專利名稱：：一種紫杉醇注射液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種抗癌藥物注射液的制備方法，具體涉及一種紫杉醇注射液的制備方法。紫杉醇是一種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的二萜類化合物，其化學(xué)名稱為5p,20-環(huán)氧-1，201，4，7卩,10卩,1301-六羥基紫杉烷-11-烯-9-酮-4,10-二乙酸酯-2-苯曱酸酯-13-(2'11,3'8)-:^-苯曱酰-3-苯基異絲氨酸酯，分子式為C47H51N014，分子量為853.92，結(jié)構(gòu)式如下紫杉醇難溶于水及許多藥用溶媒，水中的溶解度僅為0.006mg.mr1。紫杉醇在pH4~8范圍內(nèi)比較穩(wěn)定，堿性條件下很快分解，在曱醇鈉溶液中發(fā)生劇烈反應(yīng)，酸性條件下比較穩(wěn)定。此外，紫杉醇在一定條件下可以被Mn02、Jone's試劑氧化，但極難;故還原，其化學(xué)性質(zhì)相對穩(wěn)定。紫杉醇(Paclitaxel)是從紫杉(紅豆杉)樹皮中提取的一種抗癌藥，紫杉醇具有獨(dú)特的作用機(jī)制，能誘導(dǎo)和促進(jìn)微管蛋白聚合、微管裝配與微管穩(wěn)定，從而阻止腫瘤細(xì)胞的生長。微管是真核細(xì)胞的一種組成成份，它是由兩條類似的多肽(a和卩)為單位構(gòu)成的微管蛋白二聚體。正常情況下，微管和微管蛋白二聚體之間存在動態(tài)平衡。紫杉醇可以使兩者之間失去動態(tài)平衡，導(dǎo)致細(xì)胞在有絲分裂時不能形成紡錘體和紡錘絲，抑制了細(xì)胞分裂和增殖，從而發(fā)揮抗腫瘤作用。體外研究表明，紫杉醇可以濃度依賴性、可逆性地結(jié)合到微管上，尤其是結(jié)合到N端微管蛋白的|3-亞單位上，
背景技術(shù)：
：這一作用降低了聚合所需的微管蛋白的濃度，使動態(tài)平衡向著微管裝配的方向移動，增加聚合的速率與產(chǎn)量。紫杉醇誘導(dǎo)形成的微管較短，并且比不用紫杉醇時正常形成的微管的屈回性約大10倍。另外，紫杉醇抑制有絲分裂所必需的微管網(wǎng)的正常動態(tài)再生，會阻止正常的有絲分裂紡錘體的形成，導(dǎo)致染色體斷裂并抑制細(xì)胞復(fù)制和移行。紫杉醇改變了細(xì)胞的有絲分裂過程，使有絲分裂持續(xù)時間從0.5小時增加到15小時，并抑制細(xì)胞質(zhì)分裂，導(dǎo)致形成多核細(xì)胞。這些多核細(xì)胞繼續(xù)回復(fù)到Gl期，然后試圖再次進(jìn)行有絲分裂，但在有絲分裂中沒有阻滯細(xì)胞(Arrestingcells),在許多細(xì)胞中還觀察到微核。抑制紡錘體的形成似乎與這種不正常的有絲分裂有關(guān)。體內(nèi)試-瞼中，紫杉醇對動物移植性肺瘤B16、Lewis肺癌、P388和C38等都有較強(qiáng)的生長抑制作用。對KB細(xì)胞和L1210細(xì)胞集落形成的抑制強(qiáng)度超過長春新堿與秋水仙堿。在14名患急性髓性或淋巴細(xì)胞白血病的病人中，紫杉醇治療(劑量105mg.m-2)前后，自然死亡的帶有DNA鏈斷裂特征的單核細(xì)胞之比例從治療前的0.4%~16%增加到治療后的3.4%~45%。人類實(shí)體癌(肝癌、乳腺癌和子宮癌)細(xì)胞抹與紫杉醇一起孵育，也觀察到細(xì)胞自然死亡。自然死亡的人肝癌或乳腺癌細(xì)胞4朱的百分率，隨紫杉醇濃度增加而上升。在白血病和卵巢癌細(xì)胞抹中，自然死亡似乎與酪氨酸和蛋白激酶C調(diào)節(jié)的磷酸化有關(guān)。因此，紫杉醇對卵巢癌、乳腺癌、頭頸部癌、非小細(xì)胞性肺癌、前列腺癌等均有較好的療效。紫杉醇至今已在40多個國家獲準(zhǔn)上市，并在乳腺癌、肺癌、白血病、胃腸道癌及介入治療后的血管再狹窄等治療上顯示了令人鼓舞的療效。美國FDA于1993年將其用于初始治療或其它化療失敗的晚期卵巢癌的治療，現(xiàn)又批準(zhǔn)紫杉醇用于轉(zhuǎn)移性乳腺癌的治療，紫杉醇對肺癌及其他癌癥的治療也正在進(jìn)行I或II期臨床試驗。紫杉醇由于其化學(xué)結(jié)構(gòu)新穎，作用機(jī)理獨(dú)特，1993年上市后為臨床迅速接受，年銷售額隨著上市國家數(shù)量的增加和適應(yīng)癥的擴(kuò)大直線上升，成為當(dāng)前、也是歷史上世界范圍內(nèi)最為暢銷的一個抗腫瘤藥物，紫杉醇的開發(fā)利用被譽(yù)為90年代抗腫瘤藥三大成就之一。目前，紫杉醇已在美國、英國、荷蘭等40多個國家作為一線抗腫瘤藥物上市。該藥對鉑類藥物耐藥的卵巢癌療效較好。作為新型的廣譜抗腫瘤藥物，除腎癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、結(jié)腸直腸癌等之外，紫杉醇對其它常見實(shí)體瘤均有抗肺瘤活性。它既是婦科卵巢癌、乳腺癌和非小細(xì)胞肺癌的一線用藥，也是腫瘤晚期仍行之有效的化療藥物。從目前的大量臨床試驗結(jié)果看，其尤以對卵巢癌、乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、食管癌和頭頸部腫瘤等的療效最為突出。紫杉醇在國內(nèi)亦已為臨床廣泛接受。但目前國內(nèi)外紫杉醇注射液廠家的生產(chǎn)過程中普遍存在由于原料微量水分去除不完全，穩(wěn)定劑選擇不當(dāng)而造成的產(chǎn)品穩(wěn)定性不佳，儲存溫度要求較高(需在冷處儲存)的難題。另外還存在配液過程用時過長或原料溶解不完全造成的局部濃度過大或整體含量偏低的問題。因此，如何選擇合適的方法控制水分，調(diào)節(jié)穩(wěn)定劑種類和配比，縮短配液時間，提高溶解均一性是目前研究的重點(diǎn)。
發(fā)明內(nèi)容因此，本發(fā)明的目的是提供一種使穩(wěn)定性提高，均一性良好的更適于臨床應(yīng)用的紫杉醇注射液的制備方法。本發(fā)明的紫杉醇注射液制備方法去除了紫杉醇原料中的微量水分，將紫杉醇原料先溶解，再配液，從而避免了配液用時過長或原料溶解不完全造成的局部濃度過大或整體含量偏低，解決了配液過程中原料溶解的均一性問題。用于實(shí)現(xiàn)本發(fā)明上述技術(shù)目的的技術(shù)方案如下一種紫杉醇注射液的制備方法，該制備方法包括以下步驟(1)將聚氧乙烯蓖麻油與分子篩混勻，過濾除菌；(2)去除紫杉醇中的微量水分，加入重量為紫杉醇重量5~10倍的無水乙醇和穩(wěn)定劑，使紫杉醇溶解，過濾除菌；(3)將步驟(1)和(2)獲得的溶液混勻，過濾除菌。在上述制備方法中，優(yōu)選地，聚氧乙烯蓖麻油與分子篩的質(zhì)量比為5:1。分子篩具有選擇吸附性，可以脫去有機(jī)物溶劑中的水分和雜質(zhì)。分子篩吸附量較大，一般吸附量為22%。優(yōu)選的分子篩為4A型分子篩，其分子式為Na2O'Al2O3'2.0SiO2'4.5H2O。在上述制備方法中，去除紫杉醇中的微量水分是采用真空干燥進(jìn)行的，優(yōu)選為在0.030.05帕條件下以無水P20s作為干燥劑進(jìn)行真空干燥。本發(fā)明選擇常用注射液穩(wěn)定劑中的一種或多種進(jìn)行不同地配比，對成品穩(wěn)定性進(jìn)行考察后確定幾種適宜的穩(wěn)定劑，穩(wěn)定劑可以選自油酸、甘膽酸鈉、亞石克酸鈉、亞石危酸氫鈉、乳酸、枸椽酸鈉和枸椽酸中的一種或多種，穩(wěn)定劑的質(zhì)量優(yōu)選為注射液總質(zhì)量的0.5%~5%。上述注射液還可以包含抗氧化劑，例如維生素E。過濾除菌優(yōu)選采用孔徑為0.221im的濾膜。本發(fā)明的紫杉醇注射液制備方法是一種獨(dú)特的新工藝，可以很好的解決紫杉醇注射液的穩(wěn)定性、溶解均一性的問題，從而提高臨床用藥安全性。這種紫杉醇注射液的制備方法具有以下有益效果(1)紫杉醇原料先溶解再配液，避免了配液用時過長或原料溶解不完全造成的局部濃度過大或整體含量偏低，解決了配液過程中原料溶解的均一性問題。(2)很好的解決了紫杉醇注射液的穩(wěn)定性問題，使其儲存溫度從原來的冷處保存提升到25。C條件下保存，有效期從原來的兩年延長到兩年半。(3)能夠有效地控制不溶性微粒，有關(guān)物質(zhì)等項目優(yōu)于國家標(biāo)準(zhǔn)。國家標(biāo)準(zhǔn)中不溶性微粒1Ojim以上微粒<6000，25pm以上微粒<600。本發(fā)明將控制標(biāo)準(zhǔn)提升至10|am以上微粒<4000，25(im以上微粒<400。國家標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)物質(zhì)單個雜質(zhì)峰面積不大于對照主峰面積，雜質(zhì)峰總面積不大于對照主峰面積的2.5倍。本發(fā)明將控制標(biāo)準(zhǔn)提升至有關(guān)物質(zhì)單個雜質(zhì)峰面積不大于對照主峰面積的0.5倍，雜質(zhì)峰總面積不大于對照主峰面積的1.0倍。(4)采用保護(hù)條件下的真空干燥技術(shù)去除原料的微量水分，解決了國內(nèi)外紫杉醇原料生產(chǎn)廠家感到棘手的去處微量水分問題，同時避免了原輔料，例如紫杉醇或聚氧乙烯蓖麻油被破壞。具體實(shí)施例方式以下通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。應(yīng)理解，以下實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，而不用于限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例11.處方百分比以處方總質(zhì)量計紫杉醇原料0.6%聚氧乙烯蓖麻油55%無水乙醇43%油酸、甘"旦酸鈉混合物1%2.生產(chǎn)工藝(1)將質(zhì)量比為5:1的聚氧乙烯蓖麻油和4A型分子篩加入配液罐內(nèi)，攪拌30分鐘，充分混勻，密封，待過濾。(2)將步驟(1)中配好的料液通過0.22pm的濾膜進(jìn)行無菌壓濾。(3)精確稱取處方量的紫杉醇(依據(jù)紫杉醇注射液國家標(biāo)準(zhǔn)WSl-(X-026)-2001Z,每5ml紫杉醇注射液含紫杉醇30mg計算)，按質(zhì)量比加入紫杉醇10倍量的無水乙醇混合均勻，再加入油酸、甘膽酸鈉混合物(質(zhì)量比為3:l)作為穩(wěn)定劑，攪拌至紫杉醇和穩(wěn)定劑完全溶解，加入無水乙醇至處方量。(4)將步驟(3)中配好的溶液通過0.22jim的濾膜進(jìn)行無菌壓濾。(5)將上述兩種配好的溶液混合均勻，進(jìn)行無菌壓濾。(6)分裝分裝前調(diào)試好分裝機(jī)后再接通電源，按主機(jī)啟動按鈕，裝量在理論裝量100~110%范圍內(nèi)，灌裝。(7)壓塞軋蓋膠塞用75%(體積/體積)乙醇水溶液漂洗，撈出后于120士5。C滅菌1.5小時。壓塞，軋蓋，燈檢。2.加速試一瞼取試制樣品，置40。C士2。C/RH75士5Q/o條件下放置6個月進(jìn)行加速試驗考察。于第1、2、3、6個月末各取樣一次，按照紫杉醇注射液國家標(biāo)準(zhǔn)WSl-(X-026)-2001Z的考察方法對各項考察項目進(jìn)行^r測，結(jié)果與0月比較。結(jié)果如下表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>3.長期試驗取試制樣品，在溫度25°C±2°C,相對濕度60%±10%的條件下放置進(jìn)行長期試驗。于第3、6,9，12個月末各取樣一次，按照紫杉醇注射液國家標(biāo)準(zhǔn)WSl-(X-026)-2001Z的考察方法對各項考察項目進(jìn)行檢測，與0月結(jié)果比較。結(jié)果如下表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實(shí)施例21.處方紫杉醇原料0.6%聚氧乙烯蓖麻油45%無水乙醇50%枸椽酸一枸椽酸鈉0.5%2.生產(chǎn)工藝(1)將質(zhì)量比為5:1的聚氧乙烯蓖麻油和4A型分子篩加入配液罐內(nèi)，攪拌30分鐘，充分混勻，密封，待過濾。(2)將步驟(1)中配好的料液通過0.22pm的濾膜進(jìn)行無菌壓濾。(3)精確稱取處方量的紫杉醇(依據(jù)紫杉醇注射液國家標(biāo)準(zhǔn)WS廣(X-026)-2001Z,每5ml紫杉醇注射液含紫杉醇30mg計算)，按質(zhì)量比加入紫杉醇10倍量的無水乙醇混合均勻，再加入枸椽酸鈉、枸椽酸混合物(質(zhì)量比為2:l)作為穩(wěn)定劑，攪拌至紫杉醇和穩(wěn)定劑完全溶解，加入無水乙醇至處方量。。(4)將步驟(3)中配好的溶液通過0.22(am的濾膜進(jìn)行無菌壓濾。(5)將上述兩種配好的溶液混合均勻，進(jìn)行無菌壓濾。(6)分裝分裝前調(diào)試好分裝機(jī)后再接通電源，按主機(jī)啟動按鈕，裝量在理論裝量100~110%范圍內(nèi)，灌裝。(7)壓塞軋蓋膠塞用75%(體積/體積)乙醇水溶液漂洗，撈出后于120士5。C滅菌1.5小時。壓塞，軋蓋，燈檢。2.加速試驗取試制樣品，置40°C±2°C/RH75±5%條件下放置6個月進(jìn)行加速試驗考察。于第1、2、3、6個月末各取樣一次，按照紫杉醇注射液國家標(biāo)準(zhǔn)WSr(X-026)-2001Z的考察方法對各項考察項目進(jìn)行檢測，結(jié)果與0月比較。結(jié)果如下表<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>3.長期試驗取試制樣品，在溫度25。C士2。C,相對濕度60%±10%的條件下放置進(jìn)行長期試驗。于第3、6,9,12個月末各取樣一次，按照紫杉醇注射液國家標(biāo)準(zhǔn)WSl-(X-026)-2001Z的考察方法對各項考察項目進(jìn)行4企測，與0月結(jié)果比較。結(jié)果如下表<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實(shí)施例31.處方紫杉醇原料0.6%聚氧乙烯蓖麻油35%無水乙醇60%亞辟u酸鈉4.5%2.生產(chǎn)工藝(1)將質(zhì)量比為5:1的聚氧乙烯蓖麻油和4A型分子篩加入配液罐內(nèi)，攪拌30分鐘，充分混勻，密封，待過濾。(2)將步驟(1)中配好的料液通過0.22iam的濾膜進(jìn)行無菌壓濾。(3)精確稱取處方量的紫杉醇(依據(jù)紫杉醇注射液國家標(biāo)準(zhǔn)WSr(X-026)-2001Z,每5ml紫杉醇注射液含紫杉醇30mg計算)，按質(zhì)量比加入紫杉醇IO倍量的無水乙醇混合均勻，再加入亞硫酸鈉作為穩(wěn)定劑，攪拌至紫杉醇和穩(wěn)定劑完全溶解，加入無水乙醇至處方量。(4)將步驟(3)中配好的溶液通過0.22(im的濾膜進(jìn)行無菌壓濾。(5)將上述兩種配好的溶液混合均勻，進(jìn)行無菌壓濾。(6)分裝分裝前調(diào)試好分裝機(jī)后再接通電源，按主機(jī)啟動按鈕，裝量在理論裝量100110%范圍內(nèi)，灌裝。(7)壓塞軋蓋膠塞用75%(體積/體積)乙醇水溶液漂洗，撈出后于120士5。C滅菌1.5小時。壓塞，軋蓋，燈檢。2.力口速試驗取試制樣品，置40°C±2°C/RH75±5%條件下放置6個月進(jìn)行加速試驗考察。于第1、2、3、6個月末各取樣一次，按照紫杉醇注射液國家標(biāo)準(zhǔn)WSr(X-026)-2001Z的考察方法對各項考察項目進(jìn)行檢測，結(jié)果與0月比較。結(jié)果如下表<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>3.長期試驗取試制樣品，在溫度25。C士2。C，相對濕度60%±10%的條件下放置進(jìn)行長期試驗。于第3、6,9,12個月末各取樣一次，按照紫杉醇注射液國家標(biāo)準(zhǔn)WS廣(X-026)-2001Z的考察方法對各項考察項目進(jìn)行檢測，與0月結(jié)果比較。結(jié)果如下表<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實(shí)施例41.處方紫杉醇原料0.6%聚氧乙烯蓖麻油35%無水乙醇60%亞石克酸鈉、乳酸混合物2%2.生產(chǎn)工藝(1)將聚氧乙烯蓖麻油和4A型分子篩加入配液罐內(nèi)，攪拌30分鐘，充分混勻，密封，待過濾。(2)將步驟(1)中配好的料液通過0.22fim的濾膜進(jìn)行無菌壓濾。(3)精確稱取處方量的紫杉醇(依據(jù)紫杉醇注射液國家標(biāo)準(zhǔn)WS廣(X-026)-2001Z,每5ml紫杉醇注射液含紫杉醇30mg計算)，按質(zhì)量比加入紫杉醇10倍量的無水乙醇混合均勻，再加入亞辟L酸氬鈉、乳酸混合物(質(zhì)量比為2:l)作為穩(wěn)定劑，攪拌至紫杉醇和穩(wěn)定劑完全溶解，加入無水乙醇至處方量。(4)將步驟3中配好的溶液通過0.22iam的濾膜進(jìn)行無菌壓濾。(5)將上述兩種配好的溶液混合均勻，進(jìn)行無菌壓濾。(6)分裝分裝前調(diào)試好分裝機(jī)后再接通電源，按主機(jī)啟動按鈕，裝量在理論裝量100~110%范圍內(nèi)，灌裝。(7)壓塞軋蓋膠塞用75%(體積/體積)乙醇水溶液漂洗，撈出后于120士5。C滅菌1.5小時。壓塞，軋蓋，燈檢。2.加速試-驗取試制樣品，置40°C±2°C/RH75±5%條件下放置6個月進(jìn)行加速試驗考察。于第1、2、3、6個月末各取樣一次，按照紫杉醇注射液國家標(biāo)準(zhǔn)WSl-(X-026)-2001Z的考察方法對各項考察項目進(jìn)行檢測，結(jié)果與0月比較。結(jié)果如下表13<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>3.長期試驗取試制樣品，在溫度25°C±2°C，相對濕度60%±10%的條件下放置進(jìn)行長期試驗。于第3、6，9，12個月末各取樣一次，按照紫杉醇注射液國家標(biāo)準(zhǔn)WSr(X-026)-2001Z的考察方法對各項考察項目進(jìn)行檢測，與0月結(jié)果比較。結(jié)果如下表<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>權(quán)利要求1.一種紫杉醇注射液的制備方法，該制備方法包括以下步驟(1)將聚氧乙烯蓖麻油與分子篩混勻，過濾除菌；(2)去除紫杉醇中的微量水分，加入重量為紫杉醇重量5～10倍的無水乙醇和穩(wěn)定劑，使紫杉醇溶解，過濾除菌；(3)將步驟(1)和(2)獲得的溶液混勻，過濾除菌。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述聚氧乙烯蓖麻油與分子篩的質(zhì)量比為5:1。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述分子篩為4A型分子篩，其分子式為Na2O'Al2O3'2.0SiO2'4.5H2O。4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的制備方法，其特征在于，所述去除紫杉醇中的微量水分是采用真空干燥進(jìn)行的。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述真空干燥為在0.030.05帕條件下以無水P2Os作為干燥劑進(jìn)行真空干燥。6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項所述的制備方法，其特征在于，所述穩(wěn)定劑選自油酸、甘膽酸鈉、亞辟u酸鈉、亞好u酸氫鈉、乳酸、枸椽酸鈉和枸椽酸中的一種或多種。7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項所述的制備方法，其特征在于，所述穩(wěn)定劑的質(zhì)量為注射液總質(zhì)量的0.5%~5%。8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項所述的制備方法，其特征在于，所述注射液還包含抗氧化劑，例如維生素E。9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項所述的制備方法，其特征在于，所述過濾除菌釆用孔徑為0.22jim的濾膜。全文摘要本發(fā)明提供一種紫杉醇注射液的制備方法，其中包括以下步驟(1)將聚氧乙烯蓖麻油與分子篩混勻，過濾除菌；(2)去除紫杉醇中的微量水分，加入重量為紫杉醇重量5～10倍的無水乙醇和穩(wěn)定劑，使紫杉醇溶解，過濾除菌；(3)將步驟(1)和(2)獲得的溶液混勻，過濾除菌。該方法避免了配液用時過長或原料溶解不完全造成的局部濃度過大或整體含量偏低，解決了配液過程中原料溶解的均一性問題和紫杉醇注射液的穩(wěn)定性問題。文檔編號A61K31/337GK101574318SQ20091020324公開日2009年11月11日申請日期2009年5月31日優(yōu)先權(quán)日2009年5月31日發(fā)明者欣莊,張志蘭,瑩沙,平溫,王俊紅申請人:?？谑兄扑帍S有限公司