專利名稱：包含奧沙利鉑脂質(zhì)體制劑的抗腫瘤效果增強劑和包含該脂質(zhì)體制劑的抗腫瘤劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及包含奧沙利鉬(oxaliplatin)脂質(zhì)體制劑的抗腫瘤效果增強劑。本發(fā) 明亦涉及包含脂質(zhì)體制劑的抗腫瘤劑。
背景技術(shù)：
迄今為止，在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中開發(fā)和使用了很多抗癌劑。例如，替加氟(tegafur)是抗 癌劑，其在體內(nèi)被活化，并逐步釋放活性形式，即5-氟尿嘧啶(下文被稱作“5-FU”)，因此減 輕5-FU表現(xiàn)出的毒性或副作用。含有替加氟、吉莫斯特(gimeracil)、氧嗪酸鉀(oteracil potassium)三種藥劑的組合藥(商品名TS_1，替加氟/吉莫斯特/氧嗪酸鉀的摩爾比= 1 0.4 1，大鵬藥品工業(yè)株式會社(Taiho Pharmaceutical Co. , Ltd.)制造，下文該組 合藥被稱作TS-1)具有更強的抗腫瘤效果，因為吉莫斯特抑制5-FU的降解。在該制劑中， 因為氧嗪酸鉀特異性地抑制胃腸道毒性的發(fā)生，治療效果從而得到改善，所述胃腸道毒性 可能是由替加氟和吉莫斯特兩種藥劑達到的增強的抗腫瘤效果所伴隨的。因此，TS-1有助 于多種惡性腫瘤的治療(專利文件1)。然而，具有足以延長癌癥患者生存的更強治療效果的治療劑和治療方法仍然被認(rèn) 為是必需的?？鼓[瘤效果和/或副作用的作用機制彼此不同的多種藥劑的聯(lián)合給藥化療 (聯(lián)合療法)試圖改善治療效果并且一些聯(lián)合療法確實有助于改善癌癥治療(參閱，例如， 專利文件2、3和4)。例如，奧沙利鉬單獨使用時展現(xiàn)出低的抗腫瘤效果，因此與其他藥劑 聯(lián)合使用。使用5-氟尿嘧啶和亞葉酸鹽(下文亞葉酸鹽被稱為LV) (F0LF0X)的聯(lián)合療法 在世界范圍內(nèi)常用(參閱，例如，非專利文件1、2和3)。然而，F(xiàn)0LF0X的應(yīng)用是復(fù)雜的，延 長的輸注5-氟尿嘧啶的周期降低患者的生活質(zhì)量，因為持續(xù)的靜脈內(nèi)輸注帶來身體的約 束，此外，還有高額醫(yī)療費用。因此，開發(fā)使用奧沙利鉬的更好的聯(lián)合療法在全世界內(nèi)開展。 作為實例，使用奧沙利鉬和為口服氟化嘧啶的卡培他濱(capecitabine)(商品名希羅達 Xeloda)的聯(lián)合療法(XEL0X)被報道提供與F0LF0X幾乎相同的抗腫瘤效果(參閱，例如， 非專利文件4)。正如新的方法已經(jīng)表明TS-1和奧沙利鉬提供顯著的抗腫瘤效果，在此情 況下，與奧沙利鉬與卡培他濱聯(lián)合的情況相比，該方法具有更優(yōu)的治療功效(專利文件5)。 然而，仍需要更強的治療效果。正如上文所述，奧沙利鉬單獨使用時展現(xiàn)出低的抗腫瘤效果，原因之一是該藥劑 在腫瘤組織中的蓄積低。當(dāng)抗腫瘤劑給藥后，它可以從血液循環(huán)中迅速消失或被分布到健 康器官，因此，該抗腫瘤劑不能在腫瘤組織中有效蓄積。因此，很多抗腫瘤劑不能一直展現(xiàn) 出足夠的抗腫瘤活性，并且它們經(jīng)常對正常組織有不良影響(副作用)，造成嚴(yán)重的毒性。 增強抗腫瘤劑的功效是目前癌癥化療的重要目標(biāo)，并且亟需開發(fā)能夠使藥物在腫瘤中有效 蓄積的藥物送系統(tǒng)(DDS)。脂質(zhì)體是包含作為主要組分的磷脂的閉合囊泡，其磷脂來自生物材料。所以對活 體給藥時，脂質(zhì)體展現(xiàn)出低毒性和低抗原性。此外，一些報道表明將藥物封裝在脂質(zhì)體內(nèi)能夠控制藥物在血液中的穩(wěn)定性和生物分布，從而使其有效運載到靶組織的遞送效率得到改 善(專利文件6、7、8和非專利文件5)。已知諸如具有100-200nm粒徑的脂質(zhì)體的囊泡在腫 瘤中有效蓄積，因為存在于腫瘤的新生血管與健康組織中的血管相比顯示出相對高的通透 性(非專利文件6)。專利文件1 日本專利第2614164號專利文件2 日本專利第2557303號專利文件3 日本未審查的專利公開第1996-169825號專利文件4 日本未審查的專利公開第2002-205945號專利文件5 :W02005/120480專利文件6 :W095/24201專利文件7 日本專利第3415131號專利文件8 日本未審查的專利公開第2006-248978號非專利文件1 Journal of Clinical Oncology, Vol. 22, 23-30, 2004非專利文件2 Journal of Clinical Oncology，Vol. 21，2059-2069，2003非專利文件3 Journal of Clinical Oncology，Vol. 18，2938-2947，2000非專利文件4 Journal of Clinical Oncology，Vol. 22，2084-2091，2004非專利文件 5 Journal of Liposome Research, Vol. 4,667-687,1994非專利文件6 :Drug Delivery System, Vol. 14，433-447，1999發(fā)明公開內(nèi)容 本發(fā)明所要解決的問題本發(fā)明的首要目的是增強含有替加氟、吉莫斯特、氧嗪酸鉀的組合藥的抗腫瘤效 果，而不增加毒性。本發(fā)明的另一目的是提供抗腫瘤劑和試劑盒，其與含有替加氟、吉莫斯 特、氧嗪酸鉀的抗腫瘤劑聯(lián)合奧沙利鉬相比，展現(xiàn)出更好的抗腫瘤效果。解決問題的方法鑒于上述的現(xiàn)有技術(shù)，發(fā)明人進行了大量的研究來開發(fā)能明顯有助于延長患者生 存的治療癌癥的方法。結(jié)果，開發(fā)了含有1-0HP的脂質(zhì)體，該脂質(zhì)體是穩(wěn)定封裝鉬絡(luò)合物的 脂質(zhì)體制劑，并且具有適當(dāng)調(diào)整過的粒徑，所述鉬絡(luò)合物即順式-草酸(1R，2R-二氨基環(huán)己 烷)鉬(II)(通用名奧沙利鉬，商品名樂沙定(Eloxatin)或者益樂鉬定(Elplat)，下文 稱作1-0HP)。通過與含有1-0HP的脂質(zhì)體組合，包含替加氟、吉莫斯特、氧嗪酸鉀的組合藥 的抗腫瘤效果能得到顯著改善，而不增加副作用?；谶@些新發(fā)現(xiàn)，實現(xiàn)了本發(fā)明。特別地，如下文所述，本發(fā)明提供了抗腫瘤效果增強劑、抗腫瘤劑、抗腫瘤劑試劑
合絕
rm -vj- o第1項.抗腫瘤劑，其組合地包含脂質(zhì)體制劑以及組合藥，所述脂質(zhì)體制劑將奧沙 利鉬封裝在脂質(zhì)體內(nèi)，所述組合藥含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀。第2項.如第1項所述的抗腫瘤劑，其中至少一種構(gòu)成所述脂質(zhì)體的脂質(zhì)成分是 磷脂。第3項.如第2項所述的抗腫瘤劑，其中所述脂質(zhì)體的膜表面用聚乙二醇、甘油聚 合物或陽離子脂質(zhì)進行修飾。第4項.如第1至3項中任一項所述的抗腫瘤劑，其中使用的奧沙利鉬與替加氟
4的比例為0.1-5摩爾1摩爾。第5項.如第1項所述的抗腫瘤劑，其中在含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀的所 述組合藥中，使用的吉莫斯特與替加氟的比例為0.1-5摩爾1摩爾，且使用的氧嗪酸鉀與 替加氟的比例為0. 1-5摩爾1摩爾。第6項.如第1項所述的抗腫瘤劑，其中將所述抗腫瘤劑組成為試劑盒，所述試劑 盒包含脂質(zhì)體制劑以及組合藥，所述脂質(zhì)體制劑含有奧沙利鉬，所述組合藥含有替加氟、吉 莫斯特和氧嗪酸鉀。第7項.如第1項所述的抗腫瘤劑，其中所述脂質(zhì)體制劑通過靜脈內(nèi)、腹腔內(nèi)、肌 肉內(nèi)或皮下給藥，且含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀的所述組合藥經(jīng)口給藥。第8項.抗腫瘤效果增強劑，其為在脂質(zhì)體中含有有效量的奧沙利鉬的脂質(zhì)體制 劑，用于提高治療有效量的組合藥的抗腫瘤活性，所述組合藥含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪 酸鉀。第9項.如第8項所述的抗腫瘤效果增強劑，其中至少一種構(gòu)成所述脂質(zhì)體的脂 質(zhì)成分是磷脂。第10項.如第9項所述的抗腫瘤效果增強劑，其中脂質(zhì)體的膜表面用聚乙二醇、 甘油聚合物或陽離子脂質(zhì)進行修飾。第11項.如第8至10項中任一項所述的抗腫瘤效果增強劑，其中使用的奧沙利 鉬與替加氟的比例為0. 1-5摩爾1摩爾。第12項.如第8項所述的抗腫瘤效果增強劑，其中在含有替加氟、吉莫斯特和氧 嗪酸鉀的所述組合藥中，使用的吉莫斯特與替加氟的比例為0.1-5摩爾1摩爾，且使用的 氧嗪酸鉀與替加氟的比例為0. 1-5摩爾1摩爾。第13項.脂質(zhì)體制劑以及含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀的組合藥用于生產(chǎn)抗 腫瘤劑的用途，所述脂質(zhì)體制劑通過將奧沙利鉬封裝在脂質(zhì)體內(nèi)而獲得。第14項.脂質(zhì)體制劑用于生產(chǎn)抗腫瘤效果增強劑的用途，所述脂質(zhì)體制劑通過將 奧沙利鉬封裝在脂質(zhì)體內(nèi)而獲得。第15項.治療癌癥的方法，其特征在于將有效量的脂質(zhì)體制劑以及含有替加氟、 吉莫斯特和氧嗪酸鉀的組合藥給予癌癥患者，所述脂質(zhì)體制劑封裝有奧沙利鉬。本發(fā)明的效果與聯(lián)合使用1-0HP的情況相比，本發(fā)明的抗腫瘤效果增強劑能增強含有替加氟、 吉莫斯特、氧嗪酸鉀三種藥劑的組合藥的抗腫瘤效果，而不增加毒性，該組合藥是已知的抗 腫瘤劑。因此，本發(fā)明的抗腫瘤劑和抗腫瘤劑試劑盒達到了顯著的效果，即與含有替加氟、 吉莫斯特、氧嗪酸鉀三種藥劑的組合藥與1-0HP聯(lián)合使用的聯(lián)合療法相比，展現(xiàn)出更好的 抗腫瘤效果，而不增加毒性水平。本發(fā)明預(yù)期應(yīng)用于進一步延長癌癥患者生存的治療方法。附圖簡要說明

圖1顯示在測試實施例1中相對腫瘤體積的增長。圖2顯示在測試實施例1中小鼠體重的變化。圖3顯示在測試實施例2中相對腫瘤體積的增長。圖4顯示在測試實施例2中小鼠體重的變化。圖5顯示在測試實施例3中在細胞接種后的天數(shù)內(nèi)小鼠的存活。
圖6顯示在測試實施例4中在細胞接種后的天數(shù)內(nèi)小鼠的存活。圖7顯示在測試實施例5中相對腫瘤體積的增長。圖8顯示在測試實施例6中相對腫瘤體積的增長。圖9顯示在測試實施例6中小鼠體重的變化。圖10顯示在測試實施例7中在細胞接種后的天數(shù)內(nèi)小鼠的存活。實施本發(fā)明的最佳方式(1)抗腫瘤效果增強劑本發(fā)明提供了抗腫瘤效果增強劑來增強治療有效量的組合藥的抗腫瘤活性，所述 組合藥含有治療有效量的替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀?？鼓[瘤效果增強劑被制備為脂質(zhì) 體制劑，該脂質(zhì)體制劑通過將用于改善抗腫瘤效果的治療有效量的奧沙利鉬(1-0HP)封裝 在由至少一種脂質(zhì)成分組成的脂質(zhì)體內(nèi)而獲得。(1-1)脂質(zhì)體制劑1-0HP1-0HP是已知的鉬絡(luò)合物的化合物。1-0HP在癌細胞內(nèi)與DNA結(jié)合，然后誘導(dǎo)DNA 功能的中斷和DNA鏈斷裂，導(dǎo)致該藥劑產(chǎn)生針對癌細胞的細胞毒性。1-0HP可以按照已知方 法產(chǎn)生，例如，在日本審查的專利公開第1985-41077號中公開的方法。脂質(zhì)體本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑中使用的脂質(zhì)體是由水中分散的磷脂形成的囊泡并且有被 脂膜包圍的內(nèi)部水相，所述磷脂是細胞膜的主要成分。脂質(zhì)體可以根據(jù)粒徑和脂層的數(shù)目 分成三類，即多層囊泡MLV，大單層囊泡LUV和小單層囊泡SUV。任何類型脂質(zhì)體可以用 于本發(fā)明。本發(fā)明中使用的脂質(zhì)體需要在對機體給藥之前和之后具有穩(wěn)定形態(tài)。形成脂質(zhì) 體的磷脂的實例包括氫化的純化蛋黃磷脂酰膽堿(相變溫度為50°C，下文稱作HEPC)，氫化 的精制大豆磷脂酰膽堿(相變溫度為約55°C，下文稱作HSPC)，二棕櫚酰磷脂酰膽堿(相 變溫度為約41°C，下文稱作DPPC)，二硬脂酰磷脂酰膽堿(相變溫度為約58°C，下文稱作 DSPC)和1-棕櫚酰-2-油酰磷脂酰膽堿(相變溫度為約_3°C )。在這些當(dāng)中，HEPC、HSPC、 DPPC和DSPC是優(yōu)選的。在本說明書中，氫化的純化蛋黃磷脂酰膽堿意指通過來自蛋黃的磷脂酰膽堿的氫 化作用獲得的。在優(yōu)選的實施方案中使用的氫化的純化蛋黃磷脂酰膽堿的一個實例包含作 為主要成分的磷脂酰膽堿，其?；糠质莵碜燥柡椭辨溨舅岬腃16_18酰基。在本發(fā)明中， 氫化的純化蛋黃磷脂酰膽堿是通過純化氫化的蛋黃磷脂酰膽堿獲得的；并且，例如，那些純 度不小于80%以及優(yōu)選地那些純度不小于90%的氫化的蛋黃磷脂酰膽堿是可用的。在本說明書中，氫化大豆磷脂酰膽堿意指通過來自大豆的磷脂酰膽堿的氫化作用 獲得的。在優(yōu)選的實施方案中使用的氫化大豆磷脂酰膽堿的一個實例包含作為主要成分的 磷脂酰膽堿，其?；糠质莵碜燥柡椭辨溨舅岬腃16_18?；?。在本發(fā)明中，氫化的精制大 豆磷脂酰膽堿是通過精煉氫化大豆磷脂酰膽堿獲得的；并且，例如，那些純度不小于80% 以及優(yōu)選地那些純度不小于90%的氫化大豆磷脂酰膽堿是可用的。這些磷脂可以單獨使用或兩種或更多種聯(lián)合使用。通過使用具有不同相變溫度的 磷脂，脂質(zhì)體雙分子脂膜的流動性可以改變。這就允許鑒于封裝率、在藥物制劑中的穩(wěn)定 性、給藥后體內(nèi)動力學(xué)等選擇最合適的磷脂。
除了這些磷脂外，本發(fā)明中使用的脂質(zhì)體優(yōu)選地與穩(wěn)定劑混合，例如據(jù)報道可以 改善脂質(zhì)體或其衍生物的穩(wěn)定性的膽固醇。此外，如必要的話，通過用從選自聚乙二醇、甘 油聚合物或者類似親水性高分子材料的配體，包含氨基、脒基、胍基或者類似堿性功能基的 脂(下文稱作陽離子脂質(zhì))，或者肽、凝集素、抗體、糖類、糖蛋白、糖脂等對脂質(zhì)體膜表面進 行修飾，脂質(zhì)體的血液中穩(wěn)定性、組織分布、向腫瘤組織的移行性等可以進一步改善。在本發(fā)明中，“聚乙二醇(polyethylene glycol) ”不僅包括未被取代的聚乙二醇， 還包括其親脂(疏水的)側(cè)鏈形成共價鍵后的衍生物。親脂側(cè)鏈的具體實例包括烷基鏈、 磷脂和膽固醇。通常用于改善脂質(zhì)體的穩(wěn)定性的多種聚乙二醇的衍生物可以用于本發(fā)明。 相似地，本發(fā)明的“甘油聚合物(polyglycerin) ”不僅包括未被取代的甘油聚合物，還包括 其親脂(疏水的)側(cè)鏈形成共價鍵的衍生物。親脂側(cè)鏈的具體實例包括烷基鏈、磷脂和膽 固醇。通常用于改善脂質(zhì)體的穩(wěn)定性的多種甘油聚合物衍生物可以用于本發(fā)明。此外，也 可以加入甘油、葡萄糖、氯化鈉等可以作為等滲劑加入。此外，苯甲酸酯類、氯丁醇、苯甲醇、 丙二醇等防腐劑。脂質(zhì)體制劑本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑可以通過已知方法產(chǎn)生。用于產(chǎn)生脂質(zhì)體制劑的已知方法 的實例包括逆向蒸發(fā)法(Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 75，4194，1978，W097/48398)，凍 融法(Arch. Biochem. Biophys, Vol. 212，186，1981)，pH 梯度法(Biochem. Biophys. Acta, Vol. 816，294，1985，日本未審查的專利公開第1995-165560號)等。這些方法中，當(dāng)使用逆向蒸發(fā)法時，本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑按照下述過程產(chǎn)生。例 如，脂質(zhì)成分溶解在氯仿、乙醚、乙醇或相似溶劑，并將得到的溶解物置于梨形瓶內(nèi)。溶劑通 過減壓蒸發(fā)去除，形成脂質(zhì)薄膜。隨后，加入含有氯仿和二乙醚的混合液來溶解薄膜，氯仿 / 二乙醚的比例為1/2。向其中加入含有活性劑的水溶液，并將混合物在25°C超聲15分鐘 來獲得乳劑。在漩渦振蕩的同時，通過在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中蒸發(fā)一小時將得到的乳劑的有機相 去除以將w/o乳劑轉(zhuǎn)變?yōu)閛/w乳劑。由此形成脂質(zhì)體并且藥劑被封裝在脂質(zhì)體中。上述過 程允許將藥劑封裝在脂質(zhì)體中。據(jù)報道脂質(zhì)體的粒徑強烈影響其有效載荷的生物分布和腫瘤蓄積(Biol. Pharm. Bull.，Vol. 17，935，1994)。在本發(fā)明中，優(yōu)選進行顆粒定徑以獲得在其中含有藥劑的 理想的、尺寸一致的脂質(zhì)體。例如，使用生物破碎儀(biodisruptor)(日本精機株式會 社(Nippon Seiki Co.，Ltd.)制造，等)進行超聲處理或者使用nanomizer (吉田機械 (Yoshida Kikai Co.，Ltd.)制造)實施高壓乳化等，脂質(zhì)體的粒徑可以調(diào)整到具有約 100-200nm的平均顆粒直徑?？蛇x地，在氮氣壓力下，使用不同聚碳酸酯膜濾器(0.4i!m、 0.2i!m、0. lym和0. 08 u m)將含有脂質(zhì)體的溶液進行定徑，脂質(zhì)體的粒徑可以調(diào)整到具有 約100-300nm的平均顆粒直徑。在本發(fā)明中，術(shù)語“平均顆粒直徑(average particle diameter) ”表示使用 NIC0MP 370 HPL亞微米顆粒分析儀(由Particle Sizing System公司制造)通過光散射 法測量的平均顆粒直徑。必要時，通過用聚乙二醇、甘油聚合物、陽離子脂質(zhì)或配體例如肽、凝集素、抗體、 糖類、糖蛋白或糖脂對脂質(zhì)體膜表面進行修飾，脂質(zhì)體的血液中穩(wěn)定性、組織分布和腫瘤定 位可以進一步改善。
7
本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑也可以由專利文件7(日本專利第3415131號)或?qū)＠?件8(日本未審查的專利公開第2006-248978號)的方法產(chǎn)生，這些文件公開了奧沙利鉬 (1-0HP)脂質(zhì)體制劑。在優(yōu)選的實施方案中，利用作為1-0HP溶液的溶液產(chǎn)生本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑，該 溶液是通過以1-0HP的濃度變?yōu)閘-20mg/ml的方式將1-0HP溶解到的葡萄糖溶液中 獲得的。必要時，如此獲得的含1-0HP的脂質(zhì)體制劑可以被超速離心、凝膠過濾、超濾和透 析。這些處理可以適當(dāng)?shù)貑为氝M行或聯(lián)合進行，由此去除沒有封裝在脂質(zhì)體中的藥劑。通過上述方法獲得的含1-0HP的脂質(zhì)體制劑可以直接使用。然而，鑒于儲存時間、 條件等，含1-0HP的脂質(zhì)體制劑可以在加入賦形劑例如甘露醇、海藻糖、乳糖、甘氨酸后凍 干?？蛇x地，含1-0HP的脂質(zhì)體制劑可以在加入凍存劑例如甘油后冷凍保存。在優(yōu)選的實施方案中，1-0HP脂質(zhì)體制劑含有的奧沙利鉬的量為l-50i!g/mg脂 類，以及優(yōu)選地5-40 u g/mg脂類。本發(fā)明的含1-0HP的脂質(zhì)體制劑具有優(yōu)選為50-300nm和更優(yōu)選為80-200nm的平
均顆粒直徑。含1-0HP的脂質(zhì)體制劑通常用生理學(xué)上可接受的水溶液懸浮或稀釋，然后作為注 射制劑(靜脈內(nèi)、腹腔內(nèi)、肌肉內(nèi)或皮下給藥制劑)使用；然而，含1-0HP的脂質(zhì)體制劑也可 以作為口服制劑、滴鼻劑、吸入劑、栓劑、經(jīng)皮吸收制劑、經(jīng)粘膜吸收制劑等使用。在此情況 下，按照通常的方法，使用合適的載體將含1-0HP的脂質(zhì)體制劑形成為制劑組合物。本文中 可用的載體是在常規(guī)藥物制劑中常用的那些。其具體實例包括賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤 滑劑、著色劑、增味劑、增香劑、表面活性劑等。下文描述了含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀的組合藥的實例，其抗腫瘤效果可 以被本發(fā)明的抗腫瘤效果增強劑加強。(1-2)含有替力DiU吉H其財寺禾n氧,卩泰II鉀的組合藥替加氟替加氟(通用名，化學(xué)名稱5_氟-1- (2-四氫呋喃基)-2，4- (1H，3H)-嘧啶二酮) 是已知化合物，其在體內(nèi)被激活釋放5-FU，即發(fā)揮抗腫瘤活性的活性形式。可以按照已知方 法生產(chǎn)替加氟，例如，在日本審查的專利公開第1974-10510中公開的方法。吉莫斯特吉莫斯特(通用名，化學(xué)名稱2，4_ 二羥基-5-氯吡啶)也是已知化合物，并且它 本身不展現(xiàn)任何抗腫瘤活性。然而，它能夠在體內(nèi)抑制5-FU的代謝失活，引起5-FU抗腫瘤 效果增加。氧嗪酸鉀氧嗪酸鉀(通用名，化學(xué)名稱1，2，3，4-四氫-2，4_ 二氧-1，3，5_三嗪-6-羧酸 鉀)也是已知化合物，盡管它本身不展現(xiàn)任何抗腫瘤活性，但是它主要停留在胃腸道內(nèi)，抑 制胃腸道內(nèi)5-FU的活化，從而阻止5-FU引起的胃腸道病癥。關(guān)于含有三種成分，即作為活性成分的替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀的組合藥， 每種活性成分的比例可以在與已知藥劑有關(guān)的描述的范圍內(nèi)，諸如例如在專利公開第 2614164號中公開的。比例通常如下述每1摩爾的替加氟，吉莫斯特的使用比例為約
80. 1-5摩爾并且優(yōu)選地約0. 2-1. 5摩爾，以及氧嗪酸鉀的使用比例為約0. 1-5摩爾并且優(yōu) 選地約0. 2-2摩爾。三種成分特別優(yōu)選的比例為替加氟吉莫斯特氧嗪酸鉀的摩爾比= 1 0.4 1。含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀作為活性成分的組合藥可以制備為包含兩種或 更多種藥劑的藥物形式，其中每種藥劑含有一種所述活性成分或者每種藥劑含有所述活性 成分的任意組合；或者制備為包含單一藥劑的藥物形式，該藥劑含有全部所述活性成分。在 任何一種情況下，按照通常的方法、使用合適的藥物載體將該組合藥制備成藥物組合物。本 文中可用的載體是在常規(guī)藥物制劑中常用的那些，例如賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、著 色劑、增味劑、增香劑、表面活性劑等。當(dāng)使用包含兩種或更多種藥劑的藥物形式的組合藥時，每種藥劑可以同時給藥， 或者一種藥劑可以在另外的藥劑給藥之前或之后的任意時間給藥。優(yōu)選地，所有藥劑同時 給藥，或者一種藥劑在另外的藥劑給藥之前或之后的4小時內(nèi)，更優(yōu)選地2小時內(nèi)給藥。(1-3)給藥方法上述的抗腫瘤效果增強劑(即含1-0HP的脂質(zhì)體制劑)可以與包含三種成分，即 作為活性成分的替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀的組合藥分別給藥或同時給藥，所述組合藥 被制備成單位劑量形式。更具體地，本發(fā)明的抗腫瘤效果增強劑可以與抗腫瘤劑同時給藥 或在抗腫瘤劑給藥之前或之后的任意時間給藥，所述抗腫瘤劑含有三種成分，即替加氟、吉 莫斯特和氧嗪酸鉀作為活性成分。優(yōu)選地，抗腫瘤效果增強劑與抗腫瘤制劑同時給藥，或者 在抗腫瘤制劑給藥之前或之后的4小時內(nèi)，優(yōu)選地在抗腫瘤制劑給藥之前或之后的2小時 內(nèi)給藥。當(dāng)連續(xù)給藥時，應(yīng)適當(dāng)選擇抗腫瘤劑和抗腫瘤效果增強劑的給藥頻率和給藥間隔 時間。當(dāng)含1-0HP的脂質(zhì)體制劑與含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀三種活性成分的抗 腫瘤制劑同時或分別給藥時，抗腫瘤效果增強劑的給藥量優(yōu)選使得對于每1摩爾替加氟， 1-0HP的量為約0. 1-5摩爾，優(yōu)選地約0. 1-3摩爾，更優(yōu)選地約0. 2-2摩爾。(2)抗腫瘤劑本發(fā)明提供了抗腫瘤劑，其包含含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀三種活性成分 的組合藥以及與之組合的抗腫瘤效果增強劑(含1-0HP的脂質(zhì)體制劑)?？鼓[瘤劑可以為包 含多種藥劑的藥物制劑，其中每種藥劑含有上述的四種成分，即上述的三種成分和含1-0HP 的脂質(zhì)體的一種，或每種藥劑含有這些成分的任意組合；或者抗腫瘤劑可以為包含單一藥 劑的藥物形式，該藥劑包括所有成分。更具體地，本發(fā)明的抗腫瘤劑可以制成含有所有上述 4種成分的單劑型，或包含含有1-3種成分的藥劑以及含有其余成分的一種或多種藥劑的 多劑型。特別優(yōu)選的實例是兩部分制劑，其中，含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀三種成分 作為活性成分的藥劑，與含有封裝在脂質(zhì)體制劑中的1-0HP的藥劑作為分別的劑型呈現(xiàn)。關(guān)于抗腫瘤制劑，不管其由單一藥劑或多重藥劑組成，組成成分的比例不受限制。 通常，對每1摩爾替加氟，吉莫斯特的使用比例為約0. 1-5摩爾并且優(yōu)選地約0. 2-1. 5摩 爾；氧嗪酸鉀的使用比例為約0. 1-5摩爾并且優(yōu)選地約0. 2-2摩爾；以及1-0HP的使用比 例約0. 1-5摩爾，優(yōu)選地約0. 1-3摩爾，更優(yōu)選地約0.2-2摩爾。特別地，組成成分優(yōu)選 摩爾比為替加氟吉莫斯特氧嗪酸鉀1-0HP =約1 0.4 1 0. 1-5，更優(yōu)選地約 1 0.4 1 0. 1-3，特別優(yōu)選地約1 0.4 1 0.2-2。當(dāng)抗腫瘤制劑是兩劑型，其中含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀三種成分作為活性成分的藥劑與含1-0HP的脂質(zhì)體作 為上述分別的劑型呈現(xiàn)時，抗腫瘤劑優(yōu)選地包括組合藥和藥物制劑，該組合藥含有摩爾比 為1 0.4 1的替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀，該藥物制劑含有1-0HP，對于每1摩爾替加 氟，1-0HP的比例為約0. 1-5摩爾，優(yōu)選地約0. 1-3摩爾，更優(yōu)選地約0. 2-2摩爾?？梢园凑諛?biāo)準(zhǔn)方法，使用合適的藥物載體將活性成分制備為藥物組合物。本文中 可用的載體是在常規(guī)藥物制劑中常用的那些，例如賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、著色 劑、增味劑、增香齊IJ、表面活性劑等。當(dāng)使用如上文所述的具有多劑型和包含兩種或多種藥劑的抗腫瘤制劑時，每種藥 劑可以同時給藥，或者每種藥劑可以在另外的藥劑給藥之前或之后的任意時間給藥。優(yōu)選 地，所有藥劑同時給藥，或者一種藥劑在另外的藥劑給藥之前或之后的4小時內(nèi)，更優(yōu)選地 2小時內(nèi)給藥。(3)試劑盒本發(fā)明提供了包含含1-0HP的脂質(zhì)體制劑與含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀的 組合藥的試劑盒。更具體地，本發(fā)明提供了用于哺乳動物癌癥治療的試劑盒，所述試劑盒包 含(a)抗腫瘤組合物，其含有治療有效量的替加氟、用于增強抗腫瘤效果的有效量的 吉莫斯特和用于抑制副反應(yīng)的有效量的氧嗪酸鉀，和(b)脂質(zhì)體制劑，其封裝有用于增強抗腫瘤效果的有效量的1-0HP。包含在該試劑盒中的組合物可以為任意已知的藥物形式。根據(jù)其藥物形式，通常 將組合物置于任一常用的容器內(nèi)。該試劑盒用于治療哺乳動物癌癥并且包含(i)治療有效量的替加氟，(ii)有效增強抗腫瘤效果的量的吉莫斯特，(iii)有效抑制副反應(yīng)的量的氧嗪酸鉀；這些都是抗腫瘤組合物的部分，和(iv)含有有效增強抗腫瘤效果的量的1-0HP的脂質(zhì)體。該試劑盒為這些成分包含至少2個容器，并且替加氟和1-0HP包裝在分別的容器 內(nèi)。上述成分(i)至(iv)優(yōu)選地在與藥學(xué)上可接受的載體聯(lián)合制備的藥物形式內(nèi)。關(guān)于 上述試劑盒，只要成分⑴和(iv)是儲存在分別的容器內(nèi)，成分(ii)和(iii)可以獨立儲 存在與上述兩種成分儲存的容器分開的容器內(nèi)，或者成分(ii)和(iii)可以與成分(i)或 (iv)獨立地混合以儲存在相同的容器內(nèi)。優(yōu)選的試劑盒為含有成分(i)至(iii)的藥劑 儲存在一個容器內(nèi)，含有成分(iv)的藥劑儲存在另一個容器內(nèi)。用于治療患惡性腫瘤的包括人類在內(nèi)的哺乳動物的本發(fā)明的抗腫瘤劑的可用單 位劑型不受限制，并且可以根據(jù)治療目的適當(dāng)選擇。具體實例為注射劑、栓劑、眼藥水、軟 膏、氣霧劑等腸胃外形式；藥片、包衣片劑、粉劑、顆粒劑、膠囊、液體劑、九劑、懸液、乳劑等 口服形式?？梢园凑毡炯夹g(shù)領(lǐng)域熟知的方法生產(chǎn)出這些劑型的抗腫瘤劑。作為本發(fā)明的抗腫瘤制劑的活性成分的替加氟、吉莫斯特、氧嗪酸鉀和1-0HP的 量根據(jù)劑型、給藥途徑、劑量安排等有所不同，并且不受限制，因此可以適當(dāng)選擇。通常優(yōu)選 的是活性成分的比例為藥物制劑的約至約70%的重量。本發(fā)明的藥物制劑的給藥方法不受限制，并且可以根據(jù)其形式、年齡、性別、患者的情況和其他因素來決定；因此，可以腸內(nèi)給藥、口服給藥、直腸給藥、口內(nèi)給藥、動脈內(nèi)給 藥、靜脈內(nèi)給藥、經(jīng)皮給藥或以類似的方式給藥。例如，藥片、丸劑、溶液、懸液、乳劑、顆粒 劑、膠囊等是口服給藥；注射劑是動脈內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥；栓劑是直腸內(nèi)給藥；軟膏是應(yīng)用于 皮膚，口腔粘膜等。關(guān)于本發(fā)明的藥物制劑，可能含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀的藥劑 為口服給藥，而封裝在脂質(zhì)體中的1 "0HP藥劑靜脈內(nèi)給藥。本發(fā)明中每種活性成分的劑量可以根據(jù)應(yīng)用、患者年齡和性別、疾病的程度和其 他因素適當(dāng)選擇。本發(fā)明的抗腫瘤效果增強劑和抗腫瘤制劑可以每天給藥1-4齊IJ。在口服給藥中，給予本發(fā)明的藥物制劑的量優(yōu)選地使用以下范圍作為標(biāo)準(zhǔn)替加 氟的量為約0. l-100mg/kg/天，優(yōu)選地約0. 2-40mg/kg/天，更優(yōu)選地約0. 5_20mg/kg/天； 吉莫斯特的量為約0. 02-30mg/kg/天，優(yōu)選地約0. 05-12mg/kg/天，更優(yōu)選地約0. l_6mg/ kg/天；氧嗪酸鉀的量為約0. l-100mg/kg/天，優(yōu)選地約0. 2-40mg/kg/天，更優(yōu)選地約 0. 5-20mg/kg/ 天；以及 1-0HP 的量為約 0. 08-200mg/kg/ 天，優(yōu)選地約 0. 15_80mg/kg/ 天， 更優(yōu)選地約0. 4-40mg/kg/天。當(dāng)藥物制劑為注射形式時，能夠在5分鐘或更長時間將其逐步給予成年人，通常 的量相當(dāng)于約0. l-100mg/kg/天的替加氟和約0. 08-200mg/kg/天的1-0HP，必要時可以將 該藥物制劑用葡萄糖水溶液稀釋。當(dāng)本發(fā)明的藥物制劑為栓劑形式時，通過將其插入直腸 每天對成年人給藥1次或2次，間隔時間6-12小時，通常的量相當(dāng)于約0. l-100mg/kg/天 的替加氟和約0. 08-200mg/kg/天的1-0HP。通過本發(fā)明的藥物制劑的給藥可以治療的惡性腫瘤的類型不受限制，只要活性形 式，即5-FU在其中起反應(yīng)；例如肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、直腸癌、食道癌、乳腺癌、頭頸部癌、肝 癌、膽囊癌/膽管癌、胰腺癌、子宮癌、宮頸癌、卵巢癌、腎癌、膀胱癌、前列腺癌、咽癌、腦瘤、 白血病、黑色素瘤、惡性淋巴瘤等。特別地，能夠預(yù)期本發(fā)明的藥物制劑對結(jié)腸癌、腎癌、胃 癌、食道癌、乳腺癌和頭頸部癌具有顯著效果。此外，也能夠預(yù)期對典型的藥物抗性腫瘤和 正在發(fā)生藥物抗性正的腫瘤具有顯著效果。
實施例下文給出的實施例和測試實施例是為了更詳細地示例本發(fā)明，但是本發(fā)明的范圍 不被這些實施例和測試實施例所限制。實施例1將DPPC(L_a - 二棕櫚酰磷脂酰膽堿，Coatsome MC-6060，N0F公司制造)、膽固 醇(特級，由和光純藥工業(yè)株式會社(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.)制造)和 mPEG2Q(1(1-DSPE(l，2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-n-[甲氧基(聚乙二醇)-2000]， Sunbright DSPE-020CN, N0F公司制造)溶解到氯仿中獲得分別為20mM、50mM和5mM的濃 度。隨后，將5ml的20mM DPPC溶液、0. 5ml的50mM膽固醇溶液和1ml的5mM mPEG2_-DSPE 溶液置于梨形瓶中。在使用蒸發(fā)儀減壓的同時，去除氯仿以在梨形瓶底部形成脂質(zhì)薄膜。脂 質(zhì)薄膜用6ml的氯仿/ 二乙醚(體積比1 2)溶解。將1-0HP溶解在5%的葡萄糖溶液中 以使1-0HP的濃度變成8mg/ml。將由此制備好的1-0HP溶液(2ml)加入到脂質(zhì)溶液，然后混 合。得到的混合物在25°C超聲15分鐘以形成w/o乳液，以及在漩渦振蕩的同時，使用蒸發(fā) 儀減壓下將有機相去除；從而將1-0HP封裝在脂質(zhì)體中。使用生物破碎儀(biodisruptor)
11(日本精機株式會社(Nippon Seiki Co.，Ltd.))進行顆粒定徑的超聲處理，以便在其中包 含藥劑的脂質(zhì)體的平均顆粒直徑稍小于200nm。為了去除沒有封裝在脂質(zhì)體內(nèi)的藥劑，在 用磁力攪拌器攪拌的同時，使用透析盒(Slide-A-Lyzer透析盒，10000 MWC0，賽默飛世爾科 技公司(Thermo Scientific Inc.)制造)和作為外部溶液的5%的葡萄糖溶液，在4°C下 進行2小時的透析。更換外部溶液后，攪拌的同時進行另一次2小時的透析，因此獲得了含 1-0HP的脂質(zhì)體制劑。這樣制備的的含1-0HP的脂質(zhì)體制劑具有185. 2士 14. 9nm(n = 5)的 平均顆粒直徑。在本發(fā)明的實施例中，脂質(zhì)體制劑的平均顆粒直徑通過使用NIC0MP 370 HPL亞微 米顆粒分析儀(Particle Sizing System公司制造)通過光散射法測量。實施例2將HSPC(氫化大豆磷脂酰膽堿，Coatsome NC-21，由N0F公司制造)、膽固醇 (特級，由和光純藥工業(yè)株式會社(Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)制造)和 mPEG2Q(1(1-DSPE(l，2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-n-[甲氧基(聚乙二醇)-2000]， Sunbright DSPE-020CN, N0F公司制造)溶解到氯仿中獲得分別為20mM、50mM和5mM的濃 度。隨后,將5ml的20mM HSPC溶液、lml的50mM膽固醇溶液和2ml的5mMmPEG2(l(l(l-DSPE溶 液置于梨形瓶中。在使用蒸發(fā)儀減壓的同時，將氯仿去除以在梨形瓶底部形成脂質(zhì)薄膜。脂 質(zhì)薄膜用6ml的氯仿/ 二乙醚(體積比1 2)溶解。將1-0HP溶解在5%的葡萄糖溶液 中以使1-0HP的濃度變成8mg/ml。將由此制備好的1-0HP溶液(2ml)加入到脂質(zhì)溶液，然 后混合。得到的混合物在35°C超聲15分鐘以形成w/o乳液，以及在漩渦振蕩的同時，使用 蒸發(fā)儀在減壓下去除有機相約1小時；從而1-0HP被封裝在脂質(zhì)體中。此后，按照與實施1 中相同的方式控制粒徑并去除未封裝的藥劑，從而獲得了 1-0HP脂質(zhì)體制劑。以此方式制 備的含1-0HP的脂質(zhì)體制劑具有197. 9士22. 0nm(n = 5)的平均顆粒直徑。實施例3按照與實施例1中相同的方式制備含1-0HP的脂質(zhì)體制劑，除了用 PG-DSPE (Sunbright DSPE-PG10G，N0F 公司制造)代替了 mPEG2(l(l(l-DSPE。以此方式制備的 含1-0HP的脂質(zhì)體制劑具有130. 4士48. 3nm(n = 5)的平均顆粒直徑。實施例4將HSPC(氫化大豆磷脂酰膽堿，Coatsome NC-21, N0F公司制造)、膽固醇(特級， 由和光純藥工業(yè)株式會社(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.)制造)、DC-6-14 (陽 離子脂質(zhì)，0，0’ - 二肉豆蔻酰-N_(a-三甲基乙酰銨)氯二乙醇胺，Sogo藥業(yè)株式會社 制造)和!^￡62000-05 ￡(1，2-二硬脂酰-卯-甘油-3-磷酸乙醇胺-11-[甲氧基(聚乙二 醇)-2000]，Sunbright DSPE-020CN, N0F公司制造)溶解到氯仿中獲得分別為20mM、50mM 和5mM的濃度。隨后，將5ml的20mM HSPC氯仿溶液、lml的50mM膽固醇氯仿溶液和2ml的 5mM DC-6-14和5mM的mPEG2_-DSPE氯仿溶液置于梨形瓶中。在使用蒸發(fā)儀減壓的同時，將 氯仿去除以在梨形瓶底部形成脂質(zhì)薄膜。脂質(zhì)薄膜用6ml的氯仿/ 二乙醚(體積比1 2) 溶解。將1-0HP溶解在5%的葡萄糖溶液中以使1-0HP的濃度變成8mg/ml。將由此制備的 1-0HP溶液(2ml)加入到脂質(zhì)溶液，然后混合。得到的混合物在35°C超聲15分鐘，以及在 漩渦振蕩的同時，使用蒸發(fā)儀在減壓下去除有機溶劑約1小時；從而將1-0HP封裝在脂質(zhì)體 中。此后，按照與實施例1相同的方式控制粒徑和去除未封裝的藥劑，從而獲得了 1-0HP脂質(zhì)體制劑。這樣制備的含1-0HP的脂質(zhì)體制劑具有202. 4士 14. 7nm(n = 5)的平均顆粒直徑。測試實施例1藥物制劑的劑型使用實施例1中獲得的含1-0HP的脂質(zhì)體制劑(下文稱作DPPC脂質(zhì)體1-0HP)。通過將1-0HP溶解在5%的葡萄糖溶液中制備了 1-0HP制劑(下文稱作游離 l-0HP(free 1-0HP))。通過將封裝在TS-1膠囊中的內(nèi)容物溶解在水中制備了 TS-1制劑(下文稱作 TS-1)藥物制劑的抗腫瘤效果和副作用在5% C02、37°C下，將高轉(zhuǎn)移性的肺癌細胞，即Lewis肺癌(LLC)培養(yǎng)在10%胎牛 血清的DMEM中。含有5 X 106個細胞/mL的0. lml LLC細胞經(jīng)皮下注射到雄性C57BL/6小 鼠(5周齡，體重為20g)的背部，以獲得攜帶實體瘤的小鼠。經(jīng)證實，距LLC細胞輸注6天， 按照下面公式計算出的腫瘤體積超過50mm3。DPPC脂質(zhì)體1-0HP或游離1-0HP靜脈內(nèi)給藥，劑量按照1-0HP為4. 2mg/kg。TS_1 口服給藥，劑量按照替加氟為6. 9mg/kg。DPPC脂質(zhì)體1-0HP和游離1-0HP在細胞接種后的 第13天和第20天給藥，TS-1從細胞接種后6天直到實驗結(jié)束每天給藥。從細胞接種后6天，腫瘤體積按照下面公式計算。使用相對腫瘤體積比作為指標(biāo) 評價抗腫瘤作用。腫瘤體積=l/2XaXb2(a 腫瘤位置的長軸，b 腫瘤位置的短軸)小鼠體重的變化作為副作用指標(biāo)進行監(jiān)測。從圖1所示結(jié)果清楚看到，DPPC脂質(zhì)體1-0HP與TS-1的聯(lián)合療法比游離1-0HP 與TS-1的聯(lián)合顯示出更好的抗腫瘤效果。然而，圖2所示的結(jié)果表明，體重變化在TS-1與 DPPC脂質(zhì)體1-0HP聯(lián)合和TS-1與游離1-0HP聯(lián)合間無顯著差異。未觀察到毒性顯著增加。測試實施例2以與測試實施例1中相同的方式評價抗腫瘤效果與副作用，除了使用了實施例2 中獲得的含1-0HP的脂質(zhì)體制劑(下文稱作HSPC脂質(zhì)體1-0HP)。從圖3所示的結(jié)果清楚看到，HSPC脂質(zhì)體1-0HP與TS_1的聯(lián)合療法比游離1-0HP 與TS-1的聯(lián)合顯示出更好的抗腫瘤效果。然而，圖4所示的結(jié)果清楚顯示出體重變化在 TS-1與HSPC脂質(zhì)體1-0HP和TS-1與游離1-0HP的聯(lián)合間無顯著差異。未觀察到毒性顯著 增加。測試實施例3按照與測試實施例1相同的方式制備了藥物制劑。將得到的藥物制劑給予攜帶腫 瘤的小鼠，并監(jiān)測小鼠的存活天數(shù)。從圖5所示的結(jié)果清楚看到，當(dāng)TS-1與DPPC脂質(zhì)體1-0HP聯(lián)合給藥時，存活率高 于與游離1-0HP聯(lián)合的情況。測試實施例4按照與測試實施例2相同的方式制備了藥物制劑。將得到的藥物制劑給予攜帶腫瘤的小鼠，并監(jiān)測小鼠的存活天數(shù)。從圖6所示的結(jié)果清楚看到，當(dāng)TS-1與HSPC脂質(zhì)體1-0HP聯(lián)合給藥時，存活率高 于與游離1-0HP聯(lián)合的情況。測試實施例5以與測試實施例1中的相同的方式評價抗腫瘤效果，除了使用了實施例3中獲得 的含1-0HP的脂質(zhì)體制劑(下文稱作PG10脂質(zhì)體1-0HP)。從圖7所示的結(jié)果清楚看到，PG10脂質(zhì)體1-0HP與TS-1的聯(lián)合療法比游離1-0HP 與TS-1的聯(lián)合顯示出更好的抗腫瘤效果。測試實施例6藥物制劑的劑型按照與測試實施例2相同的方式配制了藥物制劑。藥物制劑的抗腫瘤效果和副作用在5% C02、37°C下，將小鼠結(jié)腸癌細胞，即Colon 26培養(yǎng)在10%胎牛血清的DMEM 中。含有2X 107個細胞/mL的0. lml的Colon 26細胞皮下注射到雄性BALB/c小鼠(5周 齡，體重為20g)的背部，以獲得攜帶實體瘤的小鼠。經(jīng)證實，Colon 26細胞接種后7天，按 照下面公式計算出的腫瘤體積超過50mm3。HSPC脂質(zhì)體1-0HP或游離1-0HP通過靜脈內(nèi)給藥，劑量按照1-0HP為4. 2mg/kg。 TS-1 口服給藥，劑量按照替加氟為6. 9mg/kg。HSPC脂質(zhì)體1-0HP和游離1-0HP在細胞接種 后的第14天和第21天給藥，TS-1從細胞接種后7天直到實驗結(jié)束每天給藥。以與測試實施例2中相同的方式評價了其他的抗腫瘤效果與副作用。從圖8所示的結(jié)果清楚看到，HSPC脂質(zhì)體1-0HP加TS_1的聯(lián)合療法的抗腫瘤效 果高于游離1-0HP加TS-1的聯(lián)合。然而，圖9所示結(jié)果清楚表明，體重變化在TS-1與HSPC 脂質(zhì)體1-0HP和TS-1與游離1-0HP的聯(lián)合療法間無顯著差異。也就是說，未觀察到毒性顯 著增加。測試實施例7按照與測試實施例6相同的方式配制了藥物制劑。將得到的藥物制劑給予攜帶腫 瘤的小鼠，并監(jiān)測小鼠的存活天數(shù)。從圖10所示的結(jié)果清楚看到，與游離1-0HP加TS-1的聯(lián)合相比，HSPC脂質(zhì)體 1-0HP加TS-1的聯(lián)合療法顯示了延長的存活率。以上顯示的結(jié)果表明通過把1-0HP封裝在脂質(zhì)體中，即含1-0HP的脂質(zhì)體制劑，含 1-0HP的脂質(zhì)體與TS-1聯(lián)合時的抗腫瘤效果與存活率可以顯著增加，而毒性水平與1-0HP 和TS-1聯(lián)合給藥的情況幾乎相同?？鼓[瘤活性的增加可能歸功于1-0HP改善的生物分布 和增強的腫瘤定位，這是其優(yōu)化的脂質(zhì)體化(liposomalization)的結(jié)果。本發(fā)明揭示了通 過把1-0HP封裝在脂質(zhì)體制劑中，1-0HP加上含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀的組合藥的 聯(lián)合療法的抗腫瘤活性可以得到加強，并且未發(fā)現(xiàn)1-0HP的脂質(zhì)體化造成的毒性。這提示 1-0HP脂質(zhì)體制劑與含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀的組合藥的聯(lián)合療法是有希望的癌 癥療法。
權(quán)利要求
抗腫瘤劑，其組合地包含脂質(zhì)體制劑以及組合藥，所述脂質(zhì)體制劑通過將奧沙利鉑封裝在脂質(zhì)體內(nèi)而獲得，所述組合藥含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀。
2.如權(quán)利要求1所述的抗腫瘤劑，其中至少一種構(gòu)成所述脂質(zhì)體的脂質(zhì)成分是磷脂。
3.如權(quán)利要求2所述的抗腫瘤劑，其中所述脂質(zhì)體的膜表面用聚乙二醇、甘油聚合物 或陽離子脂質(zhì)進行修飾。
4.如權(quán)利要求1至3中任一項所述的抗腫瘤劑，其中使用的奧沙利鉬與替加氟的比例 為0. 1-5摩爾1摩爾。
5.如權(quán)利要求1所述的抗腫瘤劑，其中在含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀的所述組 合藥中，使用的吉莫斯特與替加氟的比例為0.1-5摩爾1摩爾，且使用的氧嗪酸鉀與替加 氟的比例為0. 1-5摩爾1摩爾。
6.如權(quán)利要求1所述的抗腫瘤劑，其中將所述抗腫瘤劑組成為試劑盒，所述試劑盒包 含脂質(zhì)體制劑以及組合藥，所述脂質(zhì)體制劑含有奧沙利鉬，所述組合藥含有替加氟、吉莫斯 特和氧嗪酸鉀。
7.如權(quán)利要求1所述的抗腫瘤劑，其中所述脂質(zhì)體制劑通過靜脈內(nèi)、腹腔內(nèi)、肌肉內(nèi)或 皮下給藥，且含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀的所述組合藥經(jīng)口給藥。
8.抗腫瘤效果增強劑，其為在脂質(zhì)體中含有有效量的奧沙利鉬的脂質(zhì)體制劑，且用于 提高治療有效量的組合藥的抗腫瘤活性，所述組合藥含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀。
9.如權(quán)利要求8所述的抗腫瘤效果增強劑，其中至少一種構(gòu)成所述脂質(zhì)體的脂質(zhì)成分 是磷脂。
10.如權(quán)利要求9所述的抗腫瘤效果增強劑，其中脂質(zhì)體的膜表面用聚乙二醇、甘油聚 合物或陽離子脂質(zhì)進行修飾。
11.如權(quán)利要求8至10中任一項所述的抗腫瘤效果增強劑，其中使用的奧沙利鉬與替 加氟的比例為0. 1-5摩爾1摩爾。
12.如權(quán)利要求8所述的抗腫瘤效果增強劑，其中在含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀 的所述組合藥中，使用的吉莫斯特與替加氟的比例為0.1-5摩爾1摩爾，且使用的氧嗪酸 鉀與替加氟的比例為0. 1-5摩爾1摩爾。
13.脂質(zhì)體制劑以及含有替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸鉀的組合藥用于生產(chǎn)抗腫瘤劑的 用途，所述脂質(zhì)體制劑通過將奧沙利鉬封裝在脂質(zhì)體內(nèi)而獲得。
14.脂質(zhì)體制劑用于生產(chǎn)抗腫瘤效果增強劑的用途，所述脂質(zhì)體制劑通過將奧沙利鉬 封裝在脂質(zhì)體內(nèi)而獲得。
15.治療癌癥的方法，其特征在于分別將有效劑量的脂質(zhì)體制劑以及含有替加氟、吉莫 斯特和氧嗪酸鉀的組合藥給予癌癥患者，所述脂質(zhì)體制劑含有被封裝在脂質(zhì)體內(nèi)的奧沙利 鉬。
全文摘要
本發(fā)明的目的是進一步增強當(dāng)奧沙利鉑(oxaliplatin)與含有替加氟(tegafur)、吉莫斯特(gimeracil)、氧嗪酸鉀(oteracil potassium)的組合藥聯(lián)合給藥時的抗腫瘤效果。按照本發(fā)明，通過使用封裝在脂質(zhì)體制劑中的奧沙利鉑，奧沙利鉑加含有替加氟、吉莫斯特、氧嗪酸鉀的組合藥的聯(lián)合療法顯示出顯著增強的抗腫瘤效果，而不增加副作用。
文檔編號A61K9/127GK101925356SQ20098010321
公開日2010年12月22日 申請日期2009年1月29日 優(yōu)先權(quán)日2008年1月30日
發(fā)明者石田龍弘, 際田弘志 申請人:國立大學(xué)法人德島大學(xué);大鵬藥品工業(yè)株式會社