專利名稱::濱蒿提取物及其生產(chǎn)方法和應用的制作方法
技術領域:
:本發(fā)明涉及從植物中提取的提取物及其生產(chǎn)方法和應用的
技術領域:
,是一種濱蒿提取物及其生產(chǎn)方法和應用的
技術領域:
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背景技術:
:流感是由流感病毒引起的急性呼吸道傳染病,在流行病學上表現(xiàn)為發(fā)病率高、起病迅速、傳染力強并伴有一定的死亡率(嬰幼兒及年老體弱、免疫或心肺功能不全者,感染流感病毒后常繼發(fā)細菌性感染,特別易引起肺炎,常危及生命)。全球每年約有5億人感染流感病毒,每10-30年就會爆發(fā)一次流感大流行,并由此帶來巨大的社會負擔和經(jīng)濟損失,可以說流感是人類社會迄今為止最大的瘟疫。流感病毒分甲、乙、丙三個血清型,其中甲型流感病毒是引起流感的主要病原,乙型流感病毒感染呈散在爆發(fā)或小規(guī)模流行,丙型流感病毒致病力低、危害相對較小。流感病毒可使機體各個部分發(fā)生病理變化,病毒不僅在呼吸道上皮細胞內繁殖而引起流感,還可在呼吸道以外的組織內繁殖引起多系統(tǒng)的損害。流感病毒侵入呼吸道之后,大量繁殖并且因上呼吸道粘膜穿透性增高而進入血液,此時若機體免疫力較弱,當有大量病毒存在時,就不易被破壞和中和,可隨血液循環(huán)傳播至全身,在上皮及內皮組織內大量繁殖而引起各個組織發(fā)生病變,并因病毒酶性產(chǎn)物能損傷紅血球膜和血管內皮細胞,以致引起極其嚴重的病變。目前,接種流感疫苗是預防流感的主要方法,但由于流感病毒的基因突變率很高,原來有效的疫苗對新的變異株往往失效或無效,人類無法通過注射疫苗獲得持久的免疫力。而新的變異株可能傳播力更強,甚至引起大流行。針對流感病毒變異株,在新的疫苗產(chǎn)生之前,抗病毒藥物對高危人群的保護尤為重要。乙型肝炎是由乙肝病毒感染引起的傳染性疾病,屬世界性的流行病,我國是高地方流行區(qū),在全球3.5億乙肝病毒感染者中,中國人占三分之一。自六十年代起逐漸累積的慢性肝病已導致我國每年有數(shù)百萬人死于肝硬化和原發(fā)性肝癌。乙型肝炎的流行不僅嚴重危害人類健康,而且引發(fā)了許多社會問題,乙肝病毒感染者因疾病恐慌、就業(yè)歧視、經(jīng)濟負擔等多重壓力,生存狀態(tài)令人擔憂。乙型肝炎的流行是當今最為突出的公共衛(wèi)生問題之一,雖然近年來疫苗計劃免疫己開始控制感染的擴散,但由于社會和經(jīng)濟方面的原因,全面普及計劃免疫在我國還無法實現(xiàn),因此,抗乙肝病毒藥物有著巨大的市場空間。令人擔憂的是,抗乙肝病毒藥物的研發(fā)至今未取得理想的進展,乙型肝炎的防治已成為世界性的醫(yī)學難題。到目前為止,在臨床公認有效的抗乙肝藥只有拉米夫定和干擾素。干擾素曾作為唯一的抗乙肝病毒藥物歷經(jīng)20年,但其臨床適應癥窄,不能直接滅活病毒,停藥后易復發(fā);在適應癥內進行規(guī)范治療的情況下,也只有30%至50%的有效率,其中仍有近20%在停藥后復發(fā),而且?guī)缀跛械挠盟幷叨伎赡馨l(fā)生不良反應;此外,價格昂貴、注射給藥途徑是其在臨床難以推廣的重要原因。1998年,拉米夫定在臨床應用中被發(fā)現(xiàn)對乙肝病毒有顯著的抑制作用,于是,在長期毒性和致癌性的動物實驗數(shù)據(jù)尚不充分的情況下,就被美國食品藥品監(jiān)督管理局批準用于治療乙型肝炎。拉米夫定口服吸收好,可特異性抑制乙肝病毒的復制,改善癥狀和體征,但其治療周期長,費用高,且對病毒的抑制也是可逆的,停藥后易反彈,甚至可導致病情惡化,長期應用后耐藥率接近70%,近幾年臨床用量已逐漸下降。目前己上市的中藥抗乙肝制劑,大都是通過保肝降酶、免疫調節(jié)而發(fā)揮間接的治療作用,雖可緩解癥狀、改善肝功能,但由于直接抗病毒作用弱,臨床療效均不理想。愛滋病是由愛滋病毒感染引起的一種全身性免疫功能喪失綜合癥,人體感染愛滋病毒后免疫功能被逐漸破壞,最終繼發(fā)危及生命的各類并發(fā)癥。由于愛滋病疫苗的研制一直沒有取得突破性的進展,這種疾病的擴散無法得到有效的控制,其在全球范圍內的傳播速度驚人,給人類健康造成巨大威脅。鑒于艾滋病的嚴重危害,許多國家對抗艾滋病藥物的研制非常重視,自九十年代起,以齊多夫定為代表的核苷類似物因對艾滋病毒有明顯的抑制作用而陸續(xù)上市,在臨床用于艾滋病的治療。近年來國外開發(fā)上市的化學藥也為數(shù)不少,并通過多種作用機制對控制艾滋病的發(fā)展起到一定了的作用,但臨床療效和安全性都不容樂觀。在艾滋病疫苗的研制方面,雖然投入巨大,卻歷經(jīng)挫折,目前成功的希望依然渺茫。由于所有病毒均依賴宿主細胞進行復制和增殖,它們一方面干擾宿主細胞的代謝,一方面又與宿主共存亡,所以既能有效地殺滅病毒,同時又能使人體細胞免受傷害是現(xiàn)代科學還有待解決的難題。目前在國際上已得到廣泛認可的抗病毒藥中,利巴韋林對流感病毒有明顯的抑制活性,干擾素和拉米夫定對乙肝病毒有明顯的抑制作用,但在臨床使用中均存在一些無法克服的問題,如適應癥有限,療效不理想、副作用大或易產(chǎn)生耐藥性等;治療艾滋病的主打藥物齊多夫定有明顯的骨髓抑制作用,長期服用后艾滋病毒可對其逐漸產(chǎn)生耐藥性。可以說到目前為止,還沒有一種理想的抗病毒藥物上市。病毒性疾病的防治已成為國際醫(yī)學界的重大難題之一,特別是流感、乙型肝炎和艾滋病,更是人類長期以來一直無法有效控制的世界性瘟疫。因此,開發(fā)高效、廣譜、低毒的抗病毒藥物是迫切需要取得突破的科研課題。與西藥相比,中藥在治療病毒性疾病方面有其獨到之處,有些中藥成分不僅可直接抑制病毒的復制,還能通過調節(jié)機體免疫功能間接控制病情,并促進機體清除病毒。因此中藥抗病毒研究在國際上越來越受重視。濱蒿Mrte/ffiw'sscoparisfeJo^.et為菊科蒿屬植物,維吾爾名"西瓦克",是維吾爾醫(yī)傳統(tǒng)用藥,性質二級干熱。具有清熱解毒、開竅化痰、消敗津、除積物等功效。據(jù)報道,濱蒿中含有多種化學成分,主要有黃酮、色原酮、香豆素、揮發(fā)油、有機酸、萜類等。目前,從濱蒿及其同屬植物中制備提取物,以開發(fā)抗病毒藥物的研究在國內外未見報道,采用大孔樹脂技術和/或聚酰胺樹脂從濱蒿及其同屬植物中分離純化黃酮類成分的研究亦未見正式報道。
發(fā)明內容本發(fā)明提供了--種應用于制備廣譜抗病毒藥物的濱蒿提取物及其生產(chǎn)方法和應用,其克服了現(xiàn)有技術之不足,其濱蒿提取物含有25%至75%的黃酮類成分;該濱蒿提取物的生產(chǎn)方法首次應用大孔樹脂和/或聚酰胺樹脂吸附分離技術從濱蒿粗提物中分離純化濱蒿中的黃酮類成分;該濱蒿提取物特別適用于制備治療流感和/或乙型肝炎和/或愛滋病等疾病的廣譜抗病毒藥物。本發(fā)明的技術方案之一是通過以下方式得到的一種應用于制備廣譜抗病毒藥物的濱蒿提取物,該濱蒿提取物含有25%至75%的黃酮類成份。下面是對上述技術方案之一的進一步優(yōu)化和/或選擇該濱蒿提取物按下述步驟得到第一歩,濱蒿地上部分或全草以水和/或乙醇粗提,其中,水粗提為將濱蒿地上部分或全草加8倍至10倍量水,在8(TC至IO(TC下提取兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液;乙醇粗提為將濱蒿地上部分或全草加8倍至10倍量30%至90%的乙醇,在6(TC至8(TC提取兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液;第二步,將上述濾液濃縮至原體積的三分之一,加相當于濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇,放置沉淀12小時至24小時,濾除沉淀得到乙醇溶液;第三歩,將上述乙醇溶液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上大孔樹脂和/或聚酰胺樹脂層析柱吸附;其中,所用大孔樹脂為弱極性大孔樹脂,弱極性大孔樹脂選用D-101、HPD400、AB-8型大孔樹脂中的一種;大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合使用時,按重量比1比1進行混合;第四歩,以相當于3至8個層析柱體積的去離子水沖洗上述層析柱,再以10%至90%的乙醇為洗脫劑進行梯度洗脫,每濃度洗脫劑的用量相當于3至8個層析柱體積,流速為2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液并合并;第五歩,將上述合并后的乙醇洗脫液在6(TC至9(TC下濃縮,回收乙醇,再在5(TC至80"C下減壓干燥,即得到所需的濱蒿提取物。本發(fā)明的技術方案之二是通過以下方式得到的一種上述濱蒿提取物的生產(chǎn)方法按下述歩驟進行第一歩,濱蒿地上部分或全草以水和/或乙醇粗提;第二步,加乙醇沉淀粗提物中的雜質;第三歩,以大孔樹脂和/或聚酰胺樹脂吸附粗提物中的總黃酮,其中,所用大孔樹脂為弱極性大孔樹脂,弱極性大孔樹脂選用D-101、HPD400、AB-8型大孔樹脂中的一種;大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合使用時,按重量比l比l進行混合;第四步,用乙醇從大孔樹脂和/或聚酰胺樹脂上洗脫總黃酮得到洗脫液;第五步,將洗脫液濃縮并回收乙醇,再減壓干燥,即得濱蒿提取物。下面是對上述技術方案之二的進一步優(yōu)化和/或選擇在上述第一歩中,將濱蒿的地上部分或全草加8倍量至10倍量水在8(TC至IO(TC下提取兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液?;蛘撸谏鲜龅?.歩中,將濱蒿的地上部分或全草加8倍量至10倍量30%至90%的乙醇在60'C至8(TC提取兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液。在上述第二歩中,將濾液濃縮后加相當于濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇,放置沉淀12小時至24小時,濾除沉淀得到乙醇溶液。在上述第三歩中,將乙醇溶液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)ra值為3至6,上大孔樹脂層析柱吸附,其中,所用大孔樹脂為弱極性大孔樹脂,弱極性大孔樹脂選用D-101、HP畫、AB-8型大孔樹脂中的一種?;蛘撸谏鲜龅谌龤i中,將乙醇溶液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上聚酰胺樹脂層析柱吸附?;蛘撸谏鲜龅谌龤i中,將乙醇溶液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱吸附;其中,所用大孔樹脂為弱極性大孔樹脂,弱極性大孔樹脂選用D-101、HPD400、AB-8型大孔樹脂中的一種,大孔樹脂與聚酰胺樹脂按重量比1比1混合使用。在上述第四歩中,以相當于3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%至90%的乙醇為洗脫劑進行梯度洗脫,每濃度洗脫劑的用量相當于3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液并合并。在上述第五歩中,將合并的乙醇洗脫液在6(rC至9(TC下濃縮,并回收乙醇,再在50。C至8(TC下減壓干燥,即得到所需的濱蒿提取物。本發(fā)明的技術方案之三是通過以下方式得到的大孔樹脂在濱蒿提取物生產(chǎn)方法中的應用。下面是對上述技術方案之三的進一步優(yōu)化和/或選擇上述所用大孔樹脂為弱極性大孔樹脂,弱極性大孔樹脂選用D-101、HPD400、AB-8型大孔樹脂中的一種。本發(fā)明的技術方案之四是通過以下方式得到的聚酰胺樹脂在濱蒿提取物生產(chǎn)方法中的應用。本發(fā)明的技術方案之五是通過以下方式得到的上述濱蒿提取物應用于制備廣譜抗病毒藥物。下面是對上述技術方案之四的進一步優(yōu)化和/或選擇上述濱蒿提取物用于制備針對流感病毒和/或乙肝病毒和/或艾滋病毒的廣譜抗病毒藥物。本發(fā)明濱蒿提取物具有顯著的抗流感病毒、乙肝病毒及愛滋病毒作用,且口服給藥安全,可用于制備廣譜抗病毒藥物;本發(fā)明首次提出濱蒿總黃酮提取物具有廣譜抗病毒作用;并在該濱蒿提取物的生產(chǎn)方法中首次應用大孔樹脂和/或聚酰胺樹脂吸附分離技術,從濱蒿粗提物中富集濱蒿中的黃酮類成分,并得到總黃酮含量達25%至75%的提取物。該生產(chǎn)方法簡單易行,工藝可靠,所得提取物中總黃酮含量穩(wěn)定;生產(chǎn)中所使用的材料可通過乙醇回收和樹脂再生循環(huán)利用,生產(chǎn)成本低,適合產(chǎn)業(yè)化。具體實施例方式本發(fā)明不受下述實施例的限制,可根據(jù)上述本發(fā)明的技術方案和實際情況來確定具體的實施方式。下面結合實施例對本發(fā)明作進一歩論述。通過下述實施例對本發(fā)明濱蒿提取物進行詳細說明實施例1:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于8(TC至10(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例2:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于8(TC至10(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)ra值為3至6,上AB-8型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5CTC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例3:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水IO(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)m值為3至6,上AB-8型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為2個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6crc至9crc濃縮,濃縮液再于50"c至scrc減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,所用大孔吸附樹脂選用D-201、D-301、HPD400、HPD600、AB-8等型號的大孔樹脂中的一種。實施例4:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30y。的乙醇于6(TC至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)ra值為3至6,上AB-8型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于60'C至9(TC濃縮,濃縮液再于5CTC至80°C減壓千燥,即得濱蒿提取物。實施例5:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇6(TC至80。C煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至80'C減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例6:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30y。的乙醇6(TC至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8CTC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例7:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50y。的乙醇6(TC至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70°/。、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6crc至9crc濃縮,濃縮液再于5crc至so°c減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例8:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50。/。的乙醇6(TC至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例9:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50。/。的乙醇6(TC至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為5至10個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至80r減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例10:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70%的乙醇6(TC至80。C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70°/。、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8CTC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例ll:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量7(^的乙醇6(TC至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至80°C減壓千燥,即得濱蒿提取物。實施例12:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例13:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于8(TC至IO(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例14:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80'C至IO(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)ra值為3至6,上HPD400型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9CTC濃縮,濃縮液再于50。C至80。C減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例15:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水IOO'C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為2個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓千燥,即得濱蒿提取物。其中,所用大孔吸附樹脂選用D-201、D-301、HPD400、HPD600、AB-8等型號的大孔樹脂中的一種。實施例16:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇于60。C至80。C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于60。C至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓千燥,即得濱蒿提取物。實施例17:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)ra值為3至6,上HPD400大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例18:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6CTC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至80°C減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例19:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50%的乙醇6CTC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于60'C至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8CTC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例20:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50%的乙醇60'C至80'C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于50。C至80°C減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例21:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50%的乙醇60'C至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為5至IO個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于50。C至80'C減壓千燥,即得濱蒿提取物。實施例22:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(rC濃縮,濃縮液再于5(TC至80°C減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例23:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70%的乙醇6CTC至80。C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至80°C減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例24:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70%的乙醇60'C至8(TC煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于50'C至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例25:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80'C至IO(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于6CTC至9(TC濃縮,濃縮液再于50'C至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例26:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于8CTC至IOO'C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例27:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水10(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)ra值為3至6,上D-IOI型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為2個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于60。C至90'C濃縮,濃縮液再于5(TC至8CTC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,所用大孔吸附樹脂選用D-201、D-301、HPD400、HPD600、AB-8等型號的大孔樹脂中的一種。實施例28:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30y。的乙醇于6(TC至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至80'C減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例29:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇6(TC至8CTC煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例30:濱蒿地上部分加8倍量至io倍量3cm的乙醇6(rc至8(rc煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6CTC至90'C濃縮,濃縮液再于5(TC至80°C減壓千燥,即得濱蒿提取物。實施例31:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6or至9crc濃縮,濃縮液再于5crc至8crc減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例32:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50%的乙醇6(TC至80。C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至90'C濃縮,濃縮液再于5(TC至80°C減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例33:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50%的乙醇6(TC至8CTC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為5至IO個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至80'C減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例34:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70%的乙醇6(TC至80'C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6crc至9crc濃縮,濃縮液再于5crc至scrc減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例35:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量7(^的乙醇6(TC至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓千燥,即得濱蒿提取物。實施例36:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70y。的乙醇6(rC至8(TC煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-IOI型大孔樹脂層析柱,13待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于50。C至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例37:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于8(TC至IO(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)ra值為3至6,上AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例38:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于8(TC至IO(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上八B-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至90。C濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例39:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水10(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為2個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5CTC至8()'C減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為l比l。實施例40:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30。/。的乙醇于6(TC至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)ra值為3至6,上AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比l。實施例41:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量3(F。的乙醇6(TC至8(rC煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于50'C至80'C減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例42:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇60'C至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例43:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例44:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50°/。的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)ra值為3至6,上AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為l比l。實施例45:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50%的乙醇6(TC至80。C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為5至IO個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例46:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70。/。的乙醇6(TC至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例47:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70%的乙醇6CTC至8CTC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至80'C減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例48:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量7(E的乙醇6(TC至8(rC煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積Z小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于50x:至8crc減壓千燥,即得濱蒿提取物。其中,AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例49:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于8(TC至10(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90。/。的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例50:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于8(TC至10(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至90'C濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例51:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水10(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為2個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于60'C至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8CTC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,AB-8型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比l。實施例52:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇于6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于60'C至9(TC濃縮,濃縮液再于50。C至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比l。實施例53:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇6(TC至80。C煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于50。C至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例54:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇6CTC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5CTC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為l比l。實施例55:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50%的乙醇6CTC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至90'C濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例56:濱蒿地上部分加8倍量至io倍量5(m的乙醇6(rc至8(rc煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于60。C至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例57:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50%的乙醇6(TC至80'C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為5至IO個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8CTC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比l。實施例58:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于50'C至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比l。實施例59:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量7(P/。的乙醇6(TC至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例60:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量7(F。的乙醇6(TC至8(rC煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于60'C至9(TC濃縮,濃縮液再于50'C至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,HPD400型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例61:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于8(TC至IO(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)ra值為3至6,上D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9CTC濃縮,濃縮液再于scrc至8crc減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,d-ioi型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例62:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于8(TC至100'C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至90。C濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,d-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例63:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水IO(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為2個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(tc至8(tc減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例64:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇于6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)ra值為3至6,上D-IOI型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(tc至8(tc減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例65:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于60。C至9(TC濃縮,濃縮液再于50"C至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比l。實施例66:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)ph值為3至6,上d-ioi型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗19層析柱,再以10%、30°/。、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于60°C至90°C濃縮,濃縮液再于50'C至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例67:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50y。的乙醇60'C至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6CTC至9(TC濃縮,濃縮液再于50'C至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例68:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-IOI型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于60'C至9(TC濃縮,濃縮液再于5crc至8crc減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,d-ioi型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例69:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50。/c)的乙醇6(rC至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)ra值為3至6,上D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為5至IO個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5CTC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比l。實施例70:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70%的乙醇6(TC至80'C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5CTC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例71:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量7(^的乙醇6(TC至80'C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-IOI型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至90。C濃縮,濃縮液再于5or至8or減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比1。實施例72:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70%的乙醇6CTC至8(TC煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于50'C至8(TC減壓千燥,即得濱蒿提取物。其中,D-101型大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合的比例按重量比為1比l。實施例73:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80'C至IO(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上聚酰胺樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于50'C至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例74:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80。C至10(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上聚酰胺樹脂層析柱,,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為每小時2至5個層析柱體積,收集乙醇洗脫液,合并后于60'C至9(TC濃縮,濃縮液再于50'C至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例75:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量水100'C煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇放置沉淀12小時,濾除沉淀,濾液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上聚酰胺樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速為2個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5CTC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例76:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30。/。的乙醇于6(TC至8(rC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上聚酰胺樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至90'C濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例77:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇6(TC至80。C煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上聚酰胺樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6crc至9crc濃縮,濃縮液再于scrc至scrc減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例78:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量30%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上聚酰胺樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6crc至9crc濃縮,濃縮液再于50'c至so。c減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例79:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上聚酰胺樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6crc至9crc濃縮,濃縮液再于scrc至scrc減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例80:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上聚酰胺樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例81:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量50y。的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上聚酰胺樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為5至10個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8CTC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例82:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上聚酰胺樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以50%、70%、90%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于50。C至80。C減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例83:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上聚酰胺樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以30%、50%、70%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例84:濱蒿地上部分加8倍量至10倍量70%的乙醇6(TC至8(TC煮提兩次,每次3小時,過濾,合并濾液,濃縮至原體積的三分之一,加1倍量至2倍量無水乙醇放置沉淀24小時,濾除沉淀,濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上聚酰胺樹脂層析柱,待上樣液全部吸附后,以3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%、30%、50%的乙醇進行梯度洗脫,每濃度乙醇用量為3至8個層析柱體積,流速2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液,合并后于6(TC至9(TC濃縮,濃縮液再于5(TC至8(TC減壓干燥,即得濱蒿提取物。實施例85:對上述實施例1至60所得濱蒿提取物按下述方法進行總黃酮含量的測定對照品溶液的配制精密稱取干燥至恒重的盧丁對照品50毫克,置25毫升容量瓶中,加甲醇適量,置水浴上微熱使溶解,放冷,加甲醇至刻度,搖勻,精密量取10毫升,置100毫升容量瓶中,加水至刻度,搖勻,即得每毫升含0.2毫克無水蘆丁的對照品溶液。標準曲線的制備精密量取對照品溶液l、2、3、4、5、6毫升,分別置25毫升的容量瓶中,各加水至6毫升,加5%亞硝酸鈉溶液1毫升,混勻,放置6分鐘,再加入10%硝酸鋁溶液l毫升,搖勻,放置6分鐘,再加入氫氧化鈉試液10毫升,加蒸餾水至刻度,搖勻,放置15分鐘,以相應試劑為空白,于500納米處測定吸收度,以吸收度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線。樣品測定分別精密稱取上述實施例l至24所得濱蒿提取物樣品1.0g,置100毫升的容量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,精密量取10毫升,置100毫升的容量瓶中,加水至刻度,搖勻,精密量取3毫升,置25毫升容量瓶中,加水至6毫升,加5%亞硝酸鈉溶液1毫升,混勻,放置6分鐘,再加入10%硝酸鋁溶液1毫升,搖勻,放置6分鐘,再加入氫氧化鈉試液10毫升,加蒸餾水至刻度,搖勻,放置15分鐘,以相應試劑為空白,于500納米處測定吸收度,從上述標準曲線上讀出樣品溶液中含無水蘆丁的量,計算濱蒿提取物樣品中總黃酮(以無水蘆丁計)的含量,應在25%至75%的范圍內。在本發(fā)明中首次提出大孔樹脂和/或聚酰胺樹脂在濱蒿提取物生產(chǎn)方法中的應用。所用大孔樹脂為弱極性大孔樹脂,弱極性大孔樹脂選用D-101、HPD400、AB-8型大孔樹脂中的一種;大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合使用時,按重量比1比1混合。通過以下實驗例對本發(fā)明濱蒿提取物的廣譜抗病毒作用進行說明實驗例1本發(fā)明濱蒿提取物對流感病毒致細胞病變的抑制作用。l.材料和方法1.1病毒株流感甲型病毒(H凡亞型粵防72243株),流感乙型病毒(濟防97-13株),購自中國預防醫(yī)學科學院病毒學研究所。1.2實驗樣品濱蒿提取物樣品Hl、H2、H3,為淡棕色至深棕色的浸膏粉,樣品中總黃酮含量Hl為25%、H2為50%、H3為75%,實驗前均以高純水配制成10mg/ml的原藥液,過濾除菌后備用;陽性對照藥利巴韋林,規(guī)格100mg/片,臨床服用2片/次,3次/日,實驗前用高純水配制成10mg/ml的原藥液,過濾除菌后備用。2.方法與結果樣品對MDCK細胞毒性的測定樣品H2、H2、H3和陽性對照原液均以培養(yǎng)液作2倍稀釋,取1:5至1:320共7個稀釋度,將各稀釋度的藥液分別加到已接種Hela細胞并長成單層的培養(yǎng)板中,100微升/孔,每濃度4個平行孔,同時設細胞對照。將培養(yǎng)板置37°C、5%(:02條件培養(yǎng)四天,每R觀察細胞生長情況,以細胞不出現(xiàn)明顯退變的最小稀釋倍數(shù)為最大無毒濃度(TC。)。并按Reed-Muench法計算50%有毒濃度(TC5。),結果見表l。樣品對病毒致細胞病變的影響取己長成單層的MDCK細胞,接種流感甲型病毒10—5(50鬼細胞培養(yǎng)感染量CCID5。的15倍)、流感乙型病毒10—2(CCID5。的30倍),于37。C吸附2小時后傾去病毒液,以不含血清的維持液洗細胞表面2次。實驗設細胞對照組、病毒對照組和各樣品不同稀釋度的給藥組,每組4個平行孔,細胞對照組、病毒對照組加等體積的維持液,給藥組樣品取TC。以下的5個倍比稀釋度分別給藥。37°C、5%(1)2條件培養(yǎng),每日觀察細胞病變情況,細胞病變程度按六級標準判斷(一無病變;±:細胞病約占整個單層的10%以下;1:細胞病變約占整個單層的10%至25%;2:細胞病變約占整個單層的25%至50%;3:細胞病變約占整個單層的50%至75%;4:細胞病變約占整個單層的75%以上)。當病毒對照組細胞病變?yōu)?時記錄實驗結果。按Reed-Muench法計算半數(shù)有效濃度EC5。,并計算樣品的選擇指數(shù)TI(TC5。/EC5。),結果見表2。根據(jù)選擇指數(shù)TI的計算結果,認為濱蒿提取物H1、H2、H3在體外細胞培養(yǎng)中對甲型流感病毒均有較強的抗病毒作用,對乙型流感病毒也有一定的抑制作用。本實驗結果說明濱蒿提取物樣品H1、H2、H3對流感病毒具有明顯的抗病毒作用。實驗例2:本發(fā)明濱蒿提取物在小鼠口服的急性毒性測定l.材料1.]樣品濱蒿提取物H1、H2、H3,臨用前均以蒸餾水配制成所需濃度的混懸液備用。1.2動物昆明種小鼠,雌雄各半,體重1822g,由新疆醫(yī)科大學實驗動物中心提供,合格證號新醫(yī)動字SYXK(新)2003—0001。2.方法與結果預試驗取小鼠30只,雌雄各半,禁食(不禁水)12小時,隨機分為Hl、H2、H3三個給藥組,每組10只。樣品H1、H2、H3分別配成最大給藥濃度50%的混懸液,以40毫升/千克體重容量灌胃給藥l次。觀察24小時,未見死亡,且精神與活動狀態(tài)無異常。最大給藥量的測定取小鼠140只,雌雄各半,體重20.4士1.6g,隨機分為對照組、Hl小劑量組和大劑量組、H2小劑量組和大劑量組、H3小劑量組和大劑量組,每組20只,禁食(不禁水)12小時。樣品均按預試濃度和體積給藥,小劑量組給藥l次,大劑量組給藥2次(間隔6小時),對照組給予等量蒸餾水。觀察記錄給藥后14天內動物全身狀況及局部反應,于第15天將各組動物稱重后處死,作大體解剖檢査,并對肉眼可見異常的器官進行組織病理學檢查。結果,觀察期內對照組和給藥組動物未出現(xiàn)死亡,外觀體征、行為活動及飲食等均未見異常;實驗結束時對照組體重為31.9土3.3g;濱蒿提取物H1小劑量組動物體重為31.7士3.2g,大劑量組體重為32.8±3.4g;H2小劑量組動物體重為31.6土2.8g,大劑量組體重為33.4±2.5g;H3小劑量組動物體重為32.3±2.7g,大劑量組體重為30.6±3.2g;且給藥組體重與對照組比較均無顯著性差異,大體解剖檢査各給藥組與對照組組織臟器比較均未發(fā)現(xiàn)有明顯異常。濱蒿提取物H1、H2、H3以最大給藥量20g/kg給小鼠一日內灌胃給藥,在規(guī)定的觀察期內均未出現(xiàn)急性毒性反應,提示無明顯急性毒性,用藥安全。實驗例3:本發(fā)明濱蒿提取物對流感病毒致小鼠死亡的保護作用測定流感病毒鼠肺適應株FM,的毒力,取感染后15天內小鼠死亡率在90%以上的濃度作為實驗濃度。取小鼠(體重20±lg)220只,隨機分為11組,即病毒感染對照組、陽性對照組和HI三個劑量組、H2三個劑量組、H3三個劑量組,每組20只。各組小鼠以乙醚吸入法麻醉,流感病毒鼠肺適應株FM,以上述實驗濃度感染小鼠。于感染前一天開始給藥,每天一次,連續(xù)5天。記錄感染后小鼠的死亡情況,計算死亡率、死亡保護率及平均存活天數(shù)、生命延長率,結果見表3。死亡率-死亡動物數(shù)/動物總數(shù)X100%死亡保護率=(感染對照組死亡率一實驗組死亡率)/感染對照組死亡率給藥組平均存活天數(shù)—感染對照組平均存活天數(shù)生命延長率-感染對照組平均存活天數(shù)在感染病毒后15天內,樣品H1、H2、H3給藥組小鼠死亡率均低于病毒感染對照組,而平均存活天數(shù)則高于感染對照組,表明濱蒿提取物對小鼠流感病毒性肺炎模型均有明顯的保護作用。實驗例i和實驗例3的結果說明本發(fā)明濱蒿提取物具有明顯的抗流感病毒作用。實驗例2表明改提取物口服給藥無明顯急性毒性,用藥安全。實驗例4:本發(fā)明濱蒿提取物對人乙肝病毒的抑制作用1.實驗材料1.1樣品濱蒿提取物Hl、H2、H3,實驗前均以高純水配制成10rag/ml原藥液,過濾除菌后于4'C保存,臨用時以培養(yǎng)液稀釋成所需濃度給藥;陽性對照藥拉米夫定用高純水配制成1mg/ml的原液,實驗前以細胞培養(yǎng)液配成所需濃度給藥。1.2試劑MEM培養(yǎng)基,GiBco,InvitrogenCorporation;月夷酷,北京三t専遠志生物技術有限公司;小牛血清、服PES,中國醫(yī)科院生物醫(yī)學工程研究所;乙肝病毒核酸定量檢測試劑、cPCR—熒光探針,中山大學達安基因股份有限公司。1.3細胞株2.2.15細胞,乙型肝炎病毒(HBV)DNA克隆轉染人肝癌細胞(H印G2)的2.2.15細胞系,購自北京大學人民醫(yī)院肝病中心,以含谷氨酰胺的MEM培養(yǎng)液于37'C,5%C02條件下培養(yǎng),大約一周傳代一次。2.方法及結果細胞毒性的測定2.2.15細胞接種96孔培養(yǎng)板,待細胞長成單層時,吸棄上清,設細胞對照組和H1、H2、H3各6個濃度的給藥組,每組4孔。各樣品原液分別以培養(yǎng)液作2倍稀釋,取1/5至1/320共7個稀釋度,分別加樣,細胞對照組加培養(yǎng)液,200W/孔,于37'C、5%0)2條件培養(yǎng),第4天各組換相應濃度的藥液,第8天于顯微鏡下觀察,以細胞病變CPE為指標,程度分為五級,完全破壞為4;75%為3;50%為2;25%為1;無病變?yōu)?。計算每濃度藥液平均細胞病變程度和抑制百分率。觀察最大無毒濃度TC。,并按Reed&Muench法計算半數(shù)有毒濃度TC5。,結果見表4。樣品對乙肝病毒DNA復制的抑制作用2.2.15細胞接種96孔細胞培養(yǎng)板(約10萬個/毫升),每孔200微升,37°C、5%(]02條件培養(yǎng),待細胞長成單層后,設細胞對照組、拉米夫定(l微克/毫升)組、Hl、H2、H3各四個濃度(均取TC。及其以下的3個2倍稀釋度),每濃度4孔,加樣,200微升/孔,于37。C、5%C02條件培養(yǎng),第4天換一次藥液,繼續(xù)培養(yǎng),于第8天收集細胞培養(yǎng)上清液,以熒光定量PCR法測定乙肝病毒DNA表達量(拷貝/毫升),計算樣品的抑制率。按Reed&Muench法計算半數(shù)有效濃度ICs。,并計算選擇指數(shù)SI,結果見表5。抑制率(%)=(對照組表達量均值一給藥組表達量均值)/對照組表達量均值X100%選擇指數(shù)SI=TC5()/IC5。樣品抑制乙肝病毒復制的選擇指數(shù)(SI值大于2即認為有效)表明該提取物具有明顯的抗乙肝病毒作用。試驗例5:本發(fā)明濱蒿提取物在人類嗜T淋巴細胞病毒I型感染的T細胞系MT-4細胞中對愛滋病毒HIV-1P24抗原的抑制作用MT-4細胞懸液計數(shù),用100CCID5。的HIV-1IIIB感染細胞,在37°C,5%(:02培養(yǎng)箱中吸附i.5小時。用無血清的1640培養(yǎng)液洗去未吸附病毒,用培養(yǎng)液將感染病毒的細胞配成2Xl(T個細胞/毫升,接種于96孔細胞培養(yǎng)板內,每孔100微升;再分別加入3倍稀釋的樣品溶液和5倍稀釋的陽性對照藥齊多夫定(AZT)溶液100微升。每個稀釋度重復3個孔,同時設細胞對照組和病毒對照組。培養(yǎng)板置于37'C、5%(1)2飽和濕度培養(yǎng)箱內培養(yǎng)。4天后吸出上清,-2CTC凍存,待測HIV-1P24抗原滴度,細胞加MTT染色測定樣品對細胞的毒性。MTT染色測定細胞毒性上述培養(yǎng)板每孔加5毫克/毫升的MTT溶液10微升染色,37。C、5。/。CCU包和濕度培養(yǎng)箱內培養(yǎng)4小時后,每孔加入100微升50%DMF-17%TritonX-100脫色液,置37'C下過夜,在酶標儀上測定波長為570納米處的吸收度值,計算樣品的半數(shù)有毒濃度(CG。)。測定樣品在細胞培養(yǎng)內抑制HIV-1P24抗原的EC5。將上述凍存的感染病毒的MT-4上清液融化后進行稀釋,按預實驗結果調整稀釋比例。按照HIV-1P24抗原檢測試劑盒說明測定H:[V-1P24抗原滴度,加樣組與病毒對照組比較,計算樣品的EC,。及選擇指數(shù)TI(C"/EC丄結果見下表6。本實驗中陽性對照藥齊多夫定為目前國際上公認有效的抗愛滋病毒藥物,其對HIV-1P24抗原的抑制結果CCm、ECa,及SI值符合文獻報道,說明實驗數(shù)據(jù)可信;濱蒿提取物H1、H2、H3對H1:V-1P24抗原抑制作用的選擇指數(shù)SI表明本發(fā)明濱蒿提取物具有明顯的抗愛滋病毒作用。從以上實施例可以得出結論,本發(fā)明濱蒿提取物具有廣譜抗病毒作用,可用于制備治療流感、乙型肝炎和艾滋病的廣譜抗病毒藥物。26<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>權利要求1.一種用于制備廣譜抗病毒藥物的濱蒿提取物,其特征在于該濱蒿提取物含有25%至75%的黃酮類成分。2.根據(jù)權利要求1所述的濱蒿提取物,其特征在于該提取物按下述步驟得到第一歩,濱蒿地上部分或全草以水和/或乙醇粗提,其中,水粗提為將濱蒿地上部分或全草加8倍至IO倍量水,在8(TC至IO(TC下提取兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液;乙醇粗提為將濱蒿地上部分或全草加8倍至10倍量30%至90%的乙醇,在6(TC至80r提取兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液;第二歩,將上述濾液濃縮至原體積的三分之一,加相當于濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇,放置沉淀12小時至24小時,濾除沉淀得到乙醇溶液;第三歩,將上述乙醇溶液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上大孔樹脂和\或聚酰胺樹脂層析柱吸附其中,大孔樹脂采用弱極性大孔樹脂,弱極性大孔樹脂選用HPD400、D-101、AB-8型弱極性大孔樹脂中的一種。大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合使用時,按重量比1比1進行混合;第四歩,以相當于3至8個層析柱體積的去離子水沖洗上述層析柱,再以10%至90%的乙醇為洗脫劑進行梯度洗脫,每濃度洗脫劑的用量相當于3至8個層析柱體積,流速為2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液并合并;第五歩,將上述合并后的乙醇洗脫液在6(TC至9CTC下濃縮,回收乙醇,再在5(TC至80。C下減壓干燥,即得所需的濱蒿提取物。3.—種濱蒿提取物的生產(chǎn)方法,其特征在于該方法按下述步驟進行第一歩,濱蒿地上部分或全草以水和/或乙醇粗提;第二步,加乙醇沉淀粗提物中的雜質;第三歩,乙醇溶液濃縮后調節(jié)ra值,以大孔樹脂和\或聚酰胺樹脂吸附粗提物中的總黃酮;第四歩,用乙醇從大孔樹脂和\或聚酰胺樹脂上洗脫總黃酮得到洗脫液;第五步,將洗脫液濃縮并回收乙醇,減壓干燥,即得濱蒿提取物。其中,大孔樹脂釆用弱極性大孔樹脂,弱極性大孔樹脂選用HPD400、D-101、AB-8型弱極性大孔樹脂中的一種;大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合使用時,按重量比1比1進行混合。4.根據(jù)權利要求3所述濱蒿提取物的生產(chǎn)方法,其特征在于在第一步中將濱蒿地上部分或全草加8倍量至10倍量的水,在6(TC至8(TC提取兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液。5.根據(jù)權利要求3所述濱蒿提取物的生產(chǎn)方法,其特征在于在第一步中將濱蒿地上部分或全草加8倍量至10倍量30%至90%的乙醇,在60'C至8(TC提取兩次,每次2小時至3小時,過濾,合并濾液。6.根據(jù)權利要求3或4或5所述的濱蒿提取物的生產(chǎn)方法,其特征在于在第二步中將濾液濃縮后加相當于濃縮液體積1倍量至2倍量的無水乙醇,放置沉淀12小時至24小時,濾除沉淀得到乙醇溶液;在第三歩中將乙醇溶液濃縮后以稀鹽酸調節(jié)PH值為3至6,上大孔樹脂和\或聚酰胺樹脂層析柱吸附;其中,所用大孔樹脂為弱極性大孔樹脂,弱極性大孔樹脂選用HPD400、D-lOl、AB-8型大孔樹脂中的一種;大孔樹脂與聚酰胺樹脂混合使用時,按重量比1比1進行混合;在第四步中以相當于3至8個層析柱體積的去離子水沖洗層析柱,再以10%至90%的乙醇為洗脫劑進行梯度洗脫,每濃度洗脫劑的用量相當于3至8個層析柱體積,流速為2至5個層析柱體積/小時,收集乙醇洗脫液并合并;.在第五步中將乙醇洗脫液在6crc至9crc下濃縮,回收乙醇,再在5(rc至scrc下真空干燥,即得到所需的濱蒿提取物。7.大孔樹脂在濱蒿提取物生產(chǎn)方法中的應用。8.根據(jù)權力要求7所述大孔樹脂在濱蒿提取物生產(chǎn)方法中的應用,其特征在于所用大孔樹脂為弱極性大孔樹脂,弱極性大孔樹脂選用D-101、DHPD400、AB-8型大孔樹脂中的一種。9.聚酰胺樹脂在濱蒿提取物生產(chǎn)方法中的應用。10.根據(jù)權利要求1所述的濱蒿提取物應用于制備廣譜抗病毒藥物,其特征在于該濱蒿提取物用于制備針對流感病毒和/或乙肝病毒和/或愛滋病毒的廣譜抗病毒藥物。全文摘要一種濱蒿提取物及其生產(chǎn)方法和應用。該濱蒿提取物含有25%至75%的黃酮類成分。該濱蒿提取物的生產(chǎn)方法為第一步,濱蒿的地上部分或全草以水或乙醇粗提;第二步,提取液過濾濃縮后加無水乙醇放置沉淀,濾除沉淀得到乙醇溶液;第三步,將所得乙醇溶液濃縮后調節(jié)pH值,上大孔樹脂和/或聚酰胺樹脂層析柱吸附;第四步,以10%至90%的乙醇進行梯度洗脫,收集乙醇洗脫液并合并;第五步,將所得洗脫液濃縮,回收乙醇,再減壓干燥,即得到所需的濱蒿提取物。本發(fā)明濱蒿提取物經(jīng)實驗研究證明有顯著的抗流感病毒、乙肝病毒和愛滋病毒作用,且口服給藥安全,可用于制備治療流感、乙型肝炎和愛滋病的廣譜抗病毒藥物。文檔編號A61P31/16GK101669979SQ20091011347公開日2010年3月17日申請日期2009年10月9日優(yōu)先權日2009年10月9日發(fā)明者燕劉,華姚,芳徐,燕毛,王林林,賀金華,華黃申請人:新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所