專利名稱：：含磁共振對(duì)比劑的脂質(zhì)納米粒及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及負(fù)載磁共振對(duì)比劑的脂質(zhì)納米粒及其制備方法和在腸道磁共振成像中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：各種影像檢査方法包括氣鋇雙重造影、CT、MRI等在腸道病變的檢査中均具有重要的作用。所涉及的各種陽(yáng)性對(duì)比劑，如鋇劑、含碘造對(duì)比及軋噴替酸葡甲胺(Gd-DTPA)等消化道均不易吸收或不能吸收。MRI與CT相比具有極高的軟組織分辨率，且無(wú)輻射，因此近年來(lái)在腸道病變檢査中備受關(guān)注。目前應(yīng)用于臨床最廣泛的MR對(duì)比劑是Gd-DTPA。Gd-DTPA是陽(yáng)性對(duì)比劑，消化道不吸收。其在消化道中的應(yīng)用主要有兩種方法。第一種方法是通過(guò)對(duì)比劑口服(MR小腸成像)或灌腸(MR大腸成像)方法充盈腸道，使腸管擴(kuò)張，并增加管腔與腸壁粘膜面的對(duì)比而顯示病變。第二種方法是對(duì)比劑靜脈注射后，經(jīng)血液循環(huán)至腸壁，增強(qiáng)正常腸壁，病變的強(qiáng)化程度由病變血液供應(yīng)所決定的，通過(guò)病變與正常腸壁的強(qiáng)化差異來(lái)顯示病變并能夠了解病變血供情況。第一種方法對(duì)于小病灶檢出率低，且對(duì)于粘膜起源的小病灶難以與腸內(nèi)容物區(qū)分。第二種方法對(duì)于病變檢出及病變定性優(yōu)于第一種方法，然而靜脈用藥后屬于全身分布，無(wú)組織器官靶向性及特異性，分布于細(xì)胞間隙而不能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，在病變內(nèi)的分布只與血供有關(guān)，對(duì)于病變也無(wú)靶向性及特異性。小腸及大腸均具有很強(qiáng)的吸收功能，很多藥物均能通過(guò)腸道吸收而進(jìn)入體內(nèi)。因此，如果腸道不吸收的Gd-DTPA通過(guò)腸道易吸收的載體包裹，借助載體的吸收Gd-DTPA可以進(jìn)入腸壁內(nèi)并可在MR上增強(qiáng)腸壁，病變的強(qiáng)化程度由病3變對(duì)于載體吸收量所決定的，因此可以通過(guò)病變與正常腸壁的強(qiáng)化差異來(lái)顯示病變并能夠了解病變的吸收功能狀況。此外，還可以在MR上觀察藥物吸收代謝過(guò)程。脂質(zhì)納米粒是指粒徑在501OOOnm之間的固態(tài)膠體顆粒，它以固態(tài)天然或合成的類脂為載體，將藥物包裹或夾嵌于類脂核中制成固體膠粒給藥系統(tǒng)，是20世紀(jì)90年代初發(fā)展起來(lái)的一種新型膠體給藥系統(tǒng)。除具有納米材料特性外，其最突出的優(yōu)點(diǎn)是生理相容性好，可生物降解，口服生物利用度高，可控制藥物釋放及有良好的靶向性。固體粒子攝取及轉(zhuǎn)運(yùn)是其穿過(guò)細(xì)胞膜及細(xì)胞間隙進(jìn)入腸壁細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞間隙，然后通過(guò)淋巴途徑及血液途徑轉(zhuǎn)運(yùn)。吸收量大，進(jìn)入腸壁內(nèi)納米顆粒以淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)為主。脂質(zhì)納米粒應(yīng)用廣泛，可以包裹化療藥、基因、蛋白質(zhì)及多肽等多類物質(zhì)。目前有部分采用脂質(zhì)體包裹Gd-DTPA的研究報(bào)道，主要應(yīng)用于靜脈注射，改變釓噴替酸葡甲胺在體內(nèi)的分布，提高對(duì)耙組織的顯像能力，但有關(guān)采用脂質(zhì)納米粒包裹顯示Gd-DTPA，并將其應(yīng)用于腸道吸收顯影尚未見報(bào)道。由于釓噴替酸葡甲胺為一種易溶于水的藥物，與脂質(zhì)材料親和力比較弱，采用常見的脂質(zhì)納米粒制備方法，如溶劑擴(kuò)散法、乳化法、高壓乳勻法等，難以將藥物有效包封于納米粒中，因此對(duì)制備方法和納米粒的配方提出了比較高的要求。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明首先所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種能被小腸及大腸吸收的含磁共振對(duì)比劑的脂質(zhì)納米粒。為此，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案負(fù)載的藥物為軋噴替酸葡甲胺(Gd-DTPA),其脂質(zhì)材料選用單硬脂酸甘油酯、硬脂酸、三硬脂酸甘油酯中的一種或多種組合，負(fù)載釓噴替酸葡甲胺的質(zhì)量為脂質(zhì)納米粒質(zhì)量的4%~35%，余量為脂質(zhì)材料。由于采用本發(fā)明的技術(shù)方案，本發(fā)明脂質(zhì)納米粒能夠局部給藥，不需要靜脈及全身用藥；可能實(shí)現(xiàn)腸道吸收功能的評(píng)價(jià)；納米顆粒進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞水平的顯像；而且納米粒以淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)為主可以實(shí)現(xiàn)淋巴顯像，有助于腸道病變的淋巴(包括腫瘤前哨淋巴結(jié))靶向顯示。本發(fā)明另一個(gè)所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種上述含磁共振對(duì)比劑的脂質(zhì)納米粒的制備方法。為此，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案它采用以下步驟制備-(1)將司盤-80溶解于有機(jī)溶劑中，濃度為2%,制備乳液的有機(jī)相；將釓噴替酸葡甲胺(Gd-DTPA)與吐溫-80溶解于蒸餾水，組成水相，Gd-DTPA的濃度為0.5~5%、吐溫-80的濃度為1.8%，所述百分比為每100毫升中的溶質(zhì)克數(shù)；(2)在攪拌條件下，將所述水相加入有機(jī)相形成油包水(W/0)微乳液；(3)稱取脂質(zhì)材料溶解于稱取脂質(zhì)材料溶解于與水互溶的有機(jī)溶劑中，將此溶液迅速倒入所述油包水(W/0)微乳液中，室溫條件下繼續(xù)攪拌，得脂質(zhì)納米粒分散體系；(4)脂質(zhì)納米粒分散體系經(jīng)離心分離得到脂質(zhì)納米粒沉淀；(5)洗滌并沉淀步驟(4)分離得到的脂質(zhì)納米粒；(6)將脂質(zhì)納米粒用泊洛沙姆溶液分散，得到順磁性標(biāo)記的負(fù)載釓噴替酸葡甲胺的脂質(zhì)納米粒分散液。步驟(1)所選用的有機(jī)溶劑為與水不互溶且對(duì)步驟(3)所選用的有機(jī)溶劑的親和力小于對(duì)水的親和力，如正己烷、環(huán)己垸等。由于本發(fā)明采用微乳液中進(jìn)行溶劑擴(kuò)散的方法，有利于實(shí)現(xiàn)水溶性藥物在脂質(zhì)納米粒中的包封，能夠有效提高水溶性藥物在脂質(zhì)納米粒中的包封率，采用本發(fā)明的方法，所制備得到的納米粒徑為50300nrn。進(jìn)一步地，在納米粒制備過(guò)程中通過(guò)加入具有兩親性的脂質(zhì)材料卵磷脂，能夠更進(jìn)一步地提高水溶性藥物在脂質(zhì)納米粒中的包封率。通過(guò)本發(fā)明所提供的方法，可以制備得到釓噴替酸葡甲胺負(fù)載量達(dá)到或接近質(zhì)量百分比35.8%的脂質(zhì)納米粒。為此，用于制備的質(zhì)量配比為釓噴替酸葡甲胺50%、卵磷脂5~7.5%、單硬脂酸甘油酯42.5~45%。本發(fā)明再一個(gè)所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供含磁共振對(duì)比劑的脂質(zhì)納米粒在5腸道磁共振成像中的應(yīng)用。它可采用口服小腸吸收所述含磁共振對(duì)比劑的脂質(zhì)納米粒應(yīng)用于小腸MR檢査，采用保留灌腸后大腸吸收所述含磁共振對(duì)比劑的脂質(zhì)納米粒應(yīng)用于大腸MR檢査。小腸MR成像方法是基于小腸通過(guò)口服吸收負(fù)載Gd-DTPA的脂質(zhì)納米粒以實(shí)現(xiàn)，大腸MR成像方法是基于大腸通過(guò)保留灌腸吸收負(fù)載Gd-DTPA的脂質(zhì)納米粒以實(shí)現(xiàn)。Gd-DTPA借助載體——脂質(zhì)納米粒的吸收進(jìn)入腸壁內(nèi)，通過(guò)正常腸壁與病變對(duì)于Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒吸收差異以及腸壁中分布差異而造成正常腸壁與病變間強(qiáng)化程度差異，從而在MR上突出顯示病變，并可以了解病變吸收功能狀況。此外，還能夠在MR上活體動(dòng)態(tài)觀測(cè)Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的吸收、分布及代謝過(guò)程，尤其是該納米粒大部分通過(guò)淋巴通路代謝，從而可展示腹部淋巴結(jié)的狀況，有助于腸道病變的淋巴(包括腫瘤前哨淋巴結(jié))耙向顯示。圖1為實(shí)施例1中處方5制備的負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的電子顯微鏡照片，放大倍數(shù)為15000倍。圖2A為Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒水劑(40mg/ml)灌胃后30分鐘T1WI的MR圖像，圖2B是Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒水劑(40mg/ml)灌胃后2小時(shí)T1WI的MR圖像，它們顯示了負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒水劑(40mg/ml)口服小腸MR成像方法的建立；圖3A為Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒水劑(40mg/ml)保留灌腸前T1WI的MR圖像，圖3B是Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒水劑(40mg/ml)保留灌腸20分鐘T1WI的MR圖像，它們顯示了負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒水劑(40mg/ml)保留灌腸大腸MR成像方法的建立；圖4A為Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒水劑(40mg/ml)保留灌腸20分鐘T1WI的MR橫斷位圖像，圖4B是Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒水劑(40mg/ml)保留灌腸20分鐘T1WI的MR矢狀位圖像，它們顯示負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒水劑(40mg/ml)保留灌腸大腸癌MR成像方法的建立；圖5A為Gd-DTPA水劑(10mg/ml)保留灌腸前T1WI的MR圖像，圖5B是Gd-DTPA水劑(10mg/ml)保留灌腸20分鐘T1WI的MR圖像，它們顯示了大腸壁灌藥后T1WI的MRI上無(wú)明顯強(qiáng)化，提示大腸壁對(duì)于Gd-DTPA水劑不吸收。具體實(shí)施例方式實(shí)施伊J13與負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的制備方法相關(guān)實(shí)施例1:負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的制備稱取司盤-80200mg溶解于10mL正己烷中，組成乳液的有機(jī)相；另稱取表1中記載的處方量的Gd-DTPA與18mg吐溫-80，溶解于lmL蒸餾水中，組成水相。在400rpm攪拌條件下，將水相加入有機(jī)相中，形成油包水(W/0)微乳液；稱取處方量的單硬脂酸甘油酯和卵磷脂混合物50mg溶解于lmL無(wú)水乙醇中，將此溶液迅速倒入llmL的W/0微乳液中，室溫條件下繼續(xù)攪拌5min,即得脂質(zhì)納米粒分散體系。分散體系經(jīng)20000rpm高速離心，分離得到脂質(zhì)納米粒沉淀，用2mL正己烷洗滌脂質(zhì)納米粒沉淀2次，納米粒沉淀用50ml0.1%泊洛沙姆溶液分散，得到包裹Gd-DTPA的脂質(zhì)納米粒分散液；在該分散液中加入適量甘露醇，溶解、冷凍干燥。表l:不同處方負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的組成<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實(shí)施例2:負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的理化性質(zhì)考察(注意效果與權(quán)4比例的一致性)取上述制備的脂質(zhì)納米粒分散液適量，用0.1%泊洛沙姆溶液稀釋20倍，用3000HS粒度及表面電位分析儀測(cè)定其粒徑和表面電位。采用間接法測(cè)定計(jì)算納米粒中Gd-DTPA的包封率。按上述方法制備納米粒，脂質(zhì)納米粒分散液加入鹽酸絮凝后離心，收集上清液，熒光分光光度法(Ex:495nm，Em=514nm，Slit=5nm)測(cè)定熒光值Ip計(jì)算溶液中游離的Gd-DTPA的量；按(1)式計(jì)算熒光嫁接物包封率『一『Gd-D7714包封率=~5x100%(i)『oGd-DTPA載藥量按照(2)式計(jì)算，遞藥量=^x汰物加縣入tt，、包if洲田旦(2)(加入藥物量x包封率)+載體材料用量實(shí)施例1各處方制備得到的負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的理化性質(zhì)見表2。表2:實(shí)施例1處方負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的理化性質(zhì)處方體均粒徑(nm)表面電位(mV)包封率(%)載藥量(%)74.540.817.21-39.1±2.045.64.425.5243.9194.191.785.425.42-31.6±2.550.89.28.3266.374.452.1124.156.13-29.3±3,455.018.047.9300.8144,866.7100.647.34-27.3±3.157.931.633.3289.1117.582.5109.742.85-30.7±2.455.835.817.5277.4137.3圖1為處方5負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的電子顯微鏡照片。在油包水(w/o)型微乳液中的內(nèi)水相中進(jìn)行溶劑擴(kuò)散制備脂質(zhì)納米粒，由于內(nèi)水相本身體積小，其尺寸在lOOnm左右，在這樣的納米級(jí)反應(yīng)空間中進(jìn)行溶劑擴(kuò)散法，直接限制了制得納米粒的粒徑和藥物隨溶劑向水相擴(kuò)散的過(guò)程，因此采用該制備方法制備具有較高水溶性藥物的脂質(zhì)納米粒，具有較好的效果。Gd-DTPA是一種水溶性非常好的Gd鰲合物，采用一般的溶劑擴(kuò)散法等脂質(zhì)納米粒制備方法，由于藥物與脂質(zhì)材料親和力較弱而極易向水中滲漏，很難將其有效地包封于脂質(zhì)納米粒中；而采用本發(fā)明提供的方法，通過(guò)控制制備時(shí)Gd-DTPA的投料比，尤其是通過(guò)處方2、3、4、5添加脂溶性兩親性物質(zhì)卵磷脂，改善水溶性藥物Gd-DTPA與脂質(zhì)納米粒材料的親和力，減少制備過(guò)程中藥物的滲漏，使Gd-DTPA的包封率可達(dá)到50%以上，載藥量為35.8%,可以提高在體內(nèi)進(jìn)行磁共振檢測(cè)的靈敏度。通過(guò)本發(fā)明的研究，在加入量為5%-15%的情況下，卵磷脂可有效地改善脂質(zhì)納米粒對(duì)親水性藥物的包封率，但當(dāng)卵磷脂的加入量超過(guò)脂質(zhì)材料的20%以上時(shí)，腸壁對(duì)脂質(zhì)納米粒的吸收量反而會(huì)較加入量為5%-15%時(shí)的吸收量小。實(shí)施例3:負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的制備稱取司盤-80200mg溶解于10mL正己垸中，組成乳液的有機(jī)相；另稱取Gd-DTPA50mg與18mg吐溫-80，溶解于lmL蒸餾水中，組成水相。在400rpm攪拌條件下，將水相加入有機(jī)相中，形成油包水(W/0)微乳液；按表3稱取處方量的脂質(zhì)或混合脂質(zhì)45mg和卵磷脂5mg溶解于lmL無(wú)水乙醇中，將此溶液迅速倒入1lmL的W/0微乳液中，室溫條件下繼續(xù)攪拌5min，即得脂質(zhì)納米粒分散體系。分散體系經(jīng)20000rpm高速離心，分離得到脂質(zhì)納米粒沉淀，用2mL正己烷洗滌脂質(zhì)納米粒沉淀2次，納米粒沉淀用50ml0.1。/。泊洛沙姆溶液分散，得到包裹Gd-DTPA的脂質(zhì)納米粒分散液；在該分散液中加入適量甘露醇，溶解、冷凍干燥。Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的理化性質(zhì)見表3。表3不同脂質(zhì)材料制備得到的負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的理化性質(zhì)處方體均粒徑(nm)表面電位(mV)包封率(%)載藥量(%)硬脂酸75.824.292.5277.242.1111.3-35.2±2.552.634.5三硬脂酸甘油酯82.517.5109.7277.442.8137.3-30.7±2.450.133.4單硬脂酸甘油酯硬脂酸(1:1)71.328.7124.3296.766.5141.2-33.4±2.054.635.3硬月旨酸三硬脂酸甘油酯(1:1)68.231.8144.6318.973.7162.9陽(yáng)32.1土2.948.332.6由結(jié)果可知，采用硬脂酸、三硬脂酸甘油酯或單硬脂酸甘油酯、硬脂酸、三硬脂酸甘油酯的混合脂質(zhì)，在加入卵磷脂的情況下，納米粒對(duì)Gd-DTPA的包封率都接近或超過(guò)50%，載藥量在30%以上，其原因只是因?yàn)樗捎玫闹|(zhì)材料理化性質(zhì)比較接近，形成的脂質(zhì)納米粒在外觀和載藥性能上均比較相似，因此，參考載Gd-DTPA單硬脂酸甘油酯納米粒的配方和制備方法，顯然，無(wú)論是采用硬脂酸、三硬脂酸甘油酯或混合脂質(zhì)，或者在卵磷脂的參與下的混合脂質(zhì)，都能夠滿足載藥量控制在4%-35%的要求。實(shí)施例4~6與采用Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒進(jìn)行小鼠腸道成像相關(guān)實(shí)施例4:負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的應(yīng)用負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米?？诜∧cMR成像方法的建立選用實(shí)施例l中按處方5制備的Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒為成像劑，以40mg/ml的Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒水劑灌胃后，MR的T1WI上看見小鼠胃充盈。十二指腸、空腸及回腸腸腔隨胃腸蠕動(dòng)而逐漸充盈，然后小腸壁吸收Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒后腸壁均勻強(qiáng)化。其強(qiáng)化程度由Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒吸收量所決定，吸收量越多，信10號(hào)越高，強(qiáng)化程度越重。見圖2A和圖2B。實(shí)施例5:負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的應(yīng)用負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒保留灌腸大腸MR成像方法的建立選用實(shí)施例l中按處方5制備的Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒為成像劑，以40mg/ml的Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒水劑經(jīng)肛門注入正常小鼠大腸內(nèi)，保留灌腸后大腸吸收Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒于MR的T1WI上大腸壁增強(qiáng)，保留灌腸5分鐘腸壁可見強(qiáng)化，10-20分鐘即出現(xiàn)明顯均勻增強(qiáng)現(xiàn)象，其強(qiáng)化程度也由Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒吸收量所決定，吸收量越多，信號(hào)越高，強(qiáng)化程度越重。見圖3A和圖3B。實(shí)施例6:負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒的應(yīng)用負(fù)載Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒保留灌腸大腸癌MR成像方法的建立采用二甲肼誘發(fā)小鼠大腸癌的方法建立小鼠大腸癌模型。選用實(shí)施例1中按處方5制備的Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒為成像劑，同樣以40mg/ml的Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒水劑1.5ml保留灌腸20分鐘，T1WI的MR成像檢查顯示正常腸壁明顯均勻強(qiáng)化，而大腸癌病灶周邊強(qiáng)化，腫瘤內(nèi)散在強(qiáng)化，病變的主體部分強(qiáng)化程度較輕，病灶與正常腸壁對(duì)比鮮明，同時(shí)反映了腫瘤對(duì)于Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒吸收量明顯低于正常腸壁。見圖4A和圖4B。實(shí)施例7:Gd-DTPA對(duì)照實(shí)驗(yàn)Gd-DTPA保留灌腸大腸MR成像以10mg/ml的Gd-DTPA(與40mg/ml實(shí)施例1中按處方5制備的Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒中所含Gd-DTPA量相當(dāng))水劑經(jīng)肛門注入正常小鼠大腸內(nèi)，保留灌腸后大腸壁對(duì)于Gd-DTPA不吸收，大腸壁灌藥前后T1WI的MRI上無(wú)明顯強(qiáng)化。提示大腸壁對(duì)于Gd-DTPA水劑不吸收，與文獻(xiàn)一致。見圖5A和圖5B。11綜合實(shí)施例4-7所述，目前應(yīng)用于臨床Gd-DTPA因腸道不吸收無(wú)法建立腸壁吸收對(duì)比劑MR成像方法。Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒能夠被腸壁充分吸收，通過(guò)腸道對(duì)于Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒吸收MR成像方法可行，納米粒中Gd-DTPA增加病變(腸道腫瘤)與正常腸壁的對(duì)比，有助于病灶的顯示。其中，實(shí)施例l中按處方l-5制備的Gd-DTPA脂質(zhì)納米粒均能充分吸收，載藥量越高、MR上信號(hào)越強(qiáng)，因處方5制備的納米粒中所負(fù)載Gd-DTPA量最高，所以成像效果最佳。權(quán)利要求1.含磁共振對(duì)比劑的脂質(zhì)納米粒，其特征在于負(fù)載的藥物為釓噴替酸葡甲胺(Gd-DTPA)，其脂質(zhì)材料選用單硬脂酸甘油酯、硬脂酸、三硬脂酸甘油酯中的一種或多種組合，負(fù)載釓噴替酸葡甲胺的質(zhì)量為脂質(zhì)納米粒質(zhì)量的4％～35％，余量為脂質(zhì)材料。2.如權(quán)利要求1所述的含磁共振對(duì)比劑的脂質(zhì)納米粒，其特征在于脂質(zhì)材料中含有卵磷脂，卵磷脂的用量占脂質(zhì)材料總質(zhì)量的5~15%。3.權(quán)利要求1或2所述的含磁共振對(duì)比劑的脂質(zhì)納米粒的制備方法，其特征在于它采用以下步驟制備-(1)將司盤-80溶解于有機(jī)溶劑中，濃度為2%，制備乳液的有機(jī)相；將釓噴替酸葡甲胺(Gd-DTPA)與吐溫-80溶解于蒸餾水，組成水相，Gd-DTPA的濃度為0.5~5%、吐溫-80的濃度為1.8%,所述百分比為每100毫升中的溶質(zhì)克數(shù)；(2)在攪拌條件下，將所述水相加入有機(jī)相形成油包水(W/0)微乳液；(3)稱取脂質(zhì)材料溶解于與水互溶的有機(jī)溶劑中，將此溶液迅速倒入所述油包水(W/0)微乳液中，室溫條件下繼續(xù)攪拌，得脂質(zhì)納米粒分散體系；(4)脂質(zhì)納米粒分散體系經(jīng)離心分離得到脂質(zhì)納米粒沉淀；(5)洗滌并沉淀步驟(4)分離得到的脂質(zhì)納米粒；(6)將脂質(zhì)納米粒用泊洛沙姆溶液分散，得到順磁性標(biāo)記的負(fù)載軋噴替酸葡甲胺的脂質(zhì)納米粒分散液；步驟(1)所選用的有機(jī)溶劑為與水不互溶且對(duì)步驟(3)所選用的有機(jī)溶劑的親和力小于對(duì)水的親和力。4.權(quán)利要求3所述的含磁共振對(duì)比劑的脂質(zhì)納米粒的制備方法，其特征在于用于制備的質(zhì)量配比為釓噴替酸葡甲胺16.67~50%、卵磷脂4.17~8.33%、單硬脂酸甘油酯45~79.17%。5.含磁共振對(duì)比劑的脂質(zhì)納米粒在腸道磁共振成像中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明提供了一種腸道易吸收的脂質(zhì)納米粒，負(fù)載磁共振對(duì)比劑釓噴替酸葡甲胺，以單硬脂酸甘油酯與卵磷脂作為脂質(zhì)材料。本發(fā)明應(yīng)用腸道易吸收的脂質(zhì)體納米粒將臨床上最常用的磁共振對(duì)比劑釓噴替酸葡甲胺進(jìn)行包封，使消化道不吸收的磁共振對(duì)比劑釓噴替酸葡甲胺能大量吸收進(jìn)入腸壁內(nèi)使腸壁產(chǎn)生MRI增強(qiáng)，通過(guò)正常腸壁與病變對(duì)于該脂質(zhì)納米粒吸收及分布上的差異而顯示病變，并能夠反映病變對(duì)于納米粒的吸收功能狀況。該方法具有如下優(yōu)點(diǎn)局部給藥，不需要靜脈及全身用藥；可能實(shí)現(xiàn)腸道吸收功能的評(píng)價(jià)；納米顆粒進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞水平的顯像；而且納米粒以淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)為主可以實(shí)現(xiàn)淋巴顯像，有助于大腸病變的淋巴靶向顯示。文檔編號(hào)A61K49/06GK101496906SQ20091009590公開日2009年8月5日申請(qǐng)日期2009年2月19日優(yōu)先權(quán)日2009年2月19日發(fā)明者孫繼紅,杜永忠,章士正,胡富強(qiáng),弘袁,鄭偉良申請(qǐng)人:浙江大學(xué)