士s，n=6)組別平均瘤重抑瘤率(％)與陰性對(duì)照組比較與陽(yáng)性對(duì)照組比較陰性對(duì)照組1.25±0.40陽(yáng)性對(duì)照組0.74±0.3040.4PO.05高劑量組0.44±0.1064.7P<0.01P<0.05中劑量組0.63±0.3048.9PO.05P>0.05低劑量組0.75±0.3039.5P<0.05P>0.05從上述3個(gè)表可以看出，陽(yáng)性對(duì)照組及各給藥組與陰性對(duì)照組相比，均有顯著性差異(P<0.05)，說(shuō)明各給藥組均有抑瘤效果；各組高劑量給藥組與陽(yáng)性對(duì)照組相比，結(jié)果具有顯著差異(PO.05),表明高劑量組抑瘤效果優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照組；而中、低劑量組與陽(yáng)性對(duì)照組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示中低劑量組抑瘤效果與陽(yáng)性對(duì)照組相似。4.2毒副作用觀察灌胃給藥期間，裸鼠體重、飲食、精神狀態(tài)等一般情況與陰性對(duì)照組無(wú)明顯差異；給藥結(jié)束后，荷瘤裸鼠血常規(guī)及肝腎功能檢測(cè)結(jié)果與陰性對(duì)照組比較無(wú)顯著差異(P>O.05)，表明在上述劑量下，復(fù)方仙鶴草抗癌顆粒對(duì)荷瘤裸鼠血液系統(tǒng)及肝腎無(wú)明顯毒性。血常規(guī)及肝腎功能檢測(cè)結(jié)果見下表5、6。8表5復(fù)方仙鶴草抗癌顆粒給藥后裸鼠血常規(guī)結(jié)果(i±s，n=6)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>*表示與對(duì)照組比較P>0.05表6復(fù)方仙鶴草抗癌顆粒給藥后裸鼠肝腎功能結(jié)果(3f士s，n=6)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>*表示與對(duì)照組比較P>0.05以上結(jié)果表明，在本實(shí)驗(yàn)給藥劑量下，復(fù)方仙鶴草抗癌顆粒作用效果優(yōu)于臨床常用藥復(fù)方斑蝥膠囊，且無(wú)明顯不良反應(yīng)，因此，在治療消化系腫瘤方面具有優(yōu)越的臨床應(yīng)用價(jià)值。權(quán)利要求1.一種用于治療消化系腫瘤的中藥組合物及其制備方法，其特征在于該組合物由仙鶴草、白花蛇舌草、半枝蓮的提取物組成。2.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征為所述組合物給藥劑型為顆粒劑、膠囊劑、片劑、合劑、注射液和丸劑中的任意一種。3.按權(quán)利要求1所述，其特征在于該組合物的配比為仙鶴草提取物白蛇蛇花草提取物半枝蓮提取物1:(0.01100):(0.01-100)。4.按權(quán)利要求1所述，其特征在于該組合物主要用于癌癥和炎癥的治療。癌癥主要指食管癌、胃癌、肝癌、結(jié)直腸癌以及肺癌、骨癌、胰腺癌等；炎癥主要指腸炎、肺炎、胰腺炎、咽炎、痤瘡等。5.按權(quán)利要求1，2、3所述，其特征在于所述的提取物可以是水提物、醇提物或有效部位。6.按權(quán)利要求1，2、3所述，其特征在于仙鶴草提取物中活性成分可以為多種類別成分，其含量可以為0.01~80%;白花蛇舌草提取物主要成分為總黃酮和半枝蓮主要活性成分為總黃酮，其各自含量為0.1%~99%。7.按權(quán)利要求5所述，其特征在于白花蛇舌草和半枝蓮有效部位純化為提取濃縮液大孔吸附樹脂或聚酰胺樹脂吸附，可以是靜態(tài)吸附或動(dòng)態(tài)吸附，吸附完畢，以一定量去離子水洗至molish反應(yīng)為陰性，再用不同濃度乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮回收乙醇，干燥得有效部位。8.按權(quán)利要求5、7所述，其特征在于白花蛇舌草總黃酮有效部位和半枝蓮總黃酮有效部位，其各自含量可以為30%~99%。9.按權(quán)利要求7所述，其特征在于該組合物的配比為仙鶴草提取物白蛇蛇花草總黃酮半枝蓮總黃酮1:(0.1~50):(0.1~50)。10.按權(quán)利要求12所述，其特征在于大孔吸附樹脂和聚酰胺樹脂洗脫工藝，所用不同濃度乙醇可以為從10%~95%。全文摘要本發(fā)明提供一種治療消化系腫瘤的藥物組合物及其制備方法。組合物活性成分由白花蛇舌草、半枝蓮、仙鶴草的提取物組成，提取物制備采用大孔吸附樹脂、聚酰胺樹脂等先進(jìn)技術(shù)精制純化。其劑型為顆粒劑、片劑、膠囊劑、注射液、溶液劑、丸劑之一。該組合物可以單獨(dú)使用，也可以與手術(shù)、化療、放療配合使用治療消化系腫瘤如食管癌、胃癌、肝癌、結(jié)直腸癌等；該組合物對(duì)肺癌、骨癌、胰腺癌等其他癌癥，以及感染或非感染引起的炎證也有明顯療效。文檔編號(hào)A61P1/00GK101502579SQ20091001972公開日2009年8月12日申請(qǐng)日期2009年3月19日優(yōu)先權(quán)日2009年3月19日發(fā)明者董世波,河馬申請(qǐng)人:山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所