專利名稱：一種中藥組合物及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體涉及一種治療慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍的中藥組 合物及制備方法。
背景技術(shù)：
慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍是胃、腸黏膜受到多種因素長(zhǎng)期損傷后，引起的慢性 炎癥及潰瘍。近30年來有兩個(gè)重要發(fā)現(xiàn)使慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍病因有重大更新， 一是明確了幽門螺桿菌是慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍的主要病因，使胃炎及胃、十二指腸 潰瘍的病理生理和治療發(fā)生棄舊揚(yáng)新的轉(zhuǎn)折；二是胃黏膜損傷因子持續(xù)存在。有些胃炎的 胃黏膜炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)輕微，而上皮和血管變化很突出，實(shí)際上是一種胃病，而非胃炎。由于 內(nèi)源性或外源性胃黏膜損傷因子持續(xù)存在，特別是胃動(dòng)力不足時(shí)，十二指腸液反流使胃屏 障功能進(jìn)一步減退，造成惡性循環(huán)，這是慢性胃炎難治的原因之一。慢性胃炎發(fā)病率隨年齡 而增加，多數(shù)是以胃竇為主的全胃炎，后期以胃黏膜固有腺體萎縮和腸化生為主要病理特 點(diǎn)。隨著西藥H2受體拮抗劑、質(zhì)子泵抑制劑、抗生素、胃動(dòng)力藥、強(qiáng)固屏障功能藥在臨床上 的廣泛應(yīng)用，慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍短期內(nèi)顯效已不再是棘手的問題，但隨著幽門螺 桿菌耐藥性產(chǎn)生，根除率下降，復(fù)發(fā)率增加，而且西藥副作用大，長(zhǎng)期應(yīng)用病人耐受性差，療 效受到了影響。因此，尋找抗Hp感染和增強(qiáng)胃黏膜屏障功能治療與其相關(guān)疾病的新途徑仍 然是人們關(guān)注的研究課題。中醫(yī)臨床研究發(fā)現(xiàn)，慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍患者以脾胃虛寒多見，特別是反 復(fù)發(fā)作者。這些患者，往往有不同程度的胃脘部怕涼，不敢進(jìn)食生冷食物癥狀，有些患者由 于服用西藥時(shí)間過長(zhǎng)，常有喜熱飲，遇寒易發(fā)，便溏肢冷等脾胃虛寒之癥。如果較長(zhǎng)時(shí)間予 以健脾溫中法治療，使脾胃虛寒之癥徹底得以改善，便可達(dá)到“四季脾旺不受邪”，從而可以 提高慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍的治療質(zhì)量，減少復(fù)發(fā)?，F(xiàn)代研究認(rèn)為，一些溫中方可改 善胃局部血液循環(huán)，使胃的功能得以振奮，胃運(yùn)動(dòng)得以調(diào)整或改善，增強(qiáng)胃粘膜的抵抗力， 截?cái)辔秆自俅伟l(fā)生的過程，發(fā)揮中藥綜合療效。因此研制和生產(chǎn)一種具有抑制幽門螺桿菌， 改善胃運(yùn)動(dòng)，增強(qiáng)胃粘膜抵抗力的可長(zhǎng)期服用、低毒副作用的中藥復(fù)方產(chǎn)品，仍是人們所盼 望的。我國著名老中醫(yī)焦樹得先生在臨床實(shí)踐中使用由高良姜10g，制香附6g，百合 30g,烏藥10g，丹參30g，檀香(后下)6g，砂仁3g組成的三合湯治療慢性胃炎取得良好療 效。而高良姜和香附、百合和烏藥已經(jīng)作為一些中藥經(jīng)驗(yàn)組方在臨床中用于治療胃 病，如良附丸由高良姜和香附細(xì)粉混合而成，出自清-謝元慶《良方集腋》卷上，主要功效為 疏肝理氣，溫胃祛寒。適應(yīng)病證是肝郁氣滯，胃有寒凝，脘腹疼痛，喜溫喜按，或胸脅賬痛，苔 白，脈沉緊者。治療寒凝氣滯，脘痛吐酸，胸腹脹滿并取得較好的療效。百合、烏藥組成的百 合湯出自陳修園的《時(shí)方歌括》卷下和《時(shí)方妙用》卷二。適用于“治心口痛，服諸熱藥不效 者，亦屬氣痛”之證。據(jù)陳修園稱“此方余從海壇得來，用之多驗(yàn)”。百合既能補(bǔ)中益氣，又能潤(rùn)肺補(bǔ)虛，以制約肝木太過?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》謂“百合，味甘平，主邪氣腹脹心痛?！睘跛帲?味辛，性溫，辛溫香竄，上走脾肺，下達(dá)腎與膀胱，善于疏通氣機(jī)，散寒止痛?！侗静輳男隆返?“烏藥……疏胸腹邪逆之氣，一切病之屬氣者皆可治。，，故百合、烏藥相配，一涼一溫，一走一 守，柔中有剛，潤(rùn)而不滯，辛而不燥。在中國專利《高良姜提取物及其用途》(授權(quán)號(hào)CN1325108C，2007年7月公告)則 公開了高良姜提取物具有抗幽門螺旋桿菌作用。三合湯是以水為溶劑提取的常規(guī)中藥湯劑，迄今為止，關(guān)于以高良姜、香附、百合、 烏藥乙醇提取物為主要活性成份與藥用輔料組成的口服制劑抗幽門螺旋桿菌感染和治療 與幽門螺旋桿菌感染有關(guān)的疾病尚無文獻(xiàn)報(bào)道。本發(fā)明者在對(duì)三合湯進(jìn)行抗幽門螺旋桿菌活性和保護(hù)胃黏膜的篩選研究中發(fā)現(xiàn) 以高良姜、香附、百合、烏藥的乙醇提取物具有良好的抗幽門螺旋桿菌作用，并對(duì)內(nèi)源性和 外源性引起的胃粘膜損傷具有保護(hù)作用，而且具有促進(jìn)胃排空的作用，在動(dòng)物上得到藥效 證實(shí)，從而完成了本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于彌補(bǔ)現(xiàn)有西藥治療虛寒證的慢性胃炎及胃、十二 指腸潰瘍之不足，提供一種對(duì)于虛寒證的慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍患者擁有療效全面， 價(jià)廉，低毒，無常用西藥的副作用，還可以減少復(fù)發(fā)的理想的中藥組合物。本發(fā)明公開的治療慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍的中藥組合物是以高良姜、香附、 百合、烏藥的乙醇提取物為主要活性成份與藥用輔料組成，以口服制劑為佳。為了方便閱讀，對(duì)以下涉及的中藥組方命名解釋如下三合湯水提或醇提物是指其由高良姜、制香附、百合、烏藥、丹參、檀香(后下)、砂 仁組成；良附丸或良附提取物是指其由高良姜、制香附組成；百合湯或百合提取物是指其由百合、烏藥組成；良姜提取物是指高良姜單味提取物；聯(lián)合用藥是指良附丸或良附提取物和百合湯或百合提取物(分別減半聯(lián)合給藥) 合并用藥；二合湯水提或醇提物是指其由高良姜、制香附、百合、烏藥組成，即本發(fā)明的組方。在本發(fā)明的中藥組合物中還可以加入其他輔助中藥，以提高療效，所述的輔助中 藥可選用海螵蛸、浙貝母。本發(fā)明的活性成份各生藥重量份比例為高良姜7-15份、香附3. 5-7. 5份、百合 15-30份、烏藥7-15份。本發(fā)明所述的口服制劑是指醫(yī)學(xué)上可接受的各種口服劑型，包括顆粒劑、片劑、膠 囊劑或口服液等。本發(fā)明所述的藥用輔料為常規(guī)制劑中所采用的各種輔料。本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供上述中藥組合物的制備方法。本發(fā)明公開的治療慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍的中藥組合物的制備方法包括下 列步驟
1)活性成份提取物制備a)將配比量的高良姜、香附、百合、烏藥用8-12倍量70% -95%乙醇作溶劑，浸漬 10-15小時(shí)后，回流提取2次，合并提取液，離心，濾液真空60-70°C回收乙醇，濃縮至相對(duì)密 度1.14，得提取液I;b)將a)提取后的藥渣加8-12倍量水，提取2次，提取液離心，濾液濃縮至相對(duì)密 度1.10，得提取液II ；2)制劑制備合并上述提取液I、II，按常規(guī)方法與藥用輔料制成液體口服制劑；或?qū)⒑喜⒑蟮?提取液進(jìn)行噴霧干燥，按常規(guī)方法與藥用輔料制成固體口服制劑。本發(fā)明制劑單位劑量中含高良姜以高良姜素計(jì)，應(yīng)大于相應(yīng)制劑的含量要求， 1.4mg/g，具體見實(shí)施例，以HPLC法測(cè)定，色譜條件是，流動(dòng)相0.5%乙酸乙腈60 40; 柱溫:35°C ；檢測(cè)波長(zhǎng):267歷。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于公開上述中藥組合物在治療慢性胃炎及胃、十二 指腸潰瘍藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明者的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明將高良姜、制香附、百合、烏藥的4味藥配伍并采用本發(fā) 明的提取工藝具有抑制幽門螺桿菌作用、胃黏膜保護(hù)作用、促進(jìn)胃運(yùn)動(dòng)作用，而且分別優(yōu)于 三合湯、良附丸、百合湯、高良姜單味乙醇提取物以及良附提取物與百合提取物的聯(lián)合用 藥。中醫(yī)傳統(tǒng)制藥方法是將處方中各味藥合并用水煎煮，即中藥湯劑，本發(fā)明雖沿用 各味藥合并提取的方法，但改變了提取方式，本發(fā)明采用了乙醇提取工藝，這樣可充分提取 出有效成分。本發(fā)明所公開的組方所具有藥物作用機(jī)理與各藥協(xié)同或增溶作用有關(guān)。以本 發(fā)明高良姜中高良姜素和二芳基庚烷酮為例，傳統(tǒng)水提工藝高良姜素提取率為35%，二芳 基庚烷酮為30 %，而乙醇提取工藝高良姜素和二芳基庚烷酮提取率可達(dá)90 %。同時(shí)，工藝 研究中發(fā)現(xiàn)，四味藥合并提取的高良姜素提取率(90% )大于高良姜、香附兩味合并提取時(shí) 高良姜素的提取率(85% )。按本發(fā)明制備的中藥適用于胃脘喜暖、痛處喜按、舌苔白或薄白、脈象弦或沉細(xì) 弦、虛實(shí)寒熱癥狀?yuàn)A雜并見者。該組合物中良姜辛熱，溫胃散寒，香附味辛微苦干、性平，理 氣行滯，利三焦、解六郁，二藥合用，善治寒凝氣滯胃痛；百合性味甘平，主入肺胃，降瀉肺胃 郁氣，肺氣降，胃氣和，則諸氣俱調(diào)，配以烏藥快氣宣通，疏散滯氣，溫順胃經(jīng)逆氣。二藥合 用，既能清瀉肺胃郁氣，又能防止百合平?jīng)鲇械K中運(yùn)，故本組合物對(duì)久治難愈，正氣漸虛的 胃炎，既能理氣定痛，又能益胃調(diào)胃，既主寒又主滯，既能治病又能益人，功效比較全面。
具體實(shí)施例方式下面的實(shí)施例用于進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不意味著對(duì)本發(fā)明的任何限制。實(shí)施例1 不同中藥處方及制備方法提取物對(duì)幽門螺桿菌根除的影響(小鼠)試驗(yàn)?zāi)康牟捎靡欢舛鹊挠拈T螺旋桿菌(HpSSl)灌胃制作小鼠幽門螺旋桿菌感 染模型，觀察按不同中藥處方及制備方法得到的提取物對(duì)幽門螺桿菌根除的影響。方法1、受試藥物制備
處方1 三合湯高良姜10g，制香附6g，百合30g，烏藥10g，丹參30g，檀香(后 下)6g，砂仁3g制法1 按以上處方比例稱取各藥材，除檀香6味，加水10倍量，煮沸，煎煮1. 5h， 過濾，濾液備用，藥渣與檀香合并，加水10倍量，煎煮1. 5h，過濾，兩次濾液合并，濃縮，用 0. 4%羧甲基纖維素鈉配成Iml含0. 2g固含物的懸浮液，得三合湯水提液。制法2 按以上處方比例稱取各藥材，除檀香6味，加70%乙醇10倍量，回流提取 2次，每次1. 5h，提取液過濾，濃縮，濃縮液備用；藥渣與檀香合并再加水10倍量，煎煮2次， 每次1. 5h，過濾，濾液備用，將濾液與上述濃縮液合并，用0. 4%羧甲基纖維素鈉配成Iml含 0. 2g固含物的懸浮液，得三合湯醇提液。處方2 :二合湯高良姜10g，制香附6g，百合30g，烏藥IOg制法1 按以上處方比例稱取各藥材，高良姜、制香附、百合、烏藥4味，加水10倍 量，煎煮2次，每次1. 5h，過濾，濾液濃縮，用0. 4%羧甲基纖維素鈉配成Iml含0. 2g固含物 的懸浮液，得二合湯水提液。制法2 以上高良姜，制香附，百合，烏藥4 B末，加70%乙醇10倍量，回流提取2次， 每次1. 5h，提取液過濾，濃縮，濃縮液備用；藥渣再加水10倍量，煎煮2次，每次1. 5h，過濾， 濾液備用，將濾液與上述濃縮液合并，用0. 4%羧甲基纖維素鈉配成Iml含0. 2g固含物的懸 浮液，得二合湯醇提液。2、分組與給藥將動(dòng)物隨機(jī)分成5組，即模型組、陽性藥對(duì)照組(奧美拉唑5. 2mg/ kg、克拉霉素65mg/kg、甲硝唑104mg/kg)、三合湯水提液治療組(2. Og/kg)、三合湯醇提液 治療組(2. Og/kg)、二合湯水提液治療組(2. 0g/kg)，二合湯醇提液治療組(2. 0g/kg)經(jīng)灌 胃管灌服，每天兩次(每只小鼠0. lml/10g體重)，連續(xù)給藥14天。停止給藥30天后，于無 菌室內(nèi)解剖小鼠，進(jìn)行快速尿素酶試驗(yàn)。3、動(dòng)物模型二級(jí)C57BL/6小鼠，用一定濃度的幽門螺旋桿菌(HpSSl)灌胃，實(shí)現(xiàn) 體內(nèi)的Hp定植。將Hp定植的小鼠隨機(jī)分組。4、觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法治療結(jié)束后拉頸椎處死小鼠，開腹后切下全胃，沿胃大彎 剪開，用冰鹽水輕輕沖洗胃粘膜表面的污物，將全胃投入快速尿素酶試驗(yàn)試劑中，記錄幽門 螺旋桿菌(Hp)陽性數(shù)，計(jì)算根除率。結(jié)果見表1表1不同中藥處方及制備方法提取物對(duì)幽門螺桿菌根除的影響 注廣P < 0. Olvs模型，flP < 0. 05vs三合湯水提，二合湯水提結(jié)論結(jié)果表明，二合湯醇提液，即高良姜、制香附、百合、烏藥乙醇提取物具有清 除幽門螺桿菌作用，且優(yōu)于三合湯水提組、醇提組和二合湯水提組。實(shí)施例2 不同中藥處方對(duì)幽門螺桿菌根除的影響(小鼠)試驗(yàn)?zāi)康牟捎靡欢舛鹊挠拈T螺旋桿菌(HpSSl)灌胃制作小鼠幽門螺旋桿菌感 染模型，觀察按不同中藥處方得到的提取物對(duì)幽門螺桿菌根除的影響。方法1、受試藥物制備處方1 高良姜10g，制香附6g按以上處方比例稱取兩藥材，高良姜，制香附2味，加70%乙醇10倍量，回流提取 2次，每次1. 5h，提取液過濾，濃縮，用0. 4%羧甲基纖維素鈉配成一定體積的懸浮液，得良 附提取物。處方2 百合30g，烏藥IOg按以上處方比例稱取兩藥材，百合，烏藥2味，加70%乙醇10倍量，回流提取2次， 每次1. 5h，提取液過濾，濃縮，濃縮液備用；藥渣再加水10倍量，煎煮2次，每次1. 5h，過濾， 將濾液與上述濃縮液合并，用0.4%羧甲基纖維素鈉配成與上述良附提取物體積相同的懸 浮液，得百合提取物。處方3:高良姜IOg高良姜1 B末，加70%乙醇10倍量，回流提取2次，每次1. 5h，提取液過濾，濃縮，用 0.4%羧甲基纖維素鈉配成與上述良附提取物體積相同的懸浮液，得高良姜提取物。處方4 高良姜10g，制香附6g，百合30g，烏藥IOg以上4味，加70%乙醇10倍量，回流提取2次，每次1. 5h，提取液過濾，濃縮，濃縮 液備用；藥渣再加水10倍量，煎煮2次，每次1. 5h，過濾，濾液備用，將濾液與上述濃縮液合 并，用0. 4%羧甲基纖維素鈉配成懸浮液，得二合湯提取物。2、分組與給藥將動(dòng)物隨機(jī)分成6組，即模型組、陽性藥對(duì)照組(奧美拉唑5. 2mg/ kg、克拉霉素65mg/kg、甲硝唑104mg/kg)、良附治療組、百合治療組、良姜治療組、聯(lián)合用藥 治療組(良附提取物與百合提取物分別給0. lml/10g)、二合湯治療組，經(jīng)口灌服藥液，每天 兩次(每只小鼠0. lml/10g體重)，連續(xù)給藥14天。停止給藥30天后，于無菌室內(nèi)解剖小 鼠，進(jìn)行快速尿素酶試驗(yàn)。3、動(dòng)物模型二級(jí)C57BL/6小鼠，用一定濃度的幽門螺旋桿菌(HpSSl)灌胃，實(shí)現(xiàn) 體內(nèi)的Hp定植。將Hp定植的小鼠隨機(jī)分組。4、觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法治療結(jié)束后拉頸椎處死小鼠，開腹后切下全胃，沿胃大彎 剪開，用冰鹽水輕輕沖洗胃粘膜表面的污物，將全胃投入快速尿素酶試驗(yàn)試劑中，記錄幽門 螺旋桿菌(Hp)陽性數(shù)，計(jì)算根除率。結(jié)果見表2表2不同中藥處方及制備方法提取物對(duì)幽門螺桿菌根除的影響 注*P< 0. 05vs 模型，flP < 0. 05vs 百合湯組結(jié)論結(jié)果表明，二合湯治療組具有清除幽門螺桿菌作用，且優(yōu)于其他4組。實(shí)施例3 不同中藥處方及制備方法提取物對(duì)乙醇胃粘膜損傷小鼠胃組織表皮生 長(zhǎng)因子和過氧化體系的影響試驗(yàn)?zāi)康牟捎靡掖脊辔钢谱餍∈笠掖颊衬p傷型潰瘍模型，觀察按不同中藥處 方及制備方法得到的提取物對(duì)乙醇粘膜損傷型小鼠胃粘膜表皮生長(zhǎng)因子和抗氧化能力的影響。方法1、受試藥物制備同實(shí)施例12、分組與給藥將動(dòng)物隨機(jī)分成6組，即模型組，陽性藥對(duì)照組(膠體果膠鉍 156mg/kg)，三合湯水提液治療組(2. Og/kg)、三合湯醇提液治療組(2. Og/kg)、二合湯 水提液治療組(2. Og/kg)，二合湯醇提液治療組(2. Og/kg)，經(jīng)灌胃管灌服，灌胃容量為 0. lml/10g體重，各組給藥容量相同。小鼠禁食不禁水24h，在給乙醇Ih后每天給藥1次， 共3次。模型組灌等量的生理鹽水。3、動(dòng)物模型小鼠乙醇粘膜損傷型潰瘍采用乙醇灌胃制作急性胃粘膜損傷型潰瘍 模型。以90%乙醇0. Iml/只灌胃，隔日同法再給予1次，Ih后即可建立起急性胃粘膜損傷 模型。4、觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法給藥2h后拉頸椎處死小鼠，開腹后切下全胃，沿胃大彎 剪開，用冰鹽水輕輕沖洗胃粘膜表面的污物，用濾紙吸干、除盡胃粘膜表面的粘液等。將胃 組織勻漿，低溫冷凍保存樣品，采用試劑盒測(cè)定表皮生長(zhǎng)因子和超氧化岐化酶活力(SOD)、 過氧化產(chǎn)物(MDA)。表皮生長(zhǎng)因子試劑盒購自Adlitteram Diagnostic Laboratories Inc 公司，S0D、MDA試劑盒購自南京建成生物工程研究所，上述指標(biāo)測(cè)定按其測(cè)定試劑盒說明書 進(jìn)行。結(jié)果見表3。表3不同中藥處方及制備方法提取物對(duì)乙醇胃粘膜損傷型小鼠胃組織表皮生長(zhǎng) 因子和抗氧化能力的影響 注*P< 0. 05，**P < 0. Olvs 模型，#P < 0. 05vs 三合湯醇提結(jié)論結(jié)果表明三合湯醇提和二合湯醇提可以提高乙醇粘膜損傷小鼠的表皮生長(zhǎng) 因子水平和SOD活力，降低MDA水平，而且在表皮生長(zhǎng)因子水平和SOD活力方面二合湯醇提 優(yōu)于三合湯醇提，說明應(yīng)優(yōu)選二合湯處方并采用乙醇提取工藝。實(shí)施例4 不同中藥處方提取物對(duì)乙醇胃粘膜損傷小鼠胃組織表皮生長(zhǎng)因子和過 氧化體系的影響試驗(yàn)?zāi)康牟捎靡掖脊辔钢谱餍∈笠掖颊衬p傷型潰瘍模型，觀察按不同中藥處 方得到的提取物對(duì)乙醇粘膜損傷型小鼠胃粘膜表皮生長(zhǎng)因子和抗氧化能力的影響。方法1、受試藥物制備同實(shí)施例22、分組與給藥將動(dòng)物隨機(jī)分成7組，即模型組，陽性藥對(duì)照組(膠體果膠鉍 156mg/kg)，良附治療組、百合湯治療組、良姜治療組、聯(lián)合用藥治療組、二合湯治療組，經(jīng)灌 胃管灌服，灌胃容量為0. lml/10g體重，各組給藥容量相同。小鼠禁食不禁水24h，在給乙醇 Ih后每天給藥1次，共3次。模型組灌等量的生理鹽水。3、動(dòng)物模型同實(shí)施例3。4、觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法同實(shí)施例3結(jié)果見表4。表4不同中藥處方提取物對(duì)乙醇胃粘膜損傷型小鼠胃組織表皮生長(zhǎng)因子和抗氧
化能力的影響 注*P < 0. 05，**P < 0. Olvs模型，#P < 0. 05vs良附組、百合湯組、良姜組結(jié)論結(jié)果表明百合湯組和聯(lián)合用藥組可以提高乙醇粘膜損傷小鼠的表皮生長(zhǎng)因 子水平和SOD活力，良附組和良姜組可提高SOD活力，而在表皮生長(zhǎng)因子水平方面未顯示作 用，從表皮生長(zhǎng)因子水平和SOD活力兩方面評(píng)價(jià)，二合湯組最優(yōu)。實(shí)施例5 不同中藥處方及制備方法提取物對(duì)醋酸損傷型潰瘍的影響(大鼠)試驗(yàn)?zāi)康牟捎靡宜嶙⑸浞ㄖ谱鞔笫髶p傷型潰瘍模型，觀察按不同中藥處方及制 備方法得到的提取物對(duì)乙酸損傷型潰瘍大鼠胃黏膜的潰瘍形成程度、表皮生長(zhǎng)因子(EGF) 的影響。方法1、受試藥物制備同實(shí)施例12、分組與給藥將動(dòng)物隨機(jī)分成6組，即模型組，雷尼替丁組(0. 108g/kg/d)，三合 湯水提液治療組(2. Og/kg)、三合湯醇提液治療組(2. Og/kg)、二合湯水提液治療組(2. Og/ kg)，二合湯醇提液治療組(2.0g/kg)。灌胃容量為lml/100g體重，各組給藥容量相同。于 手術(shù)次日開始給藥，每天一次，連續(xù)10天。模型組灌等量的生理鹽水。3、動(dòng)物模型大鼠損傷型潰瘍采用乙酸注射法制作的慢性損傷型胃潰瘍模型。大 鼠在水合氯醛麻醉下開腹，暴露胃體，在胃前壁小彎側(cè)漿膜下注射20%冰醋酸0. 03ml/只， 縫合腹腔，常規(guī)飼養(yǎng)。4、觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法給藥結(jié)束后次日拉頸椎處死動(dòng)物，開腹取胃，分別測(cè)量潰 瘍的長(zhǎng)徑(L)與短徑(H)，按公式S= JiLH/4計(jì)算其潰瘍面積。用角膜環(huán)鉆將潰瘍打孔 取下，制成10%的組織勻漿液，測(cè)定表皮生長(zhǎng)因子(EGF)的含量。試劑盒購自Adlitteram Diagnostic Laboratories, Inc公司，組織蛋白含量測(cè)定試劑盒購自南京建成生物工程研 究所，上述指標(biāo)測(cè)定均按其測(cè)定試劑盒說明書進(jìn)行。結(jié)果見表5和表6。表5不同中藥處方及制備方法提取物對(duì)乙酸損傷型潰瘍的潰瘍面積的影響
10 注:*P< 0. 05，**P < 0. Olvs 模型，flP < 0. 05vs 二合湯水提液表6不同中藥處方及制備方法提取物對(duì)乙酸損傷型潰瘍的表皮生長(zhǎng)因子的影響 注:*P< 0. 05，**P < 0. Olvs 模型，##P < 0. Olvs 三合湯醇提，二合湯水提結(jié)論結(jié)果表明三合湯和二合湯處方水提、乙醇提取物均具有降低乙酸損傷型潰 瘍的潰瘍面積的作用，但以二合湯處方的乙醇提取物最優(yōu)。在對(duì)大鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF) 的影響方面，三合湯和二合湯乙醇提取物有提高表皮生長(zhǎng)因子水平的作用且二合湯處方優(yōu) 于三合湯處方。實(shí)施例6 不同中藥處方提取物對(duì)小鼠胃排空的影響試驗(yàn)?zāi)康谋緦?shí)驗(yàn)采用葡聚糖藍(lán)2000作為胃內(nèi)標(biāo)志物，觀察不同中藥處方提取物 對(duì)胃內(nèi)色素殘留量的影響，以此作為評(píng)價(jià)該藥是否具有促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)作用的評(píng)價(jià)指標(biāo)。方法1、受試藥物制備同實(shí)施例22、分組與給藥將動(dòng)物隨機(jī)分成7組，即空白對(duì)照組，多潘立酮片組(84. 6mg/kg/ d)，良附治療組、百合湯治療組、良姜治療組、聯(lián)合用藥治療組、二合湯治療組。灌胃容量為 0. lml/10g體重，各組給藥容量相同。于禁食24h后灌胃給藥，一次性給藥。空白對(duì)照組灌 0.4%羧甲基纖維素鈉溶液。3、觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法給藥30min后再灌2%葡聚糖藍(lán)2000水溶液0.4ml，再經(jīng) 20min后脫頸椎處死小鼠，剖腹取全胃，切開，將胃內(nèi)色素殘留物充分洗于4ml去離子水中， 3500r/min，離心15min，取上清液620nm處測(cè)定其胃內(nèi)色素殘留量。以空白對(duì)照組的色素殘
11留量為基準(zhǔn)值(100% )，計(jì)算胃殘留率為殘留率=殘留值/基準(zhǔn)值X 100%。結(jié)果對(duì)小鼠胃排空的影響見表7。表7、本發(fā)明中藥提取物對(duì)小鼠胃排空的影響(^ ± s) 注:#P < 0. 05vs空白，< 0. Olvs良附組、百合湯組和良姜組結(jié)論結(jié)果表明，二合湯治療組具有促進(jìn)胃排空作用，且優(yōu)于其他4組。實(shí)施例7 本發(fā)明中藥提取物對(duì)小鼠胃排空的影響試驗(yàn)?zāi)康谋緦?shí)驗(yàn)采用葡聚糖藍(lán)2000作為胃內(nèi)標(biāo)志物，觀察本發(fā)明中藥提取物對(duì) 胃內(nèi)色素殘留量的影響，以此評(píng)價(jià)對(duì)胃排空的作用。方法1、受試藥物制備按照實(shí)施例1的處方2和制法2得到中藥提取物。2、分組與給藥將動(dòng)物隨機(jī)分成5組，即空白對(duì)照組，多潘立酮片組(84. 6mg/kg/ d)，中藥提取物治療組(分0. 78g/kg/d、l. 56g/kg/d、3. 12g/kg/d三個(gè)劑量)。將中藥提取 物和多潘立酮片用蒸餾水制成不同濃度同等容量的溶液，灌胃容量為0. lml/10g體重，各 組給藥容量相同。于禁食24h后灌胃給藥，一次性給藥?？瞻讓?duì)照組灌等量的生理鹽水。3、觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法給藥30min后再灌2%葡聚糖藍(lán)2000水溶液0. 4ml，再經(jīng) 20min后脫頸椎處死小鼠，剖腹取全胃，切開，將胃內(nèi)色素殘留物充分洗于4ml去離子水中， 3500r/min，離心15min，取上清液620nm處測(cè)定其胃內(nèi)色素殘留量。以空白對(duì)照組的色素殘 留量為基準(zhǔn)值(100% )，計(jì)算胃殘留率為殘留率=殘留值/基準(zhǔn)值X 100%。結(jié)果對(duì)小鼠胃排空的影響見表8。表8、本發(fā)明中藥提取物對(duì)小鼠胃排空的影響 注*P< 0. 05，**P < 0. Olvs 空白對(duì)照結(jié)論結(jié)果表明本發(fā)明中藥提取物三個(gè)劑量與空白對(duì)照組相比均具有顯著差異 (P < 0. 05)，說明本發(fā)明中藥提取物具有促進(jìn)胃排空的功能。實(shí)施例8 本發(fā)明中藥提取物對(duì)大鼠幽門結(jié)扎型潰瘍的影響試驗(yàn)?zāi)康牟捎媒Y(jié)扎大鼠幽門制作潰瘍模型，觀察本發(fā)明中藥提取物對(duì)該模型大 鼠前胃部黏膜的潰瘍形成程度、胃液體積、胃液酸堿度和胃蛋白酶的活力的影響，以此作為 評(píng)價(jià)該藥具有胃黏膜保護(hù)作用的評(píng)價(jià)指標(biāo)。方法1、受試藥物制備按照實(shí)施例1的處方2和制法2得到中藥提取物。2、分組與給藥將動(dòng)物隨機(jī)分成5組，即模型組，陽性藥對(duì)照組(0. 108g/kg/d)， 本發(fā)明中藥提取物治療組(分0. 54g/kg/d、l. 08g/kg/d、2. 16g/kg/d三個(gè)劑量)。將本發(fā) 明中藥提取物和鹽酸雷尼替丁膠囊用蒸餾水制成不同濃度同等容量的溶液，灌胃容量為 lml/100g體重，各組給藥容量相同。大鼠造模前三天給藥，每天一次，連續(xù)3天，于處死前 2h再給藥一次。模型組灌等量的生理鹽水。3、動(dòng)物模型大鼠幽門結(jié)扎型潰瘍模型采用結(jié)扎大鼠胃幽門，造成胃液在胃中滯 留，致潰瘍因素增強(qiáng)，胃壁防御因素相對(duì)減弱，導(dǎo)致潰瘍形成。大鼠實(shí)驗(yàn)前禁食不禁水36h， 水合氯醛麻醉，結(jié)扎幽門，術(shù)后禁食不禁水。4、觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法(1)潰瘍指數(shù)測(cè)定試驗(yàn)造模18h后處死大鼠，開腹，取出 全胃，將胃浸入的甲醛溶液中，固定10分鐘，沿胃大彎處剪開胃，將胃平展在玻璃板上， 在前胃部黏膜面觀察潰瘍發(fā)生的情況，測(cè)量潰瘍面積。將每只大鼠胃潰瘍面積的總和分為 6個(gè)等級(jí)，作為潰瘍指數(shù)。潰瘍直徑> Imm者計(jì)算面積(公式兩徑相等者πΓ2，兩徑不等 者Jirlrf。面積小于lmm2的潰瘍點(diǎn)，10個(gè)相當(dāng)于潰瘍面積llmm2)。其中，潰瘍面積為1 10mm2的潰瘍指數(shù)為1分，11 20mm2為2分，21 30mm2為3分，31 40mm2為4分，41 50mm2為5，彡51mm2或穿孔為6。(2)胃液指標(biāo)測(cè)定試驗(yàn)造模5h后處死大鼠，開腹，結(jié)扎 賁門，取出全胃，收集胃液，胃液離心去渣，去渣后測(cè)量胃液的體積，然后分別取一定的胃液 滴定胃酸的濃度與測(cè)定胃蛋白酶的活力。胃酸的濃度測(cè)定采用0. lmol/L的NaOH以酚酞為 指示劑進(jìn)行酸堿滴定，胃蛋白酶的活力的測(cè)定試劑盒購自南京建成生物工程研究所，按其 測(cè)定試劑盒說明書進(jìn)行。結(jié)果1、對(duì)大鼠潰瘍面積的影響見表9。表9本發(fā)明中藥提取物對(duì)幽門結(jié)扎型潰瘍的潰瘍面積的影響
注*P < 0. 05vs 模型2、對(duì)大鼠胃液量、胃酸濃度和胃蛋白酶活力的影響見表10。表10本發(fā)明中藥提取物對(duì)幽門結(jié)扎型潰瘍的胃液量、胃酸濃度和胃蛋白酶活力 的影響 注*P < 0. 05，**P < 0. Olvs 模型結(jié)論結(jié)果表明本發(fā)明中藥提取物中、高劑量組具有抗內(nèi)源性胃粘膜損傷的作用。實(shí)施例9 本發(fā)明中藥提取物對(duì)慢性胃炎大鼠的影響試驗(yàn)?zāi)康牟捎镁C合因素制作慢性胃炎模型，觀察本發(fā)明中藥提取物對(duì)該模型大 鼠前胃部黏膜的氨基己糖含量、胃液體積、胃液酸堿度的影響，以此作為評(píng)價(jià)該藥具有治療 慢性胃炎療效的指標(biāo)。方法1、受試藥物制備按照實(shí)施例1的處方2和制法2得到中藥提取物。2、分組與給藥將動(dòng)物隨機(jī)分成6組，即正常組，模型組，陽性藥三九胃泰對(duì)照組 (3g/kg/d)，本發(fā)明中藥提取物治療組(分0. 54g/kg/d、l. 08g/kg/d、2. 16g/kg/d三個(gè)劑 量)。將本發(fā)明中藥提取物和三九胃泰用蒸餾水制成不同濃度同等容量的溶液，灌胃容量為 lml/100g體重，各組給藥容量相同。每天一次，連續(xù)30天，模型組灌等量的生理鹽水。3、動(dòng)物模型將大鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，共60只，除正常組外，其余動(dòng)物用 0. 氨水溶液及20mmoL脫氧膽酸鈉溶液交替自由飲用，配合饑飽失常法(2d足食，Id禁 食)喂食，每隔3天灌60 %乙醇2ml/只，連續(xù)6周。
4、觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法末次給藥后禁食24h，淺麻醉下結(jié)扎幽門，6h后處死，收 集胃液，滴定總酸度，打孔器取下直徑8mm鼠胃黏膜組織一塊，勻漿、離心，取上清液備用， 用考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定蛋白含量，采用改良后氨基己糖比色法的測(cè)定。結(jié)果對(duì)大鼠慢性胃炎的影響見表11。表11、本發(fā)明中藥提取物對(duì)大鼠慢性胃炎的影響(i±s) 注*Ρ< 0. 05，**P < 0. Olvs 模型結(jié)論結(jié)果表明本發(fā)明中藥提取物三個(gè)劑量與模型組相比可不同程度提高胃液酸 度和氨基己糖含量，說明本發(fā)明中藥提取物具有治療慢性胃炎的療效。實(shí)施例10 顆粒劑制備a)將1500g高良姜、750g香附、3000g百合、1500g烏藥用10倍量70%乙醇作溶 劑，浸漬12小時(shí)后，85°C回流提取2次，每次1小時(shí)，提取液離心(16000轉(zhuǎn)/分)分離后， 減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1. 14(50-60°C )，得提取液I ；b)將a)提取后的藥渣加10倍量水，煎煮2次，每次1小時(shí)，提取液用管式高速離 心機(jī)離心(16000轉(zhuǎn)/分)，得提取液II ；c)將液II濃縮至相對(duì)密度為1. 10(50-60°C )后與液I合并進(jìn)行噴霧干燥(進(jìn)風(fēng) 溫度140°C)，得干燥粉；d)取上述干燥粉500g、蔗糖150g、糊精100g、膠體微晶纖維素30g、碳酸氫鈉適量 混合均勻，以適量95 %乙醇作潤(rùn)濕劑，濕法制粒，過篩，烘干，分裝制成6g/袋顆粒劑。用 HPLC法測(cè)定含高良姜以高良姜素計(jì)7. Smg/包。實(shí)施例11 片劑制備以實(shí)施例10同樣方法得到干燥的提取物，加入10%交聯(lián)羧甲基纖維素鈉，濕法 制粒，烘干，加入適量硬脂酸鎂混合，壓制成片劑。用HPLC法測(cè)定含高良姜以高良姜素計(jì) 1. 4mg/g0實(shí)施例12 膠囊劑制備
以實(shí)施例10同樣方法得到干燥的提取物，加入10%微晶纖維素，3%微粉硅膠，以 適量90%乙醇作潤(rùn)濕劑，濕法制粒，過篩，烘干，加入適量硬脂酸鎂，混合均勻，制成硬膠囊。 用HPLC法測(cè)定含高良姜以高良姜素計(jì)1.4mg/g。實(shí)施例13: 口服液制備以實(shí)施例10同樣方法得到提取物。取蒸餾水適量，加入10%聚山梨酯-80制成溶 液，另外，將蔗糖、防腐劑適量溶于蒸餾水，在攪拌下加入上述溶液，混勻，過濾，分裝，滅菌， 制得口服液。用HPLC法測(cè)定含高良姜以高良姜素計(jì)大于0. 4mg/ml。
權(quán)利要求
一種中藥組合物，由高良姜、香附、百合、烏藥的提取物為活性成份與藥用輔料組成。
2.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于其中各味生藥按重量份為高良姜 7-15份、香附3. 5-7. 5份、百合15-30份、烏藥7-15份。
3.由權(quán)利要求1所述的中藥組合物制備而成的口服制劑。
4.如權(quán)利要求3所述的中藥組合物，其特征在于其中所述的口服制劑為顆粒劑、片劑、 膠囊劑或口服液。
5.制備如權(quán)利要求1所述的中藥組合物的方法，包括下列步驟1)活性成份提取物制備a)將配比量的高良姜、香附、百合、烏藥用8-12倍量70%-95%乙醇作溶劑，浸漬 10-15小時(shí)后，回流提取2次，合并提取液，離心，濃縮，得提取液I ；b)將a)提取后的藥渣加8-12倍量水，提取2次，提取液離心，濾液濃縮，得提取液II；c)合并上述提取液I、II；2)按常規(guī)方法與藥用輔料制成液體制劑；或?qū)⒑喜⒑蟮奶崛∫哼M(jìn)行噴霧干燥，按常規(guī) 方法與藥用輔料制成固體制劑。
6.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物，單位劑量中高良姜素的含量，采用HPLC法測(cè)定大 于1. 4mg/g,色譜條件是流動(dòng)相為0. 5%乙酸乙腈60 40，柱溫35°C，檢測(cè)波長(zhǎng)267nm。
7.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物在制備治療慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍藥物中的 應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍的中藥組合物及制備方法。本發(fā)明公開的中藥組合物是以高良姜、香附、百合、烏藥的乙醇提取物為主要活性成份與藥用輔料組成的制劑。該制劑對(duì)于慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍患者擁有明確的療效，無常用西藥的易復(fù)發(fā)等缺點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/9062GK101890141SQ200910159348
公開日2010年11月24日 申請(qǐng)日期2009年7月10日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月21日
發(fā)明者傅旭春, 扈榮, 潘福生, 白海波 申請(qǐng)人:杭州華東醫(yī)藥集團(tuán)生物工程研究所有限公司;浙江大學(xué)城市學(xué)院