專利名稱：具有靶向功能的四氧化三錳納米造影材料的制備及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及納米造影材料，具體地說是一種具有靶向功能的四氧化三錳納米造影
材料的制備及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
腫瘤疾病、心腦血管疾病是威脅人類健康的重大疾病，細(xì)胞與組織的檢測和治療 是當(dāng)代醫(yī)藥、化學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的重要任務(wù)。核磁共振成像對疾病的診斷準(zhǔn)確，提供的 信息量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于醫(yī)學(xué)影像學(xué)的其他成像術(shù)，是診斷疾病的重要方法。核磁共振成像檢查是 利用電子計(jì)算機(jī)對人體的斷面進(jìn)行圖像診斷的檢查法，原理是人體的細(xì)胞分子帶有氫原子 核，在強(qiáng)磁場下給予特定的高波后會(huì)發(fā)生共振現(xiàn)象，產(chǎn)生某種高波數(shù)的電磁波，使用電子計(jì) 算機(jī)對電磁波的強(qiáng)弱進(jìn)行處理并圖像化。核磁共振成像提供的信息量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于醫(yī)學(xué)影像學(xué) 中的其他成像技術(shù)，廣泛地用于各種癌癥的診斷。它對于腦內(nèi)血腫、腦外血腫、腦腫瘤、顱內(nèi) 動(dòng)脈瘤、動(dòng)靜脈血管畸形、腦缺血、椎管內(nèi)腫瘤、脊髓空洞癥和脊髓積水等顱腦常見疾病的 檢測準(zhǔn)確，對原發(fā)性肝癌等腫瘤組織的診斷準(zhǔn)確。從磁共振圖像中我們可以得到物質(zhì)的多 種物理特性參數(shù)，如質(zhì)子密度、自旋_晶格馳豫時(shí)間1\、自旋_自旋馳豫時(shí)間Ty擴(kuò)散系數(shù)、 磁化系數(shù)、化學(xué)位移等等。核磁共振成像沒有X線，對人體沒損害。多平面直接成像，對軟 組織的顯示能力強(qiáng)，成像參數(shù)多，成像方法多，可供選擇的余地大，改變射頻脈沖的程序、改 變脈沖的重復(fù)時(shí)間和回波時(shí)間等都可改變圖像的表現(xiàn)，從而得到不同加權(quán)因素的圖像。核 磁共振成像沒有骨偽影的干擾，靠近骨骼的病變同樣可顯示的非常清楚。多平面直接成像 可直觀地了解病變的范圍、起源和侵犯的結(jié)構(gòu)，對腫瘤的定位、定性、手術(shù)方案的制訂及預(yù) 后的估計(jì)都有重要的意義。同時(shí)操作中人為影響因素少，可重復(fù)性大，便于會(huì)診、對比和隨 訪。核磁共振成像優(yōu)良的軟組織對比度、多平面直接成像的優(yōu)點(diǎn)，加上不斷開發(fā)新的核磁共 振成像造影材料及成像程序的應(yīng)用，都給核磁共振成像診斷腫瘤提供了良好的基礎(chǔ)和進(jìn)一 步發(fā)展的條件。 造影材料按性能分為五大類。 一為經(jīng)腎排泄的造影材料，多用于泌尿系和心血管 的造影；二為經(jīng)肝膽排泄的造影材料，如橫番酸等；三為油脂類造影材料，如碘化油、碘苯 酯等，主要用于支氣管、子宮等管道、體腔等的造影；四為固體造影材料，如硫酸鋇，將其調(diào) 成混懸液吞服或灌腸用于消化道造影。以上四類造影材料密度均高于人體軟組織，統(tǒng)稱陽 性造影材料，在X線片上呈白色。第五類為氣體造影材料，如空氣、二氧化碳、氧氣等，這類 造影材料密度低于人體軟組織，屬陰性造影材料，在X線片上呈黑色?，F(xiàn)有造影材料的缺點(diǎn) 是通過材料的磁學(xué)性能來檢測腫瘤，不具有靶向性，無法準(zhǔn)確的使造影材料進(jìn)入腫瘤細(xì)胞， 使得正常組織與腫瘤組織不能區(qū)分開來。隨著醫(yī)藥和生物技術(shù)的發(fā)展，腫瘤疾病檢測的需 要，多功能檢測技術(shù)的應(yīng)用越來越重要。因此發(fā)明一種新的方法制備具有靶向功能的四氧 化三錳納米造影材料，通過靶向分子進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，準(zhǔn)確診斷腫瘤細(xì)胞或組織是十分有價(jià) 值的。 本發(fā)明制取具有氨基功能化的水溶性四氧化三錳納米粒子，通過定量分析其表面的氨基密度，固定有機(jī)熒光素和靶向分子在納米粒子表面連接數(shù)量的比例，制備出具有靶 向功能的四氧化三錳納米造影材料，不但可以作為核磁共振成像的1\造影材料，還可以應(yīng) 用于細(xì)胞內(nèi)部光學(xué)成像；也可以通過靶向分子進(jìn)入腫瘤細(xì)胞的特向異性，通過磁學(xué)成像和 光學(xué)成像，達(dá)到對腫瘤組織檢測的目的。 經(jīng)廣泛檢索國內(nèi)外專利文件和國內(nèi)外公開出版物未見有與本發(fā)明技術(shù)相同的文 獻(xiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種制備具有靶向功能四氧化三錳納米造影材料的方法。
本發(fā)明的另一目的是提供具有靶向功能四氧化三錳納米造影材料在核磁共振成 像中的應(yīng)用。 —種具有靶向功能的四氧化三錳納米造影材料的制備方法，包括以下步驟
(1)將四氧化三錳納米粒子溶于環(huán)己烷中，加入正硅酸四乙酯(TE0S)、3-氨基丙 基_三乙氧基硅烷(APS)，常溫?cái)嚢璧冒被δ芑乃苄运难趸i納米粒子；
(2)將上述納米粒子和異硫氰酸羅丹明(RBITC)溶解在無水四氫呋喃中，常溫?cái)?拌12小時(shí)； (3)將上述溶液中的沉淀物離心分離，得具有磁光雙功能的水溶性四氧化三錳納 米造影材料固體物質(zhì)； (4)將葉酸、l-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC.HCl)、N-羥基硫
代琥珀酰亞胺(sulfo-NHS)溶解在二甲亞砜(DMSO)配成溶液，真空攪拌30min ; (5)將步驟(3)所得磁光雙功能的納米粒子溶解到步驟(4)混合溶液中攪拌12小
時(shí)；離心分離，得表面具有熒光發(fā)光材料異硫氰酸羅丹明和靶向分子葉酸的水溶性四氧化
三錳納米造影材料。 表面的有機(jī)發(fā)光材料異硫氰酸羅丹明和靶向分子葉酸的比例為2 : 1。 具有靶向功能的四氧化三錳納米造影材料的應(yīng)用用于核磁共振T1造影材料，通
過磁共振和熒光成像靶向腫瘤細(xì)胞。 本發(fā)明的要點(diǎn)是通過氨基偶聯(lián)其他活性基團(tuán)的方法，使得水溶性四氧化三錳納 米材料具有熒光性質(zhì)和靶向功能，通過靶向分子，對腫瘤細(xì)胞實(shí)現(xiàn)特異性識(shí)別；通過具有靶 向功能的四氧化三錳納米造影材料在細(xì)胞和活體層次進(jìn)行磁學(xué)、光學(xué)及腫瘤靶向等生物應(yīng) 用來實(shí)現(xiàn)的。 本發(fā)明首先制備出單分散的、水溶性的、氨基功能化的四氧化三錳/二氧化硅核 殼結(jié)構(gòu)的磁性納米材料；然后氨基密度測試方法定量檢測出納米粒子表面的氨基數(shù)量；固 定有機(jī)熒光素(RBITC)和葉酸靶向分子在納米粒子表面連接數(shù)量的比例，制備出具有靶向 功能的四氧化三錳納米造影材料。本發(fā)明造影材料不但具有磁學(xué)成像應(yīng)用，還有光學(xué)成像 應(yīng)用，通過靶向分子進(jìn)入腫瘤細(xì)胞的特向異性，應(yīng)用于腫瘤細(xì)胞或組織的磁學(xué)成像和光學(xué) 成像領(lǐng)域。本發(fā)明顯著的特征是開創(chuàng)性的制備出氨基功能化的水溶性四氧化三錳納米粒 子，并且在其表面連接有機(jī)發(fā)光材料和靶向分子，使其成為具有靶向功能的四氧化三錳納 米造影材料。本發(fā)明首先利用在其表面包裹二氧化硅外殼，制備出氨基功能化的水溶性的 四氧化三錳納米粒子；然后通過氨基定量的連接上有機(jī)發(fā)光材料和靶向分子。本發(fā)明利用材料的磁學(xué)和光學(xué)性質(zhì)在細(xì)胞和活體層次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，開發(fā)出了良好的生物應(yīng)用價(jià)值。不但 可以作為核磁共振成像的I\造影材料，還可以應(yīng)用于細(xì)胞內(nèi)部光學(xué)成像熒光造影材料；也 可以通過靶向分子進(jìn)入腫瘤細(xì)胞的特向異性，通過磁學(xué)成像和光學(xué)成像，達(dá)到靶向分子對 腫瘤組織檢測的目的。 本發(fā)明方法中，在連接有異硫氰酸羅丹明的四氧化三錳磁性納米材料之前，測試 納米粒子表面的氨基數(shù)量，以此確定投入羅丹明的量，這樣不但可以產(chǎn)生一部分氨基偶聯(lián) 葉酸靶向分子，而且可以很好的控制兩種基團(tuán)的比例。 本發(fā)明方法中，在接葉酸之前，把葉酸、1- (3_ 二甲氨基丙基)_3-乙基碳二亞胺鹽 酸鹽(EDC.HCl)、N-羥基硫代琥珀酰亞胺(sulfo-NHS)溶解在二甲亞砜(DMS0)中激活半小 時(shí)，保證葉酸更有效的偶聯(lián)到納米粒子表面的氨基上。 本發(fā)明首先制備出單分散的、水溶性的、氨基功能化的四氧化三錳/二氧化硅核
殼結(jié)構(gòu)的磁性納米粒子，然后通過氨基密度測試方法定量檢測出納米粒子表面的氨基數(shù)
量，固定有機(jī)熒光素(RBITC)和葉酸靶向分子在納米粒子表面連接數(shù)量的比例，制備出具
有靶向功能的四氧化三錳納米造影材料。本發(fā)明材料具有良好的磁學(xué)性質(zhì)和發(fā)光性能，生
物兼容性很好，可以通過磁共振和熒光成像靶向腫瘤細(xì)胞，在細(xì)胞內(nèi)具有良好的磁學(xué)性能
和良好的光學(xué)性能；應(yīng)用于核磁共振T1造影材料，靶向腫瘤細(xì)胞。本發(fā)明利用材料的磁學(xué)
和光學(xué)性質(zhì)在細(xì)胞和活體層次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，開發(fā)出了該材料良好的生物應(yīng)用價(jià)值。
本發(fā)明創(chuàng)造性在于先制備出氨基功能化的水溶性四氧化三錳納米粒子；再在其
表面連接有機(jī)發(fā)光材料和靶向分子，使其成為具有靶向功能的四氧化三錳納米造影材料。
本發(fā)明具有創(chuàng)造性、新穎性和腫瘤檢測技術(shù)中的廣泛實(shí)用性。 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是 1.設(shè)備簡單，制備容易； 2.制備的四氧化三錳納米造影材料具有熒光、磁性和靶向功能；
3.造影材料粒徑均勻、分散性好、水溶性好； 4.具有磁、光雙功能的造影材料在醫(yī)藥和生物等領(lǐng)域應(yīng)用價(jià)值大。


圖1是本發(fā)明不同標(biāo)準(zhǔn)濃度芴甲氧羰酰氯(Fmoc-Cl)和測試包覆二氧化硅的水溶 性四氧化三錳納米造影材料表面氨基密度時(shí)反應(yīng)的氟摩酰氯(Fmoc-Cl)的歸一化的紫外 吸收光譜圖，然后，通過不同標(biāo)準(zhǔn)濃度芴甲氧羰酰氯(Fmoc-Cl)與測試包覆二氧化硅的水 溶性四氧化三錳納米造影材料表面氨基密度時(shí)反應(yīng)的芴甲氧羰酰氯(Fmoc-Cl)的濃度-紫 外強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)直線y = -0. 19466+5. 52526x(y代表紫外吸收的強(qiáng)度，x代表Fmoc-Cl的濃 度)，換算氨基密度，最后求出平均氨基密度為2. 2411 X 10—4mol/g。 圖2是本發(fā)明中的純異硫氰酸羅丹明配體(A)、純?nèi)~酸配體(B)、水溶性四氧化三 錳納米粒子(C)、單獨(dú)連接異硫氰酸羅丹明的四氧化三錳納米粒子(D)、單獨(dú)連接葉酸的四 氧化三錳納米粒子(E)以及同時(shí)具有熒光和靶向功能的水溶性四氧化三錳造影材料(F)的 紫外吸收光譜圖。圖2表明納米粒子表面具有功能化基團(tuán)以及基團(tuán)種類280nm為葉酸配 體的吸收峰；560nm為異硫氰酸羅丹明配體的吸收峰。 圖3是實(shí)施例4合成的具有靶向功能的四氧化三錳納米造影材料不同濃度、不同時(shí)間孵育子宮癌細(xì)胞(HeLa細(xì)胞，下同)。制備的兩親超順磁性磁共振造影材料的細(xì)胞毒 性測試結(jié)果圖。將人宮頸癌細(xì)胞系海拉細(xì)胞系(HeLa)接入50mL體積的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，在 37°〇、飽和濕度、5%0)2孵箱中培養(yǎng)而得，培養(yǎng)體系為含10%胎牛血清(FCS)的達(dá)爾伯克 (氏)必需基本培養(yǎng)基(DMEM)培養(yǎng)基(含10X胎牛血清、100U/ml青霉素、100 y g/ml鏈霉 素和1%谷氨酰胺，PH 7. 2 7. 4)。圖3表明當(dāng)制備的造影材料中的四氧化三錳組分濃 度達(dá)到20 g/ml時(shí)，細(xì)胞的存活率為85%，證明制備的具有靶向功能的四氧化三錳納米造 影材料對細(xì)胞的毒性很小。 圖4是實(shí)施例1制備的水溶性四氧化三錳納米粒子的1\加權(quán)成像圖；圖1由0. 5T 的磁共振成像儀測試而得，具體參數(shù)為TR/TE = 1000/60ms，選層厚度為0. 6mm，譜寬SW = 50KHz，接收機(jī)增益RG = 3。圖4表明隨著造影材料中Mn2+濃度的逐漸增加，核磁共振成 像圖(MRI)的1\信號(hào)逐漸變亮。 圖5為實(shí)施例1所制備的水溶性四氧化三錳納米粒子在水溶液中的相對于 Mn"濃度擬合的直線圖；圖中直線的斜率即為橫向馳豫率Rp圖5表明制備的水溶性四氧 化三錳納米粒子有較強(qiáng)的馳豫能力，橫向馳豫率&達(dá)到0. 59mM—、一1。 圖6是本發(fā)明合成的單獨(dú)葉酸靶向的四氧化三錳納米造影材料分別在HeLa細(xì)胞 (A)和乳腺癌細(xì)胞(MCF-7細(xì)胞，下同)(B)中的1\核磁共振成像圖。圖6由0. 5T的磁共振 成像儀測試而得，參數(shù)為TR/TE = 1000/60ms，選層厚度為0. 6mm，譜寬SW = 50KHz，接收 機(jī)增益RG = 3。圖6表明對MCF-7細(xì)胞屬于低表達(dá)，進(jìn)入高表達(dá)的HeLa細(xì)胞較多，所以 HeLa細(xì)胞MRI圖的1\信號(hào)較亮，表明靶向腫瘤細(xì)胞的效果很明顯。 圖7是本發(fā)明合成的連接異硫氰酸羅丹明和葉酸靶向的四氧化三錳納米造影材 料分別在HeLa細(xì)胞(A)和MCF-7細(xì)胞(B)中的共聚焦熒光成像，以及單獨(dú)連接異硫氰酸羅 丹明的四氧化三錳納米材料在HeLa細(xì)胞(C)內(nèi)的共聚焦熒光成像。本實(shí)驗(yàn)在室溫條件下 進(jìn)行，孵育細(xì)胞30分鐘。圖7可以很清楚的看到有靶向的納米粒子對HeLa細(xì)胞屬于高表 達(dá)的，對MCF-7細(xì)胞屬于低表達(dá)，沒有靶向的納米粒子進(jìn)入高表達(dá)的HeLa細(xì)胞也很少，表明 靶向腫瘤細(xì)胞的效果很明顯。a為激光下的圖像；b為明場下的圖像；c為前兩圖片合并的 圖象。 圖8是本發(fā)明合成的連接異硫氰酸羅丹明和葉酸靶向的四氧化三錳納米造影材 料(0 ii g/mL， 1 ii g/mL， 30 y g/mL)分別在HeLa細(xì)胞和MCF-7細(xì)胞中的細(xì)胞流式圖。實(shí)驗(yàn)儀 器為Becton-Dickinson, CA， USA ;室溫下進(jìn)行的，孵育細(xì)胞30min。圖8可以清楚看到有靶 向的納米粒子存在的HeLa和MCF-7細(xì)胞數(shù)量以及熒光強(qiáng)度沒有靶向的納米粒子進(jìn)入高表 達(dá)的HeLa細(xì)胞也很少、熒光強(qiáng)度很弱，表明靶向腫瘤細(xì)胞的效果很明顯。
圖9是本發(fā)明合成的單獨(dú)葉酸靶向的四氧化三錳納米造影材料注入小鼠體內(nèi)4小 時(shí)前(a)和4小時(shí)后(b)后的核磁共振1\加權(quán)成像圖。
具體實(shí)施例方式
下面通過實(shí)施例來詳細(xì)說明本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。
實(shí)施例1 : 制備二氧化硅包覆的表面有大量氨基的水溶性四氧化三錳納米粒子。 稱取表面活性劑5.8mmola-(4-壬基苯基)-"-羥基-聚(氧化-l，2-聯(lián)乙烷)(Ig印al C0-520)2. 5g，放入50mL燒杯中，然后加入30mL環(huán)己烷，超聲溶解。然后將實(shí)施例2制備的油溶性四氧化三錳納米粒子配置成150ii L濃度為50mg/mL的環(huán)己烷溶液。將這兩部分溶液混合，超聲溶解均勻，置入250mL的三頸燒瓶中，再依次加入300 L的濃氨水，180iiL正硅酸四乙酯(TE0S)，50iiL 3-氨基丙基-三乙氧基硅烷(APS)，常溫?cái)嚢?0小時(shí)；離心分離，用乙醇和水分別洗滌幾次，得二氧化硅包覆的表面有大量氨基的水溶性四氧化三錳納米粒子。
實(shí)施例2 : 測試水溶性四氧化三錳納米粒子表面的氨基密度實(shí)驗(yàn) 用10mg實(shí)施例1中制備的納米粒子和20mg荷甲氧羰酰氯溶解在15mL N， N_ 二甲基甲酰胺(DMF)，氮?dú)獗Ｗo(hù)，攪拌10小時(shí)。然后離心分離，甲醇洗兩次，真空干燥IO小時(shí)。稱取5-10mg的反應(yīng)后的納米粒子，記住質(zhì)量M，加入5mL的N， N_ 二甲基甲酰胺(VI)，然后再加入2mL的哌啶(V2)，超聲5分鐘，離心分離；取上層清液，加入比色皿中，測紫外吸收曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)直線，換算氨基密度為2.2411X10—4mol/g。
實(shí)施例3 : 制備具有熒光功能的四氧化三錳納米粒子 取用水或者四氫呋喃保存的包覆好四氧化三錳納米粒子30mg ;用剛剛除水的四氫呋喃洗滌2次或3次，以除去納米粒子中水份；將其溶解在60mL去水四氫呋喃中，加入1. lmg的異硫氰酸羅丹明，(按照氨基密度，摩爾比納米粒子表面氨基摩爾數(shù)RBITC =2 : 1)。把混合溶液置于lOOmL的單頸燒瓶中，然后密封，抽真空，并用氮?dú)獗Ｗo(hù)，在室溫的條件下用磁力器攪拌，用錫箔紙包住單頸燒瓶，避免光照破壞異硫氰酸羅丹明B的發(fā)光性能。反應(yīng)8h以上后，在12000rpm離心15min，再用無水乙醇洗滌5到6次，然后真空干燥保存。
實(shí)施例4 : 制備具有靶向功能的四氧化三錳納米粒子 將0. lg葉酸溶解到30mL 二甲基亞砜(DMSO)中，然后力n入
0. 3mmo1 (0. 0575g) 1_ (3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC. HC1)和
1. Ommol (0. 1151g)N-羥基硫代琥珀酰亞胺(sulfo-NHS)，將上述溶液在室溫條件攪拌30分鐘，密封抽真空并通N2保護(hù)，再取實(shí)施例3制備的納米粒子25mg分散在20mL 二甲基亞砜(DMSO)中，然后逐滴加入葉酸的溶液中。將上述混合溶液攪拌IO小時(shí)，使葉酸耦聯(lián)反應(yīng)充分進(jìn)行，最后用12000rpm離心分離，用匿SO洗滌兩次，除去沒有反應(yīng)的葉酸。 實(shí)施例5 : 細(xì)胞內(nèi)核磁成像 1.耙向組25t:時(shí)，將HeLa細(xì)胞在50 ii g/mL連接葉酸的納米粒子耙向材料中孵育30min，然后洗去沒有吞噬的材料；將該腫瘤細(xì)胞配成水溶液測試細(xì)胞的1\加權(quán)成像；
2.細(xì)胞對照組25t:時(shí)，將HeLa細(xì)胞在50iig/mL連接葉酸的納米粒子耙向材料中孵育30min，然后洗去沒有吞噬的材料，最后將該腫瘤細(xì)胞配成水溶液測試細(xì)胞的1\加權(quán)成像。 本實(shí)施例結(jié)果如圖6。
實(shí)施例6 :
熒光共聚焦成像 1.耙向組25t:時(shí)，將HeLa細(xì)胞在50 ii g/mL連接熒光有機(jī)配體和葉酸的納米粒子的靶向材料中孵育30min，然后在波長A = 488nm的激光激發(fā)下測試細(xì)胞內(nèi)的發(fā)光情況； 2.細(xì)胞對照組25t:時(shí)，將MCF-7細(xì)胞在50ii g/mL靶向材料中孵育30min，然后在波長A = 488nm的激光激發(fā)下測試細(xì)胞內(nèi)的發(fā)光情況； 3.材料對照25°C時(shí)，將HeLa細(xì)胞在50 y g/mL連接熒光有機(jī)配體，但不連接葉酸的納米粒子非靶向材料中孵育30min，然后在波長A = 488nm的激光激發(fā)下測試細(xì)胞內(nèi)的發(fā)光情況。 本實(shí)施例結(jié)果如圖7。 以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，并不用于限制本發(fā)明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，本發(fā)明可以有更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、改進(jìn)等，均應(yīng)包括在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
一種具有靶向功能的四氧化三錳納米造影材料的制備方法，包括以下步驟(1)將四氧化三錳納米粒子溶于環(huán)己烷中，加入正硅酸四乙酯(TEOS)、3-氨基丙基-三乙氧基硅烷(APS)，常溫?cái)嚢璧冒被δ芑乃苄运难趸i納米粒子；(2)將上述納米粒子和異硫氰酸羅丹明(RBITC)溶解在無水四氫呋喃中，常溫?cái)嚢?2小時(shí)；(3)將上述溶液中的沉淀物離心分離，得具有磁光雙功能的水溶性四氧化三錳納米造影材料固體物質(zhì)；(4)將葉酸、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC.HCl)、N-羥基硫代琥珀酰亞胺(sulfo-NHS)溶解在二甲亞砜(DMSO)配成溶液，真空攪拌30min；(5)將步驟(3)所得磁光雙功能的納米粒子溶解到步驟(4)混合溶液中攪拌12小時(shí)；離心分離，得表面具有熒光發(fā)光材料異硫氰酸羅丹明和靶向分子葉酸的水溶性四氧化三錳納米造影材料。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有靶向功能的四氧化三錳納米造影材料的制備方法，其特征在于表面的有機(jī)發(fā)光材料異硫氰酸羅丹明和靶向分子葉酸的比例為2 : 1。
3. 具有耙向功能的四氧化三錳納米造影材料的應(yīng)用用于核磁共振Tl造影劑，通過磁共振和熒光成像靶向腫瘤細(xì)胞。
全文摘要
本發(fā)明屬于納米造影材料，一種具有靶向功能的四氧化三錳納米造影材料的制備及其應(yīng)用?，F(xiàn)有造影材料的缺點(diǎn)是通過材料的磁學(xué)性能來檢測腫瘤，不具有靶向性，無法準(zhǔn)確的使造影材料進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，使得正常組織與腫瘤組織不能區(qū)分開來。本發(fā)明首先制備出單分散的、水溶性的、氨基功能化的四氧化三錳/二氧化硅核殼結(jié)構(gòu)的磁性納米材料；然后經(jīng)氨基密度測試方法定量檢測出納米粒子表面的氨基數(shù)量；固定有機(jī)熒光素和葉酸靶向分子在納米粒子表面連接數(shù)量的比例，制備出具有靶向功能的四氧化三錳納米造影材料。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是設(shè)備簡單，制備容易；納米造影材料具有熒光、磁性和靶向功能；造影材料粒徑均勻、分散性水溶性好；具有磁、光雙功能。
文檔編號(hào)A61K49/00GK101693114SQ20091019673
公開日2010年4月14日 申請日期2009年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月29日
發(fā)明者莊業(yè)明, 楊仕平, 楊紅 申請人:上海師范大學(xué);