專利名稱：1-(肉桂?；?-4-烷基酰胺哌嗪化合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，尤其涉及1_(肉桂酰基)-4-烷基酰胺哌嗪化合物及其制備 方法。
背景技術(shù)：
心腦血管疾病是一種嚴重威脅人類，特別是50歲以上中老年人健康的常見病，即 使應(yīng)用目前最先進、完善的治療手段，仍可有50%以上的腦血管意外幸存者生活不能完全 自理！全世界每年死于心腦血管疾病的人數(shù)高達1500萬人，居各種死因首位。心腦血管疾 病已成為人類死亡病因最高的頭號殺手，也是人們健康的“無聲兇煞”！心腦血管疾病具有“發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高、復(fù)發(fā)率高，并發(fā)癥多”-“四高 一多”的特點，心腦血管疾病是目前第一位的死亡病因，是嚴重威脅我國人民健康的常見病 和多發(fā)病，選擇有效而安全的治療藥物是臨床醫(yī)生面臨的重要課題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一類新的、對心腦血管疾病有治療作用的1_(肉桂酰 基)-4_烷基酰胺哌嗪化合物及其制備方法及其藥理學(xué)接受的鹽，以及制備方法以及作為 治療心腦血管疾病的藥物中應(yīng)用。本發(fā)明提供的1_(肉桂?；?-4_哌啶基酰胺哌嗪化合物具有如下結(jié)構(gòu)式(I) 以及藥學(xué)上可接受的鹽等， 目前很多的血管擴張劑的藥效及副作用有待改善，本發(fā)明者對血管擴張劑進行了 研究，得到了成果，前面所述的一般通式(I)所表示的新化合物1-(肉桂?；?-4-烷基酰 胺哌嗪化合物置換的藥學(xué)上可接受的鹽是對腦、末梢、冠狀血管的優(yōu)秀擴張劑，本發(fā)明在醫(yī) 學(xué)上非常有效。本發(fā)明在制備步驟中，哌嗪的用量和肉桂酸酰氯的當(dāng)量比不少于1當(dāng)量以上，哌 嗪最好為2-3個當(dāng)量。使用的有機溶媒如水、乙醇、乙醚、甲苯、氯仿、二氯甲烷、苯、乙酸乙 酯等。室溫至回流反應(yīng)，最好回流。本發(fā)明前面所述的通式(I)所表示的藥學(xué)上可接受的鹽如硝酸、硫酸、溴化氫、 碘化氫、磷酸等形成的鹽或者馬來酸、富馬酸、檸檬酸、草酸酒、石酸等有機酸形成的鹽。最好是馬來酸鹽和富馬酸鹽。本發(fā)明前面所述的通式(I)的1_(肉桂?；?-4_哌啶基酰胺哌嗪化合物及制備 方法。本發(fā)明的通式⑴的制備，2-氯-N烷基乙酰胺與肉桂酸哌嗪物的反應(yīng)其用量不少 于1當(dāng)量以上，最好是1. 01 1. 3當(dāng)量在無水溶媒中反應(yīng)。本發(fā)明使用的有機溶媒如乙醇、乙醚、甲苯、氯仿、二氯甲烷、苯、乙酸乙酯等。本發(fā) 明所使用的脫酸劑如三乙胺、卩比唳、碳酸鈉、碳酸氫鈉等。反應(yīng)溫度為室溫至回流，最好是室
ilm ο合成路線如下 其中 本發(fā)明的1_(肉桂?；?-4_哌啶基酰胺哌嗪化合物在治療心腦血管疾病的藥物 中的應(yīng)用。本發(fā)明的有益效果本發(fā)明所提供的化合物(I)及其制備方法不使用有毒的有機 溶劑，所用低毒或無毒溶劑均可回收利用，也不使用其他對環(huán)境不友好的試劑。該化合物對 心腦血管疾病有較好的治療作用，詳見下述的藥物學(xué)實驗。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例子，進一步闡明本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā) 明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī) 條件，或按照制造廠商所建議的條件。實施例1肉桂酰氯的制備將9克肉桂酸和50毫升二氯甲烷混合，加入0.02毫升二甲基甲酰胺，冰浴下 0-5°C，滴加7克二氯亞砜和50毫升二氯甲烷混合物，加畢，冰浴下反應(yīng)1小時，室溫反應(yīng)6 小時，常壓下蒸餾二氯甲烷至干，得產(chǎn)物9. 5克，備用。實施例2肉桂酰哌嗪的制備將15克無水哌嗪加入到50毫升二氯甲烷中，清，冰浴，控制內(nèi)溫0_5°C，滴加由 9. 5克肉桂酰氯和50毫升二氯甲烷配成的溶液，加畢，冰浴下反應(yīng)1小時，室溫反應(yīng)12小 時，有固體物析出，冰浴降溫至0°c，加入50毫升水?dāng)嚢瑁?0分鐘后，清，分出有機層，再用水 50毫升洗有機層，有機層無水硫酸鈉干燥12小時，減壓回收二氯甲烷至干，得一油狀物肉桂酰哌嗪10. 2克，備用。實施例32-氯-N-環(huán)丙基乙酰胺的制備將環(huán)丙胺15克、甲苯60毫升混合，攪拌下將氯乙酰氯16克與甲苯120毫滴加完 畢，室溫反應(yīng)一小時，濾出固體，濾液濃縮至干，得到淺黃色油11. 2克，固化，石油醚重結(jié) 晶，得2-氯-N-環(huán)丙基乙酰胺10. 1克，熔點82-84°C。實施例41-(肉桂酰基)-4_(環(huán)丙胺乙?；?哌嗪的制備將2-氯-N-環(huán)丙胺乙酰胺10克和60毫升二氯甲烷混合，冰浴5_10度，加入三乙 胺6克，滴加肉桂酰哌嗪9克和45毫升二氯甲烷混合物，加畢，室溫反應(yīng)1小時，回流反應(yīng)6 小時，有固體物析出，冰浴降溫至0°C，加入50毫升水?dāng)嚢瑁?0分鐘后，分出有機層，再用水 50毫升洗有機層，有機層無水硫酸鈉干燥12小時，減壓回收二氯甲烷至干，得固體物10. 5 克，乙醇-乙酸乙酯混合溶劑重結(jié)晶，得一白色結(jié)晶1_(肉桂?；?_4-(環(huán)丙胺乙酰基)哌 嗪，熔點 126-128°C。實施例51-(肉桂?；?-4_(環(huán)丙胺乙酰基)哌嗪馬來酸鹽的制備1_(肉桂?；?-4_(環(huán)丙胺乙?；?哌嗪5克溶于25毫升無水乙醇中，馬來酸2. 5 克溶于10毫升無水乙醇中，將1-(肉桂酰基)-4-(哌啶乙?；?哌嗪溶液加到馬來酸溶 液中，室溫靜置12小時，析出結(jié)晶，過濾得到無色結(jié)晶5. 5克.無水乙醇重結(jié)晶，得4. 8克 1-(肉桂酰基)_4-(環(huán)丙胺乙?；?哌嗪馬來酸鹽白色結(jié)晶，熔點138-140°C實施例62-氯-N-環(huán)戊基乙酰胺的制備參照例3方法將環(huán)戊胺17克、甲苯60毫升混合，攪拌下將氯乙酰氯18克與甲苯 120毫升參考例1得到無色結(jié)晶2-氯-N-環(huán)戊基乙酰胺12. 74克。熔點80-82°C實施例71-(肉桂?；?-4_(環(huán)戊胺乙?；?哌嗪的制備參照例4方法，乙醇-乙酸乙酯重結(jié)晶得到無色結(jié)晶1_(肉桂?；?-4_(環(huán)戊胺 乙?；?哌嗪4. 28克，熔點:120-122°C實施例81-(肉桂?；?-4_(環(huán)戊胺乙酰基)哌嗪馬來酸鹽的制備1-(肉桂?；?-4-(環(huán)戊胺乙酰基)哌嗪3. 0克馬來酸1. 0克參考例5得到無色 結(jié)晶1_(肉桂?；?_4-(環(huán)戊胺乙?；?哌嗪馬來酸鹽2. 82克，熔點90-93°C實施例92-氯-N-苯乙基乙酰胺的制備將苯乙胺9. 7克、氯乙酰氯13克，參考例1得到無色結(jié)晶2-氯_N_苯乙基乙酰胺 9. 18 克，熔點67-68°C實施例101-(肉桂?；?-4-(苯乙胺乙?；?哌嗪的制備參照例4方法，乙醇_乙酸乙酯重結(jié)晶得到無色結(jié)晶得1_(肉桂?；?_4-(苯乙胺乙酰基)哌嗪11. 28克，熔點130-132°C實施例111-(肉桂?；?-4-(苯乙胺乙?；?哌嗪馬來酸鹽的制備1_(肉桂?；?-4_(苯乙胺乙?；?哌嗪2. 75克馬來酸0.7克參考例5得到無色 結(jié)晶1_(肉桂?；?_4-(苯乙胺乙?；?哌嗪馬來酸鹽3. 1克，熔點138-140°C。本發(fā)明的圖譜分析(一)1_(肉桂?；?-4-(環(huán)丙胺乙?；?哌嗪馬來酸鹽為下述的受試藥11H-NMR (400MHz, DMS0) 8 ppmO. 42 0. 46 (m, 2H)，0. 63 0. 67 (m, 2H)，2. 65 2. 69 (m, 1H)，2. 96 (br, 4H)，3. 40 3. 50 (m, 2H)，3. 88 (br, 4H)，6. 10 (s, 2H)，7. 24 (d, 1H, J = 15. 2)，7. 35 7. 42 (m, 3H) 7. 51 (d, 1H, J = 15. 2)，7. 69 7. 71 (m, 2H)，8. 29 (br, 1H)(二)1_(肉桂?；?-4_(環(huán)戊胺乙?；?哌嗪馬來酸鹽為下述的受試藥21H-NMR (400MHz, DMS0) 8 ppml. 34 1. 43 (m，2H)，1. 49 1. 55 (m, 2H)，1. 58 1. 64 (m, 2H)，1. 77 1. 85 (m, 2H)，3. 01 (br, 4H)，3. 30 (br, 2H)，3. 57 3. 88 (br, 4H)，4. 00 4. 06 (m, 1H), 6. 09 (s, 2H), 7. 25 (d, 1H, J = 15. 2), 7. 37 7. 42 (m，3H)，7. 51 (d，1H，J = 15. 2)，7. 69 7. 71 (m, 2H)，8. 21 (br, 1H)(三)1_(肉桂酰基)-4_(苯乙胺乙?；?哌嗪馬來酸鹽，為下述的受試藥31H-NMR(400MHz, DMS0) 8 ppm2. 73 2. 76(t,4H) ,2. 84(br,6H) ,3. 35 3. 40 (q, 4H)，6. 12 (s, 2H)，7. 18 7. 22 (q, 3H)，7. 26 7. 31 (m, 3H)，7. 37 7. 43 (m, 3H)，7. 50 (d, 1H, J = 15. 6)，7. 70 7. 72 (m, 2H)本發(fā)明的藥物學(xué)實驗一、實驗摘要小鼠尾靜脈注射受試藥，分別采用斷尾法和玻片法，測定小鼠出血和凝血時間；以 星形膠質(zhì)細胞為研究對象，測定受試藥對星形膠質(zhì)細胞糖攝取的影響；采用含2mM連二亞 硫酸鈉的無糖EBSS(Earle’s Balanced Salt)作為造模液，建立星形膠質(zhì)細胞和PC12細胞 擬缺血再灌損傷模型，以MTT法檢測細胞存活率；建立線栓法致大鼠局灶性中動脈梗塞模 型(MCA0)，觀察受試藥對MCA0大鼠神經(jīng)行為學(xué)評分、腦梗死率及腦含水量的影響。試驗結(jié)果表明，受試藥3高劑量組小鼠尾出血時間顯著延長(p < 0. 01)；受試藥 3高劑量組小鼠凝血時間顯著延長(P < 0. 05)；受試藥1-3高劑量組均能極顯著提高星形 膠質(zhì)細胞葡萄糖消耗量(P < 0. 01, p < 0. 01, p < 0. 01)；受試藥3高劑量組能顯著提高星 形膠質(zhì)細胞擬缺血再灌損傷后細胞存活率(P < 0. 01)；受試藥1低劑量組能顯著提高PC12 擬缺血再灌損傷后細胞存活率(p<0.05)；受試藥3可顯著提高MCA0大鼠的腦卒中行為 評分(P < 0. 01)、顯著降低MCA0大鼠的腦梗死體積(p < 0. 01)；顯著降低MCA0大鼠的腦 含水量(p < 0. 01)。二.實驗?zāi)康耐ㄟ^采用斷尾法和玻片法，觀察受試藥1-3對小鼠出血和凝血時間的影響；以星 形膠質(zhì)細胞及PC12細胞為研究對象，觀察受試藥對星形膠質(zhì)細胞糖攝取及星形膠質(zhì)細胞 和PC12細胞擬缺血再灌損傷的影響；以及觀察受試藥對MCA0大鼠神經(jīng)行為學(xué)評分、腦梗死 率及腦含水量的影響，為臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。三.實驗材料
1.藥物與試劑名稱受試藥1_(肉桂?；?-4_(環(huán)丙胺乙酰基)哌嗪馬來酸鹽，受試藥2—— 1"(肉桂?；?-4-(環(huán)戊胺乙?；?哌嗪馬來酸鹽，受試藥3——1-(肉桂?；?-4-(苯乙 胺乙?；?哌嗪馬來酸鹽提供單位福州璐珈醫(yī)藥科技有限公司溶劑0. 9%氯化鈉注射液，安徽雙鶴藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號080929配制方法將受試化合物臨用前用0. 9%氯化鈉注射液稀釋至所需濃度的溶液。陽性藥馬來酸桂哌齊特注射液，北京四環(huán)制藥有限公司，批號20090205葡萄糖測定試劑盒上海榮盛生物技術(shù)有限公司，批號200901072.實驗儀器680酶聯(lián)免疫檢測儀，BI0-RAD公司3..試驗動物昆明種小白鼠，雌雄各半，18 22g。SD大鼠，雄性，體重250 300g，四.實驗方法與結(jié)果1.小鼠出血凝血時間試驗采用斷尾法，取健康昆明種小鼠72只，隨機分為9組。分別為生理鹽水組 (control)、陽性藥馬來酸桂哌齊特組(12mg/kg，6mg/kg)、受試藥酰胺哌嗪化合物no. 1、 no. 2,no. 3組(12mg/kg，6mg/kg)。給藥體積為0. 12ml/20g體重。將小鼠放置于固定器中， 尾靜脈注射后lOmin，將其尾部垂直，用mm尺測量，并在距尾尖3mm處作標記，然后用手術(shù)剪 在鼠尾標記處剪斷，待血液自行溢出開始計時，每隔30s用濾紙吸去血滴1次，直至血液自 然停止(濾紙吸時無血為止)，即為出血時間。用秒表記錄出血時間。采用玻片法，取健康小鼠72只，隨機分為9組。分別為生理鹽水組(control)、 陽性藥馬來酸桂哌齊特組(12mg/kg，6mg/kg)、受試藥酰胺哌嗪化合物no. 1、no. 2、no. 3組 (12mg/kg，6mg/kg)。給藥體積為0. 12ml/20g體重。尾靜脈注射lOmin后，將內(nèi)徑為1mm的 玻璃毛細管插入小鼠眼眶內(nèi)，使血自動流出，棄去第一滴血，再分別滴血于清潔載玻片的兩 端，血滴直徑為5 10mm立即開始計時，此后每隔30s用干燥針頭挑動血液1次，至針頭能 挑起纖維蛋白絲為止，即為凝血時間。另一滴血供最后復(fù)試。結(jié)果見表1 2。表1酰胺哌嗪化合物對小鼠尾出血時間的影響 注各給藥組與正常對照組比較*P < 0. 05 < 0. 01表2顯示，與正常對照組相比，陽性藥高低劑量組小鼠凝血時間顯著延長(p < 0. 01，p < 0. 05)；受試藥3高劑量組小鼠凝血時間顯著延長(P < 0. 05)。2.糖攝取試驗培養(yǎng)細胞按1 X 105/ml密度接入96孔板中，每孔200 U l,48h后選取生長狀態(tài)良 好的細胞，隨機分組，分別為正常對照組，陽性藥馬來酸桂哌齊特組(H= lmM,L = 0. ImM), 受試藥1-3組(H = lmM,L = 0. ImM)，每組設(shè)無細胞空白孔。將原培養(yǎng)液換出，加入無血清 的含藥或不含藥的MEM培養(yǎng)液，分別于培養(yǎng)24h后采用葡萄糖氧化酶法測定培養(yǎng)液中葡萄 糖含量的變化值(GC)；在葡萄糖消耗實驗24h孵育結(jié)束后，將待測培液移出，換入含0. 5mg/ ml MTT的無血清培養(yǎng)液孵育4h，吸棄原培養(yǎng)液，每孔加入100 ill DMS0，混勻后置酶標儀上 于492nm處測0D值(MTT)，以0D值反映細胞活性和數(shù)量的多少；以GC/MTT表示單位細胞 的糖消耗量。每組設(shè)3個復(fù)孔，實驗重復(fù)三次。結(jié)果見表3。表3酰胺哌嗪化合物對星形膠質(zhì)細胞糖攝取的影響(x士SD，n = 3) 注各給藥組與正常對照組比較*P < 0. 05 < 0. 01表1顯示，與正常對照組相比，陽性藥高低劑量組小鼠尾出血時間顯著延長(p < 0. 01，p < 0. 01)；受試藥3高劑量組小鼠尾出血時間顯著延長(P < 0. 01)。表2酰胺哌嗪化合物對小鼠尾凝血時間的影響
注各給藥組與對照組比較*P < 0. 05 < 0. 01表3顯示，與對照組相比，陽性藥高低劑量組預(yù)作用24h能顯著提高星形膠質(zhì)細胞 葡萄糖消耗量(p < 0. 01，p < 0. 05)；受試藥1-3高劑量組預(yù)作用24h均能極顯著提高星 形膠質(zhì)細胞葡萄糖消耗量(p < 0. 01，p < 0. 01，p < 0. 01)。3.細胞缺氧缺糖試驗采用含2mM連二亞硫酸鈉的無糖EBSS(Earle，s Balanced Salt)作為造模液，培 養(yǎng)細胞按1 X 105/ml密度接入96孔板中，每孔200 yl，48h后選取生長狀態(tài)良好的細胞進 行實驗，藥物設(shè)置2個給藥劑量組(H = 0. 5mM, L = 0. 05mM)，正常對照組給予含等體積空 白溶媒的完全DMEM培養(yǎng)基。藥物預(yù)作用24h，吸棄原培養(yǎng)液，PBS輕洗一次，模型及給藥組 加入含2mM連二亞硫酸鈉的無糖EBSS，對照孔中加入含5. 5mM D-Glucose不含連二亞硫酸 鈉的EBSS，于37°C，5% C02孵箱中作用2h(以上為缺氧缺糖處理)，取出，吸棄原培養(yǎng)基， PBS輕洗一次，換入不含連二亞硫酸鈉，含5. 5mM D-Glucose的低糖培養(yǎng)基，繼續(xù)于37°C， 5% C02孵箱中孵育22h(以上為再給氧處理)，以MTT法檢測細胞存活率。以正常對照組 0D492值均數(shù)為100%，計算各孔細胞存活率(％ )=各孔0D492值/正常對照組0D492值 均數(shù)X100。實驗結(jié)果表示與正常組相比，星形膠質(zhì)細胞擬缺血再灌損傷后細胞存活率顯 著降低(P < 0. 01)；與模型組相比，陽性藥組預(yù)作用24h能顯著提高星形膠質(zhì)細胞擬缺血 再灌損傷后細胞存活率(P < 0. 05)；受試藥3高劑量組預(yù)作用24h能顯著提高星形膠質(zhì)細 胞擬缺血再灌損傷后細胞存活率(p < 0. 01)。實驗結(jié)果表示與正常組相比，PC12細胞擬缺血再灌損傷后細胞存活率顯著降低 (p < 0. 01)；與模型組相比，陽性藥組預(yù)作用24h能顯著提高PC12細胞擬缺血再灌損傷后 細胞存活率(P < 0. 01)；受試藥1低劑量組預(yù)作用24h能顯著提高PC12擬缺血再灌損傷 后細胞存活率(P < 0. 05)。4.大鼠局灶性中動脈梗塞模型(MCA0)試驗4. 1動物分組及藥物干預(yù)取健康SD大鼠30只，隨機分為5組。分別為偽手術(shù)組(sham)、模型組(model)、 陽性藥馬來酸桂哌齊特組(12mg/kg)、受試藥酰胺哌嗪化合物no. 1、no. 2、no. 3組(12mg/ kg)。各治療組于再灌時治療給藥，尾靜脈注射陽性藥及受試藥1-4，對照組灌胃給予空白溶 媒，給藥體積為lml/100g體重。4. 2線栓法致大鼠局灶性中動脈梗塞模型(MCA0)建立
Sprague-Dawley大鼠術(shù)前12h禁食，不禁水，于室溫22 °C條件下3 %水合氯醛 (300mg/kg)i.p.麻醉，仰臥手術(shù)臺上頸部正中切口，暴露右側(cè)頸總動脈，向外牽引二腹肌及 胸鎖乳突肌，由頸總動脈分叉處向頭端依次游離，結(jié)扎并剪斷頸外動脈的分支枕骨下動脈 和甲狀腺上動脈，在頸外動脈遠端結(jié)扎，切斷頸外動脈使其主干游離備用，然后分離頸內(nèi)動 脈，用絲線在頸外動脈根部打一松扣，夾閉頸總動脈和頸內(nèi)動脈。將尼龍線(長4cm，直徑 0. 26mm)經(jīng)頸外動脈主干切口，緩慢向頸內(nèi)動脈入顱方向推進，以頸總動脈分叉處為標記， 推進18mm左右時感到阻力，即達到了較細的大腦前動脈內(nèi)，阻斷了 MCA的所有血供來源，扎 緊頸外動脈根部松扣。6小時后，拔出尼龍線，扎緊動脈殘端?？p合皮膚，完成MCA0導(dǎo)致局 灶性腦缺血_再灌模型。假手術(shù)組大鼠麻醉后，僅暴露頸內(nèi)外動脈分叉，不閉塞MCA。尼龍栓子的制備將一長40mm，直徑0. 26mm的尼龍線的一端加熱為光滑的球形。 用酒精擦干凈并于距球端18mm處標記，置生理鹽水中備用。4. 3神經(jīng)行為學(xué)評分根據(jù)Longa的神經(jīng)功能缺損5分制標準，于缺血再灌注22h后進行神經(jīng)功能評分。0分無神經(jīng)系統(tǒng)功能缺損癥狀，活動正常；1分提尾懸空時，動物的手術(shù)對側(cè)前肢表現(xiàn)為腕肘屈曲，肩內(nèi)旋，肘外展，緊貼胸 壁；2分爬行時出現(xiàn)向非手術(shù)側(cè)轉(zhuǎn)圈(追尾現(xiàn)象)；3分行走時身體向偏癱側(cè)傾倒；4分不能自發(fā)行走，意識喪失。結(jié)果顯示，與偽手術(shù)組相比，模型組極顯著降低MCA0大鼠的腦卒中行為評分(p <0.01)。與模型組相比，陽性藥組顯著提高MCA0大鼠的腦卒中行為學(xué)評分(p<0.01)； 受試藥3可顯著提高MCA0大鼠的腦卒中行為評分(p < 0. 01)4. 4腦梗死體積計算MCAO 24h后，斷頭處死大鼠，取出全腦，稱濕重。在視交叉及其前后各2mm處，做 冠狀切為6片，第2，4，6片迅速置于1 % 2，3，5-三苯氯化四氮唑(TTC)磷酸緩沖液中避光 60°C孵育10分鐘，每隔3 4分鐘翻動一次，正反兩面由數(shù)碼相機拍攝照片輸入電腦，用 image J影象分析系統(tǒng)處理測定梗塞體積百分比。結(jié)果顯示，與偽手術(shù)組相比，模型組大鼠的 腦梗死體積顯著增高(P < 0. 01)。與模型組相比，陽性藥組顯著降低MCA0大鼠的腦梗死體 積(p < 0. 01)；受試藥3可顯著降低MCA0大鼠的腦梗死體積(p < 0. 01)。4. 5腦含水量測定將染色后的腦組織置于110°C烘干至恒重，對比大腦濕重求出腦含水量按照公式 計算腦組織含水量(％) = (1-腦組織干重/腦組織濕重)x 100%。結(jié)果顯示，與偽手術(shù) 組相比，模型組大鼠的腦含水量顯著增高(P < 0.01)。與模型組相比，陽性藥組顯著降低 MCA0大鼠的腦含水量(p<0.01)；受試藥3可顯著降低MCAO大鼠的腦含水量(p < 0. 01)。五.實驗結(jié)論小鼠出血和凝血時間試驗結(jié)果表明，受試藥3高劑量組可顯著延長小鼠尾出血 時間(P < 0. 01)；受試藥3高劑量組可顯著延長小鼠凝血時間(P < 0. 05)；糖攝取試驗 結(jié)果表明，受試藥1-3高劑量組均能極顯著提高星形膠質(zhì)細胞葡萄糖消耗量(p < 0. 01，p < 0. 01，p < 0. 01)；細胞缺糖缺氧試驗表明，受試藥3高劑量組能顯著提高星形膠質(zhì)細胞擬缺血再灌損傷后細胞存活率(P < 0. 01)；受試藥1低劑量組能顯著提高PC12擬缺血再 灌損傷后細胞存活率(p<0.05)；通過建立大鼠MCA0模型，發(fā)現(xiàn)受試藥3可顯著提高MCA0 大鼠的腦卒中行為評分(P <0.01)、顯著降低MCA0大鼠的腦梗死體積(p<0.01)；顯著降 低MCA0大鼠的腦含水量(p < 0. 01)。參考文獻1.國家藥典委員會.中國藥典，I部[S].北京化學(xué)工業(yè)出版社，2005 :229.2. Longa EZ, ffeinstein PR, Carlson S, et, al. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats[J]. Stroke. 1989 ；20 :843.楊桂枝，高小平，晏菊芳，歐可群。G0D-P0D法微量化測定方法的建立及其在 3T3-L1脂肪細胞和H印G2細胞糖消耗中的應(yīng)用[J]。四川解剖學(xué)雜志。2003;11:12-1權(quán)利要求
一種由下式(I)表示的1 (肉桂酰基) 4 烷基酰胺哌嗪化合物及藥學(xué)上可接受的鹽其中R為F2009101120512C0000011.tif,F2009101120512C0000012.tif
2.根據(jù)權(quán)利要求1的1_(肉桂?；?-4-哌啶基酰胺哌嗪化合物，其特征在于藥學(xué)上可 接受的鹽為其中有一種選自硝酸、硫酸、溴化氫、碘化氫、磷酸所形成的鹽或者其中有一種 選自馬來酸、富馬酸、檸檬酸、草酸酒、石酸中的有機酸所形成的鹽。
3.—種心腦血管疾病治療的藥物，其特征在于包含有效量的權(quán)利要求1所述的化合物 作為有效成分的藥物。
4.權(quán)利要求1或2所述的1-(肉桂?；?-4-哌啶基酰胺哌嗪化合物的制備方法，包括 以下步驟1)肉桂酰氯的制備，將化學(xué)計量的肉桂酸和二氯甲烷溶劑混合，加入二甲基甲酰胺， 冰浴下滴加二氯亞砜和二氯甲烷混合物，加畢，冰浴反應(yīng)后再室溫反應(yīng)，常壓下蒸餾二氯 甲烷至干，得產(chǎn)物肉桂酰氯；2)肉桂酰哌嗪的制備，將化學(xué)計量的無水哌嗪加入到二氯甲 烷中，在冰浴下滴加肉桂酰氯和二氯甲烷配成的溶液，加畢，冰浴反應(yīng)后再室溫反應(yīng)，有固 體物析出，冰浴加入水?dāng)嚢瑁殖鲇袡C層，再用水洗有機層，有機層干燥后減壓回收二氯甲 烷溶劑至干，得一油狀物肉桂酰哌嗪；3) 2-氯-N-環(huán)丙基乙酰胺的制備，將環(huán)丙胺、甲苯混 合，攪拌下將氯乙酰氯與甲苯滴加完畢，室溫反應(yīng)后濾出固體，濾液濃縮至干，重結(jié)晶，得 2-氯-N-環(huán)丙基乙酰胺；4)1-(肉桂?；?-4-(環(huán)丙胺乙酰基)哌嗪的制備，將2-氯-N-環(huán) 丙胺乙酰胺和二氯甲烷混合，冰浴下加入三乙胺，滴加肉桂酰哌嗪和二氯甲烷混合物，加 畢，室溫反應(yīng)后再回流反應(yīng)，有固體物析出，冰浴下加入水?dāng)嚢?，分出有機層，再用水洗有機 層，有機層干燥，減壓回收二氯甲烷溶劑至干，得固體物，重結(jié)晶，得一白色結(jié)晶1_(肉桂酰 基)-4_(環(huán)丙胺乙?；?哌嗪；5)1-(肉桂?；?-4-(環(huán)丙胺乙酰基)哌嗪馬來酸鹽的制 備，1_(肉桂酰基)_4-(環(huán)丙胺乙?；?哌嗪溶于無水乙醇中，馬來酸溶于無水乙醇中，將 1-(肉桂?；?_4-(環(huán)丙胺乙酰基)哌嗪溶液加到馬來酸溶液中，室溫靜置后析出結(jié)晶，過 濾得到無色結(jié)晶，重結(jié)晶，得白色結(jié)晶1_(肉桂?；?_4-(環(huán)丙胺乙?；?哌嗪馬來酸鹽。
5.權(quán)利要求1或2所述的1-(肉桂酰基)-4-哌啶基酰胺哌嗪化合物的制備方法，包括 以下步驟1)肉桂酰氯的制備，將化學(xué)計量的肉桂酸和二氯甲烷溶劑混合，加入二甲基甲酰胺， 冰浴下滴加二氯亞砜和二氯甲烷混合物，加畢，冰浴反應(yīng)后再室溫反應(yīng)，常壓下蒸餾二氯 甲烷至干，得產(chǎn)物肉桂酰氯；2)肉桂酰哌嗪的制備，將化學(xué)計量的無水哌嗪加入到二氯甲 烷中，在冰浴下滴加肉桂酰氯和二氯甲烷配成的溶液，加畢，冰浴反應(yīng)后再室溫反應(yīng)，有固 體物析出，冰浴加入水?dāng)嚢?，分出有機層，再用水洗有機層，有機層干燥后減壓回收二氯甲 烷溶劑至干，得一油狀物肉桂酰哌嗪；3) 2-氯-N-環(huán)戊基乙酰胺的制備，將環(huán)戊胺、甲苯混合，攪拌下將氯乙酰氯與甲苯滴加完畢，室溫反應(yīng)后濾出固體，濾液濃縮至干，重結(jié)晶，得 2-氯-N-環(huán)戊基乙酰胺；4)1-(肉桂酰基)-4-(環(huán)戊胺乙?；?哌嗪的制備，將2-氯-N-環(huán) 戊基乙酰胺和二氯甲烷混合，冰浴下加入三乙胺，滴加肉桂酰哌嗪和二氯甲烷混合物，加 畢，室溫反應(yīng)后再回流反應(yīng)，有固體物析出，冰浴下加入水?dāng)嚢?，分出有機層，再用水洗有機 層，有機層干燥，減壓回收二氯甲烷溶劑至干，得固體物，重結(jié)晶，得一無色結(jié)晶1_(肉桂酰 基)-4_(環(huán)戊胺乙?；?哌嗪；5)1-(肉桂?；?-4-(環(huán)戊胺乙?；?哌嗪馬來酸鹽的制 備，1_(肉桂?；?_4-(環(huán)戊胺乙?；?哌嗪溶于無水乙醇中，馬來酸溶于無水乙醇中，將1-(肉桂?；?_4-(環(huán)戊胺乙酰基)哌嗪溶液加到馬來酸溶液中，室溫靜置后析出結(jié)晶，過 濾得到無色結(jié)晶，重結(jié)晶，得無色結(jié)晶1_(肉桂?；?_4-(環(huán)丙胺乙?；?哌嗪馬來酸鹽。
6.權(quán)利要求1或2所述的1-(肉桂?；?-4-哌啶基酰胺哌嗪化合物的制備方法，包括 以下步驟1)肉桂酰氯的制備，將化學(xué)計量的肉桂酸和二氯甲烷溶劑混合，加入二甲基甲酰胺，冰 浴下滴加二氯亞砜和二氯甲烷混合物，加畢，冰浴反應(yīng)后再室溫反應(yīng)，常壓下蒸餾二氯甲烷 至干，得產(chǎn)物肉桂酰氯；2)肉桂酰哌嗪的制備，將化學(xué)計量的無水哌嗪加入到二氯甲烷中， 在冰浴下滴加肉桂酰氯和二氯甲烷配成的溶液，加畢，冰浴反應(yīng)后再室溫反應(yīng)，有固體物析 出，冰浴加入水?dāng)嚢?，分出有機層，再用水洗有機層，有機層干燥后減壓回收二氯甲烷溶劑 至干，得一油狀物肉桂酰哌嗪；3) 2-氯-N-苯乙基乙酰胺的制備，將苯乙胺、甲苯混合，攪拌 下將氯乙酰氯與甲苯滴加完畢，室溫反應(yīng)后濾出固體，濾液濃縮至干，重結(jié)晶，得無色晶體2-氯-N-苯乙基乙酰胺；4)1-(肉桂酰基)-4-(苯乙胺乙?；?哌嗪的制備，將2-氯-N-苯 乙基乙酰胺和二氯甲烷混合，冰浴下加入三乙胺，滴加肉桂酰哌嗪和二氯甲烷混合物，加 畢，室溫反應(yīng)后再回流反應(yīng)，有固體物析出，冰浴下加入水?dāng)嚢?，分出有機層，再用水洗有機 層，有機層干燥，減壓回收二氯甲烷溶劑至干，得固體物，重結(jié)晶，得一無色結(jié)晶1_(肉桂酰 基)-4-(苯乙胺乙?；?哌嗪；5)1-(肉桂?；?-4-(苯乙胺乙酰基)哌嗪馬來酸鹽的制 備，1_(肉桂酰基)_4-(苯乙胺乙?；?哌嗪溶于無水乙醇中，馬來酸溶于無水乙醇中，將 1-(肉桂?；?_4-(苯乙胺乙?；?哌嗪溶液加到馬來酸溶液中，室溫靜置后析出結(jié)晶，過 濾得到無色結(jié)晶，重結(jié)晶，得1_(肉桂?；?_4-(苯乙胺乙酰基)哌嗪馬來酸鹽。
7.權(quán)利要求1或2所述的1-(肉桂?；?-4-哌啶基酰胺哌嗪化合物在治療心腦血管 疾病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種1-(肉桂?；?-4-烷基酰胺哌嗪化合物及其制備方法，由下式(I)表示的化合物及藥學(xué)上可接受的鹽其中R為本發(fā)明所提供的化合物(I)的制備方法不使用有毒的有機溶劑，所用低毒或無毒溶劑均可回收利用，也不使用其他對環(huán)境不友好的試劑。該化合物對心腦血管疾病有較好的治療作用。
文檔編號A61P9/00GK101928265SQ20091011205
公開日2010年12月29日 申請日期2009年6月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月24日
發(fā)明者林開喜, 謝開書, 謝開智, 謝梅芳 申請人:謝開智