專利名稱：芒果葉苷及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從芒果葉中分離提取的化合物及其制備方法與應(yīng)用，尤其是芒果葉苷
及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
芒果葉(Mango Leaf)為漆樹科植物芒果Mangifera indica L.的葉。中醫(yī)認(rèn)為芒果甘酸、平、無毒。入肝、脾經(jīng)。能益胃生津、止渴、止嘔、利尿，適用于口渴咽干、胃氣虛弱、眩暈嘔逆?！妒承员静荨酚涊d芒果"主婦人經(jīng)脈不通"；《本草綱目拾遺》指出芒果"凡渡海者，食之不嘔浪"；"能益胃氣，故能止嘔暈"。芒果葉的應(yīng)用始見于《嶺南采藥錄》?！蛾懘ū静荨?、《南寧市藥物志》(1959年，第一輯)和《全國中草藥匯編》對芒果葉也有相應(yīng)記載，但均附錄于芒果項(xiàng)下。而單獨(dú)將芒果葉作為中藥記載則始于1977年的《中藥大辭典》。據(jù)《廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)》記載性味酸、甘、涼，平，具有行氣疏滯，祛痧積的功能，用于熱滯腹痛，氣脹，小兒疳積，消渴等證。在我國，芒果分布于臺灣、廣東、廣西、海南、福建、云南、以及四川等省及自治區(qū)，藥材資源非常豐富。 芒果葉的化學(xué)成分包括抗壞血酸、鞣質(zhì)、芒果苷、及鞣花酸、兒茶酚、莽草酸、奎尼酸、山奈醇、側(cè)柏烯等多種成分。以往的藥理學(xué)研究表明，芒果葉提取物具有平喘止咳祛痰作用。1973年廣西中醫(yī)學(xué)院將芒果葉開發(fā)成為芒果止咳片；1998年被列為國家中藥保護(hù)品種；同年又被列為國家基本藥物。芒果葉中的代表成分芒果苷(mangiferin)具有抗脂質(zhì)過氧化、免疫、抗炎、鎮(zhèn)痛、保肝利膽、抗病毒、抗腫瘤、中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮等作用。
a -葡萄糖苷酶(a -glucosidase)存在于人體小腸刷狀緣上，參與人體糖的代謝，對維持人體正常生理功能起著重要作用。a-葡萄糖苷酶通過水解a-l，4糖苷鍵從淀粉和多糖的非還原端切下葡萄糖，人體對淀粉、糊精、蔗糖等碳水化合物的利用吸收依賴于小腸刷狀緣上該酶的活性，a -葡萄糖苷酶抑制劑是臨床上治療糖尿病的一種藥物，目前主要來源于微生物代謝產(chǎn)物，如阿卡波糖(acarbose，商品名拜糖平)、伏格列波糖(voglibose，商品名倍欣)、米格列醇(miglitol)等，臨床證明阿卡波糖、伏格列波糖等治療II型糖尿病有明顯的降低餐后高血糖效果，是較好的治療糖尿病藥物，可見a-葡萄糖苷酶抑制劑能夠有效可逆性競爭抑制小腸壁刷狀緣上a-葡萄糖苷酶的活性，從而明顯延緩和阻礙碳水化合物的降解和在消化道的吸收速度，延遲來自雙糖、低聚糖及多糖的葡萄糖吸收，有效推遲并減輕糖尿病人餐后血糖升高的時(shí)間及進(jìn)程，有助于控制2型糖尿病的血糖上升。因此從天然產(chǎn)物中尋找安全性高的a-葡萄糖苷酶抑制劑來降低血糖是現(xiàn)階段一個(gè)新的研究方向。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供從芒果葉中提取分離的新化合物芒果葉苷。
本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供上述芒果葉苷的制備方法。
本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供上述芒果葉苷的應(yīng)用。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是 本發(fā)明人對芒果葉進(jìn)行系統(tǒng)的植物化學(xué)成分的分離，得到化合物芒果葉苷，
foliamangiferosides，具有下述結(jié)構(gòu)通式(I)，其中R為-H或-0CH3。 芒果苷葉A的物理化學(xué)性質(zhì)淡黃色粉末，[a]D25+21.6° (濃度2. 91，甲醇)。高分辨電噴霧質(zhì)譜數(shù)據(jù)理論值C2。H2A。(M-H)421. 1140 ;實(shí)測值421. 1149。紅外光譜(溴化鉀，cm-l) :3281,2924,2855， 1653， 1622， 1558， 1459， 1085， 1017。氫i普(400兆赫，重二甲基亞砜)3. 21(2H，多重峰，重疊，l" -H禾口5" -H)，3. 22(1H，多重峰，3" -H) ， 3. 49 (1H，多重峰，重疊，2" -H)， [3. 49(1H，多重峰，重疊)，3. 59(1H，寬二重峰，J = 11Hz)，6" -H2]，3. 69(3H，單峰，4-0CH3) ，4. 62(1H， 二重峰，J = 9. 6Hz， 1 〃 -H)，6.06(1H，單峰，5-H)，6. 79(2H，二重峰，J = 8. 4Hz，3' ，5' -H) ， 7. 59 (2H， 二重峰，J = 8. 4Hz， 2' ，6' -H)。碳譜(100兆赫，重二甲基亞砜)109. 0 (C-l) ， 155. 7 (C-2) ， 104. 6 (C-3) ， 159. 5 (C-4) ，91.4 (C-5)，156. 4(C-6) ， 130. 2(C-l' )，131.7(C—2' )，114. 9(C—3' )，161.9(C—4' )，114. 9(C—5')，131.7(C-6' )，74.7(C-l〃 )，71.9(C—2" ) ， 78. 2 (C—3 〃 )，69.5(C—4" )，81.1(C—5")，60.3(C-6〃 ) ， 193. 8(C = 0) ，55. 6(0CH3-3')。
當(dāng)R為-0CH3時(shí)，芒果葉苷B，結(jié)構(gòu)式為 芒果苷葉B的物理化學(xué)性質(zhì)淡黃色粉末，[a]D25+2. 5° (濃度0. 67，甲醇)。高分辨電噴霧質(zhì)譜數(shù)據(jù)理論值(^H^n(M-H) 二451. 1246 ;實(shí)測值451. 1246。紅外光譜(溴化鉀，cm-l) :3281,2922,2852， 1650， 1626， 1560， 1464， 1081。氫譜(400兆赫，重二甲基亞砜):3. 21(3H，多重峰，重疊，3" ，4〃以及5" -H) ， [3. 53 (1H， m，重疊)，3. 60 (1H，
(I ) 當(dāng)R為-H時(shí)，為芒果葉苷A，結(jié)構(gòu)式為
<formula>formula see original document page 5</formula>寬二重峰，ca. J = llHz)，6 〃 -H2]，3. 55(1H， m，重疊，2 〃 _H) ， 3. 70 (3H， s，4-0CH3)，
3. 79(3H，s，3' -0CH3) ，4. 63(1H，二重峰，J = 9. 6Hz， 1〃 _H) ，6. 79(1H，二重峰，J = 8. 0Hz，
5' -H) ，7. 16(1H，寬二重峰，ca. J = 8Hz，6 ' _H) ， 7. 35 (1H，寬s， 2 ' _H). 13C-NMR(100
兆赫，重二甲亞砜)108. 9(C-1) ， 155. 6(C-2) ， 104. 4(C-3) ， 159. 3(C-4) ，91. 3(C-5)，
156. 4(C-6) ， 130. 2(C-1' )，111.5(C_2' )，147.3(C_3' )，151.6(C_4' )，114.6(C_5')，
124.9(C-6' )，74.6(C-1〃 )，71.8(C_2〃 )，78.0(03〃 )，69.3(C_4〃 )，80.9(05〃 )，
60.2(C-6〃 ) ， 193. 6(C = 0). 55. 5(0CH3-3' ， 0CH3-4) 芒果葉苷A和芒果葉苷B可以用下述方法制備 (1)芒果葉先用50% _95%的乙醇或甲醇水溶液提??； (2)提取液回收醇后用與水不互溶的有機(jī)溶劑除去雜質(zhì)； (3)萃取后水溶液上大孔吸附樹脂富集，50% -95%乙醇洗脫； (4)洗脫物用正反相硅膠層析得芒果葉苷化合物。 本發(fā)明公開了上述芒果葉苷在抑制a -葡萄糖苷酶活性方面的應(yīng)用。 優(yōu)選的，本發(fā)明公開了上述芒果葉苷在制備用于治療糖尿病的藥物中的應(yīng)用。 包含芒果葉苷的芒果葉提取物，所述提取物可用下述方法得到 (1)芒果葉用水或一定濃度的乙醇溶液提?。? (2)提取液回收乙醇后轉(zhuǎn)到水相； (3)水溶液上大孔吸附樹脂，棄去流出液，用50% _95%乙醇洗脫；
(4)醇洗脫液回收溶劑并蒸干即得。
包含芒果葉苷的芒果葉提取物的制備方法，具體步驟如下
(1)芒果葉用水或一定濃度的乙醇溶液提?。?br> (2)提取液回收乙醇后轉(zhuǎn)到水相； (3)水溶液上大孔吸附樹脂，棄去流出液，用50% _95%乙醇洗脫；
(4)醇洗脫液回收溶劑并蒸干即得。
優(yōu)選的，包含芒果葉苷的芒果葉提取物也可以用下述方法制備
(1)芒果葉用水或一定濃度的乙醇溶液提?。?br> (2)提取液回收乙醇后轉(zhuǎn)到水相； (3)水溶液上大孔吸附樹脂，棄去流出液，先用10-25 %的低濃度乙醇預(yù)洗脫，棄
去，然后用50% _95%乙醇洗脫； (4)醇洗脫液回收溶劑并蒸干即得。 本發(fā)明公開了包含芒果葉苷的芒果葉提取物在抑制a -葡萄糖苷酶活性方面的應(yīng)用。 優(yōu)選的，本發(fā)明公開了包含芒果葉苷的芒果葉提取物在制備用于治療糖尿病的藥物中的應(yīng)用。 上述芒果葉苷的藥物組合物，包含治療和/或預(yù)防有效量的芒果葉苷或包含芒果
葉苷的芒果葉提取物以及任選的藥學(xué)可接受的賦形劑。 本發(fā)明的有益效果是 通過從芒果葉中分離提取，發(fā)現(xiàn)了新的化合物芒果葉苷，該化合物為首次發(fā)現(xiàn)，并且a-葡萄糖苷酶活性抑制實(shí)驗(yàn)表明所述芒果葉苷具有很強(qiáng)的抑制a-葡萄糖苷酶活性的作用，含有該化合物的芒果葉提取物也顯現(xiàn)出強(qiáng)的抑制a-葡萄糖苷酶活性的作用，從 而有望用于制備治療糖尿病的藥物，進(jìn)而達(dá)到對于糖尿病的治療目的。
具體實(shí)施例方式
為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員更好的理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合
具體實(shí)施例方式
對本發(fā)明所述技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。 實(shí)施例1 活性成分單體芒果葉苷A的制備 芒果葉(5kg)用9倍量的乙醇回流提取2次，每次3小時(shí)，合并濾液，回收溶劑后 真空干燥箱(50°C )干燥，得提取物1. 163kg。 取上述提取物600g，加5L蒸餾水溶解，用乙酸乙酯(5L)萃取三次，分別得到乙 酸乙酯層和水層；水層部分含大量沉淀，取水層混懸液體積的4/5，減壓濃縮至2L，離心，過 濾，上清液經(jīng)過大孔吸附樹脂處理(H20 — 95% EtOH)，得到95%乙醇洗脫物84g。
取上述95X乙醇洗脫物72g，進(jìn)行硅膠柱層析氯仿-甲醇(10 : 1 — 5 : 1)—氯
仿-甲醇-水(7 :3:i — 6:4: i，下層)一甲醇，得到9個(gè)組分，其中組分6為9. og ;取
其中的7. Og進(jìn)行反相ODS柱層析甲醇-水(10%—20% —30% —40% —50%— 100%)， 得到7個(gè)組分，組分6-2， 6-3以及6-4分別為4. 9g， 0. 2g以及0. 6g ;組分6-2經(jīng)制備型高效 液相進(jìn)行制備色譜條件泵k-501 ;檢測器Waters 2487 ;溫度室溫；色譜柱Cosmosil packedcol醫(yī)5C18-MS-II (Size 20 LD.X250mm);流動相MeOH : H20(20 : 80)+1 % HAc ;流速9. Oml/min，得到一單體化合物，經(jīng)鑒定為新化合物芒果葉苷A。
芒果苷葉A的物理化學(xué)性質(zhì)淡黃色粉末，[a]D25+21.6° (濃度2. 91，甲醇)。 高分辨電噴霧質(zhì)譜數(shù)據(jù)理論值C2。^(V(M-H) 421. 1140 ;實(shí)測值421. 1149。紅外光譜(溴 化鉀，cm-l) :3281,2924,2855， 1653， 1622， 1558， 1459， 1085， 1017。氫i普(400兆赫，重二甲 基亞砜)3. 21(2H，多重峰，重疊，l" -H和5" -H)，3. 22(1H，多重峰，3" -H) ， 3. 49 (1H，多 重峰，重疊，2" -H)， [3. 49(1H，多重峰，重疊)，3. 59(1H，寬二重峰，J= 11Hz)，6" -H2]， 3. 69(3H，單峰，4-0CH3) ，4. 62(1H， 二重峰，J = 9. 6Hz， 1 〃 -H) ，6. 06(1H，單峰，5-H)， 6. 79(2H，二重峰，J = 8. 4Hz，3' ，5' -H) ， 7. 59 (2H， 二重峰，J = 8. 4Hz， 2' ，6' -H)。碳譜 (100兆赫，重二甲基亞砜)109. 0 (C-l) ， 155. 7 (C-2) ， 104. 6 (C-3) ， 159. 5 (C-4) ，91.4 (C-5)， 156. 4(C-6) ， 130. 2(C-l' )，131.7(C—2' )，114. 9(C—3' )，161.9(C—4' )，114. 9(C—5')， 131.7(C-6' )，74.7(C-l〃 )，71.9(C—2" ) ， 78. 2 (C—3 〃 )，69.5(C—4" )，81.1(C—5")， 60.3(C-6〃 ) ， 193. 8(C = 0) ，55. 6(0CH3-3')。
根據(jù)芒果葉苷A的理化性質(zhì)判斷其結(jié)構(gòu)如下所示
<formula>formula see original document page 7</formula>
該化合物未見文獻(xiàn)報(bào)道，為首次分離得到。
實(shí)施例2 活性成分單體芒果葉苷B的制備 芒果葉(5kg)用9倍量的乙醇回流提取2次，每次3小時(shí)，合并濾液，回收溶劑；用 真空干燥箱(50°C )干燥，得浸膏1. 163kg。 取上述浸膏600g，加5L蒸餾水溶解，用乙酸乙酯(5L)萃取三次，分別得到乙酸乙 酯層和水層；水層部分含大量沉淀，取水層混懸液體積的4/5，減壓濃縮至2L，離心，過濾， 上清液經(jīng)過大孔吸附樹脂處理(H20 — 95% EtOH)，得到95%乙醇洗脫物84g。
取上述95X乙醇洗脫物72g，進(jìn)行硅膠柱層析氯仿-甲醇(10 : 1 — 5 : 1)—氯
仿-甲醇-水(7 :3:i — 6:4: i，下層)一甲醇，得到9個(gè)組分，其中組分6為9. og ;取
其中的7. Og進(jìn)行反相ODS柱層析甲醇-水(10%—20% —30% —40% —50%— 100%)， 得到7個(gè)組分，組分6-2， 6-3以及6-4分別為4. 9g， 0. 2g以及0. 6g ;組分6-4，經(jīng)制備型高效 液相進(jìn)行制備色譜條件泵k-501 ;檢測器Waters 2487 ;溫度室溫；色譜柱Cosmosil packedcolumn 5C18-MS-II (Size 20 I. D. X 250mm);流動相MeOH : H20(30 : 70)+l% HAc以及MeOH : H20(20 : 80);流速9. Oml/min得到了一單體化合物，根據(jù)其理化性質(zhì) 以及核磁共振數(shù)據(jù)推知該化合物為一新化合物，命名為芒果葉苷B。 芒果苷葉B的物理化學(xué)性質(zhì)淡黃色粉末，[a ]D25+2. 5° (濃度0. 67，甲醇)。 高分辨電噴霧質(zhì)譜數(shù)據(jù)理論值(^H^n(M-H) 451. 1246 ;實(shí)測值451. 1246。紅外光譜 (溴化鉀，cm-l) :3281,2922,2852， 1650， 1626， 1560， 1464， 1081。氫譜(400兆赫，重二 甲基亞砜):3. 21(3H，多重峰，重疊，3" ，4〃以及5" _H) ， [3. 53 (1H， m，重疊)，3. 60 (1H， 寬二重峰，ca. J = 11Hz) ，6 〃 -H2] ，3. 55(1H， m，重疊，2 〃 _H) ， 3. 70 (3H， s，4-OCH3)， 3. 79(3H，s，3' -OCH3) ，4. 63(1H，二重峰，J = 9. 6Hz， 1〃 _H) ，6. 79(1H，二重峰，J = 8. 0Hz， 5' -H) ，7. 16(1H，寬二重峰，ca. J = 8Hz，6 ' _H) ， 7. 35 (1H，寬s， 2 ' _H). 13C-NMR(100 兆赫，重二甲亞砜)108. 9(C-1) ， 155. 6(C-2) ， 104. 4(C-3) ， 159. 3(C-4) ，91. 3(C-5)， 156. 4(C-6) ， 130. 2(C-1' )，111.5(C_2' )，147.3(C_3' )，151.6(C_4' )，114.6(C_5')， 124. 9 (C—6' )，74.6(C—1〃 )，71.8(C—2〃 ) ， 78. 0 (C—3 〃 )，69.3(C—4〃 )，80.9(C—5〃 )， 60. 2(C-6 〃 ) ，193. 6(C = 0) 55. 5(0CH3-3' ， 0CH3-4)
根據(jù)芒果葉苷B的物理化學(xué)性質(zhì)判斷其結(jié)構(gòu)如下所示
芒果葉苷B化合物未見文獻(xiàn)報(bào)道，為首次分離得到。
實(shí)施例3 本發(fā)明所述化合物降血糖作用實(shí)驗(yàn)研究 a -葡萄糖苷酶抑制活性研究方法——取200gWistar雄性大鼠，斷頭處死后摘除 空腸，刮下刷子緣絨毛膜，混合于O. 1M馬來酸緩沖液(p朋.O)中，混合液作為a-葡萄糖苷 酶粗酶使用；在74mM蔗糖基質(zhì)溶液lOOuL中加入溶解于2. 5%匿SO樣品溶液50uL，加入大鼠小腸a _葡萄糖苷酶溶液50uL，37度反應(yīng)30分鐘后，加入800uL水，放入沸水浴中加熱 2分鐘滅活，用葡萄糖試劑盒測定葡萄糖生成量。
樣品組溶液配制 將0. 1M馬來酸水溶液與0. 1M馬來酸鈉混合，調(diào)至p朋.0，為0. 1M馬來酸緩沖液；
樣品溶解于匿S0溶液中，用0. 1M馬來酸緩沖液稀釋IO倍，作為樣品溶液使用。 其中，樣品組為按照以上實(shí)驗(yàn)方法添加樣品實(shí)驗(yàn)組(樣品為芒果葉苷A、芒果葉
苷B);對照組為按照以上實(shí)驗(yàn)方法添加2. 5%匿S0實(shí)驗(yàn)組；空白組為與樣品組使用試劑
種類與用量相同，加入大鼠小腸a-葡萄糖苷酶溶液50uL后馬上加入800uL水，放入沸水
浴中加熱2分鐘滅活。 抑制率(％ ) = (A-B)/(A_C)*100 其中A為對照組吸收度，B為樣品組吸收度；C為空白組吸收度。
芒果葉苷A及芒果葉苷B對小腸a-葡萄糖苷酶的抑制率
芒果葉苷A芒果葉苷B濃度(uM)空白組樣品組水抑制空白組樣品組水抑制
水解出葡解出葡萄率水解出葡解出葡萄率
萄糖濃度糖濃度萄糖濃度糖濃度
(mg/dl )(mg/dl)(mg/dl)'(mg/dl )
01.086.100.0%0.956,210.0%
501.005.2315.8%1.005.2319.6%
1000.644.6420.2%0.644.6423,9%
2000.424.1226.2%0.424.1229.6%
4000.993.0958.2%0.853.7145.6% 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明 在400uM濃度下，芒果葉苷A及芒果葉苷B抑制率分別為58. 2%和45. 6% ，明能
有效抑制小腸a-葡萄糖苷酶催化下蔗糖轉(zhuǎn)化為葡萄糖。 實(shí)施例4 芒果葉中芒果苷A和芒果苷B的含量測定 儀器設(shè)備及色譜方法 高效液相色譜儀waters 600 檢測器Waters 2487紫外檢測器 色譜柱Cosmosil packed column 5C18-MS-II (5um， 4. 6X 250mm) 流動相甲醇_1%醋酸水溶液(3 : 7) 檢測波長254nm 流速0. 8ml/min
9
對照品制備取實(shí)施例1中芒果葉苷A質(zhì)量1.8mg，實(shí)施例2中芒果葉苷B質(zhì)量 2. 3mg，置10ml容量瓶中，甲醇溶解至刻度。樣品制備取090722批次芒果葉分別500mg置25ml具塞錐形瓶中，加入50ml甲 醇后稱重，超聲30min提取，甲醇補(bǔ)足重量，得樣品液。
檢測結(jié)果 標(biāo)準(zhǔn)品液和樣品液分別進(jìn)樣10微升，計(jì)算芒果葉中芒果葉苷A和B的含量分別為 0. 20%和0. 0013%。
實(shí)施例5 含有芒果葉苷A和芒果葉苷B的芒果葉提取物的制備 芒果葉(5kg)用9倍量的80%乙醇回流提取2次，每次3小時(shí)，合并濾液，回收溶 劑后加水至10000ml，冷藏過夜；取上清液上預(yù)處理好的大孔吸附樹脂處理，流出液棄去， 先用2BV(BV =柱體積)水沖洗，然后用95%乙醇洗脫，醇洗脫液回收乙醇至盡真空干燥得 芒果葉提取物。批號090822
實(shí)施例6 含有芒果葉苷A和芒果葉苷B的芒果葉提取物的制備 芒果葉(5kg)用9倍量的80%乙醇回流提取2次，每次3小時(shí)，合并濾液，回收溶
劑后加水至10000ml，冷藏過夜；取上清液上預(yù)處理好的大孔吸附樹脂處理，流出液棄去，
先用2BV(BV =柱體積)水沖洗，再用2BV20X乙醇預(yù)洗脫，棄去；然后用80%乙醇洗脫，醇
洗脫液回收乙醇至盡真空干燥得芒果葉提取物。批號090902 實(shí)施例7 芒果降糖口服液的制備 將芒果葉提取物2g加入400毫升蒸餾水中溶解，濾過，加入適量單糖漿、苯甲酸 鈉，再加蒸餾水至1000毫升，冷藏，濾過，封裝于10毫升安瓿中，IO(TC滅菌30分鐘，即得。
實(shí)施例8
芒果降糖片的制備 取芒果葉提取物4g粉碎后，加入淀粉100g、乳糖50g、適量乙基纖維素、交聯(lián)聚維
酮，用50 % -95 %的乙醇制顆粒，干燥后，整粒，加入剩余量的交聯(lián)聚維酮及硬酯酸鎂，壓
片，即得。 實(shí)施例9 芒果降糖膠囊的制備 將芒果葉提取物4g粉碎后，加入適量硬酯酸鎂，灌膠囊，即得。 實(shí)施例10 芒果降糖片的制備 取芒果葉苷A 0.5g，加入淀粉100g、乳糖50g、適量乙基纖維素、交聯(lián)聚維酮，用
50%-95%的乙醇制顆粒，干燥后，整粒，加入剩余量的交聯(lián)聚維酮及硬酯酸鎂，壓片，即得。 實(shí)施例11 芒果降糖膠囊的制備 將芒果苷B 0.5g，加入半乳糖100g、適量硬酯酸鎂，裝入2號膠囊，即得。
有益效果分析
10
本發(fā)明中所述a -葡萄糖苷酶(a -glucosidase)存在于人體小腸刷狀緣上，參與 人體糖的代謝，對維持人體正常生理功能起著重要作用。a-葡萄糖苷酶通過水解a_l，4 糖苷鍵從淀粉和多糖的非還原端切下葡萄糖，人體對淀粉、糊精、蔗糖等碳水化合物的利用 吸收依賴于小腸刷狀緣上該酶的活性，a-葡萄糖苷酶抑制劑是臨床上治療糖尿病的一種 藥物，治療II型糖尿病有明顯的降低餐后高血糖效果，是較好的治療糖尿病藥物；a -葡萄 糖苷酶抑制劑可逆性競爭抑制小腸壁刷狀緣上a _葡萄糖苷酶的活性，從而明顯延緩和阻 礙碳水化合物的降解和在消化道的吸收速度，延遲來自雙糖、低聚糖及多糖的葡萄糖吸收， 有效推遲并減輕糖尿病人餐后血糖升高的時(shí)間及進(jìn)程，有助于控制2型糖尿病的血糖上升。 a-糖苷酶抑制劑主要適用于以餐后血糖升高為主的2型糖尿病患者，尤其是肥
胖者及老年人，對于空腹、餐后血糖均升高的患者，可與其他口服降糖藥或胰島素合用；并
且能降低糖耐量低減患者向糖尿病轉(zhuǎn)化的風(fēng)險(xiǎn)，故可用于對糖耐量低減患者的干預(yù)治療；
2型糖尿病患者服用磺脲類或雙胍類降糖藥效果不佳，尤其是餐后血糖控制不理想，可以加
用a-糖苷酶抑制劑；用于單純飲食治療血糖得不到滿意控制的糖尿病患者，特別是肥胖
者更為適宜；對于1型糖尿病患者，a -糖苷酶抑制劑可作為胰島素的輔助治療藥物。
a -糖苷酶抑制劑幾乎不被腸道吸收入血，對肝、腎功能影響甚微，幾乎沒有全身
副作用，對碳水化合物的消化和吸收只是延緩而不是完全阻斷，最終對碳水化合物的吸收
總量不會減少，因此不會導(dǎo)致熱量丟失；不抑制蛋白質(zhì)和脂肪的吸收，故通常不會引起營養(yǎng)
物質(zhì)的吸收障礙。 本發(fā)明通過對從芒果葉中分離得到的化合物芒果葉苷，尤其是芒果葉苷A和芒果 葉苷B均為首次發(fā)現(xiàn)的新化合物，體外a-糖苷酶抑制活性研究表明其具有很強(qiáng)的抑制 a _葡萄糖苷酶活性的作用，含有該化合物的芒果葉提取物也顯現(xiàn)出強(qiáng)的抑制a -葡萄糖 苷酶活性的作用，從而有望用于制備治療糖尿病的藥物，進(jìn)而達(dá)到對于糖尿病的治療目的。
上述參照具體實(shí)施方式
對該芒果葉苷及其制備方法與應(yīng)用進(jìn)行的詳細(xì)描述，是說 明性的而不是限定性的，可按照所限定范圍列舉出若干個(gè)實(shí)施例，因此在不脫離本發(fā)明總 體構(gòu)思下的變化和修改，應(yīng)屬本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
芒果葉苷，其特征在于具有下述結(jié)構(gòu)通式(I)，其中R為-H或-OCH3。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芒果葉苷，其特征在于當(dāng)R為-H時(shí)，為芒果葉苷A，結(jié)構(gòu)式為<formula>formula see original document page 2</formula>
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芒果葉苷，其特征在于當(dāng)R為-0CH3時(shí)，為芒果葉苷B，結(jié)構(gòu)式為<formula>formula see original document page 2</formula>
4. 權(quán)利要求1-3之一所述的芒果葉苷的制備方法，其特征在于(1) 芒果葉先用50% _95%的乙醇或甲醇水溶液提??；(2) 提取液回收醇后用與水不互溶的有機(jī)溶劑除去雜質(zhì)；(3) 萃取后水溶液上大孔吸附樹脂富集，50% -95%乙醇洗脫；(4) 洗脫物用正相以及反相硅膠層析得芒果葉苷化合物。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1-3之一所述的芒果葉苷在制備用于治療糖尿病的藥物中的應(yīng)用。
6. 包含權(quán)利要求l-3所述的芒果葉苷的芒果葉提取物，其特征在于所述提取物用下述方法得到(1) 芒果葉用水或一定濃度的乙醇溶液提取；(2) 提取液回收乙醇后轉(zhuǎn)到水相；(3) 水溶液上大孔吸附樹脂，棄去流出液，用50% _95%乙醇洗脫；(4) 醇洗脫液回收溶劑并蒸干即得。
7. 包含上述芒果葉苷的芒果葉提取物的制備方法，其特征在于具體步驟如下(1) 芒果葉用水或一定濃度的乙醇溶液提?。?2) 提取液回收乙醇后轉(zhuǎn)到水相；(3) 水溶液上大孔吸附樹脂，棄去流出液，用50% _95%乙醇洗脫；(4)醇洗脫液回收溶劑并蒸干即得。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的芒果葉提取物的制備方法，其特征在于步驟(3)水溶液上 大孔吸附樹脂后先用10% _25%的乙醇預(yù)洗脫。
9. 權(quán)利要求6所述的包含芒果葉苷的芒果葉提取物在制備用于治療糖尿病的藥物中 的應(yīng)用。
10. 包含上述芒果葉苷的藥物組合物，其特征在于由治療和/或預(yù)防有效量的芒果葉 苷或包含芒果葉苷的芒果葉提取物以及任選的藥學(xué)可接受的賦形劑組成。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有結(jié)構(gòu)通式(I)的芒果葉苷新化合物，其中R＝H時(shí)為芒果葉苷A，R＝-OCH3時(shí)為芒果葉苷B；本發(fā)明還涉及該化合物的制備方法，該化合物為活性成分的藥物組合物，以及本發(fā)明化合物和藥物組合物在抑制α-葡萄糖苷酶活性方面的用途，進(jìn)一步表明其具有在制備用于治療糖尿病的藥物中的應(yīng)用價(jià)值。
文檔編號A61K31/7034GK101693730SQ20091007084
公開日2010年4月14日 申請日期2009年10月16日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月16日
發(fā)明者劉二偉, 張祎, 王濤, 葛丹丹, 韓立峰, 高秀梅 申請人:天津中醫(yī)藥大學(xué);