專利名稱：甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物及其制法與用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及甲硝唑枝接取代水楊酸及其制備方法與用途。
背景技術(shù)：
尿素酶是一種人和動(dòng)物胃腸道及泌尿道細(xì)菌感染中常見的酶，它既是人和動(dòng)物中某 些致病菌的致病因子之一，又是某些氮源性腐敗物轉(zhuǎn)化所必須具備的酶之一。它是人類 首次獲得晶體并發(fā)現(xiàn)含有Ni離子的金屬酶。幽門螺旋桿菌尿素酶除有尿素酶的一般理 化性狀外，還有其獨(dú)特性.幽門螺旋桿菌尿素酶分子量為550KDa左右，直徑13nm，等電 點(diǎn)5.99土0. 03，最適溫度45。C，最適pH8. 2. Km值0. 3ramol/L±0. 1畫1/L，在飽和條件 下純化的尿素酶活性為每毫克蛋白質(zhì)每分鐘水解1100nmol土200umo1尿素，較低Km 值有助于幽門螺旋桿菌的尿素酶在尿素濃度較低的人胃環(huán)境中始終處于飽和狀態(tài)而發(fā) 揮最大的功能。幽門螺旋桿菌尿素酶單體由A, B兩個(gè)亞單位組成，而其他菌屬所含尿 素酶則有三個(gè)亞單位組成.幽門螺旋桿菌的尿素酶量很大，占全菌蛋白的5% 10%。
尿素酶是尿道和消化道中病原菌重要的致病因子，與消化道和尿道疾病的預(yù)防、
診斷和治療密切相關(guān)。尿素酶抑制劑的研究，在藥物研發(fā)歷史有重要地位。許多尿素酶 抑制劑己經(jīng)上市，并用于治療系列疾病。尿素酶抑制劑已經(jīng)廣泛被認(rèn)為是治療胃潰瘍的 耙點(diǎn)藥物。
根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，硝基咪唑的衍生物有很好的生物活性，包括抗菌，抗結(jié)核和尿素酶 抑制劑等。甲硝唑(1-[2-羥乙基]-2-甲基-5-硝基咪唑)是一種重要的硝基咪唑衍生物， 有數(shù)十年臨床應(yīng)用歷史。近年來又有很多關(guān)于甲硝唑臨床應(yīng)用新進(jìn)展的報(bào)道，它可以用 于治療消化性潰瘍、呼吸系統(tǒng)疾病、高脂血癥和婦科疾病等。本發(fā)明基于已經(jīng)報(bào)道的硝 基咪唑類化合物的幽門螺旋桿菌尿素酶抑制劑活性，在甲硝唑的基礎(chǔ)上枝接具有很好生 物活性的取代水楊酸，得到一類新的化合物。因此，甲硝唑和取代水楊酸成功地結(jié)合而 形成的復(fù)合物，具有很好的抗尿素酶的生物活性，而且毒性非常小，將會(huì)成為市場(chǎng)上最 有潛力的一類新藥的之一。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一類新型甲硝唑枝接取代水楊酸的化合物以及它們的制備 方法與用途。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下
一類甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物，其特征是它有如下通式 A系列
R3
式中RI=H、 N02、 CH3或齒素；R2=H、 N02、 CH3或齒素；R3=H、 NH3或CH3;
或B系列
R4 R5
02N
式中R^H或CH3; R5=H、 CH3或齒素；R6=-H、 CH3、 S03H或卣素。
一種上述的A^列的甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物的制法，它由下列步驟組成
步驟1.將每lOmmol對(duì)甲苯磺酰氯和等物質(zhì)的量的甲硝唑溶于無(wú)水CH2C12中，CHbCl2的用量為lOOml，加入5ml三乙胺，冰浴攪拌，反應(yīng)4-5小時(shí)后，'將反應(yīng)混合物 過濾后，濾液倒入100ml冰水中，分離出有機(jī)相，水相加乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相。 用飽和碳酸氫鈉和水分別洗滌有機(jī)相，用無(wú)水NaS04干燥有機(jī)相，減壓蒸去溶劑，得到 淡黃色晶狀固體，淡黃色晶體為甲硝唑的羥基被對(duì)甲苯磺?；〈漠a(chǎn)物。
步驟2.將步驟l中得到的淡黃色晶狀固體與等物質(zhì)的量的取代水楊酸溶于N,N-二 甲基甲酰胺中，每毫摩爾的取代水楊酸用N,N-二甲基甲酰胺10ml，加入無(wú)水碳酸鉀， 每毫摩爾的取代水楊酸用無(wú)水碳酸鉀0.5克，8(TC攪拌20小時(shí)，減壓蒸去溶劑，層析得 本發(fā)明的A系列甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物。
一種上述的B系列的甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物的制法，它由下列步驟組成
步驟1.將每lOmmol對(duì)甲苯磺酰氯和等物質(zhì)的量的甲硝唑溶于無(wú)水CH2C12中， CH2Cl2的用量為lOOml，加入5ml三乙胺，冰浴攪拌，反應(yīng)4-5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物 過濾后，濾液倒入100ml冰水中，分離出有機(jī)相，水相加乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相。 用飽和碳酸氫鈉和水分別洗滌有機(jī)相，用無(wú)水NaS04干燥有機(jī)相，減壓蒸去溶劑，得到 淡黃色晶狀固體，淡黃色晶體為甲硝唑的羥基被對(duì)甲苯磺?；〈漠a(chǎn)物。
步驟2.將步驟l中得到的淡黃色晶狀固體與取代水楊酸溶于N,N-二甲基甲酰胺中， 淡黃色晶狀固體與取代水楊酸的物質(zhì)的量之比為2比1，每毫摩爾的取代水楊酸用N,N-二甲基甲酰胺10ml，加入無(wú)水碳酸鉀，每毫摩爾的取代水楊酸用無(wú)水碳酸鉀0.5克，110 'C攪拌30小時(shí)，減壓蒸去溶劑，層析得本發(fā)明的A系列甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物。
上述制法中，步驟2中所述層析，是采用200-300目硅膠柱，洗脫液為無(wú)水乙酸乙酯。
本發(fā)明的甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物，對(duì)幽門螺旋桿菌尿素酶有明顯抑制作用。 可以用于制備抗幽門螺旋桿菌的藥物。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例一2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-3,5-二硝基苯甲酸(化合物l)的制備<formula>formula see original document page 7</formula>將對(duì)甲苯磺酰氯(10mmol)和甲硝唑(10mmol)溶于無(wú)水100mlCH2Cl2中，加入5ml三 乙胺，冰浴攪拌，反應(yīng)4-5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物過濾后，濾液倒入100ml冰水中，分 離出有機(jī)相，水相加乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相。用飽和碳酸氫鈉和水分別洗滌有機(jī)相， 用無(wú)水Na2S04干燥有機(jī)相，減壓蒸去溶劑，得到淡黃色晶狀固體。
取上述淡黃色晶狀固體(0.65g,2mmol)與3,5-二硝基水楊酸(2mmol)溶于20mlDMF 中，加入lg無(wú)水碳酸鉀，8(TC攪拌20小時(shí)，減壓蒸去溶劑，柱層析(200-300目硅膠 柱，洗脫液為無(wú)水乙酸乙酯)，乙酸乙酯中結(jié)晶得目標(biāo)產(chǎn)物。產(chǎn)率85%.目標(biāo)產(chǎn)物為黃色 粉末狀固體。Mp 155-156°C. ^-NMR (300MHz, DMSO隱4 5ppm): 2.50(s, 3H); 4.51 (t, J =4.80 Hz, 2H); 4.61 (t， J = 4.80 Hz, 2H); 8.02 (s， 1H); 8.30 (d, J = 3.45Hz， 1H); 8.48 (d， J = 3.45Hz, 1H). MS (ESI): 381.06 ([M+H]+). Anal. calc. forCi3HuN509: C， 40.95; H， 2>91; N, 18.37; found: C 40.98, H 2.96, N 18.30 %.
實(shí)施例二 2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧萄-4-氨基苯甲酸(化合物2)的制備
<formula>formula see original document page 7</formula>
制備方法同實(shí)施例一。4-氨基水楊酸代替3,5-二硝基水楊酸，得到深褐色粉末狀目 標(biāo)化合物。產(chǎn)率78。/。。Mpl88-189。C. iH-NMR (300MHz, DMSO-^， Sppm): 2.49(s, 3H); 4.58 (t， J =4.95 Hz, 2H);4.70 (t， J = 4.95 Hz， 2H); 5.98(s， IH); 6.10(s, J=8.76Hz, IH); 6.20 (s,2H); 728 (d, J =8.76Hz， IH); 7.98 (s， IH); 10.51(s， IH).MS (ESI): 306.18 ([M+H]+). Anal. calc. for C13H14N405: C, 50.98; H, 4.61; N, 18.29%; found: C 50.84， H 4.69, N 18.40%,
實(shí)施例三2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧萄-4-甲基苯甲酸(化合物3)的制備制備方法同實(shí)施例一。4-甲基水楊酸代替3,5-二硝基水楊酸，得到白色粉末狀目標(biāo) 化合物。產(chǎn)率48。/。。Mp 143隱144。C. iH-NMR(300MHz, DMSO-c 6， Sppm): 2.29(s, 3H,) 2.46(s, 3H); 4.65 (t， J =4.77 Hz, 2H); 4.72 (t, J = 4.77 Hz, 2H); 6.77 (m， 2H); 7.49 (d, J = 8.04Hz, 1H); 8.00 (s, 1H); 10.25(s, 1H). MS (ESI): 305.12 ([M+H〗+). Anal. calc. for C14H15N305: C, 55.08; H， 4.95; N， 13.76%; found: C 55.30， H 4.94; N， 13.83%.
實(shí)施例四2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-3，5-二碘苯甲酸(化合物4)的制備
HOOC
制備方法同實(shí)施例一。以3， 5-二碘水楊酸代替3,5-二硝基水楊酸，得到灰色粉末 狀目標(biāo)化合物。產(chǎn)率70%。 Mp 175-176°C。 'H-NMR(300MHz, DMSO-^， Sppm): 'HNMR (DMSO-d6): 2.55(s, 3H); 4.18 (t， J =4.89 Hz, 2H); 4.76 (t, J = 4.89 Hz, 2H); 7.80 (s， 1H);8.05 (s, 1H);8.11 (s, IH).MS (ESI): 542.98([M+H]+). Anal. calc. for C13HuI2N3Os: C， 28.75; H, 2.04; N, 7.74%; found: C, 28.73; H， 2.11;N, 7.72%.
實(shí)施例五2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-3,5-二溴苯甲酸(化合物5)的制備
HOOC
制備方法同實(shí)施例一。以3， 5-二溴水楊酸代替3,5-二硝基水楊酸，得到黃色粉末狀 目標(biāo)化合物。產(chǎn)率57%。 Mpl66-168。C。 ！H-NMR (500MHz, DMSO-^， 5ppm): 2111 NMR (DMSO-d6): 2.53(s, 3H); 4.19 (t， J =4.86 Hz, 2H); 4.76 (t， J = 4細(xì)z, 2H); 7.64 (s, 1H); 8.01 (s, 1H); 8.07 (s, 1H). MS (ESI): 448.9 ([M+H] +). Anal. calc. for C13HuBr2N305: C, 34.77; H,2.47; N, 9.36; %; found: C 34.59， H 2.44; N 9.38%.
實(shí)施例六2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唾)乙氧基)-3，5-二氯苯甲酸(化合物6)的制備
制備方法同實(shí)施例一。以3， 5-二氯水楊酸代替3，5-二硝基水楊酸，得到灰白色粉 末狀目標(biāo)化合物。產(chǎn)率56%。 Mpl59-160。C。 ^-NMR (300MHz, DMSO-^， Sppm): & NMR (DMSO-d6): 2.51(s, 3H); 4.16 (t, J =4.89 Hz， 2H); 4.73 (t, J = 4.89 Hz, 2H); 7.56 (s, 1H); 7.94 (s, 1H); 8.01 (s， 1H).MS (ESI): 359.06 ([M+H]+). Anal, calc. for CuHnCbNsOs: C: 43.35; H， 3.08; N， 11.67%; found: C, 43.41; H, 3.10; N， 11.64%.
實(shí)施例七2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-3-甲基苯甲酸(化合物7)的制備
制備方法同實(shí)施例一。3-甲基水楊酸代替3，5-二硝基水楊酸，得到白色粉末狀目標(biāo) 化合物。產(chǎn)率52。/。。Mp 157-159°C. 'H-NMR (300MHz, DMSO陽(yáng)^， Sppm): 2.28(s， 3H) 2.51(s: 3H); 4.62 (t， J =4.77 Hz， 2H); 4.75 (t, J = 4.77 Hz, 2H); 7.09 (d， J = 7.68Hz， 1H); 7.42 (m， 2H); 8,03 (s, 1H); 10.21(s， 1H). MS (ESI): 305.12 ([M+H] +). Anal, calc. for C14H15N305: C， 55.08; H, 4.95; N, 13.76%; found: C 55.21, H 4.92, andN 13.73%.
實(shí)施例八2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-5-甲基苯甲酸(化合物8)的制備制備方法同實(shí)施例一。5-甲基水楊酸代替3,5-二硝基水楊酸，得到灰白色粉末狀目 標(biāo)化合物。產(chǎn)率48%。 Mp 154-155°C. iH-NMR (300MHz, DMSO-d6， Sppm): 2.31(s， 3H) 2.53(s, 3H); 4.57 (t, J =4.77 Hz， 2H); 4.68 (t, J = 4.77 Hz, 2H); 7.36 (d， J = 8.85Hz, lH);7.58(s, 1H);7.65(d, J = 8.85Hz, 1H); 8.03 (s, IH); 10.19(s, 1H). MS (ESI): 305.12 ([M+H] +). Anal. calc. for C14H15N305: C， 55.08; H, 4.95; N, 13.76%; found: C 55.26, H 4.89, N 13.72%.
實(shí)施例九2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-5-氯苯甲酸(化合物9)的制備
HOOC
CI
制備方法同實(shí)施例一。5-氯水楊酸代替3,5-二硝基水楊酸，得到淺灰色粉末狀目豐示 化合物。產(chǎn)率48%。 Mp 144-145°C. ^-NMR (300MHz, DMSO-c/6， 5ppm): 2.51(s, 3H); 4.47 (t， J =4.74 Hz, 2H); 4.59 (t， J = 4.74 Hz, 2H); 7.18(d, J = 8.97Hz， 1H);7.48(d, J - 2.52Hz， IH); 7.53 (dd, = 8.97Hz,J2，=2.52Hz,lH);8.00(s, IH); 10.21(s， IH). MS (ESI): 325.12 ([M+H]+). Anal. calc. for C13Hi3ClN305: C， 47.94; H， 3.71; N， 12.90 %; found: C， 47.86， H, 3.72, N, 12.79%.
實(shí)施例十2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-5-溴苯甲酸(化合物10)的制備
HOOC
Br
制備方法同實(shí)施例一。4-漠，JC楊酸代替3,5-二硝基水楊酸，得到灰色粉末狀目標(biāo)4t 合物。產(chǎn)率61%。 Mp 148-149°C. !H隱NMR (300MHz, DMSO-cf6, Sppm): 2.51(s, 3H); 4.44 (tJ =4.74 Hz, 2H); 4.58 (t, J = 4.74 Hz， 2H); 7.1 l(d, J - 8.97Hz， 1H); 7.59(s, 1H); 7.64(d, J = 8.97Hz, 1H); 8.03 (s, 1H). 10.19(s, 1H). MS (ESI): 369.34 ([M+H] +). Anal. calc. for C13H12BrN305: C， 42.18; H, 3.27; N, 11.35%; found: C, 42.17， H,3.23，N, 11.39%.
實(shí)施例十一2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-4-甲基苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-l -咪 唑)乙酯(化合物ll)的制備
將對(duì)甲苯黃酰氯(10mmol)和甲硝唑(10mmol)溶于無(wú)水100mlCH2CI2中，加入5ml三 乙胺，冰浴攪拌，反應(yīng)4-5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物過濾后，濾液倒入100ml冰水中，分 離出有機(jī)相，水相加乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相。用飽和碳酸氫鈉和水分別洗滌有機(jī)相， 用無(wú)水NaS04干燥有機(jī)相，減壓蒸去溶劑，得到淡黃色晶狀固體。
取上述淡黃色晶狀固體(1.34g，4mmol)與4-甲基水楊酸(2mmol)溶于20mlDMF中，力口 入lg無(wú)水碳酸鉀，110'C攪拌30小時(shí)，減壓蒸去溶劑，柱層析(200-300目硅膠柱，洗脫 液為無(wú)水乙酸乙酯)，乙酸乙酯中結(jié)晶得目標(biāo)產(chǎn)物。產(chǎn)率55%.目標(biāo)產(chǎn)物為黃色粉末狀固 體。Mp 159-160。C. !H-NMR(300MHz, DMSO-c 6, Sppm): 2.28(s, 3H); 2.38(s, 3H);2.47(s, 3H); 4.36(t, J =4.71 Hz, 2H);4.50(t, J =4.77 Hz, 2H);4.65 (m, 4H); 6.82 (d, J = 7.86Hz, 1H);6.98 (s, 1H);7.39 (d， J = 7.86Hz， 1H); 8.01 (s， 1H); 8.03 (s， IH).. MS (ESI): 458.06 ([M+H] +). Anal. calc. forC20H22N6O7: C， 52.40; H, 4.84; N, 18.33%; found: C 52.42, H4.87, N, 18.30%.
實(shí)施例十二 2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-5-溴苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物12)的制備02N
制備方法同實(shí)施例十一。以5-溴水楊酸代替4-甲基水楊酸，得到淺褐色粉末狀目木示 化合物。產(chǎn)率74%。 Mpl59誦160。C。 ！H-NMR (300MHz, DMSO-c/6， Sppm): 2.26(s, 3H); 2.39(s， 3H); 4.39(t， J =4.74 Hz， 2H);4.52(t, J =4.77 Hz, 2H);4.65 (m, 4H );7.13 (d, J = 8.97Hz， lH);7.59(s, 1H);7.66(d， J = 8.97Hz, 1H); 8.00 (s, 1H); 8.03 (s, 1H). MS (ESI): 552.11 ([M+H〗 +). Anal, calc. for Ci9Hi9BrN607: C， 43.61; H, 3.66; N, 16.06%; found: C， 43.55; H， 3.62; N, 16.16%.
實(shí)施例十三2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-5-碘苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物13)的制備
02N
制備方法同實(shí)施例十一。以5-碘水楊酸代替4-甲基水楊酸，得到褐色粉末狀目標(biāo)4七 合物。產(chǎn)率81%。 Mp 166-148°CLH-NMR (300MHz， DMS0-4,5ppm): 2.42(s, 3H); 4.37(t, J =4.74 Hz, 2H);4.49(t， J =4.92Hz, 2H);4.65 (m, 4H );6.98 (d， J = 8.76Hz, 1H);7.71(d, J -2.01Hz, 1H);7.78(dd, = 8.76Hz,J2,=2.01Hz,lH); 7.98 (s, 1H); 8.01 (s, 1H)。
MS (ESI): 570.1 ([M+H] +). Anal, calc. for C19H19IN607: C, 40.01; H， 3.36; N， 14.74%; found: C, 40.05; H，3.38;N, 14.76%.實(shí)施例十四2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-5-碘苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物14)的制備
制備方法同實(shí)施例十一。以5-璜基水楊酸代替4-甲基水楊酸，得到淺黃色粉末狀目 標(biāo)化合物。產(chǎn)率43%。 Mp 140-141。C 。 ！H-NMR (300MHz, DMSO-^， Sppm): 2.73(s, 3H ); 2.89(s, 3H); 4.29(t, J =4.774 Hz, 2H);4.52(t， J =4.89Hz， 2H);4.70 (m, 4H );7.39 (d, J = 8.82Hz, lH);7.57(s, 1H);7.68(d, J = 8.82Hz, 1H); 7.99 (s， 1H); 8.03 (s， 1H). MS (ESI): 524.21 ([M+H] +). Anal, calc. for C19H20N6O10S: C， 43.51; H, 3.84; N, 16.02%; found: C, 43.57 H，3.85;N, 16.11%.
實(shí)施例十五2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-5-甲基苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪 唑)乙酯(化合物15)的制備
制備方法同實(shí)施例十一。以5-甲基水楊酸代替4-甲基水楊酸，得到淡灰色晶狀目標(biāo) 化合物。產(chǎn)率43%。 Mpl56-158。C。 'H-NMR (300MHz, DMSO陽(yáng)^， Sppm): 2.73(s， 3H ); 2.89(s， 3H); 4.29(t, J ，774 Hz,.2H);4.52(t， J =4.89Hz， 2H);4.70 (m, 4H );7.39 (d， J =8.82Hz， 1H);7.57(s， 1H);7.68(d, J = 8.82Hz, 1H); 7.99 (s, 1H); 8.03 (s, 1H). MS (ESI): 458.21 ([M+H〗+). Anal, calc. for C20H22N6O7: C， 52.40; H, 4.84; N， 18.33%; found: C, 52,41; H, 4.84; N, 18.35%.
實(shí)施例十六2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-3-甲基苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪 唑)乙酯(化合物16)的制備
02N
制備方法同實(shí)施例十一。以3-甲基水楊酸代替4-甲基水楊酸，得到灰白色粉末狀目 標(biāo)化合物。產(chǎn)率66%。 Mpl44-147。C。 'H-NMR (300MHz, DMSO-^,Sppm): 1.99(s, 3H ); 2.40(s， 3H);2.50(s， 3H); 4.08(t， J =4.95 Hz, 2H);4.51(t, J =4.95 Hz, 2H);4.68(m, 4H); 7.10(d， J = 7.68Hz， 1H); 7.40 (m, 2H); 8.03 (s, 1H); 8.07(s, 1H). MS (ESI): 458.31([M+H] +). Anal, calc. for C20H22N6O7: C, 52.40; H, 4.84; N， 18.33%; found: C， 52.46; H， 4.86; N, 18.30%.
實(shí)施例十七2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-5-氯苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物17)的制備
02N制備方法同實(shí)施例十一。以5-氯水楊酸代替4-甲基水楊酸，得到灰褐色粉末狀目標(biāo) 化合物。產(chǎn)率56%。 Mp 150-151°C 。 ^-NMR (300MHz, DMSO-^， Sppm): 2.39(s, 3H); 2.44(s， 3H); 4.39(t, J =4.74 Hz， 2H);4.52(t， J =4.92Hz， 2H);4.66 (m, 4H );7.20(d， J = 9.00Hz， 1H);7.47(d， J = 2.55Hz, 1H); 7.58 (dd， ^ = 9.00Hz,J2，=2.55Hz,lH);8.00(s, 1H); 8.03(s, 1H). MS (ESI): 478.31([M+H〗+). Anal. calc. for C19H19C1N607: C， 47.66; H, 4.00; N, 17.55%; found: C, 47.59; H, 4.02; N, 17.51%.
實(shí)施例十八2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-4-氯苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物18)的制備
制備方法同實(shí)施例十一。以5-氯水楊酸代替4-甲基水楊酸，得到黃褐色粉末狀目 標(biāo)化合物。產(chǎn)率56%。 Mp 101-103 °C 。 'H-NMR (300MHz, DMSO-^, Sppm): 2.36(s, 3H ); 2.45(s, 3H); 4.44(t， J =2.94 Hz， 2H);4.52(t， J =2.942Hz， 2H);4.66 (m, 4H );7.i0(d, J = 5.10Hz, 1H);7.29(s， 1H); 7.49 (d, J=5.10Hz，lH);8.00(s， 1H); 8.03(s， 1H).MS (ESI): 478.11([M+H]+). Anal. calc. for Ci9H19QN607: C, 47.66; H, 4.00; N， 17.55%; found: C, 47.69; H, 3.98; N， 17.54%.
實(shí)施例十九2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-5-氟苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物19)的制備02N
制備方法同實(shí)施例十一。以5-氟水楊酸代替4-甲基水楊酸，得到白色粉末狀目標(biāo)化 合物。產(chǎn)率46。/。。Mp 153-155°C 。 ^-NMR (300MHz， DMSO-d6， 5ppm): 2.41(s, 3H ) ; 2.47(s, 3H); 4.49(t, J =4.74 Hz, 2H);4.57(t, J =4.92Hz, 2H);4.68 (m, 4H );7.25(d, J = 8.97Hz, 1H);7.49(d， J = 2.58Hz, 1H); 7.62 (dd, h = 8.97Hz，J2,=2.58Hz,lH);8.01(s, 1H); 8.03(s, 1H). MS (ESI): 462.10([M+H〗+). Anal. calc. for Ci9H19FN607: C, 49.35; H, 4.14; N, 18.18%; found: C, 49.31; H, 4.12; N, 18.21%.
實(shí)施例二十2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-4-溴苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物20)的制備
Br
02N
制備方法同實(shí)施例十一。以4-溴水楊酸代替4-甲基水楊酸，得到淺褐色粉末狀目標(biāo) 化合物。產(chǎn)率61%。 Mp 163-164。C。 ^-NMR (300MHz， DMS0-4, S卯m): 2.39(s, 3H); 2.47(s, 3H); 4.42(t, J =2.94 Hz， 2H);4.49(t, J =2.94Hz, 2H);4.67 (m, 4H );7.09(d， J = 5.10Hz, lH);7.23(s, 1H); 7.41 (d， J=5.10Hz,lH);8.01(s， 1H); 8'04(s， IH).MS (ESI): 552.27 ([M+H〗+). Anal. calc. for C19H19BrN607: C， 43.61; H， 3.66; N， 16.06%; found: C, 43.63; H， 3.69; N,16.07%.
實(shí)施例二H^— 2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-4-碘苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪 唑)乙酯(化合物21)的制備
制備方法同實(shí)施例十一。以4-碘水楊酸代替4-甲基水楊酸，得到黃褐色粉末狀目標(biāo) 化合物。產(chǎn)率49%。 Mp 169層170。C 。 ^-NMR (300MHz, DMSO-^， Sppm): 2.32(s， 3H ); 2.51(s, 3H); 4.37(t, J =2.91 Hz, 2H);4.45(t， J =2.91Hz, 2H);4.51 (m, 4H );7.00(d, J = 5.13Hz， lH);7.16(s, 1H); 7.46 (d, J=5.13Hz，lH);8.01(s， 1H); 8.05(s， 1H) .MS (ESI): 570.17 ([M+H〗、 Anal, calc. for C19H19IN607: C， 40.01; H， 3.36; N, 14.74%; found: C， 39.96; H, 3.35; N,
實(shí)施例二十五甲硝唑枝接取代水楊酸的一類化令物體外抗尿素酶活性研究
抑制尿素酶(Urease)活性實(shí)驗(yàn)幽門螺旋桿菌尿素酶購(gòu)自Sigma-Aldrich公司(St.
Louis, Mo, USA)，用DMSO和水(v/v， l:l)的混合溶劑配制各種濃度的待測(cè)化合物。，將
含有幽門螺旋桿菌尿素酶(25 nL， 10 kU七")和各種濃度的待測(cè)化合物(25 pL)的混合溶
液放置在化驗(yàn)盤(96-well)中，37 °C下預(yù)培養(yǎng)1 h。再加入含有尿素酶(500mM)的Hepes
緩沖溶液(0.2ml， lOOmM; pH = 6.8)和濃度為0.002%的酚紅指示劑，并在37 °C下進(jìn)
行培養(yǎng)。反應(yīng)時(shí)間通過微盤讀卡器(570nm)來測(cè)量，這需要形成充足的碳酸銨，使Hepes
緩沖溶液的pH值從6.8提高到7.7，測(cè)試終點(diǎn)依據(jù)酚紅指示劑的顏色變化。
半數(shù)抑制濃度(IC5o)定義為當(dāng)抑制率為50%時(shí)的藥物濃度。 測(cè)得的ICw見表l所示
14.78%.表1本發(fā)明所列甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物的幽門螺旋桿菌尿素酶的抑制ic50 值(〃M)
IC5。值(/M)
化合物
I 3 5 7 9
II 13 15 17 19 21
甲硝唑
陽(yáng)性對(duì)照AHA(乙酰氧 肟酸)
46.3±0.45 293. 6±0.81
73. 7±0.37 123. 5±0.63
63±0.21 132. 11士0.54
15. 1±0.33
26. 34±0.21 33. 04±0.17
27. 32±0.35 21.69±0.16
化合物 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
27. 55±0.31 17.67±0.15
ICs。值(/M) 49. 2±0.32 19. 4±0.12 54. 22±0.41 89±0.77 76±0.36 6. 5±0.02 23. 69±0.21 29. 54±0.39 21. 40±0.26 44. 32±0.1權(quán)利要求
1.一類甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物，其特征是它有如下通式A系列式中R1＝H、NO2、CH3或鹵素；R2＝H、NO2、CH3或鹵素；R3＝H、NH3或CH3；或B系列式中R4＝H或CH3；R5＝H、CH3或鹵素；R6＝-H、CH3、SO3H或鹵素。
2. —種權(quán)利要求1所述的A系列的甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物的制法，其特征是它由下列步驟組成步驟1.將每lOmmol對(duì)甲苯磺酰氯和等物質(zhì)的量的甲硝唑溶于無(wú)水CH2C12中， CH2Cl2的用量為lOOml，加入5ml三乙胺，冰浴攪拌，反應(yīng)4-5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物過濾后，濾液倒入100ml冰水中，分離出有機(jī)相，水相加乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相。 用飽和碳酸氫鈉和水分別洗滌有機(jī)相，用無(wú)水NaS04干燥有機(jī)相，減壓蒸去溶劑，得到 淡黃色晶狀固體，黃色晶體為甲硝唑的羥基被氯取代的產(chǎn)物，步驟2.將步驟l中得到的淡黃色晶狀固體與等物質(zhì)的量的取代水楊酸溶于N,N-二 甲基甲酰胺中，每毫摩爾的取代水楊酸用N,N-二甲基甲酰胺10ml，加入無(wú)水碳酸鉀， 每毫摩爾的取代水楊酸用無(wú)水碳酸鉀0.5克，8(TC攪拌20小時(shí)，減壓蒸去溶劑，層析得 本發(fā)明的A系列甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物。
3. —種權(quán)利要求1所述的B系列的甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物的制法，它由下 列步驟組成步驟1.將每lOmmol對(duì)甲苯磺酰氯和等物質(zhì)的量的甲硝唑溶于無(wú)水CH2Cl2中， CH2Cl2的用量為100ml，加入5ml三乙胺，冰浴攪拌，反應(yīng)4-5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物 過濾后，濾液倒入100ml冰水中，分離出有機(jī)相，水相加乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相。 用飽和碳酸氫鈉和水分別洗滌有機(jī)相，用無(wú)水NaS04干燥有機(jī)相，減壓蒸去溶劑，得到 淡黃色晶狀固體，黃色晶體為甲硝唑的羥基被氯取代的產(chǎn)物，步驟2.將步驟l中得到的淡黃色晶狀固體與取代水楊酸溶于N，N-二甲基甲酰胺中， 淡黃色晶狀固體與取代水楊酸的物質(zhì)的量之比為2比1，每毫摩爾的取代水楊酸用N，N-二甲基甲酰胺10ml，加入無(wú)水碳酸鉀，每毫摩爾的取代水楊酸用無(wú)水碳酸鉀0.5克，110 'C攪拌30小時(shí)，減壓蒸去溶劑，層析得本發(fā)明的A系列甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合4勿。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述制法，其特征是步驟2中所述層析，是采用200-300 目硅膠柱，洗脫液為無(wú)水乙酸乙酯。
5. 權(quán)利要求1所述的甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物在制備抗幽門螺旋桿菌的藥物 中的應(yīng)用。
全文摘要
一類甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物，它有如下通式A系列，式中R¹＝H、NO₂、CH₃或鹵素；R²＝H、NO₂、CH₃或鹵素；R³＝H、NH₃或CH₃；B系列，式中R⁴＝H或CH₃；R⁵＝H、CH₃或鹵素；R⁶＝H、CH₃、SO₃H或鹵素。本發(fā)明的甲硝唑和取代水楊酸的復(fù)合物對(duì)幽門螺旋桿菌尿素酶有明顯的抑制作用。本發(fā)明公開了其制法。
文檔編號(hào)A61P31/04GK101560189SQ20091002777
公開日2009年10月21日 申請(qǐng)日期2009年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月20日
發(fā)明者呂鵬程, 朱海亮, 毛文君 申請(qǐng)人:南京大學(xué)