專利名稱：：一種仙芪眩寧中藥制劑的藥物質量檢測方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種中藥制劑的質量檢測方法，具體講是涉及仙芪眩寧中藥制劑的質量檢測方法。
背景技術：
：美尼爾氏病是以膜迷路積水的一種內耳疾病，以突發(fā)性眩暈、耳鳴、耳聾或眼球震顫為主要臨床表現，眩暈有明顯的發(fā)作期和間歇期。病人多數為中年人，患者性別無明顯差異，首次發(fā)作在50歲以前的病人約占65%,大多數病人單耳患病。美尼爾綜合癥為一突然發(fā)作的非炎性迷路病變，具有眩暈、耳聾、耳鳴及有時有患側耳內悶脹感等癥狀的疾病。多為單耳發(fā)病，其發(fā)病原因不明，男女發(fā)病率無明顯差異，病人多為青壯年，60歲以上老人發(fā)病罕見，近年亦有兒童病例報告，病程多為數天或周余。關于病因、學說甚多，尚無定論，如變態(tài)反應、內分泌障礙、維生素缺乏及精祌神經因素等引起自主祌經功能紊亂，因之使血管神經功能失調，毛細血管滲透性增加，導致膜迷路積水，蝸管及球囊膨大，刺激耳蝸及前庭感受器時，引起耳鳴、耳聾、眩暈等一系列臨床癥狀。此病不經過治療，癥狀可緩解，雖可反復發(fā)作，發(fā)作時間間隔不定，但也有發(fā)作一次不再發(fā)作者。由于對其病因論點不一，所以在臨床上治療方法也多。美尼爾氏綜合癥可用西藥或手術治療，但效果都不很理想。中藥制劑在治療眩暈癥和美尼爾綜合征中可以起到重要的作用。同時，為了促進中藥的現代化，進一步研究中藥制劑的質量檢測方法也是很必要的。
發(fā)明內容本發(fā)明要解決的技術問題在于提供一種仙芪眩寧中藥制劑的質量檢測方法。為了實現本發(fā)明的發(fā)明目的，采用的技術方案為-本發(fā)明涉及一種仙芪眩寧中藥制劑的質量檢測方法，所述方法包括以下步驟(l)對照品溶液的制備稱取仙鶴草藥材2g，加水4060ml，煮沸2040分鐘，過濾，取濾液加815ml乙醚提取23次，取乙醚液，蒸干，殘渣加乙醇lml溶解，制成對照品溶液；供試品溶液的制備稱取仙芪眩寧中藥制劑3g，研細，加水2040ml，溶解，取濾液加815ml乙醚提取2次，取乙醚液，蒸干，殘渣加乙醇lml溶解，制成供試品溶液；測定方法照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5^1，分別點于G型薄層層析硅膠板上，以體積比為30:1:1:1的醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水為展開劑展開，取出，晾干，于254nm的紫外光燈下檢視；在供試品色譜中，在與對照藥材相應的位置上，顯示相同顏色的主斑點；(2)對照品溶液的制備稱取黃芪甲苷，加濃度大于或等于99.5%的甲醇，制成lmg/ml的黃芪甲苷的甲醇溶液，作為對照品溶液；供試品溶液的制備稱取仙芪眩寧中藥制劑15g，置索氏提取器中，加甲醇100-200ml，加熱回流35小時，將提取液蒸干，殘渣加水4050ml溶解，過濾，濾液加質量百分比為2528%的濃氨水lml，通過大孔吸附樹脂柱，流速每分鐘5ml，分別用體積比為100:1的水質量百分比為2528%濃氨水混合溶液、體積比為100:1的體積百分比為30%乙醇質量百分比為2528%濃氨水混合溶液、體積比為100:1的體積百分比為40%乙醇質量百分比為2528%濃氨水混合溶液洗脫，棄去洗脫液；用體積百分比為70%乙醇150ml洗脫，收集洗脫液并蒸干，殘渣加10ml水溶解，用水飽和的正丁醇提取35次，每次10ml，合并正丁醇提取液，濾過，蒸干，殘渣加濃度大于或等于99.5%的甲醇定容與lml量瓶中，搖勻，作為供試品溶液；測定方法照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液6pl、對照品溶液2^與4^，分別點于G型薄層層析硅膠板上，010'C放置816小時，以體積比為13:6:2的氯仿-甲醇-水混合溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積比為10%的硫酸乙醇溶液，在105"C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯示相同的棕褐色斑點或在365nm紫外光燈下顯相同的橙黃色熒光斑點；(3)供試品溶液的制備同步驟(2);測定方法照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液6pl、對照品溶液2pl與4nl，分別點于G型薄層層析硅膠板上，01(TC以下放置816小時，以體積比為13:6:2氯仿-甲醇-水溶液為展開劑，展開，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，照薄層色譜法進行掃描，波長為5tS=530nm，XR=700mn，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算。本發(fā)明的質量檢測方法優(yōu)選為(l)對照品溶液的制備取仙鶴草藥材2g，加水50ml，煮沸30分鐘，過濾，取濾液加10ml乙醚提取2次，取乙醚液，蒸干，殘渣加乙醇lml溶解，制成對照藥材溶液；供試品溶液的制備取仙芪眩寧中藥制劑3g，研細，加水30ml，溶解，取濾液加10ml乙醚提取2次，取乙醚液，蒸干，殘渣加乙醇lml溶解，制成供試品溶液；測定方法照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5pl，分別點于以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的G型薄層層析硅膠板上，以體積比為30:1:1:1的醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，于254nm的紫外光燈下檢視；在供試品色譜中，在與對照藥材相應的位置上，顯示相同顏色的主斑點；(2)對照品溶液的制備稱取黃芪甲苷，加濃度大于或等于99.5%的甲醇，制成lmg/ml的黃芪甲苷的甲醇溶液，作為對照品溶液；供試品溶液的制備稱取仙芪眩寧中藥顆粒劑15g，置索氏提取器中，加甲醇100-200ml，加熱回流4小時，將提取液蒸干，殘渣加50ml水溶解，過濾，濾液加質量百分比濃度為28%濃氨水lml，通過內徑為1.5cm、長20cm的D朋型大孔吸附樹脂柱，流速5ml/分鐘，分別以體積比為100:1的水:質量百分比濃度28%濃氨水溶液200ml、體積比為100:1的體積百分比30%乙醇:質量百分比濃度28%濃氨水溶液200ml、體積比為100:1的體積百分比為40%的乙醇:質量百分比濃度28%的濃氨水溶液150ml洗脫，棄去洗脫液；再用體積比為70%的乙醉150ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加10ml水溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次10ml，合并正丁醇提取液，濾過，蒸干，殘渣加濃度大于或等于99.5%的甲醇定容于lml量瓶中，搖勻，作為供試品溶液；測定方法照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液6pl、對照品溶液2pl與4jil，分別點于以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的G型薄層層析硅膠板上，01(TC放置1014小時，以體積比為13:6:2的氯仿-甲醇-水為展開劑展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的棕褐色斑點；365nm紫外光燈下顯示相同的橙黃色熒光斑點；(3)供試品和對照品溶液的制備同步驟(2);測定方法照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液6h1、對照品溶液2^1與4nl，分別點于以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的G型薄層層析硅膠板上，01(TC放置1014小時，以體積比13:6:2氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，照薄層色譜法進行掃描，波長Xs=530nm，k=700nm，測量供試品的吸收度積分值與對照品的吸收度積分值，計算。其中，每克仙芪眩寧中藥制劑中含有黃芪甲苷CuH68Ch40.0050.02mg。本發(fā)明的仙芪眩寧中藥制劑用于治療眩暈癥，特別是美尼爾綜合征，其組成成分為，以重量份計的仙鶴草80120，黃芪1030，白術515，澤瀉515，生姜0.82.0;其制備方法包括以下步驟(1)按重量比稱取仙鶴草、黃芪、白術、澤瀉和生姜加水煎煮2次，第一次添加藥物的重量815倍的水煎煮13小時，過濾后再添加藥物重量610倍的水煎煮12小時，合并煎液，過濾，將濾液濃縮至相對密度70。C溫度條件下1.121.18克/毫升；(2)將濃縮后的濾液冷卻至室溫，加入濾液體積13倍的體積比為70%100%的乙醇，混勻，靜置1236小時，過濾，將濾液濃縮至相對密度5(TC溫度條件下1.321.38克/毫升的浸膏；(3)將浸膏加入輔料，制成片劑、膠囊、丸劑、顆粒劑、軟膏劑、噴霧劑、油膏劑、緩釋制劑、控釋制劑及各種微粒給藥系統。本發(fā)明的中藥組合物是根據傳統的中醫(yī)理論和經驗研制而成，具有健脾滲濕、升清降濁、利水除痰之功效，用于痰濁中阻所致的眩暈、美尼爾氏病。經臨床應用后證明其對于美尼爾綜合征具有顯著的治療效果，總有效率為95.0%。治療后患者眩暈、頭重、胸悶、身困、食少、惡心嘔吐、耳鳴耳聾等癥均有明顯好轉。本發(fā)明的質量檢測方法使本發(fā)明的復方中藥制劑質量可控，療效確切。本方法操作簡便，準確先進，重現性、精密度和穩(wěn)定性均較好，能夠更有效的控制產品的質量。具體實施例方式下面的實施例用來進一步說明本發(fā)明，但這并不意味著對本發(fā)明的任何限制。實施例11.稱取仙鶴草1100克，黃芪200克，白術100克，澤瀉100克，生姜14克，加水煎煮2次，第一次添加藥物的重量8倍的水煎煮1小時，過濾后再添加藥物重量6倍的水煎煮1小時，合并煎液，過濾，將濾液濃縮至相對密度70'C溫度條件下1.12克/毫升；2.將濃縮后的濾液冷卻至室溫，加入濾液體積1倍的體積比為80%的乙醇，混勻，靜置12小時，過濾，將濾液濃縮至相對密度5(TC溫度條件下1.32克/毫升的浸膏；3.將浸膏加入輔料，按照常規(guī)方法制成丸劑。實施例21.稱取仙鶴草1050克，黃芪200克，白術100克，澤瀉100克，生姜14克加水煎煮2次，第一次添加藥物的重量15倍的水煎煮3小時，過濾后再添加藥物重量10倍的水煎煮2小時，合并煎液，過濾，將濾液濃縮至相對密度70'C溫度條件下1.18克/毫升；2.將濃縮后的濾液冷卻至室溫，加入濾液體積3倍的體積比為70%的乙醇，混勻，靜置36小時，過濾，將濾液濃縮至相對密度50'C溫度條件下1.38克/毫升的浸膏；3.將浸膏加入輔料，按照常規(guī)方法制成膠囊劑。實施例31.稱取仙鶴草1100g、黃芪220g、白術120g、澤瀉120g和生姜15g加水煎煮2次，第一次添加藥物的重量12倍的水煎煮1.5小時，過濾后再添加藥物重量8倍的水煎煮1.5小時，合并煎液，過濾，將濾液濃縮至相對密度70'C溫度條件下1.14克/毫升；2.將濃縮后的濾液冷卻至室溫，加入濾液體積1.5倍的體積比為100%的乙醇，混勻，靜置18小時，過濾，將濾液濃縮至相對密度5(TC溫度條件下1.33克/亳升的浸膏；3.將浸膏加入輔料，按照常規(guī)方法制成片劑。實施例41.稱取仙鶴草1067克，黃芪200克，白術100克，澤瀉100克，生姜14克，加水煎煮2次，第一次添加藥物的重量10倍的水煎煮2小時，過濾后再添加藥物重量10倍的水煎煮1.5小時，合并煎液，過濾，將濾液濃縮至相對密度7(TC溫度條件下1.15克/毫升；2.將濃縮后的濾液冷卻至室溫，加入濾液體積2倍的體積比為95%的乙醇，混勻，靜置24小時，過濾，將濾液濃縮至相對密度50"C溫度條件下1.35克/毫升的浸膏；3.將浸膏加入糖粉710g、糊精200g、70。/。乙醇15ml，混勻，制成顆粒，干燥，制成1000g，即得。實施例51.按重量稱取<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>2.制備方法同實施例4。試驗例1實施例4制備的顆粒劑的檢測參照中國藥典2005年版一部附錄IC，對本發(fā)明的實施例4的顆粒劑進行檢測:1.粒度檢測方法參照《中國藥典》2005版一部附錄IC中的"顆粒劑粒度"項檢查。檢測結果不能通過一號篩和能通過五號篩的總和不超過15.0%。2.水分檢測方法參照《中國藥典》2005版一部附錄IXH"水分測定法"項測定，檢測結果水分重量百分比不超過6.0%。3.溶化性參照《中國藥典》2005版一部附錄IC"顆粒劑溶化性"項檢査判定標準顆粒全部溶化，允許有輕微渾濁，但不得有焦屑等物，檢測結果符合規(guī)定。4.裝量差異判定標準參照《中國藥典》2005版一部附錄IC"顆粒劑裝量差異"項檢査。檢測結果每袋裝量在14.25~15.75g之間(標示裝量為15g，±5.0%)，有超出此范圍的不多于2袋。5.微生物限度判定標準參照《中國藥典》2005版一部附錄XIIIC"微生物限度檢查法"項下檢査。檢測結果細菌本品每克不超過1000個；霉菌本品每克不超過100個；大腸埃希菌未檢出；活螨未檢出。試驗例2藥物質量的檢驗(1)對照品溶液的制備取仙鶴草藥材2g，加水50ml，煮沸30分鐘，過濾，取濾液加10ml乙醚提取2次，取乙醚液，蒸干，殘渣加乙醇lml溶解，制成對照藥材溶液；供試品溶液的制備稱取實施例4的仙芪眩寧中藥顆粒劑3g，研細，加水30ml，溶解，取濾液加10ml乙醚提取2次，取乙醚液，蒸干，殘渣加乙醇lml溶解，制成供試品溶液；測定方法照薄層色譜法試驗(中國藥典2005年版一部附錄VIB)，吸取上述兩種溶液各5pl，分別點于以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的G型薄層層析硅膠板上，以體積比為30:1:1:1的醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，于254nm的紫外光燈下檢視；在供試品色譜中，在與對照藥材相應的位置上，顯示相同顏色的主斑點；(2)對照品溶液的制備稱取黃芪甲苷加甲醇，制成lmg/ml的黃芪甲苷的甲醇溶液，作為對照品溶液，其中甲醇購買的是分析醇，濃度大于99.5%;供試品溶液的制備稱取實施例4的仙芪眩寧中藥顆粒劑15g，置索氏提取器中，提取器的容積為500ml，加甲醇200ml，加熱回流4小時，將提取液蒸干，殘渣加50ml水溶解，過濾，濾液加質量百分比濃度為28%濃氨水lml，通過內徑為1.5cm、長20cm的D1()1型大孔吸附樹脂柱，流速5ml/分鐘，分別以體積比為100:1的水:質量百分比濃度28%濃氨水溶液200ml、體積比為100:1的體積百分比30%乙醇:質量百分比濃度28%濃氨水溶液200ml、體積比為100:1的體積百分比為40%的乙醇:質量百分比濃度28%的濃氨水溶液1501111洗脫，棄去洗脫液；再用體積比為70%的乙醇150ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加10ml水溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次10ml，合并正丁醇提取液，濾過，蒸干，殘渣加99.5%的甲醇定容于lml量瓶中，搖勻，作為供試品溶液；測定方法:照薄層色譜法試驗(中國藥典2005年版一部附錄VIB)，吸取供試品溶液6^1、對照品溶液2^1與4^1，分別點于以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的G型薄層層析硅膠板上，8°C放置12小時，以體積比為13:6:2的氯仿-甲醇-水為展開劑展開，取出，晾干，噴以體積比為10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的棕褐色斑點；365nm紫外光燈下顯相同的橙黃色熒光斑點；(3)供試品和對照品溶液的制備同步驟(2);測定方法照薄層色譜法試驗(中國藥典2005年版一部附錄VIB)，精密吸取供試品溶液6pl、對照品溶液2pl與4W，分別點于以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的G型薄層層析硅膠板上，8'C放置12小時，以體積比13:6:2氯仿-甲醇-水為展開劑，展幵，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，照薄層色譜法進行掃描，波長Xs=530nm，XR=700nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，經計算，每克仙芪眩寧中藥制劑中含有黃芪甲苷C41H68O140.02mg。權利要求1.一種仙芪眩寧中藥制劑的藥物質量檢測方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟(1)對照品溶液的制備稱取仙鶴草藥材2g，加水40～60ml，煮沸20～40分鐘，過濾，取濾液加8～15ml乙醚提取2～3次，取乙醚液，蒸干，殘渣加乙醇1ml溶解，制成對照品溶液；供試品溶液的制備稱取仙芪眩寧中藥制劑3g，研細，加水20～40ml，溶解，取濾液加8～15ml乙醚提取2次，取乙醚液，蒸干，殘渣加乙醇1ml溶解，制成供試品溶液；測定方法照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于G型薄層層析硅膠板上，以體積比為30∶1∶1∶1的醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水為展開劑展開，取出，晾干，于254nm的紫外光燈下檢視；在供試品色譜中，在與對照藥材相應的位置上，顯示相同顏色的主斑點；(2)對照品溶液的制備稱取黃芪甲苷，加濃度大于或等于99.5％的甲醇，制成1mg/ml的黃芪甲苷的甲醇溶液，作為對照品溶液，；供試品溶液的制備稱取仙芪眩寧中藥制劑15g，置索氏提取器中，加甲醇100-200ml，加熱回流3～5小時，將提取液蒸干，殘渣加水40～50ml溶解，過濾，濾液加質量百分比為25～28％的濃氨水1ml，通過大孔吸附樹脂柱，流速每分鐘5ml，分別用體積比為100∶1的水∶質量百分比為25～28％濃氨水混合溶液、體積比為100∶1的體積百分比為30％乙醇∶質量百分比為25～28％濃氨水混合溶液、體積比為100∶1的體積百分比為40％乙醇∶質量百分比為25～28％濃氨水混合溶液洗脫，棄去洗脫液；用體積百分比為70％乙醇150ml洗脫，收集洗脫液并蒸干，殘渣加10ml水溶解，用水飽和的正丁醇提取3～5次，每次10ml，合并正丁醇提取液，濾過，蒸干，殘渣加濃度大于或等于99.5％的甲醇定容與1ml量瓶中，搖勻，作為供試品溶液；測定方法照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液6μl、對照品溶液2μl與4μl，分別點于G型薄層層析硅膠板上，0～10℃放置8～16小時，以體積比為13∶6∶2的氯仿-甲醇-水混合溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積比為10％的硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯示相同的棕褐色斑點或在365nm紫外光燈下顯相同的橙黃色熒光斑點；(3)供試品溶液的制備同步驟(2)；測定方法照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液6μl、對照品溶液2μl與4μl，分別點于G型薄層層析硅膠板上，0～10℃以下放置8～16小時，以體積比為13∶6∶2氯仿-甲醇-水溶液為展開劑，展開，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，照薄層色譜法進行掃描，波長為λs＝530nm，λR＝700nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算。2.測定方法:照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液6pl、對照品溶液2pl與4^1，分別點于以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的G型薄層層析硅膠板上，01(TC放置1014小時，以體積比為13:6:2的氯仿-甲醇-水為展開劑展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈(365nm)下顯相同的橙黃色熒光斑點；(3)供試品和對照品溶液的制備同步驟(2);測定方法照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液6pl、對照品溶液2iAl與4pl，分別點于以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的G型薄層層析硅膠板上，01(TC放置1014小時，以體積比13:6:2氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，照薄層色譜法進行掃描，波長Xs=530nm，XR=700nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算。3.如權利要求1所述的仙芪眩寧中藥制劑的藥物質量檢測方法，其特征在于，每克仙芪眩寧中藥制劑中含有黃芪甲苷C41H68O140.0050.02mg。全文摘要本發(fā)明涉及一種中藥制劑的質量檢測方法，具體講是涉及仙芪眩寧中藥制劑的質量檢測方法，該方法包括含量的測定和/或鑒別，具體指對仙鶴草的進行薄層色譜定性鑒定，對黃芪進行薄層色譜定性鑒定及薄層色譜掃描定量鑒定。文檔編號A61K36/88GK101612382SQ200910089509公開日2009年12月30日申請日期2009年7月22日優(yōu)先權日2009年7月22日發(fā)明者紅黎申請人:廣西神通藥業(yè)有限公司