專利名稱：一種獼猴桃根提取物的提取方法及其抗肝損傷的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
一種獼猴桃根提取物的提取方法及其抗肝損傷的應(yīng)用，本發(fā)明涉及提取分離獼猴桃根抗肝損傷的有效成分的方法。屬于獼猴桃根提取物的制備和應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：
獼猴桃根為獼猴桃科植物獼猴桃(Actinidia chinensis planch)的根或根皮，具有清熱、利尿、活血、消腫、治肝炎和抗癌作用，民間用獼猴桃根水煎液治療肝炎和肝癌取得較好的效果。
有關(guān)獼猴桃根的抗肝損傷的研究國內(nèi)尚未見報道，國外有關(guān)的研究也很少。
我們在對不同種獼猴桃根部乙醇提取物進行研究時，發(fā)現(xiàn)其不但有較好的抗腫瘤活性，也具有很好的抗肝損傷的活性。
為充分利用獼猴桃資源、為肝炎患者的治療提供更多的途徑，進一步開發(fā)獼猴桃植株的根或根皮，生產(chǎn)抗肝損傷產(chǎn)品很有必要。參考文獻 1.江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典[M].上海人民出版社，1977，2(2)11. 2.孟艷玲.保健果品獼猴桃[J].資源節(jié)約和綜合利用.1999，9(3)51. 3.陳東虹.獼猴桃的藥理活性研究進展.廣東藥學(xué)院學(xué)報，2004，18(3)231. 4.徐小彪，張秋明.中國獼猴桃種質(zhì)資源的研究與利用[J].植物學(xué)通報.2003，20(6)648～655. 5.覃益民，陳?；?，蔡民廷等.中越獼猴桃三萜化學(xué)成分的研究[J].中草藥，1999，30(5)323. 6.李典鵬.中越獼猴桃根化學(xué)成分研究.廣西植物[J]，2003，(6)23. 7.Xu，P.，Liu，F(xiàn).，Usal，P.Animal Model for Acuk Liver Injury[J].ChineseJournal of Pathophysiology，1995，11(4)337.

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對上述現(xiàn)有現(xiàn)狀，提供一種更利于工業(yè)化生產(chǎn)的、更安全的抗肝損傷有效成分的生產(chǎn)工藝。
為達上述目的，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案一種獼猴桃根提取物的提取方法，依次包括如下步驟 A、獼猴桃植株的根或根皮，粉碎至40目，按kg/L計料液比1:6加入60％～95％質(zhì)量濃度的乙醇，在60～80℃的溫度中提取3～4小時，離心分離出乙醇液，渣再按料液比1:6加入60％～95％質(zhì)量濃度的乙醇，在60～80℃的溫度中提取3～4小時，共三次，合并乙醇提取液，濃縮，得乙醇提取物； B、取乙醇提取物，上AB-8或X-5大孔樹脂柱，依次用1-2倍柱體積的50％、60％、70％、80％質(zhì)量濃度的乙醇洗脫，收集合并60％和70％質(zhì)量濃度的乙醇洗脫液，濃縮，得獼猴桃根有效成分的提取物

化合物12α，3β，19，23-四羥基烏蘇酸 化合物22β，3β，10—三羥基烏蘇酸，

化合物32α，3β，14β—三羥基烏蘇酸， 化合物42α，3β，19α，23—四到基齊墩果酸，

化合物52α，3β，23—三羥基烏蘇酸， 化合物62α，3β—二羥基烏蘇酸，

化合物72β，3β—二羥基烏蘇酸， 化合物82β，3β—23—三羥基烏蘇酸。
所述獼猴桃植株的根或根皮選用的獼猴桃植株為軟棗獼猴桃、中越獼猴桃、山梨獼猴桃、美味獼猴桃、中華棗獼猴桃中的一種。
得到的獼猴桃根提取物的應(yīng)用，對急性四氯化碳性肝損傷小鼠血漿的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶ALT有明顯下降，降幅達64.72％，大于甘草酸銨的作用，而對血清門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶AST也有明顯下降，降幅達28.26％，但不如甘草酸銨的作用。
抗肝損傷活性 60％乙醇洗脫部分對急性四氯化碳肝損傷小鼠血漿ALT/AST的影響見表1。
表1.獼猴桃根有效成分對急性四氯化碳肝損傷小鼠血漿ALT/AST的影響
★P<0.05與模型組相比較 獼猴桃根的有效成分對急性四氯化碳性肝損傷小鼠血漿的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)有明顯下降，大于甘草酸銨的作用，而對血清門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)也有明顯下降，但作用不如甘草酸銨。
本發(fā)明的有益效果本發(fā)明以獼猴桃根或根皮為原料，利用乙醇溶液進行提取，再上柱分離，提取得到有抗肝損傷作用的有效成份。該獼猴桃根提取物對急性四氯化碳性肝損傷小鼠血漿的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶ALT有明顯下降，大于甘草酸銨的作用，對血清門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶AST也有明顯下降，但作用不如甘草酸銨。本發(fā)明為獼猴桃根的綜合利用提供了新的有價值的用途。



圖1化合物1的NMR碳譜 圖2化合物2的NMR碳譜 圖3化合物3的NMR碳譜 圖4化合物4的NMR碳譜 圖5化合物5的NMR碳譜 圖6化合物6的NMR碳譜 圖7化合物7的NMR碳譜 圖8化合物8的NMR碳譜
具體實施例方式 下面結(jié)合實施例及附圖對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。
實施例1 將1kg獼猴桃根粉碎置于10升三角瓶中，用6升70％乙醇提取，攪拌3-4小時，提取溫度為80℃，提取三次。離心分離除去殘渣，濃縮后上大孔樹脂(型號AB-8或X-5)層析柱(60×600mm)，分別用50％、60％、70％、80％乙醇梯度洗脫，收集60-70％乙醇洗脫液。對收集到的獼猴桃根洗脫液濃縮到無乙醇止，得絮狀沉淀物，離心分離后將濾餅置于真空干燥箱內(nèi)，控制溫度50-60℃，干燥3小時。得獼猴桃根提取物。
實施例2 將10kg獼猴桃根粉碎置于100升提取罐中，用60升80％乙醇提取，攪拌3-4小時，提取溫度為70℃，提取三次。離心分離除去殘渣，濃縮后上大孔樹脂(型號AB-8或X-5)層析柱(100×1500mm)，分別用50％、60％、70％、80％乙醇梯度洗脫，收集60％、70％乙醇洗脫液。對收集到的獼猴桃根洗脫液濃縮到無乙醇止，得絮狀沉淀物，離心分離后將濾餅置于真空干燥箱內(nèi)，控制溫度50-60℃，干燥3小時。得獼猴桃根提取物。
實施例3 將50kg獼猴桃根粉碎置于500升提取罐中，用300升90％乙醇提取，攪拌3-4小時，提取溫度為60℃，提取三次。離心分離除去殘渣，濃縮后上大孔樹脂(型號AB-8，X-5)層析柱(300×1800mm)，分別用50％、60％、70％、80％乙醇梯度洗脫，收集60-70％乙醇洗脫液。
對收集到的獼猴桃根洗脫液濃縮到無乙醇止，得絮狀沉淀物，離心分離后將濾餅置于真空干燥箱內(nèi)，控制溫度50-60℃，干燥3小時。得獼猴桃根提取物。
權(quán)利要求
1、一種獼猴桃根提取物的提取方法，其特征在于步驟為
A、獼猴桃植株的根或根皮，粉碎至40目，按kg/L計料液比1:6加入60％～95％質(zhì)量濃度的乙醇，在60～80℃的溫度中提取3～4小時，離心分離出乙醇液，渣再按料液比1:6加入60％～95％質(zhì)量濃度的乙醇，在60～80℃的溫度中提取3～4小時，共三次，合并乙醇提取液，濃縮，得乙醇提取物；
B、取乙醇提取物，上AB—8或X—5大孔樹脂柱，依次用1-2倍柱體積的50％、60％、70％、80％質(zhì)量濃度的乙醇洗脫，收集合并60％和70％質(zhì)量濃度的乙醇洗脫液，濃縮，得獼猴桃根有效成分的提取物
化合物12α，3β，19，23—四羥基烏蘇酸， 化合物22β，3β，10—三羥基烏蘇酸，
化合物32α，3β，14β—三羥基烏蘇酸， 化合物42α，3β，19α，23—四羥基齊墩果酸，
化合物52α，3β，23—三羥基烏蘇酸， 化合物62α，3β—二羥基烏蘇酸，
化合物72β，3β—二羥基烏蘇酸， 化合物82β，3β—23—三羥基烏蘇酸。
2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的獼猴桃根提取物的提取方法，其特征在于所述A步驟中，獼猴桃植株的根或根皮選用的獼猴桃植株為軟棗獼猴桃、中越獼猴桃、山梨獼猴桃、美味獼猴桃、中華棗獼猴桃中的一種。
3、權(quán)利要求1提取方法得到的獼猴桃根提取物的應(yīng)用，其特征是對急性四氯化碳性肝損傷小鼠血漿的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶ALT有明顯下降，降幅達64.72％，大于甘草酸銨的作用，而對血清門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶AST也有明顯下降，降幅達28.26％，不如甘草酸銨的作用。
全文摘要
一種獼猴桃根提取物的提取方法及其抗肝損傷的應(yīng)用，屬于獼猴桃根提取物的制備和應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明以獼猴桃根或根皮為原料，利用乙醇溶液進行提取，再上柱分離，提取得到有抗肝損傷作用有效成份的獼猴桃根提取物。該獼猴桃根提取物對急性四氯化碳性肝損傷小鼠血漿的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶ALT有明顯下降，降幅達64.72％，大于甘草酸銨的作用，對血清門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶AST也有明顯下降，降幅達28.26％，但不如甘草酸銨的作用。本發(fā)明為獼猴桃根的綜合利用提供了新的有價值的用途。
文檔編號A61K36/185GK101502542SQ20091002622
公開日2009年8月12日 申請日期2009年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月17日
發(fā)明者徐德平, 裘愛泳, 唐年初, 劉國華, 燕 來 申請人:江南大學(xué)