專利名稱：：穿山龍治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的有效部位及其提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種中藥的有效部位，尤其涉及一種穿山龍治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的有效部位，本發(fā)明有效部位的提取方法，屬于中藥治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：研究表明，無論發(fā)達(dá)國(guó)家還是發(fā)展中國(guó)家，痛風(fēng)的患病率皆呈迅速上升趨勢(shì)。痛風(fēng)的首發(fā)癥狀是急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎，如防治不當(dāng)，不僅給患者帶來極大痛苦，且易導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形、腎結(jié)石、腎損傷等嚴(yán)重后果，故急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎已成為危害人類健康的一種嚴(yán)重疾病，至今尚無法根治。所以迫切需求尋找預(yù)防和治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的有效中藥，以控制疾病的發(fā)生、發(fā)展。穿山龍為薯蕷科植物穿龍薯蕷("ioscoreani卯o;n'ca他iiflo)的才艮莖。主產(chǎn)于東北黑龍江省山區(qū)。味苦、微寒，無毒，具有祛風(fēng)濕、活血通絡(luò)、清肺化痰作用。痛風(fēng)發(fā)病的根本原因是由于血中尿酸升高而導(dǎo)致的關(guān)節(jié)周圍的局部炎癥反應(yīng)，如果既能降低尿酸，又能減緩局部的炎癥反應(yīng)，那么才是其治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的真正意義所在?，F(xiàn)有的穿山龍?zhí)崛∥锘蛴行Р课粌H對(duì)于風(fēng)濕、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎具有較好的抗炎鎮(zhèn)痛療效，而尚不具備降低患者血中尿酸的功效，提供一種既能P條低患者血中的尿酸，又能減緩患者局部關(guān)節(jié)周圍的炎癥反應(yīng)的穿山龍有效部位提取物將具有重要的意義。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種既能降低患者血中的尿酸，又能減緩患者局部關(guān)節(jié)周圍的炎癥反應(yīng)的穿山龍有效部位提取物。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的一種治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的穿山龍有效部位提取物，包括以下步驟制備得到將穿山龍粉碎后用水煎煮提取，收集水煎液，過濾，即得；或者將穿山龍粉碎后用10-95%乙醇提取，收集醇提液，回收乙醇，即得。其中，將穿山龍用水煎煮提取時(shí)，優(yōu)選的用穿山龍藥材水4-IO倍重量的水煎煮l-4小時(shí)；為了達(dá)到更好的提取效果，可以將穿山龍的水煎液濃縮后上大孔吸附樹脂柱吸附，用蒸餾水或10-95%的乙醇進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，即得；更優(yōu)選的，用30%的乙醇進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，即得；所述的大孔吸附樹脂柱優(yōu)選為AB-8型大孔吸附樹脂柱或D101型大孔吸附樹脂柱；優(yōu)選的，將穿山龍用10-95%乙醇才是取時(shí)，用70%乙醇提取所得到的有效部位具有更好的治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的藥理活性。本發(fā)明治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的穿山龍有效部位富含活性成分，具有降低尿酸、抗炎、鎮(zhèn)痛的藥理作用。本發(fā)明有效部位不但能緩解急性期關(guān)節(jié)紅腫熱痛的炎癥反應(yīng)，而且能夠針對(duì)病機(jī)降低血中尿酸水平，對(duì)于痛風(fēng)標(biāo)本兼治，因此可以用來制備療效好，安全可靠的防治急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的藥物。本發(fā)明有效部位的提取工藝簡(jiǎn)單，不需高溫高壓和特殊設(shè)備，安全，易于操作且成本低。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)將會(huì)隨著描述而更為清楚。但這些實(shí)施例僅是范例性的，并不對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。實(shí)施例1將穿山龍干燥根及根莖切片1000g,粉碎，浸泡30分鐘，加水6倍重量，煎煮1小時(shí)，得到水煎液；水煎液濃縮至lg/ml上AB-8型大孔吸附樹脂柱，用蒸餾水洗脫至無色，收集洗脫液，得到組分I;再用30%乙醇洗脫至無色，收集洗脫液，得到組分II;回收乙醇，再用50%乙醇洗脫至無色，收集洗脫液，回收乙醇，得到組分III;再用70%乙醇洗脫至無色，收集洗脫液，回收乙醇，得到組分IV。實(shí)施例2將穿山龍干燥根及根莖切片1000g,粉碎，浸泡30分鐘，加水8倍重量，煎煮1小時(shí)，煎煮2次，合并煎液，得到水煎液；將水煎液濃縮至2g/ml上D101型大孔吸附樹脂柱，用6倍蒸餾水洗脫，洗脫液棄去，再用8倍30%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到組分II,再用50%乙醇洗脫至無色，收集洗脫液，回收乙醇，得到組分III;再用70%乙醇洗脫至無色，收集洗脫液，回收乙醇，得到組分IV。實(shí)施例3將穿山龍干燥根及根莖切片lOOOg，粉碎，力口70°/乙醇3倍重量，回流提取4次，合并提取液，回收乙醇，得到穿山龍有效部位提取物(組分V)。對(duì)比實(shí)施例1將穿山龍干燥根及根莖切片1000g,粉碎，加30%乙醇3倍重量，回流提取4次，合并提取液，回收乙醇，得到穿山龍?zhí)崛∥?組分VI)。對(duì)比實(shí)施例2將穿山龍干燥根及根莖切片1000g,粉碎，加50%乙醇3倍重量，回流提取4次，合并提取液，回收乙醇，得到穿山龍?zhí)崛∥?組分VII)。對(duì)比實(shí)施例3將穿山龍干燥根及根莖切片1000g,粉碎，力口60%乙醇3倍重量，回流提取4次，合并提取液，回收乙醇，得到穿山龍?zhí)崛∥?組分VIH)。對(duì)比實(shí)施例4將穿山龍干燥根及根莖切片1000g,粉碎，加95%乙醇4倍重量回流提取4次，合并提取液，回收乙醇，得到穿山龍?zhí)崛∥?組分IX)。實(shí)驗(yàn)例1穿山龍?zhí)崛∥锏乃幮W(xué)試驗(yàn)61:穿山龍水煎液(實(shí)施例1或2所制備)；供試藥物2:實(shí)施例1或2所制備的組分IV;供試藥物3:對(duì)比實(shí)施例3所制備的穿山龍?zhí)崛∥?組分VII1);供試藥物4:對(duì)比實(shí)施例4所制備的穿山龍?zhí)崛∥?組分IX);二、實(shí)l全方法①模型制備雄性Wistar大鼠和昆明種小鼠，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。實(shí)驗(yàn)方法釆用次黃噤呤和微晶尿酸鈉造模，腹腔注射次黃噤呤500mg/kg,20min后右側(cè)踝關(guān)節(jié)腔注射微晶尿酸鈉溶液0.4ml。四個(gè)組分濃縮液連續(xù)灌胃3天，檢測(cè)大鼠血尿酸水平、關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)改變及小鼠醋酸扭體實(shí)驗(yàn)，以檢測(cè)抗炎、鎮(zhèn)痛、血尿酸相關(guān)指標(biāo)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。②血尿酸及關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)各組大鼠于造模后lh，目艮底取血1.5mL,以檢測(cè)血尿酸。24h后處死，取踝關(guān)節(jié)內(nèi)組織急行10%曱醛溶液固定，24h后再鋸取厚度約0.5厘米關(guān)節(jié)周圍組織。再以10%福爾馬林固定2天。將組織置于脫釣劑(甲酸-福爾馬林液)中，每日更換新鮮液、直至組織軟化為止。流水沖洗24小時(shí)(除酸)。進(jìn)行常規(guī)脫水，透明，浸蠟，切片。HE染色石蠟切片厚度為5Mm,裱于干凈載玻片上，60。C烤片機(jī)烤片2h—二曱苯脫蠟5minx4次—乙醇100%1次—100%2次—95%—90%—85。/。各5min—流水沖洗5min4蘇木素染胞核5min—流水沖洗5min—伊紅染胞漿5min—乙醇逐級(jí)脫水—二甲苯透明—樹脂膠封片—顯微鏡觀察。結(jié)果判定大鼠步態(tài)分級(jí)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)據(jù)文獻(xiàn)改良0級(jí):正常行走，計(jì)0分；l級(jí):輕微跛行，受試下肢略有彎曲，計(jì)2分；2級(jí):跛行，受試下肢剛觸及地面，計(jì)4分；3級(jí)重度跛行，受試下肢離開地面，三足著地行走，計(jì)6分。鏡下關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)檢查，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)文獻(xiàn)改良，(l)血管充血正常0分；輕度l分；中度2分；重度3分；(2)炎細(xì)胞浸潤(rùn)正常0分；輕度l分；中度2分；重度3分；(3)滑膜腫脹正常0分；輕度1分；中度2分；重度3分；(4)組織壞死正常0分；輕度1分；中度2分；重度3分。大鼠血尿酸水平的纟全測(cè)采用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)。③醋酸致小鼠扭體反應(yīng)小鼠腹腔注射(ip)藥物20min后，再ipO.7°/。醋酸致痛，記錄注射醋酸后小鼠出現(xiàn)扭體的時(shí)間和20min內(nèi)的扭體次數(shù)。計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率。鏞餾簽息謝對(duì)翻組ffl體度俊動(dòng)物數(shù)-鏺葯邇扭體度應(yīng)動(dòng)物數(shù)？3HH，》對(duì)撤綴概缽狡應(yīng)敏物敏X鵬％三、實(shí)l^結(jié)果表l大鼠步態(tài)、血尿酸水平、關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)改變和醋酸致小鼠扭體反應(yīng)組別大鼠步態(tài)(分)血尿酸(ymol/L)服染色(分)鎮(zhèn)痛百分率(%)空白組0150.24±38.710模型組5.60±1.56273.04±77.1611.5±3.5供試藥物13.8±1.18'197.39±51.06'7.2±2.0'85±22'供試藥物35.4±1.39238.69±47.0110.5±2.842±12供試藥物24.7±1.33"236.87±45.338.5±2.6*'67±18"供試藥物45.4±1.66229.4±46.2910.1±3.153±15注與模型組比較*P<0.01,〃P<0.05。其中在供試藥物3與供試藥物4組間無顯著性差異(P>0.05)。結(jié)果表明，供試藥物1和供試藥物2均能顯著改善急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠步態(tài)、血尿酸水平、關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)改變和醋酸致小鼠扭體反應(yīng)，說明對(duì)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠有治療作用。其中供試藥物1的作用最為顯著。實(shí)驗(yàn)例2穿山龍?zhí)崛∥锏乃幮W(xué)試驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)藥物實(shí)施例l所制備的組分I,組分II,組分m和組分IV;二、實(shí)-瞼方法①模型制備雄性Wistar大鼠和昆明種小鼠，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。實(shí)驗(yàn)方法采用次黃噤呤和微晶尿酸鈉造模，腹腔注射次黃噤呤1000mg/kg，15min后右側(cè)踝關(guān)節(jié)腔注射微晶尿酸鈉溶液0.2ml。四個(gè)組分濃縮液連續(xù)灌胃5天，檢測(cè)大鼠血尿酸水平、關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)改變及小鼠醋酸扭體實(shí)驗(yàn)，以檢測(cè)抗炎、鎮(zhèn)痛、血尿酸相關(guān)指標(biāo)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。②血尿酸及關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)各組大鼠于造模后1.5h，目艮底取血1.5mL,以檢測(cè)血尿酸。24h后處死，取踝關(guān)節(jié)內(nèi)組織急行10%曱醛溶液固定，36h后再鋸取厚度約0.4厘米關(guān)節(jié)周圍組織。再以10%福爾馬林固定3天。將組織置于脫鉤劑(VonEbner氏液)中，每日更換新鮮液、直至組織軟化為止。流水沖洗18小時(shí)(除酸)。進(jìn)行常規(guī)脫水，透明，浸蠟，切片。HE染色石蠟切片厚度為5Mm，裱于干凈載玻片上，60。C烤片才/L烤片1.5h—二曱笨脫錯(cuò)10minx4次—乙醇100%1次—100%2次—95%—90%—85%各10min—流水沖洗lOmin—蘇木素染胞核lOmin—流水沖洗10min—伊紅染胞漿lOmin—乙醇逐級(jí)脫水—二曱苯透明—樹脂膠封片—顯微鏡觀察。結(jié)果判定大鼠步態(tài)分級(jí)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)據(jù)文獻(xiàn)改良0級(jí):正常行走，計(jì)0分；1級(jí)輕微跛行，受試下肢略有彎曲，計(jì)2分；2級(jí)跛行，受試下肢剛觸及地面，計(jì)4分；3級(jí)重度跛行，受試下肢離開地面，三足著地行走，計(jì)6分。鏡下關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)檢查，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)文獻(xiàn)改良，(l)血管充血正常0分；輕度l分；中度2分；重度3分；U)炎細(xì)胞浸潤(rùn)正常0分；輕度l分；中度2分；重度3分；(3)滑膜腫脹正常0分；輕度l分；中度2分；重度3分；(4)組織壞死正常0分；輕度1分；中度2分；重度3分。大鼠血尿酸水平的檢測(cè)采用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)。③醋酸致小鼠扭體反應(yīng)小鼠腹腔注射(ip)藥物15min后，再ip0.5%醋酸致痛，記錄注射醋酸后小鼠出現(xiàn)扭體的時(shí)間和15min內(nèi)的扭體次數(shù)。計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率。謹(jǐn):〗j(luò)—麵固g綱-國(guó)隱艦瞧a豕蕭暨#率》對(duì)履纖綴律fi慮動(dòng)物敷x三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表2大鼠步態(tài)、血尿酸水平、關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)改變和醋酸致小鼠扭體反應(yīng)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注與模型組比較*P<0.05。藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，組分n能顯著改善急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠步態(tài)、血尿酸水平、關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)改變和醋酸致小鼠扭體反應(yīng)，其余各組之間無顯著性差異，因此確定組分n為穿山龍治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的有效部位。實(shí)驗(yàn)例3一、供試藥物供試藥物1:穿山龍水煎液(實(shí)施例1或2所制備)；供試藥物2:實(shí)施例1或2所制備的組分IV;供試藥物3:對(duì)比實(shí)施例3所制備的穿山龍?zhí)崛∥?組分V1I1);供試藥物4:對(duì)比實(shí)施例4所制備的穿山龍?zhí)崛∥?組分IX);二、實(shí)驗(yàn)方法①模型制備雄性Wistar大鼠和昆明種小鼠，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。實(shí)驗(yàn)方法采用氧溱酸鉀和微晶尿酸鈉造模，腹腔注射氧。秦酸鉀500mg/kg,30min后右側(cè)踝關(guān)節(jié)腔注射微晶尿酸鈉溶液0.4。四個(gè)組分濃縮液連續(xù)灌胃9天，檢測(cè)大鼠血尿酸水平、關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)改變及小鼠醋酸扭體實(shí)驗(yàn)，以檢測(cè)抗炎、鎮(zhèn)痛、血尿酸相關(guān)指標(biāo)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。②血尿酸及關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)各組大鼠于造模后2h,目艮底取血l.5mL，以檢測(cè)血尿酸。24h后處死，取踝關(guān)節(jié)內(nèi)組織急行10y。曱醛溶液固定，48h后再鋸取厚度約0.3厘米關(guān)節(jié)周圍組織。再以10%福爾馬林固定1天。將組織置于脫4丐劑(Clayden氏液)中，每日更換新鮮液、直至組織軟化為止。流水沖洗12小時(shí)(除酸)。進(jìn)行常規(guī)脫水，透明，浸蠟，切片。HE染色石蠟切片厚度為5Mm,^表于干凈載玻片上，60。C烤片機(jī)烤片2.5h—二甲苯脫蠟15minx4次—乙醇100%1次—100%2次—95%—90%—85%各15min—流水沖洗15min—蘇木素染胞核15min—流水沖洗15min—伊紅染胞漿15min—乙醇逐級(jí)脫水—二曱苯透明—樹脂膠封片4顯^敖鏡觀察。結(jié)果判定大鼠步態(tài)分級(jí)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)據(jù)文獻(xiàn)改良0級(jí):正常行走，計(jì)0分；l級(jí)輕微跛行，受試下肢略有彎曲，計(jì)2分；2級(jí):跛行，受試下肢剛觸及地面，計(jì)4分；3級(jí):重度跛行，受試下肢離開地面，三足著地行走，計(jì)6分。鏡下關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)檢查，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)文獻(xiàn)改良，(1)血管充血正常O分；輕度l分；中度2分；重度3分；(2)炎細(xì)胞浸潤(rùn)正常0分；輕度1分；中度2分；重度3分；(3)滑膜腫脹正常0分；輕度1分；中度2分；重度3分；(4)組織壞死正常0分；輕度1分；中度2分；重度3分。大鼠血尿酸水平的檢測(cè)釆用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)。③醋酸致小鼠扭體反應(yīng)小鼠腹腔注射(ip)藥物25min后，再ip0.9°/。醋酸致痛，記錄注射醋酸后小鼠出現(xiàn)扭體的時(shí)間和25min內(nèi)的扭體次數(shù)。計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率。編癧龍童對(duì)厫組扭體度應(yīng)動(dòng)物數(shù)-毚藥組扭體虔應(yīng)動(dòng)物數(shù)，通S分舉-對(duì)麒組綴缽反魔動(dòng)物蕺X柳％表3大鼠步態(tài)、血尿酸水平、關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)改變和醋酸致小鼠扭體反應(yīng)組別大鼠步態(tài)(分)血尿酸((Jmol/L)HE染色(分)鎮(zhèn)痛百分率(％)空白組0132.80±40.110模型組5.30±1.45282.19±55.2611.4±3.7供試藥物14.0±1.2T201.45±52.08'6.8±1.8'83±23'供試藥物35.0±1.29244.59±70.1410.2±2.641±11供試藥物24.5±1.26''242.75±65.218.1±2.4…66±21''供試藥物45.2±1.55231,61±65.1110.4±2.751±14注:與模型組比較'P〈0.01，'*P<0.05。其中在供試藥物3與供試藥物4組間無顯著性差異(P〉0.05)。結(jié)果表明，供試藥物1和供試藥物2均能改善急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠步態(tài)、血尿酸水平、關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)改變和醋酸致小鼠扭體反應(yīng)，說明對(duì)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠有治療作用。其中供試藥物1的作用最為顯著。實(shí)驗(yàn)例4穿山龍?zhí)崛∥锏乃幮W(xué)試驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)藥物實(shí)施例l所制備的組分I,組分II,組分III和組分IV;二、實(shí)"驗(yàn)方法12①模型制備雄性Wistar大鼠和昆明種小鼠，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。實(shí)驗(yàn)方法采用氧溱酸鉀和微晶尿酸鈉造模，腹腔注射氧溱酸鉀300mg/kg，25min后右側(cè)踝關(guān)節(jié)腔注射微晶尿酸鈉溶液0.3ml。四個(gè)組分濃縮液連續(xù)灌胃7天，檢測(cè)大鼠血尿酸水平、關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)改變及小鼠醋酸扭體實(shí)驗(yàn)，以檢測(cè)抗炎、鎮(zhèn)痛、血尿酸相關(guān)指標(biāo)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。②血尿酸及關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)各組大鼠于造才莫后0.5h,目艮底取血l.5mL,以檢測(cè)血尿酸。24h后處死，取踝關(guān)節(jié)內(nèi)組織急行10%曱醛溶液固定，12后再鋸取厚度約0.3厘米關(guān)節(jié)周圍組織。再以10%福爾馬林固定4天。將組織置于脫4丐劑(福爾馬林-硝酸液)中，每日更換新鮮液、直至組織軟化為止。流水沖洗20小時(shí)(除酸)。進(jìn)行常規(guī)脫水，透明，浸蠟，切片。HE染色石蠟切片厚度為5卿，-浪于干凈載玻片上，50。C烤片機(jī)烤片3h—二曱苯脫蠟10minx4次—乙醇100%1次—100%2次—95%—90%—85%各10min—流水沖洗10min—蘇木素染胞核10min-流水沖洗lOmin—伊紅染胞漿lOmin—乙醇逐級(jí)脫水—二曱苯透明—樹脂膠封片—顯孩i鏡觀察。結(jié)果判定大鼠步態(tài)分級(jí)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)據(jù)文獻(xiàn)改良O級(jí):正常行走，計(jì)O分；l級(jí):輕微跛行，受試下肢略有彎曲，計(jì)2分；2級(jí):跛行，受試下肢剛觸及地面，計(jì)4分；3級(jí):重度跛行，受試下肢離開地面，三足著地行走，計(jì)6分。鏡下關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)檢查，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)文獻(xiàn)改良，(1)血管充血正常O分；輕度l分；中度2分；重度3分；(2)炎細(xì)胞浸潤(rùn)正常0分；輕度1分；中度2分；重度3分；(3)滑膜腫脹正常0分；輕度1分；中度2分；重度3分；(4)組織壞死正常0分；輕度1分；中度2分；重度3分。大鼠血尿酸水平的檢測(cè)采用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)。③醋酸致小鼠扭體反應(yīng)小鼠腹腔注射(ip)藥物30min后，再ipl。/。醋酸致痛，記錄注射醋酸后小鼠出現(xiàn)扭體的時(shí)間和30min內(nèi)的扭體次數(shù)。計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率。慣顯s分率畫對(duì)履組扭體反應(yīng)動(dòng)物載xt纖三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表4大鼠步態(tài)、血尿酸水平、關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)改變和醋酸致小鼠扭體反應(yīng)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注:與模型組比較*P<0.05。藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，組分n能顯著改善急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠步態(tài)、血尿酸水平、關(guān)節(jié)滑膜組織形態(tài)學(xué)改變和醋酸致小鼠扭體反應(yīng)，其余組分之間無顯著性差異，因此確定組分n為穿山龍治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的有效部位。權(quán)利要求1、一種治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的穿山龍有效部位提取物，包括以下步驟制備得到將穿山龍粉碎后用水煎煮提取，收集水煎液，過濾，即得；或者將穿山龍粉碎后用10-95％乙醇提取，收集醇提液，回收乙醇，即得。2、按照權(quán)利要求1所述的穿山龍有效部位提取物，其特征在于將穿山龍藥材用4-10倍重量的水煎煮1-4小時(shí)。3、按照權(quán)利要求l所述的穿山龍有效部位提取物，其特征在于將穿山龍的水煎液濃縮后上大孔吸附樹脂柱吸附，用蒸餾水或10-95%的乙醇進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，即得。4、按照權(quán)利要求3所述的穿山龍有效部位提取物，其特征在于將穿山龍的水煎液濃縮后上大孔吸附樹脂柱吸附，用30%的乙醇進(jìn)行洗脫，收集洗脫液。5、按照權(quán)利要求3或4所述的穿山龍有效部位提取物，其特征在于所述的大孔吸附樹脂柱選自AB-8型大孔吸附樹脂柱或D101型大孔吸附樹脂柱。6、按照權(quán)利要求l所述的穿山龍有效部位提取物，其特征在于將穿山龍粉碎后用70%乙醇提取，收集醇提液，回收乙醇，即得。7、權(quán)利要求l-4任何一項(xiàng)所述的穿山龍有效部位提取物在制備治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明公開了一種治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的穿山龍有效部位提取物及其制備方法。本發(fā)明穿山龍有效部位提取物包括以下步驟制備得到將穿山龍粉碎后用水煎煮提取，收集水煎液，過濾，即得；或者將穿山龍粉碎后用10-95％乙醇提取，收集醇提液，回收乙醇，即得。本發(fā)明治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的穿山龍有效部位富含活性成分，具有降低尿酸、抗炎、鎮(zhèn)痛的藥理作用。本發(fā)明有效部位不但能緩解急性期關(guān)節(jié)紅腫熱痛的炎癥反應(yīng)，而且能夠針對(duì)病機(jī)降低血中尿酸水平，對(duì)于痛風(fēng)標(biāo)本兼治，可以用來制備療效好，安全可靠的防治急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的藥物。本發(fā)明有效部位的提取工藝簡(jiǎn)單，不需高溫高壓和特殊設(shè)備，安全，易于操作且成本低。文檔編號(hào)A61P19/02GK101537103SQ20091013557公開日2009年9月23日申請(qǐng)日期2009年4月27日優(yōu)先權(quán)日2009年4月27日發(fā)明者于書儀,劉樹民,麗姚申請(qǐng)人:劉樹民