專利名稱：口服液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于修復(fù)抗生素引起的粘膜損傷、治療腸道菌群 紊亂引起的腹瀉、便秘以及提高免疫力的口服液保健品的制備方法， 屬于保健食品領(lǐng)域。
(二)
背景技術(shù)：
有效徼生物群(effectivemicroorganisms, EM)是日本學(xué)者比嘉 照夫于20世紀(jì)80年代研制而成的復(fù)合微生物群，主要由五大微生物 菌群，即光合菌群、乳酸菌群、酵母菌群、革蘭氏陽性放線菌群和發(fā) 酵系絲狀菌群復(fù)合培養(yǎng)而成。EM中的各種微生物在其生長過程中產(chǎn) 生有用物質(zhì)及其分泌物，成為各自或相互生長的基質(zhì)和原料，通過這 種共生增殖關(guān)系，形成一個(gè)復(fù)雜而穩(wěn)定的微生態(tài)系統(tǒng)。目前市售的 EM廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)(種植)、畜牧(養(yǎng)殖)、水產(chǎn)、環(huán)保(水處理) 和人體保健等領(lǐng)域。
據(jù)統(tǒng)計(jì)，EM在人體上的功能已見對(duì)消化系統(tǒng)(肝腹水、胃腸炎 癥及潰瘍、便秘、腹瀉等)、循環(huán)系統(tǒng)(高低血壓、血管硬化、冠心 病等)、呼吸系統(tǒng)(氣管炎、肺氣腫、哮喘、咽炎、喉干口苦等)、糖 尿病、婦科炎癥(內(nèi)服外用)、多數(shù)癌癥(包括正在放療或化療者)、 風(fēng)濕病、神經(jīng)衰弱、失眠、膠原病、消除皮膚斑痕、花粉病、灰指甲 等均有功效。目前上市的EM 口服產(chǎn)品多為飲料，主要以天然植物為原料，經(jīng) EM發(fā)酵工藝提取的有效成分制成保健飲料，具有抗氧化功能；有報(bào) 道直接飲用經(jīng)過稀釋的EM活菌制劑治療腹瀉等疾病。天然植物原料 制備的EM制劑效果好，但成本較高；而活菌制劑在保存、運(yùn)輸、使 用過程中易受環(huán)境條件變化的影響導(dǎo)致細(xì)菌失活，穩(wěn)定性差。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種原料廉價(jià)，工藝簡單，安全有效，質(zhì)量 穩(wěn)定的能夠修復(fù)抗生素引起的粘膜損傷、治療腸道菌群紊亂引起的腹 瀉、便秘以及提高免疫力的口服液制劑的制備方法。
本發(fā)明的口服液的制備方法，概括地說，是以廉價(jià)易得的蜂蜜、 食用糖為原料，經(jīng)啤酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae (菌種編號(hào) CGMCC2.610)和EM原露(江西省天意生物技術(shù)開發(fā)有限公司銷售 的綜合型EM原露產(chǎn)品)依次發(fā)酵轉(zhuǎn)化，生成藥液，再配以營養(yǎng)劑蜂 蜜、矯味劑、防腐劑及適量水，經(jīng)過濾和滅菌后即得。具體包括如下 步驟
(1) 以啤酒酵母為菌株，常規(guī)方法接種于三角瓶制備二級(jí)液體菌 種；新開封的EM原露無菌條件下以凈化水稀釋10倍，備用；
(2) 按重量份將蜂蜜l"O份、食用糖1-10份、蛋白胨0.1-2份、 硫酸鎂0.01-(X2份、硫酸錳0.01-O2份、磷酸氫二鉀0.01-1份、氯化 鈉0.1-2份混合，加入凈化的水75-96份溶解，熱處理方法進(jìn)行滅菌， 作為培養(yǎng)基；
(3)待滅菌后的培養(yǎng)基冷卻后，接種培養(yǎng)好的啤酒酵母二級(jí)液體菌種，接種量為0.1-2份重量份；26-32"C培養(yǎng)小時(shí)，然后接 入10%EM原露0.1-2重量份，在35一0"繼續(xù)培養(yǎng)2130小時(shí)，pH 值降至3.34.5即可；
(4) 將(3)所得藥液，加入適量營養(yǎng)劑(蜂蜜)、矯味劑、少 量防腐劑以及凈化水，混合均勻；
(5) 將(4)所得液體過濾，封裝，熱處理滅菌，即得。 步驟(2)所述食用糖為紅糖、白糖或葡萄糖中的一種或幾種，
優(yōu)選為紅糖；
步驟(2)所述熱處理滅菌方法為在11(M28t:溫度下滅菌25-180 分鐘；
步驟(4)所述矯味劑為食用糖或木糖醇，其中食用糖包括紅糖、 白糖或葡萄糖的一種或幾種；防腐劑指苯甲酸鈉或山梨酸鉀或二者的 結(jié)合；各組分的配比為(3)所得藥液70>85份、蜂蜜l-5份，凈化 水1(K25份、矯味劑0.5-2份、防腐劑0.3-0.8份。
本發(fā)明應(yīng)用啤酒酵母菌與EM菌協(xié)同作用，分解蜂蜜及食用糖形 成對(duì)身體有益的成分，本發(fā)明的口服液為棕色澄明液體，用于改善抗 生素引起的黏膜損傷如口腔潰瘍、刺激性咳嗽，腸道菌群紊亂引起的 腹瀉、便秘，以及提高機(jī)體免疫力，味道酸甜，尤其適合適合兒童服 用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的口服液保健品原料廉價(jià)易得，制備方 法簡單，且效果顯著，使用安全，質(zhì)量穩(wěn)定。
為驗(yàn)證本發(fā)明口服液的安全性，進(jìn)行了小鼠經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)。
本發(fā)明口服液飼喂昆明小鼠54只，體重18-22g，雌雄各半。將小鼠隨機(jī)分為6組，每組9只，雌雄各半，禁食12小時(shí)后，經(jīng)口灌 胃，劑量分別為40ml/kg、 32ml/kg、 25.6ml/l堪、20.5ml/kg、 16.4ml/kg、 13.1ml/kg (r=0.8)。小鼠給藥后連續(xù)觀察14天，記錄小鼠中毒癥狀 和死亡數(shù)，根據(jù)各組死亡率，以Bliss法計(jì)算LD50和95%可信限， 結(jié)果顯示，經(jīng)口給藥后各組小鼠無死亡現(xiàn)象，表明小鼠一次經(jīng)口給藥 半數(shù)致死量LD50大于40ml/kg。
本發(fā)明口服液治療兒童腹瀉的臨床預(yù)試資料如下 臨床預(yù)試病例全部來自門診。80例中，男性44例，女性36例， 年齡在2-14歲之間。其中急性腹瀉54例，慢性遷延性腹灣45例， 所有患者均通過血常規(guī)、大便常規(guī)鏡檢及部分細(xì)菌培養(yǎng)確診。給藥方 式5ml/次， 一日三次，急性腹瀉3天一療程，慢性遷延性腹瀉10天 一療程，療效標(biāo)準(zhǔn)參考《小兒內(nèi)科學(xué)》。
治愈大便次數(shù)正常，體重增加，鏡檢無膿細(xì)胞、紅細(xì)胞，潛血 試驗(yàn)陰性；
好轉(zhuǎn)大便次數(shù)減少，體重增加，鏡檢膿細(xì)胞、紅細(xì)胞 吞噬細(xì)胞明顯減少，潛血實(shí)驗(yàn)陰性；
無效大便次數(shù)、體重、鏡檢無明顯變化。
治療結(jié)果表明，本發(fā)明口服液治愈68例，好轉(zhuǎn)9例，無效3例， 總有效率為96.25%。
具體實(shí)施例方式
以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但不限于此。 實(shí)施例1.將啤酒酵母菌株以常規(guī)方法接種于三角瓶制備二級(jí)液體菌種；新
開封的EM原露無菌條件下以凈化水稀釋10倍，備用；按重量份稱
取蜂蜜2份、紅糖7份、蛋白胨0.2份、硫酸鎂O.Ol份、硫酸錳0.01 份、磷酸氫二鉀0.01份、氯化鈉0.2份混合，加入凈化的水80份溶 解，120'C蒸汽滅菌25分鐘；滅菌后的培養(yǎng)基冷卻后，接種培養(yǎng)好的 啤酒酵母二級(jí)液體菌種1份，于32'C培養(yǎng)24小時(shí)，然后接入10%EM 原露0.5重量份，在37C繼續(xù)培養(yǎng)約24小時(shí)，pH值降至3,6，得藥 液；將藥液80份，加入蜂蜜1份、木糖醇0.5份、苯甲酸鈉0.5份以 及凈化水18份，混合均勻，過濾得透明液體，封裝，熱處理滅菌， 即得。
實(shí)施例2.
將啤酒酵母菌株以常規(guī)方法接種于三角瓶制備二級(jí)液體菌種；新 開封的EM原露無菌條件下以凈化水稀釋10倍，備用；按重量份稱 取蜂蜜3份、白糖5份、蛋白胨O.l份、硫酸鎂0.02份、硫酸錳0.02 份、磷酸氫二鉀0.02份、氯化鈉(U份混合，加入凈化的水85份溶 解，116'C蒸汽滅菌30分鐘；滅菌后的培養(yǎng)基冷卻后，接種培養(yǎng)好的 啤酒酵母二級(jí)液體菌種0.5份，于28"培養(yǎng)20小時(shí)，然后接入10%EM 原露l重量份，在35'C繼續(xù)培養(yǎng)約24小時(shí)，pH值降至3.8，得藥液； 將藥液75份，加入蜂蜜2份、紅糖0.5份、苯甲酸鈉0.5份以及凈化 水18份，混合均勻，過濾得透明液體，封裝，熱處理滅菌，即得。
實(shí)施例3.
將啤酒酵母菌株以常規(guī)方法接種于三角瓶制備二級(jí)液體菌種；新開封的EM原露無菌條件下以凈化水稀釋10倍，備用；按重量份稱 取蜂蜜2份、葡萄糖2份、紅糖3份、蛋白胨0.2份、硫酸鎂0.01份、 硫酸錳0.01份、磷酸氫二鉀0.02份、氯化鈉0.2份混合，加入凈化 的水96份溶解，11(TC蒸汽滅菌45分鐘；滅菌后的培養(yǎng)基冷卻后，接 種培養(yǎng)好的啤酒酵母二級(jí)液體菌種2份，于261C培養(yǎng)16小時(shí)，然后 接入10%EM原露1重量份，在35'C繼續(xù)培養(yǎng)約24小時(shí)，pH值降至 3.8，得藥液；將藥液85份，加入蜂蜜2份、白糖0.5份、山梨酸鉀 0.5份以及凈化水15份，混合均勻，過濾得透明液體，封裝，熱處理 滅菌，即得。 實(shí)施例4.
將啤酒酵母菌株以常規(guī)方法接種于三角瓶制備二級(jí)液體菌種；新 開封的EM原露無菌條件下以凈化水稀釋10倍，備用；按重量份稱 取蜂蜜3份、白糖2份、紅糖2份、蛋白胨0.2份、硫酸鎂0.02份、 硫酸錳0.02份、磷酸氫二鉀0.01份、氯化鈉0.1份混合，加入凈化 的水90份溶解，1281C蒸汽滅菌25分鐘；滅菌后的培養(yǎng)基冷卻后，接 種培養(yǎng)好的啤酒酵母二級(jí)液體菌種0.8份，于32'C培養(yǎng)18小時(shí)，然 后接入10%EM原露1.5重量份，在371C繼續(xù)培養(yǎng)約26小時(shí)，pH值 降至4.2,得藥液；將藥液82份，加入蜂蜜3份、白糖0.5份、山梨 酸鉀0.5份以及凈化水14份，混合均勻，過濾得透明液體，封裝， 熱處理滅菌，即得。
權(quán)利要求
1.一種口服液的制備方法，步驟如下(1)以啤酒酵母Saccharomyces cerevisiae(菌種編號(hào)CGMCC2.610)為菌株，常規(guī)方法接種于三角瓶制備二級(jí)液體菌種；新開封的EM原露無菌條件下以凈化水稀釋10倍，備用；(2)按重量份將蜂蜜1-10份、食用糖1-10份、蛋白胨0.1-2份、硫酸鎂0.01-0.2份、硫酸錳0.01-0.2份、磷酸氫二鉀0.01-1份、氯化鈉0.1-2份混合，加入凈化的水75-96份溶解，熱處理方法進(jìn)行滅菌，作為培養(yǎng)基；(3)待滅菌后的培養(yǎng)基冷卻后，接種培養(yǎng)好的啤酒酵母二級(jí)液體菌種，接種量為0.1-2份重量份；26-32℃培養(yǎng)16-24小時(shí)，然后接入10％EM原露0.1-2重量份，在35～40℃繼續(xù)培養(yǎng)24-30小時(shí)，pH值降至3.3-4.5即可；(4)將(3)所得藥液，加入適量營養(yǎng)劑(蜂蜜)、矯味劑、少量防腐劑以及凈化水，混合均勻；(5)將(4)所得液體過濾，封裝，熱處理滅菌，即得。
2. 權(quán)利要求l所述的口服液制備方法，其特征在于步驟(2)所 述的食用糖為紅糖、白糖、葡萄糖中的一種或幾種。
3. 權(quán)利要求1或2所述的口服液制備方法，其特征在于步驟(4) 所述的矯味劑為食用糖或木糖醇，其中食用糖包括紅糖、白糖或葡萄 糖的一種或幾種，防腐劑指苯甲酸鈉或山梨酸鉀或二者的結(jié)合。
4. 權(quán)利要求3所述的口服液制備方法，其特征在于步驟(4)中 各組分的配比為步驟(3)所得藥液70^85份、蜂蜜l-5份，凈化水 10-25份、矯味劑0.5-2份、防腐劑(U"0.8份。
5. 權(quán)利要求1或2所述的口服液的制備方法，其特征在于步驟 (2)或(4)中所述的熱處理方法是在11(M28"C溫度下滅菌25-180分鐘。
6. 權(quán)利要求1所述方法在制備用于修復(fù)抗生素引起的粘膜損傷、 治療腸道菌群紊亂引起的腹灣、便秘或提高免疫力的口服液制劑中的 應(yīng)用。
全文摘要
一種口服液的制備方法，屬于保健食品領(lǐng)域。以蜂蜜、食用糖為原料，經(jīng)啤酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae和EM原露依次培養(yǎng)發(fā)酵，pH值降至3.6左右時(shí)，加入蜂蜜、矯味劑、防腐劑及適量水，經(jīng)過濾、封裝、熱處理滅菌，即得。本發(fā)明制備方法所得口服液，適用于修復(fù)抗生素引起的粘膜損傷、治療腸道菌群紊亂引起的腹瀉、便秘以及提高免疫力，安全有效，且味道酸甜，尤其適合兒童服用。
文檔編號(hào)A61K36/064GK101628017SQ200910157249
公開日2010年1月20日 申請(qǐng)日期2009年7月3日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月3日
發(fā)明者王風(fēng)敏 申請(qǐng)人:王風(fēng)敏