專利名稱：乙肝病毒(HBV)的疏水性修飾的preS-衍生肽及其作為載體將化合物特異性遞送到肝臟的用途的制作方法
乙肝病毒(HBV)的疏水性修飾的preS-衍生肽及其作為載 體將化合物特異性遞送到肝臟的用途 本發(fā)明涉及乙肝病毒(HBV)的疏水性修飾的preS-衍生肽(preS-derived
peptide),所述肽是多用途載體，用于在體外和體內(nèi)將化合物特異性遞送到肝臟，優(yōu)選遞 送到肝細(xì)胞。任何類型的化合物，除了特定藥物(例如干擾素、病毒逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑或 核心裝配抑制劑和/或標(biāo)記)之外，都可特異性靶向肝臟并因此在肝臟中富集。這種肝 臟靶向還可用于靶向的診斷、預(yù)防和/或治療肝臟疾病或病癥(例如肝炎、瘧疾、肝細(xì)胞 癌(HCC))，以及用于預(yù)防HAV、HBV、HCV和/或HDV的感染。本發(fā)明涉及藥物組 合物，所述組合物包含所述疏水性修飾的preS-衍生肽和待特異性遞送到肝臟的化合物。 本發(fā)明還涉及用于聯(lián)合治療肝臟疾病以及預(yù)防HAV、HBV、HCV和/或HDV感染的方 法。本發(fā)明還涉及preS-衍生肽在基因治療和免疫原性表位的遞送中的用途，所述表位 用于肝細(xì)胞介導(dǎo)的抗原呈遞，以活化肝臟定向的免疫應(yīng)答。
背景技術(shù)：
肝臟是存在于脊椎動(dòng)物和其它動(dòng)物中的一種器官，在代謝中起到主要作用并在 體內(nèi)具有大量功能，包括糖原貯存、紅細(xì)胞分解、血漿蛋白質(zhì)合成和解毒。肝臟也是人 體內(nèi)最大的腺體。它位于胸腹部的橫膈膜下方。它產(chǎn)生膽汁，這是通過脂肪乳化而有 助于消化的一種堿性化合物。它也執(zhí)行和調(diào)節(jié)需要特定組織的各種各樣高容量的生化反應(yīng)。肝細(xì)胞構(gòu)成肝臟胞質(zhì)團(tuán)的70-80%。肝細(xì)胞參與蛋白質(zhì)合成，蛋白質(zhì)貯存和糖 類轉(zhuǎn)化，膽固醇、膽汁鹽和磷脂的合成，并對(duì)外源性和內(nèi)源性物質(zhì)進(jìn)行解毒、修飾和分 泌。肝細(xì)胞還啟始膽汁的形成和分泌。有各種各樣的已知肝臟疾病，例如 肝炎肝臟炎癥，主要是由各種病毒引起，還可由某些毒物、自身免疫或遺 傳性病癥引起； 肝硬化肝臟內(nèi)形成纖維組織，取代死亡肝細(xì)胞。肝細(xì)胞的死亡可以是由例 如病毒性肝炎、酒精中毒或接觸其它肝臟毒性化學(xué)物而引起的； 血色病造成鐵在體內(nèi)貯積的一種遺傳性疾病，最終導(dǎo)致肝臟損傷； 肝癌原發(fā)性肝細(xì)胞癌(HCC)或膽管癌和轉(zhuǎn)移性癌，通常來自胃腸道的其它 部分； 威爾遜病(Wilson，s disease)引起機(jī)體保留銅的一種遺傳性疾??； 原發(fā)性硬化性膽管炎膽管炎性疾病，本質(zhì)上是自身免疫。 原發(fā)性膽汁性肝硬變小膽管的自身免疫性疾??； 巴希綜合征(Budd-Chiari syndrome)肝靜脈阻塞； 吉爾伯綜合征(Gilbert，s syndrome)膽紅素代謝遺傳病癥，在約5%的人群
中存在； II型糖原貯積病糖原的貯積引起全身進(jìn)行性肌無力(肌病)并影響各種機(jī) 體組織，尤其是在心臟、骨骼肌、肝臟和神經(jīng)系統(tǒng)。
還有多種兒科肝臟疾病，例如膽道閉鎖、a-1-抗胰蛋白酶缺乏、alagille綜合征 和進(jìn)行性家族性肝內(nèi)膽汁淤積；以及代謝疾病。此外，若干病原體和寄生蟲，尤其是熱帶病，在其生命周期期間具有肝臟期。例如瘧疾就是一種最常見的傳染病和重大公共衛(wèi)生問題。瘧疾由原生動(dòng)物瘧 原蟲屬(Plasmodium)的寄生蟲引起。該病的最嚴(yán)重形式由惡性瘧原蟲(Plasmodium falciparum)和間日瘧原蟲(Plasmodium vivax)引起，但是其它相關(guān)物種(蛋形瘧 原蟲(Plasmodium ovale)、三日瘧原蟲(Plasmodium malariae)和有時(shí)是諾氏瘧原蟲 (Plasmodiumknowlesi))也可感染人類。這一類人類病原性瘧原蟲種類通常稱為瘧疾寄生 蟲。瘧疾寄生蟲由雌性按蚊(Anopheles)傳播。人體內(nèi)的瘧疾發(fā)育經(jīng)過兩個(gè)時(shí)期紅細(xì) 胞外期(肝時(shí)期或“肝階段”)和紅細(xì)胞內(nèi)期。當(dāng)受感染的蚊刺穿人的皮膚吸血時(shí)，蚊唾 液中的子孢子就進(jìn)入血流并遷移至肝臟。在進(jìn)入人宿主約30分鐘內(nèi)，它們感染肝細(xì)胞， 進(jìn)行無性和無癥狀的繁殖，為期6-15天。一旦這些生物體在肝內(nèi)分化而產(chǎn)生數(shù)以千計(jì)的 裂殖子，其隨后使其宿主細(xì)胞破裂，逃逸到血液中并感染紅細(xì)胞，由此開始生命周期的 紅細(xì)胞內(nèi)期。這種寄生蟲從肝臟逃逸時(shí)，其自身包裹在受感染的宿主肝細(xì)胞的細(xì)胞膜中 而不會(huì)被檢測(cè)到。這種寄生蟲對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的攻擊具有相應(yīng)保護(hù)作用，因?yàn)閷?duì)于它在 人體內(nèi)的大部分生命周期而言，它都駐留在肝臟和血細(xì)胞內(nèi)并能相對(duì)躲避免疫監(jiān)視。人 們?cè)陂_發(fā)特異性針對(duì)瘧疾寄生蟲的特定肝階段從而阻止血液階段發(fā)育的藥物(例如伯氨 喹(primaquin))上的興趣不斷增加。另一個(gè)實(shí)例是血吸蟲病或裂體吸蟲病，這是由幾種扁形動(dòng)物引起的寄生蟲病。 盡管血吸蟲病死亡率低，但它可使人非常衰弱。它是由寄生性扁形動(dòng)物(血吸蟲)感染 血液引起的一種常見慢性病。它使人虛弱并引起肝腸損害。它在亞洲、非洲和南美洲最 常見，尤其是在水體被含有該寄生蟲的淡水螺污染的地區(qū)。引起乙肝的乙肝病毒(HBV)是哺乳動(dòng)物和鳥類的小的包膜DNA病毒家族的原型 (1)。HBV包膜包含3種蛋白質(zhì)，稱為L(zhǎng)-(大)、M-(中)和S-(小)(

圖1A)。它們 共享具有4個(gè)跨膜區(qū)的C-端S-區(qū)。M-蛋白和L-蛋白攜帶55個(gè)氨基酸以及隨基因型 而異的107個(gè)或118個(gè)氨基酸(preS2-和preSl)的額外的N_端突出端(圖IB)。在病毒 顆粒中，L、M和S的化學(xué)計(jì)量比為約1 1 4，而更豐富分泌的非感染性亞病毒顆粒 (SVP)含有幾乎全部是S-蛋白和僅痕量的L-蛋白(2)。合成期間，L的preSl-結(jié)構(gòu)域 被豆蔻?；⑶以贖BV生命周期的某點(diǎn)通過ER-衍生膜而易位。這種修飾對(duì)于感染性 而言是必不可少的(3，4)。HBV及其它嗜肝病毒具有肝臟趨向性，即肝臟是特異性支持 HBV生長(zhǎng)的組織。藥物的特異性靶向旨在改善治療功效。在1906年，PaulEhrlich引入“魔彈
(magic bullet)" 一詞，用于研究最佳治療策略。從此，在藥物靶向方面的研究就一直集 中在開發(fā)載體系統(tǒng)上，所述系統(tǒng)增加了靶組織(例如腫瘤或病原體)中的藥物治療濃度并 因此減少對(duì)生物體整體的副作用。理想的是，藥物靶向應(yīng)當(dāng)滿足下列標(biāo)準(zhǔn)1)將藥物特 異性地轉(zhuǎn)移至所需作用部位；2)對(duì)其它組織的作用最小化；3)藥理學(xué)惰性載體的使用。為了將藥物攜帶至特定組織，研究了不同策略。這些策略是例如使用前藥，所 述前藥在靶組織中通過組織特異性酶釋放出藥理學(xué)活性部分。再一種可能性是將有效 的、非組織特異性藥物與組織特異性的、但藥理學(xué)上惰性的載體系統(tǒng)(例如受體-親和肽或膠體顆粒)偶聯(lián)。各種藥物載體已經(jīng)用于增強(qiáng)藥物的肝臟靶向。一個(gè)直接的方法是基于通過遞送 在特定載體(例如脂質(zhì)體和微球體)中的藥物并通過肝臟中的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的活性吞噬作 用。例如，已經(jīng)證明在靜脈注射之后，摻有藥物的顆粒載體主要由肝臟中的網(wǎng)狀內(nèi)皮系 統(tǒng)捕獲，導(dǎo)致藥物對(duì)肝臟的靶向(5)。另一方面，帶正電荷的水溶性聚合物的藥物對(duì)肝臟 的靶向是基于來自肝臟血管系統(tǒng)的大部分水溶性物質(zhì)的自由溢出以及肝細(xì)胞表面的負(fù)電 荷(6)。因此，根據(jù)這樣的肝臟解剖特征和生化特征，聚合物已經(jīng)用作載體，以允許藥物 靶向肝臟。已經(jīng)試圖通過使用肝細(xì)胞的去唾液酸糖蛋白受體，進(jìn)行更特異性的藥物對(duì)肝 臟的靶向。去唾液酸糖蛋白受體(半乳糖受體)以高密度存在于肝細(xì)胞上。另外，一旦
配體與半乳糖受體結(jié)合，配體-受體復(fù)合物就會(huì)內(nèi)在化，允許細(xì)胞攝取半乳糖基化配體 ⑵。US 7,001,760 B2公開了源自乙肝病毒(HBV)的重組載體，其可用于基因治療，
例如將治療用基因遞送到肝細(xì)胞并在肝細(xì)胞內(nèi)表達(dá)異源基因。然而，HBV載體對(duì)于包裝 基因而言具有有限容量。然而，迄今為止，還沒有特異性靶向動(dòng)物(尤其是人)或鳥類的肝臟器官并同時(shí) 將所需化合物或藥物特異性遞送到肝臟的通用診斷、治療和/或預(yù)防方法。因此，需要在受試者中特異性靶向肝臟器官并將所需化合物或藥物特異性遞送 到肝臟的通用診斷、治療和/或預(yù)防方法。此外，還沒有在受試者中特異性靶向肝臟器官并將所需化合物或藥物特異性遞 送到肝臟且同時(shí)阻止乙肝病毒和丁肝病毒侵入肝細(xì)胞的通用診斷、治療和/或預(yù)防方法。此外，需要用抗原性表位對(duì)肝臟進(jìn)行特異性靶向，以觸發(fā)免疫系統(tǒng)，例如用于 免疫接種。因此，本發(fā)明旨在提供用于有效的特異性靶向的肝臟疾病診斷、預(yù)防和/或治 療和肝功能調(diào)節(jié)的工具(means)和方法。發(fā)明_既述依照本發(fā)明，通過提供HBV的疏水性修飾的preS-衍生肽來解決該目的。所述疏水性修飾的preS-衍生肽具有以下通式[Hm-P_Rn]A。。P是所述preS-衍生肽并包含“HBV共有序列”或其變體的氨基酸序列。H是preS-衍生肽P的所述疏水性修飾，所述修飾是P的N_端修飾并選自?；?和添加疏水性部分；其中m為至少1。R是所述preS-衍生肽P的任選的C-端修飾(n為0或至少1)。A是任選的錨定基團(tuán)(即0為0或至少1)，所述基團(tuán)適于所述化合物的共價(jià)連接 并連接H、P和/或R。依照本發(fā)明，還通過提供藥物組合物來解決該目的，所述組合物包含至少一種 本文所定義的HBV的疏水性修飾的preS-衍生肽和至少一種本文所定義的待特異性遞送 到肝臟、優(yōu)選遞送到肝細(xì)胞的化合物和任選的藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑。依照本發(fā)明，還通過使用HBV的疏水性修飾的preS-衍生肽作為載體或穿梭物(shuttle),用于將化合物特異性遞送到肝臟，來解決該目的。依照本發(fā)明，還通過提供HBV的疏水性修飾的preS-衍生肽或本發(fā)明的藥物 組合物，用于診斷、預(yù)防和/或治療肝臟疾病或病癥或者用于調(diào)節(jié)肝功能，來解決該目 的。依照本發(fā)明，還通過使用HBV的疏水性修飾的preS-衍生肽或本發(fā)明的藥物組 合物，用于制備診斷、預(yù)防和/或治療肝臟疾病或病癥的藥物，來解決該目的。依照本發(fā)明，還通過用于診斷、預(yù)防和/或治療肝臟疾病或病癥的方法，通過 使用HBV的疏水性修飾的preS-衍生肽或本發(fā)明的藥物組合物，來解決該目的。依照本發(fā)明，還通過提供用于聯(lián)合診斷、預(yù)防和/或治療肝臟疾病或病癥以及 預(yù)防HBV和/或HDV感染的方法，通過給予受試者本文所定義的綴合物或藥物組合物， 來解決該目的；所述綴合物包含HBV的疏水性修飾的preS-衍生肽和化合物。依照本發(fā)明，還通過提供包含編碼本文所定義的preS-衍生肽P的核酸的病毒載 體用于肝臟疾病或病癥的基因治療的應(yīng)用，來解決該目的。本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案的描述在更詳細(xì)地描述本發(fā)明之前，應(yīng)當(dāng)知道，本發(fā)明并不限于本文所述的具體方 法、方案和試劑，因?yàn)樗鼈兛赡懿煌?。也?yīng)當(dāng)知道，本文所用的術(shù)語僅僅用于描述具體 實(shí)施方案的目的，不得視為限制僅由所附權(quán)利要求限定的本發(fā)明的范圍。除非另有說 明，否則本文所用的所有科技術(shù)語都具有本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的含義。為了本發(fā)明 的目的，本文所引用的所有參考文獻(xiàn)都通過引用全部結(jié)合到本文中。HBV的疏水性修飾的preS-衍生肽如上所述，本發(fā)明提供乙肝病毒(HBV)的疏水性修飾的preS-衍生肽。HBV包膜包含3種蛋白質(zhì)，稱為L(zhǎng) (大)、M (中)和S (小)(參見圖1A)。它 們共享具有4個(gè)跨膜區(qū)的C-端S-區(qū)。M-蛋白和L-蛋白攜帶55個(gè)氨基酸以及隨基因 型而異的107個(gè)或118個(gè)氨基酸(preS2-和preSl)的額外的N_端突出端(參見圖1B)。因此，本發(fā)明的HBV的術(shù)語“preS-衍生”肽是指具有以下氨基酸序列的肽， 所述序列對(duì)應(yīng)于HBV的L-蛋白N-端突出端preSl，優(yōu)選對(duì)應(yīng)于種(species)和基因型 A-H的共有序列以及卷毛猴(woolly monkey) (WMHBV)、黑猩猩和大猩猩(gorilla)的乙 肝病毒的共有序列，但它也指其變體，優(yōu)選N-端截短的和/或C-端截短的變體、氨基 酸取代變體。SEQ ID NO.l表示種和基因型A-H以及卷毛猴(WMHBV)的HBV preS共有氨
基酸序列。參見圖2中的比對(duì)，顯示HBV preS共有序列(共有)和8個(gè)HBV基因型(A_H) 以及包含氨基酸2-48的卷毛猴HBV (WMHBV) preS序列。注意基因型A、B、C、E、
F、G和H在其N_端具有至多11個(gè)額外氨基酸。在本申請(qǐng)中，HBV “基因型C”的氨基酸序列是指人工序列，其對(duì)應(yīng)于HBV 基因型C或與其相同，例如示于GenbankABV02850.1，除了位置46 (按照下述編號(hào))在 本發(fā)明基因型C中是Lys (K)而不是Genbank序列中的Gin (Q)之外；本申請(qǐng)的HBV基 因型C序列也可稱為“HBV基因型CQ46K”。另見SEQIDN0.4、12、21-27。圖2也顯示HBV preS共有序列的氨基酸殘基編號(hào)，所述編號(hào)將在整篇說明書中引用。氨基酸殘基號(hào)1是基因型D (先前描述為亞型ayw，另見SEQ IDN0.5)的甲硫氨 酸(Metl)，而氨基酸殘基號(hào)(-11)是基因型C(SEQ IDN0.4)的甲硫氨酸(Met(-ll))。 體內(nèi)Metl或Met(-ll)分別被細(xì)胞甲硫氨酰氨肽酶切除并在隨后通過N_豆蔻?；D(zhuǎn)移酶 使豆蔻酰殘基從豆蔻酰-CoA中分別轉(zhuǎn)移給氨基酸殘基號(hào)2甘氨酸(Gly2)或氨基酸殘基號(hào) (-10)甘氨酸(Gly(-lO))而得以修飾?；蛐虳的N-端氨基酸殘基是天然氨基酸甘氨 酸(Gly2)并且按照來自L的潛在的(underlying)可讀框密碼子的相應(yīng)編號(hào)而編號(hào)為2 (或 者例如基因型C的Gly(-lO))。HBVpreS共有序列還包括基因型A、B、C、E、F、G和H的額外N_端氨基 酸(指定為“_”位)。因此，HBVpreS共有序列總共包括位置(-11)至48。因此，上述編號(hào)與例如SEQ ID N0.1中的氨基酸的實(shí)際編列之間有差異。Met (-11)，殘基號(hào)(-11)，編列為SEQ ID N0.1的氨基酸殘基1 ；Gly(-lO)，殘基號(hào)(-10)，編列為SEQ IDN0.1的氨基酸殘基2 ；Met 1，殘基號(hào)1，編列為SEQ IDN0.1的氨基酸殘基12 ；Gly 2，殘基號(hào)2，編列為SEQ ID N0.1的氨基酸殘基13 ；Gly 48，殘基號(hào)48，編列為SEQ ID N0.1的氨基酸殘基58。SEQ ID NO 1HBV preS 共有序列(位置(_11) -48)(-ll)-M GGWSS TPRKG MGTNL SVPNP LGFFP DHQLDPAFRA NSNNP DWDFN PNKDH WPEAN KVG-48SEQ ID NO 2HBV 基因型 A(-11)-M GGWSS KPRKG MGTNL SVPNP LGFFP DHQLDPAFGA NSNNP DWDFN PVKDD WPAAN QVG-48SEQ ID NO 3HBV 基因型 B(-11)-M GGWSS KPRKG MGTNL SVPNP LGFFP DHQLDPAFKA NSENP DWDLN PHKDN WPDAN KVG-48SEQ ID NO : 4人工氨基酸序列，其對(duì)應(yīng)于HBV基因型C，除了位置46是 Lys(K)而不是 Gin (Q)之外；Q46K(-ll)-M GGWSS KPRQG MGTNL SVPNP LGFFP DHQLDPAFGA NSNNP DWDFN PNKDH WPEAN KVG-48SEQ ID NO 5HBV 基因型 D1-MGQNL STSNP LGFFP DHQLD PAFRA NTANP DWDFNPNKDT WPDAN
KVG-48SEQ ID NO 6HBV 基因型 E(-10) -MGLSW TVPLE WGKNI STTNP LGFFP DHQLDPAFRA NTRNP DWDHN PNKDH WTEAN KVG-48SEQ ID NO 7HBV 基因型 F(-11)-M GAPLS TTRRG MGQNL SVPNP LGFFP DHQLDPLFRA NSSSP DWDFN TNKDS WPMAN KVG-48SEQ ID NO 8HBV 基因型 G
(-10) -MGLSW TVPLE WGKNL SASNP LGFLP DHQLDPAFRA NTNNP DWDFN PKKDP WPEAN KVG-48SEQ ID NO 9HBV 基因型 H(-11)-M GAPLS TARRG MGQNL SVPNP LGFFP DHQLDPLFRA NSSSP DWDFN TNKDN WPMAN KVG-48SEQ ID NO 10WMHBV1-MGLNQ STFNP LGFFP SHQLD PLFKA NAGS A DWDKNPNKDPWPQAH
DTA-48對(duì)于SEQ ID N0.2-10,另見 Genbank 檢索號(hào)HBV 基因型 A Genbank AAT28684.1HBV 基因型 B Genbank AAU01950.1HBV 基因型 C Genbank ABV02850.1 (其中位置 46 是 Lys (K)(在 SEQ ID N0.4 中)而不是 Gln(Q)(在 ABV02850.1 中)HBV 基因型 D Genbank AAR19337.1HBV 基因型 E Genbank ABS31101.1HBV 基因型 F Genbank ABK19774.1HBV 基因型 G Genbank AAF34735.1/AF1605013HBV 基因型 H Genbank AAM09052.1WMHBV Genbank AAC16905.1本發(fā)明HBV的疏水性修飾的preS-衍生肽具有下式[Hm-P-Rn]A0其中P是所述preS-衍生肽；H是P的所述疏水性修飾；R是P的C-端修飾；A是錨定基團(tuán)；m為至少1;n為0或至少1;o為0或至少1。優(yōu)選地，n和o不同時(shí)為0。本發(fā)明的HBV的preS-衍生肽P包括-HBV preS共有序列的氨基酸序列，示于SEQ ID NO. 1或-其變體?！白凅w”優(yōu)選為N-端截短的和/或C-端截短的變體、氨基酸取代或缺失變體、 或延長(zhǎng)變體。變體還包括含有修飾氨基酸、非天然氨基酸或肽模擬物或可模擬肽主鏈/ 結(jié)構(gòu)的另外的化合物的氨基酸序列。優(yōu)選地，變體選自SEQ ID N0.1的N-端截短的和/或C-端截短的變體；氨基 酸取代或缺失變體；含有修飾氨基酸、非天然氨基酸或肽模擬物或可模擬肽主鏈/結(jié)構(gòu) 的另外的化合物的氨基酸序列的變體。
依照本發(fā)明，疏水性修飾的preS-衍生肽的變體含有SEQ ID N0.1的至少10個(gè)或 20個(gè)連續(xù)氨基酸并且可由SEQ ID NO. 1或其變體的11、12、13、14、15、16、17、18、 19、 20、 21、 22、 23、 24、 25、 26、 27、 28、 29、 30、 31、 32、 33、 34、 35、 36、 37、
38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48 個(gè)或更多個(gè)氨基酸組成。N-端截短的和/或C-端截短的變體包括SEQ ID NO.l的優(yōu)選至少14個(gè)連續(xù)氨 基酸(例如殘基5-18)，更優(yōu)選至少19個(gè)連續(xù)氨基酸(例如殘基2-20)，甚至更優(yōu)選至少 20個(gè)連續(xù)氨基酸(例如殘基2-21)。術(shù)語“變體”也指在嗜肝DNA病毒屬的不同病毒種、株或亞型中發(fā)現(xiàn)的同源 序列，例如HBVal株、HBVLSH株(黑猩猩分離物)、卷毛猴HBV(WMHBV)、或 選自HBV基因型A-H的毒株、以及本文所定義的HBV基因型C即Q46K (例如SEQ ID N0.4)。術(shù)語“變體”也指與SEQ ID NO.l或本文所公開的任何其它氨基酸序列具有至 少50%序列同一性、優(yōu)選70%、更優(yōu)選80%、甚至更優(yōu)選90%或95%序列同一性的同源 序列。因此，在本發(fā)明優(yōu)選的疏水性修飾的preS-衍生肽中，P包括具有不同病毒種、 株或亞型(優(yōu)選HBV基因型或卷毛猴HBV(WMHBV)或其變體)的氨基酸序列的SEQ ID NO.l 變體。優(yōu)選地，P包括選自SEQ ID N0.2-10或其變體的氨基酸序列(另見圖2)。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，在本發(fā)明的疏水性修飾的preS-衍生肽中，P包括具 有選自SEQ ID NO.l所示的HBV preS共有序列的以下氨基酸序列的SEQ ID NO.l變體氨基酸殘基2-48 [SEQIDNO.ll]氨基酸殘基2-20氨基酸殘基2-21[SEQIDN0.12]氨基酸殘基9-15[SEQIDN0.21]。更優(yōu)選地，PJS包含在SEQ ID NO.l殘基9-22的氨基酸取代和
或缺失，例如
缺失殘基17-21。更優(yōu)選地，PJS包含在SEQ ID NO.l殘基9-15的氨基酸取代和/或缺失。更優(yōu)選地，序列基序NPLGFFP(對(duì)應(yīng)于SEQ ID NO.l殘基9-15)不被中斷或不 被例如由D-氨基酸置換殘基11-15來修飾。本發(fā)明人已經(jīng)證明，這些氨基酸殘基對(duì)于HBV的疏水性修飾的preS-衍生肽的 肝臟趨向性而言是重要的，如下所述。更優(yōu)選地，在本發(fā)明的疏水性修飾的preS-衍生肽中，P包括具有選自以下氨基 酸序列的SEQ ID NO.l變體
共有序列的氨基酸殘基2-48 共有序列的氨基酸殘基2-21 基因型C的氨基酸殘基2-48 基因型C的氨基酸殘基5-48 基因型C的氨基酸殘基9-48 基因型C的氨基酸殘基2-21； [SEQ ID NO. 12]； [SEQ ID NO. 13] [SEQ ID NO. 14] [SEQ ID NO. 15] [SEQ ID NO. 16]0131]基因型c的氨基酉1殘基5--21[SEQ ID NO. 17]0132]基因型c的氨基酉1殘基9--21[SEQ ID NO. 18]0133]基因型c的氨基酉1殘基2--15[SEQ ID NO. 19]0134]基因型c的氨基酉1殘基5--15[SEQ ID N0.20]0135]基因型c的氨基酉1殘基9--15[SEQ ID NO.21]0136]基因型D的氨基酉髮殘基2--48[SEQ ID N0.23]0137]基因型D的氨基酉髮殘基5--48[SEQ ID N0.24]0138]基因型D的氨基酉髮殘基9--48[SEQ ID N0.25]0139]基因型D的氨基酉髮殘基2--21[SEQ ID N0.26]0140]基因型D的氨基酉髮殘基5--21[SEQ ID N0.27]0141]基因型D的氨基酉髮殘基9--21[SEQ ID N0.28]0142]基因型D的氨基酉髮殘基2--20[SEQ ID N0.38]0143]基因型D的氨基酉髮殘基2--15[SEQ ID N0.29]0144]基因型D的氨基酉髮殘基5--15[SEQ ID N0.30]0145]基因型D的氨基酉髮殘基9--15[SEQ ID NO.21]。因此，優(yōu)選地，P包括選自SEQ ID NO. 11-30和38或其變體的氨基酸序列。SEQIDN0.1的“變體”也包括這樣的變體或“類似物”其包含氨基酸缺失、 氨基酸取代(例如被其它氨基酸或被等構(gòu)物(修飾的氨基酸，其具有與蛋白質(zhì)氨基酸接近 的結(jié)構(gòu)和空間相似性)保守取代或非保守取代)、氨基酸添加或等構(gòu)物添加，只要序列仍 具有肝臟趨向性，優(yōu)選在1小時(shí)后大于10%注射劑量/g肝臟組織即可。保守氨基酸取代通常涉及同類型氨基酸之間的取代。這些類型包括例如-具有不帶電荷的極性側(cè)鏈的氨基酸，例如天冬酰胺、谷氨酰胺、絲氨酸、蘇氨 酸和酪氨酸；-具有堿性側(cè)鏈的氨基酸，例如賴氨酸、精氨酸和組氨酸；-具有酸性側(cè)鏈的氨基酸，例如天冬氨酸和谷氨酸；和_具有非極性側(cè)鏈的氨基酸，例如甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨 酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸和半胱氨酸。優(yōu)選地，對(duì)本發(fā)明的疏水性修飾的preS-衍生肽進(jìn)行修飾以降低其免疫原性。因此，待通過取代和/或缺失而修飾的優(yōu)選的序列基序是負(fù)責(zé)免疫原性的序 列，例如B細(xì)胞表位和/或T細(xì)胞表位。HBV的B細(xì)胞表位優(yōu)選為SEQ ID NO.l的氨基酸殘基20-23 (基序DPAF)和共 有序列(SEQIDN0.1)和基因型C(SEQIDN0.4)的氨基酸殘基26-32 (基序NSNNPDW) 或基因型D (SEQ ID N0.5)的氨基酸殘基26-32 (基序NTANPDW)。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，優(yōu)選通過氨基酸取代來修飾SEQIDN0.1的氨基酸殘 基20-23，和/或優(yōu)選通過氨基酸取代來修飾氨基酸殘基26-32。優(yōu)選地，通過丙氨酸氨基酸取代來修飾SEQ ID NO.l的氨基酸殘基20-23 (基序 DPAF),優(yōu)選修飾成基序APAF。優(yōu)選地，通過丙氨酸氨基酸取代來修飾SEQ ID NO.l的氨基酸殘基26-32，優(yōu)選 修飾成基序NANAPDW或NAAAPDW。
待通過取代和/或缺失來修飾的其它優(yōu)選序列基序是作為抗體識(shí)別基序的序 列。對(duì)于負(fù)責(zé)免疫原性的序列(例如B細(xì)胞表位)的修飾，一個(gè)優(yōu)選的目標(biāo)就是降低 本發(fā)明疏水性修飾的preS-衍生肽的免疫原性。本領(lǐng)域技術(shù)人員知道該目標(biāo)及其有點(diǎn)和缺 點(diǎn)。重要的是，在降低本發(fā)明疏水性修飾的preS-衍生肽的免疫原性的同時(shí)，也得考慮 所需的肝臟靶向/趨向性特性。可重復(fù)給予不誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的穿梭肽(shuttle peptide)， 而該肽不會(huì)從體液免疫應(yīng)答中系統(tǒng)地除去(systemic removal)。因此，在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，PJS包含在SEQIDN0.1殘基9-15處的氨基 酸取代和/或缺失，以保持肝臟靶向/趨向性。本發(fā)明的更優(yōu)選的疏水性修飾的preS-衍生肽表現(xiàn)出高肝臟靶向/趨向性和低或 無免疫原性。體。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，P包含選自SEQ ID N0.31-37的氨基酸序列或其變 另見表和相應(yīng)的附圖和實(shí)施例。
在一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，P包含選自以下的氨基酸序列
SEQ ID NO. 11 SEQ ID NO. 12 SEQ ID NO. 13 SEQ ID NO. 16 SEQ ID N0.23 SEQ ID N0.26 SEQ ID N0.38 SEQ ID NO.31
(共有序列的殘基2-48)， (共有序列的殘基2-21)， (基因型C的殘基2-48)， (基因型C的殘基2-21)， (基因型D的殘基2-48)， (基因型D的殘基2-21)， (基因型D的殘基2-20)，和
(基因型C的殘基2-48和在位置21、23、29和30的Ala突變)。 以上是優(yōu)選的氨基酸序列，所述序列符合所需特性的優(yōu)選組合短氨基酸序 列、低或無免疫原性以及有效的肝臟靶向。preS-衍生肽P的疏水性修飾(H)是P的N-端。"N-端”是指在N-端(即相應(yīng)的第一個(gè)氨基酸殘基(例如Gly2))的疏水性 修飾，但也包括接近N-端的疏水性修飾，例如相應(yīng)的氨基酸殘基(_4)、(-3)、(-2)、 (-1)、1、2或3或4。因此，還可通過將疏水性部分在接近P的N-端位置處連接來得到 疏水性修飾。本發(fā)明HBV的所述preS-衍生肽的疏水性修飾將疏水性部分添加到所述肽上。此外，m為至少1，即用至少一個(gè)疏水性部分或基團(tuán)來修飾。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，m為1、2、3、4或更大。也就是說，可用不止1 個(gè)(例如2個(gè))疏水性部分或基團(tuán)來修飾P。疏水性部分或基團(tuán)可以彼此相同或不同。本發(fā)明HBV的所述preS-衍生肽的疏水性修飾選自-酰化；-添加疏水性部分。?；瘍?yōu)選選自用羧酸、脂肪酸、具有親脂性側(cè)鏈的氨基酸來酰化。優(yōu)選的脂肪酸是飽和或不飽和的脂肪酸、支鏈或非支鏈的脂肪酸，優(yōu)選具有8-22 個(gè)碳原子(C8-C22)。更優(yōu)選地，通過酰化的疏水性修飾選自用豆蔻?；?C14)、棕櫚?；?C16)或硬 脂?；?C18)來?；?。在體內(nèi)和醫(yī)學(xué)應(yīng)用上優(yōu)選豆蔻?；揎?，因其安全性較高，例如沒有硬脂?；?的不良反應(yīng)(先天免疫應(yīng)答(innate immune response)等)。疏水性部分的添加優(yōu)選選自添加膽固醇、膽固醇衍生物、磷脂、糖脂、甘油 酯、類固醇、神經(jīng)酰胺(ceramids)、異戊二烯衍生物、金剛烷、法尼醇、脂族基團(tuán)、聚芳 族化合物。疏水性部分的連接優(yōu)選通過共價(jià)結(jié)合，其可通過氨基甲酸酯、酰胺、醚、二硫 化物或本領(lǐng)域技術(shù)人員技術(shù)之內(nèi)的任何其它連接來實(shí)現(xiàn)。因此，本發(fā)明的疏水性修飾的、優(yōu)選酰化的preS-衍生肽優(yōu)選是脂肽，這是由于 其N-端親脂性或疏水性基團(tuán)/部分。所述preS-衍生肽P的C-端修飾(R)優(yōu)選是用針對(duì)降解(例如體內(nèi)降解)的保 護(hù)部分來修飾。“C-端”是指在C-端(即在相應(yīng)的最后氨基酸殘基)處的修飾，但也包括接 近C-端的修飾，例如倒數(shù)第一個(gè)氨基酸殘基、倒數(shù)第二個(gè)氨基酸殘基或更前的氨基酸殘 基(例如引入一個(gè)D-氨基酸，其可保護(hù)載體免遭羧肽酶作用而導(dǎo)致的酶促降解)。技術(shù)人員將能根據(jù)相應(yīng)的應(yīng)用來選擇相應(yīng)的合適的部分。優(yōu)選的針對(duì)降解的保護(hù)部分選自酰胺、D-氨基酸、修飾氨基酸、環(huán)狀氨基酸、 白蛋白、天然和合成聚合物(例如PEG、聚糖(glycane))。此外，η為0或至少1，即C-端修飾(R)是任選的。優(yōu)選地，η為1。在本發(fā)明的進(jìn)一步的實(shí)施方案中，η為1、2、3、4或更大。也就是說，可用不 止1個(gè)(例如2個(gè))部分或基團(tuán)來修飾P的C-端或其附近。所述部分或基團(tuán)可以彼此相 同或不同。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，H和/或R通過接頭或間隔物與P連接。接頭或間隔物是技術(shù)人員已知的，例如聚丙氨酸、聚甘氨酸(polyglycin)、糖 類、(CH2)n基團(tuán)。因此，技術(shù)人員將能夠根據(jù)相應(yīng)的應(yīng)用來選擇相應(yīng)的合適接頭或間隔物。錨定基團(tuán)(A)可作為化合物、標(biāo)簽、標(biāo)記的連接點(diǎn)。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，錨定基團(tuán)是P的“C-端”，其中“C-端”是指在 C-端(即在相應(yīng)的最后氨基酸殘基)處的修飾，但也包括接近C-端的修飾，例如倒數(shù)第 一個(gè)氨基酸殘基、倒數(shù)第二個(gè)氨基酸殘基或更前的氨基酸殘基。在此情況下，η可以是 0，因此，沒有其它C-端修飾R。在該實(shí)施方案中，HBV的疏水性修飾的preS-衍生肽可具有以下通式
權(quán)利要求
1.下式的乙肝病毒(HBV)的疏水性修飾的pres-衍生肽， [Hm-P-RJA0其中P是所述preS-衍生肽，所述肽包含SEQ ID N0.1所示的HBVpreS共有序列的氨基酸序列或其變體， 其中變體優(yōu)選選自SEQ ID N0.1的至少14個(gè)連續(xù)氨基酸的N-端截短的和/或C-端 截短的變體；氨基酸取代或缺失變體；含有修飾氨基酸、非天然氨基酸或肽模擬物的變 體；H是所述preS-衍生肽P的所述疏水性修飾，所述修飾是P的N-端并選自酰化，優(yōu)選與羧酸、脂肪酸、C8-C22脂肪酸、具有親脂性側(cè)鏈的氨基酸的?；?， 和添加選自以下的疏水性部分膽固醇、膽固醇衍生物、磷脂、糖脂、甘油酯、類固醇、神經(jīng)酰胺、異戊二烯衍生 物、金剛烷、法尼醇、脂族基團(tuán)、聚芳族化合物， m為至少1，R是所述preS-衍生肽P的C-端修飾，所述修飾優(yōu)選是選自以下的針對(duì)降解的保護(hù)部分酰胺、D-氨基酸、修飾的氨基 酸、環(huán)狀氨基酸、白蛋白、天然和合成聚合物例如PEG、聚糖， η為O或至少1， A是錨定基團(tuán)，優(yōu)選選自酯、醚、二硫化物、酰胺、硫醇、硫酯， ο為O或至少1。
2.權(quán)利要求1的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中H是通過選自用豆蔻?；?C14)、 棕櫚?；?C16)或硬脂酰基(C18)來?；氖杷孕揎?。
3.權(quán)利要求1或2的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中H和/或R通過接頭或間隔物與P連接。
4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中P包括SEQID N0.1的 至少20個(gè)連續(xù)氨基酸的N-端截短的和/或C-端截短的變體。
5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中P包括具有選自SEQID N0.1所示的HBVpreS共有序列的氨基酸殘基2-48、殘基2_21、殘基2_20或殘基9_15 的氨基酸序列的SEQ ID N0.1變體。
6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中P不包含在SEQID N0.1 殘基9-15的氨基酸取代和/或缺失，優(yōu)選不包含在SEQ ID N0.1殘基9_22的氨基酸取代 和/或缺失。
7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中P包含具有不同病 毒種、株或亞型的氨基酸序列的SEQ ID N0.1變體，優(yōu)選具有HBV基因型或卷毛猴 HBV(WMHBV)或其變體的氨基酸序列的SEQ ID NO.1變體。
8.權(quán)利要求7的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中P包括選自SEQIDN0.2-10的氨基酸序列或其變體。
9.權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中P包括選自SEQID NO. 11-30和38的氨基酸序列或其變體。
10.權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中優(yōu)選通過氨基酸取代 來修飾SEQ ID N0.1的氨基酸殘基20-23，和/或優(yōu)選通過氨基酸取代來修飾氨基酸殘基 26-32。
11.權(quán)利要求10的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中通過丙氨酸氨基酸取代來修飾 SEQ ID N0.1的氨基酸殘基20-23，優(yōu)選修飾成基序APAF。
12.權(quán)利要求10或11的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中通過丙氨酸氨基酸取代來 修飾SEQ ID N0.1的氨基酸殘基26-32，優(yōu)選修飾成基序NANAPDW或NAAAPDW。
13.權(quán)利要求10-12中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中P包括選自SEQID N0.31-37的氨基酸序列或其變體。
14.權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中P包括選自SEQ IDNO.ll、SEQ ID NO. 12, SEQ ID NO. 13、SEQ ID NO. 16、SEQ ID N0.23、SEQ ID N0.26、SEQ ID N0.31 和 SEQ ID N0.38 的氨基酸序列。
15.權(quán)利要求14的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中H是通過用硬脂?；?C18)來酰 化的疏水性修飾。
16.權(quán)利要求14的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中H是通過用豆蔻?；?C14)來酰 化的疏水性修飾。
17.權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽，所述肽還包括選自以下的 化合物藥物；前藥；標(biāo)記；重組病毒或其衍生物；用于藥物、前藥或標(biāo)記的載體或貯 庫制劑；免疫原性表位。
18.權(quán)利要求17的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中所述化合物選自藥物，優(yōu)選 干擾素，例如IFN α ；病毒逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑；病毒RNA聚合酶抑制劑；病毒核心裝配抑制劑或病毒核殼抑制劑；激酶抑制劑，例如Raf激酶抑制劑；核苷類似物；蛋白酶抑制劑；蛋白酶體抑制劑；抗體或其片段；siRNA或其前體；法尼基化抑制劑；例如法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(FTI)； 醇脫氫酶(ADH)或其激活劑； 膽固醇生物合成抑制劑； 病毒或非病毒性病原體的肝臟期抑制劑； 抗生素。
19.權(quán)利要求18的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中所述藥物呈前藥的形式。
20.權(quán)利要求18或19的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中所述化合物是干擾素，例 如IFN- α并且P優(yōu)選包括SEQ ID Ν0.23或SEQ IDN0.38的氨基酸序列。
21.權(quán)利要求20的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中H是通過?；?、優(yōu)選用豆蔻?；?(C14)來酰化的疏水性修飾。
22.權(quán)利要求17-21中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中所述化合物是選自 熒光染料、放射性同位素和造影劑的標(biāo)記。
23.權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中所述化合物與所述 HBV的疏水性修飾的preS-衍生肽形成綴合物。
24.權(quán)利要求23的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中所述綴合物是通過共價(jià)連接或通 過形成復(fù)合物來形成。
25.權(quán)利要求24的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中所述綴合物通過將化合物與錨定 基團(tuán)A共價(jià)連接來形成。
26.權(quán)利要求1-25中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中錨定基團(tuán)A還包含間 隔物或接頭。
27.權(quán)利要求26的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中所述間隔物或接頭包含識(shí)別位 點(diǎn)，所述位點(diǎn)優(yōu)選被肝臟蛋白識(shí)別，所述肝臟蛋白優(yōu)選是肝細(xì)胞蛋白，更優(yōu)選是肝細(xì)胞 蛋白水解酶或細(xì)胞色素。
28.包含以下的藥物組合物至少一種權(quán)利要求1-16、26和27中任一項(xiàng)的HBV的疏水性修飾的preS_衍生肽；至少一種優(yōu)選如權(quán)利要求17-22中任一項(xiàng)所限定的待特異性遞送到肝臟、優(yōu)選遞送 到肝細(xì)胞的化合物；或權(quán)利要求23-25中任一項(xiàng)所限定的綴合物；和任選藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑。
29.權(quán)利要求1-27中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽作為載體用于將化合物特異 性遞送到肝臟的用途。
30.權(quán)利要求29的用途，其中所述化合物是權(quán)利要求17-21中任一項(xiàng)所限定的化合物。
31.權(quán)利要求29或30的用途，其中將化合物特異性遞送到肝臟是將所述化合物特異 性遞送到肝細(xì)胞。
32.權(quán)利要求29-31中任一項(xiàng)的用途，其中將所述化合物特異性遞送到動(dòng)物、優(yōu)選哺 乳動(dòng)物或人、或鳥的肝臟。
33.權(quán)利要求29-32中任一項(xiàng)的用途，其中所述化合物在肝臟內(nèi)富集。
34.權(quán)利要求29-33中任一項(xiàng)的用途，其中通過肝臟蛋白、優(yōu)選肝細(xì)胞蛋白、更優(yōu)選 肝細(xì)胞蛋白水解酶或細(xì)胞色素，自HBV的疏水性修飾的preS-衍生肽的共價(jià)綴合物中將 所述化合物切離。
35.用于診斷、預(yù)防和/或治療肝臟疾病或病癥的權(quán)利要求1-27中任一項(xiàng)的疏水性修 飾的preS-衍生肽或權(quán)利要求28的藥物組合物。
36.權(quán)利要求35的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中所述肝臟疾病或病癥選自肝炎、 肝硬化、血色病，優(yōu)選由肝炎A、B、C、D、E、F、G和H型病毒引起的肝炎或由病毒引起的并發(fā)性肝炎。
37.權(quán)利要求35或36的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中所述肝臟疾病或病癥是涉 及病毒或非病毒性病原體的肝臟期的疾病。
38.權(quán)利要求37的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中所述肝臟疾病或病癥是熱帶病、 瘧疾、血吸蟲病和利什曼病。
39.權(quán)利要求35的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中所述肝臟疾病或病癥是肝臟腫 瘤，優(yōu)選肝細(xì)胞癌(HCC)。
40.權(quán)利要求35的疏水性修飾的preS-衍生肽，其中所述肝臟疾病或病癥是代謝疾 病，優(yōu)選肥胖癥、代謝綜合征、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
41.用于調(diào)節(jié)肝功能的權(quán)利要求1-27中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽或權(quán)利要 求28的藥物組合物。
42.用于肝細(xì)胞-介導(dǎo)的抗原呈遞和肝臟定向的免疫應(yīng)答的活化的權(quán)利要求1-27和41 中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽或權(quán)利要求28的藥物組合物。
43.用于預(yù)防HBV和/或HDV感染、優(yōu)選用作疫苗的權(quán)利要求1_27和35-42中任一 項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽或權(quán)利要求28的藥物組合物。
44.用于聯(lián)合診斷、預(yù)防和/或治療肝臟疾病或病癥并預(yù)防HBV和/或HDV感染的 權(quán)利要求1-25和29-43中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽或權(quán)利要求28的藥物組合 物。
45.權(quán)利要求1-27中任一項(xiàng)的疏水性修飾的preS-衍生肽或權(quán)利要求28的藥物組合 物在制備用于診斷、預(yù)防和/或治療肝臟疾病或病癥的藥物中的用途。
46.用于聯(lián)合診斷、預(yù)防和/或治療肝臟疾病或病癥并預(yù)防HBV和/或HDV感染的 方法，所述方法包括給予受試者治療有效量的(a)包含權(quán)利要求1-16、26和27中任一項(xiàng)所限定的疏水性修飾的preS_衍生肽和至 少一種權(quán)利要求17-22中任一項(xiàng)所限定的化合物的綴合物，其中所述綴合物如權(quán)利要求 23-25中任一項(xiàng)所限定；或(b)權(quán)利要求28的藥物組合物。
47.權(quán)利要求46的方法，其中給藥途徑選自皮下、靜脈內(nèi)、口服、鼻內(nèi)、肌內(nèi)、經(jīng) 皮、吸入、通過栓劑。
48.權(quán)利要求46或47的方法，其中所述治療有效量范圍是每千克體重10μ g至lmg。
49.用于肝臟疾病或病癥的基因治療的包含編碼權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)所限定的 preS-衍生肽P的核酸的病毒載體。
50.權(quán)利要求49的病毒載體，其中所述病毒載體是復(fù)制缺陷型的，優(yōu)選是腺伴隨病毒 載體。
51.權(quán)利要求49或50的病毒載體，其中所述病毒載體還包含待在肝臟中表達(dá)的異源 序列。
52.用于鑒定HBV受體的方法，所述方法包括使用(a)包含權(quán)利要求1-16、26和27中任一項(xiàng)所限定的疏水性修飾的preS_衍生肽和至 少一種權(quán)利要求17-22中任一項(xiàng)所限定的化合物的綴合物，其中所述綴合物如權(quán)利要求23-25中任一項(xiàng)所限定；或(b)權(quán)利要求28的藥 物組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及乙肝病毒(HBV)的疏水性修飾的preS-衍生肽，所述肽是多用途載體，用于在體外和體內(nèi)將化合物特異性遞送到肝臟，優(yōu)選遞送到肝細(xì)胞。任何類型的化合物，除了特定藥物(例如干擾素、病毒逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑或核心裝配抑制劑和/或標(biāo)記)之外，都可特異性靶向肝臟并因此在肝臟中富集。這種肝臟靶向還可用于靶向的診斷、預(yù)防和/或治療肝臟疾病或病癥(例如肝炎、瘧疾、肝細(xì)胞癌(HCC))，以及用于預(yù)防HAV、HBV、HCV和/或HDV的感染。本發(fā)明涉及藥物組合物，所述組合物包含所述疏水性修飾的preS-衍生肽和特異性遞送到肝臟的化合物。本發(fā)明還涉及用于聯(lián)合治療肝臟疾病以及預(yù)防HAV、HBV、HCV和/或HDV感染的方法。本發(fā)明還涉及preS-衍生肽在基因治療和免疫原性表位的遞送中的用途，所述表位用于肝細(xì)胞介導(dǎo)的抗原呈遞，以活化肝臟定向的免疫應(yīng)答。
文檔編號(hào)A61P33/02GK102015753SQ200980112506
公開日2011年4月13日 申請(qǐng)日期2009年1月26日 優(yōu)先權(quán)日2008年1月25日
發(fā)明者S·烏爾班, U·哈伯科恩, W·米爾 申請(qǐng)人:海德堡呂布萊希特-卡爾斯大學(xué)