專利名稱：：一種防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑及其制備方法，屬于獸藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：痢疾和腹瀉是獸醫(yī)臨床上常見的消化道疾病，多數(shù)是由大腸桿菌、沙門氏菌、球菌等引起的，在畜禽各種疾病中發(fā)病率很高，一年四季均可發(fā)病。獸醫(yī)臨床上對(duì)畜禽腹瀉的治療主要采用抗生素或化學(xué)藥物，治療效果不佳，致病菌的耐藥性越來越嚴(yán)重。治療此病的中藥有止痢散、雛痢凈、白頭翁散、烏梅散等，這些藥物劑型主要是傳統(tǒng)散劑，技術(shù)含量低，質(zhì)量粗糙，用量大，適口性差，見效慢，生物利用度低，因此防治畜禽腹瀉性疾病效果不理想，同時(shí)造成了中藥資源的極大浪費(fèi)?，F(xiàn)代中藥發(fā)酵制藥技術(shù)是在繼承傳統(tǒng)中藥炮制學(xué)發(fā)酵法的基礎(chǔ)上，吸取了微生態(tài)學(xué)研究成果，結(jié)合現(xiàn)代生物工程發(fā)酵技術(shù)而形成的高科技中藥制藥新技術(shù)，是從中藥(天然藥物)制藥方面尋找藥物的新療效，具有很大的研究價(jià)值和市場開發(fā)意義。研究表明，微生物生長代謝過程中可以產(chǎn)生豐富而強(qiáng)大的酶系，可以將中藥的藥物成分分解轉(zhuǎn)化，將不能被人體或動(dòng)物體吸收的有效組分降解成小分子活性物質(zhì)，而被機(jī)體直接吸收利用，或產(chǎn)生新的活性組分，改變藥性，降低毒副作用，從而大大提高藥物療效和治療范圍。由白頭翁、黃柏、黃連、秦皮組成的中藥方劑，為古代藥學(xué)名著《傷寒論》中的治痢名方，組方嚴(yán)謹(jǐn)，被稱為"白頭翁湯"，主要功能為清熱解毒，涼血止痢。后世常變通應(yīng)用于多種病證?！吨袊F藥典》中收錄了白頭翁散，用來治療畜禽腹瀉性疾病。目前，國內(nèi)外未見將白頭翁散全方進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化并制成相應(yīng)制劑的研究報(bào)道
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種見效快、效果明確的防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供該防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑的制備方法。本發(fā)明還提供了包含該防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑的飼料。本發(fā)明的中藥生物制劑是利用微生物對(duì)白頭翁散進(jìn)行發(fā)酵代謝后制備而成，實(shí)現(xiàn)了傳統(tǒng)中藥方劑與現(xiàn)代生物技術(shù)的有機(jī)結(jié)合。本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明提供一種防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑，此制劑是將微生物接種到包含白頭翁散的培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵制備而成。本發(fā)明所述的白頭翁散包括如下組分和重量份數(shù)白頭翁2080份、黃柏3060份、秦皮2080份、黃連1050份。其中，所述的微生物為酵母菌。所述的酵母菌為產(chǎn)朊假絲酵母和/或釀酒酵母。本發(fā)明的防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑可為口服液、粉劑、片劑、顆粒劑、緩釋制劑、丸劑、微囊劑、注射劑或其他藥劑學(xué)上可接受的劑型。本發(fā)明還提供了該防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)制備菌種培養(yǎng)液將酵母菌菌種接種到Y(jié)PD培養(yǎng)基中，2832°C，150200rpm搖床培養(yǎng)生產(chǎn)一級(jí)種子液，當(dāng)活菌含量達(dá)到1.0Xl(TVfu/ml時(shí)轉(zhuǎn)接到二級(jí)種子液發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)，接種量為38%，培養(yǎng)溫度2832'C，攪拌轉(zhuǎn)速180220rpm，二級(jí)種子液活菌含量在1.0Xl(T9cfu/ml時(shí)，停止培養(yǎng)，備用；(2)培養(yǎng)基的制備取配方量的中藥材，粉碎成80120目的藥材細(xì)粉，裝入發(fā)酵罐中，加入占中藥重量510%的麩皮、15%葡萄糖、0.11.0%尿素、0.52.0%K2HPO4，加水至含水量在4060%，調(diào)節(jié)pH至45，滅菌2025min;(3)冷卻后，按發(fā)酵物總重量的510%將(1)中的菌種發(fā)酵液接入到(2)的培養(yǎng)基中，于2837。C恒溫培養(yǎng)2472h，攪拌轉(zhuǎn)速150250rpm，當(dāng)活菌含量達(dá)到1.OX108~9cfu/ml時(shí)停止發(fā)酵；(4)將成熟的固態(tài)發(fā)酵物用乙醇進(jìn)行浸提，分離，過濾，濾液精制，發(fā)酵液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.01.2，加入藥學(xué)上常用輔料制成相應(yīng)劑型。進(jìn)一步，本發(fā)明的防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑的制備方法還可包括如下步驟步驟(4)得到的濃縮發(fā)酵液經(jīng)過噴霧干燥或冷凍干燥后，加入輔料制成預(yù)混劑。本發(fā)明的防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑還可以直接添加到飼料中，制成包含該中藥生物制劑的伺料。本發(fā)明的原料含有白頭翁、黃柏、秦皮、黃連四味藥，現(xiàn)代研究表明，白頭翁含有原白頭翁素、白頭翁皂苷；黃連、黃柏含有小檗堿、藥根堿；秦皮含有七葉苷、七葉內(nèi)酯等活性成分，通過微生物發(fā)酵后使藥物更容易吸收，藥效更充分。本發(fā)明的中藥生物制劑與傳統(tǒng)中獸藥比較有如下優(yōu)點(diǎn)1、傳統(tǒng)中獸藥散劑適口性差、內(nèi)服后有效成分不易從植物細(xì)胞中游離出來被機(jī)體充分吸收，生物利用度低，而煎劑在制備過程中對(duì)中藥有效成分破壞性大，降低了藥物應(yīng)有的療效。微生物發(fā)酵轉(zhuǎn)化中藥，反應(yīng)條件溫和，可以最大限度的保護(hù)中藥有效成分免遭破壞，同時(shí)，可使某些有效成分含量增加及產(chǎn)生新的藥物成分，從而提高藥物療效、擴(kuò)大適應(yīng)癥、減少服用劑量；2、白頭翁散經(jīng)過微生物代謝后制備的中藥生物制劑，在畜禽腹瀉性疾病的治療效果上大大優(yōu)于傳統(tǒng)的白頭翁散及其煎劑。通過以下實(shí)施例將更具體的說明本發(fā)明，但是應(yīng)理解所述實(shí)施例僅是為了說明本發(fā)明，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。具體實(shí)施例方式實(shí)施例l本發(fā)明中藥生物制劑的制備白頭翁散組成白頭翁60份、黃柏50份、秦皮60份、黃連30份制備方法(1)將酵母菌菌種接種到Y(jié)PD培養(yǎng)基中，30°C，180rpm搖床培養(yǎng)生產(chǎn)一級(jí)種子液，當(dāng)活菌含量達(dá)到1.0X108~9cfu/ml時(shí)轉(zhuǎn)接到二級(jí)種子液發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)，接種量為6%，培養(yǎng)溫度30'C,攪拌轉(zhuǎn)速220rpm，二級(jí)種子液活菌含量達(dá)到1.0Xl(T9cfu/ml時(shí)，停止培養(yǎng)，備用；(2)取上述配方量的中藥材，粉碎成120目的藥材細(xì)粉，加入占中藥重量10%的麩皮、2%葡萄糖、0.5%尿素、1.0%K2HP04，加水至含水量為50%，調(diào)節(jié)pH至4，滅菌20min;(3)冷卻后，按發(fā)酵物總重量的10%將(1)中的菌種培養(yǎng)液接入到(2)的培養(yǎng)基中，于30'C恒溫培養(yǎng)72h，攪拌轉(zhuǎn)速250rpm，當(dāng)活菌含量達(dá)到1.0X109cfu/ml時(shí)停止發(fā)酵；(4)將成熟的固態(tài)發(fā)酵物用乙醇進(jìn)行浸提，分離，過濾，濾液精制，發(fā)酵液減壓濃縮相對(duì)密度為1.0;(5)濃縮后的發(fā)酵液加水至200份，過濾，分裝，滅菌，即制成口服液，lml溶液相當(dāng)于原生藥lg。實(shí)施例2本發(fā)明中藥生物制劑的制備白頭翁散組成白頭翁80份、黃柏60份、秦皮80份、黃連50份制備方法(1)將酵母菌菌種接種到Y(jié)PD培養(yǎng)基中，3CTC，180rpm搖床培養(yǎng)生產(chǎn)一級(jí)種子液，當(dāng)活菌含量達(dá)到1.0Xl(TVfu/ml時(shí)轉(zhuǎn)接到二級(jí)種子液發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)，接種量為8%，培養(yǎng)溫度30。C，攪拌轉(zhuǎn)速220rpm，二級(jí)種子液活菌含量達(dá)到1.0Xl(T9cfu/ml時(shí)，停止培養(yǎng)，備用；(2)取上述配方量的中藥材，粉碎成IOO目的藥材細(xì)粉，加入占中藥重量8%的麩皮、3%葡萄糖、0.7%尿素、1.5%&朋04加水至含水量為60%，調(diào)節(jié)pH至4.5,滅菌25min;(3)冷卻后，按發(fā)酵物總重量的8%將(1)中的菌種培養(yǎng)液接入到(2)的培養(yǎng)基中，于32'C恒溫培養(yǎng)48h，攪拌轉(zhuǎn)速180rpm，當(dāng)活菌含量達(dá)到1.0X109cfu/ml時(shí)停止發(fā)酵；(4)將成熟的固態(tài)發(fā)酵物用乙醇進(jìn)行浸提，分離，過濾，濾液精制，發(fā)酵液減壓濃縮至相對(duì)密度為l.l，再加入適量蔗糖、糊精，制軟材并過篩制粒；濕顆粒干燥、整粒，檢測，分裝，即制備成顆粒劑，每lg相當(dāng)于原生藥lg。實(shí)施例3本發(fā)明中藥生物制劑的制備白頭翁散組成白頭翁50份、黃柏45份、秦皮50份、黃連45份制備方法-(1)將酵母菌菌種接種到Y(jié)PD培養(yǎng)基中，29°C，190rpm搖床培養(yǎng)生產(chǎn)一級(jí)種子液，當(dāng)活菌含量達(dá)到1.0Xl(T9CfU/ml時(shí)轉(zhuǎn)接到二級(jí)種子液發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)，接種量為5%，培養(yǎng)溫度29'C，攪拌轉(zhuǎn)速200rpm，二級(jí)種子液活菌含量達(dá)到1.0Xl(T9cfu/ml時(shí)，停止培養(yǎng)，備用；(2)取上述配方量的中藥材，粉碎成90目的藥材細(xì)粉，加入占中藥重量9%的麩皮、4%葡萄糖、0.8%尿素、0.7%K2HP04,加水至含水量為55%，調(diào)節(jié)pH至5，滅菌25min;(3)冷卻后，按發(fā)酵物總質(zhì)量的9%將(1)中的菌種培養(yǎng)液接入到(2)的培養(yǎng)基中，于29'C恒溫培養(yǎng)60h，攪拌轉(zhuǎn)速200rpm，當(dāng)活菌含量達(dá)到1.0X109cfu/ml時(shí)停止發(fā)酵；(4)將成熟的固態(tài)發(fā)酵物用乙醇進(jìn)行浸提，分離，過濾，濾液精制，發(fā)酵液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.2,再噴霧干燥得到固體粉末，加入適量乙醇作潤濕劑制軟材，制粒，干燥，再加入硬脂酸鎂混合均勻，壓片，即制成片劑，每片相當(dāng)于原生藥0.5g。實(shí)施例4本發(fā)明中藥生物制劑的制備白頭翁散組成白頭翁70份、黃柏40份、秦皮40份、黃連40份制備方法(1)將酵母菌菌種接種到Y(jié)PD培養(yǎng)基中，30°C,200rpm搖床培養(yǎng)生產(chǎn)一級(jí)種子液，當(dāng)活菌含量達(dá)到1.0X108~9cfu/ml時(shí)轉(zhuǎn)接到二級(jí)種子液發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)，接種量為4%，培養(yǎng)溫度3(TC，攪拌轉(zhuǎn)速220rpm，二級(jí)種子液活菌含量達(dá)到1.0Xl(T9cfu/ml時(shí)，停止培養(yǎng)，備用；(2)取上述配方量的中藥材，粉碎成IOO目的藥材細(xì)粉，加入占中藥重量7%的麩皮、5%葡萄糖、0.6%尿素、0.5%K2HP04，加水至含水量為45%，調(diào)節(jié)pH至4，滅菌20rain;(3)冷卻后，按發(fā)酵物總重量的7%將(1)中的菌種培養(yǎng)液接入到(2)的培養(yǎng)基中，于28'C恒溫培養(yǎng)36h，攪拌轉(zhuǎn)速150rpm,當(dāng)活菌含量達(dá)到1.0X109Cfu/ml時(shí)停止發(fā)酵；(4)將成熟的固態(tài)發(fā)酵物用乙醇進(jìn)行浸提，分離，過濾，濾液精制，發(fā)酵液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.2，噴霧干燥，再加入適量輔料玉米芯粉后混合均勻，8即制備成預(yù)混劑。實(shí)施例5本發(fā)明中藥生物制劑的制備白頭翁散組成白頭翁20份、黃柏30份、秦皮20份、黃連10份制備方法-(1)將酵母菌菌種接種到Y(jié)PD培養(yǎng)基中，29°C，200rpm搖床培養(yǎng)生產(chǎn)一級(jí)種子液，當(dāng)活菌含量達(dá)到1.0Xl(T9cfu/ml時(shí)轉(zhuǎn)接到二級(jí)種子液發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)，接種量為7%，培養(yǎng)溫度29'C,攪拌轉(zhuǎn)速200rpm，二級(jí)種子液活菌含量達(dá)到1.0Xl(T9cfu/tnl時(shí)，停止培養(yǎng)，備用；(2)取上述配方量的中藥材，粉碎成IOO目的藥材細(xì)粉，加入占中藥重量5%的麩皮、1%葡萄糖、0.4%尿素、1.2%K2HP04，加水至含水量為40%，調(diào)節(jié)pH至4，滅菌20min;(3)冷卻后，按發(fā)酵物總重量的5%將(1)中的菌種培養(yǎng)液接入到(2)的培養(yǎng)基中，于3rC恒溫培養(yǎng)24h，攪拌轉(zhuǎn)速220rpm，當(dāng)活菌含量達(dá)到1.0X109cfu/ml時(shí)停止發(fā)酵；(4)將成熟的固態(tài)發(fā)酵物用乙醇進(jìn)行浸提，分離，過濾，濾液精制，發(fā)酵液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.2，再加入適量可溶性淀粉、糊精后混合均勻，烘干，粉碎，過篩，即制成粉劑，每lg相當(dāng)于原生藥5g。以下通過具體試驗(yàn)例來說明本發(fā)明的中藥生物制劑的有益效果。試驗(yàn)例1本試驗(yàn)例是按實(shí)施例1的方法制備的口服液對(duì)人工發(fā)病仔豬白痢的臨床治療試驗(yàn)。1、材料與方法1.1供試藥物白頭翁散煎劑(生藥含量為lg/ml)、本發(fā)明的口服液。1.2菌種大腸桿菌0139，中國獸藥監(jiān)察所提供。1.3受試動(dòng)物200頭體重約為22土lkg左右的健康斷奶仔豬。1.4試驗(yàn)方法1.4.1動(dòng)物分組將200頭仔豬隨機(jī)分成5組，每組40頭，其中1，2，3,4組為藥物治療組，5組為陽性對(duì)照組。91.4.2人工發(fā)病先將保存菌種接種于普通營養(yǎng)平板，37"C恒溫培養(yǎng)18小時(shí)，然后挑取典型菌落接種于普通肉湯中，37'C恒溫培養(yǎng)18小時(shí)取出，以生理鹽水稀釋至濃度為5X108cfu/ml，經(jīng)預(yù)試驗(yàn)后，除空白對(duì)照組外，其它各組攻毒量為每頭豬肌注5ml菌液。待仔豬出現(xiàn)腹瀉、排白色粥樣糞便、食欲減退等典型癥狀時(shí)開始用藥。1.4.3用藥方法l組為白頭翁散煎劑(lg/ml)治療組，灌服給藥，每頭豬35ml/次，一天2次，連用3天；2組為本發(fā)明口服液高劑量組(lg/ml)，灌服給藥，每頭豬35ml/次，一天2次，連用3天；3組為本發(fā)明口服液中劑量組(0，5g/ml)，灌服給藥，每頭豬35ml/次，一天2次，連用3天；4組為本發(fā)明口服液低劑量組(0.25g/ml)，灌服給藥，每頭豬35ml/次，一天2次，連用3天；5組為陽性對(duì)照組，感染發(fā)病后不給藥。各組試驗(yàn)豬均飼喂不含藥物的全價(jià)飼料。1.5療效評(píng)價(jià)指標(biāo)治愈率經(jīng)用藥治療后臨床癥狀完全消失，精神及飲食欲恢復(fù)正常為治愈，統(tǒng)計(jì)治愈數(shù)，計(jì)算治愈率。有效率經(jīng)用藥治療后臨床癥狀明顯減輕，精神及飲食欲好轉(zhuǎn)者或治愈的，均視為有效，統(tǒng)計(jì)有效數(shù)，計(jì)算有效率。死亡率治療期間因用藥無效而死亡，統(tǒng)計(jì)死亡數(shù)，計(jì)算死亡率。1.6數(shù)據(jù)分析與處理生物統(tǒng)計(jì)用t檢驗(yàn)和卡方檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。試驗(yàn)結(jié)果見表1。2、結(jié)果表1對(duì)人工發(fā)病仔豬白痢的治療效果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>本發(fā)明的中藥口服液高、中、低劑量組及白頭翁散煎劑組對(duì)人工發(fā)病的仔豬白痢的有效率與陽性對(duì)照組比較差異極顯著(P〈0.01);本發(fā)明的中藥口服液中劑量組的有效率與白頭翁散煎劑組相比較差異不顯著(PX).05);說明本發(fā)明的發(fā)酵制劑僅需要未發(fā)酵制劑50%的劑量就可以達(dá)到未發(fā)酵制劑的治療效果。試驗(yàn)例2本試驗(yàn)例是用本發(fā)明實(shí)施例4制備的預(yù)混劑預(yù)防仔豬黃白痢的試驗(yàn)，取得了良好的試驗(yàn)效果。選擇所產(chǎn)仔豬有黃白痢病史的31頭母豬，隨機(jī)分成3組。l組為本發(fā)明的預(yù)混劑組，產(chǎn)前5天開始用藥，在飼料中按0.5%添加本發(fā)明預(yù)混劑，連續(xù)用藥5天；2組為白頭翁散組，同樣產(chǎn)前5天開始用藥，在飼料中按1.0%添加白頭翁散，連續(xù)用藥5天；3組為對(duì)照組，飼料中不添加任何藥物；3個(gè)組的飼養(yǎng)條件相同。記錄出生仔豬發(fā)病頭數(shù)及死亡頭數(shù)，計(jì)算各組發(fā)病率及死亡率。試驗(yàn)結(jié)果見表2。表2預(yù)防仔豬黃白痢的試驗(yàn)結(jié)果組別母豬產(chǎn)仔仔豬發(fā)死亡發(fā)病率死亡率頭數(shù)頭數(shù)病頭數(shù)頭數(shù)(%)(%)111122604.92021011313411.503.54310111622755.8624.32試驗(yàn)結(jié)果表明，懷孕母豬產(chǎn)前使用本發(fā)明的中藥生物制劑后，所產(chǎn)仔豬黃白痢的發(fā)病率、死亡率與普通散劑組和對(duì)照組相比較明顯下降，說明本發(fā)明的中藥生物制劑可通過母豬來有效預(yù)防出生仔豬黃白痢，降低其死亡率。試驗(yàn)例3本試驗(yàn)例是按實(shí)施例5制備的中藥粉劑對(duì)肉仔雞白痢治療效果的觀察試驗(yàn)。試驗(yàn)方法某養(yǎng)雞場提供20日齡肉仔雞，經(jīng)臨床檢查病雞表現(xiàn)昏睡，怕冷，精神沉郁，食欲減少或不食，翅膀下垂，拉白色漿糊樣糞便，肛門周圍粘連石灰樣糞便等明顯的雞白痢癥狀。剖殺10只病雞，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測為沙門氏菌感染。將雞白痢全血平板凝集反應(yīng)(用標(biāo)準(zhǔn)血清檢測未知抗原)陽性的肉仔雞750只，隨機(jī)分成5組，每組150只。其中l(wèi)組為本發(fā)明的粉劑組；2組為慶大霉素組；3組為氟苯尼考組；4組為白頭翁散煎劑組(生藥含量lg/ml)，5組為對(duì)照組，不用藥物治療，4個(gè)用藥治療組的用藥劑量及使用方法見表3。各組雞的飼養(yǎng)條件相同，詞料中不添加任何藥物。連續(xù)用藥5天，觀察治療效果。試驗(yàn)結(jié)果見表4。<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>上述試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的中藥生物制劑對(duì)雞白痢具有良好的治療效果，能夠有效降低死亡率，治療效果好于西藥組和白頭翁散煎劑組。試驗(yàn)例4本試驗(yàn)例是按實(shí)施例2的方法制備的中藥顆粒劑對(duì)出生羔羊腹瀉的防治效果的觀察試驗(yàn)。1、材料與方法1.1試驗(yàn)動(dòng)物選擇甘肅某牧場4個(gè)月內(nèi)母羊所產(chǎn)的320只羔羊進(jìn)行試驗(yàn)。1.2試驗(yàn)藥物本發(fā)明的中藥顆粒劑、白頭翁散煎劑(生藥含量lg/ml)、土霉素。1.3試驗(yàn)分組按羔羊的出生時(shí)間隨機(jī)分組，分為3組。試驗(yàn)l組為本發(fā)明制劑組；試驗(yàn)2組為白頭翁散煎劑組；試驗(yàn)3組為土霉素對(duì)照組。1.4用藥方法出生羔羊吃初乳后馬上給藥，本發(fā)明的中藥顆粒劑，按每公斤體重0.51.0g給藥；白頭翁散煎劑組，按每公斤體重0.5lml給藥；對(duì)照組，按每公斤體重0.020.05g口服土霉素。各組均日用藥2次，連續(xù)用藥35天。每天觀察、記錄各組羔羊腹瀉和死亡情況等臨床癥狀，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分析。2、結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果見表5。表5對(duì)出生羔羊腹灣的預(yù)防效果組別羔羊數(shù)腹瀉數(shù)腹瀉率成活數(shù)成活率死亡數(shù)死亡率(只)(只)(%)(只)(只)(只)(%)111098.210797.332.721101210.910191.898.231001515.08888.01212.0注成活數(shù)、死亡數(shù)均為45日齡時(shí)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，本發(fā)明的制劑及白頭翁散煎劑可以對(duì)出生羔羊的腹瀉起到很好的預(yù)防作用，與對(duì)照組相比腹瀉率分別降低了6.8%和4.1%,成活率分別提高9.3%和3.8%。本發(fā)明的制劑組與對(duì)照組之間差異極顯著(P〈O.Ol)o試驗(yàn)例5本試驗(yàn)例是按實(shí)施例3的方法制備的片劑對(duì)犬各種腹瀉治療效果的觀察。1、試驗(yàn)動(dòng)物從幾個(gè)養(yǎng)犬場中選擇患有急性腸炎、黏液性腸炎、出血性腸炎的病犬共112條供試驗(yàn)用。2、動(dòng)物分組及用藥將選定的112條犬分成2組，1組100條犬，為本發(fā)明制劑治療組，其中患急性腸炎的犬72條，黏液性腸炎犬8條，出血性腸炎犬20條，用藥量為每公斤體重l片，每日1次，連用35天；2組12條犬作為對(duì)照組，不給任何藥物。133、判定標(biāo)準(zhǔn)無效用藥治療5天，癥狀未見改變或病情變嚴(yán)重的視為無效。有效用藥治療5天，臨床癥狀減輕或痊愈的均視為有效。治愈用藥治療5天，臨床癥狀消失，患急性腸炎的犬精神正常，嘔吐完全停止，排便正常；患黏液性腸炎的犬精神、體溫、食欲、排便均恢復(fù)正常；患出血性腸炎的犬出血停止，排便正常，精神、食欲、體溫恢復(fù)正常，鼻鏡潤濕。4、結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果見表6。表6對(duì)犬腹瀉的治療效果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>從試驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明的藥物治療犬各種腹瀉的平均有效率在90%以上，平均治愈率在85%以上，效果較好。權(quán)利要求1、一種防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑，其特征在于是將微生物接種到包含白頭翁散的培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵制備而成。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑，其特征在于所述的白頭翁散包括如下組分和重量份數(shù)白頭翁2080份、黃柏3060份、秦皮2080份、黃連1050份。3、根據(jù)權(quán)利要求l所述的防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑，其特征在于所述微生物為酵母菌。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑，其特征在于所述的酵母菌為產(chǎn)朊假絲酵母和/或釀酒酵母。5、根據(jù)權(quán)利要求l所述的防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑，其特征在于所述的制劑為口服液、粉劑、片劑、顆粒劑、緩釋制劑、丸劑、微囊劑、注射劑或其他藥劑學(xué)上可接受的劑型。6、根據(jù)權(quán)利要求l一5任一項(xiàng)所述的防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)制備菌種培養(yǎng)液將酵母菌菌種接種到Y(jié)PD培養(yǎng)基中，2832°C，150200rpm搖床培養(yǎng)生產(chǎn)一級(jí)種子液，當(dāng)活菌含量達(dá)到1.0X1089cfu/ml時(shí)轉(zhuǎn)接到二級(jí)種子液發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)，接種量為38%,培養(yǎng)溫度2832'C,攪拌轉(zhuǎn)速180220rpm，二級(jí)種子液活菌含量在1.0Xl(T9cfu/ml時(shí)，停止培養(yǎng)，備用；(2)培養(yǎng)基的制備取配方量的中藥材，粉碎成80120目的藥材細(xì)粉，裝入發(fā)酵罐中，加入占中藥重量510%的麩皮、15%葡萄糖，0.11.0%尿素，0.52.0%K2HP04，加水至含水量在40~60%，調(diào)節(jié)pH至45,滅菌2025min;(3)冷卻后，按發(fā)酵物總重量的510%將(1)中的菌種培養(yǎng)液接入到(2)培養(yǎng)基中，于2837'C恒溫培養(yǎng)2472h，攪拌轉(zhuǎn)速150250rpm,當(dāng)活菌含量達(dá)到1.OX1089cfu/ml時(shí)停止發(fā)酵；(4)將成熟的固態(tài)發(fā)酵物用乙醇進(jìn)行浸提，分離，過濾，濾液精制，發(fā)酵液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.01.2，加入藥學(xué)上常用輔料制成相應(yīng)劑型。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑的制備方法，其特征在于還可進(jìn)一步包括如下步驟步驟(4)得到的濃縮發(fā)酵液經(jīng)過噴霧干燥或冷凍干燥后，加入輔料制成預(yù)混劑。8、一種包含權(quán)利要求l一4任一項(xiàng)所述的防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑的飼料。全文摘要本發(fā)明公開了一種防治畜禽腹瀉的中藥生物制劑及其制備方法。本發(fā)明將傳統(tǒng)方劑與現(xiàn)代微生物轉(zhuǎn)化技術(shù)相結(jié)合，利用微生物的強(qiáng)大轉(zhuǎn)化能力，對(duì)傳統(tǒng)的白頭翁散進(jìn)行發(fā)酵代謝制備了一種中藥生物制劑。它是將白頭翁散粉碎，加入麩皮、葡萄糖、尿素、無機(jī)鹽、水作為發(fā)酵培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)pH值，滅菌后，加入一定比例的菌種培養(yǎng)液，進(jìn)行發(fā)酵，成熟的固態(tài)發(fā)酵物加入乙醇進(jìn)行浸提，分離，過濾，濃縮，制備成各種劑型。白頭翁散經(jīng)酵母菌發(fā)酵代謝后所制備的中藥生物制劑，對(duì)畜禽腹瀉性疾病的治療效果大大優(yōu)于白頭翁散及其煎劑。文檔編號(hào)A61K36/064GK101664421SQ200910093560公開日2010年3月10日申請(qǐng)日期2009年9月30日優(yōu)先權(quán)日2009年9月30日發(fā)明者叢日剛,瀾劉,周德剛,張俊儒,玲田,云莫,冰葛,葛代興,鄧?yán)?黃建茹申請(qǐng)人:北京大北農(nóng)科技集團(tuán)股份有限公司;北京大北農(nóng)動(dòng)物保健科技有限責(zé)任公司