專利名稱：應用抗磷脂酰絲氨酸受體抗體在治療癌癥上的新用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明是有關應用抗磷脂酰絲氨酸受體抗體(anti-phosphatidylserine receptor antibody)來阻止憐月旨酷絲氛酸受體和憐 脂酰絲氨酸結合，使磷脂酰絲氨酸表面化的細胞在局部誘導特異免疫反應，極大的增強癌 癥的治療效果，為治療癌癥的新用途，涉及制藥領域.
背景技術：
癌癥是嚴重危害人類健康的常見病及多發(fā)病，在世界范圍內致死性疾 病中，占第二位或第三位。近半個世紀以來，世界有許多國家和地區(qū)癌癥的發(fā)病率和死亡率 均有增加之勢.癌癥的治療方法主要有外科手術療法、放射療法和藥物療法，近年來生物 免疫療法已進入臨床應用，臨床上常以四種方法的綜合應用來治療癌癥.單克隆抗體或多克隆抗體是一類蛋白質分子，以其高特異性在醫(yī)學基礎研究，疾 病的臨床診斷，治療和預防有廣泛的應用，其在生物免疫療法治療癌癥的開發(fā)前景已獲廣 泛肯定·巨嗜細胞是機體免疫系統(tǒng)的一個重要組成部份，其表面的磷脂酰絲氨酸受體和在 細胞凋亡時外翻的磷脂酰絲氨酸結合是迅速清除凋亡的細胞的一個主要機制.細胞凋亡是機體在生理或病理條件下受到刺激后，導致細胞產生一系列形態(tài)和生 化方面的改變而引起的程序性細胞死亡.磷脂酰絲氨酸是一種磷脂，存在于細胞膜內，為膜的一種組成部分.正常細胞的細胞膜磷脂分布是不對稱的，位于細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸 (phosphatidylserine)在細胞凋亡時轉至細胞膜外表面，此改變被認為是特異性的，并且 可作為凋亡細胞表面改變的標記。磷脂酰絲氨酸表面化發(fā)生于凋亡早期，是一種導致機體 吞噬凋亡細胞的信號.

發(fā)明內容
本發(fā)明利用放射線在試驗動物腫瘤模型上誘導細胞凋亡，利用抗磷脂 酰絲氨酸受體抗體療法來阻止凋亡細胞被機體的免疫系統(tǒng)的迅速清除，使凋亡細胞在局部 誘導特異腫瘤免疫反應，起到腫瘤疫苗的作用，用以刺激機體產生對腫瘤的免疫反應，達到 治療目的.所用抗磷脂酰絲氨酸受體抗體為兔抗人多克隆抗體，該抗體對人和鼠磷脂酰絲氨 酸受體有交叉反應.兔IgG和抗磷脂酰絲氨酸受體抗體購自Trend Pharma & Tech Ltd.試驗動物腫瘤模型試驗動物采用C3H/HEN小鼠，試驗用腫瘤細胞為老鼠鱗狀細 胞癌細胞株SCCVII.各組小鼠接種腫瘤后第8天測量各組小鼠腫瘤體積.各組無顯著差異。試驗動物分組組(1)為對照組，無任何治療.組(2)為腫瘤局部放射治療.組(3)為腫瘤局部放射治療，加抗磷脂酰絲氨酸受體抗體.組(4)為腫瘤局部放射治療，加兔IgG為治療對照.當腫瘤的直徑超12mm，和體積超過450立方毫米，給與人道毀滅.


在附圖1中，X軸表示該圖為植腫瘤后的第8天紀錄的分組資料，Y軸表示各組存活老鼠只數(shù).該圖表明所有試驗鼠均存活.在附圖2中，X軸表示該圖為植腫瘤后的第15天紀錄的分組資料，Y軸表示各組存 活老鼠只數(shù).該圖表明組1所有試驗鼠因腫瘤體積超過450立方毫米，均人道毀滅，其他 3組試驗鼠均存活.在附圖3中，X軸表示該圖為種植腫瘤后的第50天紀錄的分組資料，Y軸表示各 組存活老鼠只數(shù).經過放射照射后約40天，三組中有些老鼠身上腫瘤開始復發(fā)，至第50天 時，凡老鼠的復發(fā)腫瘤的直徑超過12mm，和體積超過450立方毫米，給與人道毀滅.在附圖4中，X軸表示該圖為植腫瘤后的第80天紀錄的分組資料，Y軸表示各組存 活老鼠只數(shù).圖示只有組3有75%小鼠經治療存活，其余組全部小鼠因腫瘤復發(fā)死亡.
具體實施例方式以下對本發(fā)明作詳細說明，但不意味著限制本發(fā)明的內容.試驗基本準備動物試驗用C3H/HEN小鼠，22_30克重，50只，雌雄各半，試驗前 一天用電動理發(fā)刀剃掉小鼠背部毛發(fā)，并使用市售退毛劑去掉殘余毛根，然后每只老鼠背 部種植2百萬個腫瘤細胞，約8天后，種植的腫瘤細胞長為實體腫瘤，選用其腫瘤直徑約為 8-9mm(毫米)的老鼠32只，分為4組，雌雄各半，并測量每個腫瘤的體積，測量用游標卡尺， 因腫瘤體積近似于錐形，所以測量結果經公式體積=1/3 ^ 3. 14 ^ r ^ r ^ H計算，其中 r表示腫瘤底面半徑，H表示腫瘤高度，并紀錄并進行統(tǒng)計學處理，然后按試驗計劃，分組治 療，腫瘤局部放療是將老鼠放置于一個3毫米鉛板所制小容器，只允許腫瘤暴露與外，接受 放射治療.組(1)為對照組，無任何治療，每2天測量腫瘤體積.組(2)給與腫瘤局部放射治療25Gy，定期測量腫瘤體積.組(3)給與腫瘤局部放射治療25Gy，立即給與腹腔注射抗磷脂酰絲氨酸受體抗 體，每天一次，連續(xù)3天.然后定期測量腫瘤體積.組(4)給與腫瘤局部放射治療25Gy，立即給與腹腔注射兔IgG，每天一次，連續(xù)3 天.然后定期測量腫瘤體積.任何小鼠腫瘤的直徑超過12毫米，和體積超過450立方毫米，給與人道毀滅.
權利要求
本發(fā)明是有關應用阻斷磷脂酰絲氨酸受體和磷脂酰絲氨酸結合的方法在治療癌癥上的新用途，涉及制藥領域，此新用途可用于國家一類新藥的開發(fā)。
2.根據權利要求1所述的本發(fā)明所用抗體為可阻斷磷脂酰絲氨酸受體和磷脂酰 絲氨酸結合的單克隆或多克隆抗磷脂酰絲氨酸受體的抗體(anti-phosphatidylserine receptor antibody)和功能上的類似物，如來自有此功能抗體的片段，有此功能抗體的重 組形式，有此功能抗體的人源化形式或有此功能的化學合成物。
3.根據權利要求1所述的本發(fā)明的抗體的應用可以和誘導腫瘤細胞凋亡的方法，包括 物理的，化學的和生物的方法聯(lián)用，也可單獨應用。
4.根據權利要求1所述的本發(fā)明的應用對象是人或動物。
5.根據權利要求1所述的本發(fā)明的抗體的應用劑量是每天0.5毫克/每公斤體重-20毫克/每公斤體重。
6.根據權利要求1所述的本發(fā)明在阻斷磷脂酰絲氨酸受體和磷脂酰絲氨酸結合時，每 天注射1 2次。
7.根據權利要求1所述的本發(fā)明的應用途徑是經靜脈注射或經腹腔注射，或經靜脈注 射和經腹腔注射結合。
8.根據權利要求1所述的本發(fā)明所用攜帶抗體的注射用液為0.9%生理鹽水或其它臨 床靜脈注射稀釋用液體。
9.根據權利要求1所述的本發(fā)明所用抗體為IgGjPIgM及所屬亞型。
10.根據權利要求1所述的本發(fā)明的治療范圍為早期，中期，晚期的實體癌癥和非實體 癌癥。
全文摘要
本發(fā)明是有關應用抗磷脂酰絲氨酸受體抗體在治療癌癥上的新用途，該用途可用來阻止磷脂酰絲氨酸表面化的細胞被機體的免疫系統(tǒng)的迅速清除，使之在局部誘導特異腫瘤免疫反應，極大的增強癌癥的治療效果，為治療癌癥的新用途，涉及制藥領域。
文檔編號A61P35/00GK101810857SQ20091006080
公開日2010年8月25日 申請日期2009年2月20日 優(yōu)先權日2009年2月20日
發(fā)明者孫京海 申請人:孫京海