專利名稱：Hcv ns3-ns4a蛋白酶抑制的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抑制絲氨酸蛋白酶、特別是抑制丙型肝炎病毒NS3-NS4A蛋白酶活性的化合物。這些化合物通過干擾HCV生命周期發(fā)揮作用，并且是有用的抗病毒藥。本發(fā)明進(jìn)而涉及既可離體應(yīng)用也可給予HCV感染病人的組合物。本發(fā)明也涉及給病人施用本發(fā)明組合物治療HCV感染的方法。
背景技術(shù)：
丙型肝炎病毒(“HCV”)感染是一個(gè)備受關(guān)注的人類醫(yī)學(xué)問題。估計(jì)全球有3% 的人血清流行，故HCV被認(rèn)為是大多數(shù)非甲非乙型肝炎病例的致病因子[Alberti A等.丙型肝炎的自然史.J Hepatology. 1999，31 (Suppl. 1) :17 M]。單單在美國(guó)約有4百萬人可能被感染[Alter MJ等.美國(guó)病毒性肝炎的流行病學(xué).Gastroenterol Clin North Am， 1994,23 :437 455 ;Alter MJ.美國(guó)的 HCV 感染.J Hepatology, 1999, 31 (Suppl 1) :88 91]。首次暴露于HCV，僅約20%感染者發(fā)展成臨床急性肝炎，而其他人表現(xiàn)出感染自發(fā)消退?？墒窃趲缀?0%病例中HCV確立了能持續(xù)幾十年的慢性感染[Iwarson S.慢性肝炎的自然病程.FEMS Microbiology Reviews，1994，14 :201 204 ;Lavanchy D 等·丙型肝炎的全球監(jiān)督和管理.J Viral !fepatitiS，1999，6 :35 47]。這通常會(huì)造成復(fù)發(fā)和進(jìn)行性惡化的肝臟炎癥，常常會(huì)導(dǎo)致更嚴(yán)重的疾病狀態(tài)如肝硬化和肝細(xì)胞癌[Kew MC.丙型肝炎和肝細(xì)胞癌.FEMS Microbiology Reviews，1994，14 :211 220 ;Saito I 等.HCV 感染伴發(fā)肝細(xì)胞癌.Proc Natl Acad Sci USA，1990，87 :6547 6549]。遺憾的是，對(duì)慢性HCV使人衰弱的進(jìn)程尚無普遍有效的治療方法。HCV基因組編碼一種3010 3033個(gè)氨基酸的多聚蛋白[Choo QL等.HCV的多樣性與基因組成.Proc Natl Acad Sci USA，1991，88 :2451 2455 ;Kato N 等·日本非甲非乙型肝炎病人的人類HCV基因組的分子克隆.ProcNatl Acad Sci USA, 1990,87 :9524 9528 ；Takamizawa A等·從人攜帶者中分離得到HCV基因組的結(jié)構(gòu)和組織.J Virol, 1991, 65 :1105 1113]。推測(cè)這種HCV非結(jié)構(gòu)性(NS)蛋白為病毒復(fù)制提供了必需的催化機(jī)制。NS蛋白由多聚蛋白的蛋白裂解而來[Bartenschlager R等.HCV的非結(jié)構(gòu)性蛋白3 編碼切割NS3/4和NS4/5接頭所需的絲氨酸型蛋白酶.J Virol, 1993,67 :3835 3844 ； Grakoui A等.HCV編碼的絲氨酸蛋白酶的特征蛋白酶依賴性多聚蛋白切割位點(diǎn)的測(cè)定.J Virol. 1993，67 :沘32 沘43 ；Grakoui A等.HCV多聚蛋白裂解產(chǎn)物的表達(dá)和鑒定.J Virol, 1993,67 :1385 1395 ；Tomei L等.NS3是HCV多聚蛋白加工所需的絲氨酸蛋白酶.J Virol,1993,67 :4017 4026]。HCV NS3包含絲氨酸蛋白酶活性，它可幫助加工處理大多數(shù)病毒酶，因此被認(rèn)為對(duì)病毒復(fù)制和感染性是必需的。HCV NS3絲氨酸蛋白酶對(duì)病毒復(fù)制是必需的，因?yàn)榇呋?lián)體的取代導(dǎo)致在黑猩猩上感染性的喪失[Kolylchalov AA等.HCV編碼的酶活性和3’非翻譯區(qū)RNA保守元件是體內(nèi)病毒復(fù)制所必需的.J Virol, 2000, 74 :2046 2051]。已知NS3的頭181個(gè)氨基酸(病毒多聚蛋白的1027 1207殘基)含有NS3的絲氨酸蛋白酶區(qū)域，能加工處理HCV多聚蛋白所有4個(gè)下游位點(diǎn)[Lin C等.HCV NS3絲氨酸蛋白酶反式裂解要求和加工動(dòng)力學(xué)· J Virol, 1994，68，8147 8157]。HCV NS3絲氨酸蛋白酶及其相關(guān)輔助因子NS4A幫助加工病毒非結(jié)構(gòu)性蛋白區(qū)成為包括所有病毒酶在內(nèi)的各非結(jié)構(gòu)性蛋白。這種加工類似于人免疫缺陷病毒天冬氨酰蛋白酶所進(jìn)行的加工，此酶也涉及病毒蛋白的加工。抑制病毒蛋白加工的HIV蛋白酶抑制劑，對(duì)人是有效的抗病毒藥，提示阻斷病毒生命周期的這一階段可導(dǎo)致具有治療作用的活性藥物產(chǎn)生。因此它是發(fā)現(xiàn)藥物的有吸引力的靶標(biāo)?，F(xiàn)有技術(shù)描述了幾種潛在的HCV蛋白酶抑制劑[PCT公開號(hào)W002/18369， WO 02/08244, WO 00/09558, WO 00/09543, WO 99/64442， W099/07733, WO 99/07734， WO 99/50230, WO 98/46630, WO 98/17679 和 W097/43310，美國(guó)專利 5，990, 276，Llinas-Brunet M等.Bioorg Med Chem Lett, 1998,8 :1713 18 ；Han W等.Bioorg Med Chem Lett, 2000, 10 711 13 ；Dunsdon R 等.Bioorg Med Chem Lett,2000,10 :1571 79 ；Llinas-Brunet M等.Bioorg Med Chem Lett, 2000,10 :2267 70和 LaPlante S等.Bioorg Med ChemLett, 2000，10 :2271 74]。不清楚這些化合物是否具有成為可接受藥物的合適特征。而且發(fā)現(xiàn)那些抑制劑即使不是全部，也大多數(shù)是將基因型1 (la或lb)NS3-4A絲氨酸蛋白酶用作靶標(biāo)?？墒荋CV存在有各種基因型，而且每種基因型中又有各種亞型。例如目前已知有11種 (編號(hào)1 11)主要HCV基因型，盡管其他人將它們分成6種主要基因型。每種基因型又進(jìn)一步細(xì)分成各種亞型(la lc，2a 2c，3a 3b，4a 4e，5a，6a，7a 7b，8a 8b，9a， IOa和Ila)。亞型的流行性在全球范圍內(nèi)有如下變化
權(quán)利要求
1.抑制基因型-2丙型肝炎病毒(HCV)NS3-NS4A蛋白酶的方法，該方法包括將該蛋白酶與有效量的VX-950或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸以抑制該蛋白酶的活性。
2.抑制HCV基因型-3NS3-NS4A蛋白酶的方法，該方法包括將該蛋白酶與有效量的 VX-950或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸以抑制該蛋白酶的活性。
3.治療患者HCV基因型-2感染的方法，該方法包括給予患者VX-950或其藥學(xué)上可接受的鹽。
4.治療患者HCV基因型-3感染的方法，該方法包括給予患者VX-950或其藥學(xué)上可接受的鹽。
5.如權(quán)利要求3或4所述的方法，包括給予所述患者另一種物質(zhì)的附加步驟，所述物質(zhì)選自免疫調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞色素P45抑制劑、抗病毒劑、HCV蛋白酶的第二抑制劑、HCV生命周期另一靶點(diǎn)的抑制劑、或它們的組合；其中所述另一種物質(zhì)是作為VX-950的同一劑型的一部分或作為分開的劑型給予的。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述免疫調(diào)節(jié)劑為α-、β-或Y-干擾素或胸腺素；所述抗病毒劑為利巴韋林、金剛烷胺或替比夫定；或所述HCV生命周期另一靶點(diǎn)的抑制劑是HCV螺旋酶、聚合酶或金屬蛋白酶的抑制劑。
7.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述細(xì)胞色素ρ450抑制劑是利托那韋。
8.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述另一種物質(zhì)是VX-497。
9.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述另一種物質(zhì)是干擾素。
10.消除或減少生物樣品或醫(yī)藥或?qū)嶒?yàn)室設(shè)備基因型-2或基因型-3HCV污染的方法， 該方法包括將所述生物樣品或醫(yī)藥或?qū)嶒?yàn)室設(shè)備與VX-950接觸的步驟。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于，所述樣品或設(shè)備選自體液、生物組織、外科設(shè)備、外科服裝、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室服裝、血液或其他體液收集器具、血液或其他體液儲(chǔ)備材料。
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，所述體液為血液。
13.抑制HCV基因型-2NS3-NS4A蛋白酶的組合物，包括i)抑制HCV基因型-2NS3-NS4A蛋白酶有效量的VX-950或其藥學(xué)上可接受的鹽；和ii)可接受的載體、佐劑或賦形劑。
14.抑制HCV基因型-3NS3-NS4A蛋白酶的組合物，包括i)抑制HCV基因型-3NS3-NS4A蛋白酶有效量的VX-950或其藥學(xué)上可接受的鹽；和ii)可接受的載體、佐劑或賦形劑。
15.如權(quán)利要求13或14所述的組合物，其特征在于，所述組合物配制成用于對(duì)患者給藥的形式。
16.如權(quán)利要求15所述的組合物，其特征在于，所述載體、佐劑或賦形劑是藥學(xué)上可接受的載體、佐劑或賦形劑。
17.如權(quán)利要求16所述的組合物，其特征在于，所述組合物包括另一種物質(zhì)，所述物質(zhì)選自免疫調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞色素P450抑制劑、抗病毒劑、HCV蛋白酶的第二抑制劑、HCV生命周期另一靶點(diǎn)的抑制劑、細(xì)胞色素P450抑制劑、或它們的組合。
18.如權(quán)利要求17所述的組合物，其特征在于，所述免疫調(diào)節(jié)劑為α-、β-或Y-干擾素或胸腺素；所述抗病毒劑為利巴韋林、金剛烷胺或替比夫定；或所述HCV生命周期另一靶點(diǎn)的抑制劑是HCV螺旋酶、聚合酶或金屬蛋白酶的抑制劑。
19.如權(quán)利要求17所述的組合物，其特征在于，所述細(xì)胞色素p450抑制劑是利托那韋。
20.如權(quán)利要求17所述的組合物，其特征在于，所述另一種物質(zhì)是VX-497。
21.如權(quán)利要求17所述的組合物，其特征在于，所述另一種物質(zhì)是干擾素。
全文摘要
本發(fā)明涉及抑制非基因型1丙型肝炎病毒(HCV)NS3-NS4A蛋白酶的活性。更具體地涉及抑制HCV基因型-2或HCV基因型-3中該蛋白酶的活性。本發(fā)明的方法采用的抑制劑通過干擾HCV生命周期而起作用，并且也是有用的抗病毒劑。本發(fā)明還涉及包含這種化合物的組合物，這種化合物既可離體使用，也可給予罹患基因型-2或基因型-3HCV感染的患者。本發(fā)明還涉及通過給予包含本發(fā)明化合物的組合物對(duì)患者的HCV感染進(jìn)行治療。
文檔編號(hào)A61K45/00GK102160891SQ20091026256
公開日2011年8月24日 申請(qǐng)日期2005年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月1日
發(fā)明者C·林, W·P·泰勒 申請(qǐng)人:威特克斯醫(yī)藥股份有限公司