專利名稱：新曲霉酸在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新曲霉酸在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤是嚴(yán)重危害人類生命的疾病，其死亡率僅次于心腦血管疾病，且發(fā)生率 有逐年上升的趨勢(shì)。現(xiàn)在腫瘤治療已有外科手術(shù)、放射療法和藥物治療三類方法，其中藥物 療法在腫瘤治療或綜合治療、延長(zhǎng)腫瘤患者生命和提高他們的生活質(zhì)量方面均具有肯定、 積極和不可替代的作用?？鼓[瘤藥物己能治愈或控制不少腫瘤類型，但總體尚未達(dá)到令人 滿意的階段。因此研究開發(fā)具有有效抗腫瘤活性的藥物具有重要的意義。
新曲霉酸最早被發(fā)現(xiàn)存在于真菌Aspergillus sclerotiorum的培養(yǎng)濾 液 (Micetich， R. G. ;MacDonald， ，J. C. Met.abolites of Aspergillus sclerot.iorum 他ber. J. Chem. Soc. 1964年，1507-1510頁)。MacDonald等發(fā)現(xiàn)它對(duì)Staphylococcus aureus, Escherichia coli， Candida albicans禾卩Bacillussubtilis具有很強(qiáng)的J卬 菌活 性(MacDonald, J. C. ;Micetich， R. G. ;Haskins， R. H. Antibiotic activityof neoaspergillic acid. Can. J. Microbiol. 1964年，第10巻，90_92頁)。Micetich 等的生源合成研究表明，它的生源合成前體是亮氨酸(Micetich ， R. G. ;MacDonald， J.C.Biosynthesis ofnecmspergillie and neohydroxyaspergi1 lie acids. J. Biol. Chem. 1965年，第240巻，1692-1695頁)。Masaki等完成了其化學(xué)全合成工作(Masaki， M. ;Chigira， Y. ;Sugiyama， M. ;et. al. Synthesis ofneoaspergillic acid. Tetrahedron Lett. 1965年，第6巻，4837-4840頁；Masaki， M. ;Chigira， Y. ;0hta， M. Total synthesis of racemic aspergillic acid and neoaspergillic acid. J. Org. Chem.丄966年,第31巻， 4143-4146頁)。但新曲霉酸的腫瘤抑制活性未見報(bào)道。 我們通過混合培養(yǎng)2株Aspergillus sp.真菌，從混合培養(yǎng)液分離獲得了新曲霉 酸[朱峰，等.欖錢兩株附生真菌混合培養(yǎng)次級(jí)代謝產(chǎn)物研究.中山大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué) 版).2009年，第48巻第6期，5-8頁]。與上述報(bào)道不同的是，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)新曲霉酸對(duì)人的 多種癌細(xì)胞均有良好的抑制活性，可用于制備抗腫瘤藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供具有抑制人腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)活性的新曲霉酸在制備抗腫瘤 藥物中的應(yīng)用。 本發(fā)明為了達(dá)到上述目的而采用的技術(shù)解決方案如下
本發(fā)明所述新曲霉酸是一種羥氨酸，其結(jié)構(gòu)式為
OH 。 本發(fā)明所述新曲霉酸可以通過微生物單獨(dú)培養(yǎng)或混合培養(yǎng)制備，也可以通過化學(xué) 合成方法制得。 本發(fā)明的試驗(yàn)證明，新曲霉酸能抑制人癌細(xì)胞株的生長(zhǎng)，在以人肺癌細(xì)胞株 SPC-A-1、人肝癌細(xì)胞株P(guān))EL-7402、人胃癌細(xì)胞株SGC-7901和人白血病細(xì)胞株K562為耙細(xì) 胞的MTT還原法檢測(cè)抗腫瘤活性試驗(yàn)中，新曲霉酸的半數(shù)致死量IC5。分別為22. 19、24. 90、 8. 24和7. 99 u g/ml。表明新曲霉酸可用于制備抗腫瘤藥物。
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說明。
具體實(shí)施例方式1.新曲霉酸的制備 本發(fā)明所述新曲霉酸是根據(jù)文獻(xiàn)[朱峰，等.欖錢兩株附生真菌混合培養(yǎng)次級(jí)代 謝產(chǎn)物研究.中山大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版).2()()9年，第48巻第6期，5-8頁]所述制備方 法制備。即以GYP為培養(yǎng)基混合培養(yǎng)2株Aspergillus sp.真菌，培養(yǎng)液減壓濃縮后用乙 酸乙酯提取，粗提物經(jīng)硅膠柱層析，石油醚_乙酸乙酯梯度洗脫，得到新曲霉酸。
2. MTT還原法檢測(cè)新曲霉酸抗腫瘤活性試驗(yàn)
2. l材料 MTT[3-(4， 5_dimethylt.hiazol_2_yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide].、 0. Olmol/L的磷酸鹽緩沖液(PBS) 、二甲基亞砜(DMS0) 、 RPMI-1640培養(yǎng)基、新生小牛血清 (NBS)、青霉素、鏈霉素。 新曲霉酸用固S()溶解后，用PBS分別稀釋至1()()、5()、10、5、1和() 1 u g/mL。 2. 2 細(xì)胞株選用人肺癌細(xì)胞株SPC-A-l、人肝癌細(xì)胞株BEL-7402、人胃癌細(xì)胞株SGC-7901和 人白血病細(xì)胞株K562。各細(xì)胞株分別在含10% (v/v)熱滅活的NBS以及100U/ml青霉素、 100U/ml鏈霉素的RPMH640培養(yǎng)液中，置37。C的5% C02培養(yǎng)箱飽和濕度下培養(yǎng)。
2.3腫瘤抑制活性檢測(cè) [,]MTT法用于考查細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的SPC-A-1、 BEL-7402、 SGC-7901和K562癌細(xì)胞，接種于96孔培養(yǎng) 板，使每孔細(xì)胞密度為1 X 105 4X 105Cells/孔。 表1新曲霉酸對(duì)不同腫瘤細(xì)胞的]:C5。值
試驗(yàn)細(xì)胞肺癌SPC-A-1肝癌BEL-7402胃癌SGC-7則白血病K562
IC50 (一ml)22.1924.908.247.99
試驗(yàn)結(jié)果表明，新曲霉酸具有較強(qiáng)的癌細(xì)胞毒性，可用于制備抗腫瘤藥物。
權(quán)利要求
新曲霉酸在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l，所述新曲霉酸是 一種羥氨酸，其結(jié)構(gòu)式為<formula>formula see original document page 2</formula>
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明公開了新曲霉酸在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。新曲霉酸可通過微生物發(fā)酵制備或通過化學(xué)合成得到。經(jīng)試驗(yàn)表明，新曲霉酸對(duì)人的多種癌細(xì)胞均有良好的抑制活性。因此，可用于制備抗腫瘤藥物。
文檔編號(hào)A61K31/4965GK101697972SQ20091019395
公開日2010年4月28日 申請(qǐng)日期2009年11月16日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月16日
發(fā)明者朱峰 申請(qǐng)人:朱峰