專(zhuān)利名稱(chēng)：：治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及藥品的質(zhì)量控制方法,尤其是-種治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，屬于中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：皮炎、濕疹、蕁麻疹是皮膚病中的多發(fā)病、常見(jiàn)病，病因復(fù)雜，以皮疹形態(tài)多、易于滲出、病程遷延和有復(fù)發(fā)傾向?yàn)樘卣鳎捎诓∽兎植加诨颊呱眢w表面，加之患者缺乏醫(yī)學(xué)知識(shí),護(hù)理不當(dāng)，導(dǎo)致病情時(shí)好時(shí)壞,反復(fù)發(fā)作。長(zhǎng)期的遷延不愈致使病情進(jìn)一步加重患處滲液、干燥、結(jié)痂、粗糙、肥厚以及裂口，并且伴著鉆心的癢,在漫長(zhǎng)的求醫(yī)過(guò)程中，仍然沒(méi)有看好病,對(duì)治療失去了信心,甚至產(chǎn)生誤解，造成恐懼感,給患者背上沉重的思想壓力，嚴(yán)重影響了患者的工作、學(xué)習(xí)、日常生活。傳統(tǒng)的中醫(yī)觀念認(rèn)為，造成濕疹、皮炎、蕁麻疹的直接禍?zhǔn)?就是"血毒",血熱、血瘀、血燥。然而長(zhǎng)期的臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，患者的"血毒"是很難清除干凈的，原因就在于患者的內(nèi)臟就像一個(gè)名符其實(shí)的造毒機(jī)器，源源不斷地向血液中輸送毒素。所謂"病在血毒,根在臟毒",五臟之毒不排，血液之毒就無(wú)法清除干凈,久而久之造成濕疹、皮炎、蕁麻疹反反復(fù)復(fù)，難以治療。所以說(shuō)治血必先治臟，清血毒必先排臟毒，這樣，皮膚表皮細(xì)胞的分化機(jī)制才能恢復(fù)正常，濕疹、皮炎、蕁麻疹才能根治。我國(guó)皮膚病的發(fā)病率很高，據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計(jì)，全國(guó)總患病率為1.23%，即約有1.6億人患有不同程度的皮膚病。經(jīng)過(guò)測(cè)算，國(guó)內(nèi)理論市場(chǎng)容量達(dá)320億元。其中抗真菌藥是最主要的皮膚病用藥，占整個(gè)市場(chǎng)的一半以上。目前治療皮膚病最常用的是外用藥，治標(biāo)不治本,易于復(fù)發(fā)。外用藥選擇或使用不當(dāng),往往無(wú)效,甚至使病情加劇、惡化,長(zhǎng)期使用具有一定的耐藥性，給患者帶來(lái)了萬(wàn)分痛苦。為了開(kāi)發(fā)出能有效治療濕疹、蕁麻疹、皮炎等瘙癢皮膚病的中藥，申請(qǐng)人進(jìn)行了大量的探索和研究。本發(fā)明的發(fā)明人在專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枮镃N2007102030459的專(zhuān)利申請(qǐng)中請(qǐng)求保護(hù)了一種治療皮膚病的藥物及其制備方法,其中膠囊制劑是這樣制備杠板歸400g、白鮮皮200g、金銀花2()()g和犁頭草2()()g，加水煎煮3次，每次加10倍量水煎煮3小時(shí),濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮至6(TC相對(duì)密度為1.25的浸膏，減壓干燥，粉碎，過(guò)80目篩；徐長(zhǎng)卿80g，粉碎，過(guò)80目篩；將浸膏粉和生藥粉混勻，加入淀粉適量，以75%乙醇制粒，千燥，裝入膠囊，每粒裝0.3g,制成1000粒；該藥物組合主要由杠板歸、白鮮皮、金銀花、犁頭草和徐長(zhǎng)卿等藥味組成。具有祛風(fēng)燥濕，清熱涼血，解毒止癢；用于血熱風(fēng)燥、濕熱瘀毒所致的濕疹、蕁麻疹、皮炎等瘙癢皮膚病。由于該藥物是-種新藥，目前還沒(méi)有有效的質(zhì)量控制方法。發(fā)明人對(duì)該藥物的膠囊制劑進(jìn)行了研究，以期探索如何有效控制膠囊制劑的質(zhì)量，以確保膠囊制劑的臨床療效。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法,包括性狀、鑒別、檢查和含量測(cè)定。所制定的質(zhì)量控制方法能全面有效地控制膠囊制劑4的質(zhì)量，從而確保了膠囊制劑的臨床療效。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的技術(shù)方案治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，這種膠囊這樣制備杠板歸400g、白鮮皮200g、金銀花200g和犁頭草200g,加水煎煮3次，每次加10倍量水煎煮3小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮至6(rC相對(duì)密度為1.25的浸膏，減壓干燥，粉碎，過(guò)80目篩,得浸膏粉；取徐長(zhǎng)卿80g,粉碎，過(guò)80目篩，得生藥粉；將浸膏粉和生藥粉混勻，加入淀粉適量，以75%乙醇制粒，千燥，裝入膠囊，每粒裝0.3g，制成1000粒；質(zhì)量控制方法由性狀、鑒別、檢查和含量測(cè)定組成,其中鑒別是對(duì)金銀花、徐長(zhǎng)卿、犁頭草和白鮮皮的鑒別，含量測(cè)定是用高效液相色譜法和紫外可見(jiàn)分光光度法分別對(duì)膠囊制劑中丹皮酚和總黃酮的含量測(cè)定。上述的治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，具體是這樣的性狀本品為硬膠囊，內(nèi)容物為棕褐色與白色的顆粒及粉末，氣特異，味苦、微澀；鑒別以金銀花對(duì)照藥材為對(duì)照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以乙酸丁酯-甲酸_水的上層液為展開(kāi)劑照薄層色譜法鑒別金銀花；以徐長(zhǎng)卿對(duì)照藥材為對(duì)照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以環(huán)己烷_(kāi)醋酸乙酯為展開(kāi)劑照薄層色譜法鑒別徐長(zhǎng)卿；以犁頭草對(duì)照藥材為對(duì)照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開(kāi)劑照薄層色譜法鑒別犁頭草；以白鮮皮對(duì)照藥材為對(duì)照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以氯仿醋酸乙酯_丙酮為展開(kāi)劑照薄層色譜法鑒別白鮮皮；檢查符合中國(guó)藥典2005年版一部附錄IL中膠囊劑項(xiàng)F的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定丹皮酚的含量測(cè)定徐長(zhǎng)卿以丹皮酚對(duì)照品為對(duì)照，以十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-水(60:40)為流動(dòng)相照高效液相色譜法測(cè)定膠囊制劑中丹皮酚的含量；總黃酮的含量測(cè)定總黃酮以蘆丁對(duì)照品為對(duì)照，以5%亞硝酸鈉溶液、10%硝酸鋁溶液及氫氧化鈉試液為顯色劑，照紫夕卜-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定膠囊制劑中總黃酮的含量。前述的治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法中，所述鑒別由以下項(xiàng)組成(1)金銀花鑒別取膠囊內(nèi)容物lg，加甲醇5ml，超聲提取30分鐘，過(guò)濾，取濾液，作為供試品溶液；另取金銀花對(duì)照藥材0.5g，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10U1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7:2.5:2.5的乙酸丁酯_甲酸_水的上層液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾千，噴以5%三氯化鐵-乙醇溶液，在溫度105°C下烘5分鐘，取出，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)徐長(zhǎng)卿鑒別取膠囊內(nèi)容物5g,加甲醇15ral，超聲提取30分鐘，過(guò)濾，濾液濃縮至約5ml，過(guò)濾，取濾液，作為供試品溶液；另取徐長(zhǎng)卿對(duì)照藥材3g,同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為3:l的環(huán)己烷-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈365mn下檢視；在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)犁頭草鑒別取膠囊內(nèi)容物lg，加甲醇5ml，超聲30分鐘，過(guò)濾，取濾液，作為供試品溶液；另取犁頭草對(duì)照藥材0.5g，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板....匕以體積比為5:3:0.5的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi),取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)白鮮皮鑒別取膠囊內(nèi)容物5g,加乙醇20ml，水浴回流30分鐘，過(guò)濾，濾液水浴揮千，加水20ml溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴揮千，加甲醇lml溶解,作為供試品溶液；另取白鮮皮對(duì)照藥材0.3g，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為10:0.5:0.2的氯仿-醋酸乙酯_丙酮為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾千，噴以新配制的碘化鉍鉀溶液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。前述的治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法中，所述膠囊制劑中丹皮酚的含量測(cè)定為徐長(zhǎng)卿色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇—水(60:40)為流動(dòng)相；流速為1.Oml/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為274nm;柱溫35。C，理論板數(shù)按丹皮酚峰計(jì)算應(yīng)不低于3000;對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取丹皮酚對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml中含丹皮酚0.02064mg的溶液，即得對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品，混勻，取lg，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，加入甲醇溶液25ml，稱(chēng)重，超聲處理(功率250W，頻率40kHz)10分鐘，取出，放冷，補(bǔ)重，濾過(guò)，取續(xù)濾液lml至10ml量瓶中，加入甲醇用定容，用0.45"m濾膜濾過(guò)，作為供試品溶液；測(cè)定法分別取供試品溶液和對(duì)照品溶液各10y1,照高效液相色譜法,注入液相色譜儀測(cè)定，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得；所述膠囊制劑中總黃酮的含量測(cè)定為總黃酮對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取在12(TC千燥至恒重的蘆丁對(duì)照品適量，置25ml量瓶中，加甲醇適量，置水浴上微熱使溶解，放冷，加甲醇至刻度，搖勻；精密量取l()ni:l.,置l()(Ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，制成每lml中含蘆丁()20192mg的溶液，即得對(duì)照品溶液；標(biāo)準(zhǔn)曲線制備精密量取對(duì)照品溶液lml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，分別置25ml量瓶中，各加水至6.Oml,加5%亞硝酸鈉溶液lml，搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液lml,放置6分鐘，加氫氧化鈉試液l()ral，再加水至刻度,搖勻，放置15分鐘，以相應(yīng)試劑為空白，照紫外_可見(jiàn)分光光度法，在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品，混勻，取0.2g,精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇25hi:I,稱(chēng)重，超聲l()min，放置室溫，用70%乙醇補(bǔ)足減失重量，濾過(guò)，精密吸取續(xù)濾液lml至25ml容量瓶中，加水至5ml，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法，自"加水至6.Oml"起同法操作制得供試品溶液，依法測(cè)定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含無(wú)水蘆丁的重量，計(jì)算，即得。前述的治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法中，每粒膠囊含徐長(zhǎng)卿以丹皮酚(C9H誦)計(jì)，不少于1.02mg;每粒膠囊含總黃酮以無(wú)水戸丁(C27H30016)計(jì)，不少于2.OOmg。為了研究治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，發(fā)明人進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)以篩選最佳方案，具體如下一、性狀的研究根據(jù)樣品的試驗(yàn)結(jié)果擬定,三批中試樣品均與擬定結(jié)果描述一致,列入質(zhì)量控制方法正文。二、鑒別方法的研究2.1處方中金銀花的薄層色譜鑒別取膠囊內(nèi)容物lg,加甲醇5ml,超聲提取30分鐘，過(guò)濾，取濾液，作為供試品溶液；另取缺金銀花樣品lg,同供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照溶液；另取金銀花對(duì)照藥材0.5g，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各lOlil，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7:2.5:2.5的乙酸丁酯-甲酸-水的上層液為展開(kāi)齊U，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5^三氯化鐵-乙醇溶液，在105。C烘約5分鐘，取出，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；陰性對(duì)照無(wú)干擾；經(jīng)3批中試樣品驗(yàn)證，此方法重復(fù)性好，專(zhuān)屬性強(qiáng)，故將其列為質(zhì)量控制方法。2.2處方中徐長(zhǎng)卿的薄層色譜鑒別取膠囊內(nèi)容物5g，加甲醇15ml，超聲提取30分鐘，過(guò)濾，濾液濃縮至約5ral，過(guò)濾，取濾液，作為供試品溶液；另取缺徐長(zhǎng)卿樣品5g，同供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照溶液；另取徐長(zhǎng)卿對(duì)照藥材3g，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10ul,分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為3:1的環(huán)己垸-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；陰性對(duì)照無(wú)千擾；經(jīng)3批中試樣品驗(yàn)證，此方法重復(fù)性好，專(zhuān)屬性強(qiáng)，故將其列為質(zhì)量控制方法。2.3處方中犁頭草的薄層色譜鑒別取膠囊內(nèi)容物lg，加甲醇5ral，超聲30分鐘，過(guò)濾，濾液作為供試品溶液；另取缺犁頭草樣品1g，同供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照溶液；另取犁頭草對(duì)照藥材0.5g，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為5:3:0.5的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)；陰性對(duì)照無(wú)干擾；經(jīng)3批中試樣品驗(yàn)證，此方法重復(fù)性好，專(zhuān)屬性強(qiáng)，故將其列為質(zhì)量控制方法。2.4處方中白鮮皮的薄層色譜鑒別取膠囊內(nèi)容物5g，加乙醇2(Ml，水浴回流30分鐘，過(guò)濾，濾液水浴揮干，加水2()ni:l-溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液水浴揮干,加甲醇lml溶解，作為供試品溶液；另取缺白鮮皮樣品5g，同供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照溶液；另取白鮮皮對(duì)照藥材0.3g,同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5ul,分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為10:0.5:0.2的氯仿-醋酸乙酯-丙酮為展開(kāi)齊lj，展開(kāi)，取出，噴以新配制的碘化鉍鉀溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；陰性對(duì)照無(wú)干擾；經(jīng)3批中試樣品驗(yàn)證，此方法重復(fù)性好，專(zhuān)屬性強(qiáng)，故將其列為質(zhì)量控制方法。三、檢查項(xiàng)的研究3.1崩解時(shí)限按《中國(guó)藥典》2005年版一部"附錄XIIA崩解時(shí)限檢查法"測(cè)定，規(guī)定本品應(yīng)在30分鐘內(nèi)全部崩解，本品三批檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表l,均符合規(guī)定。3.2水分檢查按《中國(guó)藥典》2005年版一部"附錄IXH水分測(cè)定法第一法"測(cè)定，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1,3批樣品均符合規(guī)定。3.3裝量差異檢查依據(jù)《中國(guó)藥典》2005年版一部"附錄IL膠囊劑"項(xiàng)下進(jìn)行檢查，結(jié)果見(jiàn)表1，3批樣品均符合規(guī)定。3.4重金屬檢查照《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄IXE重金屬檢查法第二法操作。3.4.1標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的制備精密稱(chēng)取在105t;干燥至恒重的硝酸鉛0.117g，置1000ml容量瓶中，加硝酸5ml，水50ml，溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，即得標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液。臨用時(shí)，精密量取前貯備液10ml,置100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每lml相當(dāng)于10ug的鉛)。3.4.2供試品溶液的制備精密稱(chēng)取本品內(nèi)容物lg，置坩鍋中，電爐上緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸lml，使恰濕潤(rùn)，用低溫加熱至硫酸除盡，加硝酸0.5ml，蒸千，放冷，馬弗爐中50060(TC熾灼使完全灰化，放冷加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至酚酞指示劑顯中性,再加醋酸鹽緩沖液(pH:3.5)2m:[,微熱溶解后，移至納氏比色管中，加水稀釋成25ml。3.4.3陽(yáng)性對(duì)照液的制備將配制供試品溶液的試劑，置另一坩鍋中蒸千后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水15ml,微熱溶解后，移置納氏比色管中，加入標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液lml,再加水稀釋成25ral。3.4.4空白對(duì)照液的制備將配制供試品溶液的試劑，置另一坩鍋中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，再加水稀釋成25ml。3.4.5比色供試品溶液、陽(yáng)性對(duì)照液和空白對(duì)照液的3支納氏比色管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視,供試品液顯出的顏色與陽(yáng)性對(duì)照液比較，顏色更淺，空白對(duì)照無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)表1。結(jié)果表明，3批樣品重金屬含量均小于10ppm。3.5砷鹽檢查照《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄I:XF砷鹽檢查法第一法操作。3.5.1標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的制備稱(chēng)取三氧化二砷0.121g，置1000ml量瓶中，加20%氫氧化鈉溶液5ml溶解后，用適量稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml,用水稀釋至刻度，搖勾，即得(每1ml相當(dāng)于1ug的As)。3.5.2供試品溶液的制備精密稱(chēng)取本品內(nèi)容物lg，置坩堝中，加入氫氧化鈣0.5g，混勻,加水濕潤(rùn)，烘干,在小火上小心熾灼，(注意不使內(nèi)容物濺出)至煙霧除盡,移入馬弗爐中在5006()(rC熾灼至灰化，放冷，加鹽酸5ral和水23ral，水浴上加熱溶解，作為供試品溶液。3.5.3陽(yáng)性對(duì)照液的制備精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml，置坩鍋中，同3.5.2方法制得陽(yáng)性對(duì)照液。3.5.4空白對(duì)照液的制備另取坩鍋一只，加入氫氧化鈣0.5g，同供試品溶液的制備方法制得空白對(duì)照液。3.5.5砷斑的制備將供試品溶液、陽(yáng)性對(duì)照液、空白對(duì)照液分別移至測(cè)砷瓶中，再分別加碘化鉀試液5ml,酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g，3(TC水浴中反應(yīng)45分鐘，取出溴化束試紙，觀察砷斑顏色，結(jié)果供試品溶液砷斑淺于標(biāo)準(zhǔn)砷斑顏色。結(jié)果見(jiàn)表l。結(jié)果表明，3批樣品砷鹽含量均小于2ppm。表1三批樣品檢査結(jié)果表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>3.6微生物檢查方法驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)材料生化培養(yǎng)箱、立式壓力蒸汽消毒器、雙筒實(shí)目顯微鏡。陽(yáng)性對(duì)照菌及常規(guī)微生物檢驗(yàn)用化學(xué)試劑和玻璃儀器等。營(yíng)養(yǎng)瓊脂、玫瑰紅鈉瓊脂、曙紅亞甲藍(lán)瓊脂、膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基、膽鹽乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基(以上均為中國(guó)北京三科科技開(kāi)發(fā)公司生產(chǎn)，按CP()5版規(guī)定配制及滅菌)、四-甲基傘形酮葡萄糖苷酸(中國(guó)北京牛?；蚣夹g(shù)有限公司)；大腸埃希菌[CMCC(B)44102]、金黃色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、枯草芽孢桿菌[CMCC(B)63501]、白色念珠菌[CMCC(F)98001]、黑曲霉[CMCC(F)98003]，以上菌種均來(lái)源于貴州省藥品檢驗(yàn)所。供試液制備按規(guī)定取本品膠囊內(nèi)容物，充分搖勻后混合，取膠囊內(nèi)容物10g，加入pH7.0的無(wú)菌氯化鈉_蛋白胨緩沖液至100ml，即為1:10供試液。驗(yàn)證結(jié)果見(jiàn)表2至表5。表2細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)方法驗(yàn)證回收試驗(yàn)記錄<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表4控制菌檢査方法驗(yàn)證記錄(大腸埃希菌)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表5控制菌檢査方法驗(yàn)證記錄(大腸菌群)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>由驗(yàn)證試驗(yàn)可知，本品可采用常規(guī)法進(jìn)行霉菌和酵母菌、大腸埃希菌、大腸菌群檢驗(yàn),用培養(yǎng)基稀釋法(0.2mL/皿)對(duì)細(xì)菌進(jìn)行檢驗(yàn)。按驗(yàn)證方法對(duì)本品的三批樣品微生物限度進(jìn)行了檢查，結(jié)果均符合規(guī)定。結(jié)論由以上實(shí)驗(yàn)可知,可采用常規(guī)方法對(duì)膠囊制劑進(jìn)行檢査項(xiàng)下的各項(xiàng)檢查。四、膠囊制劑中含量測(cè)定的研究丹皮酚本品中主藥徐長(zhǎng)卿含有丹皮酚，現(xiàn)代研究表明，丹皮酚具有鎮(zhèn)痛、止血、消炎、抗菌、降壓等多種藥理作用；丹皮酚體外對(duì)多種人體致病菌具有明顯的抑制作用，是徐長(zhǎng)卿的有效成分,本品采用高效液相色譜法測(cè)定了其含量。4.1儀器與試藥高效液相色譜儀LC-2010HT(日本島津)；SeriesIII泵(美國(guó))，Mode500紫外檢測(cè)器(美國(guó))；AUW220D分析天平(日本島津)；甲醇(色譜純，天津大茂)冰(重蒸熘，臨用前制備)，磷酸(分析純,天津大茂)，丹皮酚(中檢所,批號(hào)110708-200505)。樣品三批(批號(hào)2007001、2007002、2007003)。4.2色譜條件DiamonsilC18柱(5um)，流動(dòng)相:甲醇_水(60:40);流速:1.0ml/min;檢測(cè)波長(zhǎng)274nm;柱溫35。C。4.3系統(tǒng)適用性試驗(yàn)分別取丹皮酚對(duì)照品溶液、供試品溶液及缺徐長(zhǎng)卿的陰性樣品對(duì)照溶液各10y1注入液相色譜儀，記錄色譜。從圖譜可知，在此色譜條件下，丹皮酚峰與其他組分峰分離完全，在與丹皮酚峰相同的保留時(shí)間處，陰性對(duì)照無(wú)千擾。4.4供試品溶液的制備本試驗(yàn)對(duì)供試品處理方法作了以下考察4.4.l提取方法選擇方法1:取本品內(nèi)容物，置具塞錐形瓶中，以甲醇溶液為提取溶劑，以冷浸方法提取，考察了不同提取時(shí)間內(nèi)容物丹皮酚含量。結(jié)果見(jiàn)表6。表6提取方法1考察結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>方法2:取本品內(nèi)容物，以甲醇為提取溶劑，以超聲為處理方法,考察了不同提取時(shí)間內(nèi)容物丹皮酚含量。結(jié)果見(jiàn)表7。表7提取方法2考察結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>試驗(yàn)結(jié)果表明，本品采用甲醇超聲提取效率高、耗時(shí)短、操作簡(jiǎn)便,可采用其為本品供試品處理方法；根據(jù)不同提取時(shí)間考察結(jié)果，確定超聲時(shí)間為10分鐘。4.4.2提取溶劑比較取本品內(nèi)容物，分別以甲醇、50%甲醇和乙醇25ml為溶劑，超聲提取10分鐘，過(guò)濾，濾液經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾，作為供試品溶液，測(cè)定丹皮酚含量，結(jié)果溶劑甲醇提取效果最好,而50%甲醇提取效果次之、乙醇的提取效果最差，由于以50%甲醇為溶劑制備的供試品比甲醇為溶劑制備的供試品顏色深，考慮到對(duì)色譜柱的保護(hù)，我們選擇甲醇為樣品提取溶劑，結(jié)果見(jiàn)表8。表8提取溶劑考察結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>試驗(yàn)結(jié)果表明，本品還是采用甲醇作為提取溶劑較為合適。4.5線性關(guān)系考察精密稱(chēng)取丹皮酚對(duì)照品25.8()mg，置5()ni:l.量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取2ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度,得0.02064mg/ml的丹皮酚對(duì)照品溶液，分別精密吸取丹皮酚對(duì)照品溶液2ii1、5u1、10u1、15u1、20u1，注入色譜儀,記錄色譜圖，測(cè)定峰面積積分值,測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表9,并以對(duì)照品進(jìn)樣量X(iig)為橫坐標(biāo)，峰面積值Y(nw.s)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果表明，丹皮酚在().04130.4128yg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。表9丹皮酚線性關(guān)系考察<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>將回歸方程擬合為過(guò)原點(diǎn)的方程得y=5537711x。取線性關(guān)系考察中最低點(diǎn)進(jìn)樣量(0.0413iig)分別代入上述兩個(gè)方程，計(jì)算得兩者相對(duì)偏差為().43%，說(shuō)明本品可用外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行含量測(cè)定。4.6精密度試驗(yàn)精密吸取丹皮酚對(duì)照品溶液10u1(濃度為0.02046mg/ml)，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定丹皮酚峰面積積分值，求出相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果表明精密度良好，結(jié)果見(jiàn)表10。表l()精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>4.7穩(wěn)定性試驗(yàn)取--供試品(批號(hào)2007001),按質(zhì)量控制方法正文中供試品溶液的制備方法制備供試液。在室溫下每隔一段時(shí)間進(jìn)樣lOlil，測(cè)定丹皮酚峰面積值，求相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果表明，丹皮酚在12小時(shí)內(nèi)基本穩(wěn)定(RSD=0.14%)，結(jié)果見(jiàn)表11。表ll穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果(<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>4.8重復(fù)性試驗(yàn)精密取本品(批號(hào)2()()7(X)1)各lg，共5份，按質(zhì)量質(zhì)量控制方法正文中供試品溶液的制備方法制備供試液。精密吸取供試品溶液各10ul，測(cè)定丹皮酚峰面積積分值，計(jì)算含量，求相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果表明，重復(fù)性良好(RSD=1.53%)。見(jiàn)表12。表12重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>4.9中間精密度取同一批樣品(批號(hào)2(K)70()1)，分兩組由不同操作人員在不同設(shè)備上對(duì)本品進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果表明，中間精密度良好(RSD=0.58%)。結(jié)果見(jiàn)表13。A組:LC-2010HT高效液相色譜儀；B組:SSI高效液相色譜儀。表13中間精密度試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>兩SMS^鵬i34g/g腿(L鵬4.10回收率試驗(yàn)采用加樣回收法試驗(yàn)，取已知含量的同一批樣品(批號(hào)2007001)6份，精密稱(chēng)取各約0.5g，精密加入丹皮酚對(duì)照品適量，按供試品溶液制備方法制備成供試品溶液，精密吸取供試品溶液各10U1，照....匕述色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖，計(jì)算含量,結(jié)果表明，丹皮酚的回收率良好,結(jié)果見(jiàn)表14。表14加樣回收試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>4.11樣品測(cè)定取3批中試樣品，按質(zhì)量控制方法正文測(cè)定其中丹皮酚含量(結(jié)果見(jiàn)表15)。按下式計(jì)算含量250XA,XC.XM一含量(呢泡〕=-AXM式中Aff_供試品丹皮酚峰面積積分值A(chǔ)Xit-丹皮酚對(duì)照品峰面積積分值C對(duì)-丹皮酚對(duì)照品濃度(mg/m:[)M樣-供試品取樣量(g)M裝量-平均裝量(g)250-供試品稀釋體積(ml)表153批樣品中丹皮酚的含測(cè)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>樣品中含量限規(guī)定本品處方中徐長(zhǎng)卿共80g，為原生藥粉入藥，其丹皮酚含量限為1.3%，由中試結(jié)果可知，本品在生產(chǎn)過(guò)程中丹皮酚轉(zhuǎn)移率均不低于99%，按F式計(jì)算本品每粒膠囊丹皮酚含量限含量限(mg/粒)=藥材量X藥材含量限X轉(zhuǎn)移率/制成量即:含量限(mg/粒)=80gX1.3%X99%/1000粒=1.03mgZ?？紤]到生產(chǎn)和貯存過(guò)程對(duì)藥品的影響，規(guī)定本品每粒含徐長(zhǎng)卿以丹皮酚計(jì)，不得少于1.02mg。總黃酮本品中杠板歸、白鮮皮、金銀花和犁頭草均含有黃酮成分，現(xiàn)代研究表明，該類(lèi)黃酮成分具有消炎、抗菌等多種藥理作用，本品采用紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定了其含量。(1)儀器與試藥TU-1901型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(北京通用儀器設(shè)備公司)；亞硝酸鈉(重慶川江)、硝酸鋁(成都金山)、氫氧化鈉(廣東西隴化工)均為分析純；蘆丁對(duì)照品(中檢所，批號(hào)100080-200306);樣品三批(批號(hào)2007001、2007002、2007003)。(2)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備精密稱(chēng)取在12(TC千燥至恒重的蘆丁對(duì)照品適量，置25ml量瓶中，加甲醇適量，置水浴上微熱使溶解，放冷,加甲醇至刻度，搖勻。精密量取10ml,置l()()ral量瓶中，加水至刻度，搖勻，制成每lml中含蘆丁()20192mg的溶液，即得。(3)檢測(cè)波長(zhǎng)選擇及陰性對(duì)照試驗(yàn)稱(chēng)取樣品(批號(hào)2007001)0.2g,精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，稱(chēng)重，超聲lOmin，放置室溫，用70%乙醇補(bǔ)足減失重量，濾過(guò)，精密吸取續(xù)濾液4ml容量瓶中，加水至6.Oml,加5%亞硝酸鈉溶液lml,搖勻，放置6分鐘，加1()%硝酸鋁溶液1ml，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液l(Ml，再加水至刻度，搖勻，放置15分鐘，作為供試品溶液；精密量取蘆丁對(duì)照品溶液及水各4ml，分別置25ml量瓶中，自"加水至6.Oml"起同法操作制得對(duì)照品溶液及空白對(duì)照溶液。取上述三種溶液適量，在400600nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，對(duì)照品溶液和供試品溶液在510nm處有最大吸收，而陰性對(duì)照溶液在此波長(zhǎng)下的吸收度與供試品溶液的吸收度相比，小于5%,符合相關(guān)規(guī)定，因此我們選擇510nm為本品中總黃酮的檢測(cè)波長(zhǎng)。(4)標(biāo)準(zhǔn)曲線精密量取戸丁對(duì)照品溶液0.5ml，lml，2ml，3ml，4ml，5ml，分別置25ml量瓶中，各加水至6.Oml，加5%亞硝酸鈉溶液lml,搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液lml，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液l()na,再加水至刻度,搖勻，放置15分鐘，以相應(yīng)試劑為空白，照紫外_可見(jiàn)分光光度法,在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，經(jīng)回歸得到如下方程A=0.035552C+0.016181(r=0.996)。式中A為吸光度值，C為比色液中蘆丁對(duì)照品溶液濃度(Ug/ml)。聲丁對(duì)照品濃度在4.038440.3840iig/ml范圍內(nèi)，吸光度和濃度呈良好的線性關(guān)系，結(jié)果見(jiàn)表16。表16蘆丁對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線考察<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>序號(hào)濃度(ug/ml)吸收度316.15360.308424.23040.411532.30720.521640.38400.689(5)精密度試驗(yàn)取"標(biāo)準(zhǔn)曲線"項(xiàng)下3號(hào)對(duì)照品溶液(12.115()ug/ni:l.)適量，依法重復(fù)測(cè)定5次，記錄吸收度值，求出相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果表明，對(duì)照品蘆丁吸收度測(cè)定精密度良好，RSD=0.27%，結(jié)果見(jiàn)表17。表17精密度試驗(yàn)結(jié)果吸雌RSD《案》10.31320.31430.3120.31320-240.31450.313(6)穩(wěn)定性試驗(yàn)稱(chēng)取樣品(批號(hào)2007001)0.2g,精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入70X乙醇25ni:l-,稱(chēng)重，超聲l(Min，放置室溫，用70%乙醇補(bǔ)足減失重量，濾過(guò)，精密吸取續(xù)濾液4ml容量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法，自"加水至6.0ml"起，制備成供試品溶液；在室溫....F每隔一段時(shí)間依法測(cè)定吸收度，求相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差；結(jié)果表明，該方法測(cè)定樣品中總黃酮吸收度在12小時(shí)內(nèi)基本穩(wěn)定，RSD=0.37%,結(jié)果見(jiàn)表18。表18穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果時(shí)閱(小時(shí)》吸鵬手聰離勵(lì)OO00.35220.35140—3i30.3S1SD.378O.測(cè)120.353(7)重復(fù)性試驗(yàn)取稱(chēng)取樣品(批號(hào)2(K)70()1)5份，各0.2g，精密稱(chēng)定，分別置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，稱(chēng)重，超聲10min，放置室溫，用70%乙醇補(bǔ)足減失重量，濾過(guò)，精密吸取續(xù)濾液4ml容量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法，自"加水至6.Oml"起，制備成供試品溶液；依法重復(fù)測(cè)定5次，記錄吸收度值，求出相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果表明，該方法測(cè)定樣品中蘆丁吸收度重復(fù)性良好，RSD=0.67%，結(jié)果見(jiàn)表19。17表19重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>(8)回收率試驗(yàn)采用加樣回收試驗(yàn)，取已知含量的重復(fù)性試驗(yàn)的同一批樣品(批號(hào)2()()7()()1，總黃酮平均含量為7.26mg/g)共5份，各().15g，精密稱(chēng)定，分別置具塞錐形瓶中，精密加入蘆丁對(duì)照品5ml及70X乙醇20ml,稱(chēng)重，超聲10min，放置室溫，用70%乙醇補(bǔ)足減失重量，濾過(guò)，精密吸取續(xù)濾液4ml容量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法，自"加水至6.Oml"起，制備成供試品溶液；照上述條件測(cè)定吸光度，計(jì)算含量，求相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，RSD=1.49%，結(jié)果表明，此方法具有較好的加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表20。表20供試品中蘆丁加樣回收試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>(9)3批樣品測(cè)定及成品含量限度制定按"重復(fù)性"測(cè)定項(xiàng)下制備供試品溶液和對(duì)照品溶液，測(cè)定吸光度，計(jì)算其中總黃酮的含量，結(jié)果見(jiàn)表2L表213批樣品中總黃酮含量測(cè)定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>根據(jù)3批樣品中總黃酮測(cè)定結(jié)果，考慮到生產(chǎn)和貯存等因素的影響，規(guī)定本品每粒含總黃酮以無(wú)水蘆丁(C27H3。0:l6)計(jì)，不得少于2.00mg。五、質(zhì)量控制方法中所用到的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)丹皮酚對(duì)照品購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110708-2()05()5，供含量測(cè)定用。蘆丁對(duì)照品購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)100080-200306，供含量測(cè)定用。金銀花對(duì)照藥材購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)121060-2()()303，供鑒別用。徐長(zhǎng)卿對(duì)照藥材購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)121514-200501，供鑒別用。犁頭草對(duì)照藥材購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)121429-2()06()2，供鑒別用。白鮮皮對(duì)照藥材購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)120978-200503，供鑒別用。本發(fā)明的有益效果與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明建立了治療皮膚疾病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法,對(duì)膠囊制劑的性狀、鑒別、檢查和含量測(cè)定進(jìn)行了研究和篩選，所采用的質(zhì)量控制方法科學(xué)合理，準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好，能全面有效地控制質(zhì)量皮膚疾病的膠囊制劑的質(zhì)量，確保該制劑的臨床療效。下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。具體實(shí)施例方式實(shí)施例l。治療皮膚疾病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法如下性狀本品為硬膠囊，內(nèi)容物為棕褐色與白色的顆粒及粉末，氣特異，味苦、微澀。鑒別(l)金銀花鑒別取膠囊內(nèi)容物lg，加甲醇5ml,超聲提取30分鐘，過(guò)濾,取濾液，作為供試品溶液；另取金銀花對(duì)照藥材0.5g，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各l()U:[,分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7:2.5:2.5的乙酸丁酯-甲酸-水的上層液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵_乙醇溶液，在溫度105。C烘約5分鐘，取出，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(2)徐長(zhǎng)卿鑒別取膠囊內(nèi)容物5g,加甲醇15ral，超聲提取30分鐘，過(guò)濾，濾液濃縮至約5ml，過(guò)濾，取濾液，作為供試品溶液；另取徐長(zhǎng)卿對(duì)照藥材3g,同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10ul,分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為3:1的環(huán)己垸-醋酸乙酯為展開(kāi)劑,展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈365mn下檢視；在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(3)犁頭草鑒別取膠囊內(nèi)容物lg，加甲醇5ml，超聲30分鐘，過(guò)濾，濾液作為供試品溶液；另取犁頭草對(duì)照藥材0.5g,同藥材制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為5:3:0.5的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干,置紫外光燈365nm下檢視；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。(4)白鮮皮鑒別取膠囊內(nèi)容物5g,加乙醇20ml，水浴回流30分鐘，過(guò)濾，濾液水浴揮千，加水20ml溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液水浴揮千，加甲醇lml溶解,作為供試品溶液。另取白鮮皮對(duì)照藥材O.3g，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各5ul,分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為10:0.5:0.2的氯仿-醋酸乙酯-丙酮為展開(kāi)齊lj，展開(kāi)，取出，噴以新配制的碘化鉍鉀溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。檢查符合中國(guó)藥典2005年版一部附錄I:L中膠囊劑項(xiàng)下的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定丹皮酚照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版--部附錄VID)測(cè)定膠囊制劑中丹皮酚的含量色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(60:40)為流動(dòng)相；流速為1.Oml/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為274;柱溫:35。C。理論板數(shù)按丹皮酚峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取丹皮酚對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml中含丹皮酚0.02064mg的溶液，即得。供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品，混勻，取lg，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，加入甲醇溶液25ml，稱(chēng)重，超聲處理(功率250W，頻率40kHz)10分鐘，取出，放冷，補(bǔ)重，濾過(guò)，取續(xù)濾液lml至10ml量瓶中，加入甲醇用定容，用0.45um濾膜濾過(guò)，作為供試品溶液。領(lǐng)U定法分別取供試品溶液和對(duì)照品溶液各:[,照高效液相色譜法，注入液相色譜儀測(cè)定,記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。每粒治療皮膚病的膠囊制劑含徐長(zhǎng)卿以丹皮酚(C9H1Q03)計(jì)，不少于1.02mg?？傸S酮對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取在12(TC干燥至恒重的聲丁對(duì)照品適量,置25ral量瓶中，加甲醇適量，置水浴上微熱使溶解，放冷，加甲醇至刻度，搖勻。精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，制成每lml中含蘆丁0.20192mg的溶液，即得。標(biāo)準(zhǔn)曲線制備精密量取對(duì)照品溶液lml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，分別置25ml量瓶中，各加水至6.Oml,加5%亞硝酸鈉溶液lml，搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液lml，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液l()ral，再加水至刻度，搖勻，放置15分鐘，以相應(yīng)試劑為空白，照紫外_可見(jiàn)分光光度法，在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品，混勻，取0.2g,精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇25hi:I,稱(chēng)重，超聲l()min，放置室溫，用70%乙醇補(bǔ)足減失重量，濾過(guò)，精密吸取續(xù)濾液lml至25ml容量瓶中，加水5ml，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法，自"加水至6.Oml"起同法操作制得供試品溶液，依法測(cè)定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含無(wú)水蘆丁的重量,計(jì)算，即得。20每粒治療皮膚病的膠囊制劑含總黃酮以無(wú)水蘆丁(C27H3。016)計(jì)，不少于2.OOmg。功能主治祛風(fēng)燥濕，清熱涼血，解毒止癢。用于血熱風(fēng)燥、濕熱瘀毒所致的濕疹、蕁麻疹、皮炎等瘙癢性皮膚病。用法用量口服。一次3粒，一日3次。規(guī)格每粒裝O.3g。注意事項(xiàng)孕婦忌服。貯藏密封，防潮。本發(fā)明的實(shí)施方式不限于上述實(shí)施例，在不脫離本發(fā)明宗旨的前提下做出的各種變化均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。權(quán)利要求一種治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，這種膠囊這樣制備杠板歸400g、白鮮皮200g、金銀花200g和犁頭草200g，加水煎煮3次，每次加10倍量水煎煮3小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮至60℃相對(duì)密度為1.25的浸膏，減壓干燥，粉碎，過(guò)80目篩，得浸膏粉；取徐長(zhǎng)卿80g，粉碎，過(guò)80目篩，得生藥粉；將浸膏粉和生藥粉混勻，加入淀粉適量，以75％乙醇制粒，干燥，裝入膠囊，每粒裝0.3g，制成1000粒；其特征在于質(zhì)量控制方法由性狀、鑒別、檢查和含量測(cè)定組成，其中鑒別是對(duì)金銀花、徐長(zhǎng)卿、犁頭草和白鮮皮的鑒別，含量測(cè)定是用高效液相色譜法和紫外-可見(jiàn)分光光度法分別對(duì)膠囊制劑中丹皮酚和總黃酮的含量測(cè)定。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于性狀本品為硬膠囊，內(nèi)容物為棕褐色與白色的顆粒及粉末，氣特異，味苦、微澀；鑒別以金銀花對(duì)照藥材為對(duì)照、以羧甲基纖維素鈉為黏合齊1〗、以乙酸丁酯-甲酸-水的上層液為展開(kāi)劑照薄層色譜法鑒別金銀花；以徐長(zhǎng)卿對(duì)照藥材為對(duì)照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以環(huán)己烷-醋酸乙酯為展開(kāi)劑照薄層色譜法鑒別徐長(zhǎng)卿；以犁頭草對(duì)照藥材為對(duì)照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以甲苯_醋酸乙酯_甲酸為展開(kāi)劑照薄層色譜法鑒別犁頭草；以白鮮皮對(duì)照藥材為對(duì)照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以氯仿_醋酸乙酯_丙酮為展開(kāi)劑照薄層色譜法鑒別白鮮皮；檢查符合中國(guó)藥典2005年版一部附錄IL中膠囊劑項(xiàng)下的各項(xiàng)規(guī)定；丹皮酚的含量測(cè)定徐長(zhǎng)卿以丹皮酚對(duì)照品為對(duì)照，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為60:40的甲醇-水為流動(dòng)相照高效液相色譜法測(cè)定膠囊制劑中丹皮酚的含量；總黃酮的含量測(cè)定總黃酮以蘆丁對(duì)照品為對(duì)照，以5%亞硝酸鈉溶液、10%硝酸鋁溶液及氫氧化鈉試液為顯色劑，照紫外_可見(jiàn)分光光度法測(cè)定膠囊制劑中總黃酮的含量。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法,其特征在于所述鑒別由以下項(xiàng)組成(1)金銀花鑒別取膠囊內(nèi)容物lg,加甲醇5ml，超聲提取30分鐘，過(guò)濾，取濾液，作為供試品溶液；另取金銀花對(duì)照藥材0.5g，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10ia，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7:2.5:2.5的乙酸丁酯-甲酸-水的上層液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵-乙醇溶液，在溫度105°C下烘5分鐘，取出，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)徐長(zhǎng)卿鑒別取膠囊內(nèi)容物5g,加甲醇15ml，超聲提取30分鐘，過(guò)濾，濾液濃縮至約5m:l，過(guò)濾，取濾液，作為供試品溶液；另取徐長(zhǎng)卿對(duì)照藥材3g，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為3:1的環(huán)己烷-醋酸乙酯為展開(kāi)劑,展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)犁頭草鑒別取膠囊內(nèi)容物lg，加甲醇5ml，超聲30分鐘，過(guò)濾，取濾液，作為供試品溶液；另取犁頭草對(duì)照藥材0.5g，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板....匕以體積比為5:3:0.5的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)白鮮皮鑒別取膠囊內(nèi)容物5g，加乙醇2()ml，水浴回流30分鐘，過(guò)濾，濾液水浴揮干，加水20ml溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴揮干，加甲醇lml溶解，作為供試品溶液；另取白鮮皮對(duì)照藥材0.3g，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為l():().5:().2的氯仿-醋酸乙酯-丙酮為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以新配制的碘化鉍鉀溶液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法,其特征在于所述膠囊制劑中丹皮酚的含量測(cè)定為徐長(zhǎng)卿色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；體積比為60:40的甲醇-水為流動(dòng)相；流速為1.Oml/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為274nm;柱溫35。C，理論板數(shù)按丹皮酚峰計(jì)算應(yīng)不低于3000;對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取丹皮酚對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml中含丹皮酚0.02064mg的溶液，即得對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品，混勻，取lg，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，加入甲醇溶液25ml，稱(chēng)重，超聲處理10分鐘，取出，放冷，補(bǔ)重，濾過(guò)，取續(xù)濾液lml至10ml量瓶中，加入甲醇用定容，用().451ini濾膜濾過(guò)，作為供試品溶液；測(cè)定法分別取供試品溶液和對(duì)照品溶液各10yl，照高效液相色譜法，注入液相色譜儀測(cè)定，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得；所述膠囊制劑中總黃酮的含量測(cè)定為總黃酮對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取在12(rC干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品適量，置25m:[量瓶中，加甲醇適量，置水浴上微熱使溶解,放冷，加甲醇至刻度,搖勻；精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，制成每lml中含蘆丁0.20192mg的溶液，即得對(duì)照品溶液；標(biāo)準(zhǔn)曲線制備精密量取對(duì)照品溶液lml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，分別置25ml量瓶中，各加水至6.()ni:l.,加5%亞硝酸鈉溶液lral，搖勻，放置6分鐘，加1()%硝酸鋁溶液lml，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，再加水至刻度，搖勻，放置15分鐘，以相應(yīng)試劑為空白;照紫外-可見(jiàn)分光光度法，在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品，混勻，取().2g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇25ml,稱(chēng)重，超聲10min，放置室溫，用70%乙醇補(bǔ)足減失重量，濾過(guò)，精密吸取續(xù)濾液lml至25ml容量瓶中，加水至5ml，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法，自"加水至6.Oml"起同法操作制得供試品溶液,依法測(cè)定吸光度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含無(wú)水蘆丁的重量，計(jì)算，即得。5.根據(jù)權(quán)利要求1、2或4所述的治療皮膚病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于每粒膠囊含徐長(zhǎng)卿以丹皮酚(C9H誦)計(jì)，不少于1.02mg;每粒膠囊含總黃酮以無(wú)水蘆丁(C27H30016)計(jì)，不少于2.OOmg。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種治療皮膚疾病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，該質(zhì)量控制方法是由性狀、鑒別、檢查和含量測(cè)定組成，其中鑒別是對(duì)金銀花、徐長(zhǎng)卿、犁頭草和白鮮皮的鑒別，含量測(cè)定是用高效液相色譜法和紫外-可見(jiàn)分光光度法分別對(duì)膠囊制劑中丹皮酚和總黃酮的含量測(cè)定。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明建立了治療皮膚疾病的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，對(duì)膠囊制劑的性狀、鑒別、檢查和含量測(cè)定進(jìn)行了研究和篩選，所采用的質(zhì)量控制方法科學(xué)合理，準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好，能全面有效地控制制劑的質(zhì)量，確保該制劑的臨床療效。文檔編號(hào)A61K36/86GK101716260SQ20091031086公開(kāi)日2010年6月2日申請(qǐng)日期2009年12月4日優(yōu)先權(quán)日2009年12月4日發(fā)明者劉艷,周強(qiáng),皮海燕,羅陽(yáng)洋申請(qǐng)人:貴陽(yáng)春科藥業(yè)技術(shù)研發(fā)有限公司