專利名稱：具有苯并菲啶結(jié)構(gòu)的抗腫瘤藥及包含它們的制劑的制作方法
具有苯并菲啶結(jié)構(gòu)的抗腫瘤藥及包含它們的制劑本發(fā)明涉及苯并菲啶生物堿類及其鹽用于制備腫瘤治療藥物的用途。本發(fā)明還涉及所述生物堿的新的鹽及包含它們的組合物。
現(xiàn)有技術(shù)腫瘤學(xué)的首要目標(biāo)是通過任何手段根除腫瘤，即使當(dāng)這樣做帶來嚴(yán)重副作用，“首先不能傷害”("primum non nocere")的格言不用作腫瘤的治療指南，而是優(yōu)選換之以“首 先促進(jìn)以幫助”(“primum succerere”)。腫瘤治療常涉及到根除手術(shù)、靶向放療(包括光動(dòng)力療法)、高劑量的化療藥物、 放射治療和用細(xì)胞因子(IL2)和單克隆抗體的治療。盡管有龐大、不斷增加數(shù)量的可利用 的治療方法，治愈成功率仍然不能滿意，特別是在發(fā)生藥物耐藥性的化療情況下。在實(shí)體腫瘤中，化療迅速降低了瘤塊，但并不完全，少數(shù)特別抗藥的細(xì)胞可保持腫 瘤活躍，然后發(fā)展，常帶來致命的結(jié)果。這些細(xì)胞最近被分類為腫瘤干細(xì)胞，其擁有強(qiáng)的增 殖潛力與適應(yīng)性。所述細(xì)胞構(gòu)成約占5%的瘤塊，并且抵抗當(dāng)前使用的所有已知的化療藥。 腫瘤干細(xì)胞的存在最先在髓性白血病中被確立(Bonnet D，Dick JE. Nature Medicine, 3, 730-737 (1997)，并相繼在乳腺腫瘤與腦腫瘤中被證實(shí)(Al-Hajj M，等人，Natl Acad Sci, USA，100. 3983-3988，2003，Sing SK，等人.，432，396-401，Nature 2004)。最近，已經(jīng)從黑色素瘤、結(jié)腸腫瘤和肺切片(microtomes)中分離出干細(xì)胞 (Ricci-Vitali,Nature 445，111-115 (2007) ；Fang D. , Cancer Res.，65，9328-9337 2005， Eramo,Cell Death and Differentiation,advance online publication 2007 ^11^ 30 日，Doi :10.1038/sj.cdd. 4402283)。如上文所述的這些細(xì)胞，不能通過標(biāo)準(zhǔn)治療得到控制，并產(chǎn)生了腫瘤。因此明確需 要開發(fā)能夠可能通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而抑制腫瘤干細(xì)胞的化合物。發(fā)明描述現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)苯并菲啶生物堿類、特別是血根堿、白屈菜紅堿、白屈菜堿及其與淡黃青 霉酸、磷脂酸或透明質(zhì)酸的鹽對多藥抗藥的腫瘤干細(xì)胞具有抗增殖作用。具體而言，與淡黃青霉酸的鹽得到對癌細(xì)胞的強(qiáng)效細(xì)胞毒作用及同樣強(qiáng)效的抗血 管形成、抗炎和鎮(zhèn)痛作用。第一方面，本發(fā)明因此涉及苯并菲啶生物堿或其鹽用于制備治療腫瘤的藥物的用 途。第二方面，本發(fā)明提供了苯并菲啶生物堿與磷脂酸或透明質(zhì)酸的新的鹽。所述鹽 特別用于靶向局部施用或全身施用。另一方面，本發(fā)明提供了以納米粒形式的苯并菲啶或異喹啉生物堿與人體白蛋白 的復(fù)合物及包含所述復(fù)合物的混懸液，其可靜脈或口服施用。納米粒選擇性地達(dá)到腫瘤，在 腫瘤處它們可進(jìn)行細(xì)胞毒與抗血管新生瘤塊降低作用。該制劑被特別用于實(shí)體腫瘤與更常 見形式的白血病的治療。磷脂酸包含脂肪酸殘基，其可以是相同的或不同的，有包含12至22個(gè)碳原子的飽和或不飽和直鏈。優(yōu)選二棕櫚酰_和二硬脂酰_磷脂酸，其大大增加了 口服和局部生物利用度。血根堿與磷脂酸的鹽是特別優(yōu)選的。根據(jù)本發(fā)明的鹽能夠以微摩爾以下濃度誘導(dǎo)腫瘤干細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。血根堿與淡黃青霉酸的鹽已被體外證實(shí)了在200ng/ml濃度下對黑色素瘤與結(jié)腸 干細(xì)胞的強(qiáng)效抑制活性。其對其他腫瘤干細(xì)胞的行為是相同的。這些生物堿可因此被視為 新一代抗腫瘤藥，其能夠有效地治療人體腫瘤。對結(jié)腸、肝臟、胰與宮頸腫瘤而言，最適合的 形式是分散在適宜溶媒的與淡黃青霉酸的鹽，然而對皮膚腫瘤如黑色素瘤的腫瘤，與磷脂 酸的鹽可有利地直接局部施用在受腫瘤影響的區(qū)域。與白蛋白的復(fù)合物適于以比中毒劑量低得多的劑量、且非常長時(shí)期地局部注射施 用；與正常細(xì)胞相比選擇性地針對腫瘤干細(xì)胞，且強(qiáng)效抗血管新生作用對瘤塊產(chǎn)生了迅速 的降低作用并最終根除。最適合口服與局部施用的產(chǎn)品是血根堿與淡黃青霉酸的鹽。所述鹽已被證實(shí)在 口咽腫瘤、頭頸腫瘤、黑色素瘤與宮頸腫瘤的治療中特別有效，有效程度大于未成鹽的生物 堿，且同樣作用于與腫瘤相關(guān)的任何病毒。與透明質(zhì)酸的鹽也是有利的，其可增加生物堿的細(xì)胞攝取并使得腫瘤根除。將通過眾所周知的方法，如在“雷明頓藥物手冊”(("Remington' s Pharmaceutical Handbook”)，Mack Publishing Co·，美國紐約)中描述的那些方法，連同 適宜的賦形劑制備所述制劑。下文列出的實(shí)施例詳細(xì)闡釋了本發(fā)明。實(shí)施例I-淡黃青霉酸血根堿鹽的制備將3. 68g的氯化血根堿溶于IOOmL的乙醇中，并在攪拌下加入3. 6g的淡黃青霉酸 鉀，將混合物反應(yīng)3小時(shí)。濾除生成的氯化鉀，將溶液濃縮至小體積，得到5. 6g的鹽。實(shí)施例11-1，2- 二棕櫚酰-sn-甘油基_3_ 二氧磷基-rac-(l-甘油)血根堿鹽的 制備將3. 7g的氯化血根堿溶于50ml甲醇中，在攪拌下加入含7. 5g的1，2_ 二棕櫚 酰-sn-甘油基-3- 二氧磷基-rac-(l-甘油基)1，2_ 二棕櫚酰-sn-甘油基_3_ 二氧磷 基-raC-(l-甘油)鈉鹽的該溶液，使該混合物攪拌2小時(shí)。得到的溶液用等體積的二氯甲 烷稀釋，使混合物攪拌0. 5h。濾除沉淀的氯化鈉，將濾液真空下在不高于35°C的溫度下濃 縮至干。得到了 IOg熔點(diǎn)70°C的帶紅色固體。實(shí)施例III-白蛋白與血根堿的納米粒的制備在室溫下將Ig血根堿溶于15ml的二噁烷中，并加至5g的人體白蛋白在300ml鹽 水中的溶液中。使混合物在無菌環(huán)境下攪拌4小時(shí)。得到的混濁溶液接受超聲1分鐘?；?懸液的物理外觀與顏色發(fā)生變化。無需加入賦形劑將溶液冷凍干燥。實(shí)施例IV按照實(shí)施例III的方法，制備血根堿溶液，溶質(zhì)在無菌條件下在容器中被凍干，在 完成該過程后容器中將包含IOmg的血根堿。凍干物被用在口咽部腫瘤的局部(loco-regional)治療。實(shí)施例V-用于頭頸腫瘤治療的1克咀嚼片
4[0035大豆磷脂30.OOmg[0036無水枸櫞酸10.OOmg[0037乳糖240. OOmg[0038甘露醇550.OOmg[0039甲基纖維素40. OOmg[0040棕櫚酰硬脂酸酯50. OOmg[0041漿果味香精40.OOmg[0042甘草酸銨0. 5mg[0043滑石粉10.OOmg[0044實(shí)施例VI-用于宮頸腫瘤治療的軟明膠膠囊[0045血根堿淡黃青霉酸鹽10.OOmg[0046大豆磷脂50.OOmg[0047蜂蠟50.OOmg[0048甘草酸銨10.OOmg[0049植物油適量至800. OOmg[0050實(shí)施例VII-用于宮頸腫賴討臺(tái)療的軟明膠膠囊[0051血根堿淡黃青霉酸鹽10.OOmg[0052大豆磷脂50.OOmg[0053蜂蠟50.OOmg[0054琥珀酰-甘草酸鈉10.OOmg[0055植物油適量至800. OOmg[0056實(shí)施例VIII-用于黑色素瘤局部治療的磷脂S[0057二棕櫚酰磷脂酸血根堿鹽0. 40g[0058丙二醇10. OOg[0059肉豆蔻酸異丙酯5. OOg[0060十六醇5. OOg[0061吐溫803. OOg[0062卡波姆0. 40g[0063對羥基苯甲酸甲酯0. IOg[0064對羥基苯甲酸丙酯0. 05g[0065純化水適量至IOOg
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權(quán)利要求
苯并菲啶生物堿或其鹽用于制備治療腫瘤的藥物的用途。
2.如權(quán)利要求1所述的用途，其中苯并菲啶生物堿選自血根堿、白屈菜紅堿、白屈菜堿。
3.如權(quán)利要求2所述的用途，其中所述的生物堿是血根堿。
4.如權(quán)利要求1-3的任意一項(xiàng)所述的用途，其中所述的生物堿為與淡黃青霉酸或磷脂 酸成鹽的形式。
5.如權(quán)利要求4所述的血根堿淡黃青霉酸鹽的用途。
6.如權(quán)利要求4所述的與磷脂酸形成的血根堿鹽的用途。
7.如權(quán)利要求1-3的任意一項(xiàng)所述的用途，其中所述的生物堿以納米粒形式存在，所 述的納米粒包含所述生物堿與白蛋白的復(fù)合物。
8.如權(quán)利要求1-7的任意一項(xiàng)所述的用途，其中腫瘤來自于多藥抗藥腫瘤干細(xì)胞的過度增殖。
9.如權(quán)利要求1-8的任意一項(xiàng)所述的用途，其中腫瘤為口咽腫瘤、頭頸腫瘤、宮頸腫瘤 或黑色素瘤。
10.苯并菲啶生物堿與磷脂酸或透明質(zhì)酸所成的鹽。
11.如權(quán)利要求10所述的與磷脂酸所成的鹽。
12.如權(quán)利要求11所述的鹽，其中所述的磷脂酸為二棕櫚酰-或二硬脂酰-磷脂酸。
13.如權(quán)利要求11或12所述的血根堿鹽。
14.作為抗黑色素瘤藥物的權(quán)利要求11、12或13的鹽。
15.藥物組合物，其包含作為活性成分的權(quán)利要求10-14的鹽。
全文摘要
公開了苯并菲啶生物堿和其鹽用于制備治療腫瘤的藥物的用途。
文檔編號A61P35/00GK101951907SQ200980105648
公開日2011年1月19日 申請日期2009年2月16日 優(yōu)先權(quán)日2008年2月22日
發(fā)明者A·里瓦, E·邦巴爾代利, G·豐塔納, P·莫拉佐尼 申請人:因德納有限公司