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      六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物及其醫(yī)藥用途的制作方法

      文檔序號(hào):1154841閱讀:482來(lái)源:國(guó)知局
      專利名稱:六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物及其醫(yī)藥用途的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及一種中藥有效部位提取物,尤其涉及一種發(fā)酵中藥六神曲的提取物及 其制備方法,本發(fā)明還涉及該活性提取物在制備抗菌、抗病毒藥物中的用途,屬于中藥有效 部位提取物領(lǐng)域。
      背景技術(shù)
      六神曲是由面粉(和/或麥麩)、杏仁、赤小豆,及鮮青蒿、鮮辣蓼、鮮蒼耳草汁(或 干品煎汁),按一定比例經(jīng)過(guò)共同發(fā)酵制成的中藥材,為傳統(tǒng)發(fā)酵曲劑中應(yīng)用最為廣泛的一 種。六神曲味甘、辛,性溫,歸脾、胃經(jīng),具有健脾開(kāi)胃,發(fā)表散寒,兼有發(fā)散功用,用于感冒、 食滯、食積不化、腸鳴、食積泄瀉,尤以治療時(shí)暑暴瀉、飲食所傷見(jiàn)長(zhǎng)。傳統(tǒng)應(yīng)用中,六神曲需 要經(jīng)過(guò)高溫炒制炮制后方可應(yīng)用。多年以來(lái),關(guān)于六神曲藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究一直不明確,認(rèn) 為藥效物質(zhì)基礎(chǔ)是活性酶、益生菌的觀點(diǎn)一直占主導(dǎo)地位,并且據(jù)此主張生用為好,這與傳 統(tǒng)用藥習(xí)慣和臨床效應(yīng)是不符合的。六神曲具有悠久、廣泛的臨床應(yīng)用歷史和確切的療效,相對(duì)于其它臨床治療消化 道菌群紊亂及病毒感染性疾病使用的化學(xué)合成藥、抗生素類等更加安全、可靠。迄今為止,尚沒(méi)有六神曲抗菌或抗病毒有效部位提取物的報(bào)道,本發(fā)明提供一種 六神曲抗菌或抗病毒有效部位提取物,可以為臨床治療胃腸感冒、消化道菌群紊亂及病毒 感染性疾病提供新方法,對(duì)于提升中藥的科技含量,實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化也具有重要意義的。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明目的之一是提供一種六神曲抗菌、抗病毒活性提取物;本發(fā)明目的之二是提供一種上述六神曲抗菌、抗病毒活性提取物的制備方法;本發(fā)明目的之三是將提供所述六神曲抗菌、抗病毒活性提取物的醫(yī)藥用途,即用 于治療胃腸感冒、食積不化,脘腹脹滿、腹瀉、腸炎、痢疾等消化道菌群失調(diào)及感冒等病毒感 染性疾病;本發(fā)明目的之四是提供一種六神曲抗菌、抗病毒活性提取物的液質(zhì)聯(lián)用指紋圖 譜、化學(xué)組成特征;本發(fā)明目的之五是提供一種六神曲抗菌、抗病毒活性提取物可以直接制成藥物或 作為原料藥與其他藥物配伍制成片劑、顆粒劑、滴丸劑、口服液、軟膠囊劑、膠囊劑或其他劑 型的醫(yī)藥用途。本發(fā)明的上述目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的一種六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物,包括以下步驟制備得到將六神曲粗粉用低分子醇回流提取,得醇提取物;將醇提取物用乙酸乙酯或正丁 醇萃取,或者是依次用乙酸乙酯或正丁醇萃??;將萃取液減壓回收溶劑,即得。優(yōu)選的,一種六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物,包括以下步驟制備得到(1)六神曲粗粉用低分子醇回流提取;提取液濾過(guò),濾液減壓回收溶劑至稠膏;
      (2)稠膏用水稀釋,分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取至萃取液澄清;(3)將乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液減壓回收溶劑,即得。本發(fā)明中所述的低分子醇可以是甲醇、乙醇等低分子醇,優(yōu)選為乙醇,更優(yōu)選為濃 度為95%的乙醇;為了達(dá)到更好的提取效果,優(yōu)選的,步驟⑴中將六神曲粗粉用4-8倍六神曲體積 的95%乙醇回流提取3-4次,每次2-4小時(shí),過(guò)濾,合并濾液;步驟( 中優(yōu)選采用10-20倍 稠膏體積的水稀釋稠膏,再分別依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取,每次萃取液用 量為1-3倍體積比的稀釋稠膏量,萃取次數(shù)需至萃取液澄清。經(jīng)檢測(cè),其中,乙酸乙酯提取 組分的出膏率為0.6 0.8% (優(yōu)選為0.8%),正丁醇提取組分出膏率為0.8-1.0% (優(yōu) 選為1.0% )。本發(fā)明所述六神曲可以是生六神曲、焦六神曲、麩炒六神曲,原藥材包括但不限于 自然發(fā)酵的六神曲或以純種發(fā)酵方式制備的六神曲,以及在發(fā)酵原料上增減作為發(fā)酵培養(yǎng) 基的組成原料生產(chǎn)的中藥發(fā)酵曲劑。本發(fā)明六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物,其特征在于不限于上述的提取或分 離方法,其它各種新型分離填料、技術(shù)、制備方法的應(yīng)用,以制備六神曲微生物發(fā)酵產(chǎn)物為 目的的,均落入本發(fā)明。六神曲、麩炒六神曲和焦六神曲也可參照以下方法制備得到(1)六神曲的制備方法面粉100kg (或面粉40kg,麥麩60kg)、杏仁粉4kg、赤小豆 粉4kg、青蒿、蒼耳草、辣蓼鮮品各也可用干品,用量為1/3)。①鮮青蒿、鮮蒼耳草、鮮 辣蓼榨出鮮汁,殘?jiān)铀R?guī)法煎汁,合并藥液,若用干品則直接煮汁;②將面粉或麥麩與 杏仁、赤小豆混勻;③將藥汁與藥粉混和,揉搓成握則成團(tuán),擲之即散的“軟材”;④用模具壓 制成一定規(guī)格的待發(fā)酵曲塊;⑤將曲塊置于30 37°C,相對(duì)濕度70 80%,堆置發(fā)酵約7 天;⑥發(fā)酵后,切成小塊,干燥。在步驟③中可混入純種菌種,其余步驟相同,即為進(jìn)行純種 發(fā)酵。(2)麩炒六神曲麩炒(每IOOkg神曲,用麥麩IOkg)至六神曲表面呈棕黃色;或 用清炒法,炒至六神曲呈棕黃色。(3)焦六神曲將六神曲炒至表面呈焦褐色,內(nèi)部微黃色,有焦香氣。本發(fā)明六神曲有效部位提取物可以有效抑制、殺滅各種常見(jiàn)的細(xì)菌、病毒,尤其是 腸道致病菌、流感病毒。如痢疾桿菌、福氏痢疾桿菌、金黃色葡萄球菌、白葡萄球菌、檸檬 葡萄球菌、傷寒桿菌、乙型溶血性鏈球菌、乙型副傷寒桿菌等,其中乙酸乙酯提取組分的最 低抑菌濃度為0. 6%ig/ml,最低殺菌濃度為0. 65mg/ml ;正丁醇提取組分最低抑菌濃度為 1.70mg/ml,最低殺菌濃度為1.70mg/ml。本發(fā)明六神曲有效部位提取物具有較強(qiáng)的抗流感 病毒A、流感病毒B作用,臨床用藥安全。本發(fā)明還提供了一種六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物的液質(zhì)聯(lián)用指紋圖譜, 可以闡明其化合物組成、分子量、保留時(shí)間、質(zhì)荷比、離子強(qiáng)度等1.六神曲液質(zhì)聯(lián)用正離子流指紋圖譜六神曲乙酸乙酯萃取部位以甲醇水=7 3溶解,13000rpm離心5min,取上清 液經(jīng)0. 22微米濾膜過(guò)濾,進(jìn)樣量為3 μ 1 ;Waters ACQUITY UPLC液相系統(tǒng)超高效液相色譜柱HSS T3, 2. 1 X 100mm, 1. 7 μ m,400C ;流速0. 4ml/min ;流動(dòng)相水、乙腈,梯度洗脫;Waters Xevo QTof質(zhì)譜系統(tǒng)電噴霧正離子離子化模式;毛細(xì)管電壓3000V ;錐 孔電壓40V ;除溶劑溫度450°C ;除溶劑氣體800L/Hr ;離子源溫度120°C ;采集范圍m/ ζ 50-1000 ;碰撞氣體氬氣。所得正離子全成分掃描液質(zhì)聯(lián)用指紋圖譜見(jiàn)

      圖1,對(duì)圖1中數(shù) 據(jù)進(jìn)一步分析,可以得出,六神曲有效部位的化學(xué)組成包括由具備以下色譜、質(zhì)譜特征的化 合物共同組成,見(jiàn)表1。表1六神曲乙酸乙酯提取部位化學(xué)組成列表(ES+離子)
      權(quán)利要求
      1.一種中藥六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物,其特征在于主要由六神曲的以下 生產(chǎn)原料面粉和/或麥麩、杏仁、赤小豆,及鮮青蒿、鮮辣蓼、鮮蒼耳草汁或干品煎汁,經(jīng)過(guò) 共同發(fā)酵后的發(fā)酵產(chǎn)物組成。
      2.—種六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物,包括以下步驟制備得到(1)將六神曲粗 粉用高濃度的低分子醇回流提取,得醇提取物;( 將醇提取物用乙酸乙酯或正丁醇萃取, 或者是依次用乙酸乙酯或正丁醇萃??;將萃取液減壓回收溶劑,得到乙酸乙酯提取物及正 丁醇提取物。
      3.一種六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物,包括以下步驟制備得到(1)六神曲粗粉用高濃度的低分子醇回流提??;提取液濾過(guò),濾液減壓回收溶劑至稠膏;(2)稠膏用水稀釋,分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取至萃取液澄清;(3)將乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液減壓回收溶劑,得到乙酸乙酯提取物及正丁醇提 取物。
      4.按照權(quán)利要求3所述的六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物,其特征在于所述的低 分子醇包括甲醇或乙醇;優(yōu)選是濃度為95%的乙醇;步驟(1)中將六神曲粗粉用4-8倍六 神曲體積的95%乙醇回流提取3-4次,每次2-4小時(shí);步驟( 中采用10-20倍稠膏體積的 水稀釋稠膏,再分別依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃??;每次萃取液用量為1-3倍 體積比的稀釋稠膏量。
      5.按照權(quán)利要求1或2所述的六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物,其特征在于所述 六神曲是生六神曲、焦六神曲或麩炒六神曲;所述六神曲藥材為自然發(fā)酵的六神曲或以純 種發(fā)酵方式制備的六神曲,以及在發(fā)酵原料上增減作為發(fā)酵培養(yǎng)基的組成原料生產(chǎn)的發(fā)酵 曲劑。
      6.按照權(quán)利要求1或2所述的六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物,其特征在于其液 質(zhì)聯(lián)用指紋圖譜正離子流圖見(jiàn)圖1,ES+離子圖中見(jiàn)如下化合物組成
      7.按照權(quán)利要求1或2所述的六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物,其特征在于其液 質(zhì)聯(lián)用指紋圖譜負(fù)離子流圖見(jiàn)圖2,Es—離子圖中見(jiàn)如下化合物組成保留時(shí)間質(zhì)荷比離子強(qiáng)度分子式10.575187.05591.57xe3C3H11N2O720.767515.12436.11xe2C24H23N2O1131.351627.40233.29xe3C29H59N2O1241.491740.48663.16xe3C33H58N17O351.591853.56886.18 xe3C40H85O1861.679966.63212.27xe3C40H88N9O1772.250253.06615.34xe2C14H9N2O382.618545.30015.10xe2C33H4iN2O592.706329.24262.15xe3Ci7H33N2O4102.835401.26468.91xe2C20H37N2O6112.942311.18112.02xe3C17H27O5123.042325.19342.00xe3C18H29O5133.162339.21121.39xe3CwH31O5144.522253.22902.13 xe3C15H29N2O154.582279.24977.57xe3CnH31N2O164.902255.24561.20xe3C15H31N2O174.950281.26021.32xe3CnH33N2O
      8.一種抗菌或抗病毒藥物組合物,其特征在于由有效量的權(quán)利要求1或2所述的六 神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物與藥學(xué)上可接受的載體或輔料組成;還能作為原料藥與 其它藥物及輔料共同組成。
      9.權(quán)利要求1或2所述的六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物作為抗菌劑、抗病毒劑, 用于細(xì)菌感染、病毒感染的醫(yī)藥用途。
      10.如權(quán)利要求1所述的中藥六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物,其特征在于不限 于權(quán)利要求2、3或4的化學(xué)分離技術(shù),其它各種新型分離填料、技術(shù)、制備方法的應(yīng)用,以制 備六神曲微生物發(fā)酵產(chǎn)物為目的的,均落入本發(fā)明。
      全文摘要
      本發(fā)明公開(kāi)了六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物及其用作抗菌劑、抗病毒劑的醫(yī)藥用途,包括以下步驟制備得到(1)將六神曲粗粉用低分子醇回流提取,得醇提取物;(2)將醇提取物用乙酸乙酯、正丁醇萃??;將萃取液減壓回收溶劑,即得。本發(fā)明六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物主要由六神曲發(fā)酵后的發(fā)酵產(chǎn)物組成;該有效部位提取物具有較強(qiáng)的抗菌、抗病毒活性,尤其對(duì)于常見(jiàn)的腸道致病菌和流感病毒作用效果突出,用藥安全,無(wú)毒副反應(yīng)。
      文檔編號(hào)A61K36/899GK102068464SQ200910237879
      公開(kāi)日2011年5月25日 申請(qǐng)日期2009年11月20日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月20日
      發(fā)明者付新, 匡海學(xué), 夏永剛, 姜海, 楊炳友, 王秋紅, 王長(zhǎng)福 申請(qǐng)人:匡海學(xué)
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