專利名稱：：一種治療糖尿病腎病的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中藥制藥領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及一種以化合物二苯甲烷二氨基甲酸甲酉旨(4，4'_diphenylmethane_bis(methyl)carbamates,DPMC)為活性成分的藥物組合物及其在制備治療糖尿病并發(fā)癥藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：糖尿病及其慢性并發(fā)癥已嚴(yán)重影響人類健康和生活質(zhì)量。近年來(lái)，糖尿病發(fā)病人數(shù)呈上升趨勢(shì)。全世界各年齡組的糖尿病發(fā)病率，在2000年約為2.8%，到2030年預(yù)計(jì)為4.4%?；继悄虿∪藬?shù)將從2000年的1.71億增加到2030年3.33億。中國(guó)每年糖尿病的發(fā)病率在不斷上升，患病人數(shù)僅次于印度，居世界第二位。糖尿病及其慢性并發(fā)癥的防治是當(dāng)今面臨的重要課題。糖尿病腎病(diabeticn印hropathy，DN)是糖尿病的重要并發(fā)癥之一，在西方國(guó)家已成為導(dǎo)致終末期腎衰竭的首位疾病。2003年世界衛(wèi)生組織資料顯示，如果不控制血糖，大約有30%的1型糖尿病患者和25%40%的2型糖尿病患者發(fā)展成為糖尿病腎病。糖尿病腎病發(fā)病隱匿，早期不易被發(fā)現(xiàn)，出現(xiàn)癥狀時(shí)腎臟的病變已經(jīng)不可逆轉(zhuǎn)。長(zhǎng)年糖尿病導(dǎo)致腎臟的濾過(guò)功能被破壞，最初表現(xiàn)為微量白蛋白尿。隨著病程延長(zhǎng)，尿蛋白增加，腎臟排除血中毒素的能力逐漸減退，最終發(fā)展為終末期腎病(ESRD)，只能依靠血液透析或腎移植來(lái)維持生命。糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)，是蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等大分子物質(zhì)與還原糖羰基非酶催化的共價(jià)結(jié)合產(chǎn)物。在無(wú)酶催化條件下，葡萄糖分子游離醛與蛋白質(zhì)氨基首先形成可逆的希夫堿，后者經(jīng)結(jié)構(gòu)重排形成較穩(wěn)定的酮胺化合物(Amadori產(chǎn)物)，再經(jīng)過(guò)脫水、氧化和縮合等反應(yīng)，最后形成穩(wěn)定的、不可逆的AGEs。AGEs極易與蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物大分子形成交聯(lián)物，在細(xì)胞內(nèi)沉積，干擾細(xì)胞正常功能，與糖尿病并發(fā)癥密切相關(guān)。AGEs與RAGE(AGEs受體)相互作用，誘導(dǎo)產(chǎn)生或激活大量包括前致炎因子和前致纖維化因子等在內(nèi)的多種細(xì)胞因子，導(dǎo)致細(xì)胞肥大，基質(zhì)增生，腎小球纖維化等病理改變，在糖尿病腎病發(fā)生發(fā)展中起重要作用，是主要致病因素之一。干預(yù)AGEs的形成、消除已形成的AGEs、改善AGEs所誘發(fā)的各種腎病癥狀可以預(yù)防禾口治療糖尿病腎病(BohlenderJM，F(xiàn)rankeS，SteinG，etal.Advancedglycationendproductsandthekidney.AmJPhysiolRenalPhysiol，2005，289(4):645-659)。桑白皮(CortexMori)為桑科植物桑MorusalbaL.的干燥根皮，性甘、寒，具有瀉肺平喘、利水消腫的功能，主治肺熱喘咳、水腫脹滿尿少、面目肌膚浮腫，近年的藥理學(xué)研究表明桑白皮具有降血糖血壓、利尿、鎮(zhèn)咳平喘、抗HIV抗腫瘤等方面的活性。自20世紀(jì)70年代有學(xué)者從桑白皮中分離并證實(shí)了降血糖成分1-脫氧野尻霉素(l-deoxynojirimycin)和桑糖苷元(MoranA)以來(lái)，從桑白皮中分離更多更具活性的化學(xué)成分包括降血糖成分得到越來(lái)越多人的關(guān)注。DPMC為首次從桑白皮水提物中分離得到的新的天然產(chǎn)物，以往的人工合成品僅局限于化工領(lǐng)域，用于制備二苯甲烷二異氰酸酯(MDI)，后者是合成聚氨酯的主要原料。目前DPMC在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用國(guó)內(nèi)外鮮有文獻(xiàn)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種治療糖尿病腎病的藥物組合物及其制備方法，該藥物組合物的活性成分是提取自桑白皮的二苯甲烷二氨基甲酸甲酯。解決上述問(wèn)題的技術(shù)方案如下—種治療糖尿病腎病的藥物組合物，其由作為活性成分的二苯甲烷二氨基甲酸甲酯，以及常規(guī)的藥物載體組成，所述活性成分的重量百分比含量為0.1-99.5%。優(yōu)選地，所述活性成分的重量百分比含量為5-70%。本發(fā)明藥物組合物所述常規(guī)的藥用載體是指藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥物載體，例如稀釋劑、賦形劑如水等，填充劑如淀粉、蔗糖或乳糖等；粘合劑如纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠和聚乙烯吡咯烷酮；濕潤(rùn)劑如甘油；崩解劑如瓊脂、碳酸鈣和碳酸氫鈉；吸收促進(jìn)劑如季銨化合物；表面活性劑如十六烷醇；吸附載體如高嶺土和皂粘土；潤(rùn)滑劑如滑石粉、硬脂酸鈣和鎂、和聚乙二醇等。另外還可以在組合物中加入其它輔劑如香味劑、甜味劑等。本發(fā)明藥物組合物可以通過(guò)常規(guī)制劑方法制備成常規(guī)的劑型，常規(guī)劑型主要為口服制劑，如固體制劑片劑、顆粒劑、丸劑、粉劑、粒劑、膠囊等，液體制劑水或油懸浮劑或其它液體制劑如酏劑等。優(yōu)選地，所述藥物組合物為片劑、顆粒劑、丸劑或膠囊。本發(fā)明所述藥物組合物的使用劑量可隨特定的給藥方式、病癥的嚴(yán)重程度等而相應(yīng)調(diào)整。一般情況下，臨床口服使用的參考劑量是20-120mg/d。本發(fā)明的另一目的是提供上述藥物組合物的制備方法。采用了以下技術(shù)方案—種治療糖尿病腎病的藥物組合物的制備方法，將活性成分二苯甲烷二氨基甲酸甲酯與常規(guī)的藥用載體混合即得。A.取桑白皮切碎磨成粉，加水回流提取后合并提取液，減壓濃縮至一定的體積；B.將步驟A得到的提取液置于樹(shù)脂中，經(jīng)水和95%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，減壓濃縮得浸膏；C.浸膏以硅膠層析柱分離，分別以石油醚、石油醚-乙酸乙酯100:i，石油醚-乙酸乙酯50:l洗脫，其中石油醚-乙酸乙酯50:i洗脫部分得無(wú)色片狀晶體。本發(fā)明藥物組合物可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)生產(chǎn)方法制備。例如活性成分與多種載體混合，然后將其制成所需的劑型。本發(fā)明還提供了二苯甲烷二氨基甲酸甲酯在制備治療糖尿病并發(fā)癥的藥物中的應(yīng)用，優(yōu)選地，所述應(yīng)用為該藥物組合物在制備治療糖尿病腎病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明藥物組合物具有以下有益效果1.本發(fā)明首次從桑白皮中提取得到二苯甲烷二氨基甲酸甲酯，并證明了其具有降血糖的功能，為糖尿病及其并發(fā)癥患者提供了新的治療候選藥物。2.本發(fā)明的藥物組合物可加工成口服劑型如顆粒劑、滴丸、沖劑、片劑等，使用方便。3.本發(fā)明的藥物組合物具有顯著治療和預(yù)防糖尿病時(shí)腎小球損害的作用，由于可顯著預(yù)防糖尿病時(shí)血肌酐的升高、顯著降低糖尿病大鼠的尿量和尿蛋白，降低腎指數(shù)，表明對(duì)糖尿病腎病有顯著的防治作用。44.本發(fā)明的藥物組合物對(duì)糖尿病腎病的治療效果明顯優(yōu)于桑白皮水提物，并且活性成分明確，質(zhì)量易于控制，克服了傳統(tǒng)中藥中有效成分不明確、質(zhì)量控制難、有一定的毒副作用等缺點(diǎn)。圖1是DPMC對(duì)AGEs誘發(fā)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞外TGFP_1表達(dá)的影響(200X);其中:A:正常對(duì)照組;B:AGEs(5mM/L);C:陰性對(duì)照組;D:桑白皮水提物(0.lmg/mL);E:DPMC(O.5nM/L);F:DPMC(5nM/L);G:DPMC(25nM/L);H:DPMC(125nM/L)。具體實(shí)施例方式以下通過(guò)具體實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。實(shí)施例1:制備二苯甲烷二氨基甲酸甲酯(DPMC)取桑白皮(CotexMori)10kg，切碎磨成粉，加100L水回流提取三次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至一定的體積，置D101大孔樹(shù)脂中，先用水洗脫，再用95%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，減壓濃縮得浸膏，浸膏以硅膠層析柱分離，分別以石油醚、石油醚-乙酸乙酯ioo:1，石油醚-乙酸乙酯50:i洗脫，石油醚-乙酸乙酯(50:i)洗脫部分有無(wú)色片狀晶體析出，經(jīng)紅外、紫外、核磁共振和質(zhì)譜等分析確定其結(jié)構(gòu)為二苯甲烷二氨基甲酸甲酉旨(4，4'_diphenylmethane_bis(methyl)carbamates,DPMC)，分子式C17H18N204，分子量314，其結(jié)構(gòu)如下實(shí)施例2:本發(fā)明藥物組合物片劑的制備每片含有下述成分二苯甲烷二氨基甲酸甲酯12mg乳糖175mg玉米淀粉50mg硬脂酸鎂3mg制備方法將二苯甲烷二氨基甲酸甲酯、乳糖和淀粉混合，用水均勻濕潤(rùn)，把濕潤(rùn)后的混合物過(guò)篩并干燥，再過(guò)篩，加入硬脂酸鎂，然后將混合物壓片，每片重240mg，活性成分含量為12mg。該片劑用于高尿蛋白癥、糖尿病腎病的治療，具有良好的效果。實(shí)施例3:本發(fā)明藥物組合物膠囊的制備步驟如下A.取蜂蠟4.2g，加月見(jiàn)草油125g，8(TC水浴下熔融混勻，冷卻至室溫(25°C)后加入叔丁基對(duì)羥基茴香醚和枸椽酸適量，充分混勻；B.加入過(guò)100目篩的二苯甲烷二氨基甲酸甲酯0.25g、卵磷脂5g，加月見(jiàn)草油至250g，充分混勻，作為囊心液，壓制成1000粒膠囊。本實(shí)施例所得膠囊用于治療高血糖癥、糖尿病腎病等具有良好的效果。實(shí)施例4:本發(fā)明藥物組合物滴丸的制備取二苯甲烷二氨基甲酸甲酯15g，經(jīng)超微粉碎過(guò)200目篩后得細(xì)粉，加入至熔融的15g聚乙二醇4000基質(zhì)中，攪勻，以二甲苯硅油為冷卻劑，滴制法制丸，干燥，制得二苯甲烷二氨基甲酸甲酯滴丸。該滴丸用于血肌酐增多尿肌酐排出減少癥、糖尿病腎病的治療有著良好的效果。實(shí)施例5:本發(fā)明藥物組合物分散片的制備精密稱取處方量的二苯甲烷二氨基甲酸甲酯280g、乳糖40g、微晶纖維素70g、交聯(lián)聚維酮5.25g、阿斯巴甜2.5g、聚維酮6g、碳酸氫鈉4g，按等量遞加法將主藥混合物與各種輔料先手工混合均勻。過(guò)80目篩兩遍?；靹蚝蟮奈锪现眠m當(dāng)容器中，加入含15%(g/100ml)聚乙二醇6000的75%乙醇溶液適量，制軟材。20目擠壓過(guò)篩制濕顆粒。濕顆粒平攤于搪瓷盤中，置鼓風(fēng)恒溫干燥箱中，7(TC干燥2小時(shí)。精確稱量干燥顆粒的重量，加入2.25g剩余交聯(lián)聚維酮，按1%的量加入十二烷基硫酸鈉(SDS)，混勻后，7mm圓形沖模壓制成1000片。即得二苯甲烷二氨基甲酸甲酯分散片1000片。用于治療糖尿病腎病及并發(fā)病，具有良好的效果。實(shí)施例6:本發(fā)明藥物組合物片劑的制備活性成分70g微晶纖維素0.4g制成1000片制備方法將活性成分和微晶纖維素混合，用水均勻濕潤(rùn)制成軟材，把濕潤(rùn)后的混合物制粒，過(guò)20目篩，8(TC烘干，加入滑石粉，再過(guò)篩，然后將混合物壓片，每片重70.4mg，活性成分含量為70mg。本品口服用于治療糖尿病腎病及并發(fā)癥，具有良好的效果。本發(fā)明將二苯甲烷二氨基甲酸甲酯用于醫(yī)藥領(lǐng)域，觀察了活性成分二苯甲烷二氨基甲酸甲酯對(duì)AGEs引起的腎小球系膜細(xì)胞外基質(zhì)增生的影響，和對(duì)STZ糖尿病腎病大鼠病變的影響，驗(yàn)證了其防治糖尿病腎病的作用。試驗(yàn)例1:二苯甲烷二氨基甲酸甲酯(DPMC)對(duì)AGEs引起的腎小球系膜細(xì)胞外基質(zhì)增生的影響糖尿病腎病的特定病征為系膜區(qū)細(xì)胞外基質(zhì)增多而引起腎小球系膜基質(zhì)硬化。系膜細(xì)胞是腎小球的重要組成細(xì)胞，具有收縮、內(nèi)分泌、分裂增殖、免疫及吞噬作用多種功能，對(duì)腎小球生理功能的調(diào)解起著重要作用。AGEs可引起腎組織細(xì)胞外基質(zhì)增生，是糖尿病腎病的重要病變。1實(shí)驗(yàn)材料大鼠腎小球系膜細(xì)胞株HBZY-1(武漢細(xì)胞生物研究所)；DPMC，桑白皮水提物；牛血清白蛋白，D-葡萄糖(Sigma);新生牛血清(杭州四季青血清廠)；TGFP-1抗體(CantaCruz);DAB顯色系統(tǒng)(GeneTechBiotechnologyCompanyLimited);羥脯氨酸含量測(cè)定試劑盒(南京建成)。2實(shí)驗(yàn)方法2.1桑白皮水提物及AGEs的制備桑白皮水提物制備取桑白皮(CotexMori)適量，切碎磨成粉，加10量水回流提取三次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至一定的體積，備用。AGEs制備將質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的無(wú)球蛋白的牛血清白蛋白(BovineSerumAlbumin，BSA)與0.5mol/LD_葡萄糖共同溶解于0.2mol/L磷酸鹽緩沖溶液(pH=7.2)中，經(jīng)0.22ym濾膜過(guò)濾除菌后，置37t:培養(yǎng)箱內(nèi)孵育60d。糖基化產(chǎn)物孵育結(jié)束后，未結(jié)合的物質(zhì)通過(guò)對(duì)磷酸緩沖鹽溶液的廣泛透析而除去，F(xiàn)olin-酚法測(cè)定其濃度，稀釋成實(shí)驗(yàn)所需濃度，0.22m濾膜過(guò)濾除菌備用。2.2大鼠腎小球系膜細(xì)胞培養(yǎng)液準(zhǔn)備引起系膜細(xì)胞病理改變的AGEs最適濃度與作用時(shí)間的確定取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期HBZY-l細(xì)胞，以含5%新生牛血清的DMEM培養(yǎng)基制成單細(xì)胞懸液，以100y1/孔接種于96孔板，細(xì)胞數(shù)1X104/L37°C，5%0)2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h后，換用100無(wú)血清的DMEM，再孵育24h使細(xì)胞生長(zhǎng)同步進(jìn)入休止期(同步化)。棄細(xì)胞上清液，加入90iU5%新生牛血清的DMEM培養(yǎng)基和10i！1梯度稀釋AGEs，每組設(shè)置6個(gè)重復(fù)，于培養(yǎng)箱中分別按時(shí)間梯度培養(yǎng)。MTT法測(cè)定鼠腎小球系膜細(xì)胞增殖程度。結(jié)果表明，0.25mg/mlAGEs，培養(yǎng)48h為腎小球系膜細(xì)胞增殖最適條件。取24孔板培養(yǎng)的同步化處理的HBZY-1細(xì)胞，棄細(xì)胞上清液，各藥物組每孔均加入含5%新生牛血清的匿EM培養(yǎng)基800iil禾P100iil葡萄糖(終濃度為25mmol/L)，再向孔內(nèi)分別加入100iil桑白皮水提物(終濃度為0.lg/L)，各濃度的二苯甲烷二氨基甲酸甲酯溶液(終濃度分別為0.5nM/L、5nM/L、25nM/L、125nM/L)。正常對(duì)照組加lmlDEME培養(yǎng)基，AGEs組加900ii1DMEM培養(yǎng)基和100ylAGEs(終濃度為0.25mg/ml)。每組設(shè)置六個(gè)重復(fù)。于37°C，5%C02培養(yǎng)箱中再孵育48h，細(xì)胞鋪滿玻片后，吸出細(xì)胞上清，作羥脯氨酸含量檢測(cè)；取出細(xì)胞爬片，固定，留作染色和細(xì)胞免疫組化染色。TGFP-1染色流程如下4X多聚甲醛固定細(xì)胞爬片30min;新配含3%H202的甲醇溶液滅活內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶10min，蒸餾水洗3次；5XBSA封閉非特異性抗原20分鐘；滴加TGFP-l—抗(l:500)，4"過(guò)夜，PBS(pH7.4)洗2minX3次；滴加生物素化山羊抗小鼠抗體(二抗)，37°C30min，PBS(pH7.4)洗2minX3次；滴加HRP標(biāo)記的親和素_生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物，37。C30min，PBS(PH7.4)洗5minX4次;滴加50y1DAB染色液，室溫顯色15min，蒸餾水充分洗滌；蘇木素輕度復(fù)染lmin，水洗；酒精梯度脫水、二甲苯透明，中性樹(shù)膠封片。3統(tǒng)計(jì)與分析測(cè)定各組中大鼠腎小球系膜細(xì)胞培養(yǎng)液中羥脯氨酸含量，測(cè)定結(jié)果用^±^表示，采用組間t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；顯微鏡下觀測(cè)大鼠腎小球系膜細(xì)胞免疫組化攝片TGFP-1的表達(dá)。4結(jié)果4.1二苯甲烷二氨基甲酸甲酯(DPMC)對(duì)AGEs引起的大鼠腎小球系膜細(xì)胞上清液中羥脯氨酸含量增加的影響從表1可以看出，桑白皮水提物、不同劑量的DPMC都能顯著地降低AGEs引起的7大鼠腎小球系膜細(xì)胞上清液中羥脯氨酸的含量增加，其中大劑量的DPMC(125nM/L)作用最強(qiáng)，且明顯優(yōu)于水提物組。表1.DPMC對(duì)AGEs引起的大鼠腎小球系膜細(xì)胞上清液中羥脯氨酸含量增加的影響(x±s,n=6)組別樣本數(shù)劑量羥脯氨酸(Hg/ml)正常對(duì)照組6—5.47±1.23**AGEs組6一10.90±8.03桑白皮水提物組60.lmg/ml7.54±1.52*DPMC組60.5nM/L7.68±1.10*DPMC組65nM/L7.76±1.21*DPMC組625nM/L5.71±1.18*DPMC組6125nM/L4.76±0.58**#和AGEs組比較*p<0.05**P<0.01;和桑白皮水提物組比較#p<0.054.2DPMC對(duì)AGEs引起的大鼠腎小球系膜細(xì)胞TGFP_1的表達(dá)的影響附圖1結(jié)果表明，AGEs能使大鼠腎小球系膜細(xì)胞外TGFI3-1表達(dá)增多，桑白皮水提物、不同濃度的DPMC均能對(duì)抗AGEs引起的大鼠腎小球系膜細(xì)胞外TGFP-1的表達(dá)增多；DPMC大劑量的效果最佳；各濃度DPMC效果和桑白皮水提物相當(dāng)或優(yōu)于水提物。試驗(yàn)例2:二苯甲烷二氨基甲酸甲酯對(duì)STZ糖尿病腎病模型大鼠病變的影響1材料和試劑鏈佐菌素(Str印tozotocinSTZ，Sigma);Wistar大鼠(由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)；BIOBASE-PEARL分立式全自動(dòng)生化分析儀(山東BIOBASE公司)。2實(shí)驗(yàn)方法2.1桑白皮水提物的制備取桑白皮(CotexMori)適量，切碎磨成粉，加10量水回流提取三次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至一定的體積，備用。2.2給藥經(jīng)STZ小劑量多次給藥造模，確認(rèn)為糖尿病腎病模型的大鼠，隨機(jī)分為6組，每組10只模型組，陽(yáng)性藥物對(duì)照組(氨基胍，100mg/kg)，桑白皮水提物組(2000mg/kg)，本發(fā)明藥物二苯甲烷二氨基甲酸甲酯3個(gè)劑量組(大劑量組，4mg/kg;中劑量組2mg/kg;低劑量組lmg/kg)，另取Wistar大鼠10只為正常對(duì)照組。每天各組同體積不同濃度灌胃給予相應(yīng)藥物或生理鹽水1次，連續(xù)給藥14周。3統(tǒng)計(jì)與分析給藥結(jié)束后，代謝籠收集24小時(shí)尿液，計(jì)算尿量，并測(cè)定尿液中總蛋白、微白蛋白，肌酐含量；眼眶取血，全自動(dòng)生化儀測(cè)定各生化指標(biāo)；取腎，10%甲醛固定，留做病理組織學(xué)檢查。所有測(cè)定結(jié)果用S±S表示，采用組間t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。4結(jié)果4.1DPMC對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病腎病動(dòng)物模型大鼠24小時(shí)尿量、尿總蛋白、微白蛋白及尿肌酐的影響從表2可以看出，模型組動(dòng)物24小時(shí)尿量、總蛋白排出量、微白蛋白排出量增加，尿液中肌酐排出明顯減少；桑白皮水提物和不同劑量的DPMC均可明顯對(duì)抗模型動(dòng)物的上述變化減少糖尿病腎病動(dòng)物24小時(shí)尿量，降低24小時(shí)尿總蛋白、微白蛋白排出量，增加尿肌酐排出量，其中DPMC隨著劑量提高，效果增強(qiáng)，量效關(guān)系明顯。大劑量DPMC效果明顯優(yōu)于桑白皮水提物。表2DPMC對(duì)糖尿病腎病模型大鼠尿量、尿總蛋白、微白蛋白及尿肌酐的影響<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>和模型組比較*P<0.05**P<0.01;和桑白皮組比較:#p<0.05翻p<0.014.2二苯甲烷二氨基甲酸甲酯(DPMC)對(duì)糖尿病腎病模型大鼠血清生化指標(biāo)的影響從表3可以看出，桑白皮水提物和DPMC均可明顯降低糖尿病腎病動(dòng)物血清中總膽固醇、丙二醛、血肌酐、血尿素氮、AGEs、低密度脂蛋白水平，顯著提高血清SOD水平。劑量提高，DPMC效果增強(qiáng)；各劑量DPMC效果優(yōu)于桑白皮水提物或相當(dāng)。表3DPMC對(duì)糖尿病腎病模型大鼠血清生化指標(biāo)的影響±S,n=10)組別劑量(mg/kg)TG(mmol/L)SOD(U/ml)MDA(nmol/L)血肌酐(umol/L)血尿素氮(mmol/L)AGEsLDL(mmol/L)正常對(duì)照組—1.89±0.22**525±26**4.4±0.7**71.7±19.2**6.5±0.7**264士53*0.78±0.30**模麵—3.36±0.72481±259.3±2.696.3±13.47.9±1.3351±592.12±0.67氨基胍組1003.35±0.87516±20**5.9±1.7**77,7±20.3*6.6士0.8*283±78*2.01±0.58桑白皮水提物組20002.68±0.86510±44*6.8±2.4*79.3±24.7*6.8±1.3*291±521.66±0.54*DPMC組13.23±0.76498±337.8±2.391.0±31.17.0±1.0290±591.91±0■55DPMC組22.76±0.80*513±41*6.8±1.9*76.6±24.5*6.6±1.2*289±56*1.51±0DPMC組42.57±0.80*520±29**6.8±1.3*74.0±17.1**6.5±1.5**281±78*1.43±0.36*和模型組比較*P<0.05**P<0.01;其中TG:總膽固醇；S0D:超氧化物歧化酶；MDA:丙二醛；AGEs:糖基化蛋白；LDL:低密度脂蛋白。4.3二苯甲烷二氨基甲酸甲酯對(duì)糖尿病腎病模型大鼠腎小球CTGF表達(dá)和病理組織學(xué)的影響從表4可以看出，與正常對(duì)照組相比，糖尿病腎病模型腎小球CTGF的表達(dá)顯著增加(P<0.01)，病理組織損傷(包括PAS染色)明顯增加(P<0.01);桑白皮水提物和不同劑量的DPMC均能顯著減少由STZ誘發(fā)的糖尿病腎病模型大鼠腎小球CTGF的表達(dá)，降低損傷病理學(xué)評(píng)分，其中DPMC劑量提高，效果增強(qiáng)；各劑量DPMC效果優(yōu)于桑白皮水提物或相當(dāng)。表4二苯甲烷二氨基甲酸甲酯對(duì)糖尿病腎病模型大鼠腎小球CTGF表達(dá)和病理組織學(xué)的影響(三±s,n=10)動(dòng)物數(shù)劑量組別CTGF(W病理評(píng)分(只)(mg/kg)10<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>和模型組比較:*P<0.05**P<0.01;和桑白皮水提物組比較:#p<0.0權(quán)利要求一種治療糖尿病腎病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物由作為活性成分的二苯甲烷二氨基甲酸甲酯，以及常規(guī)的藥物載體組成，所述活性成分的重量百分比含量為0.1-99.5％。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療糖尿病腎病的藥物組合物，其特征在于所述活性成分的重量百分比含量為5-70%。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種治療糖尿病腎病的藥物組合物，其特征在于所述的常規(guī)的藥物載體為稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體、潤(rùn)滑劑、香味劑或甜味劑中的至少一種，其中賦形劑為水，填充劑選自淀粉、蔗糖或乳糖；粘合劑選自纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯烷酮；濕潤(rùn)劑為甘油；崩解劑選自瓊脂、碳酸鈣或碳酸氫鈉；吸收促進(jìn)劑為季銨化合物；表面活性劑為十六烷醇；吸附載體為高嶺土或皂粘土；潤(rùn)滑劑選自滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂或聚乙二醇。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種治療糖尿病腎病的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物為片劑、顆粒劑、丸劑、膠囊或液體制劑。5.—種制備如權(quán)利要求1所述的一種治療糖尿病腎病的藥物組合物的方法，其特征在于將活性成分二苯甲烷二氨基甲酸甲酯與所述常規(guī)的藥物載體混合，按照一定的制劑工藝制備，即得。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種治療糖尿病腎病的藥物組合物的制備方法，其特征在于所述活性成分二苯甲烷二氨基甲酸甲酯的制備方法為A、取桑白皮切碎磨成粉，加水回流提取后合并提取液，減壓濃縮至一定的體積；B、將步驟A得到的提取液置于樹(shù)脂中，經(jīng)水和95%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，減壓濃縮得浸膏；C、浸膏以硅膠層析柱分離，分別以石油醚、石油醚-乙酸乙酯100:l，石油醚-乙酸乙酯50:l洗脫，其中石油醚-乙酸乙酯50:i洗脫部分得無(wú)色片狀晶體。7.二苯甲烷二氨基甲酸甲酯在制備治療糖尿病腎病的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了提取自桑白皮的二苯甲烷二氨基甲酸甲酯在制備治療糖尿病腎病藥物的應(yīng)用，該治療糖尿病腎病的藥物組合物其由作為活性成分的二苯甲烷二氨基甲酸甲酯，以及常規(guī)的藥物載體組成，所述活性成分的含量為0.1-99.5wt％。該藥物組合物主要應(yīng)用于制備治療糖尿病腎病藥物中。本發(fā)明的藥物組合物對(duì)糖尿病腎病有顯著的防治作用，使用方便，為患者提供了新的治療候選藥物。文檔編號(hào)A61K31/27GK101780067SQ20091003671公開(kāi)日2010年7月21日申請(qǐng)日期2009年1月16日優(yōu)先權(quán)日2009年1月16日發(fā)明者何寶,朱荃,段婷婷,湯丹,王汝上,石興華,程慧荃,鄭兆廣,顧斐,黃曉玲,黃艷霞申請(qǐng)人:廣州康臣藥物研究有限公司