專利名稱：普洱茶的提取物及其制備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥提取物及其制備，特別涉及普洱茶的提取物及其制備。
背景技術(shù)：
普洱茶是云南特有的地方名茶。是以云南原產(chǎn)地的大葉種曬青茶及其再加工而成 兩個系列直接再加工為成品的生普和經(jīng)過人工速成發(fā)酵后再加工而成的熟普，型制上又 分散茶和緊壓茶兩類；成品后都還持續(xù)進行著自然陳化過程，具有越陳越香的獨特品質(zhì)。普 洱茶是用優(yōu)良品種云南大葉種的鮮葉制成，也叫作普洱散茶。其外形條索粗壯肥大，色澤烏 潤或褐紅，俗稱象豬肝色。滋味醇厚回甘，具有獨特的陳香味兒，有“美容茶”之聲譽。普洱茶是惟一的后發(fā)酵型的茶，它的茶堿、茶多酚等對人體有害的物質(zhì)在長期的 發(fā)酵過程中被分化掉了，因此品性溫和，對人體不刺激，還能夠促進新陳代謝，加速身體內(nèi) 脂肪、毒素的消解和轉(zhuǎn)化，現(xiàn)在困擾都市人的肥胖、三脂高等問題，普洱茶都能夠起到很好 的緩解作用，如排毒、養(yǎng)胃、消炎、降低膽固醇、消脂去膩、美容減肥。普洱茶提取物屬茶制品。為暗紅褐色，溶于水，不溶于乙醇、甲醇、及三氯甲烷；普 洱茶提取物的主要化學組分，以干基或干物率計為茶多糖，茶褐素類，蛋白質(zhì)，其余為極少 量的茶葉自身的物質(zhì)如茶紅素、茶黃素及水溶性果膠等。普洱茶提取物營養(yǎng)價值高，生理活 性物質(zhì)豐富。中國專利200510010871公開了一種普洱茶提取物制備過程如下a.稱取一定量的普洱茶，粉碎至20目，加入5-10倍體積的溫度為80 90°C的蒸 餾水，加蓋保溫浸泡40分鐘后過濾；b.濾渣用3-5倍體積的溫度為80 90°C的蒸餾水浸泡30分鐘后過濾；c.濾渣再用3倍體積的溫度為80 90°C的蒸餾水浸泡30分鐘后過濾；d.合并三次過濾的濾液，加入無水乙醇至乙醇濃度為50% 90%的范圍進行沉 淀，靜置24小時后進行過濾，收集沉淀物，進行真空低溫干燥，真空低溫為50 60°C，干 燥至水分含量約為5 11%即得普洱茶提取物。普洱茶中含有茶多糖15-45%，茶褐素 50-70%，蛋白質(zhì) 4. 7-14. 0%等。以上普洱茶提取物制備方法耗醇量大，設(shè)備占用大，提取液直接過濾耗能又耗時， 本發(fā)明人在對普洱茶提取物進行研究過程中，采用新的分離技術(shù)，試驗出一組新的普洱茶 提取物及其制備方法，這些普洱茶提取物具有療效高，吸收好，質(zhì)量穩(wěn)定，同時制備方法分 離效果佳，工藝簡單，操作方便，成本低廉，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種普洱茶提取物。所述提取物含有的主要活性成分為茶多酚，茶多糖，茶褐素，咖啡因。各組分占提 取物總重量的重量百分比為
茶多酚12-50%，茶褐素15-25%，咖啡因6_8%，茶多糖15-40%，其中四者重 量百分比之和小于100%。本發(fā)明的普洱茶提取物，制備方法如下取普洱茶，灌組逆流循環(huán)提取，每組由2-5罐組成；每罐沸騰煎煮提取3-8次， 每次加水3-10倍，每次提取時間0. 5-1. 5h ；每罐的第一次提取液進入儲液罐，每罐的后 續(xù)提取液依次作為下一罐的提取溶媒；完成提取的罐添加新的原料后進入循環(huán)，開始新 的提取，提取液過濾提取液60-300目過濾，濾液自然或換熱降溫至30-55 °C，10-30萬分 子量膜過濾，得膜過濾液和膜截留液；將膜截留液濃縮至固含量為5-30%的濃縮液，濃 縮液一次離心，一次離心液二次離心，將膜過濾液和二次離心液單獨或合并濃縮至比重 1. 01-1. 4/55-65°C，濃縮膏干燥。優(yōu)選的制備方法如下取普洱茶，灌組逆流循環(huán)提取，每組由3-4罐組成；每罐沸騰煎煮提取3-5次，每次 加水5-10倍，每次提取時間0. 5-1. 5h ；每罐的第一次提取液進入儲液罐，每罐的后續(xù)提取 液依次作為下一罐的提取溶媒；完成提取的罐添加新的原料后進入循環(huán)，開始新的提取，提 取液過濾提取液60-300目過濾，濾液自然或換熱降溫至30-55°C，10-30萬分子量膜過濾， 得膜過濾液和膜截留液；將膜截留液濃縮至固含量為5-30%的濃縮液，濃縮液用三足離心 機一次離心，一次離心液用管式離心機二次離心，將膜過濾液和二次離心液單獨或合并減 壓，溫度< 70°C濃縮至比重1. 01-1. 4/55-65°C，濃縮膏用微波干燥、真空帶式干燥或噴霧 干燥。本發(fā)明最優(yōu)選的制備方法在本發(fā)明實施例中。本發(fā)明還包括用本發(fā)明的普洱茶提取物制備的藥物組合物，所述藥物組合物是用 上述普洱茶作為藥物活性成分制備成的藥物制劑。本發(fā)明的藥物組合物，根據(jù)需要可以含有藥物可接受的載體，其中普洱茶作為藥 物活性成分，其在制劑中所占重量百分比可以是0. 1-99.9%，其余為藥物可接受的載體。本 發(fā)明的藥物制劑組合物，以單位劑量形式存在，所述單位劑量形式是指制劑的單位，如片劑 的每片，膠囊的每粒膠囊，口服液的每瓶，顆粒劑每袋，注射劑的每支等。本發(fā)明的藥物組合物可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括片劑、糖衣片劑、 薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸 劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜劑、噴霧劑、滴 劑、貼劑。本發(fā)明的藥物組合物，其口服給藥的制劑可含有常用的賦形劑，諸如粘合劑、填充 劑、稀釋劑、壓片劑、潤滑劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑和濕潤劑，必要時可對片劑進行包衣。適用的填充劑包括纖維素、甘露糖醇、乳糖和其它類似的填充劑。適宜的崩解劑包 括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羥基乙酸淀粉鈉。適宜的潤滑劑包括，例如硬 脂酸鎂。適宜的藥物可接受的濕潤劑包括十二烷基硫酸鈉?？赏ㄟ^混合，填充，壓片等常用的方法制備固體口服組合物。進行反復混合可使活 性物質(zhì)分布在整個使用大量填充劑的那些組合物中?？诜后w制劑的形式例如可以是水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑， 或者可以是一種在使用前可用水或其它適宜的載體復配的干燥產(chǎn)品。這種液體制劑可含
6有常規(guī)的添加劑，諸如懸浮劑，例如山梨醇、糖漿、甲基纖維素、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基 纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂肪，乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨醇一油酸酯或阿拉 伯膠；非水性載體(它們可以包括食用油)，例如杏仁油、分餾椰子油、諸如甘油的酯的油性 酯、丙二醇或乙醇；防腐劑，例如對羥基苯甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸，并且如果需 要，可含有常規(guī)的香味劑或著色劑。對于注射劑，制備的液體單位劑型含有本發(fā)明的活性物質(zhì)和無菌載體。根據(jù)載體 和濃度，可以將此化合物懸浮或者溶解。溶液的制備通常是通過將活性物質(zhì)溶解在一種載 體中，在將其裝入一種適宜的小瓶或安瓿前過濾消毒，然后密封。輔料例如一種局部麻醉 齊U、防腐劑和緩沖劑也可以溶解在這種載體中。為了提高其穩(wěn)定性，可在裝入小瓶以后將這 種組合物冰凍，并在真空下將水除去。本發(fā)明的藥物組合物，在制備成藥劑時可選擇性的加入適合的藥物可接受的載 體，所述藥物可接受的載體選自甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽 酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素C、EDTA 二鈉、EDTA鈣鈉，一價堿金屬的碳酸鹽、醋 酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、木糖醇、 麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素及 其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性 劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂等。本發(fā)明的藥物組合物在使用時根據(jù)病人的情況確定用法用量，可每日服三次，每 次1-20劑，如1-20袋或?；蚱?，每劑Img-IOOOmgo以下通過實驗數(shù)據(jù)說明本發(fā)明的有益效果。普洱茶降糖、減肥功能考察實驗1、試驗材料1. 1試驗動物=KKAy小鼠40只，雌性，7-8周齡，級別SPF級，體重33. 5士 1. 9g，由 中國醫(yī)學科學院實驗動物所提供。1. 2試劑與藥品普洱茶提取物(簡稱茶粉)本發(fā)明實施例1，深褐色粉末，溶于水，溶解度好，避光。陽性藥馬來酸羅格列酮片1. 3實驗儀器BI0SEN5030型血糖/乳酸分析儀日立7080全自動生化儀2. 1實驗方法2.1空腹血糖測定方法所有動物均于商務九點開始禁食，禁食4h后取血，取血前Ih各組動物灌胃給藥， 取血時剪尾取末梢血10ul，用BI0SEN5030型血糖/乳糖分析儀測定空腹血糖。2. 2分組及給藥動物適應性喂養(yǎng)一周后按照2. 1方法測定空腹血糖，按照測定的空腹血糖值分層 隨機分組。40只KKAy按照空腹血糖值分層隨機分組，分成4組，模型組，陽性對照組，實驗組。
7
人群使用方案，人群擬使用劑量為3g/人/日，S卩0. 05g/kg/d,使用途徑?jīng)_泡飲用。陽性對照組，每日給藥1次，給藥劑量1. 33mg/kg/日，口服灌胃給藥。試驗組動物供試品飲用量達到1. 5g/kgBff的劑量要求，并以此濃度的普洱茶代 替每日飲用水，連續(xù)給予4周。2. 3試驗步驟2. 3. 1動物體重及進食情況，糞便變化情況觀察動物精神、活動、毛色、進食量、 飲水量及體重變化2. 3. 2空腹血糖測定給藥前及給藥后每周固定時間按照2. 1方法測定空腹血糖。2. 3. 3糖耐量實驗實驗第21天，動物按照2. 1方法測定空腹血糖后，灌服葡萄糖2. 5g/kg，分別于 0. 5h，lh、2h采血測定血糖值，計算曲線下面積(AUC)AUC = 0. 5X空腹血糖+0. 5h血糖 +1. 5Xlh血糖+2h血糖。2. 3. 4血清電解質(zhì)測定實驗第22天時，動物禁食16h后摘眼球取血，分離血清，用XD685電解質(zhì)分析儀測 測定血清K離子、Na離子、Ca離子濃度。2. 3. 5甘油三酯、總膽固醇測定；實驗第29天時，動物禁食16h后摘眼球取血，分離血清，用全自動生化儀測定血清 甘油三酯、總膽固醇含量。3、試驗結(jié)果3. 1動物體重，進食量變化試驗結(jié)果實驗期間試驗動物狀態(tài)良好，進食量、飲水量穩(wěn)定。實驗組按照給藥量1. 5g/kg/日，連續(xù)自由飲用兩周，進食量及體重均變化不大， 各組動物體重，進食量變化結(jié)果見表1，表2。表1動物體重變化情況(g)
權(quán)利要求
一種普洱茶提取物，其特征在于，所述提取物含有的主要活性成分為茶多酚，茶多糖，茶褐素，咖啡因，各組分占提取物總重量的重量百分比為茶多酚12 50％，茶褐素15 25％，咖啡因6 8％，茶多糖15 40％，其中四者重量百分比之和小于100％。
2.權(quán)利要求1的提取物，其特征在于，制備方法如下取普洱茶，灌組逆流循環(huán)提取，每組由2-5罐組成；每罐沸騰煎煮提取3-8次，每次加水 3-10倍，每次提取時間0. 5-1. 5h ；每罐的第一次提取液進入儲液罐，每罐的后續(xù)提取液依 次作為下一罐的提取溶媒；完成提取的罐添加新的原料后進入循環(huán)，開始新的提取，提取液 過濾提取液60-300目過濾，濾液自然或換熱降溫至30-55°C，10-30萬分子量膜過濾，得膜 過濾液和膜截留液；將膜截留液濃縮至固含量為5-30%的濃縮液，濃縮液一次離心，一次 離心液二次離心，將膜過濾液和二次離心液單獨或合并濃縮至比重1. 01-1. 4/55-65°C，濃 縮膏干燥。
3.權(quán)利要求1的提取物，其特征在于，制備方法如下取普洱茶，灌組逆流循環(huán)提取，每組由3-4罐組成；每罐沸騰煎煮提取3-5次，每次加水 5-10倍，每次提取時間0. 5-1. 5h ；每罐的第一次提取液進入儲液罐，每罐的后續(xù)提取液依 次作為下一罐的提取溶媒；完成提取的罐添加新的原料后進入循環(huán)，開始新的提取，提取液 過濾提取液60-300目過濾，濾液自然或換熱降溫至30-55°C，10-30萬分子量膜過濾，得膜 過濾液和膜截留液；將膜截留液濃縮至固含量為5-30%的濃縮液，濃縮液用三足離心機一 次離心，一次離心液用管式離心機二次離心，將膜過濾液和二次離心液單獨或合并減壓，溫 度< 70°C濃縮至比重1. 01-1. 4/55-65°C，濃縮膏用微波干燥、真空帶式干燥或噴霧干燥。
4.權(quán)利要求1的提取物，其特征在于，制備方法如下取普洱茶，灌組逆流循環(huán)提取，每組由3罐組成；每罐沸騰煎煮提取4次，每次加水6 倍，每次提取時間Ih ；每罐的第一次提取液進入儲液罐，每罐的后續(xù)提取液依次作為下一 罐的提取溶媒；完成提取的罐添加新的原料后進入循環(huán)，開始新的提取，提取液過濾提取液 80目過濾，濾液自然降溫至45°C，20萬分子量膜過濾，得膜過濾液和膜截留液；將膜截留 液在溫度< 70°C下減壓濃縮，得固含量為10%的濃縮液，濃縮液用三足離心機進行第一次 離心，第一次離心液再用管式離心機進行第二次離心，將膜過濾液和第二次離心液在溫度 ^ 70°C下合并減壓濃縮，濃縮到60°C測定比重1. 14，噴霧干燥。
5.含有權(quán)利要求1的提取物的藥物組合物。
6.權(quán)利要求5的藥物組合物，根據(jù)需要可以含有藥物可接受的載體，其中普洱茶提取 物作為藥物活性成分，其在制劑中所占重量百分比可以是0. 1-99.9%，其余為藥物可接受 的載體。
7.權(quán)利要求5的藥物組合物，是任何可藥用的劑型。
8.權(quán)利要求1的提取物和權(quán)利要求5的組合物在制備治療糖尿病的和減肥藥物中的應用。
9.權(quán)利要求1的普洱茶提取物中有效成分的含量測定方法，步驟如下茶多酚含量測定方法酒石酸鐵溶液稱取硫酸亞鐵1. 0g，酒石酸鉀鈉5. 0g，加水溶解并定容至IL，PH7. 5的磷酸緩沖液a液l/15mol/L的磷酸氫二鈉溶液稱取磷酸氫二鈉23. 877g，加水溶解并稀釋至IL ； b液l/15mol/L的磷酸二氫鉀溶液稱取經(jīng)110°C烘干2h的磷酸二氫鉀9. 078g，加水 溶解至IL ；取a液85mL和b液15mL混勻，即得ρΗ7· 5的緩汁液； 標準溶液的配制精確稱取沒食子酸乙酯250mg，溶于IOOmL水中作為母液，分別吸取母液2，4，6，8，IOmL 于IOmL容量瓶中，用不定容配制成IOOmL中含沒食子酸乙酯50，100，150，200，250mg五種 不同濃度的標準溶液； 標準工作曲線的制作準確吸取的不同濃度的沒食子酸乙酯標準溶液ImL和酒石酸鐵試劑5mL，置于一系列 25mL的容量瓶中，用pH7. 5的緩沖液定容；用水代替沒食子酸乙酯作為對照，用Icm的比色 杯，在540nm處測定吸光度；所測的吸光度與對應的沒食子酸乙酯濃度繪制成標準工作曲 線.一入 ，供試液的制備與測定制備精確稱取茶提取物200mg樣品置于IOOmL燒杯中，加20 30mL90°C以上的沸水 溶解，冷卻，移入IOOmL容量瓶中，定容、過濾，棄去最初的濾液約20mL，所剩濾液為供試液；測定準確吸取供 試液ImL，置25mL容量瓶中，加酒石酸鐵溶液5ml，充分混勻，用pH7. 5的磷酸緩沖液定容； 以試劑空白液作參比，于540nm處測定吸光度； 結(jié)果計算根據(jù)標準工作曲線，求出相當于試樣吸光度的沒食子酸乙酯相應含量； 茶多糖檢驗方法 供試品溶液的制備取本品粉末約0. 2g，置IOml量瓶中，加水適量，超聲20分鐘溶解，冷卻并加水至刻度， 搖勻；精密量取1ml，置IOOml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液； 對照品溶液的制備取D-無水葡萄糖對照品適量，精密稱定，加水溶解并稀釋制成每Iml中含0. 2mg的溶 液，作為對照品溶液； 標準曲線的繪制分別精密吸取對照品溶液0. 0,0. 1,0. 2,0. 3,0. 4,0. 5ml分別置IOml具塞試管中，分別 加水至1. Oml，各精密加入5 %的苯酚溶液1. Oml，振搖混勻，加5. Oml硫酸，用微型漩渦混合 儀迅速振搖混勻，室溫下放置30分鐘，以第1管為空白，照紫外-可見分光光度法，在487nm 波長處測定吸光度；以吸光度(Y)和質(zhì)量(X)作標準曲線，回歸方程為 供試品溶液的測定精密吸取Iml供試品溶液，按照標準曲線的繪制項下，自“精密加入5%的苯酚溶液 1. 0ml”起，同法操作，在487nm處分別測定吸光度；計算含量；茶黃素、茶紅素和茶褐素含量測定方法供試液制備準確稱取0. 05-lg粉末，加入沸水125ml，搖勻后在沸水浴中浸提10分 鐘，浸提中搖瓶一次，浸提完畢后，取出搖勻，趁熱用棉花過濾于干燥的三角燒瓶中，濾液浸 放在冷水中冷至室溫后，即可進行萃取和分光光度測定；萃取搖勻供試液，吸取25ml放在 60ml分液漏斗中，加入25ml醋酸乙酯，以大致每秒鐘二次的速度振搖5分鐘，靜止分層，分 別放出水層而將醋酸乙酯層倒入具塞三角瓶中待用；吸取醋酸乙酯層溶液2ml，放在25ml容量瓶中，加入95 %乙醇稀釋至25ml，搖勻為溶 液A ；吸取醋酸乙酯層溶液IOml放在30ml分液漏斗中，加入2. 5% NaHC03水溶液10ml，振 搖30秒鐘；靜置分層后，立即放出NaHC03水層溶液并棄去，小心地把醋酸乙酯層溶液倒入 具塞試管中，取該醋酸乙酯層溶液4ml，放在25ml容量瓶中，加95 %乙醇稀釋至25ml，搖勻 為溶液C ；吸取第一次用醋酸乙酯萃取所分出的水層溶液2ml，放在25ml容量瓶中，加入2ml飽和 草酸溶液和6ml蒸餾水，并用95%乙醇稀釋至25ml，搖勻后溶液D ；吸取茶湯供試液IOml，放在30ml分液漏斗中，加入IOml正丁醇，振搖3分鐘，靜置慢慢 分層后，放出下面的水層；吸取該水層溶液2ml，放在25ml容量瓶中，加入2ml飽和草酸和 6ml蒸餾水，并用95%乙醇稀釋至25ml，搖勻為溶液B ； 比色測定選擇380nm波長，用Icm比色杯，以95%乙醇作空白對照，分別測定A、B、C、D溶液的光 密度E ；計算含量。
10.權(quán)利要求1的普洱茶提取物的制備方法，步驟如下取普洱茶，灌組逆流循環(huán)提取，每組由3罐組成；每罐沸騰煎煮提取3次，每次加水5 倍，每次提取時間0. 5h ；每罐的第一次提取液進入儲液罐，每罐的后續(xù)提取液依次作為下 一罐的提取溶媒；完成提取的罐添加新的原料后進入循環(huán)，開始新的提取。提取液過濾提取 液60目過濾，濾液自然降溫至30°C，10萬分子量膜過濾，得膜過濾液和膜截留液；將膜截留 液在溫度< 70°C下減壓濃縮，得固含量為5%的濃縮液，濃縮液用三足離心機進行第一次 離心，第一次離心液再用管式離心機進行第二次離心，將膜過濾液和第二次離心液在溫度 ^ 70°C下合并減壓濃縮，濃縮到60°C測定比重1. 01，噴霧干燥。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種中藥提取物及其制備，特別涉及普洱茶的提取物及其制備，其中制備方法包括灌組逆流提取，膜過濾和離心等技術(shù)手段。
文檔編號A61P3/04GK101961424SQ20091006987
公開日2011年2月2日 申請日期2009年7月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月24日
發(fā)明者劉順航, 范開, 閆希軍, 馬繼忠, 黃松 申請人:天津天士力現(xiàn)代中藥資源有限公司