專利名稱：一種治療急性、亞急性濕疹的菊芩清解顆粒劑的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑的檢測方法，具體涉及一種治療急性、亞急性濕疹中藥 菊芩清解顆粒制劑的檢測方法。
背景技術(shù)：
菊芩清解顆粒由野菊花、黃芩、連翹、地黃、赤芍、牡丹皮、當(dāng)歸、茯苓皮、甘草九味 中藥組成，具有清熱除濕、涼血解毒的作用，主要用于濕熱蘊(yùn)膚所致的濕瘡，癥見皮膚掀紅 或皮膚鮮紅斑，腫脹，瘙癢，糜爛，丘疹，皰疹等；急性濕疹、亞急性濕疹見上述證侯者。處方 野菊花440g、黃芩325g、連翹325g、地黃325g、赤芍220g、牡丹皮220g、當(dāng)歸220g、茯苓皮 325g、甘草 IOOg,制法以上九味，取黃芩粗片，加入10倍量沸水中，煎煮3次，提取液合并，放冷濾 過，濾液加熱至60°C，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值為1-2，保溫30分鐘，放置過夜，濾過，沉淀水洗至 PH4-5，低溫干燥，即得黃芩提取物。取野菊花、當(dāng)歸、連翹、牡丹皮混合后加水，浸泡4小時， 用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，收集揮發(fā)油，其水提取液及藥渣留用。取揮發(fā)油用環(huán)糊精 包合，冷藏(4-10°C)過夜，濾過，沉淀低溫干燥，得β-環(huán)糊精包結(jié)物，備用。其余四味藥 加水煎煮兩次，加入上述提取揮發(fā)油的藥渣再共同煎煮一次，加入上述提取揮發(fā)油時的水 提液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1. 10-1. 15(50°C測)時加乙醇使含醇量達(dá)70%，冷藏過 夜，濾過，濾液回收乙醇，并濃縮至相對密度為1. 10-1. 15(50°C測)清膏，加入糊精，加熱溶 解后噴霧干燥，即得水提物干粉。取黃芩提取物、環(huán)糊精包結(jié)物和水提物干粉，加入甜 菊素和適量糊精混勻，以適當(dāng)濃度的乙醇制粒，干燥，制成顆粒lOOOg，分裝，即得。本品是對急性、亞急性濕疹療效顯著，副作用小，深受醫(yī)生及患者的歡迎。現(xiàn)有產(chǎn)品檢測方法影響因素較多，結(jié)果重現(xiàn)性較差，不能很好的控制藥品質(zhì)量，從 而不能很好地保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定均一。為保證其質(zhì)量穩(wěn)定均一，這就要求對產(chǎn)品有一個好的質(zhì)量控制方法對其進(jìn)行有效 的質(zhì)量控制，使產(chǎn)品做到“安全、有效、質(zhì)量可控”。本發(fā)明采用高效液相色譜法進(jìn)行含量測定，再加上配合薄層鑒別，與原標(biāo)準(zhǔn)采用 的薄層掃描法測定更具有準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好的特點(diǎn)，較原方法精密度、靈敏度、穩(wěn)定性均較高。 從而可準(zhǔn)確嚴(yán)格地控制產(chǎn)品的質(zhì)量與均一性，

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的菊芩清解顆粒檢測方法，包括鑒別和含量測定的步驟所述鑒別采用薄層色譜法，以野菊花，丹皮酚，芍藥苷為對照，鑒別菊芩清解顆粒 中的藥物成分；所述含量測定采用高效液相色譜法測定菊芩清解顆粒中黃芩苷的含量。本發(fā)明的菊芩清解顆粒的檢測方法，其中鑒別方法包括以下步驟a.取菊芩清解顆粒，研細(xì)，取15g，加乙醚40ml，水浴回流1小時，放冷、靜置、傾取
4上清液，揮干，殘渣加丙酮Iml使溶解，作為供試品溶液。另取野菊花對照藥材lg，同法制成 對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品及對照藥材溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅 膠G薄層板上，以環(huán)己烷-甲苯-醋酸乙酯(3-6 4-6 0.2-1)為展開劑，展開，取出，晾 干，噴以3%香草醛硫酸試液，105°C烘烤3分鐘。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)位 置上顯相同顏色的主斑點(diǎn)。b.取當(dāng)歸對照藥材0. 3g，加乙醚20ml，水浴回流1小時，放冷、靜置、傾取上清液， 揮干，殘渣加丙酮Iml使溶解，得到對照藥材溶液。另取丹皮酚對照品，加丙酮制每Iml含 丹皮酚Img的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版附錄VI B)試驗(yàn)， 吸取a項(xiàng)下供試品溶液20 μ 1及上述對照藥材和對照品溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯(6-10 1-4)為展開劑，展開，展距12cm，取出，晾干，置于 紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒 光主斑點(diǎn)；再噴以酸性三氯化鐵乙醇液，于105°C，烘烤3分鐘。供試品色譜中，在與對照品 色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。c.取本品5g，研細(xì)，加無水乙醇25ml，超聲提取30分鐘，靜置，傾取上清液，揮至約 lml，作為供試品溶液。另取赤芍對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液，再取芍藥苷對照品， 加無水乙醇制成每Iml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版 一部附VI B)試驗(yàn)，吸取供試品和對照藥材、對照品溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層 板上，以氯仿-甲醇(3-8 1-3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%香草醛硫酸試液，于 105°C烘烤3-5分鐘。供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的 主斑點(diǎn)。本發(fā)明的菊芩清解顆粒的檢測方法，其中含量測定包括以下步驟含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定；色譜條 件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-1%醋酸O0-30 70-80) 為流動相，檢測波長276nm ；理論塔板數(shù)按黃芩苷峰計算，應(yīng)不低于1500 ；對照品溶液的制 備精密稱取黃芩苷對照品適量，加甲醇溶解并制成每Iml含30μ g的溶液，即得；供試品 溶液的制備取本品粉末約0. 3g精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重 量，超聲提取1小時，放置至室溫，再稱定重量，補(bǔ)足減失的重量、濾過、棄去初濾液，精密量 取續(xù)濾液1ml，置5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0. 40-0. 50 μ m微孔濾膜濾過，收 集續(xù)濾液，即得；測定法精密吸取上述對照品及供試品溶液各10 μ 1，分別注入液相色譜 儀中，測定峰面積值，按外標(biāo)法計算含量，即得；每袋含黃芩以黃芩苷(C21H18O11)計算，不得 少于 0. lg-0. 2g。本發(fā)明控制方法能對菊芩清解顆粒進(jìn)行有效的質(zhì)量控制。本質(zhì)量控制方法對制劑中有效成份黃芩苷以高效液相色譜法進(jìn)行含量測定，規(guī)定 每袋含黃芩以黃芩苷(C21H18O11)計算，不得少于0. 16g。從而對菊芩清解顆粒質(zhì)量進(jìn)行了有 效的控制。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1處方野菊花440g、黃芩325g、連翹325g、地黃325g、赤芍220g、牡丹皮220g、當(dāng)歸
5220g、茯苓皮325g、甘草100g，制法以上九味，取黃芩粗片，加入10倍量沸水中，煎煮3次，提取液合并，放冷濾 過，濾液加熱至60°C，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值為1-2，保溫30分鐘，放置過夜，濾過，沉淀水洗至 PH4-5，低溫干燥，即得黃芩提取物。取野菊花、當(dāng)歸、連翹、牡丹皮混合后加水，浸泡4小時， 用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，收集揮發(fā)油，其水提取液及藥渣留用。取揮發(fā)油用環(huán)糊精 包合，冷藏(4-10°C)過夜，濾過，沉淀低溫干燥，得β-環(huán)糊精包結(jié)物，備用。其余四味藥 加水煎煮兩次，加入上述提取揮發(fā)油的藥渣再共同煎煮一次，加入上述提取揮發(fā)油時的水 提液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1. 10-1. 15(50°C測)時加乙醇使含醇量達(dá)70%，冷藏過 夜，濾過，濾液回收乙醇，并濃縮至相對密度為1. 10-1. 15(50°C測)清膏，加入糊精，加熱溶 解后噴霧干燥，即得水提物干粉。取黃芩提取物、環(huán)糊精包結(jié)物和水提物干粉，加入甜 菊素和適量糊精混勻，以適當(dāng)濃度的乙醇制粒，干燥，制成顆粒lOOOg，分裝，即得。菊芩清解顆粒的質(zhì)量控制方法為鑒別(1)、取本品15g，研細(xì)，加乙醚40ml，水浴回流1小時，放冷、靜置、傾取上清液，揮 干，殘渣加丙酮Iml使溶解，作為供試品溶液。另取野菊花對照藥材lg，同法制成對照藥材 溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品及對照藥材溶液各 10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-甲苯-醋酸乙酯 5 0.5)為展 開劑，展開，取出，晾干，噴以3%香草醛硫酸試液，105°C烘烤3分鐘。供試品色譜中，在與對 照藥材色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的主斑點(diǎn)。(2)、取當(dāng)歸對照藥材0. 3g，加乙醚20ml，同鑒別⑴項(xiàng)下供試品溶液的制備方 法制備對照藥材溶液。另取丹皮酚對照品，加丙酮制每Iml含丹皮酚Img的溶液，作為對照 品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版附錄VI B)試驗(yàn)，吸取鑒別(1)項(xiàng)下供試品 溶液20 μ 1及上述對照藥材和對照品溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己 烷-醋酸乙酯(9 1)為展開劑，展開，展距12cm，取出，晾干，置于紫外光燈(365nm)下檢 視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)；再噴以酸性 三氯化鐵乙醇液，于105°C，烘烤3分鐘。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯 相同顏色的主斑點(diǎn)。(3)、取本品5g，研細(xì)，加無水乙醇25ml，超聲提取30分鐘，靜置，傾取上清液，揮至 約1ml，作為供試品溶液。另取赤芍對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液，再取芍藥苷對照 品，加無水乙醇制成每Iml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005 版一部附VI B)試驗(yàn)，吸取供試品和對照藥材、對照品溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄 層板上，以氯仿-甲醇(5 1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%香草醛硫酸試液，于 105°C烘烤3-5分鐘。供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的 主斑點(diǎn)。含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統(tǒng) 適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-1%醋酸04 76)為流動相，檢測 波長276nm ；理論塔板數(shù)按黃芩苷峰計算，應(yīng)不低于1500 ；對照品溶液的制備精密稱取黃 芩苷對照品適量，加甲醇溶解并制成每Iml含30μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備取
6本品粉末約0. 3g精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲提取1小 時，放置至室溫，再稱定重量，補(bǔ)足減失的重量、濾過、棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液Iml，置 5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0. 40-0. 50 μ m微孔濾膜濾過，收集續(xù)濾液，即得； 測定法精密吸取上述對照品及供試品溶液各10μ 1，分別注入液相色譜儀中，測定峰面積 值，按外標(biāo)法計算含量，即得；每袋含黃芩以黃芩苷(C21H18O11)計算，不得少于0. 16g。
權(quán)利要求
1.一種菊芩清解顆粒的檢測方法，其特征在于，包括鑒別和含量測定的步驟。
2.權(quán)利要求1的檢測方法，其特征在于，所述鑒別采用薄層色譜法，以野菊花，丹皮酚， 芍藥苷為對照，鑒別菊芩清解顆粒中的藥物成分。
3.權(quán)利要求1的檢測方法，其特征在于，所述含量測定采用高效液相色譜法測定菊芩 清解顆粒中黃芩苷的含量。
4.權(quán)利要求1的檢測方法，其特征在于，其中鑒別方法包括以下步驟(1)、取菊芩清解顆粒15g，研細(xì)，加乙醚40ml，水浴回流1小時，放冷、靜置、傾取上清 液，揮干，殘渣加丙酮Iml使溶解，作為供試品溶液，另取野菊花對照藥材lg，同法制成對照 藥材溶液，照中國藥典2005年版附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品及對照藥材溶液各 10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-甲苯-醋酸乙酯=4. 5 5 0.5為展 開劑，展開，取出，晾干，噴以3%香草醛硫酸試液，105°C烘烤3分鐘，供試品色譜中，在與對 照藥材色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的主斑點(diǎn)。
5.權(quán)利要求1的檢測方法，其特征在于，其中鑒別方法包括以下步驟O)、取菊芩清解顆粒15g，研細(xì)，加乙醚40ml，水浴回流1小時，放冷、靜置、傾取上清 液，揮干，殘渣加丙酮Iml使溶解，作為供試品溶液，取當(dāng)歸對照藥材0. 3g，加乙醚20ml，水 浴回流1小時，放冷、靜置、傾取上清液，揮干，殘渣加丙酮Iml使溶解，作為對照藥材溶液， 另取丹皮酚對照品，加丙酮制每Iml含丹皮酚Img的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法 試驗(yàn)，吸取供試品溶液20 μ 1、對照藥材和對照品溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板 上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯=9 1為展開劑，展開，展距12cm，取出，晾干，置于365nm紫外光 燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)；再噴 以酸性三氯化鐵乙醇液，于105°C，烘烤3分鐘，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置 上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。
6.權(quán)利要求1的檢測方法，其特征在于，其中鑒別方法包括以下步驟(3)、取菊芩清解顆粒5g，研細(xì)，加無水乙醇25ml，超聲提取30分鐘，靜置，傾取上清液， 揮至約1ml，作為供試品溶液，另取赤芍對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液，再取芍藥苷 對照品，加無水乙醇制成每Iml含aiig的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供 試品和對照藥材、對照品溶液各5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇(5 1) 為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%香草醛硫酸試液，于105°C烘烤3-5分鐘，供試品色譜 中，在與對照藥材、對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。
7.權(quán)利要求1的檢測方法，其中含量測定方法，步驟如下照中國藥典2005年版一部附錄VI D高效液相色譜法測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試 驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-1%醋酸=20-30 70-80為流動相，檢測波 長276nm ；理論塔板數(shù)按黃芩苷峰計算，應(yīng)不低于1500 ；對照品溶液的制備精密稱取黃芩 苷對照品適量，加甲醇溶解并制成每Iml含30μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備取本 品粉末約0. 3g精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲提取1小時， 放置至室溫，再稱定重量，補(bǔ)足減失的重量、濾過、棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液1ml，置5ml 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0. 40-0. 50 μ m微孔濾膜濾過，收集續(xù)濾液，即得；測定 法精密吸取上述對照品及供試品溶液各10μ 1，分別注入液相色譜儀中，測定峰面積值， 按外標(biāo)法計算含量，即得；每袋含黃芩以黃芩苷計算，不得少于0. 16g。
8.權(quán)利要求1的檢測方法，步驟如下 鑒別(1)、取菊芩清解顆粒15g，研細(xì)，加乙醚40ml，水浴回流1小時，放冷、靜置、傾取上清 液，揮干，殘渣加丙酮Iml使溶解，作為供試品溶液，另取野菊花對照藥材lg，同法制成對照 藥材溶液，照中國藥典2005年版附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品及對照藥材溶液各 10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-甲苯-醋酸乙酯=4. 5 5 0.5為展 開劑，展開，取出，晾干，噴以3%香草醛硫酸試液，105°C烘烤3分鐘，供試品色譜中，在與對 照藥材色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的主斑點(diǎn)，O)、取菊芩清解顆粒15g，研細(xì)，加乙醚40ml，水浴回流1小時，放冷、靜置、傾取上清 液，揮干，殘渣加丙酮Iml使溶解，作為供試品溶液，取當(dāng)歸對照藥材0. 3g，加乙醚20ml，水 浴回流1小時，放冷、靜置、傾取上清液，揮干，殘渣加丙酮Iml使溶解，作為對照藥材溶液， 另取丹皮酚對照品，加丙酮制每Iml含丹皮酚Img的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法 試驗(yàn)，吸取供試品溶液20 μ 1、對照藥材和對照品溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板 上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯=9 1為展開劑，展開，展距12cm，取出，晾干，置于365nm紫外光 燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)；再噴 以酸性三氯化鐵乙醇液，于105°C，烘烤3分鐘，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置 上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)，(3)、取菊芩清解顆粒5g，研細(xì)，加無水乙醇25ml，超聲提取30分鐘，靜置，傾取上清液， 揮至約1ml，作為供試品溶液，另取赤芍對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液，再取芍藥苷 對照品，加無水乙醇制成每Iml含aiig的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供 試品和對照藥材、對照品溶液各5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇=5 1 為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%香草醛硫酸試液，于105°C烘烤3-5分鐘，供試品色譜 中，在與對照藥材、對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)， 含量測定照中國藥典2005年版一部附錄VI D高效液相色譜法測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性 試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-1%醋酸=沈74為流動相，檢測波長 276nm ；理論塔板數(shù)按黃芩苷峰計算，應(yīng)不低于1500 ；對照品溶液的制備精密稱取黃芩苷 對照品適量，加甲醇溶解并制成每Iml含30μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品 粉末約0. 3g精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲提取1小時， 放置至室溫，再稱定重量，補(bǔ)足減失的重量、濾過、棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液1ml，置5ml 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0. 40-0. 50 μ m微孔濾膜濾過，收集續(xù)濾液，即得；測定 法精密吸取上述對照品及供試品溶液各10 μ 1，分別注入液相色譜儀中，測定峰面積值， 按外標(biāo)法計算含量，即得；每袋含黃芩以黃芩苷計算，不得少于0. 16g。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療急性、亞急性濕疹的菊芩清解顆粒劑的檢測方法，其對方中的野菊花、赤芍、牡丹皮和當(dāng)歸采用薄層色譜法進(jìn)行定性鑒別，采用高效液相色譜法對產(chǎn)品中的黃芩苷進(jìn)行含量測定，可很好的控制產(chǎn)品的質(zhì)量，保證產(chǎn)品質(zhì)量的安全、有效、質(zhì)量可控。
文檔編號A61P17/00GK102078426SQ20091018659
公開日2011年6月1日 申請日期2009年12月1日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月1日
發(fā)明者邱國萍, 鄒武斌 申請人:江西濟(jì)民可信藥業(yè)有限公司