專利名稱：載藥類脂微粒及其制備方法
載藥類脂微粒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物制劑學領(lǐng)域，更具體地說，本發(fā)明涉及一種載藥類脂微粒及其制 備方法。
背景技術(shù)：
類脂微粒是由類脂質(zhì)體衍化而來。類脂質(zhì)體亦稱泡囊(niosomes)，系指用非離子 型表面活性劑等類脂材料為囊材制成的單層或多層的新型藥物載體單層囊泡，其特點是穩(wěn) 定性高于脂質(zhì)體，可克服脂質(zhì)體因磷脂氧化而帶來的毒性，因而成為很有前途的新型藥物 的傳遞系統(tǒng)。類脂質(zhì)體用于包裹藥品，可減免或減少環(huán)境因素對藥品的影響，延長藥品在體內(nèi) 的有效作用時間，提高藥品在體內(nèi)的有效生物利用度，并可降低藥品的毒副作用，尤其適用 于具生物活性的大分子藥品及熱不穩(wěn)定藥品的靶向治療。近年隨著類脂材料的迅速發(fā)展，類脂質(zhì)體已經(jīng)發(fā)展成為類脂微粒，其范圍不僅限 于液體核心的類脂泡囊(即狹義的類脂質(zhì)體)，也有膠體為核心的類脂微球，還有氣體為核 心的類脂空泡。并且根據(jù)需要，類脂微?？梢詫⒘较薅ㄓ谖⒚准壔蚣{米級，尤其是納米級 類脂微粒在靶向控釋、增強藥物穩(wěn)定性、提高載藥量、批量化生產(chǎn)和滅菌等方面具有較明顯 的優(yōu)點。但是已有的類脂微粒一般是呈液體狀態(tài)，其保存、運輸?shù)染容^困難，易受環(huán)境條 件變化的影響而出現(xiàn)絮凝、聚團、沉淀、藥物滲漏等問題，且在體內(nèi)作用時間較短，影響制劑 的有效、安全和穩(wěn)定。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有的載藥類脂微粒及其制備方法的不足之處， 提供一種穩(wěn)定性高的載藥類脂微粒及其制備方法。我們在研究提高類脂微粒的有效性和穩(wěn)定性的實驗中發(fā)現(xiàn)，羥乙基淀粉包被的類 脂微粒具有較好的物理穩(wěn)定性，并且可以明顯提高光、熱敏感藥物的穩(wěn)定性，延長藥物的釋 放時間。進一步實驗發(fā)現(xiàn)，利用干燥工藝將羥乙基淀粉包被的載藥類脂微粒制成固體后， 便于制成各種制劑，也便于制劑的保存和運輸，增加制劑體內(nèi)外的穩(wěn)定性，延長體內(nèi)循環(huán)時 間。經(jīng)過多次試驗，為提高類脂微粒制劑的有效性、安全性和穩(wěn)定性，本發(fā)明采用了以 下的技術(shù)方案本發(fā)明的載藥類脂微粒含有類脂成分和羥乙基淀粉，類脂微粒中的類脂成分與羥 乙基淀粉之間可為任意比例，當類脂成分包括兩種或兩種以上時，它們之間也可為任意比 例，該類脂微粒的制備是將已制成的類脂微粒分散于含有羥乙基淀粉的水溶液中，或?qū)⒑?有類脂成分的溶液分散于含有羥乙基淀粉的水溶液中，經(jīng)干燥處理后可得到固態(tài)的類脂微 粒，藥物根據(jù)極性溶于有機溶液或水溶液中，可以同類脂成分和羥乙基淀粉一起制備成載藥類脂微粒，也可以利用被動載藥方式或主動載藥方式包裹到空白類脂微粒中。藥物根據(jù)極性溶于有機溶液或水溶液中，同類脂成分和羥乙基淀粉一起制備成載 藥類脂微粒是指，將溶有藥物的有機溶液或者水溶液加入到含有類脂成分的溶液中與含有 類脂成分的溶液一起分散于含有羥乙基淀粉的水溶液中；或者加入到含有羥乙基淀粉的水 溶液中，然后將已制成的類脂微粒分散于上述含有藥物與羥乙基淀粉的溶液中。上述的類脂成分選自藥學中公認類脂質(zhì)成分，包括硬脂酸及其甘油酯類、聚乳酸 及其酯類、12 30個碳的醇及其酯類、膽固醇及其衍生物、谷留醇及其衍生物、膽酸及其衍 生物，當類脂成分包括兩種或兩種以上時，它們之間可為任意比例。上述的含有類脂成分的溶液是指類脂成分的融熔溶液、有機溶液或水溶液。上述的羥乙基淀粉包括低分子量羥乙基淀粉、中分子量羥乙基淀粉與高分子量高 取代級的羥乙基淀粉。上述的干燥處理是指藥學上公認的干燥處理方式，包括冷凍干燥、噴霧干燥、減壓 干燥、低溫揮發(fā)或常壓干燥。上述的藥物是指醫(yī)學中公認具有治療、保健、美容作用的利用生物提取、化學合成 或生物技術(shù)得到的中藥、西藥和生物制品藥物，優(yōu)選難溶性藥物和生物大分子藥物。上述的類脂微粒是指由類脂材料形成的固體、液體或氣體為核心的微米級或納米 級囊泡結(jié)構(gòu)，包括微囊、微球、微泡、膠束、納米粒。上述的被動載藥方式是指用將空白類脂微粒加入到含有藥物的溶液中，藥物依靠 自身濃度梯度進入空白類脂微粒中形成載藥類脂微粒。上述的主動載藥方式是指利用硫酸銨離子濃度梯度或pH梯度驅(qū)使藥物進入空白 類脂微粒的方法，包括藥學上公認的PH梯度法和硫酸銨梯度法。上述的載藥類脂微?？蓡为殤没蚝嫌盟帉W上常用的助懸劑、穩(wěn)定劑、骨架支持 劑、表面活性劑、PH調(diào)節(jié)劑、抗氧化劑、等滲調(diào)節(jié)劑加入于注射劑、口服液體或固體制劑、皮 膚制劑、黏膜制劑、靶向制劑或生物制品中，發(fā)揮治療、保健、美容作用。本發(fā)明的類脂微粒具有以下優(yōu)點1.已有的類脂微粒在液體狀態(tài)時的穩(wěn)定時間短，易受環(huán)境條件變化的影響而出現(xiàn) 絮凝、聚團、沉淀等問題，而本發(fā)明的類脂微粒在液體狀態(tài)時的穩(wěn)定時間增長，絮凝、聚團、 沉淀等現(xiàn)象明顯得到抑制。2.本發(fā)明的類脂微?？梢蕴岣咚幬锇饴剩黠@減少包載藥物的滲漏，延長藥物 釋放，達到緩釋效果。3.本發(fā)明的類脂微粒制成固體后，便于藥物制成各種制劑，也便于制劑的保存和 運輸，增加制劑體內(nèi)外的穩(wěn)定性，延長藥物作用時間。4.本發(fā)明的類脂微粒適于包裹各種藥物，特別適用于難溶性藥物、熱敏感的藥物 和生物大分子藥物，并且適用劑型范圍廣，使用方便。
具體實施方式現(xiàn)結(jié)合下列實例來進一步描述本發(fā)明。以下通過幾個實施例來進一步說明本發(fā)明。實施例1 茶多酚類脂微?；鞈乙?br> 許多藥物對于光、熱條件敏感，在環(huán)境中放置很容易喪失藥效。例茶多酚，是從茶 葉中提取的多酚物質(zhì)，具有良好的抗突變、抗腫瘤、抗氧化、抗過敏、抗齲齒等多種藥理作 用，但自身對于熱敏感，極易氧化，是制劑生產(chǎn)中的棘手問題。本發(fā)明的第一個實施方案利 用茶多酚為靶藥，采用十六醇為類脂材料和中分子量羥乙基淀粉制備茶多酚類脂微粒。茶多酚類脂微粒混懸液的制備0. 5g羥乙基淀粉130/0. 4和5mg吐溫80溶解于 25ml蒸餾水中構(gòu)成水相，IOmg茶多酚和十六醇15mg溶解于20ml無水乙醇中，構(gòu)成有機相， 將有機相注入lOOOr/min攪拌的(25士2) ！的水相中，攪拌lOmin，形成類脂微粒混懸液，在 25°C水浴中減壓蒸發(fā)使有機溶媒完全蒸發(fā)并使體系濃縮至約25ml，即得茶多酚類脂微粒A 混懸液。同法制備不含茶多酚的空白類脂微?；鞈乙骸４送?，以0.5g聚乙二醇4000代替 0. 5g羥乙基淀粉130/0. 4，其余步驟同上述方法，制備茶多酚類脂微粒B (既不含羥乙基淀 粉的類脂微粒)混懸液。包封率測定取茶多酚類脂微?；鞈乙?ml，轉(zhuǎn)入離心管中應用IOOOOrpm離心 5min，類脂微粒沉淀于離心管底部，利用275nm波長紫外檢測離心后上清液中游離茶多酚 的紫外吸收值，代入茶多酚標準品制得的標準曲線中計算濃度，利用“包封率(％)=[(茶 多酚總量_游離茶多酚的量)/茶多酚總量]X 100”公式計算，未含茶多酚的類脂微粒為空 白組，用于校正紫外吸收值背景。茶多酚標準曲線稱取茶多酚標準品50mg，置50ml容量瓶中，乙醇加至刻度，溶 解搖勻，制成茶多酚標準品溶液(lmg/ml)，分別精密吸取茶多酚標準品溶液0.2、0.5、1、2、 4ml，于IOml容量瓶中，加水至刻度，搖勻，于275nm處的吸收度，得到茶多酚標準曲線。低溫放置考察茶多酚類脂微粒A和茶多酚類脂微粒B的樣品于10°C放置24h后， 進行形態(tài)觀察，并依據(jù)“包封率測定”方法測定包封率。形態(tài)觀察取一滴樣品涂布于載玻片上，顯微鏡下觀察，茶多酚類脂微粒A形態(tài)圓 整，顆粒分布均勻，無聚團或絮凝現(xiàn)象，放置24h后無顯著變化，有少量藥物結(jié)晶析出。茶多 酚類脂微粒B形態(tài)圓整，顆粒分布均勻，有少量藥物結(jié)晶析出，無明顯聚團或絮凝現(xiàn)象，但 是放置24h后，顆粒變得粗大，有聚團現(xiàn)象，并有大量藥物結(jié)晶析出。包封率結(jié)果茶多酚類脂微粒A的平均包封率為75%，放置24h后平均包封率為 65 %。茶多酚類脂微粒B的平均包封率為46 %，放置24h后平均包封率為22 %。結(jié)果顯示，本發(fā)明制備的含羥乙基淀粉的新型類脂微粒有效提高了藥物的包封 率，并延緩藥物滲漏，提高制劑的穩(wěn)定性。實施例2 茶多酚類脂微粒凍干品干燥的類脂微粒便于保存和運輸，熱穩(wěn)定性提高。本發(fā)明的第二個實施方案是利 用冷凍干燥工藝將第一個實施方案得到的茶多酚類脂微粒制成固體凍干品。茶多酚類脂微粒凍干品的制備第一個實施方案得到的茶多酚類脂微粒A和茶多 酚類脂微粒B的混懸液，分別加入50mg海藻糖作為凍干支持劑，轉(zhuǎn)入廣口瓶中，-20°C冷凍 lh，冷凍干燥(5X10-4Pa，20h)得到茶多酚類脂微粒A和茶多酚類脂微粒B得凍干粉。同 法制備不含茶多酚的空白類脂微粒凍干粉。包封率測定取凍干品用蒸餾水20ml溶解，輕微振搖，形成類脂微粒混懸液，取 2ml參照實施例1的方法測定包封率。高溫放置考察茶多酚類脂微粒A和茶多酚類脂微粒B的凍干品于30°C放置6個月后，參照實施例1的方法進行包封率測定和形態(tài)觀察。形態(tài)觀察茶多酚類脂微粒A形態(tài)圓整，顆粒分布均勻，無聚團或絮凝現(xiàn)象，30°C 放置6個月后無顯著變化。茶多酚類脂微粒B形態(tài)圓整，顆粒分布均勻，有少量藥物結(jié)晶析 出，無明顯聚團或絮凝現(xiàn)象，30°C放置6個月后，顆粒變得粗大，形態(tài)不圓整，有聚團現(xiàn)象， 有大量藥物結(jié)晶析出。包封率結(jié)果茶多酚類脂微粒A凍干品的平均包封率為85%，30°C放置6個月后 平均包封率為83%，無明顯變化。茶多酚類脂微粒B凍干品的平均包封率為55%，30°C放 置6個月后平均包封率降為42%。結(jié)果顯示，本發(fā)明制備的類脂微粒固體凍干品進一步提高了藥物在液態(tài)茶多酚類 脂微粒中的包封率，并提高了藥物對熱的穩(wěn)定性。實施例3 紫杉醇類脂微粒許多藥物需要發(fā)揮長效作用，以降低給藥次數(shù)。本發(fā)明的第三個實施方案利用抗 腫瘤藥物紫杉醇為靶藥，采用硬脂酸為類脂材料和高分子量高取代級的羥乙基淀粉制備長 效紫杉醇類脂微粒。紫杉醇類脂微粒的制備取IOmg紫杉醇、IOOmg硬脂酸和丙酮IOml加入25ml具 塞梨形瓶中，超聲使其充分溶解，構(gòu)成有機相。另取150mg泊洛沙姆188溶于30ml水中，構(gòu) 成水相。將有機相注入lOOOr/min攪拌的70°C的水相中，繼續(xù)攪拌4h，使丙酮完全蒸發(fā)并 使體系濃縮至約5ml，形成紫杉醇類脂微粒混懸液，等體積分成兩份溶液(2. 5ml/份)。取 2. 5ml紫杉醇類脂微?；鞈乙嚎焖偌尤氲?ml含IOOmg羥乙基淀粉480/0. 7的水溶液中， 700r/min繼續(xù)攪拌2h，即得紫杉醇類脂微?；鞈乙篈。另取2. 5ml紫杉醇類脂微粒混懸液 加入到5ml水中，得到紫杉醇類脂微?；鞈乙築。包封率測定取200 μ 1紫杉醇類脂微?；鞈乙荷蠘佑赟i^phadex GlOO柱上，以蒸 餾水為洗脫液，接取不同體積的洗脫部分，測定各洗脫部分中藥物的含量。將紫杉醇類脂 微粒混懸液用30% (體積分數(shù))乙腈水溶液溶解后，過濾，取續(xù)濾液進樣50μ1，用高效液 相法檢測其中紫杉醇的含量，液相條件流動相，乙腈水=7 3(體積比)，檢測波長= 227nm，流速=1. Oml · min-1。藥物釋放測定將半透膜于蒸餾水中浸泡24h后，置于釋放池的中間固定。取紫杉 醇類脂微?；鞈乙河卺尫懦氐纳喜?，下部充滿30% (體積分數(shù))乙醇水溶液的釋放液。整 個裝置置于37 0C的恒溫水浴中。分別于0. 5、1、2、4、8、12、16、24h吸取下部溶液100 μ 1，然 后再補充100 μ 1釋放液。用高效液相法測定不同時間點釋放液中藥物的含量，高效液相條 件同上。藥物釋放結(jié)果紫杉醇類脂微粒A和紫杉醇類脂微粒B的平均包封率均為77%， 藥物累積釋放率結(jié)果見表1。結(jié)果顯示，本發(fā)明制備的含羥乙基淀粉的新型類脂微粒延緩了 藥物的釋放速度，延長制劑的藥效。表1紫杉醇類脂微粒藥物累積釋放率結(jié)果 實施例4 納米級莪術(shù)油類脂微粒植物揮發(fā)油等許多液態(tài)難溶性藥物，不適宜直接制成各類制劑。本發(fā)明的第四個 實施方案以液態(tài)難溶性藥物莪術(shù)油為靶藥，采用類脂材料單硬脂酸甘油酯和低分子量羥乙 基淀粉制備納米級莪術(shù)油類脂微粒，便于其制成各類制劑。納米級莪術(shù)油類脂微粒的制備取莪術(shù)油3g和單硬脂酸甘油酯lg，在75°C水浴 下，加熱至完全熔融，作為油相。稱取3g明膠和0. 5g吐溫80溶于IOml蒸餾水中，水浴加 熱至與油相溫度相同，作為水相。在3000r/min攪拌條件下，用預熱過的注射器將油相緩慢 滴加于水相中，并高速攪拌lh，形成初乳。將所得初乳在75°C、120Pa條件下，高壓乳勻3 次，然后迅速冷至室溫，得到乳光明顯的納米級莪術(shù)油類脂微?；鞈乙?，用激光散射粒度測 定儀測定其粒徑，加入含2g羥乙基淀粉40的25ml水溶液中，混合均勻，噴霧干燥(進風溫 度140°C)得到莪術(shù)油類脂微粒淡黃色粉末，流動性良好，取該粉末0. Ig加水IOml溶解，用 激光散射粒度測定儀測定其粒徑。以乳糖代替羥乙基淀粉，用量相同，同法制備納米級莪術(shù)油類脂微粒。結(jié)果莪術(shù)油類脂微?；鞈乙毫狡骄禐?25nm，粒徑分布較窄，加入羥乙基淀 粉后噴霧干燥得到的莪術(shù)油類脂微粒粒徑平均值為147nm，粒徑分布較窄，兩者無顯著性差 異；但是以乳糖代替羥乙基淀粉噴霧干燥得到的莪術(shù)油類脂微粒粒徑平均值為1.5μπι，粒 徑明顯增大。結(jié)果表明本發(fā)明制備的莪術(shù)油類脂微粒，改善了藥物的性狀，增加了藥物的分散 度，提高藥物制成各類制劑的便利性，也便于藥物制劑的保存和運輸。實施例5 鹽酸阿霉素類脂微粒本發(fā)明的第五個實施方案采用類脂材料膽固醇和中分子量羥乙基淀粉，利用ρΗ 梯度法制備了鹽酸阿霉素類脂微粒。
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鹽酸阿霉素類脂微粒的制備將20mg膽固醇用IOml氯仿溶解，于旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)器 上減壓除氯仿，形成膽固醇薄膜，加入含有IOmg吐溫80的15ml 0. 3Mol/L檸檬酸溶液(pH 4.0)水化膽固醇薄膜，振搖，攪拌，形成較粗糙的類脂體微?；鞈乙?將類脂體微粒混懸液 在120Pa條件下，高壓乳勻3次，通過0. 22Lm微孔濾膜過濾，加入15mg鹽酸阿霉素，并用 IMol/L Na2HP04將pH值調(diào)至7. 0, 55°C水浴保溫20min，加入含IOOmg羥乙基淀粉130/0. 4 的水溶液5ml，混合均勻，即得鹽酸阿霉素類脂微粒。包封率測定參考文獻戚洪，李煥秋，蘇德森等.氨甲喋呤多相脂質(zhì)體的包封率 測定與滲漏研究.藥學學報.1987，22(1) :48，用S印hadex G-25微型柱分離得到包載鹽 酸阿霉素的類脂微粒，用混合溶媒(10%triton X-100/乙醇/水=1 14 35，V/V)溶 解包載鹽酸阿霉素的類脂微粒，于480nm測吸收度，代入鹽酸阿霉素標準曲線，利用“包封 率(％)=[(類脂微粒包載的鹽酸阿霉素量)/鹽酸阿霉素總量]X 100”公式計算鹽酸阿 霉素類脂微粒的包封率。鹽酸阿霉素類脂微粒樣品25°C放置2h后再次測定包封率。鹽酸阿霉素標準曲線精密稱取鹽酸阿霉素標準品，用混合溶媒(10% tritonX-100/乙醇 / 水=1 14 35,V/V)配制成 0. 25、0. 5，1. 0，2. 0，5. Omg/ml 的系列 標準溶液，于480nm測吸收度，得到鹽酸阿霉素濃度與吸收度的標準曲線。結(jié)果鹽酸阿霉素類脂微粒包封率平均值為90%，25°C放置2h后包封率平均值為 87 %。結(jié)果表明本發(fā)明制備的鹽酸阿霉素類脂微粒體外泄漏較少，能夠保證臨床應用需要。在上述實施例中，僅對本發(fā)明進行了示范性描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員在閱讀本 專利申請后可以在不脫離本發(fā)明的精神和范圍的情況下對本發(fā)明進行各種修改。
權(quán)利要求
一種載藥類脂微粒，其特征在于所述類脂微粒中含有類脂成分和羥乙基淀粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的載藥類脂微粒，其特征在于所述類脂成分選自藥學中公認 類脂質(zhì)成分，包括硬脂酸及其酯類、聚乳酸及其酯類、12 30個碳的醇及其酯類、膽固醇及 其衍生物、谷留醇及其衍生物、膽酸及其衍生物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的載藥類脂微粒，其特征在于所述羥乙基淀粉包括低分子量 羥乙基淀粉、中分子量羥乙基淀粉與高分子量高取代級的羥乙基淀粉。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的載藥類脂微粒，其特征在于所述類脂微粒是指由類脂材料 形成的固體、液體或氣體為核心的微米級或納米級囊泡結(jié)構(gòu)，包括微囊、微球、微泡、膠束、 納米粒。
5.一種載藥類脂微粒制備方法，其特征在于該制備方法包括步驟(a)將已制成的類脂微粒分散于含有羥乙基淀粉的水溶液中，或?qū)⒑蓄愔?分的溶液分散于含有羥乙基淀粉的水溶液中，經(jīng)干燥處理后可得到固態(tài)的類脂微粒；步驟(b)藥物根據(jù)極性溶于有機溶液或水溶液中，同類脂成分和羥乙基淀粉一起制 備成載藥類脂微粒，或利用被動載藥方式或主動載藥方式將藥物包裹到空白類脂微粒中。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的載藥類脂微粒制備方法，其特征在于所述含有類脂成分的 溶液是指類脂成分的融熔溶液、有機溶液或水溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的載藥類脂微粒制備方法，其特征在于所述干燥處理是指藥 學上公認的干燥處理方式，包括冷凍干燥、噴霧干燥、減壓干燥、低溫揮發(fā)或常壓干燥。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的載藥類脂微粒制備方法，其特征在于所述的藥物是指醫(yī)學 中公認具有治療、保健、美容作用的利用生物提取、化學合成或生物技術(shù)得到的中藥、西藥 和生物制品藥物，優(yōu)選難溶性藥物和生物大分子藥物。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的載藥類脂微粒制備方法，其特征在于所述被動載藥方式是 指用將空白類脂微粒加入到含有藥物的溶液中，藥物依靠自身濃度梯度進入空白類脂微粒 中形成載藥類脂微粒。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的載藥類脂微粒制備方法，其特征在于所述主動載藥方式是 指利用硫酸銨離子濃度梯度或PH梯度驅(qū)使藥物進入空白類脂微粒的方法，包括藥學上公 認的PH梯度法和硫酸銨梯度法。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種載藥類脂微粒及其制備方法。該類脂微粒除含有類脂成分外，還含有保證類脂微粒結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的羥乙基淀粉。利用該類脂微粒包載藥物，提高類脂微粒在液體狀時的穩(wěn)定時間，抑制絮凝、聚團、沉淀等現(xiàn)象，減少包載藥物的滲漏，延長藥物釋放。將該類脂微粒干燥處理制成固體后，便于藥物制成各種制劑，也便于制劑的保存和運輸，增加制劑體內(nèi)外的穩(wěn)定性。本發(fā)明的類脂微粒適于包裹各種藥物，特別適用于難溶性藥物、熱敏感的藥物和生物大分子藥物，并且適用劑型范圍廣。
文檔編號A61K9/50GK101926773SQ20091010819
公開日2010年12月29日 申請日期2009年6月25日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月25日
發(fā)明者趙應征, 魯翠濤 申請人:浙江海正藥業(yè)股份有限公司