專利名稱：一種醋酸奧曲肽注射液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，本發(fā)明公開(kāi)了一種注射液及其制備方法。

背景技術(shù)：
奧曲肽是人工合成的天然生長(zhǎng)抑素的八肽衍生物，其化學(xué)名為D-苯丙氨酰-L-半胱氨酰-L-苯丙氨酰-D-色氨酰-L-賴氨酰-L-蘇氨酰-L-半胱氨酰-L-蘇氨醇環(huán)2→7)二硫化物，其藥理作用與生長(zhǎng)抑素相似但作用持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)。它抑制生長(zhǎng)激素(GH)和胃腸胰(GEP)內(nèi)分泌系統(tǒng)肽的病理性分泌增加。
在動(dòng)物體內(nèi)，奧曲肽在抑制生長(zhǎng)激素、胰高血糖素和胰島素釋放方面比生長(zhǎng)抑素更強(qiáng)，而且對(duì)生長(zhǎng)激素和胰高血糖素選擇性更高。
奧曲肽對(duì)健康受試者表現(xiàn)出如下的抑制作用抑制精氨酸、運(yùn)動(dòng)或胰島素誘發(fā)的低血糖癥引起的生長(zhǎng)激素的釋放；抑制餐后胰島素、胰高血糖素、胃泌素和GEP系統(tǒng)其它肽類的釋放以及精氨酸引起的胰島素和胰高血糖素的釋放；抑制由促甲狀腺素釋放激素(TRH)引起的促甲狀腺素(TSH)的釋放。與生長(zhǎng)抑素相比，奧曲肽對(duì)生長(zhǎng)激素分泌的抑制比對(duì)胰島素分泌的抑制更強(qiáng)，而且不引起激素的反彈性高分泌(例如肢端肥大癥中的生長(zhǎng)激素)。對(duì)肢端肥大癥患者，奧曲肽可以降低血漿生長(zhǎng)激素和胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)的濃度。幾乎90％的病人其血漿水平下降50％或更多，且半數(shù)病例生長(zhǎng)激素降至5ng/ml以下。多數(shù)病人的臨床癥狀有明顯減輕，如頭痛，皮膚增厚，軟組織水腫，多汗，關(guān)節(jié)疼痛和感覺(jué)異常等。此外，奧曲肽可使垂體大腺瘤病人的瘤體縮小。對(duì)GEP內(nèi)分泌系統(tǒng)功能性腫瘤患者，奧曲肽通過(guò)其廣泛的活性使多種臨床癥狀得到改善。對(duì)曾接受過(guò)手術(shù)、肝動(dòng)脈栓塞、化療(鏈脲霉素或5-氟尿嘧啶等)后仍有與腫瘤相關(guān)的嚴(yán)重癥狀者，奧曲肽可起到良好的改善作用。
目前臨床使用的奧曲肽商品名為善寧，為奧曲肽的醋酸鹽注射液，并在其中加入了乳酸、甘露醇作為賦形劑，苯酚作為抑菌劑，由于中國(guó)藥典規(guī)定靜脈用注射液不能加入抑菌劑，所以善寧的生產(chǎn)廠家諾華公司又對(duì)配方進(jìn)行了改進(jìn)，利用乳酸、甘露醇為輔料得到了奧曲肽醋酸鹽注射液，雖然此注射液的穩(wěn)定性較好(避光2～8C可以保存5年)，但常溫下只能保存兩周，很不穩(wěn)定，不利于儲(chǔ)存和運(yùn)輸。


發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問(wèn)題，本專利的發(fā)明人進(jìn)行了大量實(shí)驗(yàn)，改進(jìn)了醋酸奧曲肽的配方，利用甘露醇和吐溫-80作為穩(wěn)定劑，利用檸檬酸作為PH調(diào)節(jié)劑，并對(duì)上述輔料的用量進(jìn)行了優(yōu)化，完成了本發(fā)明。
具體地，本發(fā)明公開(kāi)了一種醋酸奧曲肽注射液，含有醋酸奧曲肽、甘露醇、吐溫-80和檸檬酸。
更具體地，本發(fā)明公開(kāi)的上述醋酸奧曲肽注射液，其中醋酸奧曲肽、甘露醇、吐溫-80和檸檬酸的用量按重量比為1.2∶8～12∶0.001～0.0015∶0.1～0.5。
優(yōu)選地，本發(fā)明公開(kāi)的上述醋酸奧曲肽注射液，其中醋酸奧曲肽、甘露醇、吐溫-80和檸檬酸的用量按重量比為1.2∶10∶0.0012∶0.3。
本發(fā)明的發(fā)明人在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，利用甘露醇和吐溫-80作為醋酸奧曲肽注射液的穩(wěn)定劑可以達(dá)到令人驚奇的效果，通過(guò)穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)和光照實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)得到的醋酸奧曲肽注射液可以在常溫下放置6個(gè)月且不需避光保存，達(dá)到了本發(fā)明的目的。

具體實(shí)施例方式 以下實(shí)施例、實(shí)驗(yàn)例僅僅對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說(shuō)明，不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1 醋酸奧曲肽注射液的制備 處方(以1000支計(jì)) 醋酸奧曲肽1.2克 甘露醇8克 吐溫-800.001克 檸檬酸0.1克 注射用水加至1000毫升 制備過(guò)程加入8克甘露醇溶于100毫升注射用水中，后加入吐溫-800.001克，溶解后加入醋酸奧曲肽1.2克，測(cè)PH，加入檸檬酸0.1克調(diào)PH至4.0～4.5之間，后加入注射用水至1000毫升。
藥液配制后，經(jīng)過(guò)0.22微米除菌薄膜進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾，然后按制劑1毫升/支進(jìn)行灌裝，灌裝后壓塞，扎蓋，燈檢后進(jìn)行包裝。
實(shí)施例2 處方(以1000支計(jì)) 醋酸奧曲肽1.2克 甘露醇12克 吐溫-800.0015克 檸檬酸0.5克 注射用水加至1000毫升 制備過(guò)程同實(shí)施例1 實(shí)施例3 處方(以1000支計(jì)) 醋酸奧曲肽1.2克 甘露醇10克 吐溫-800.0012克 檸檬酸0.3克 注射用水加至1000毫升 制備過(guò)程同實(shí)施例1 實(shí)驗(yàn)例 檢查方法與條件 色譜條件與系統(tǒng)提適應(yīng)性試驗(yàn) 用于十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-1mol/L四甲基氫氧化銨溶液-水(100∶20∶880)并用磷酸調(diào)節(jié)PH值至4.5的溶液作為流動(dòng)相A；以乙腈-1mol/L四甲基氫氧化銨溶液-水(600∶20∶380)并用磷酸調(diào)節(jié)PH值至4.5的溶液作為流動(dòng)相B；采用梯度洗脫，流動(dòng)相B的比例在12分鐘內(nèi)由29％～49％，并維持4分鐘，檢測(cè)波長(zhǎng)為210mm。理論板數(shù)按奧曲肽峰計(jì)算應(yīng)不低于5000，奧曲肽主峰保留時(shí)間應(yīng)在4.5～7.5分鐘之間，奧曲肽降解峰的保留時(shí)間應(yīng)在5.5～8.5分鐘之間，奧曲肽降解峰和奧曲肽峰的分離度應(yīng)符合要求。
奧曲肽降解物的制備 取奧曲肽對(duì)照品適量，加水制成每1ml中約含0.1mg的溶液，置水浴中加熱4小時(shí)，取該溶液20ul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，色譜圖中相對(duì)于主峰保留時(shí)間約為1.1的雜質(zhì)峰即為該降解產(chǎn)物。
有關(guān)物質(zhì) 取供試品溶液；精密量取奧曲肽(市售標(biāo)準(zhǔn)品)1ml至100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。量取上述兩種溶液各20ul，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰(輔料及溶劑峰除外)，量取各雜質(zhì)峰的面積，它們的總和不得大于對(duì)照溶液主成分峰面積的3倍(3％)，其中降解產(chǎn)物奧曲肽峰的面積不得大于對(duì)照溶液主要成分峰面積的2倍(2％)。
實(shí)驗(yàn)例1影響因素的試驗(yàn) 按實(shí)施例1～3各制備三批樣品，每批抽樣，并以市售善寧作為對(duì)照品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
對(duì)本品受光照、高溫、高濕度的影響進(jìn)行考察，觀測(cè)本品的外觀性狀、分(降)解產(chǎn)物、吸濕重量、及奧曲肽含量的變化。
醋酸奧曲肽注射液分(降)解產(chǎn)物及含量的HPLC分析采用上述檢查方法與條件中公開(kāi)的HPLC方法進(jìn)行。
1.光照試驗(yàn) 取供試品，在4500lx光照度下放置，并于5、10天取樣，測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)，與0天的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較。試驗(yàn)結(jié)果表明實(shí)施例1～3產(chǎn)品經(jīng)4500lx光照10天，分降解雜質(zhì)很少，小于1％，可以不用避光保存，而對(duì)照品善寧分降解雜質(zhì)顯著增加(大于15％)，奧曲肽含量顯著減小，故為保證質(zhì)量，應(yīng)避光保存。
2、高溫試驗(yàn) 取供試品，分別在8℃、25℃、40℃和60℃條件下放置，并于5、10天取樣考察，與0天的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較。試驗(yàn)結(jié)果表明實(shí)施例1～3產(chǎn)品在60℃放置10天，分降解雜質(zhì)很少，小于1％，奧曲肽含量基本沒(méi)有減少；分別在8℃、25℃和40℃放置10天，各項(xiàng)指標(biāo)均沒(méi)有明顯改變，故可以在室溫下保存。而對(duì)照品善寧分降解雜質(zhì)顯著增加(大于15％)，奧曲肽含量顯著減小，為保證品質(zhì)，應(yīng)涼處貯藏。
3、高濕度試驗(yàn) 取供試品，分別在室溫相對(duì)濕度為75％和92.5％的條件下放置10天，并于5、10天取樣考察，與0天數(shù)據(jù)比較，結(jié)果表明，所有樣品在室溫相對(duì)濕度為75％和92.5％條件下放置10天，各項(xiàng)指標(biāo)均沒(méi)有改變。
實(shí)驗(yàn)例2 按實(shí)施例1～3各制備三批樣品，每批抽樣，并以市售善寧作為對(duì)照品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
1.加速試驗(yàn) 取供試品置40℃相對(duì)濕度為75％條件下放置6月，并于1，2，3，6月取樣，測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)，與0時(shí)的數(shù)據(jù)比較，試驗(yàn)結(jié)果表明實(shí)施例1~3產(chǎn)品在40℃相對(duì)濕度為75％條件下放置6月，分降解雜質(zhì)無(wú)明顯增加，奧曲肽含量無(wú)明顯改變，說(shuō)明本發(fā)明實(shí)施例得到的樣品相對(duì)穩(wěn)定；而對(duì)照品善寧分降解雜質(zhì)顯著增加(大于10％)。
2.長(zhǎng)期試驗(yàn)考察 取供試品分別于8℃、25℃及長(zhǎng)期試驗(yàn)條件下放置，定期于3，6，9，12……個(gè)月取樣，測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)，與0時(shí)的數(shù)據(jù)，試驗(yàn)結(jié)果表明實(shí)施例1~3產(chǎn)品8℃、25℃及長(zhǎng)期試驗(yàn)條件下放置試驗(yàn)6個(gè)月穩(wěn)定，而對(duì)照品善寧在8℃長(zhǎng)期試驗(yàn)條件下放置試驗(yàn)6個(gè)月比較穩(wěn)定，在25℃放置試驗(yàn)6個(gè)月含量明顯降低。
3.穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)論 對(duì)供試品的穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)施例1~3產(chǎn)品8℃、25℃、長(zhǎng)期試驗(yàn)、及加速試驗(yàn)條件下穩(wěn)定，60℃高溫試驗(yàn)條件下分降解雜質(zhì)無(wú)明顯增加，可以常溫保存6個(gè)月，不避光。
實(shí)驗(yàn)例3醋酸奧曲肽注射液溶血試驗(yàn) 動(dòng)物新西蘭家兔，體重2.24kg，雄性，購(gòu)自中山醫(yī)院大學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物中 藥物醋酸奧曲肽注射液，實(shí)驗(yàn)例1產(chǎn)品。實(shí)驗(yàn)前用注射用生理鹽水溶液成12ml備用。
方法取家兔1只，自頸動(dòng)脈取血約20ml，置三角瓶中，用竹簽攪拌去除纖維蛋白，然后將血移入刻度離心管內(nèi)，加入生理鹽水5-10ml，混合后離心10分鐘(2000-2500/分)，去除上清夜，再用生理鹽水混合離心，反復(fù)洗3-4次，至上清夜呈無(wú)色透明方可用于試驗(yàn)。將所得紅細(xì)胞按其容積，用生理鹽水稀釋成2％的混懸液。
取試管7支，編號(hào)排列于試管架上，按下表加入各種溶液 表1醋酸奧曲肽注射液對(duì)家兔急性溶血實(shí)驗(yàn)

第6管為不容血對(duì)照管，第7管為完全溶血對(duì)照管。輕輕搖勻后，置37℃恒溫水浴中觀察5小時(shí)，于孵育0.5小時(shí)及1小時(shí)內(nèi)各觀察一次，1小時(shí)后，每隔1小時(shí)觀察一次。
結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)如下 ①+++完全溶血，溶液澄明紅色，管底無(wú)細(xì)胞殘留。
②++部分溶血，溶液澄明紅色或棕色，管底有少量紅細(xì)胞殘留。
③-無(wú)溶血，紅細(xì)胞全部下沉，上層液體無(wú)色澄明。
④+凝集，雖不溶血，但出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集，振搖后不能分散或出現(xiàn)藥物性沉淀。
結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，第1-6號(hào)均無(wú)溶血和凝集現(xiàn)象，第7管完全溶血。表明醋酸奧曲肽注射液在37℃保溫環(huán)境下，5小時(shí)以內(nèi)均未引起家兔紅細(xì)胞溶血或凝集，說(shuō)明適用于靜脈途徑給藥。
實(shí)施例2、實(shí)施例3產(chǎn)品也進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)，結(jié)果與實(shí)施例1產(chǎn)品相同。
實(shí)驗(yàn)例4過(guò)敏試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察動(dòng)物重復(fù)注射受試物后所產(chǎn)生的過(guò)敏反映情況。
受試藥物 實(shí)施例1產(chǎn)品 溶液配制致敏液 原液 供試液 原液 對(duì)照藥物 (1)陽(yáng)性對(duì)照藥物 品名牛血清白蛋白 規(guī)格1g/瓶 提供單位上海麗珠東風(fēng)生物技術(shù)有限公司 批號(hào)9905084 溶液配制 致敏液 0.5％牛血清白蛋白溶液 供試液 0.5％牛血清白蛋白溶液 (2)陰性對(duì)照藥物 品名氯化鈉注射液 規(guī)格250ml 提供單位上海長(zhǎng)征制藥廠 批號(hào)9711112 溶液配制 致敏液 氯化鈉注射液 供試液 氯化鈉注射液 試驗(yàn)動(dòng)物 名稱豚鼠性別陽(yáng)性組為♀余為♂體重250-350g 來(lái)源上海生物制品研究所合格證號(hào)醫(yī)動(dòng)字第02-21-19號(hào) 實(shí)驗(yàn)方法 設(shè)供試品1組，陽(yáng)性對(duì)照1組、陰性對(duì)照組1組，每組取健康豚鼠6只，連續(xù)3次間日腹腔注射致敏液0.5ml/只，然后將每組豚鼠均分為二部分，各3只，分別于第一次注射后14日及21日自靜脈注射供試液1ml/只，觀察注射后15分鐘內(nèi)動(dòng)物的過(guò)敏反應(yīng)情況，并繼續(xù)觀察24小時(shí)。
結(jié)果 a)陰性對(duì)照組(性別♂)
b)陽(yáng)性對(duì)照組(性別♀)
c)受試藥物組
結(jié)論本品經(jīng)豚鼠過(guò)敏試驗(yàn)，無(wú)過(guò)敏反應(yīng)。
實(shí)施例2、實(shí)施例3產(chǎn)品同樣進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)，結(jié)果與實(shí)施例1產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)結(jié)果相同。
實(shí)驗(yàn)例5醋酸奧曲肽注射液降壓物質(zhì)檢查方法 檢查方法 本實(shí)驗(yàn)所用貓購(gòu)自中山醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，體重3.3kg，雌性未孕。戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，固定于保溫手術(shù)臺(tái)，分離氣管并插入插管以使呼吸暢通。在一側(cè)頸動(dòng)脈插入連接測(cè)壓計(jì)的動(dòng)脈套管，管內(nèi)充滿適宜的抗凝劑溶液，以RM6200多導(dǎo)生理鹽水記錄儀(日本光電)記錄血壓。在一側(cè)股靜內(nèi)插入靜脈插管，供注射藥液用。試驗(yàn)中應(yīng)保持動(dòng)物體溫。全部手術(shù)完畢后，將測(cè)壓計(jì)調(diào)節(jié)到與動(dòng)物血壓相當(dāng)?shù)母叨龋?4.5Kpa，開(kāi)啟動(dòng)脈夾，待血壓穩(wěn)定后，即可進(jìn)行藥液注射。各次注射速度相同，每次注射后立即注入2ml的氯化鈉注射液，相鄰兩次注射的間隔時(shí)間5分鐘，每次注射應(yīng)在前一次反應(yīng)恢復(fù)穩(wěn)定以后進(jìn)行。
自靜脈輪流注入上述對(duì)照品稀釋液，劑量按動(dòng)物體重每1kg注射組胺0.05ug、0.1ug及0.15ug，每個(gè)劑量應(yīng)各重復(fù)2～3次。
取對(duì)照品稀釋液按動(dòng)物體重每1kg注射組胺0.1ug的劑量(dS)，供試品溶液(實(shí)施例1產(chǎn)品)按上述文中規(guī)定的劑量(dT)，照下列次序注射一組4個(gè)劑量dS、dT、dT、dS、dT由于奧曲肽文獻(xiàn)報(bào)道劑量選擇范圍較大，故ds皆選擇組胺0.1ug/kgdT則選擇了4個(gè)劑量，即10.0ug/kg、3.3ug/kg、1.0ug/kg、0.3ug/kg，每次為同一劑量，實(shí)驗(yàn)分別重復(fù)了4次。
結(jié)果 1、靈敏度檢查 組胺對(duì)照品降壓靈敏度(kpa) 2、樣品檢查 醋酸奧曲肽注射液降壓檢查(Kpa)
本實(shí)驗(yàn)所組胺三個(gè)劑量組降壓明顯，0.1ug劑量降壓大于2.67Kpa，結(jié)果說(shuō)明動(dòng)物符合標(biāo)準(zhǔn)，試驗(yàn)靈敏度符合規(guī)定。醋酸奧曲肽注射液四個(gè)劑量組皆未引起明顯血壓下降，彼此之間亦無(wú)差別，故實(shí)驗(yàn)證明實(shí)施例1產(chǎn)品的降壓物質(zhì)檢查符合規(guī)定。
實(shí)施例2、實(shí)施例3產(chǎn)品經(jīng)過(guò)上述實(shí)驗(yàn)，結(jié)果與實(shí)施例1產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)結(jié)果相同。
權(quán)利要求
1.一種醋酸奧曲肽注射液，含有醋酸奧曲肽、甘露醇、吐溫-80和檸檬酸。
2.權(quán)利要求1所述的醋酸奧曲肽注射液，其中醋酸奧曲肽、甘露醇、吐溫-80和檸檬酸的用量按重量比為1.2∶8～12∶0.001～0.0015∶0.1～0.5。
3.權(quán)利要求2所述的醋酸奧曲肽注射液，其中醋酸奧曲肽、甘露醇、吐溫-80和檸檬酸的用量按重量比為1.2∶10∶0.0012∶0.3。
4.權(quán)利要求1～3任一所述的醋酸奧曲肽注射液，還含有注射用水。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種醋酸奧曲肽注射液，含有醋酸奧曲肽、甘露醇、吐溫-80和檸檬酸，其中醋酸奧曲肽、甘露醇、吐溫-80和檸檬酸的用量按重量比為1.2∶8～12∶0.001～0.0015∶0.1～0.5。本發(fā)明公開(kāi)的醋酸奧曲肽注射液具有穩(wěn)定性好的優(yōu)點(diǎn)，可以在常溫下放置6個(gè)月，不需避光。
文檔編號(hào)A61K9/08GK101647773SQ20091007442
公開(kāi)日2010年2月17日 申請(qǐng)日期2009年5月25日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月25日
發(fā)明者李紅力 申請(qǐng)人:李紅力