專利名稱：積雪草酸與羥基積雪草酸在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑的藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及中藥提取積雪草酸與羥基積雪草酸的方法，經(jīng)藥理實驗證明具有新的 醫(yī)藥用途。具體的說是積雪草酸與羥基積雪草酸作為α-葡萄糖苷酶抑制劑在制備降血糖 藥物中的應用。屬于醫(yī)藥技術領域。
背景技術：
糖尿病是一組由遺傳和環(huán)境因素相互作用而引起的臨床綜合征，系因胰島素分泌 絕對或相對不足及靶組織對胰島素敏感性降低，引起機體糖、脂肪、蛋白質(zhì)、水和電解質(zhì)等 一系列代謝紊亂，臨床以高血糖為主要共同標志。久病可引起多系統(tǒng)損害，病情嚴重或應激 時可發(fā)生急性代謝紊亂如酮癥酸中毒等。α-葡萄糖苷酶抑制劑是通過競爭性抑制α-葡 萄糖苷酶的活性，可阻滯雙糖水解為單糖，延緩糖的吸收，使血糖平穩(wěn)并緩慢的維持在一定 的水平，防治餐后高血糖癥，同時還可以提高糖耐量，預防和治療肥胖癥，高三酰甘油血癥， 用于治療因碳水化合物紊亂而引起的疾病。實驗研究表明阿卡波糖治療糖尿病動物模型的 慢性并發(fā)癥有效，通過降低餐后血糖濃度而減少蛋白糖基化，延遲或阻止腎、視網(wǎng)膜神經(jīng)病 變發(fā)生以及缺血性心肌病的發(fā)展。文獻報道主要α-葡萄糖苷酶抑制劑有多糖、生物堿、苷 類、多肽、糖苷類、黃酮類、皂苷和酚類等。積雪草酸與羥基積雪草酸是從傘形科Umbel 1 iferae植物積雪草CentelIa Miatica(L)Urban的干燥全草或帶根全草提取純化水解分離而得。積雪草性寒，味苦、辛， 具有清熱利濕、解毒消腫之功效。我國民間常用于治療感冒、扁桃腺炎、傳染性肝炎、痢疾、 跌打損傷、疔瘡腫毒、流行性腦脊髓膜炎等。并且傣族民間積雪草用于食療治療很多疾病。 積雪草主要成分為積雪草苷和羥基積雪草苷。另外含有黃酮類、揮發(fā)油類、多炔烯炔類等， 還含有少量積雪草酸與羥基積雪草酸(趙宇新等報道積雪草研究進展，中國中醫(yī)藥信息雜 志，2002年8月第9卷第8期，81-84)。資料表明積雪草酸與羥基積雪草酸是積雪草苷與羥 基積雪草苷在胃腸道內(nèi)代謝的活性形式，給藥時直接使用積雪草酸與羥基積雪草酸來代替 積雪草苷與羥基積雪草苷，則無須經(jīng)過胃腸道細菌的代謝，使活性作用更直接，從而克服用 皂苷給藥劑量不好控制的難題。植物中游離的積雪草酸與羥基積雪草酸的含量較低，從積 雪草中直接獲得的三萜酸的量相對較少，而積雪草中皂苷的含量遠高于三萜酸，所以我們 從積雪草中提取總皂苷，然后經(jīng)過水解得總三萜酸，經(jīng)過分離得積雪草酸與羥基積雪草酸。國外專利公開了積雪草酸及衍生物有治療創(chuàng)傷、皮膚潰瘍、抗癌、保肝、癡呆和知 識別紊亂的作用(W096/17819、W098/23575、W098/23278、W098/23574、W098/37899)。國 內(nèi)專利公開了積雪草酸及衍生物有治療皮膚創(chuàng)傷、抗抑郁、抗阿爾茨海默病以及保肝、 保護心腦血管和誘導腫瘤細胞調(diào)亡等多種作用(CN1238692、CN1248918、CN1543964及 CN1582946)。積雪草酸還有治療肝纖維化、肺纖維化作用(專利申請?zhí)?00610122561. 4、 200610118041. 6)。我們在α -葡萄糖苷酶抑制藥物篩選過程中出人意料地發(fā)現(xiàn)積雪草酸與羥基積雪草酸具有很強的抑制α-葡萄糖苷酶的作用。在本專利申請之前還未有文獻報道積雪草 酸與羥基積雪草酸具有抑制α-葡萄糖苷酶的作用。也未發(fā)現(xiàn)積雪草酸與羥基積雪草酸在 制備α-葡萄糖苷酶抑制劑的藥物中的應用的報道。以往制備積雪草酸與羥基積雪草酸是從植物中分離積雪草苷與羥基積雪草苷單 一成分然后在進行水解純化得到單一成分積雪草酸與羥基積雪草酸；另種方法就是直接從 積雪草中提取，經(jīng)過繁瑣的萃取、層次等分離過程而獲得，較為費時費力，而且消耗大量的 溶劑，并且收率低。為克服以上技術方面的不足，我們先制備總的三萜酸，然后分離單一成 分積雪草酸與羥基積雪草酸，本發(fā)明的特點在于我們提取分離總皂苷，利用積雪草中的苷 元大部分為五環(huán)三萜酸的特點，用含水乙醇提取時加氧化鈣，既提高了積雪草苷的溶解度 又除去了大量雜質(zhì)，水解后再進行純化分離，可以得到總的三萜酸及單一成分。收率大大 提高。具體操作為積雪草用乙醇或甲醇提取后，提取液不經(jīng)過濃縮直接通過大孔樹脂柱， 操作簡單，并且解決了濃縮后有效成分部分析出，溶液渾濁不利于上柱、有效成分流失的問 題。濃縮液不經(jīng)過干燥直接水解成積雪草三萜酸，還可以節(jié)省時間。制備積雪草酸與羥基 積雪草酸時利用常壓或中低壓ODS柱層析，可跟據(jù)需要設計柱的規(guī)格，可大量制備高純度 積雪草酸與羥基積雪草酸，分離柱具有可反復使用，易操作、成本低，純度高的特點。整個生 產(chǎn)過程沒有使用大量有害有機試劑，操作簡單、成本低，純度高的特點。積雪草酸與羥基積 雪草酸含量均在95%以上，特別適合產(chǎn)業(yè)化大量生產(chǎn)，與以往公開的技術相比具有明顯的 區(qū)別和技術進步。我們通過對積雪草酸與羥基積雪草酸的進一步研究證明，積雪草酸與羥基積雪草 酸具有α-葡萄糖苷酶抑制劑的活性。本發(fā)明完成前未發(fā)現(xiàn)有關積雪草酸與羥基積雪草酸作為α -糖苷酶抑制劑、在預 防和治療降血糖方面應用的報道。本發(fā)明具有良好的應用前景。積雪草酸(asiatic acid)的結構式
權利要求
積雪草酸與羥基積雪草酸在制備α 葡萄糖苷酶抑制劑的藥物中的應用。
2.根據(jù)權利要求1所述的應用其特征在于積雪草酸與羥基積雪草酸是從傘形科積雪 草屬植物積雪草中提取純化分離而得。積雪草酸與羥基積雪草酸含量均在95%以上。
3.根據(jù)權利要求2所述的積雪草酸與羥基積雪草酸制備方法為取積雪草藥材，用 含0. 1-0. 4%氧化鈣或氫氧化鈣的50-90%乙醇或甲醇回流提取2-3次。合并提取液，加 入藥液體積0. 1-1 %的藥用活性炭，攪拌，濾過，濾液直接通過已處理好的大孔樹脂柱，用 50-90%乙醇或甲醇洗脫，收集流出液及洗脫液，回收溶劑，濃縮至每Iml含2g藥材；加 0. 2 2mol/L的堿溶液1_4倍量，100°C水解1_5小時。放冷，用稀酸調(diào)PH值為2_6，濾 過，棄去水解液，濾餅用去離子水洗至中性；再用60-95%乙醇或甲醇加熱至沸，加入藥液 體積0. 2-2%的藥用活性炭，趁熱濾過，濾液減壓濃縮回收至無醇味，加水至每Iml含Ig藥 材，放置，過濾，水洗，干燥，再重結晶1-3次，得積雪草總三萜酸。取積雪草總三萜酸，用含 60-90%乙腈醋酸水溶液溶解，在常壓或中低壓C-18反相柱上分離純化，用含60-90%乙腈 醋酸水溶液為洗脫劑，分別收集積雪草酸與羥基積雪草酸流分，薄層鑒定后合并，揮去部分 溶劑，分別獲得積雪草酸與羥基積雪草酸。含量均在95%以上。
4.根據(jù)權利要求3所述的純化得到積雪草酸與羥基積雪草酸的特征在于提取藥材乙 醇或甲醇用量為5 10倍量；提取時間為1-3小時；水解用的堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳 酸鉀、碳酸鈉等；調(diào)PH值為2-6的稀酸溶液為鹽酸或硫酸溶液。
5.根據(jù)權利要求3所述的應用其特征在于所選用的大孔樹脂為D101、D201、AB-8。
6.根據(jù)權利要求1所述的應用其特征在于在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑的藥物中的 應用是指含有有效治療劑量的積雪草酸與羥基積雪草酸和一種或多種藥學上可接受的藥 用賦形劑，或用積雪草酸與羥基積雪草酸組方，并用于制備α “葡萄糖苷酶抑制藥物的其 它制劑中的應用。
全文摘要
從積雪草(Centella asiatica(L.)Urban)中提取制備了積雪草酸(asiatic acid)與羥基積雪草酸(madecassic acid)，經(jīng)藥理實驗證明具有抑制α-葡萄糖苷酶活性。本發(fā)明公開了積雪草酸與羥基積雪草酸在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑藥物中的新用途，在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑藥物中可以是積雪草酸與羥基積雪草酸，也可以是含積雪草酸與羥基積雪草酸的組合物。同時也公開了積雪草酸與羥基積雪草酸新的制備方法。
文檔編號A61K31/56GK101991578SQ200910067429
公開日2011年3月30日 申請日期2009年8月24日 優(yōu)先權日2009年8月24日
發(fā)明者南敏倫, 赫玉芳, 趙全成, 趙文杰, 陳聲武, 馬吉勝 申請人:趙全成