專利名稱：一種治療痛風(fēng)、腎病的植物提取物的制備方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，涉及從大葉皇冠(Echinodorus macrophyllus，英 文名Large-Leaved Amazon Sword)的提取物制備方法及該提取物在醫(yī)藥領(lǐng)域中的用途，尤 其是在制備預(yù)防與治療與痛風(fēng)、腎有關(guān)的疾病的藥物方面的應(yīng)用及制劑的制備。
背景技術(shù)：
大葉皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large-Leaved Amazon Sword)為 一種澤瀉科澤苔草屬植物，其產(chǎn)地為中國長江中下游及以南地區(qū)?，F(xiàn)代研究表明，痛風(fēng)是一組嘌呤代謝紊亂所致的一種疾病，是細(xì)小針尖狀的尿酸 鹽的慢性沉積，其臨床表現(xiàn)為高尿酸鹽結(jié)晶而引起的痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎和關(guān)節(jié)畸形，它會(huì)讓你 周身局部出現(xiàn)紅、腫、熱、痛的癥狀，俗語說痛風(fēng)痛起來真要命。只有飽受痛風(fēng)煎熬的人才 會(huì)有如此深的感覺，如不及時(shí)治療，會(huì)引起痛風(fēng)性腎炎，尿酸腎結(jié)石，以及性功能減退，高血 壓等多種并發(fā)癥。痛風(fēng)病因是長期嘌呤代謝障礙，血尿酸增高引起。如果血中尿酸濃度長 期高于這個(gè)飽和點(diǎn)，醫(yī)學(xué)上稱為“高尿酸血癥”。而目前為止，痛風(fēng)目前未見臨床治療特效 藥，秋水仙堿、別嘌呤醇、丙黃舒是最常用的，效果并不穩(wěn)定，而腎病也是具有高尿酸血癥的 疾病，文獻(xiàn)有報(bào)道中藥對(duì)痛風(fēng)有較好的作用，但多數(shù)只具有改善癥狀的作用。因此需找治療痛風(fēng)有效藥物是世界各國醫(yī)藥研究者共同研究課題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明致力于從天然產(chǎn)物中需找更安全更有效的治療痛風(fēng)、腎病藥物及營養(yǎng) 補(bǔ)充劑，在大葉皇冠活性物質(zhì)研究中，從澤瀉科澤苔草屬植物大葉皇冠(Echinodorus macrophyllus,英文名Large-Leaved Amazon Sword)得到水提取物、醇提物及黃酮類化合 物跟皂苷類化合物，同時(shí)藥效學(xué)試驗(yàn)證明其具有明顯降低血尿酸的作用，從而完成了本發(fā) 明。本發(fā)明的目的是要提供一種新的用于痛風(fēng)、腎病治療的溶劑提取物、黃酮類、皂苷 類化合物，為研發(fā)預(yù)防與治療痛風(fēng)、腎病的新藥提供先導(dǎo)物，尤其是用于預(yù)防與治療與痛風(fēng) 有關(guān)的高尿酸血癥、急性痛風(fēng)關(guān)節(jié)炎反復(fù)發(fā)作、痛風(fēng)石沉積、痛風(fēng)石性慢性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)性 腎結(jié)石、腎損害有關(guān)疾病或與嘌呤代謝障礙有關(guān)疾病，包括腎病等疾病。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案完成的，具體內(nèi)容包括黃酮類化合物的提取分離，皂 苷類化合物的提取分離、水提取物、溶劑提取物提取方法、藥效研究及用途。所述的黃酮類 化合物的提取物、皂苷類化合物、水提取物、溶劑提取物提取是以澤瀉科澤苔草屬植物大葉 皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large-Leaved Amazon Sword)為原料，經(jīng)水、有 機(jī)溶劑或水和有機(jī)溶劑混合溶劑加熱或常溫浸泡提取，得到相應(yīng)提取物，以及對(duì)上述提取 物采用不同粒度的分離柱分離、純化所得黃酮類、皂苷類化合物，分離柱層析所用載體為各 種粒度規(guī)格的硅膠、氧化鋁、聚酰胺、ODS中的一種或幾種；有機(jī)溶劑包括單一有機(jī)溶劑與 有機(jī)溶劑混合溶劑及水，提取溫度為ioo°c。
具體而言，本發(fā)明的目的是通過以下方案來實(shí)現(xiàn)的1)水溶物提取本發(fā)明采用澤瀉科澤苔草屬植物大葉皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名Large-Leaved Amazon Sword)，干燥后用水加熱提取，得到本發(fā)明水 提取物。2)乙醇可溶物提取本發(fā)明采用本發(fā)明采用澤瀉科澤苔草屬植物大葉皇冠 (Echinodorusmacrophyllus，英文名 Large-Leaved Amazon Sword)，干燥后用 95% 乙酉享力口 熱回流提取得到。3)黃酮類成分、皂苷類成分提取本發(fā)明采用本發(fā)明采用澤瀉科澤苔草屬植物大 葉皇冠(Echinodorus macrophyllus,英文名 Large-Leaved Amazon Sword),/K提物經(jīng)水飽 和正丁醇萃取后得到本發(fā)明正丁醇提取物；乙醇提取液減壓回收為乙醇浸膏，再將此提取 物用0DS、聚酰胺、硅膠柱層析分離純化得到本發(fā)明黃酮類化合物跟皂苷類化合物。所述提取分離得到各部分化合物用于制備調(diào)節(jié)和治療痛風(fēng)疾病、腎病藥物。所述分離提純得到水提取物、正丁醇提取物、黃酮類及皂苷類化合物可單獨(dú)或與 其他有效成分或有效部位或有效提取物的組合使用，用于制備治療痛風(fēng)相關(guān)疾病及腎病藥 物。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，但本發(fā)明的內(nèi)容并不僅僅局限 于所列舉的實(shí)施例，試驗(yàn)用大葉皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名Large-Leaved AmazonSword)，于2009年采集于中國本土。實(shí)施例1取大卩十皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large—Leaved Amazon Sword), 用水加熱提取三次，水量量分別為大葉皇冠重量的8-12倍，提取時(shí)間分別為60-120分鐘， 提取液濃縮回收為密度1. 1——1. 6的浸膏。實(shí)施例2取大卩十皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large—Leaved Amazon Sword), 用水加熱提取三次，水量量分別為大葉皇冠重量的8-12倍，提取時(shí)間分別為60-120分鐘， 提取液濃縮回收為密度1. 1——1.6的浸膏，用水飽和正丁醇萃取的正丁醇部位，減壓回收 正丁醇至干，得到正丁醇可溶部分。實(shí)施例3取澤瀉科大葉皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large -Leaved Amazon Sword)，用乙醇加熱回流提取三次，乙醇量分別為大葉皇冠重量的8-12倍，提取時(shí)間分別 為60-120分鐘，提取液減壓濃縮回收溶劑至于，得到乙醇可溶部分浸膏。實(shí)施例4取澤 寫禾斗大口十皇冠 Echinodorus macrophyllus，英文名 Large -Leaved Amazon Sword)，用乙醇加熱回流提取三次，乙醇量分別為大葉皇冠重量的12、10、8倍，提取時(shí)間分 別為120分鐘、60分鐘、60分鐘，提取液減壓濃縮回收溶劑至干，浸膏用硅膠拌樣，上硅膠 柱，用乙酸乙酯、石油醚、正己烷、丙酮多次柱層析分離后得到黃酮類化合物。實(shí)施例5
取澤瀉科大葉皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large -Leaved Amazon Sword)，用水加熱提取三次，水量量分別為大葉皇冠重量的8-12倍，提取時(shí)間分別為 60-120分鐘，提取液濃縮回收為密度1. 1——1.6的浸膏，用水飽和正丁醇萃取的正丁醇部 位，減壓回收正丁醇至干，得到正丁醇可溶浸膏。浸膏硅膠拌樣，用丙酮、乙酸乙酯進(jìn)行硅膠 柱層析，洗脫液濃縮至干，所得浸膏再用聚酰胺柱層析，洗脫溶劑用丙酮、乙酸乙酯、洗脫， 得黃酮類化合物。實(shí)施例6取澤 寫禾斗大口十皇冠 Echinodorus macrophyllus，英文名 Large -Leaved Amazon Sword) 3公斤，用乙酸乙酯加熱回流提取，乙酸乙酯量分別為大葉皇冠重量的12、10、8倍， 提取時(shí)間分別為60分鐘、50分鐘、30分鐘，提取液減壓濃縮至干，浸膏硅膠拌樣，用乙酸乙 酯、進(jìn)行硅膠柱層析，洗脫液濃縮至干，浸膏再用聚酰胺柱層析，洗脫溶劑用乙酸乙酯、正己 烷、石油醚洗脫，黃酮類與皂苷類化合物。實(shí)施例7降尿酸作用根據(jù)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，痛風(fēng)及腎病都可使血尿酸增高，因此降低血尿酸可有效 的治療痛風(fēng)及腎病。我們?cè)囼?yàn)采用次黃嘌呤誘發(fā)小鼠高尿酸血癥模型，觀察大葉皇冠水提物、95 %乙 醇提取物、黃酮類、皂苷類化合物對(duì)小鼠高尿酸血癥的影響。結(jié)果顯示，大葉皇冠水提物、 95 %乙醇提取物、黃酮類、皂苷類化合大、中、小劑量每日給藥一次，連續(xù)給藥15次，各劑量 組均能明顯降低高尿酸血癥小鼠血清中的尿酸含量。結(jié)果表明，大葉皇冠水提物、95%乙醇 提取物、黃酮類、皂苷類化合物對(duì)次黃嘌呤誘導(dǎo)的小鼠高尿酸血癥具有明顯的降低作用，說 明大葉皇冠對(duì)小鼠的高尿酸血癥有明顯的治療作用。實(shí)施例8痛風(fēng)性急性關(guān)節(jié)炎實(shí)驗(yàn)采用尿酸鹽誘導(dǎo)的大鼠足趾腫脹模型，觀察了大葉皇冠水提物、95%乙醇提 取物、黃酮類、皂苷類化合物對(duì)大鼠足趾腫脹的抗炎作用。結(jié)果顯示，模型組動(dòng)物足趾注射 尿酸鹽后，1小時(shí)后即開始出現(xiàn)明顯的腫脹，2-4小時(shí)最明顯，6小時(shí)腫脹程度逐漸減輕。大 鼠灌胃分別給予大葉皇冠水提物、95%乙醇提取物、黃酮類、皂苷類化合物大、中、小劑量， 各劑量組具有顯著減輕尿酸鹽誘導(dǎo)的足趾腫脹的作用，各劑量組動(dòng)物在給予致炎劑后的 2-4小時(shí)的兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的足趾腫脹程度均比模型組顯著降低，抗炎作用可持續(xù)至致炎后6 小時(shí)，結(jié)果表明，大葉皇冠水提物、95%乙醇提取物、黃酮類、皂苷類化合物可明顯減輕尿酸 鹽所致的足趾腫脹程度，說明對(duì)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)腫脹具有抗炎作用。實(shí)施例9水負(fù)荷大鼠利尿作用本實(shí)驗(yàn)采用水負(fù)荷模型大鼠，觀察了大葉皇冠水提物、95%乙醇提取物、黃酮類、 皂苷類化合物大、中、小劑量對(duì)大鼠利尿作用的影響。結(jié)果顯示，模型組動(dòng)物水負(fù)荷后，1-2 小時(shí)排尿量明顯增加，大葉皇冠水提物、95%乙醇提取物、黃酮類、皂苷類化合物各劑量組 均能明顯增強(qiáng)水負(fù)荷后大鼠的尿排出量，在藥后1- 作用明顯。大葉皇冠水提物、95% 乙醇提取物、黃酮類、皂苷類化合物各劑量組在藥后2小時(shí)內(nèi)排尿量分別為水負(fù)荷量的25. 34,21. 45、14. 8%，6小時(shí)內(nèi)的尿排出總量占攝水量的131. 26、135. 7和106. 8%，夏拜爾 茶能使水負(fù)荷大鼠的尿排出總量在6小時(shí)之內(nèi)超出水負(fù)荷量的100%。說明大葉皇冠水提 物、95%乙醇提取物、黃酮類、皂苷類化合物的利尿作用明確。實(shí)施例10極性毒性試驗(yàn)大葉皇冠水提物、95%乙醇提取物、黃酮類、皂苷類化合物分別給小鼠灌胃給藥， 一日內(nèi)給藥2次，劑量達(dá)IOOg生藥· kg-Ι動(dòng)物未出現(xiàn)明顯的中毒癥狀，未出現(xiàn)呼吸抑制、 驚厥、抽搐等反應(yīng)。藥后觀察14日，所有動(dòng)物均存活，動(dòng)物的一般情況、行為、活動(dòng)、皮毛等 均未見異常，動(dòng)物給藥后當(dāng)天糞便稍軟但均成形，未見稀便，次日后所有動(dòng)物糞便均恢復(fù)正 常。給藥組雌性和雄性動(dòng)物體重增長均與對(duì)照組相近，大體解剖未見臟器異常病變。因此 大葉皇冠水提物、95%乙醇提取物、黃酮類、皂苷類化合物均對(duì)對(duì)小鼠灌胃給藥的最大耐受 量為IOOg生藥/kg，相當(dāng)于人日飲用劑量的300倍。在此劑量下未見明顯毒性反應(yīng)。實(shí)施例11片劑的制備取大葉皇冠水提物、95%乙醇提取物，加藥用輔料淀粉、硬脂酸鎂等適量，充分混 勻后，壓片，制成每片含上述化合物或者衍生物IOOmg的片劑供口服使用。取大葉皇冠黃酮類、皂苷類化合物，加藥用輔料淀粉、硬脂酸鎂等適量，充分混勻 后，壓片，制成每片含上述化合物或者衍生物IOOmg的片劑供口服使用。實(shí)施例12膠囊劑的制備取大葉皇冠水提物、95 %乙醇提取物，加藥用輔料淀粉適量，充分混勻后裝入膠 囊，制成每粒含上述新化合物或者衍生物50mg的膠囊劑供口服使用。取大葉皇冠黃酮類、皂苷類化合物，加藥用輔料淀粉適量，充分混勻后裝入膠囊， 制成每粒含上述新化合物或者衍生物50mg的膠囊劑供口服使用。實(shí)施例13顆粒劑的制備取大葉皇冠水提物、95%乙醇提取物、黃酮類、皂苷類化合物加藥用輔料淀粉適 量，制成顆粒劑。實(shí)施例14注射劑的制備取大時(shí)皇冠水提物、95%乙醇提取物、黃酮類、皂苷類化合物，加注射用純凈水及 聚山梨酯80適量，制成每250ml含IOOml上述新化合物或者衍生物的注射液供經(jīng)脈點(diǎn)滴使用。實(shí)施例15注射用粉針劑的制備取大葉皇冠水提物、95%乙醇提取物、黃酮類、皂苷類化合物，加注射用水溶性藥 用輔料適量，制成注射用粉針劑。
權(quán)利要求
1.一種治療痛風(fēng)、腎病的植物提取物的制備方法及用途，其特征在于從澤瀉科澤苔草 屬植物大葉皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large-Leaved Amazon Sword)得到 水提取物、醇提物及黃酮類化合物跟皂苷類化合物，及上述提取物及制劑在醫(yī)藥領(lǐng)域中的 用途，尤其是在制備預(yù)防與治療與痛風(fēng)、腎有關(guān)的疾病的藥物方面的應(yīng)用及制劑的制備。
2.權(quán)利要求1所述提取物的制備方法，其特征在于以澤瀉科澤苔草屬植物大葉皇冠 (Echinodorus macrophyllus，英文名 Large—Leaved Amazon Sword)為原 14，經(jīng)水、有 劑或水和有機(jī)溶劑混合溶劑加熱或常溫浸泡提取，用不同載體柱層析分離。
3.權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于用有機(jī)溶劑或水或有機(jī)溶劑和水的混合溶 劑提取，所得提取物分離柱層析所用載體為各種粒度規(guī)格的硅膠、氧化鋁、聚酰胺、ODS中的 一種或幾種；有機(jī)溶劑包括單一有機(jī)溶劑與有機(jī)溶劑混合溶劑。
4.權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在提取溫度為90-120°C。
5.權(quán)力要求2所述的制備方法，其特征在于水、有機(jī)溶劑或水跟有機(jī)溶劑混合溶劑 類為澤瀉科澤苔草屬植物大葉皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名Large-Leaved Amazon Sword)重量的 4-12 倍。
6.權(quán)利要求1所述的提取物，其特征在于大葉皇冠(Echinodorusmacrophyllus，英文 名Large-Leaved Amazon Sword)為原料，用乙醇加熱回流提取三次，提取液減壓濃縮回收 溶劑至干，浸膏用硅膠拌樣，上硅膠柱，用單一有機(jī)溶劑或不同極性有機(jī)溶劑混合溶劑多次 柱層析分離后得到。
7.權(quán)利要求5所述的提取物，其特征在于乙醇量為大葉皇冠(Echinodorus macrophyllus,Large-Leaved Amazon Sword) ；Sfi白勺 4—12 {音。
8.權(quán)利要求5所述的提取物，其特征在于提取時(shí)間為60-120分鐘。
9.權(quán)利要求5所述的提取物，其所用分離載體為各種粒度規(guī)格的硅膠、氧化鋁、聚酰 胺、ODS中的一種或幾種；洗脫溶劑為有機(jī)溶劑包括單一有機(jī)溶劑與有機(jī)溶劑混合溶劑。
10.權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于以大葉皇冠(Echinodorusmacrophyllus, 英文名Large-Leaved Amazon Sword)為原料，用水加熱回流提取，提取液減壓濃縮至密度 為0. 9-1. 3的浸膏，浸膏用水飽和正丁醇萃取后用不同載體分離純化
11.權(quán)利要求9所述的提取物，其特征在于水量為大葉皇冠(Echinodorus macrophyllus,Large-Leaved Amazon Sword) ；Sfi白勺 4—12 {音。
12.權(quán)利要求9所述的化合物，其特征在于提取時(shí)間為30-60分鐘，提取溫度為 80-100°C，提取次數(shù)為2-3次，水飽和正丁醇萃取次數(shù)為3-10次。
13.權(quán)利要求9所述的提取物，其特征在于所用載體為硅膠、氧化鋁、聚酰胺、ODS中的 一種或幾種；洗脫溶劑為有機(jī)溶劑包括單一有機(jī)溶劑與有機(jī)溶劑混合溶劑。。
14.權(quán)利要求1所述提取物與醫(yī)學(xué)上可接受的藥用輔料組成的藥物組合物及其制劑。
15.權(quán)利要求13所述的制劑，包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液、注射用粉針劑或水針劑。
16.權(quán)利要求1所述提取物在制備預(yù)防與治療與痛風(fēng)、腎有關(guān)的有關(guān)疾病的藥物中的 用途。
17.權(quán)利要求15所述的用途，其特征在于所述疾病包括與具有高尿酸血癥相關(guān)的痛 風(fēng)病、腎病等疾病。
全文摘要
本發(fā)明涉及天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，公開了從澤瀉科澤苔草屬植物大葉皇冠(Echinodorusmacrophyllus，英文名Large-Leaved Amazon Sword)得到水提取物、醇提物及黃酮類化合物跟皂苷類化合物的痛風(fēng)及腎病的提取物，以及上述提取物制備方法及在醫(yī)藥領(lǐng)域中的用途，尤其在制備預(yù)防、治療與高尿血酸癥相關(guān)的痛風(fēng)、腎病的藥物方面的用途。
文檔編號(hào)A61P19/06GK102106938SQ20091026005
公開日2011年6月29日 申請(qǐng)日期2009年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月24日
發(fā)明者王亞非 申請(qǐng)人:王亞非