專利名稱：一種提取燕麥β-葡聚糖的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物提取物領(lǐng)域，特別涉及一種提取燕麥β -葡聚糖的方法。
背景技術(shù)：
燕麥葡聚糖是由燕麥麩皮中提取，提取后產(chǎn)品附加值大增。燕麥葡聚糖 是以β_1，3-，β-1，4-糖苷鍵連接起來(lái)的粘性多聚葡聚糖，其主要集中于燕麥麩皮的糊粉 層。燕麥葡聚糖具有多種功能，可以降低血脂、控制血糖、增強(qiáng)免疫力，以及防治便秘、 改善腸道微環(huán)境等，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥和保健食品領(lǐng)域。目前，制備燕麥β -葡聚糖一般都通過(guò)溶劑提取或者采用溫和堿提取法。這些方 法都需要引入有機(jī)溶劑，成本高，去除不易，而且生產(chǎn)溫度較高，對(duì)節(jié)能環(huán)保不利。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題就是針對(duì)現(xiàn)有的提取燕麥β -葡聚糖的方法使用 有機(jī)溶劑、操作溫度高，不節(jié)能環(huán)保的不足，提供一種新的提取燕麥葡聚糖的方法，其 既節(jié)能又環(huán)保。因此，本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是一種提取燕麥葡聚糖 的方法，包括如下步驟1)將燕麥麩皮去除表面的淀粉和浮塵；2)將燕麥麩皮在40 50°C加入水，調(diào)節(jié)pH7 8，攪拌1 5小時(shí)；3)分離后收集濾液，冷卻至10 30°C，調(diào)整pH為4. 5 5. 0，攪拌后靜置0. 5 3小時(shí)；4)離心分離得濾液，加入低溫α -淀粉酶，在35 45°C下，pH值5. 5 6. 5，處理 1 2小時(shí)，采用硅藻土板框過(guò)濾，得到澄清液體；5)用截留分子量為50000 IOOOOODa的超濾膜過(guò)濾，得到燕麥β -葡聚糖溶液。其中，步驟1)較佳的通過(guò)淀粉篩分機(jī)除去燕麥麩皮表面的淀粉和浮塵。步驟1) 所述燕麥麩皮的粒徑優(yōu)選20 60目。步驟2)所述的燕麥麩皮與水的重量比優(yōu)選1 20 1 30。步驟3)所述的分離后收集濾液，分離方法優(yōu)選100目濾布過(guò)濾。所述的靜置 0. 5 3小時(shí)，優(yōu)選靜置1小時(shí)。靜置后有蛋白質(zhì)沉淀析出。步驟4)離心分離的速度為2500 lOOOOrpm，優(yōu)選5000rpm。低溫α -淀粉酶反 應(yīng)的溫度在35 45°C，較佳的是40°C。pH5. 5 6. 5，優(yōu)選6pH。低溫α-淀粉酶的用量 優(yōu)選50 150U/g燕麥麩皮，更優(yōu)選100U/g燕麥麩皮。低溫α -淀粉酶是一種反應(yīng)溫度 在25 45°C的淀粉酶。而一般的淀粉酶在25 45°C溫度下催化效率及其低下。同時(shí)在 生產(chǎn)過(guò)程中，如溫度超過(guò)60°C，淀粉的物理性質(zhì)發(fā)生明顯變化，使溶液十分粘稠，處理困難； 而且高溫容易導(dǎo)致燕麥葡聚糖分解，使提取率降低。所以，采用低溫α-淀粉酶不僅使 生產(chǎn)過(guò)程更加容易，降低設(shè)備能耗，還提高了燕麥β “葡聚糖的提取率。
步驟5)得到燕麥0 -葡聚糖溶液可以進(jìn)一步冷凍干燥，或者配制到0. 2 濃 度進(jìn)行使用。本發(fā)明還提供上述方法提取的燕麥0 -葡聚糖。本發(fā)明還提供燕麥葡聚糖在改善面部泛紅和減少細(xì)紋的應(yīng)用，可用于制備改 善面部泛紅和減少細(xì)紋的藥物或化妝品。本發(fā)明所用的原料或試劑除特別說(shuō)明之外，均市售可得。相比于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果如下本發(fā)明的燕麥葡聚糖的生產(chǎn)工藝 中，未使用有機(jī)溶劑，而且操作溫度不高于50°C，節(jié)能環(huán)保，安全性高。本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)了燕麥 3-葡聚糖在改善面部泛紅和減少細(xì)紋的應(yīng)用。


以下結(jié)合

本發(fā)明的特征和有益效果。圖1是涂用燕麥0 -葡聚糖前后面部泛紅的改善狀況圖。圖2是涂用燕麥0 -葡聚糖前后面部細(xì)紋的改善狀況圖。
具體實(shí)施例方式下面用實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明并不受其限制。下列實(shí)施例中未注 明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。所述的百分比 若無(wú)特別說(shuō)明，是指質(zhì)量百分比。實(shí)施例1選擇粒徑20目的燕麥麩皮。通過(guò)淀粉篩分機(jī)(新鄉(xiāng)市三禾振動(dòng)設(shè)備有限公司) 采用60目的篩網(wǎng)，除去燕麥麩皮表面的淀粉顆?；蚍勰┮约案m。燕麥麩皮在50°C下加水 攪拌，燕麥麩皮與水的重量比為1 20，調(diào)節(jié)pH8，攪拌1小時(shí)。5000rpm離心分離后收集濾 液，冷卻至301，調(diào)整？11為4.5，攪拌后靜置1小時(shí)。5000rpm離心分離得濾液，加入低溫 a -淀粉酶(購(gòu)自Sigma公司，A-3176，Type VI-B型，酶活力24000U/g)，用量為0. 42g低 溫a-淀粉酶/100g燕麥麩皮。在40°C下，pH值6，處理1小時(shí)，采用硅藻土板框過(guò)濾，得 到澄清液體。采用截留分子量為lOOOOODa的超濾膜過(guò)濾，收集截留液，得到燕麥葡聚 糖溶液，冷凍干燥。提取率85%，純度88%。用水配制成(wt)燕麥葡聚糖濃度的 溶液。實(shí)施例2選擇粒徑60目的燕麥麩皮。通過(guò)淀粉篩分機(jī)采用80目的篩網(wǎng)，除去燕麥麩皮表 面的淀粉顆粒或粉末以及浮塵。燕麥麩皮在40°C下加水?dāng)嚢瑁帑滬熎づc水的重量比為 1 30，調(diào)節(jié)pH7，攪拌5小時(shí)。100目濾布過(guò)濾，收集濾液，冷卻至10°C，調(diào)整pH為5. 5， 攪拌后靜置3小時(shí)。5000rpm離心分離得濾液，加入低溫a -淀粉酶(酶活力24000U/g)， 用量為1.25g低溫a-淀粉酶/100g燕麥麩皮。在451下，？11值6.5，處理2小時(shí)，采用硅 藻土板框過(guò)濾，得到澄清液體。采用截留分子量為50000Da的超濾膜過(guò)濾，收集截留液，得 到燕麥葡聚糖溶液，冷凍干燥。提取率78%，純度95%。用水配制成0.2% (wt)燕麥
葡聚糖濃度的溶液。實(shí)施例3
選擇粒徑40目的燕麥麩皮。通過(guò)淀粉篩分機(jī)采用60目的篩網(wǎng)，除去燕麥麩皮表 面的淀粉顆?；蚍勰┮约案m。燕麥麩皮在45°C下加水?dāng)嚢?，燕麥麩皮與水的重量比為 1 25，調(diào)節(jié)pH7. 5，攪拌2小時(shí)。lOOOOrpm離心分離后收集濾液，冷卻至20°C，調(diào)整pH為 5. 0，攪拌后靜置0. 5小時(shí)。5000rpm離心分離得濾液，加入低溫a -淀粉酶(酶活力24000U/ g)，用量為0.85g低溫a-淀粉酶/100g燕麥麩皮。在35°C下，pH值5. 5，處理1. 5小時(shí)， 采用硅藻土板框過(guò)濾，得到澄清液體。采用截留分子量為80000Da的超濾膜過(guò)濾，收集截留 液，得到燕麥葡聚糖溶液，冷凍干燥。提取率82%，純度93%。用水配制成0.5% (wt) 燕麥葡聚糖濃度的溶液。采用硫酸-苯酚法檢測(cè)燕麥葡聚糖濃度。硫酸-苯酚法如下苯酚-硫酸試劑可與游離的寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起顯色反應(yīng)，顯色后在 490nm處有最大吸收值，吸收值與糖含量呈線性關(guān)系。儀器與用具紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)；分析天平。試藥與試液0 -葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)溶液精密稱取0 -葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品10mg，雙蒸水定容至100ml (若 配置過(guò)程中較難溶解，可先加少量水，70°C水浴助溶，冷卻至室溫后，定溶)。冰箱儲(chǔ)存?zhèn)溆?。苯酚溶?5% )取苯酚5g，加水使溶解成100ml，搖勻，即得。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備取6組具塞試管，每組三個(gè)平行。分別精密量取0. 2,0. 4,0. 6、 0. 8、1.0、1.2ml 葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(0. 10mg/ml)加入各組試管中，補(bǔ)加雙蒸水至2. 0ml ；另 取3支試管加入蒸餾水2. 0ml做空白。分別精密加入5%苯酚溶液1. 0ml，搖勻，迅速精密 加入濃硫酸5. 0ml，搖勻后放置至室溫，以空白液為對(duì)照調(diào)零，在490nm處測(cè)定吸光值。以 3 -葡聚糖的量為橫坐標(biāo)，吸光值A(chǔ)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程Y = aX+b(Y為為吸光度(abs)，X為3 -葡聚糖的加入量(P g))，相 關(guān)系數(shù)r彡0. 99。待測(cè)樣品溶液的制備精密稱取待測(cè)樣品lg定容于100ml容量瓶中，搖勻后精密 量取1. 0ml加入平行試管中，補(bǔ)雙蒸水至2. 0ml，精密加入5%苯酚1ml，搖勻后精密加入濃 硫酸5. 0ml，冷卻至室溫，在490nm下測(cè)定其吸光值A(chǔ)。每個(gè)待測(cè)溶液做三組平行。含量計(jì)算將待測(cè)樣品的吸光度帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程中，計(jì)算出待測(cè)樣品中的 葡聚糖含量。葡聚糖濃度=(x/100)%，其中，X為代入標(biāo)準(zhǔn)曲線求出的待測(cè)樣品葡聚
糖的量(Ug)o下面通過(guò)試驗(yàn)例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的有益效果。效果實(shí)施例1取實(shí)施例1制備的濃度的燕麥葡聚糖濃度的溶液。給予5位面部泛紅 (Baumann皮膚分型為敏感性皮膚，已發(fā)生面部皮膚泛紅現(xiàn)象)的女性和5位面部有皺紋的 女性使用。每次取0. 5ml均勻涂滿面部，每天早晚洗臉后使用，不涂其他東西。連續(xù)使用30天。使用30天后的結(jié)果見(jiàn)圖1和圖2。5位原來(lái)面部泛紅的女性的面部的均得到不同 程度的消退，其中2人基本恢復(fù)正常。2人消退了 60 70%。一人消退40%。5位原來(lái)面 部有皺紋的女性面部的皺紋都有減少。特別是細(xì)紋和干紋所有人都明顯減少?？梢?jiàn)燕麥 3-葡聚糖具有明顯改善面部泛紅和減少細(xì)紋的作用。
權(quán)利要求
一種提取燕麥β-葡聚糖的方法，其特征在于，包括如下步驟1)將燕麥麩皮去除表面的淀粉和浮塵；2)將燕麥麩皮在40～50℃加入水，調(diào)節(jié)pH7～8，攪拌1～5小時(shí)；3)分離后收集濾液，冷卻至10～30℃，調(diào)整pH為4.5～5.0，攪拌后靜置0.5～3小時(shí)；4)離心分離得濾液，加入低溫α-淀粉酶，在35～45℃下，pH值5.5～6.5，處理1～2小時(shí)，采用硅藻土板框過(guò)濾，得到澄清液體；5)用截留分子量為50000～100000Da的超濾膜過(guò)濾，得到燕麥β-葡聚糖溶液。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)所述燕麥麩皮的粒徑優(yōu)選20 60目。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)所述的燕麥麩皮與水的重量比為 1 20 1 30。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟3)所述的靜置1小時(shí)。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)所述的離心分離的速度為5000rpm。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)所述的低溫α-淀粉酶反應(yīng)溫度 40°C，ρΗ6。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)所述的低溫α-淀粉酶的用量是 50 150U/g燕麥麩皮。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述的低溫α-淀粉酶的用量是100U/g燕麥麩皮。
9.如權(quán)利要求1 8任一項(xiàng)所述的方法提取的燕麥β-葡聚糖。
10.燕麥β-葡聚糖在改善面部泛紅和減少細(xì)紋的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種提取燕麥β-葡聚糖的方法，包括如下步驟1)將燕麥麩皮去除表面的淀粉和浮塵；2)將燕麥麩皮在40～50℃加入水，調(diào)節(jié)pH7～8，攪拌1～5小時(shí)；3)分離后收集濾液，冷卻至10～30℃，調(diào)整pH為4.5～5.0，攪拌后靜置0.5～3小時(shí)；4)離心分離得濾液，加入低溫α-淀粉酶，在35～45℃下，pH值5.5～6.5，處理1～2小時(shí)，采用硅藻土板框過(guò)濾，得到澄清液體；5)用截留分子量為50000～100000Da的超濾膜過(guò)濾，得到燕麥β-葡聚糖溶液。本發(fā)明的燕麥β-葡聚糖，生產(chǎn)工藝中未使用有機(jī)溶劑，而且操作溫度不高于50℃，節(jié)能環(huán)保，安全性高。本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)了燕麥β-葡聚糖在改善面部泛紅和減少細(xì)紋的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K31/716GK101798357SQ20091019948
公開(kāi)日2010年8月11日 申請(qǐng)日期2009年11月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月27日
發(fā)明者孫常磊, 廖立平, 李成亮, 翟春濤 申請(qǐng)人:上海萊博生物科技有限公司