專(zhuān)利名稱(chēng)：：熱淋清浸膏及其制備方法和用途的制作方法熱淋清浸骨及其制備方法和用途才W賦械明涉及中藥4賦*^言,械明涉及娜賴(lài)膏及其牽恪方法kX^i根膏作為藥輛擁逸總沐頭^(ft4go,aptoftwBudV"HaniexDI)on);l^f牛^i^直物，為多卑生草本別名四季紅、石粹、石#膝7K4^求、i^t^丁、》'彰衫工等。在中國(guó)貴州、云南、廣西、四川、西藏、湖北、湖輛江西等地區(qū)i械分布，主##山坡、山^^^富^^錄的沙頁(yè)巖i錄。全^W清熱if4、、*^功氣據(jù)1963年《廣西中藥志》第二刪餓，頭一t^主要用亍治療恥顯痛；1977年《中藥大辭典》上斷餓，頭;S^主要用亍治療痢疾、腎炎、膀胱炎和#石等。民間-^lf^t^用7K煎服，治療歲踩t^交明顯，^^陰不方H中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)^^i兌明書(shū)CN1054899A中7請(qǐng)了-^f^^靈沖劑、糖^_產(chǎn)工藝，該方法是將中草藥頭繊至煎煮鄉(xiāng)慮，；4^宿成膏狀，再用鴻是取2-3次，真空棘鵬曼膏，期爭(zhēng)是膏分別命J^^H戈沖劑。該生產(chǎn)工藝^Zi舌菔煮、農(nóng)宿、提取、再農(nóng)宿^"驟，工藝復(fù)雜，而且，該方法得到的;^Jt^靈沖劑的藥效學(xué)歲i^^射是高。我們貴州威門(mén)藥財(cái)1^/^]長(zhǎng)4;于中草藥頭;^勺開(kāi)發(fā)利用鵬，我^ll^^n^煎煮兩;^^逸慮i^宿制成熱i^青茅辯立，該制劑7/Hf在中華A^^和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì)1998賴(lài)的中華A^^和國(guó)衛(wèi)生部〈銜。。4和佳--中藥^^制劑》(第十七冊(cè))中，<統(tǒng)^"嗽的不郵^^,^C明/d5見(jiàn)，1998賴(lài)的中華A^^和國(guó)衛(wèi)生部《藥品標(biāo)雄--中藥^"制劑》(第十七冊(cè))中的^^^青茅Mi的命l^工藝中，^R^4'賴(lài)'J方法J^v^好各，t^、該工藝，將1000克頭花蓼煎煮，不可能帝威400拔膏婉立，即1^口Aitf^嫩，制成800克娜青顆抵這種熱沐會(huì)茅嫩制劑由f射M^t低其藥理學(xué)歲i^差。械B月Aif浙中草藥頭^fii行長(zhǎng)^f發(fā)順，辨吉合藥理學(xué)逸^^現(xiàn)，通iit^^耳^4'轉(zhuǎn)'J工藝，得到的頭4t^t是fyf勿的藥您舌性明顯提高，并發(fā)5iiLii種頭^t^樹(shù)4fi^"賴(lài)々療^
發(fā)明內(nèi)容因》匕，^^明的目的^i是供了^H^^彰旻膏；^^明的另一發(fā)明目的^^供了^t帝J^^彰曼膏的方法；^^明的另一發(fā)明目的是提供了*^彰曼膏用于命洛抗菌、抗炎、科'鵬藥物的用逸^^明的另一發(fā)明目的是提供了含有^^明^^彰旻膏的藥4Ma^勿。極明的目的是通itT列方法實(shí)現(xiàn)的。;^^明人分另樹(shù)頭;^勺不同藥用柳iii行了艦，對(duì)頭;ftf"全草、頭^^iLh粉、葉、種子、莖械粉別進(jìn)行了提耳沐刮^,極明嫂現(xiàn)，頭繊襯、種子、莖械4,藥彰封生是有別的，抗i^封:4^i^^勿為最佳抗菌活|"生的強(qiáng)弱;'11^是#">。1>莖>根^!^A^^—發(fā)現(xiàn)中得到啟示，用頭^^^kJ^[^a^^充使用的頭^^全草進(jìn)^^S^這才弁無(wú)^#高了提取旻膏的藥學(xué)活性，又敏翻頭緣銀部。由于頭錄是賴(lài)直物，W釧期艮部，可^€^采集頭^將期艮省,,這樣，頭銶可以私既w了樹(shù)猜源，有銜戶(hù)了廁直被，劍稱(chēng)資源械樹(shù)睹重要意義*^言，極日服供了-^t娜緣膏，糊硪于由頭緣全草的^誠(chéng)干品用水分1-3次煎煮，每次1-2小時(shí)，*煎瓶頓棘至85。C時(shí)賴(lài)時(shí)密顏1.05-1.25、1~1.2，更艦l.2時(shí)，得到浸膏，然后經(jīng)夠千燥，得到浸膏粉。^!明的另"H;fc^^支^C方^l在i^l:"^^^1t力口A^^書(shū)定:^,伊淑口入重量比5%的豐^K定粉。械明的另-^i^M^^^其中頭^f^D其:l4Jl吾盼，其中頭^f^Jl吾l^是葉、花和莖。;^^明的藥4Ma^t勿可以帝威片劑、茅辯立劑、丸劑、月自'、^#"劑、^4t劑、$絲'、栓劑、滴丸劑、射寸、搭傳j、貝^寸、月鼓'J、紙型劑、〉瓦懸劑、西a'J、干灃唐敘'J、；^J^片、石更膏劑、4欠膏劑、才唐敘'J、吝'L^寸、糊、緩釋、控糊劑及輩響制劑，艦制顛嫩劑。一、提*>洛^^明的熱^j爭(zhēng)旻膏是通itr列方法得到的才財(cái)居國(guó)家食品藥品監(jiān)"f"fS^的有^M^，以命械品量1000g為^i^計(jì)算頭^^材的用量。才財(cái)居原標(biāo)碓中頭jt^藥材的用量，i^5角定帝J^熱沐青顆農(nóng)(含^T唐)1000g，熱沐青顆恭(^FM)500g戶(hù)贈(zèng)頭4t^艘為1250g。娜青婉aW飾錄有明榭耽干默法。財(cái)千駄繊亍了術(shù)脫熱淋漸旻膏原主^M^辯g千M方式主要有常溫千J^^a干聚其中，^f]常溫干J^j^i干燥的方法，不姻樹(shù)長(zhǎng)浸膏干驗(yàn)為塊狀物，還需進(jìn)4賴(lài)沐砂卜，鰣后浸膏粉易口魏雄不利于保存。后輛的噴霧干燥生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)使可實(shí)現(xiàn)頭;^^是耳5^輛々瞬間干騰其均勻4Mrt^量辦統(tǒng)，干激斤得妳曼膏4斜S^甜，同時(shí)，瑜絲'J成。口^^青顆4i^質(zhì)量。實(shí)施例1:常溫干燥(編號(hào)W-l)取頭花蓼220Kg，加水煎煮二次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.20±0.05(85°〇)的清膏，濾過(guò)，常溫干燥。實(shí)施例2:減壓干燥(編號(hào)W-2)取頭花蓼220Kg，加水煎煮二次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為120士0.05(85。C)的清膏，濾過(guò)，減壓干燥。實(shí)施例3:噴霧干燥(編號(hào)W-3)取頭花蓼220Kg，加水煎煮二次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.10士0.05(85X:)的清膏,濾過(guò)，噴霧干燥。實(shí)施例4:浸膏加5%的可溶性淀粉噴霧干燥(編號(hào)W-4)取頭花蓼220Kg,加水煎煮二次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.20士0.05(85。C)的清膏，濾過(guò)，加重量比5%可溶性淀粉混勻，噴霧干燥。實(shí)施例5:浸膏加10%的可溶性淀粉噴霧干燥(編號(hào)W-5)取頭花蓼220Kg,加水煎煮二次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為U0士0.05(85。C)的清膏，濾過(guò)，加重量比10%可溶性淀粉混勻，噴霧干燥。實(shí)施例6:浸膏加5%的糊精噴霧干燥(編號(hào)W-6)取頭花蓼220Kg,加水煎煮二次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為U0i0.05(8rC)的清膏，濾過(guò)，加重量比5%糊精混勻，噴霧干燥。<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>可以看出，熱淋清浸膏采用直接噴霧干燥或先加5%的可溶性淀粉與浸膏混合后再?lài)婌F干燥兩種方式均可，但采用加入淀粉較不加淀粉所得的浸膏粉性質(zhì)更加穩(wěn)定，其制成品的含量也較方法1所得浸膏制成品的含量為高。噴霧干燥較傳統(tǒng)蒸發(fā)操作與減壓干燥工藝相比耗時(shí)短、干燥質(zhì)量好、省去蒸發(fā)、粉碎等工序。大大提高了生產(chǎn)效率，同時(shí)又能相對(duì)提高干燥成品熱淋清浸膏的質(zhì)量，因噴霧干燥所得的熱淋清浸膏粉為粉末狀，較傳統(tǒng)干燥成品的流動(dòng)性好，含水量小，質(zhì)地均勻，溶解性好。噴霧干燥具傳熱快，水分蒸發(fā)迅速，瞬間干燥的特點(diǎn)，所得的熱淋清浸膏質(zhì)量好，質(zhì)地松脆，溶解性能也好，改善了成品制劑熱淋清顆粒的溶出速率。以上試驗(yàn)結(jié)果也表明采用噴霧干燥所得的樣品收率較高，水份含量均勾，浸膏粉溶化性好，總黃酮及沒(méi)食子酸含量較高，穩(wěn)定性好，同時(shí)，采用噴霧干燥還可大大縮短干燥時(shí)間，節(jié)約成本。故確定采用噴霧千燥。其中，釆用常規(guī)噴霧干燥，與采用浸膏加5%可溶性淀粉噴霧所得的浸膏就有效成分的含量及穩(wěn)定性而言，以后者更好。二藥效^^t對(duì)上述提取物w-3、w-4進(jìn)行藥效學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，具有良好的抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、利尿、排石、治療腎盂腎炎等藥理活性。具體實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及結(jié)果如下試驗(yàn)一熱淋清浸骨粉抗炎作用試驗(yàn)1.熱淋清浸骨粉對(duì)角叉菜膠誘起的大鼠足跖肺脹的影響樣品配制方法受試藥物熱淋清浸膏粉w-3、w-4系頭花蓼水提取粉，深棕色粉末，臨用時(shí)用蒸餾水研磨配成所需濃度。陽(yáng)性藥物氫化可的松原料，系白色粉末。試劑角叉菜膠臨用時(shí)用生理鹽水配成1%濃度。實(shí)驗(yàn)方法64只大鼠，隨機(jī)均分8組，每組8只，雌雄各半，按表l-l設(shè)計(jì)劑量給藥，每天灌服給藥一次，連續(xù)6次，但氫化可的松在第6天給藥，只給一次。末次給藥后立即用外徑千分尺測(cè)所有大鼠右前肢足跖外直徑。末次給藥后1小時(shí)所有大鼠右前肢足跖處皮下注射1。/。角叉菜膠溶液0.1ml/只，注射角叉菜膠后l、2、3、4及6小時(shí)測(cè)所有大鼠右前肢足跖處直徑，所測(cè)得的各值減去相應(yīng)的用藥前測(cè)得的右前肢足跖處直徑作為腫脹程度，各用藥組平均肺脹程度與對(duì)照組進(jìn)行比較。結(jié)果見(jiàn)表l-l。_表l-l大鼠灌服熱淋清浸膏對(duì)角叉菜膠添g的足媒腫脹的影響_^劑量x次~~^致炎后不同時(shí)間大鼠足跖胂脹程度(單位mm~數(shù)(g原生藥/kg)數(shù)(只)1hr2hr±SD)3hr4hr6hr熱淋清浸膏粉組(w-3)52.4x680.55±0.33A0.89±0.31.35±0.51A1.46±0.35AA1.34±0.37A熱淋清浸膏粉組(w-3)26.2x680.89±0.311.24±0.37A1.59±0.26A1.68±0.27A1.58±0.22A熱淋清浸膏粉組(w-3.)13.1x680.95±0.231.55±0.181.84±0.12.02±0.271.89±0.41淋清浸膏粉組(w陽(yáng)4)5診680.54±0.37A0.87±0.25AA1.35±0.27A1.47±0.39A厶1.33±0.42A熱淋清浸膏粉組(w-4)25.8x680.90±0.241.23±0.38A1.56±0.32A1說(shuō)±0.21A1.56±0.22A熱淋清浸膏粉組(w-4)12.9x680.96±0.211.55±0.431.82±0.232.00±0.431.91±0.21氬化可的松組40mgx180.36±0.18A厶0.42±0.19厶厶0.65±0.24AA0.81±0.27AA0.77±0.27AA對(duì)照組蒸餾水x681.12±0.341.69±0.351.99±0.312.18±0.312.01±0.38用注"A""AA"表示與對(duì)照組比較p0.05,pO.Ol,如表1-1所示熱淋清浸膏粉w-3、w-4對(duì)角叉菜膠誘起的大鼠足跖腫脹有明顯抗炎作其抗炎作用與劑量有4交好的量效關(guān)系。2.熱淋清浸骨粉對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響樣品配制方法受試藥物熱淋清浸膏粉w-3、w-4系頭花蓼水提取粉，深棕色粉末，臨用時(shí)用蒸餾水研磨配成所需濃度。試驗(yàn)方法動(dòng)物在戊巴比妥鈉麻醉下，右下腋手術(shù)放入消毒棉球10mg,術(shù)后24小時(shí)按表l-2分組灌服給藥，每天一次，連續(xù)10天，末次給藥后次日處死大鼠，將棉球連同周?chē)Y(jié)締組織一起取出，剔除脂肪組織，放烘箱中7(TC烘干，稱(chēng)重。將稱(chēng)得重量減去10mg棉球重量作為腫脹程度，并用藥組與對(duì)照組進(jìn)行比較。結(jié)果見(jiàn)表l-2。表l-2大鼠灌服熱淋清浸骨粉對(duì)棉球肉芽腫的影響組別劑量x給藥次數(shù)(g原生藥/kg)動(dòng)物數(shù)肉芽腫干重(mg)熱淋清浸膏粉組(w-3)熱淋清浸膏粉組(w-3)熱淋清浸膏粉組(w-4)熱淋清浸膏粉組(w-4)氫化可的松組對(duì)照組52.4x1026.2x1051.6x1025.8"0翻g/Kgx1蒸餾水x108988947.7土4.7AA59.9±10.647.5土5.7AA50.2±11.244.5土12.6AA62.9±12.6注"A""AA，，表示與對(duì)照組比較p0.05，pO.Ol,由表l-2所示大鼠灌服熱淋清浸膏粉52.4g原生藥/kg/d,連續(xù)10天，以及熱淋清浸膏粉(w-4)51.6g原生藥/kg/d,連續(xù)10天，均對(duì)棉球引起的肉芽腫有明顯抗炎作用。3.熱淋清浸骨粉對(duì)小鼠耳腫脹的影響樣品配制方法受試藥物熱淋清浸膏粉w-3、w-4系頭花蓼水提取粉，深棕色粉末，臨用時(shí)用蒸餾水研磨配成所需濃度。致炎劑巴豆油，藥用級(jí)，臨用時(shí)用V乙醇V水V乙醚=25:5:70混合溶劑配成1%濃度。試驗(yàn)方法每次試驗(yàn)88只小鼠，隨機(jī)均分8組，每組ll只，具體分組見(jiàn)下表動(dòng)物數(shù)劑量濃度給藥量x給藥次數(shù)組別(只)(g原生藥/kg)(mg樣品/ml)(ml/20gx次)對(duì)照組11蒸餾水-0.5x5氬化可的^^組1150mg/kg40.4x5熱淋清浸膏粉1117.4800.5x5(w國(guó)3)熱淋清浸膏粉1134.81600.5x5(w-3)熱淋清浸膏粉1169.63200.5x5(w-3)熱淋清浸膏粉1117.278.50.5x5(w-4)熱淋清浸膏粉1134.31570.5x5(w-4)熱淋清浸膏粉1168.63140.5x5(w-4)所有小鼠在末次給藥后30分鐘于右耳涂上致炎劑0.03ml,4小時(shí)后，處死動(dòng)物，剪下左右兩耳，用直徑為9mm的打孔器沿耳緣于同一部位沖下兩耳片，精確稱(chēng)重。以腫脹度和腫脹抑制率作為檢測(cè)指標(biāo)。結(jié)果見(jiàn)表1-3。表1-3小鼠灌服熱淋清浸骨粉對(duì)巴豆油引起的耳腫脹的影響組別動(dòng)物數(shù)(g原生藥/kg)(只)熱淋清浸膏粉組(w-3)熱淋清浸膏粉組(w-3)熱淋清浸膏粉組(w-3)熱淋清浸膏粉組(w-4)熱淋清浸膏粉組(w-4)熱淋清浸膏粉組(w-4)氫化可的+>組對(duì)照組熱淋清浸膏粉組(w-3)熱淋清浸膏粉組(w-3)熱淋清浸膏粉組(w-3)熱淋清浸膏粉組(w-4)熱淋清浸膏粉組(w隱4)熱淋清浸膏粉組(w-4)氫化可的松組對(duì)照組69.634.817.468.634.317.2翻g/kg蒸餾水69.634.817.468.634.317.240mg/kg蒸餾水平均肝脹度(mg)肺脹抑制率(％)12.5±5.6**48.614.5±5.6**40.320.9±5.114.013.1±5.1**46.114.5±7.2**40.321.5±5.511.510.4±5.1**57.224.3±5.7-9.0±5.8**60,613.8±6.3**40.323.5±8.7-1.79.9±7.2**57.114.8±5.3**35.922.6±7.92.110.5±5.7**54.523.1±5.6注**表示與對(duì)照組比較pO.Ol,試驗(yàn)結(jié)果小鼠灌服熱淋清浸膏粉(w-3)34.8和69.6原生藥g/kg劑量，連續(xù)5天，可明顯抑制巴豆油引起的耳腫脹，最高腫脹抑制率可達(dá)60.6%,并與劑量呈一定的量效關(guān)系。此外，小鼠灌服熱淋清浸膏粉(w-4)34.3和68.6原生藥g/kg劑量，連續(xù)5天，可明顯抑制巴豆油引起的耳腫脹，最高腫脹抑制率可達(dá)57.1%，并與劑量呈一定的量效關(guān)系?？梢?jiàn)熱淋清浸膏粉(w-3、w-4)對(duì)巴豆油引起的炎性反應(yīng)有較好的抗炎作用。綜上所述，熱淋清浸骨粉具有良好的抗炎活性。試驗(yàn)二熱淋清浸骨粉鎮(zhèn)痛作用試驗(yàn)l.扭體法鎮(zhèn)痛試驗(yàn)樣品制備受試藥物熱淋清浸膏粉w-3、w-4臨用時(shí)用蒸餾水研磨配成所需濃度。陽(yáng)性藥物羅通定片臨用時(shí)用0.50/。CMC配制，由四川天策藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。試驗(yàn)方法每次試驗(yàn)80只小鼠，隨機(jī)均分8組，每組10只，雌雄各半。熱淋清浸膏粉w-3、w-4各三組,w-3劑量分別為17.4、34.8、69.6g原生藥/kg，w-4劑量分別為17.2、34.3、68.6g原生藥/kg,—組羅通定片，劑量50mg/kg/d,另一組為對(duì)照灌服等體積的蒸餾水。每天灌服給藥一次，連續(xù)六天，末次給藥后1小時(shí)小鼠腹腔注射0.5%水醋酸溶液0.2m1/只，立即觀察記錄20分鐘內(nèi)動(dòng)物扭體次數(shù)，計(jì)算各組動(dòng)物平均扭體次數(shù)。用藥組分別與對(duì)照組進(jìn)行比較。結(jié)果見(jiàn)表2-1。表2-l小鼠灌服熱淋清浸骨粉的鎮(zhèn)痛作用(扭體法)_組別劑量x給藥次數(shù)(g原生藥/kg)動(dòng)物數(shù)(只)平均Ja體次數(shù)熱淋清浸膏粉組(w-3)熱淋清浸膏粉組(w-3)熱淋清浸膏粉組(w-3)熱淋清浸膏粉組(w-4)熱淋清浸膏粉組(w隱4)熱淋清浸膏粉組(w-4)羅通定片組對(duì)照組熱淋清浸膏粉組(w隱3)熱淋清浸膏粉組(w-3)熱淋清浸膏粉組(w-3)熱淋清浸膏粉組(w-4)熱淋清浸膏粉組(w-4)熱淋清浸膏粉組(w-4)羅通定片組對(duì)照組69.6x634.8x617.4x668.6x634.3x617.2x650mg/kgx&蒸餾水x669.6x634.8x617.4x668.6x634.3x617.2x650mg/kgx6蒸餾水x6109.8土12.9厶A109.8土13.2AA1014.1士9.1A109.8土12.9AA109.8土13.2AA1014.1土9.1A105.6士6.1AA1027.3±8.61014.9土14.2AA1021.2士18.2A1033.1±12.4109.8土12.9AA109.8土13.2AA1014.1土9.1A1013.5士13.4AA1037.4±15.7如表2-l所示頭熱淋清浸膏粉對(duì)冰醋酸誘發(fā)的小鼠疼痛有明顯鎮(zhèn)痛作用。其鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)弱與劑量有較好的量效關(guān)系。2.熱輻射法鎮(zhèn)痛試驗(yàn)試驗(yàn)方法(l)測(cè)正常痛閾值，篩選合格小鼠150只小鼠于給藥前測(cè)定兩次痛閾值，以甩尾作為疼痛指標(biāo)，篩選痛閾值在3-10秒的小鼠用于試驗(yàn)，取其兩次平均痛閾值作為正常值。(2)劑量設(shè)置與分組將篩選出的合格小鼠分為5組，按下表進(jìn)行給藥組別動(dòng)物數(shù)(只)劑量(g原生藥/kg)濃度(mg樣品/ml)給藥量x給藥次數(shù)(ml/20gx次)對(duì)照組14蒸餾水-0.5x6羅痛定組1350mg/kg2.50.4x6熱淋清浸膏1317.4800.5x6粉組(w-3)熱淋清浸膏1334.81600.5x6粉組(w-3)熱淋清浸膏1369.63200.5x6粉組(w隱3)熱淋清浸膏1317.278.50.5x6粉組(W"4)熱淋清浸膏1334.31570.5x6粉組(w-4)熱淋清浸膏1368.63140.5x6粉組(w-4)(3)檢測(cè)指標(biāo)分別于給藥后3天和6天測(cè)定各組小鼠的痛闊值，超過(guò)30秒者按30秒計(jì)。然后進(jìn)行自身對(duì)照和組間對(duì)照，并計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率(鎮(zhèn)痛百分率(％)_給藥組平均痛閾值-對(duì)照組平均痛閾值xl00%)。結(jié)果見(jiàn)表2-2。懼涌曰^羊?qū)φ战M平均痛閾值_表2-2小鼠灌服熱淋清浸骨粉的鎮(zhèn)痛作用(熱刺激法)_痛閾值(s,±SDg動(dòng)物數(shù)劑量(g原給藥前給藥后3d給藥后6d(只)生藥/kg)(鎮(zhèn)痛百分率)(鎮(zhèn)痛百分率)對(duì)照組148.50±1.1811.4±6.5010.7±3.87羅痛定組熱淋清浸膏粉(w-3)低劑131350mg/kg17.48.65±0.778.46±0.9917.2±6.73***A(50.9%)11.1±3.04*20.5士8.09"A△(91.6%)13.5±楊**(26.2%)熱淋清浸膏粉(w-3)中劑1334.88.54±1.2810.2±3.6312.5±5.14*(16.8%)熱淋清浸膏粉(w-3)高劑1369.68.54±1.5515.0±6.65**(31.6%)16.4±6.56**(53.3%)熱淋清浸膏粉(w-4)低劑1317.28.66±1.1212.3±2.98*13.9±4.15**(29.9%)熱淋清浸膏粉(w-4)中劑1334.38.42±0.8910.9±3.3313.1±4.84'(22.4%)熱淋清浸膏粉(w-4)高劑1368.68.54±1.0814.9±5.83**(30.7%)16.3±4.87**(52.3%)注*表示與給藥前自身對(duì)照，PO.05;**表示與給藥前自身對(duì)照，PO.01;A表示與同期對(duì)照組比較，PO.05;厶厶表示與同期對(duì)照組比較，P<0.01由表2-2結(jié)果顯示，羅痛定組動(dòng)物在給藥3d和6d時(shí)，其平均痛閾值的自身對(duì)照及同對(duì)照組的組間對(duì)照均有顯著性差異(PO.Ol)，鎮(zhèn)痛百分率分別達(dá)50.9%和91.6%。說(shuō)明羅痛定的鎮(zhèn)痛作用是有效可靠的，本試驗(yàn)方法是可行的。分別對(duì)于熱淋清浸膏粉w-3、w-4三個(gè)劑量組，給藥3天時(shí)，兩個(gè)高劑組自身對(duì)照均有顯著性差異(PO.01);給藥6天時(shí)，各組自身對(duì)照均有顯著性差異，以高劑組效果最佳(PO.OOl)，但與對(duì)照組比較，均無(wú)顯著性差異。熱淋清浸膏粉w-3高劑組在給藥3d和6d時(shí)的鎮(zhèn)痛百分率分別為31.6%和53.3%;熱'淋清浸膏粉w-4高劑組在給藥3d和6d時(shí)的鎮(zhèn)痛百分率分別為29.9%和52.3%。實(shí)驗(yàn)三熱淋清浸骨粉的利尿作用試驗(yàn)1.熱淋清浸骨粉對(duì)麻醉家兔的利尿作用(導(dǎo)尿管集尿法)樣品配制方法受試藥物熱淋清浸膏粉w-3、w-4臨用時(shí)分別用蒸餾水研磨配成所需濃度。P曰性藥速尿(呋塞米片)。麻醉劑烏來(lái)糖(Urethame)配成25%濃度備用。試驗(yàn)方法將家兔按體重隨機(jī)分組，設(shè)立空白對(duì)照組，陽(yáng)性藥組(速尿8mg/kg)及熱淋清浸膏粉(w-3)34.8、17.4、8.7g原生藥/kg、熱淋清浸膏粉(w-4)34.3、17.2、8.6g原生藥/kg各三劑量。將家兔麻醉后30分鐘，背位固定于手術(shù)臺(tái)上，用溫水浸潤(rùn)過(guò)的14號(hào)導(dǎo)尿管輕而慢插入尿道。經(jīng)膀胱括約肌進(jìn)入膀胱后有尿液滴出，表示插入成功，插入深度約812cm。用膠布固定導(dǎo)尿管于兔體。輕輕擠壓兔下腹部，排盡膀胱內(nèi)尿液。然后按公斤體重灌服37。C溫生理鹽水40ml/kg,隨后分別記錄0.5、1.0、1.5、2.0、2.5小時(shí)尿液排泄量，直至灌服的生理鹽水量排泄80~90%后再進(jìn)行第二次灌服，此時(shí)用藥組開(kāi)始給藥。熱淋清浸膏粉根據(jù)兔子體重分別稱(chēng)取一定樣品重量后用40ml/kg生理鹽水調(diào)配后灌服。第二次灌服后同第一次類(lèi)同操作，記錄0.5-2.5小時(shí)時(shí)間內(nèi)尿液量。比較給藥組與對(duì)照組在第二次灌服后的尿量差異。及對(duì)用藥后0.5、l.O二時(shí)間點(diǎn)尿量排泄百分率(％)進(jìn)行比較。結(jié)果見(jiàn)表3-l。<table>tableseeoriginaldocumentpage0</column></row><table>注""表示與生理鹽水組比較p0.05,"""表示與生理鹽水組比較pO.Ol。'_表3-2熱淋清浸骨粉對(duì)^醉家兔的利尿作用(艱泄百分率％)組別樣本數(shù)對(duì)照組速尿組熱淋清浸膏粉(w-3)熱淋清浸膏粉(w-3)熱淋清浸膏粉(w-3)熱淋清浸膏粉(w-4)熱淋清浸膏粉(w-4)熱淋清浸膏粉(w-4)5555555劑量(g原生藥/kg)0.5小時(shí)1小時(shí)生理鹽水8mg/kg9.8±5.924.0±4.8**15.4±6.625.4±4.4*34.86.9±3.120.9±4.117.420.0±5.4**38.9±8.2**8.76.4±3.819.8±3.134.38.8±3.226.1±3.9*17.223.7±4.9**45.1±6.8**8.67.7±3.823.0±4.5注""表示與生理鹽水組比較p0.05,"""表示與生理鹽水組比較pO.Ol由表3-l可見(jiàn)熱淋清浸膏粉w-3中劑量17.4g原生藥/kg及w-4中劑量17.2g原生藥/kg,在用藥后0.5小時(shí)即呈現(xiàn)出利尿作用，與同時(shí)間點(diǎn)生理鹽水組比較有顯著性差異(p<0.01)。用藥后1.0小時(shí)低，中劑量組同樣表現(xiàn)出差異(與生理鹽水比較)，排泄尿量顯著性超過(guò)生理鹽水小組(分別p<0.05,PO,Ol)。陽(yáng)性藥也顯示出明顯的利尿作用。但熱淋清浸膏粉(w-3)34.8g原生藥/kg劑量組及熱淋清浸膏4分(w-4)34.3g原生藥/kg劑量組在本次試驗(yàn)中沒(méi)有出現(xiàn)明顯藥效作用，即未呈量效關(guān)系，推測(cè)是否由于過(guò)多的藥粉吸收了灌服水份所致。從給藥后0.5、1.0小時(shí)的尿量排泄百分率(％)(表3-2)來(lái)看，陽(yáng)性藥速尿的利尿強(qiáng)度最大。0.5小時(shí)已排出24.00/o的尿量，熱淋清浸膏粉w-3的17.4g原生藥/kg劑量組及w-4的17.2g原生藥/kg劑量組也呈現(xiàn)較強(qiáng)的利尿作用，從表中可看出中藥熱淋清浸膏粉的利尿起效時(shí)間不如西藥速尿，相對(duì)要延后些。2.熱淋清浸骨粉對(duì)正常大鼠的利尿作用試驗(yàn)試驗(yàn)方法(1)篩選合格動(dòng)物所有大鼠先禁食18小時(shí)，然后灌服生理鹽水5ml/100g體重，以2小時(shí)內(nèi)排尿量達(dá)30。/。者為合格動(dòng)物用于試驗(yàn)，共篩選出大鼠76只。(2)劑量設(shè)置與分組熱淋清浸膏粉以34.8g原生藥/kg作為起始劑量進(jìn)行預(yù)試，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果逐步降低劑量17.4、8.7、4.4g原生藥/kg;熱淋清浸膏粉w-4以34.3g原生藥/kg作為起始劑量進(jìn)行預(yù)試，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果逐步降低劑量17.3、8.6、4.3g原生藥/kg藥液，在灌服前均37。C水浴溫?zé)崞獭＞唧w分組見(jiàn)下表組別動(dòng)物數(shù)(只)劑量(g原生藥/kg)濃度(mg樣品/ml)給藥量(m畫(huà)g)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>(3)方法和指標(biāo)每只動(dòng)物給藥后即投入代謝籠中，開(kāi)始計(jì)時(shí)收集尿液。每隔1小時(shí)測(cè)量尿量一次，紀(jì)錄給藥后1-4小時(shí)內(nèi)的排尿情況，計(jì)算每只大鼠各時(shí)間點(diǎn)的排尿百分率(排尿百分率(%)=各時(shí)間點(diǎn)排尿量)作為判斷標(biāo)準(zhǔn)，以觀察利尿情況。動(dòng)物灌服藥液體積(ml)_表3-2熱淋清浸膏粉對(duì)正常大鼠的利尿作用(排泄百分率％)_<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>注"""表示與對(duì)照組比較pO.Ol由表3-2結(jié)果顯示，熱淋清浸膏粉8.7g原生藥/kg劑量在給藥后0-2小時(shí)內(nèi)有明顯的利尿作用，與同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組比較PO.Ol。而熱淋清浸膏粉(w-4)8.6g原生藥/kg劑量在給藥后0-2小時(shí)內(nèi)有明顯的利尿作用，與同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組比較PO.Ol。與陽(yáng)性藥速尿比較，熱淋清浸膏粉(w-3)8.7g原生藥/kg及熱淋清浸膏粉(w-4)8.6g原生藥/kg的利尿作用均呈現(xiàn)出起效時(shí)間慢、作用強(qiáng)度亦較弱的特點(diǎn)。而兩組的其它各劑量均未顯出明顯的利尿作用。實(shí)驗(yàn)四對(duì)大鼠腎盂腎炎模型的療效試驗(yàn)樣品配制方法受試藥物熱淋清浸膏粉(w-3、w-4)臨用時(shí)用蒸餾水研磨配成所需濃度。氟哌酸，臨用前以生理鹽水配成懸液。菌林大腸埃希氏菌ATCC25922,普通肉湯37。C培養(yǎng)12小時(shí)后，菌量達(dá)107/ml,用于動(dòng)物感染。實(shí)驗(yàn)方法大鼠200250g,腹腔注射戊巴妥鈉(配成15mg/ml濃度，按0.2ml/100g體重給藥)30mg/kg麻醉。俯臥固定，背側(cè)切開(kāi)，充分暴露右腎，采用0.25ml容量卡介苗注射器(4#針頭)于腎實(shí)質(zhì)部，分三處接種10々ml菌液50W。術(shù)后置于代謝中單獨(dú)飼養(yǎng)。收集術(shù)后24小時(shí)的新鮮尿樣，以血球計(jì)數(shù)板顯微鏡下檢查尿樣中的白細(xì)胞數(shù)，每立方毫米尿樣中的白細(xì)胞數(shù)在100個(gè)以上者，視為腎盂腎炎模型成功。將模型鼠按尿液中的白細(xì)胞值及性別隨機(jī)分為6組熱淋清浸膏粉(w-3)52.32和26.16g生藥/kg組，熱淋清浸膏粉(w-4)51.6和25.8g生藥/kg組，氟哌酸(0.03g/kg)及模型組，同時(shí)設(shè)正常對(duì)照組(未感染細(xì)菌者)，動(dòng)物分組完畢后，即灌胃給予相應(yīng)受試藥物，模型組i.g.生理鹽水，連續(xù)給藥7天，每天給藥前收集尿樣，計(jì)數(shù)尿樣中的白細(xì)胞數(shù)。分別收集受試各組動(dòng)物給藥后1、2、3、5、7天的尿樣，釆用日本MA-4210型尿分析儀對(duì)尿樣以下指標(biāo)作半定量測(cè)定糖(GLU)、尿蛋白(PRO),隱血(BLD)、酮體(KET)、膽紅質(zhì)(BIL)以及尿膽原(URO)。尿分析的結(jié)果轉(zhuǎn)化為分值"_"計(jì)1分，"+"計(jì)2分，"++"計(jì)3分，"+++"計(jì)4分，"++++"計(jì)5分，求出各組的平均分值，采用非參法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；尿液中的白細(xì)胞統(tǒng)計(jì)采用t檢驗(yàn)比較給藥組與模型組的差異。上述統(tǒng)計(jì)均采用SPSS軟件進(jìn)行。結(jié)果見(jiàn)表4-l。_表4-l熱淋清浸骨粉對(duì)腎盂腎炎大鼠尿液白劍趙的影響(X±SD,個(gè)/mm3)_劑量(g分組生藥給藥前給藥后(天)/kg)_0_^__^_^_567560±319528±289448±239392±195277±146191±11310:±778±516594±327509±264372±209263±122146±97*63±52*29±3115±14*586±336512±316422±238325±227227±174139±10989±6859±43595±331513±285383±212256，」63132±89*75±61*30±3317±13*596±338515±298495±243318±217208±124119±9576±5249±38588±321338±，*217*士*1441，*44±35**22±13**5±7**4±3**3±4**3±3**2±2**2±3**3±4**2±2**3±4**3±4**注給藥各組、模型組進(jìn)行比較，"""表示pO.Ol,""表示p0.05由上表可知試驗(yàn)中的大鼠腎盂腎炎能自行恢復(fù)，而熱淋清浸膏粉52.32g生藥/kg/kg組及熱淋清浸膏粉(w-4)51.6g生藥/kg兩組的恢復(fù)要明顯優(yōu)于模型組，給藥后第2、3、4、5、6、7天，該組大鼠尿液中的白細(xì)胞數(shù)量明顯少于模型組(p<0.01，0.05),但其作用不及氟哌酸，熱淋清浸膏粉(w-3)26.16g生藥/kg及熱淋清浸膏粉(w-4)25.8g生藥/kg模型組(w-3)(w-4)氟哌酸正常對(duì)照052.3226.1651.625.80.03兩組對(duì)腎盂腎炎大鼠尿液中的白細(xì)胞沒(méi)有明顯影響。對(duì)腎盂腎炎大鼠尿液生化指標(biāo)的影響試驗(yàn)表明熱淋清浸膏粉52.32g生藥/kg及熱淋清浸膏粉(w-4)51.6g生藥/kg兩組于給藥后2和3天與模型相比，隱血明顯減少(p0.05)。尿液中的其余各項(xiàng)指標(biāo)，給藥各組及模型組均無(wú)明顯差異。綜上所述，i.g.熱淋清浸膏粉52.32g生藥/kg或熱淋清浸膏粉(w-4)5L6g生藥/kg對(duì)大鼠腎盂腎炎有一定的療效，連續(xù)給藥3天后能顯著減少腎盂腎炎大鼠尿液中的白細(xì)胞數(shù)量和尿中的隱血量，i.g.熱淋清浸膏粉26.16g生藥/kg及熱淋清浸膏粉(w-4)25.8g生藥/kg對(duì)大鼠腎盂腎炎沒(méi)有明顯治療作用。實(shí)驗(yàn)五體內(nèi)外抗菌作用(一)體外抗菌作用1、樣品配制方法受試藥物熱淋清浸膏粉w-3、w-4臨用時(shí)用蒸餾水研磨配成所需濃度。沒(méi)食子酸含量98%。鹽酸環(huán)丙沙星試驗(yàn)時(shí)用無(wú)菌水溶液配制，制備成終濃度為256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、1、0.5、0.25、0.125、0.06ug/mi的系列含藥平皿待用。頭孢三。秦鈉氟哌酸膠囊潔爾陰洗液氟康唑片2、試驗(yàn)菌林試驗(yàn)時(shí)配制方法同鹽酸環(huán)丙沙星'試驗(yàn)時(shí)配制方法同鹽酸環(huán)丙沙星<規(guī)祐"120ml/瓶，1g原生藥/ml。試^r時(shí)配制方法同鹽酸環(huán)丙沙星。革蘭陽(yáng)性菌101林包括金黃色葡萄球菌20抹表皮葡萄球菌20林卡他氏球菌20抹淋球菌20林革蘭陰性菌100抹:變形桿菌屬20抹綠假單孢菌20林真菌26抹白色念i朱菌20林紅色毛癬菌2抹厭氧菌21才朱脆弱擬桿菌10林A型溶血性鏈球菌10林滕黃八疊球菌l林C群鏈球菌10抹大腸埃希菌20抹痢疾桿菌20抹肺炎克雷伯菌20林銅石膏樣小孢子菌2抹石膏樣癬菌2林消化3求菌3才朱消化鏈球菌3林痤癡丙酸桿菌3林顆粒丙酸桿菌2林共計(jì)248抹，均經(jīng)常規(guī)方法鑒定后使用。質(zhì)控菌抹金黃色葡萄球菌ATCC25923大腸埃希菌ATCC25922銅綠假單孢菌ATCC278533、培養(yǎng)基及其培養(yǎng)MM-H培養(yǎng)基中國(guó)藥品生物制品檢定所產(chǎn)品，M-H肉湯培養(yǎng)基稱(chēng)取25g加1000ml蒸餾水，加熱溶解，分裝,高壓滅菌，116°C20分鐘。M-H固體培養(yǎng)基稱(chēng)取36g,加1000ml蒸餾水，高壓滅菌，116。C20分鐘，用于革蘭陽(yáng)性、陰性需氧菌的藥敏試驗(yàn)。鏈球菌屬培養(yǎng)基中加10%的脫纖維羊血。淋球菌使用淋球菌專(zhuān)用培養(yǎng)基，35°C,5%C02環(huán)境中培養(yǎng)48小時(shí)觀察結(jié)果。(英國(guó)oxiod公司產(chǎn)品)。白色念珠菌及其他真菌用真菌專(zhuān)用培養(yǎng)基(沙氏培養(yǎng)基)，28。C培養(yǎng)，48h-72h觀察結(jié)果。^^菌培養(yǎng)；^^L菌專(zhuān)用i^^基^f^不竟，35。C培養(yǎng)48h觀察結(jié)果。4、試驗(yàn)方法(1)最1氐4中菌濃度(MIC)的測(cè)定采用瓊脂二倍稀釋法分別測(cè)定熱淋清浸膏粉w-3、w-4的最低抑菌濃度(MIC)。用多點(diǎn)接種儀將細(xì)菌接種于含不同藥物濃度的瓊脂平皿表面，每點(diǎn)含菌量約為105CFU/ml，37。C孵育18小時(shí)(淋球菌孵育48小時(shí))觀察結(jié)果，以無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)平皿培養(yǎng)基中所含藥物的最低濃度為藥物對(duì)該菌的最低抑菌濃度(MIC值)。每皿中所含熱淋清浸膏粉w-3的終濃度分別為400,200,100，50,25,12.5，6.25，3.12,1.56,0.78,0.39,0.2，0.1,0.05,0.025,0.0125，0.006mg原生藥/ml。每皿中所含熱淋清浸膏粉w-4的終濃度分別為400,200,100，50,25，12.6,6.3,3.15,1.58，0.79,0.40,0.2，0.1,0.05,0.025,0.012,0.006mg原生藥/ml。(2)最低殺菌濃度(MBC)的測(cè)定先用液體二倍稀釋法測(cè)定出熱淋清浸膏粉w-3、w-4對(duì)試驗(yàn)菌林的MIC值后，再吸取未見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)管的培養(yǎng)液O.lml于無(wú)藥的瓊脂平皿表面，用滅菌玻棒推勻后，37。C繼續(xù)培養(yǎng)18-20小時(shí)，仍無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)的藥物最低濃度為最低殺菌濃度(MBC,MininalBactericidalConctntraion)。(3)不同影響因素對(duì)熱淋清浸青粉的抑菌作用(MIC)的影響改變培養(yǎng)基PH值(5.0、7.0、9.0)，改變接種菌量(105、107、109CFU/ml),改變培養(yǎng)基中血清濃度(O,10，25,50%)，再測(cè)定其MIC值。5、試驗(yàn)結(jié)果接表5-1熱淋清浸骨粉的體外抗菌語(yǔ)MIC值細(xì)菌(菌號(hào))熱淋清浸膏粉w-3(mg原生藥/ml)熱淋清浸膏粉w-4(mg原生藥/ml)沒(méi)i子環(huán)丙沙(mi)星(叩加)頭孢三。秦鈉(|jg/mi)潔爾陰(mg原生藥/ml)氟康唑(|jg/ml)淋球菌130.050.050.010.0150.00152Nt19(l)對(duì)臨床分離致病菌的體外作用，結(jié)果見(jiàn)表5-l、表5-2、表5-3。表5-l熱淋清浸骨粉的體外抗菌鐠_MIC值_熱淋清浸膏熱淋清浸膏沒(méi)食子環(huán)丙沙頭孢三——潔爾陰粉w-3(mg原粉w-4(mg原酸星((jg/ml)嗪鈉(mg原生生藥/ml)生藥/ml)(mg/ml)(pg/ml)藥/ml)痢疾桿菌銅綠假單孢菌994肺炎克雷伯菌9938肺炎克雷伯菌9939大腸埃希菌992大腸埃希菌993大腸埃希菌ATCC25922變形4干菌993變形桿菌994滕黃八疊球菌金黃色葡萄球菌209P金黃色葡萄球菌9981金黃色葡萄球菌9982金黃色葡萄球菌9983表葡球菌994表葡球菌995表葡球菌9916卡他氏球菌3C群鏈球菌A型溶血性鏈球菌1001002525256.2525252512.56.2512.512.512.56.2512.56.2540040040012.512.512.56.253.123.126.2512.512.512.512.512.56.256.2512.512.56,2512.512.512.54>128Nt'4>128Nt4>128Nt464Nt0.5128Nt0.54Nt0.50.03Nt16>128Nt162Nt44Nt0.54Nt48Nt48Nt0.58Nt88Nt1>128Nt14Nt2>128Nt0.5>128Nt_J_^_0細(xì)50.786.2580.0150細(xì)580.780.001562.50.780細(xì)531.50.396.25160.01250.0015160.0150.012580.0150.001540.786.2540.786.2510.780.391§§5553555R3RR3R3gww685858555-88570707000r^77-3555535533？l13553553.,11o—-_rjrjT3T-—-，~菌菌菌菌菌菌菌菌菌菌菌菌求求求求求求求求求&求求淋淋淋淋淋淋淋淋淋淋淋淋*Nt=Nottested表5-2熱淋清浸骨粉對(duì)臨床分離221林菌林的體外抗菌活性比較細(xì)菌(抹數(shù))熱淋清浸膏w-3(mg原生藥/ml)熱淋清浸w-4(mg原生藥/ml)沒(méi)食子酸(mg/ml)環(huán)丙沙星頭孢三。秦鈉(pg/ml)潔爾陰(mg原生藥/ml)氟康唑金黃MIC5012.512.612.50.5162.50.010.011.560.390.390.780.7825252512.525255012.512.512.5252512.56.2512.525256.2512.5250.01250.01256.250.00150.1250.050.39128>128>128>128>128>128>128>128128>128128>128>128>128>128>128128128>128>12812818431.2516831.254431.25862.581284462.5462.581644814151617181920白色念珠菌011白色念珠菌012白色念珠菌013白色念珠菌014白色念珠菌015白色念珠菌016白色念珠菌017白色念J朱菌018白色念珠菌019白色念珠菌0110白色念珠菌0111白色念珠菌0112白色念珠菌0113白色念珠菌0114白色念珠菌0115白色念珠菌0116白色念珠菌0117白色念珠菌0118白色念珠菌0119白色念珠菌01202o211冗sssSSSo3ooooooooo0,1sl丄4:^isSwwooooooooooo1CC000444442224444424oooooo<uooo巧巧11巧沿巧oooooo;!;00000444442oooooooooooooooooooooo0curl;n0丄06KK11K1u116111。13611&COO>>1>1>>>>>1>>>NNNNNNN555^52252菌菌菌菌菌菌菌淋淋淋淋淋淋淋MIC90MICR3ng6MIC50MIC90MICRangeMIC50MIC90MICRange12.512.612.562.5Nt3.12-12.53.15-12.63.12-12.50.25-41-831.25-12.'6.256.312.5121612.512.6254862.56.25-256.3-256.25-250.5-82->1288-1254004001.522250400400.524250200-400200-4006.25-12.50.5-21-4125-250NtNtA型溶血性鏈球菌(10)c群鏈球菌(10)MIC50MOOMICRangeMIC50MIC90MICR3門(mén)g640040040040012.512.5200-400200-4006.25-2540040040040012.512.5120.5-40.50.5200-400200-4006.25-12.50.25-1240.5-16120.5-212512562.5-250NtNtNt大腸MIC50埃，MIC9050506.2511NtNt菌MIC(20)Range25253.120.50.550506.25116.25-506.鄉(xiāng)3.12-12.50.5-10.5-1細(xì)菌(林?jǐn)?shù))銅綠假單孢菌(20)痢疾桿菌接表5-2熱淋清浸骨粉對(duì)臨床分離221林菌林的體外抗菌活性比較(mg原生藥/ml)Nt熱淋清浸熱淋清沒(méi)食子酸環(huán)丙沙頭孢三,膏w-3(mg浸膏(mg/ml)星鈉,ml)原生藥w-4(mg原(pg/ml)/ml)生藥/ml)MIC5020020025416MOO400400508128MICRan100-400100-40012.5-1002-84-128geMIC50100湖12.524MIC9020020025464氟康峻(pg/ml)NtNtNtMIC50MOOMICRangeNt=Nottested252512.5216505012.54>128Nt12.5-5012.6-506.25-251-82->128Nt黃疊菌腠八球皮萄菌s他球M表葡球"卡氏斷炎雷菌o肺克伯s細(xì)菌(菌號(hào))MIC值熱淋清浸膏粉w-3(mg原生藥/ml)熱淋清浸膏粉w-4(mg原生藥/ml)潔爾陰(mg原生藥/ml)石膏樣小孢子菌1湖1008(濕)*石膏樣小孢子菌2■1008(1/64)石膏樣癬菌1505016(1/32)石膏樣癬菌2■■Nt紅色毛褲菌15050Nt紅色毛癬菌22525Nt脆弱擬桿菌1100100Nt脆弱擬桿菌25050250(1/4)脆弱擬桿菌3200200125(1/8)脆弱擬桿菌4■■500(1/2)脆弱擬桿菌55050250(1/4)脆弱擬桿菌65050125(1/8)脆弱擬桿菌75050125(1/8)脆弱擬桿菌82525125(1/8)脆弱擬桿菌9100■250(1/4)脆弱擬桿菌10■100250(1/4)消化球菌15050125(1/8)消化球菌2100100250(1/4)消化球菌3200200500(1/2)消化鏈球菌1200200500(1/2J消化鏈球菌25050500(1/2)消化鏈球菌32525250(1/4)痤瘡丙酸桿菌15050250(1/4)痤瘡丙酸桿菌22525250(1/4)MICRan50-40050-4006.25-251國(guó)81-128淋j泉MIC500.050.050.390.20.01258^MIC900.390.400.780.786.2531.25Nt，、MICRan0.025>3.120.02M.150.05"1.560.001&O.0.001&6.251-31.25(20)ge78變形MIC50桿菌MIC90屬M(fèi)ICRan(20)ge12.582501616NtNt12.W002-160.5->128MIC5040040012.5>128>12880.5MIC9040040025>128>12862.54MICRan200，脅4006'25-5032國(guó)>128128國(guó)>1284-62.50.03-8(20)ge*Nt-隨ested表53熱淋清浸骨粉對(duì)27抹^^菌、鄉(xiāng)菌的MICS25^5o125cl,色珠白念菌痤瘡丙酸桿菌312.5顆粒丙酸桿菌125顆粒丙酸桿菌2_*()內(nèi)為潔爾陰洗液稀釋度Nt=Nottested試驗(yàn)結(jié)果表明熱淋清浸膏粉對(duì)所試金黃色葡萄球菌，表皮葡萄球菌具有一定的抗菌作用，MICRange為3.12~25mg/ml,MICso各為12.5和6.25mg/ml;對(duì)卡他氏球菌，A型溶血性鏈球菌、C群鏈球菌抗菌作用差，MICRange為200~400mg/ml;對(duì)淋球菌呈現(xiàn)較強(qiáng)的抗菌活力，MICRange為0.025-3.12mg/ml，MIC50，MICw分別是0.05和0.39mg/ml,與沒(méi)食子酸的抗菌活力相當(dāng)。熱淋清浸膏粉對(duì)淋球菌、金黃色葡萄球菌，表皮葡萄球菌等的抗菌作用強(qiáng)于潔爾陰。熱淋清浸膏粉對(duì)革蘭陰性菌中的大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、變形桿菌亦呈現(xiàn)一定的抗菌活力，MICRange為6.25~100mg/ml;對(duì)銅綠假單孢菌和痢疾桿菌的抗菌活力差，MICRange為50~400mg/ml;對(duì)白色念珠菌的抗菌活力差，MICRange在200-400mg/ml;對(duì)石膏樣小孢子菌、石膏樣褲菌和紅色癬菌的MIC為25~100mg/ml。熱淋清浸膏粉對(duì)白色念珠菌的抗菌活力比潔爾陰弱。熱淋清浸膏粉對(duì)所試厭氧菌中的脆弱擬桿齊、消化球菌、消化鏈球菌和痤瘡丙酸桿菌、顆粒丙酸桿菌呈現(xiàn)一定的抗菌活力，MIC值為25~200mg/ml。而熱淋清浸膏粉w-4同樣對(duì)所試金黃色葡萄球菌，表皮葡萄球菌具有一定的抗菌作用，MICRange為3.15~25mg/ml，MIC50各為12.6和6.3mg/ml;對(duì)卡他氏球菌，A型溶血性鏈球菌、C群鏈球菌抗菌作用差，MICRange為200~400mg/ml;對(duì)淋球菌呈現(xiàn)較強(qiáng)的抗菌活力，MICRange為0.025~3.12mg/ml,MIC50，MIC卯分別是0.05和0.40mg/ml,與沒(méi)食子酸的抗菌活力相當(dāng)。熱淋清浸膏粉w-4對(duì)淋球菌、金黃色葡萄球菌，表皮葡萄球菌等的抗菌作用強(qiáng)于潔爾陰。熱淋清浸膏粉w-4對(duì)革蘭陰性菌中的大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、變形桿菌亦呈現(xiàn)一定的抗菌活力，MICRange為6.3~100mg/ml;對(duì)銅綠假單孢菌和痢疾桿菌的抗菌活力差，MICRange為50~400mg/ml;對(duì)白色念珠菌的抗菌活力差，MICRange在200~400mg/ml;對(duì)石膏樣小孢子菌、石膏樣褲菌和紅色癬菌的MIC為25~100mg/ml。熱淋清浸膏粉w-4對(duì)白色念珠菌的抗菌活力比潔爾陰弱。熱淋清浸膏粉w-4對(duì)所試厭氧菌中的脆弱擬桿菌、消化球菌、消化鏈球菌和痤瘡丙酸桿菌、顆粒丙酸桿菌呈現(xiàn)一定的抗菌活力，MIC值為25~200mg/ml。12.6125(1/8)25250(1/4)■250(1/4)(2)PH值，接種菌量，血清濃度對(duì)熱淋清浸膏粉的MIC值的影響表S4冊(cè)值、^tg量、ifc^^熱淋清浸骨粉的MICtf^^)MlC值(mg原生藥/ml)細(xì)菌(菌號(hào))PH值接種菌量(CFU/ml)血清濃度(％)5.07.09.01051071090102550金黃色葡萄球菌0.23.1212.51.561.563.121.561.561.563.12ATCC25923金黃色葡萄球菌2001-3未長(zhǎng)12.50.786.256.2512.56.256.2512.525金黃色葡萄球菌2001-4未長(zhǎng)6.250.783.126.256.256.256.256.2512.5金黃色葡萄球菌2001-50.212.56.256.2512.512.512.512.512.525大腸埃希氏菌00412.5252512.5252525255050大腸埃希氏菌0056.25252512.5255025505050大腸埃希氏菌0063.126.256.253.126.2512.512.512.512.512.5大腸埃希氏菌0071.563.126.253.123.126.253.123.123.126.25淋球菌01010.20.391.560.390.781.561.563.123.123.12淋球菌01020.781.563.121.561.563.121.561.561.563.12淋球菌01030.20.391.560.783.123.123.123.126.256.25淋球菌01040.20.783.121.563.123.123.123.123.123.12錄54PH值、^m量、ii^m&^淋清浸骨粉w4的MC<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>由上表可知，培養(yǎng)基PH值改變，則熱淋清浸膏粉的MIC值也有所改變，在酸性或中性(PH5.0,PH7.0)環(huán)境中，其MIC值低于堿性環(huán)境(PH9.0)中的MIC值。接種菌量改變(由103增加至109CFU/ml),熱淋清浸膏粉的MIC值隨之增加2-4倍，表明接種菌量對(duì)其MIC值有一定影響；血清濃度改變(0,10%,25%,50%)對(duì)熱淋清浸膏粉的抑菌作用無(wú)顯著影響(見(jiàn)表5-4)。(3)熱淋清浸骨粉的MIC,MBC比較<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>由上表可知，熱淋清浸膏粉在2MIC值濃度呈現(xiàn)一定的殺菌作用(見(jiàn)表5-5)。(二)體內(nèi)保護(hù)作用1、樣品配制方法受試藥物熱淋清浸膏粉臨用時(shí)用蒸餾水研磨配成所需濃度。氟哌酸膠囊試驗(yàn)時(shí)用無(wú)菌水溶液配制。2、實(shí)驗(yàn)菌種用于感染動(dòng)物的細(xì)菌為金黃色葡萄球菌MSSA43、大腸埃希菌994、變形桿菌993、淋球菌14系2000年從成都地區(qū)收集的臨床分離致病菌。經(jīng)重新鑒定后使用。3、實(shí)驗(yàn)方法(1)試驗(yàn)菌液的制備挑取試驗(yàn)菌的2-3個(gè)單菌落接種于M-H肉湯中，37。C培養(yǎng)18小時(shí)，用5%滅菌干酵母液適當(dāng)稀釋備用。(2)最小致死菌量(MLD)的測(cè)定取健康昆明種小鼠，體重18-22克，均勻分組，每組5只小鼠，雌雄兼用，吸取上述不同稀釋度的菌液分別腹腔注射入小鼠體內(nèi)，每鼠0.5ml,感染后連續(xù)觀察7天，并記錄小鼠死亡數(shù)，以引起小鼠100%死亡的最低菌量作為最小致死菌量(MLD)。用該菌量作為體內(nèi)保護(hù)試驗(yàn)的感染菌量。(3)藥液的配制試驗(yàn)用藥均用0.5%CMC配制，熱淋清浸膏粉以口服途徑的給藥劑量為金葡球菌MSSA43、大腸埃希氏菌994、變形桿菌感染小鼠的給藥劑量是30.00、19.50、12.68、8.24、5.36和3.48原生藥g/kg(濃度為1.2、0.78、0.51、0.32、0.21、0.14g原生藥/ml);淋球菌14感染小鼠的給藥劑量是20.00、13.00、8.45、5.49、3.57g原生藥/kg(濃度為0.80、0.52、0.34、0.22、0.14g原生藥/ml)。氟哌酸膠囊以口服途徑給藥的劑量為金葡球菌MSSA43是75.74、49.23、32.00、20.80、13.52和8.79mg/kg(濃度為3.03、1.97、1.28、0.83、0.54、0.35mg/ml);大腸埃希菌994是120.00、78.00、50.70、32.96、21.42和13.92mg/kg(濃度為4.80、3.12、2.03、1.32、0.85、0.55mg/m)；變形桿菌993是50.00、32.50、21.13、13.73、8.93、5.80mg/kg(濃度為2.00、1.30、0.85、0.55、0.36、0.23mg/ml);淋球菌14的劑量是12.00、7.80、5.07、3.29、2.14、1.39mg/kg(濃度為0.48、0.31、0.20、013、0.08、0.05mg/ml)。試驗(yàn)用藥均用0.5%CMC配制，熱淋清浸膏粉w-3以口服途徑的給藥劑量為金葡球菌MSSA43、大腸埃希氏菌994、變形桿菌感染小鼠的給藥劑量是29.60、19.22、12.48、8.10、5.26和3.42原生藥g/kg(濃度為1.18、0.77、0.50、0.32、0.21、0.14g原生藥/ml);淋球菌14感染小鼠的給藥劑量是19.22、12.48、8.10、5.26和3.42原生藥g/kg(濃度為1.18、0.77、0.50、0.32、0.21、0.14g原生藥/ml)。氟哌酸膠囊以口服途徑給藥的劑量為金葡球菌MSSA43是76,40、49.61、32.21、20.92、13.58和8.82mg/kg(濃度為3.05、1.98、1.29、0.84、0.55、0.36mg/ml);大腸埃希菌994是116.76、75.82、49.23、31.97、20.76和13.46mg/kg(濃度為4.68、3.04、1.97、1.28、0.83、0.54mg/ml);變形桿菌993是51.卯、33.70、21.88、14.21、9.23、5.99mg/kg(濃度為2.08、1.35、0.88、0.57、0.37、0.24mg/ml);淋球菌14的劑量是11.96、7.77、5.05、3.28、2.13、1.38mg/kg(濃度為0.49、0.32、0.21、014、0.09、0.06mg/ml)。(4)感染及治療實(shí)驗(yàn)方法將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按性別、體重均勻分組，每組10只小鼠，雌雄各半。小鼠灌胃熱淋清浸膏粉,每日一次，0.5ml/20g鼠重,預(yù)先連續(xù)給藥3天,于第3天給藥后各組小鼠腹腔感染受試菌液，每鼠感染菌量為0.5ml(1MLD),氟哌酸膠嚢于感染菌液后即刻及4小時(shí)各灌胃給藥一次，同時(shí)設(shè)感染對(duì)照組及藥物對(duì)照組(不感染菌)，記錄感染后七天內(nèi)小鼠存活數(shù)，根據(jù)感染后七天動(dòng)物存活數(shù)計(jì)算其半數(shù)有效劑量(ED5G)及其95%可信限。(5)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理熱淋清浸膏粉與對(duì)照藥氟哌酸膠嚢對(duì)金黃色葡萄球菌MSSA43、大腸埃希菌994、變形桿菌993、淋球菌14感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)作用的半數(shù)有效劑量ED5o及其95。/?？尚畔?，均按Bliss法運(yùn)用中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院編制的程序軟件，使用計(jì)算機(jī)進(jìn)行計(jì)算和統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果見(jiàn)表5-6-5-10。表5-6小鼠灌服熱淋清浸骨粉的體內(nèi)保護(hù)作用的EDs。值<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>氟9^l嫂口服120.001000.000.04278.0010220.00(0.033-0.054)50.7010440.0032.9610660.0021.4210990.0013.9210101畫(huà)_感染對(duì)照組腹腔-_1010畫(huà)o*氟<^^*給藥劑量為mg/Kg。表5-9熱淋清浸骨粉對(duì)小鼠體內(nèi)感染變形桿菌的EDso給藥給藥劑量'動(dòng)物數(shù)死亡數(shù)死亡率ED50藥物途徑(g原生藥/kg)(只)(只)(％)(g原生藥/kg)娜可傻艮)CFU/ml)氟9^MJ:口服50.001000.000.018菌994粉w-3熱淋清浸膏口服粉w-410660.00108訓(xùn)0108訓(xùn)0109訓(xùn)010101畫(huà)10101畫(huà)37.87(17.48-82.03)36.76(25.19-494.70)熱淋清鵬口服30.0010619.5010912.681098.2410105.3610103.481010變形桿菌熱淋清浸膏口服993粉w-3熱淋清浸膏口服粉w-41010101010102799101010101010101026991010熱淋清顆在口服30.0010419.5010812.681098.2410105.3610103.48101022.08(17.20-33.82)20.95(16.15-27.17)27.13(21.11-52.61)林林感量%<號(hào)染8911§468p234§^防136R4:R23400001"330851332799KK3ooSowooowQ699K1K<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>IW^^A給藥劑量為mg/Kg。表5-10熱淋清浸貪粉對(duì)小鼠體內(nèi)感染淋球菌的EDS0<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>*氟。J^^A給藥劑量為mg/Kg。體內(nèi)保護(hù)試驗(yàn)結(jié)果表明，熱淋清浸膏粉w-3口服給藥，對(duì)小鼠由金黃色葡萄球菌MSSA43、大腸埃希菌9914、變形桿菌993和淋球菌14所致小鼠全身感染的半數(shù)有效劑量ED50值分別為11.85g原生藥/kg、37.84g原生藥/kg、22.08g原生藥/kg、10.14g原生藥/kg;熱淋清浸膏粉w-4口服給藥，對(duì)小鼠由金黃色葡萄球菌MSSA43、大腸埃希菌9914、變形桿菌993和淋球菌14所致小鼠全身感染的半數(shù)有效劑量EDso值分別為11.82g原生藥/kg、37.87g原生藥/kg、20.95g原生藥/kg、9.31g原生藥/kg。結(jié)果表明熱淋清浸膏粉w-3、w-4對(duì)所試菌林具有一定的體內(nèi)保護(hù)作用。綜上所迷經(jīng)體外抗菌試驗(yàn)結(jié)果證明熱淋清浸膏粉呈現(xiàn)出一定的體外抗菌活力，尤其是對(duì)臨床分離淋球菌顯示出較強(qiáng)的抗菌活力，其次對(duì)金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大腸埃希菌、痢疾桿菌、變形桿菌和肺炎克雷伯菌也呈現(xiàn)出抗菌活力。但對(duì)白色念珠菌的抗菌活力較弱。對(duì)淺表毛癬菌如石膏樣孢子菌、石膏樣癬菌也呈現(xiàn)一定的抗菌活力，其次對(duì)于厭氧菌中的脆弱擬桿菌，消化球菌、消化鏈球菌和痤瘡丙酸桿菌、顆粒丙酸桿菌等均具有一定的抗菌作用。體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果也表明，熱淋清浸膏粉對(duì)淋球菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、大腸埃希菌感染小鼠具有一定的保護(hù)作用，其半數(shù)致死劑量EDs()分別為10.14、11.85、22.08、37.84原生藥g/kg，w-4半數(shù)致死劑量ED50分別為9.31、11.82、20.95、37.87原生藥g/kg。因此，用熱淋清浸膏粉制成的熱淋清顆粒具有清熱解毒，利尿通淋的作用。用于濕熱蘊(yùn)結(jié)，小便黃赤、淋漓澀痛之癥，尿路感染，腎盂腎炎及上述證候者。權(quán)利要求1.一種熱淋清浸膏，其特正在于由頭花蓼全草的鮮品或干品用水分1-3次煎煮，每次1-2小時(shí)，合并煎煮液，過(guò)濾濃縮至85℃時(shí)的相對(duì)密度為1.05～1.25時(shí)，得到浸膏，然后經(jīng)噴霧干燥，得到浸膏粉。2.極順?biāo)Ｇ?繊娛膏，期桐雄f^千燥前加入槲悔分。3.才財(cái)斜M'耍求l-2之一^曼膏，^4射雄1^#干"加入重量比5°"辨*^定粉。4.才財(cái)斜X^'虔求1—2之一^曼膏，逸應(yīng)^宿至85。C時(shí)6祐時(shí)密JL^1.1~1.2。5.樹(shù)鵬恢求l-2之-"^憂膏，糊i^慮棘至85。C時(shí)樹(shù)時(shí)密^1.2。6.才財(cái)斜幼虔求l-2妳曼膏，其中知t^ffl其i4Ji^^。7.樹(shù)網(wǎng)懊求l-2之,是膏，期爭(zhēng)棘于頭繊磁敝葉、#莖。8.^^'虔求1-7的浸膏用于帝洛抗菌藥物的用逸9.才財(cái)斜幼虔求8的用逸其中抗菌藥物是^#^摘藥物。10.纟5^慎求1-7妳曼膏用于命洛抗麟物的用逸11.*^虔求1-7沐旻膏用于弗'mfei藥4輛々用逸12.樹(shù)'棘1-7的浸膏用于弟恪矛尿藥綱用逸13.;f5Uf'漆求1-7的浸膏用于命洛治療泌尿系鄉(xiāng)衫吉石的藥4輛々用逸14."^t飾緣膏組^4勿，絲有樹(shù)恢求1-7喊膏和可藥用樹(shù)牛。15.才財(cái)斜X^']^求14的組^4勿，其可以制M劑、茅顛立劑、丸劑、月嫩'J、^#劑、；Mf劑、；^'J、^t^劑、滴丸劑、射'j、撤'J、貝^f'j、月鼓'J、紙型劑、';f"懸劑、附'J、^f唐敘'J、；^t片、石更膏劑、專(zhuān)欠膏劑、糖ji好'、導(dǎo)L^J、緩釋、^:^'劑^le^制劑。16.樹(shù)鵬'棘14的組她其可以制綱立劑。全文摘要本發(fā)明涉及熱淋清浸膏及其制備方法和用途，還涉及含有該浸膏的藥物組合物。本發(fā)明用水對(duì)頭花蓼進(jìn)行了提取制得熱淋清浸膏并進(jìn)行了活性研究，本發(fā)明工藝得到的熱淋清浸膏在抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛和利尿等方面具有明顯的效果。文檔編號(hào)A61K36/704GK101664446SQ200910177179公開(kāi)日2010年3月10日申請(qǐng)日期2009年9月28日優(yōu)先權(quán)日2009年9月28日發(fā)明者唐靖雯,張麗艷,李孟林,斌梁,梅潘,君羅,宇謝申請(qǐng)人:貴州威門(mén)藥業(yè)股份有限公司