專(zhuān)利名稱(chēng)：：夏枯草口服液含量測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于中藥制劑領(lǐng)域，特別涉及夏枯草口服液含量測(cè)定方法。技術(shù)背景夏枯草口服液是處方夏枯草800g，制法取夏枯草800g,加水煎煮三次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至約800ml，靜置24小時(shí)，濾過(guò)，濾液加蔗糖250g及苯曱酸鈉3g，加熱《吏溶解，加水調(diào)整總量至1000ml，攪勾，冷藏24小時(shí)，濾過(guò)，灌封，每支裝10ml，滅菌，即得。夏枯草口月良液現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS3-224(Z-224)-2003(Z),標(biāo)準(zhǔn)中含量測(cè)定項(xiàng)下規(guī)定用紫外分光光度法檢測(cè)總黃酮含量與及用高效液相色譜法檢測(cè)金絲桃苦含量。在檢測(cè)過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)高效液相色譜法檢測(cè)金絲桃苷存在以下缺點(diǎn)一、夏枯草口服液中金絲桃苷含量太低，一般僅為0.11-0.20mg/10ml左右，而標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定為應(yīng)不得少于0.10mg/10ml,作為夏枯草口服液含量測(cè)定的指標(biāo)成分不恰當(dāng)；二、本品中總黃酮含量較高，金絲桃苷屬其中的一種，結(jié)構(gòu)相對(duì)復(fù)雜，含量又低，在液相色譜中分離較困難，所以常導(dǎo)致樣品中金絲桃苷色譜峰的分離度僅為l.O左右，從而影響^r測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，不利于產(chǎn)品質(zhì)量的控制。而夏枯草中富含迷迭香酸，迷迭香酸具有很強(qiáng)的紫外線(xiàn)吸收能力和極強(qiáng)的抗氧化性及良好的熱穩(wěn)定性，其抗氧化活性強(qiáng)于綠原酸、阿魏酸、咖啡酸、維生素E等，具有抗血栓及血小板凝集作用，能增強(qiáng)血漿纖維蛋白溶解活性。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服上述缺點(diǎn)而提供的一種被檢組份含量高、穩(wěn)定性好，有利于對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行控制的夏枯草口服液含量測(cè)定方法。本發(fā)明的一種夏枯草口服液含量測(cè)定方法，包括如下步驟(1)迷迭香酸測(cè)定照高效液相色語(yǔ)法(中國(guó)藥典2005年版一部VID)測(cè)定；(2)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；曱醇-0.5%曱酸(40:60)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)330nm。理論板數(shù)按迷迭香酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3000;(3)對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取迷迭香酸對(duì)照品適量，力口50%曱醇制成每lml含0.2mg的溶液，即得；(4)供試品溶液的制備精密量取本品2ml，置25ml量瓶中，加50%曱醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得(5)測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。上述夏枯草口服液含量測(cè)定方法，其中夏枯草口服液每支(10ml)含夏枯草以迷迭香酸(C18H160J計(jì)，不得少于4.0mg。上述夏枯草口服液含量測(cè)定方法，還包括總黃酮測(cè)定的以下步驟(1)對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取在120。C減壓干燥至恒重的,丁對(duì)照品20mg，置10ml量瓶中，加曱醇5ml，置水浴上微熱使溶解，放冷，加曱醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得.(每lml中含,丁0.2mg);(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備:精密量取對(duì)照品溶液l.Oml、2.Oml、3.Oml、4.Oml、5.Oml與6.Oml,分別置25ml量瓶中，各加水至6ml，力。5%亞硝酸鈉溶液lml，混勻，；改置6分鐘，加10%硝酸鋁〉容液lml，搖勻，；故置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，再加水稀釋至刻度，搖勻，放置15分鐘，同時(shí)以相應(yīng)的試劑作空白；照分光光度法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VA)，在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；(3)測(cè)定法精密量取本品10ml,加水10ml，搖勻。用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)訒醮?0ml使溶解，定量轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。精密量取lml，置25ml量并瓦中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備項(xiàng)下的方法，自"加水至6ml"起依法測(cè)定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀出供試品溶液中相當(dāng)于蘆丁的重量，計(jì)算，即得。上述夏枯草口服液含量測(cè)定方法，其中夏枯草口服液每支(10ml)含總黃酮以蘆丁(G晶(,OJ計(jì)，不得少于50.0mg。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，由以上技術(shù)方案可知，對(duì)夏枯草口服液中含量高的迷迭香酸含量測(cè)定、檢測(cè)方法科學(xué)、迷迭香酸峰與其它峰有良好的分離。穩(wěn)定性好，有利于對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行控制。在同一體系中對(duì)總黃酮、迷迭香酸同時(shí)進(jìn)行含量測(cè)定，使得夏枯草口服液質(zhì)量更容易控制。圖1為迷迭香酸對(duì)照品線(xiàn)性關(guān)系圖之一；圖2為迷迭香酸對(duì)照品線(xiàn)性關(guān)系圖之二。具體實(shí)施方式以下通過(guò)實(shí)驗(yàn)例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明方法的有益效果。高效液相色i普4義，VWD4企測(cè)器，Agilent化學(xué)工作站。超聲波清洗器CX-250型(頻率29-34KHz，功率>250W,北京醫(yī)療i殳備二廠(chǎng))；電子天平(十萬(wàn)分之一)AE240型(Mettler公司)。2、對(duì)照品及試藥對(duì)照品迷迭香酸對(duì)照品(批號(hào)06111725)供含量測(cè)定用，純度按面積歸一化法檢測(cè)為97%,購(gòu)于上海同田生化技術(shù)有限公司。試劑曱醇為色譜純及分析純；曱酸為分析純；水為重蒸餾水。試藥夏枯草口服液樣品由貴陽(yáng)新天藥業(yè)股份有限公司提供。3、對(duì)照品溶液的制備對(duì)照品溶液①精密稱(chēng)取迷迭香酸對(duì)照品24.46mg，置50ml量瓶中，加50%曱醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含O.475mg的溶液(純度以97%計(jì))。對(duì)照品溶液②精密吸取上述對(duì)照品溶液20ml置50ml的量瓶中，加50%曱醇稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含O.19mg的溶液。4、色譜條件試驗(yàn)4.1色i普柱十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(AgilentC18，250mmx4.6mm，5jum)4.2流速1.Oml/min4.34全測(cè)波長(zhǎng)330nm(參照藥物分析雜志ChinJPharmAnal2006,3夏枯草中迷迭香酸含量分析方法研究)4.4柱溫25°C4.5流動(dòng)相原文獻(xiàn)中流動(dòng)相為曱醇-1%曱酸(40:60),在實(shí)際斗全測(cè)中發(fā)現(xiàn)該流動(dòng)相pH值低于2，超過(guò)色i普柱pH適用范圍，對(duì)柱子損傷較大，所以將其改為甲醇-O.5%曱酸(40:60)4.6供試品溶液的制備精密量取夏枯草口服液(20081204)2ml，置25ml量瓶中，加曱醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即3曰付》測(cè)定法分別4青密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10hi1,注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。結(jié)果供試品圖語(yǔ)中在與對(duì)照品相應(yīng)的時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)相應(yīng)的色譜峰，峰形良好，迷迭香酸峰與其它峰有良好的分離，說(shuō)明該條件適宜作為夏枯草口服液中迷迭香酸的含量測(cè)定。5、供試品溶液制備溶劑選擇試驗(yàn)方法一精密量取夏枯草口服液(20081204)2ml，置25ml量瓶中，加曱醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。方法二精密量取夏枯草口服液(20081204)2ml，置25ml量瓶中，加50%乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。方法三精密量取夏枯草口服液(20081204)2ml，置25ml量瓶中，加乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。方法四精密量取夏枯草口服液(20081204)2ml，置25ml量瓶中，加50%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。4青密吸取對(duì)照品溶液(0.19mg/ml)及上述供試品溶液各10ja1進(jìn)樣測(cè)定<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>結(jié)論從以上試驗(yàn)結(jié)果可以看出，各方法中，迷迭香酸峰與其它峰之間均有良好的分離，方法2、3含量無(wú)明顯變化，方法4含量最高，因此將方法4列入正文，即為精密量取本品2ml,置25ml量并瓦中'加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。6、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)及色譜柱耐用性試驗(yàn)6.1系統(tǒng)適用性試馬全精密量取本品2ral，置25ml量瓶中，力口50%曱醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；另取陰性樣品同法制成陰性樣品溶液。精密吸取對(duì)照品溶液(0.19mg/ml)、陰性樣品溶液和供試品溶液各10jLil注入液相色譜儀，記錄色譜圖。從色譜圖中可看出，供試品在與對(duì)照品保留時(shí)間相應(yīng)的位置上有峰，且峰形好，而陰性樣品在相應(yīng)的位置上無(wú)峰，說(shuō)明陰性樣品對(duì)樣品測(cè)定無(wú)干擾。樣品在圖譜中的迷迭香酸峰的理論板數(shù)為9368，與其它物質(zhì)有良好的分離，峰形好，綜合考慮，規(guī)定本實(shí)驗(yàn)的理論板數(shù)按迷迭香酸峰計(jì)算，應(yīng)不得低于3000。6.2色譜柱耐用性試驗(yàn)分別取上述供試品溶液、對(duì)照品溶液各10注入液相色語(yǔ)議，々別用Elite、迪馬、漢邦品牌色譜柱進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果如下<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>結(jié)果表明，以上三種品牌的色譜柱亦能檢測(cè)迷迭香酸含量，耐用性良好。7、線(xiàn)性關(guān)系試驗(yàn)對(duì)照品溶液①精密量取迷迭香酸對(duì)照品溶液②(C二0.19mg/ml)lml，置10ml量瓶中，加曱醇稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含O.019mg的溶液。對(duì)照品溶液②精密量取迷迭香酸對(duì)照品溶液①(C二O.475mg/ml)lml，置10ml量瓶中，力口甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含0.048mg的溶液。對(duì)照品;容液③耳又迷迭香酸對(duì)照品溶液②(C二O.19mg/ml)5ml，置10ml量弁瓦中，加甲醇稀壽奪至刻度，搖勻，即得每lml含O.095mg的溶液。對(duì)照品溶液④耳又對(duì)照品溶液②(C=0.19mg/ml)即得。對(duì)照品溶液⑤耳又對(duì)照品溶液①(C=0.475mg/ml)即得。精密吸取上述5個(gè)對(duì)照品溶液各10jul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果見(jiàn)下表序號(hào)12345對(duì)照品溶液濃度(mg7ml)0.0190.0480.0950.190.475峰面積388.60757912.343571834.399293682.570079163.59961以峰面積為縱坐標(biāo)，以濃度(mg/ml)為橫坐標(biāo)作線(xiàn)性關(guān)系圖參見(jiàn)圖1,得線(xiàn)性方程y二19282x+7.0437r=0.9999參見(jiàn)圖2，得線(xiàn)性方程y二19303xr二O.9999結(jié)果表明，迷迭香酸在濃度為0.019-0.475mg/ml范圍內(nèi)具有良好的線(xiàn)性關(guān)系；通過(guò)擬合后二方程之間的相對(duì)偏差小于1%,說(shuō)明該法適宜用外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行定量。8、精密度試驗(yàn)精密吸取迷迭香酸對(duì)照品溶液(OO.19mg/ml)10ju1，注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，結(jié)果見(jiàn)下表:序號(hào)123456峰面積3694.808593690.962163690.069093683.645263687.546393682,39624平均J"奪面積3688.23796RSD0.1%實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明.，該方法有良好的精密度。9、穩(wěn)定性試驗(yàn)精密量取本品(批號(hào)20081204)2ml，置25ml量瓶中，力。50%曱醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。分別精密吸取供試品溶液10jal，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，并將供試品溶液》文置0、2、4、8、12、24小時(shí)后，分別精密吸取供試品溶液10jil進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，結(jié)果見(jiàn)下表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>從上述試驗(yàn)結(jié)果得出，供試品溶液在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。10、重復(fù)性試驗(yàn)精密量取本品(批號(hào)20081204)2ml，置25ml，加50%稀釋至刻度,搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶液(濃度為0.19mg/ml)和5份供試品溶液各10ja1進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)下表:<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>通過(guò)上述試驗(yàn)結(jié)果得出，該方法的樣品重現(xiàn)性好。11、加樣回收率試驗(yàn)對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取迷迭香酸對(duì)照品12.41mg，置10ml量瓶中，力口50%曱醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含1.204mg的溶液。(迷迭香酸對(duì)照品以97%計(jì))精密量取本品(20081204)lml(平行樣6份)，置25ml量瓶中，再精密加入上述迷迭香酸對(duì)照品溶液(O1.204mg/ml)lml,力。50%曱醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。精密吸取迷迭香酸對(duì)照品溶液(00.19mg/ml)和上述6份供試品溶液各10(il，分別注入液相色譜儀，結(jié)果見(jiàn)下表回收率(％)=M測(cè)得總量^^M樣品中含迷迭香酸量M對(duì)照品加入量<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>回收率(％)跳2399.06跳2899.1399.55100.02平均回收率(%)99.7RSW0.5從上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出，該方法有良好的回收率。12、樣品含量測(cè)定及含量P艮度的制定按夏枯草藥材迷迭香酸含量測(cè)定的方法檢測(cè)三批原藥材的迷迭香酸含量，并按正文方法和條件;險(xiǎn)測(cè)該3批藥材分別對(duì)應(yīng)的夏枯草口服液成品的迷迭香酸含量，結(jié)果如下:原藥材批號(hào)原藥材含量對(duì)應(yīng)成品批號(hào)成品含量轉(zhuǎn)移率0706140.62%0707041.22mg/ml24.68%0706150.87%0708011.78mg/ml25.62%0706200.66%0708091.26mg/ml23.95%轉(zhuǎn)移率平均值24.8%根據(jù)三批大生產(chǎn)樣品含量與處方中夏枯草藥材中迷迭香酸的轉(zhuǎn)移率(24.8%)，確定本品含量限度為。藥材含量最低限度x處方量x轉(zhuǎn)移率x103含量限度=-^-批量0.2%x800gx24.8%x10j100支=4.0mg/支實(shí)施例一種夏枯草口服液含量測(cè)定方法，包括在同一體系中對(duì)總黃酮、迷迭香酸同時(shí)進(jìn)行含量測(cè)定，步驟如下(l)總黃酮對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取在120。C減壓干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品20mg,置10ml量瓶中，加曱醇5ml，置水浴上微熱使溶解，放冷，加曱醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每lml中含蘆丁0.2mg)。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備精密量取對(duì)照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.Oml、5.0ml與6.Oml,分別置25ml量瓶中，各加水至6ml，力。5%亞硝酸鈉溶液lml，混勻，》文置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液lml，搖勻，》文置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，再加水稀釋至刻度，搖勻，放置15分鐘，同時(shí)以相應(yīng)的試劑作空白。照分光光度法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VA)，在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為一黃坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。測(cè)定法4青密量取本品10ml，加水10ml，搖勻。用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?0ml使溶解，定量轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。精密量取lml，置25ml量瓶中，加水至6ml，加5%亞硝酸鈉溶液lml,混勻，放置6分鐘，加10。/。賄酸鋁溶液lml，搖勻，》t置6分鐘，加氬氧〗匕鈉試液10ml,再加水稀釋至刻度，搖勻，放置15分鐘，同時(shí)以相應(yīng)的試劑作空白。照分光光度法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VA),在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀出供試品溶液中相當(dāng)于蘆丁的重量，計(jì)算，即得。本品每支含總黃酮以蘆丁(C27H30016)計(jì)，不得少于50.0mg。(2)迷迭香酸照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部VID)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-O.5%曱酸(40:60)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)330nm。理論板數(shù)按迷迭香酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取迷迭香酸對(duì)照品適量，加50%曱醇制成每lml含0.2mg的溶液，即得。供試品溶液的制備精密量取本品2ml，置25ml量瓶中，加50°/0甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各lOul,注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品每支含夏枯草以迷迭香酸(d孔A)計(jì)，不得少于4.Omg。權(quán)利要求1、一種夏枯草口服液含量測(cè)定方法，包括如下步驟(1)迷迭香酸測(cè)定照高效液相色譜法測(cè)定；(2)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，40∶60的甲醇-0.5％甲酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)330nm。理論板數(shù)應(yīng)不低于3000；(3)對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取迷迭香酸對(duì)照品適量，加50％甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得；(4)供試品溶液的制備精密量取本品2ml，置25ml量瓶中，加50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得(5)測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。2、如權(quán)利要求1所述的夏枯草口服液含量測(cè)定方法，其中夏枯草口服液每支含夏枯草以迷迭香酸計(jì)，不得少于4.Omg。3、如權(quán)利要求1或2所述的夏枯草口服液含量測(cè)定方法，還包括總黃酮測(cè)定的以下步驟(1)對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取在120。C減壓干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品20mg,置10ml量瓶中，加曱醇5ml，置水浴上微熱使溶解，放冷，加曱醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每lml中含，丁0.2mg);(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備精密量取對(duì)照品溶液l.Oml、2.Oml、3.Oml、4.0ml、5.0ml與6.0ml,分別置25ml量瓶中，各加水至6ml，加5%亞硝酸鈉溶液lml，混勻，；故置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液lml,搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，再加水稀釋至刻度，搖勻，放置15分鐘，同時(shí)以相應(yīng)的試劑作空白；照分光光度法，在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；(3)測(cè)定法4青密量取本品10ml,加水10ml,搖勻。用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)訒醮?0ml使溶解，定量轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻；精密量取lml，置25ml量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備項(xiàng)下的方法，自加水至6ml起依法測(cè)定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀出供試品溶液中相當(dāng)于蘆丁的重量，計(jì)算，即得。4、如權(quán)利要求3所述的夏枯草口服液含量測(cè)定方法，其中夏枯草口服液每支含總黃酮以蘆丁計(jì)，不得少于50.Omg。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種夏枯草口服液含量測(cè)定方法，包括如下步驟照高效液相色譜法測(cè)定迷迭香酸；用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.5％甲酸(40∶60)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)330nm。理論板數(shù)應(yīng)不低于3000；精密稱(chēng)取迷迭香酸對(duì)照品適量，加50％甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得；精密量取本品2ml，置25ml量瓶中，加50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本發(fā)明被檢組份含量高、穩(wěn)定性好，有利于對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行控制。文檔編號(hào)A61K36/536GK101658550SQ20091010279公開(kāi)日2010年3月3日申請(qǐng)日期2009年9月24日優(yōu)先權(quán)日2009年9月24日發(fā)明者董大倫申請(qǐng)人:貴陽(yáng)新天藥業(yè)股份有限公司