專利名稱：：一種α-硫辛酸脂質體的制備方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及a-硫辛酸的制備領域，具體涉及一種a-硫辛酸脂質體的制備方法。
背景技術：
：自從1965年被A.D.Bangham發(fā)現(xiàn)脂質體后，脂質體在生物物理學、膠體科學、化學、細胞領域等得到了快速發(fā)展。尤其是載藥脂質體具有良好的細胞親和性、靶向性、緩釋性和可降低藥物毒性等優(yōu)點而受到越來越多的關注。目前，制備脂質體的方法較多，常用的有薄膜法、反相蒸發(fā)法、溶劑注入法和復乳法等，這些方法一般稱為被動載藥法；pH梯度法，硫酸銨梯度法等一般被稱為主動載藥法。但是在某些載藥脂質體制備過程中仍面臨藥物脂質體的形態(tài)與粒徑、穩(wěn)定性、包封率等問題。a-硫辛酸對急性肝炎、肝硬化、肝昏迷、脂肪肝等肝臟疾病的預防和治療及對于治療肝病引起的營養(yǎng)代謝失調等癥狀都有效果。a-硫辛酸還具有活化細胞的作用，因此可作為抗氧劑使用，其作用是維他命C和E的400倍，且作用持久。由于人體的a-硫辛酸非常少，且隨著年齡的增長而減少，所以從體外攝取補充a-硫辛酸以滿足人體的需要。2004年，日本修改食品藥品區(qū)分標準，規(guī)定了a-硫辛酸不僅作為醫(yī)藥品，也可以當食品使用。a-硫辛酸不但具有美容養(yǎng)顏的功效，同時還可以達到減肥的目的。因此，a-硫辛酸在健康食品和化妝品領域的用途值得關注。但由于目前采用a-硫辛酸不夠穩(wěn)定，在人體內容易降解，無法發(fā)揮正常生理作用，因此，作為化妝品或者食品的效果就大打折扣，如果可以得到均勻穩(wěn)定的a-硫辛酸，則其市場前景十分樂觀。
發(fā)明內容本發(fā)明的目的在于根據(jù)現(xiàn)有技術的不足，提供一種均勻、穩(wěn)定的a-硫辛酸脂質體的制備方法。本發(fā)明目的是通過以下技術方案予以實現(xiàn)的—種a-硫辛酸脂質體的制備方法，包括如下步驟將大豆磷脂和膽固醇溶解于有機溶劑后，加入到a-硫辛酸溶液形成脂質體溶液，所用大豆磷脂、膽固醇和a-硫辛酸的質量比為3.13.5:1:0.030.06，經(jīng)水浴、減壓、旋蒸形成厚度均勻的脂質薄膜，加入助劑乙醚，經(jīng)過水化、破碎后形成均勻脂質體。上述方法中，大豆磷脂、膽固醇和a-硫辛酸的質量比優(yōu)選為5:1.5:0.08。三種原料的處理過程優(yōu)選為，先將大豆磷脂和膽固醇溶解于有機溶劑中，再緩慢加入到a-硫辛酸溶液中。其中，所述有機溶劑優(yōu)選為三氯甲烷。所述a-硫辛酸溶液優(yōu)選為將a-硫辛酸溶解于無水乙醇中得到的a-硫辛酸溶液。上述方法中，所述水浴溫度優(yōu)選為3555°C;所述旋蒸的旋轉速度優(yōu)選為1030rpm;所述減壓后的真空度優(yōu)選為0.050.09MPa。由于形成脂質膜后很難從瓶壁上洗脫下來，既浪費了大量的原料，又使制備時間大大延長，因此本發(fā)明在水化過程中先加入適量的助劑乙醚，用量以將瓶壁上的薄膜洗脫下來為宜，這樣可以大大加快膜的洗脫。由于乙醚的分子量和沸點都較低，易于在后續(xù)步驟中通過減壓旋蒸除去。上述方法中，水化和破碎所用方法均為本領域的常用方法。但由于磷脂在水化是，磷脂分子與水分子接觸，分子間發(fā)生重排定向，并形成磷脂雙分子層，本發(fā)明為了使形成的磷脂膜之間發(fā)生有規(guī)律的重排，在加緩沖液后，磷脂層可以有序的從壁上脫離從而巻曲形成脂質體，因此在水化過程中優(yōu)選在磷脂的相變溫度之上進行，如果磷脂水化不充分，就會導致產(chǎn)品粒度不均勻甚至磷脂產(chǎn)生沉淀，嚴重影響質量，因此本發(fā)明水化優(yōu)選在3555t:，水化20min的條件下進行；在制備脂質體過程中，必須選擇合適的緩沖體系，過大的離子強度以及不合適的離子種類會誘使脂質體發(fā)生聚集融合，而過低的離子強度可能起不到良好的緩沖作用，同時也有可能導致一些種類的磷脂無法有效水化，因此，本發(fā)明優(yōu)選采用pH為7.4的磷酸鹽緩沖液進行水化，以達到最好的水化效果；為了獲得粒度均勻的脂質體，本發(fā)明中，破碎時的條件優(yōu)選為優(yōu)選采用3555t:，功率為100400W的高頻超聲破碎儀超聲破碎。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有如下有益效果(1)本發(fā)明a-硫辛酸脂質體克服了a-硫辛酸在人體含量偏低的問題，增加了a-硫辛酸在人體中的含量，使其發(fā)揮正常的生理作用；(2)由于脂質體與皮膚具有很強的親和力，使皮膚對于含有脂質體的化妝品具有更好的吸收能力；而且，由于脂質體的特殊雙分子膜結構的特點，使皮膚對脂質體有很好的接受性；(3)本發(fā)明通過用脂質體將a-硫辛酸包封起來，可將一些皮膚難以吸收的物質帶入肌膚深層，并能降低內容物的剌激性；(4)脂質體制備過程中，獲得均勻的脂質膜是非常關鍵的，本發(fā)明通過研究在減壓旋蒸時控制其旋轉速度、水浴溫度及真空度等條件，使得到的a_硫辛酸脂質體均勻、穩(wěn)定、包封率高；數(shù)據(jù)表明，在水浴溫度為3555t:、旋蒸的旋轉速度為1030rpm、減壓的真空度為0.050.09MPa的條件下進行減壓旋蒸制備得到的脂質膜厚度均勻，水化過程更容易。具體實施例方式以下結合實施例來進一步解釋本發(fā)明，但實施例并不對本發(fā)明做任何形式的限定。實施例1取濃度為1.6mg/mL的a-硫辛酸無水乙醇溶液5ml、膽固醇0.15g、0.5g大豆磷脂及5mL三氯甲烷作為溶劑，將其溶解置于旋轉蒸發(fā)儀中在蒸發(fā)溫度35t:、真空度為0.09MPa下旋轉蒸發(fā)，速度為10轉/min，待溶劑蒸發(fā)完全形成均勻薄膜后加入助劑乙醚溶解，再用pH=7.4的磷酸鹽緩沖液40mL在35。C下使其水化。然后超聲破碎20min，功率為250w，水浴溫度為30°C，而后進行旋蒸5min得產(chǎn)品。經(jīng)過激光粒度儀表征，所得產(chǎn)物均勻分散，平均粒度在120nm左右，包封率為59%，恒溫存放20天未見分層。實施例2稱取大豆磷脂0.5g，膽固醇0.15g以5mL三氯甲烷為溶劑完全溶解后慢慢倒入1.6mg/mLa-硫辛酸無水乙醇溶液5mL，充分攪拌后，置于旋轉蒸發(fā)儀中在蒸發(fā)溫度40°C，真空度為0.08Mpa下旋轉蒸發(fā)，速度為10轉/min，待溶劑蒸發(fā)完全形成均勻薄膜，加入助劑乙醚使其溶解后用pH=7.4的磷酸鹽緩沖液30mL在4(TC下水化20min。然后超聲破碎20min，功率為250w，水浴溫度為3(TC。最后進行減壓旋蒸得產(chǎn)品。經(jīng)過激光粒度儀表征，所得產(chǎn)物均勻分散，平均粒度在110nm左右，包封率為51%，恒溫存放20天未見分層。實施例3稱取大豆磷脂0.5g，膽固醇0.15g以5mL三氯甲烷為溶劑完全溶解后慢慢倒入1.6mg/mLa-硫辛酸無水乙醇溶液5mL，充分攪拌后，置于旋轉蒸發(fā)儀中在蒸發(fā)溫度45°C，真空度為0.07Mpa下旋轉蒸發(fā)，速度為15轉/min，待溶劑蒸發(fā)完全形成均勻薄膜，加入助劑乙醚使其溶解后用pH=7.4的磷酸鹽緩沖液30ml在45。C下水化20min后超聲破碎20min，功率為400w，水浴溫度為30°C。而后進行減壓旋蒸得產(chǎn)品。經(jīng)過激光粒度儀表征，所得產(chǎn)物均勻分散，平均粒度在100nm左右，包封率為61%，恒溫存放20天未見分層。實施例4稱取大豆磷脂0.5g，膽固醇0.15g以5mL三氯甲烷為溶劑完全溶解后慢慢倒入1.6mg/mLa-硫辛酸無水乙醇溶液5mL，充分攪拌后，置于旋轉蒸發(fā)儀中在蒸發(fā)溫度50°C，真空度為0.06Mpa下旋轉蒸發(fā)，速度為15轉/min，待溶劑蒸發(fā)完全形成均勻薄膜，加入助劑乙醚使其溶解后加入pH=7.4的磷酸鹽緩沖液40ml在5(TC下水化20min，然后超聲破碎20min，功率為250w，水浴溫度為3(TC。而后進行減壓旋蒸得產(chǎn)品。經(jīng)過激光粒度儀表征，所得產(chǎn)物均勻分散，平均粒度在130nm左右，包封率為59%，恒溫存放20天未見分層。實施例5稱取大豆磷脂0.5g，膽固醇0.15g以5mL三氯甲烷為溶劑完全溶解后慢慢倒入1.6mg/mLa-硫辛酸無水乙醇溶液5mL，充分攪拌后，置于旋轉蒸發(fā)儀中在蒸發(fā)溫度55°C，真空度為0.05Mpa下旋轉蒸發(fā)，速度為30轉/min，待待溶劑蒸發(fā)完全形成均勻薄膜后加入溶劑乙醚使其溶解后加入pH=7.4的PBS緩沖液40ml在55。C下水化20min后超聲破碎30min，功率為100w，水浴溫度為45t:。而后進行減壓旋蒸得產(chǎn)品。經(jīng)過激光粒度儀表征，所得產(chǎn)物均勻分散，平均粒度在160nm左右，包封率為46%，恒溫存放20天未見分層。實施例6稱取大豆磷脂0.5g，膽固醇0.15g以5mL三氯甲烷為溶劑完全溶解后慢慢倒入1.6mg/mLa-硫辛酸無水乙醇溶液5mL，充分攪拌后，置于旋轉蒸發(fā)儀中在蒸發(fā)溫度45°C，真空度為0.09Mpa下旋轉蒸發(fā)，速度為10轉/min，待溶劑蒸發(fā)完全形成均勻薄膜，加入助劑乙醚使其溶解后加入pH=7.4的磷酸鹽緩沖液40ml在45。C下水化20min，然后超聲破碎20min，功率為250w，水浴溫度為45t:。而后進行減壓旋蒸得產(chǎn)品。經(jīng)過激光粒度儀表征，所得產(chǎn)物均勻分散，平均粒度在140nm左右，包封率為68%，恒溫存放20天未見分層。實施例7稱取大豆磷脂0.5g，膽固醇0.15g以5mL三氯甲烷為溶劑完全溶解后慢慢倒入1.6mg/mLa-硫辛酸無水乙醇溶液5mL，充分攪拌后，置于旋轉蒸發(fā)儀中在蒸發(fā)溫度40°C，真空度為0.09Mpa下旋轉蒸發(fā)，速度為30轉/min，待溶劑蒸發(fā)完全形成均勻薄膜，加入助劑乙醚使其溶解后加入pH=7.4磷酸鹽緩沖液30ml在4(TC下水化20min，然后超聲破碎510min，功率為400w，水浴溫度為4(TC。而后進行減壓旋蒸得產(chǎn)品。經(jīng)過激光粒度儀表征，所得產(chǎn)物均勻分散，平均粒度在120nm左右，包封率為46%，恒溫存放20天未見分層。實施例8稱取兩份大豆磷脂0.5g，膽固醇0.15g分別以5mL三氯甲烷為溶劑完全溶解后慢慢倒入1.6mg/mLa-硫辛酸無水乙醇溶液5mL，充分攪拌后，用Al和A2標示，分別置于旋轉蒸發(fā)儀中在蒸發(fā)溫度45°C，真空度為0.09Mpa下旋轉蒸發(fā)，速度為10轉/min，待溶劑蒸發(fā)完全形成均勻薄膜，A1加入助劑乙醚使其溶解后加入pH=7.4的磷酸鹽緩沖液40ml，A2加入pH=7.4的磷酸鹽緩沖液40ml，分別在45。C下水化20min然后將Al和A2超聲破碎20min，功率為250w，水浴溫度為30°C。最后進行減壓旋蒸得產(chǎn)品。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>權利要求一種α-硫辛酸脂質體的制備方法，其特征在于所述方法如下將大豆磷脂和膽固醇溶解于有機溶劑后，加入到α-硫辛酸溶液形成脂質體溶液，所用大豆磷脂、膽固醇和α-硫辛酸的質量比為3.1~3.5∶1∶0.03~0.06，經(jīng)水浴、減壓、旋蒸形成薄膜，加入助劑乙醚，經(jīng)過水化、破碎后形成均勻脂質體。2.根據(jù)權利要求l所述的a-硫辛酸脂質體的制備方法，其特征在于大豆磷脂、膽固醇和a-硫辛酸的質量比為5:1.5:0.08。3.根據(jù)權利要求2所述的a-硫辛酸脂質體的制備方法，其特征在于所述溶解大豆磷脂和膽固醇的有機溶劑是三氯甲烷。4.根據(jù)權利要求2所述的a-硫辛酸脂質體的制備方法，其特征在于所述a-硫辛酸溶液是將a-硫辛酸溶解在無水乙醇中得到。5.根據(jù)權利要求2所述的a-硫辛酸脂質體的制備方法，其特征在于所述水浴溫度為3555°C。6.根據(jù)權利要求2所述的a-硫辛酸脂質體的制備方法，其特征在于所述旋蒸的旋轉速度為1030rpm。7.根據(jù)權利要求2所述的a-硫辛酸脂質體的制備方法，其特征在于所述減壓的真空度為0.050.09MPa。8.根據(jù)權利要求2所述的a-硫辛酸脂質體的制備方法，其特征在于所述薄膜是厚度均勻的脂質薄膜。9.根據(jù)權利要求2所述的a-硫辛酸脂質體的制備方法，其特征在于所述水化，是采用pH為7.4的磷酸鹽緩沖液進行水化，水化溫度為3555t:，水化時間為20min。10.根據(jù)權利要求2所述的a-硫辛酸脂質體的制備方法，其特征在于所述破碎是超聲破碎，破碎溫度為3555t:，超聲功率為100400W。全文摘要本發(fā)明公開了一種α-硫辛酸脂質體的制備方法。該方法是將大豆磷脂和膽固醇溶解于有機溶劑后，加入到α-硫辛酸溶液形成脂質體溶液，所用大豆磷脂、膽固醇和α-硫辛酸的質量比為3.1~3.5∶1∶0.03~0.06，經(jīng)水浴、減壓、旋蒸形成薄膜，加入助劑乙醚，經(jīng)過水化、破碎后形成均勻脂質體。利用本發(fā)明制備方法得到的辛酸脂質體均勻、穩(wěn)定、包封率高，有利于工業(yè)生產(chǎn)。文檔編號A61K8/49GK101721369SQ20091021396公開日2010年6月9日申請日期2009年12月18日優(yōu)先權日2009年12月18日發(fā)明者何秋星,王學文申請人:廣東藥學院