專利名稱：用于治療神經(jīng)變性疾病的組合物和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療神經(jīng)變性疾病的組合物和方法。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供 了用于治療和預(yù)防老年性耳聾的組合物。
背景技術(shù)：
年齡相關(guān)的聽力損失或老年性耳聾對(duì)社會(huì)提出巨大的人道主義和經(jīng)濟(jì)的挑戰(zhàn)。在 美國，據(jù)估計(jì)年齡在65和75之間的23%的人和年齡超過75的40%的人患有老年性耳聾， 且患有這一病癥的人數(shù)預(yù)期隨著老年人口的增長逐漸增長(Someya等，Neurobiol. Aging 20 1613 [2007])ο老年性耳聾是在大多數(shù)個(gè)體中隨著它們變老而逐漸發(fā)生的聽力損失。聽力損失是 與老化關(guān)聯(lián)的普遍病癥。與老年性耳聾關(guān)聯(lián)的損失由于高音調(diào)聲音或高頻率聲音，通常很 大。存在許多老年性耳聾的原因。最普遍地，隨著他或她年齡增長，其起因于人的內(nèi)耳 中的病理變化，但是老年性耳聾也可能起因于中耳的病理變化或起因于沿著通往腦的神經(jīng) 途徑的復(fù)雜的病理變化。老年性耳聾最通常發(fā)生在雙耳中，同樣地感染它們。因?yàn)閾p失過 程是逐漸的，患有老年性耳聾的人可能不會(huì)認(rèn)識(shí)到他們的聽力在減退?；加欣夏晷远@，聲 音通常較不清楚且音量降低。這個(gè)引起聽力和理解語言的困難。感覺神經(jīng)性聽力損失由內(nèi)耳或聽神經(jīng)的病癥引起。老年性耳聾通常是感覺神經(jīng)聽 力病癥。其最通常由內(nèi)耳中逐漸的變化引起。反復(fù)暴露于日常交通聲音或建筑工作，吵鬧 的辦公室，產(chǎn)生噪音的設(shè)備和大聲的音樂的蓄積作用可以引起感覺神經(jīng)性聽力損失。感覺 神經(jīng)性聽力損失最通常起因于毛細(xì)胞(內(nèi)耳中的感覺感受器)和螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(螺狀神 經(jīng)元)的損失。這可以由于遺傳因素以及老化，各種健康狀況和一些藥物(阿司匹林和某 些抗生素)的副作用而發(fā)生。老年性耳聾可以由心臟病、高血壓、糖尿病引起的血管(關(guān)于血管)病況或其它循 環(huán)問題引起的向耳部的血液供應(yīng)的變化引起。損失可以是輕度、中度或嚴(yán)重的。有時(shí)老年性耳聾是傳導(dǎo)性聽力損失，意味著聲音敏感性的損失是由外耳和/或中 耳的異常引起。這些異常情況可能包括鼓膜(耳膜)的降低的功能或?qū)⒁舨◤墓哪みf送到 內(nèi)耳的中耳中的三塊小骨的降低的功能。存在幫助患有老年性耳聾的人的許多策略。對(duì)于一些個(gè)人可以推薦助聽器。助聽 設(shè)備在一些情況中可以提供聽力能力的進(jìn)一步的提高。這種設(shè)備的一個(gè)實(shí)例是內(nèi)裝的電話 擴(kuò)音器。另一實(shí)例是通過遞送像廣播的聲波使聲音更清楚的具有或沒有助聽器的FM系統(tǒng)。 讀唇法訓(xùn)練(使用視覺信號(hào)確定說話的內(nèi)容)可以幫助患有老年性耳聾的這些人更好地理 解交談或陳述中說的內(nèi)容。
然而，還沒有開發(fā)出用于老年性耳聾的預(yù)防性或治療性介入。發(fā)明概述本發(fā)明涉及治療神經(jīng)變性疾病的組合物和方法。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供 了用于治療和預(yù)防老年性耳聾的組合物。在一些實(shí)施方式中，治療了其它神經(jīng)變性疾病。在 一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了營養(yǎng)補(bǔ)劑、食品和藥物組合物，和用于施用包含預(yù)防或減輕 神經(jīng)變性疾病的化合物的這些產(chǎn)品的方法。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供用于治療和/或預(yù)防神經(jīng)變性疾病(例如，老年 性耳聾)的方法，包括在預(yù)防或減輕癥狀的條件下向具有神經(jīng)變性疾病的癥狀或處于神經(jīng) 變性疾病風(fēng)險(xiǎn)中的受治療者施用包含珊瑚萃取物的組合物。在一些實(shí)施方式中，珊瑚萃取 物是含水液體(例如，MiIiQ水或蒸餾水)。在一些實(shí)施方式中，珊瑚萃取物具有約7.0至 9. 0(例如，8. 0)的pH。在一些實(shí)施方式中，珊瑚萃取物具有約1. 4mg/L至140mg/L(例如， 7mg/L 至 21mg/L、8. 5mg/L 至 19. 5mg/L、10mg/L 至 18mg/L、llmg/L 至 17mg/L、12. 8mg/L 至 15. 8mg/L、13. 6mg/L 至 15mg/L、13. 9mg/L 至 14. 7mg/L、14mg/L 至 14. 6mg/L、14. 2mg/L 至 14. 5mg/L，或約14. 30mg/L)的鈣含量。在一些實(shí)施方式中，珊瑚萃取物具有約0. 54mg/L至 54. Omg/L (例如，2. 7mg/L 至 8. lmg/L、3. 2mg/L 至 7. 6mg/L、3. 8mg/L 至 7mg/L、4. 3mg/L 至 6. 5mg/L、4. 9mg/L 至 5. 9mg/L、5. lmg/L 至 5. 7mg/L、5. 2mg/L 至 5. 6mg/L、5. 3mg/L 至 5. 5mg/ !^力^日！^/！至日乂日！^/！，或約日乂!!^/!)的鎂含量。在一些實(shí)施方式中，珊瑚萃取物具有 約 0. lmg/L 至 50. Omg/L(例如，0. 53mg/L 至 1. 59mg/L、0. 76mg/L 至 1. 46mg/L、0. 86mg/L 至 1. 26mg/L、0. 96mg/L 至 1. 16mg/L、l. Omg/L 至 1. lmg/L、1. 03mg/L 至 1. 09mg/L、l. 04mg/L 至 1. 08mg/L、1. 05mg/L 至 1. 07mg/L、1. 055mg/L 至 1. 065mg/L,或約 1. 06mg/L)的鈉含量。在 一些實(shí)施方式中，珊瑚萃取物具有約0. 03mg/L至30. Omg/L (例如，0. 14mg/L至0. 42mg/L、 0. 17mg/L 至 0. 53mg/L、0. 2mg/L 至 0. 36mg/L、0. 22mg/L 至 0. 34mg/L、0. 25mg/L 至 0. 31mg/ L、0. 27mg/L 至 0. 29mg/L、0. 275mg/L 至 0. 285mg/L、0. 272mg/L 至 0. 288mg/L、0. 277mg/L 至 0. 283mg/L,或約0. 28mg/L)的鉀含量。在一些實(shí)施方式中，液體具有約5. 8mg/L至580mg/ L (例如，29mg/L 至 87mg/L、35mg/L 至 81mg/L、41mg/L 至 75mg/L、47mg/L 至 69mg/L、52mg/L 至 64mg/L、55mg/L 至 61mg/L、56mg/L 至 60mg/L、57mg/L 至 59mg/L、57. 5mg/L 至 58. 5mg/L, 或約58mg/L)的硬度。在一些實(shí)施方式中，珊瑚萃取物的施用在受治療對(duì)象中產(chǎn)生螺旋神 經(jīng)節(jié)細(xì)胞的損失的預(yù)防或減少。在一些實(shí)施方式中，珊瑚液體通過以下方法制備將珊瑚顆粒浸漬在純化的水中； 并調(diào)節(jié)水的PH至8. 0士0. 5。在一些實(shí)施方式中，珊瑚液體通過以下制備使水通過包括珊 瑚顆粒的水純化柱(例如，家用水或工業(yè)水純化系統(tǒng))。本發(fā)明另外提供用于治療神經(jīng)變性疾病的方法，其包括向具有神經(jīng)變性疾病癥 狀的受治療者施用約7. 0至9. 0的pH的天然石的提取物，其包含約1. 4mg/L至140mg/L的 鈣含量、約0. 54mg/L至54mg/L的鎂含量、約0. lmg/L至50. Omg/L的鈉含量、約0. 03mg/L 至30. 0mg/L的鉀含量，和約5. 8mg/L至580mg/L的硬度。在一些實(shí)施方式中，天然石是石 灰石、碳酸鈣、碳酸鎂、碳酸鈉、碳酸鉀等。本發(fā)明另外提供用于治療神經(jīng)變性疾病的方法，其包括向具有神經(jīng)變性疾病癥 狀的受治療者施用約7. 0至9. 0的pH的化合物的提取物，其包含約1. 4mg/L至140mg/L的 鈣含量、約0. 54mg/L至54mg/L的鎂含量、約0. lmg/L至50. 0mg/L的鈉含量、約0. 03mg/L至30. Omg/L的鉀含量，和約5. 8mg/L至580mg/L的硬度。在一些實(shí)施方式中，化合物是碳 酸鈣、碳酸鎂、碳酸鈉、碳酸鉀或這些化合物的混合物。本發(fā)明進(jìn)一步提供了包含足以預(yù)防或減輕神經(jīng)變性疾病的劑量的珊瑚提取物的 食品、營養(yǎng)補(bǔ)劑或藥物組合物。本發(fā)明的另外的實(shí)施方式在本文被描述。附圖簡述附

圖1表示在本發(fā)明的實(shí)施方式的開發(fā)過程中進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)中使用的示例性研究 設(shè)計(jì)。附圖2表示20個(gè)月鼠齡的對(duì)照和CW小鼠的體重。附圖3表示由珊瑚鈣水對(duì)老年性耳聾的預(yù)防。附圖4表示來自對(duì)照(A C)和CW(D F)的耳蝸底層的顯微照片。箭頭指明螺 旋神經(jīng)節(jié)和毛細(xì)胞。比例條=50μπι(左圖)。比例條=IOOym(中圖和右圖)。附圖5表示珊瑚處理的水預(yù)防螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞損失。誤差柱表示S. Ε. M0附圖6表示由珊瑚處理的水預(yù)防毛細(xì)胞損失。誤差柱表示S. Ε. M0為了促進(jìn)對(duì)本發(fā)明的理解，許多術(shù)語和短語在下面定義如本文所用，術(shù)語“受治療者”指任何動(dòng)物(例如，哺乳動(dòng)物)，包括但不限于，人、 非人靈長類、嚙齒類、伴侶動(dòng)物(例如，狗、貓等)，以及類似物，其是具體治療的接受者。通 常，提到人受治療者時(shí)，術(shù)語“受治療者”和“患者”在本文互換使用。如本文所用，術(shù)語“非人動(dòng)物”指所有的非人動(dòng)物，包括但不限于脊椎動(dòng)物，諸如嚙 齒類、非人靈長類、羊、牛、反芻類、兔類、豬、山羊、馬、犬、貓、鳥類等。如本文所用，術(shù)語“體外”指人工環(huán)境和人工環(huán)境中發(fā)生的過程和反應(yīng)。體外環(huán)境 可以包括，但不限于，試管和細(xì)胞培養(yǎng)物。術(shù)語“體內(nèi)”指自然環(huán)境(例如，動(dòng)物或細(xì)胞)和 在自然環(huán)境中發(fā)生的過程或反應(yīng)。術(shù)語“測(cè)試化合物”和“候選化合物”指為用于治療或預(yù)防疾病、疾病(illness)、 疾病(sickness)或身體功能的病癥(例如聽力損失)的候選物的任何化學(xué)實(shí)體、藥劑、藥 物以及類似物。測(cè)試化合物包括已知的潛在的治療化合物。通過使用本發(fā)明的篩選方法篩 選可以確定測(cè)試化合物具有治療性。如本文所用，術(shù)語“樣品”以其最廣義使用。在一種含義中，其意指包括從任何來 源獲得的標(biāo)本或培養(yǎng)物，以及生物和環(huán)境樣品。生物樣品可以獲自動(dòng)物(包括人)且涵蓋 液體、固體、組織和氣體。生物樣品包括血液產(chǎn)品，諸如血漿、血清以及類似物。環(huán)境樣品包 括環(huán)境物質(zhì)，諸如表面物質(zhì)、土壤、水和工業(yè)樣品。然而這些實(shí)例并非被解釋為限制適用于 本發(fā)明的樣品類型。“制備的食品”指批準(zhǔn)用于人類消耗的任何預(yù)包裝食物。如本文所用，術(shù)語“生理學(xué)上可接受的載體”指通常與油性藥物一起使用的任何載 體或賦形劑。這些載體或賦形劑包括，但不限于，油、淀粉、蔗糖和乳糖。如本文所用，術(shù)語“ 口服遞送媒介物”指口服遞送藥物的任何方法，包括但不限于 膠囊、丸劑、片劑和糖漿。如本文所用，術(shù)語“食品”指適合被人、非反芻動(dòng)物或反芻動(dòng)物消耗的任何食物或飼料?！笆称贰笨梢允侵苽涞氖澄锖桶b的食物(例如，蛋黃醬、色拉調(diào)味汁、面包或乳酪) 或動(dòng)物飼料(例如，擠出的和壓出的動(dòng)物飼料或粗制混合飼料)。如本文所用，術(shù)語“營養(yǎng)補(bǔ)劑”指被配制成飲食補(bǔ)劑或營養(yǎng)補(bǔ)劑用作飲食的一部分 的食品。如本文所用，術(shù)語“模擬物”指模擬配體與其靶的結(jié)合或相互作用，或模擬化合物 的生理效應(yīng)的小分子化合物。例如，本文描述的化合物的模擬物是具有與化合物相同的生 理學(xué)效應(yīng)(例如預(yù)防或治療神經(jīng)變性疾病)的小分子。如本文所用，術(shù)語“珊瑚水”指暴露于液體或溶劑的珊瑚提取的產(chǎn)物。在一些實(shí)施 方式中，珊瑚是從海洋底部采集的化石化的珊瑚顆粒。在一些實(shí)施方式中，珊瑚在提取之前 被粉末化的或以其他方式干燥。在一些實(shí)施方式中，液體是含水的(例如水，諸如純化水或 蒸餾水)。在一些實(shí)施方式中，提取物包括鹽和礦物質(zhì)。在一些實(shí)施方式中，珊瑚萃取物具 有約7.0至9. 0(例如，8.0)的pH。雖然不需要了解精確的組合物，但在一些實(shí)施方式中， 提取物包含約 1. 4mg/L 至 140mg/L (例如 7mg/L 至 21mg/L、8. 5mg/L 至 19. 5mg/L、10mg/L 至 18mg/L、1 lmg/L 至 17mg/L、12. 8mg/L 至 15. 8mg/L、13. 6mg/L 至 15mg/L、13. 9mg/L 至 14. 7mg/ L、14mg/L 至 14. 6mg/L、14. 2mg/L 至 14. 5mg/L,或約 14. 30mg/L)的鈣含量，約 0. 54mg/L 至 54. Omg/L (例如 2. 7mg/L 至 8. lmg/L、3· 2mg/L 至 7. 6mg/L、3. 8mg/L 至 7mg/L、4. 3mg/L 至 6. 5mg/L、4. 9mg/L 至 5. 9mg/L、5. lmg/L 至 5. 7mg/L、5. 2mg/L 至 5. 6mg/L、5. 3mg/L 至 5. 5mg/ L、5. 35mg/L 至 5. 45mg/L,或約 5. 4mg/L)的鎂含量，約 0. lmg/L 至 50. Omg/L (例如 0. 53mg/L 至 1. 59mg/L、0. 76mg/L 至 1. 46mg/L、0. 86mg/L 至 1. 26mg/L、0. 96mg/L 至 1. 16mg/L、l. Omg/L 至 1. lmg/L、1. 03mg/L 至 1. 09mg/L、1. 04mg/L 至 1. 08mg/L、1. 05mg/L 至 1. 07mg/L、1. 055mg/ L 至 1. 065mg/L,或約 1. 06mg/L)的鈉含量，約 0. 03mg/L 至 30. Omg/L(例如 0. 14mg/L 至 0. 42mg/L、0. 17mg/L 至 0. 53mg/L、0. 2mg/L 至 0. 36mg/L、0. 22mg/L 至 0. 34mg/L、0. 25mg/L 至 0. 3lmg/L、0. 27mg/L 至 0. 29mg/L、0. 275mg/L 至 0. 285mg/L、0. 272mg/L 至 0. 288mg/L、 0. 277mg/L 至 0. 283mg/L,或約 0. 28mg/L 的鉀含量和約 5. 8mg/L 至 580mg/L (例如 29mg/L 至 87mg/L、35mg/L 至 81mg/L、41mg/L 至 75mg/L、47mg/L 至 69mg/L、52mg/L 至 64mg/L、55mg/L 至 61mg/L、56mg/L 至 60mg/L、57mg/L 至 59mg/L、57. 5mg/L 至 58. 5mg/L,或約 58mg/L)的硬 度。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及治療神經(jīng)變性疾病的組合物和方法。本發(fā)明的一些實(shí)施方式提供組合 物、藥物組合物、食品、營養(yǎng)補(bǔ)劑和施用用于預(yù)防和治療神經(jīng)變性疾病諸如老年性耳聾的組 合物的方法。例如，在老年性耳聾的可靠的動(dòng)物模型中進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，該模型顯示15個(gè)月鼠齡 的年齡相關(guān)的聽力損失的遲發(fā)(Keithley等，Hear Res. 188 21[2004])和12個(gè)月鼠齡的 SGC和毛細(xì)胞的顯著損失(Keithley等，[2004]，增刊)。在本發(fā)明的實(shí)施方式的發(fā)展過程中進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)中，評(píng)價(jià)珊瑚處理的飲用水在動(dòng)物 模型中對(duì)老年性耳聾預(yù)防和治療效果。聽力功能測(cè)試顯示對(duì)照動(dòng)物在8，16，32kHz顯示了 嚴(yán)重的聽力損失，而珊瑚處理的(CW)小鼠在8，16，32kHz顯示了正常的聽力或輕度聽力損 失ΓΡ< 0.05，η = 7)，表明珊瑚處理的水顯著保護(hù)聽力功能。組織學(xué)分析顯示，對(duì)照動(dòng)物 的耳蝸顯示螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元和毛細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p失而CW動(dòng)物耳蝸顯示螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元和毛細(xì)胞的輕度或較少的損失，表明珊瑚處理的水預(yù)防耳蝸細(xì)胞損失。此外，CW動(dòng)物的頂 層、中層和底層平均螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(SGC)密度顯著地高于對(duì)照動(dòng)物，表明了珊瑚處理的 水預(yù)防螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞損失ΓΡ<0. 05，η = 4 5)。CW小鼠的中層和底層的平均 外毛細(xì)胞存活率顯著地高于對(duì)照小鼠，表明珊瑚處理的水預(yù)防外毛細(xì)胞損失ΓΡ < 0. 05， η = 4 5)?？傮w來說，實(shí)驗(yàn)顯示珊瑚處理的水的消耗引起預(yù)防和治療老年性耳聾，并預(yù) 防或治療與多種神經(jīng)變性疾病和病況關(guān)聯(lián)的生理學(xué)損傷。因此，在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明 提供了使用珊瑚提取物(例如，水提取物)治療和/或預(yù)防神經(jīng)變性疾病諸如老年性耳聾 的方法。I.珊瑚提取物如上面描述，在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供包含珊瑚提取物的組合物。在一些實(shí) 施方式中，該提取物在水溶液中。例如，在一些實(shí)施方式中，珊瑚處理的水使用珊瑚顆?；?粉末產(chǎn)生。一種示例非限制性方法如下將珊瑚顆?；蚍勰┙谡麴s水或純水中持續(xù)幾分 至幾年的時(shí)間(例如，1小時(shí)至1年，1小時(shí)至1個(gè)月，1小時(shí)至1星期，2小時(shí)至2天，12小 時(shí)至36小時(shí)，或約24小時(shí))，然后使用NaOH或HCl將水的ρΗ調(diào)至8. 0士0. 5。因?yàn)樯汉黝w 粒富含礦物，包括鈣、鎂、鉀、鐵、鋅、硒、錳、鉻等，所以珊瑚處理的水富含這些礦物且是堿性 的。許多珊瑚處理的提取物的制劑適合用于本發(fā)明的實(shí)施方式的組合物和方法。在 一些實(shí)施方式中，施用是口服施用。本發(fā)明的實(shí)施方式的組合物可以以水溶液、油溶液， 或以本文討論的任一其它形式提供。組合物也可以通過許多其它途徑的任一種提供，所 述途徑包括但不限于靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、髓內(nèi)、鞘內(nèi)、心室內(nèi)、經(jīng)皮、皮下、腹膜內(nèi)、鼻內(nèi)、 腸、局部、舌下或直腸方式。用于制劑和施用的技術(shù)的進(jìn)一步細(xì)節(jié)可以參見Remington' s Pharmaceutical Sciences (雷明頓藥物科學(xué))(Maack Publishing Co.，Easton, PA)的最 新版本。在一些實(shí)施方式中，組合物單獨(dú)提供為營養(yǎng)補(bǔ)劑，或其與其它成分組合提供為營 養(yǎng)補(bǔ)劑。在一些實(shí)施方式中，營養(yǎng)補(bǔ)劑被包裝在可以包括描述補(bǔ)劑施用的劑量和時(shí)機(jī)的說 明書的容器或瓶中。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明的珊瑚提取物提供為包含提取物的食品。例如，在一 些實(shí)施方式中，珊瑚水被提供為用于人或動(dòng)物消耗的瓶裝水。在其它實(shí)施方式中，珊瑚提 取物被添加到制備的飲料產(chǎn)品，包括但不限于橙汁、蔬菜汁和類似水果飲料和蔬菜汁、可 樂飲料、姜酒、蘇打水和類似碳酸飲料，運(yùn)動(dòng)飲料和類似軟飲料、咖啡、黑茶、抹茶和類似 基于茶的飲料、可可、乳酸菌飲料和類似牛奶飲料、siruko、紅豆年糕湯(zenzai)(稠的 紅豆湯(azuki bean soup))，堅(jiān)果(例如，杏仁或花生)飲料、麥芽飲料、啤酒飲料(hop beverage)、由除了茶之外的植物制備的茶類飲料(大麥茶、藥茶、中國濱黎葉枸杞茶、 tochu(杜仲茶)，豆乳和含豆乳的飲料，膳食替換飲料、能量飲品、節(jié)食飲品和其它普通飲 料中。在一些實(shí)施方式中，飲料包含其他成分，包括但不限于碳酸水，食物淀粉-例如， 改進(jìn)的，高果糖玉米糖漿和/或蔗糖和/或糖、苯甲酸鈉、咖啡因、樹脂的甘油酯、調(diào)味劑、 色素、防腐劑、其他抗氧化劑、乳化劑、緩沖劑、著色劑、調(diào)味劑、維生素、礦物質(zhì)、核苷酸和核 苷、藥劑、增稠劑和穩(wěn)定劑等。在一些實(shí)施方式中，組合物與合適的抗氧化劑諸如卵磷脂、生育酚、維生素C、維生素C棕櫚酸酯，或香料提取物，諸如迷迭香提取物，一起被包裝用于人 類用途。在一些實(shí)施方式中，飲料包含維生素。實(shí)例包括但不限于水溶性的或油溶性的，天 然的或合成的，包括用作維生素制品的各種底物。天然的水溶性維生素的實(shí)例包括維生素 B1、B2、B6、B12、煙酸、泛酸、生物素、葉酸、硫辛酸、肌醇、維生素C以及類似物。天然油溶性 的維生素的實(shí)例包括維生素A、維生素D、維生素E、維生素K以及類似物。通常用作合成維 生素的維生素制品的實(shí)例包括維生素A制品，諸如視黃醇；維生素D制品，諸如麥角骨化醇 和二氫速硫醇；維生素Bl制品，諸如鹽酸硫胺和硝酸硫胺；維生素Bl衍生物制品，諸如奧 托硫胺、鹽酸地賽硫胺、二硫硫胺、雙苯硫胺、呋喃硫胺和苯磷硫胺；維生素B2制品，諸如黃 素腺嘌呤二核苷酸、丁酸核黃素、核黃素和磷酸核黃素鈉鹽；維生素B6制品，諸如鹽酸吡哆 醇、磷酸吡哆醇和磷酸吡哆醛；維生素B12制品，諸如腺苷鈷胺、氰鈷維生素、醋酸羥鈷胺、 甲鈷胺；維生素E制品，諸如生育酚琥珀酸鈣和乙酸生育酚；維生素K制品，諸如植物甲萘 醌和四烯甲萘醌。在一些實(shí)施方式中，通過將成分添加到液體中(例如，上面描述的珊瑚提取物組 合物)不使用珊瑚制備包含珊瑚提取物成分的組合物。在一些實(shí)施方式中，具有上面描述的組分的提取物由天然石或化合物(例如，石 灰石、碳酸鈣、碳酸鎂、碳酸鈉、碳酸鉀等)單獨(dú)或結(jié)合其它礦物質(zhì)來制備。在一些實(shí)施方式中，珊瑚提取物通過包括珊瑚或其它天然石的水純化系統(tǒng)來提 供。例如，在一些實(shí)施方式中，家用水純化系統(tǒng)(例如，水過濾器、水龍頭過濾器或凈水器 (under sink filters))包括珊瑚柱或純化柱或過濾器的珊瑚組件。在其它實(shí)施方式中，工 業(yè)水過濾系統(tǒng)(例如，用于商業(yè)產(chǎn)品或純化水或包含純化水的飲料)。II.治療方法在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供用于預(yù)防和治療老年性耳聾和其它神經(jīng)變性疾病 和病況的方法。例如，在一些實(shí)施方式中，將珊瑚提取物(例如，珊瑚處理的水)施用到受 治療者以預(yù)防老年性耳聾。在其它實(shí)施方式中，將珊瑚提取物作為治療施用到診斷患有老 年性耳聾的受治療者。在一些實(shí)施方式中，以每日(或近似頻度)為基礎(chǔ)，施用珊瑚提取物 持續(xù)延長的一段時(shí)間(例如，數(shù)星期、數(shù)月或數(shù)年)。在一些實(shí)施方式中，珊瑚處理的水被提 供為即飲的水瓶。在其它實(shí)施方式中，珊瑚提取物提供為濃縮的提取物以與其它飲料或食 品混合(例如，上面描述的那些)。在其它實(shí)施方式中，珊瑚處理的水被用于治療和/或預(yù)防其它疾病或耳蝸中與神 經(jīng)變性關(guān)聯(lián)的體征或癥狀。例如，在一些實(shí)施方式中，珊瑚處理的水被用于治療和/或預(yù)防 阿爾茲海默病、帕金森病、亨延頓病、肌萎縮性側(cè)索硬化、亞歷山大病、阿爾珀病、運(yùn)動(dòng)失調(diào) 性毛細(xì)血管擴(kuò)張病、巴騰病(也稱為Spielmeyer-Vogt-Sjogren-Batten病)、牛海綿樣腦 病(BSE)、卡納萬病、科凱恩綜合征、皮質(zhì)延髓退化、克羅伊茨菲爾特雅各布病、HIV-關(guān)聯(lián)的 癡呆、肯尼迪病、克拉伯病、路易體癡呆、馬約病(脊髓小腦性共濟(jì)失調(diào)3型)、多發(fā)性硬化、 多系統(tǒng)萎縮癥、神經(jīng)萊姆病(Neuroborreliosis)、佩-梅氏病、皮克病、原發(fā)性側(cè)索硬化癥、 朊病毒病、雷夫索姆病、桑德霍夫病、謝爾德病、繼發(fā)于阿狄森貧血的亞急性脊髓混合變性、 精神分裂癥、Spielmeyer-Vogt-S jogren-Batten病(也已知為巴騰病)、脊髓小腦性共濟(jì)失 調(diào)(具有不同特征的多個(gè)類型)、脊髓性肌萎縮、司-里-奧三氏病和脊髓癆。
鐘為了說明和進(jìn)一步解釋本發(fā)明的某些優(yōu)選的實(shí)施方式和方面，提供以下實(shí)施例， 并且它們不被解釋為限制其范圍。實(shí)施例1A.材料和方法1. 1.水的制備制備珊瑚處理的水和對(duì)照水的方法如下將IOOg的珊瑚顆粒浸漬在2L的蒸餾水 中持續(xù)24hr，然后使用NaOH或HCl將水的pH調(diào)為8.0 士 0.5。使用蒸餾水制備對(duì)照水。使 用NaOH或HCl將對(duì)照水的pH調(diào)節(jié)至3. 0士0. 5，因?yàn)橛糜趯?shí)驗(yàn)室小鼠的標(biāo)準(zhǔn)飲用水是酸化 的水，其PH是約3.0。1. 2.水組合物使用電感偶合等離子體發(fā)射光譜儀(η = 3)測(cè)定鈣含量和鎂含量。使用原子吸收 光譜儀(η = 3)測(cè)定鈉含量和鉀含量。使用二尾標(biāo)準(zhǔn)t檢驗(yàn)檢測(cè)數(shù)據(jù)。將所有數(shù)據(jù)報(bào)道為 平均值士 S. E.M。1. 3.動(dòng)物和飲食處理已經(jīng)描述了用于貯存和飼養(yǎng)雄性同系繁殖C57BL/6(B6)小鼠的方法的細(xì)節(jié)。簡要 地說，將小鼠分成兩組對(duì)照水(對(duì)照)和珊瑚處理的水(CW)。喂食CW治療的小鼠與對(duì)照 小鼠相同的食物和相同的熱量攝取，但從2個(gè)月鼠齡到20個(gè)月鼠齡喂食CW治療的小鼠珊 瑚處理的水(圖1)。喂食對(duì)照小鼠蒸餾水和酸化(PH3)水。在20個(gè)月鼠齡進(jìn)行聽力測(cè)試。 相同的動(dòng)物被用于組織學(xué)評(píng)價(jià)、螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞計(jì)數(shù)和毛細(xì)胞計(jì)數(shù)。1.4.聽力評(píng)價(jià)已經(jīng)描述了 ABR測(cè)量的詳細(xì)過程。(Yamasoba等，2005)。簡要地說，使用ABR記錄 系統(tǒng)(Intelligent Hearing System)用短純音刺激(4、8禾口 16kHz)測(cè)量ABR。將小鼠用鹽 酸甲苯噻嗪(10mg/kg，肌內(nèi)注射)和鹽酸氯胺酮(40mg/kg，肌內(nèi)注射)的混合物麻醉。將 每組七只小鼠用于這一研究，且將相同的小鼠用于以下的組織病理學(xué)分析。使用二尾標(biāo)準(zhǔn) t檢驗(yàn)檢測(cè)數(shù)據(jù)。將所有數(shù)據(jù)報(bào)告為平均值士S. E.M。1. 5.組織病理學(xué)分析已經(jīng)描述了用于組織處理的詳細(xì)過程(Someya等，2007)。簡要地說，將4%多聚甲 醛固定的和石蠟包埋的樣品切成4μπι切片，裝在甲硅烷涂覆的載玻片上，用蘇木素和曙紅 (HE)染色，并在光學(xué)顯微鏡(Leica Microsystems,Bannockburn, IL)下觀察。將羅林塔爾 管分成三個(gè)區(qū)域頂部、中部和底部(Keithley等，2004)，并將三個(gè)區(qū)域用于耳蝸組織病理 學(xué)的評(píng)價(jià)。使用各組四至五只小鼠，小鼠與在ABR測(cè)試中使用的那些相同。評(píng)價(jià)每只小鼠 的來自一個(gè)單側(cè)耳蝸的每五個(gè)切片中獲得的五個(gè)模塊切片。使用相同的動(dòng)物用于螺旋神經(jīng) 節(jié)細(xì)胞計(jì)數(shù)和毛細(xì)胞計(jì)數(shù)。使用20X物鏡在耳蝸個(gè)體切片的頂層、中層和底層的各橫截面中對(duì)螺旋神經(jīng)節(jié) 細(xì)胞(SGC)計(jì)數(shù)。通過細(xì)胞核的存在鑒定細(xì)胞。在各管輪廓的數(shù)字顯微照片上測(cè)量羅林 塔爾管的相應(yīng)的面積。使用ImageJ軟件，用光標(biāo)描繪管的周邊(Rasband，W. S.，Image J， U. S. NationalInstitutes of Health,Bethesda,Maryland,USA, 1997—2007.)。然后計(jì)算機(jī) 計(jì)算輪廓內(nèi)的面積。將SGC密度計(jì)算為每Imm2的SGC數(shù)目。評(píng)價(jià)每只小鼠的一個(gè)耳蝸中的單側(cè)頂層的五個(gè)切片。使用二尾標(biāo)準(zhǔn)t檢驗(yàn)分析數(shù)據(jù)。將所有數(shù)據(jù)報(bào)告為平均值士S. E.M。使用40X物鏡在耳蝸個(gè)體切片的頂層、中層和底層的各橫截面中對(duì)外毛細(xì)胞 (OHC)和內(nèi)毛細(xì)胞(IHC)計(jì)數(shù)。通過細(xì)胞核的存在鑒定細(xì)胞。如下計(jì)算外毛細(xì)胞存活率 (% ) :(0HC/3的#)X 100。如下計(jì)算內(nèi)毛細(xì)胞存活率(％ ) :(0HC/1的#)X 100。評(píng)價(jià)每只 小鼠的一個(gè)耳蝸中的單側(cè)頂層的五個(gè)切片。使用二尾標(biāo)準(zhǔn)t檢驗(yàn)分析數(shù)據(jù)。將所有數(shù)據(jù)報(bào) 告為平均值士 S. E.M。B.結(jié)果2. 1.珊瑚處理的水的評(píng)價(jià)Cff的鈣含量和鉀含量顯著高于對(duì)照的那些(表1) Γ P < 0. 05，η = 5)。CW的硬 度和ρΗ顯著高于對(duì)照的那些Γ P < 0. 05，η = 3)。在對(duì)照水中未檢測(cè)到鎂和鈉。2.2.聽力功能和耳蝸組織病理學(xué)的評(píng)價(jià)為了檢測(cè)珊瑚處理的水的長期消耗對(duì)老年性耳聾預(yù)防和治療的效果，隨后檢測(cè)該 水是否在Β6小鼠中延遲老年性耳聾的遲發(fā)。從這些小鼠中測(cè)定的ABR閾值顯示對(duì)照小鼠 在8，16，32kHz顯示了嚴(yán)重的聽力損失，而CW小鼠在8，16，32kHz顯示了正常的聽力或輕度 聽力損失ΓΡ < 0. 05，η = 7)，顯示珊瑚處理的水顯著保持了聽力功能(圖3)。2. 3.耳蝸組織病理學(xué)評(píng)價(jià)接下來檢測(cè)水對(duì)年齡相關(guān)的耳蝸退化的作用。對(duì)照小鼠(A)的耳蝸顯示螺旋神經(jīng) 節(jié)神經(jīng)元(B)和毛細(xì)胞(C)的嚴(yán)重?fù)p失，而CW小鼠(D)的耳蝸顯示螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元和毛 細(xì)胞的輕度或僅較少的損失，表明珊瑚處理的水預(yù)防耳蝸細(xì)胞損失(圖4)。CW小鼠的頂層、 中層和底層的平均螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(SGC)密度顯著地高于對(duì)照動(dòng)物的那些，顯示了處理的 水預(yù)防螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞損失(圖5)ΓΡ<0.05，η = 4 5)。CW小鼠的中層和底 層的平均外毛細(xì)胞存活率顯著地高于對(duì)照小鼠，顯示珊瑚處理的水預(yù)防外毛細(xì)胞損失(圖 6) (*Ρ < 0. 05，η = 4 5)。表1.水組合物。CW的鈣含量和鉀含量顯著高于對(duì)照的那些。此外，CW的硬度和 PH顯著高于對(duì)照的那些。在對(duì)照中未檢測(cè)到鎂和鈉。
權(quán)利要求
一種用于治療神經(jīng)變性疾病的方法，包括向具有神經(jīng)變性疾病的癥狀的受治療者施用包含珊瑚提取物的組合物。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述珊瑚提取物是含水液體。
3 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述珊瑚提取物具有約8.0的pH。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述珊瑚提取物具有約14.30mg/L的鈣含量。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述珊瑚提取物具有約5.4mg/L的鎂含量。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述珊瑚提取物具有約1.06mg/L的鈉含量。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述珊瑚提取物具有約0.28mg/L的鉀含量。
8.如權(quán)利要求2所述的方法，其中所述液體選自由過濾水和蒸餾水組成的組。
9.如權(quán)利要求8所述的方法，其中所述液體具有約58mg/L的硬度。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述神經(jīng)變性疾病是老年性耳聾。
11.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述珊瑚提取物的所述施用在所述受治療者中產(chǎn) 生螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞或神經(jīng)元的損失的預(yù)防或減輕。
12.如權(quán)利要求8所述的方法，其中所述珊瑚液體由以下方法制備a)將珊瑚顆粒浸漬在純化的水中；b)將水的pH調(diào)節(jié)至8.0± 0.5。
13.如權(quán)利要求8所述的方法，其中所述液體通過將水通過包含珊瑚顆粒的純化柱來 制備。
14.一種預(yù)防神經(jīng)變性疾病的方法，其包括在預(yù)防所述受治療者的神經(jīng)變性疾病的 條件下向受治療者施用包含珊瑚提取物的組合物。
15.如權(quán)利要求14所述的方法，其中所述神經(jīng)變性疾病是老年性耳聾。
16.一種治療神經(jīng)變性疾病的方法，其包括向具有神經(jīng)變性疾病的癥狀的受治療者 施用包含約7. 0至9. 0的pH的含水液體的組合物，所述液體包含約1. 4mg/L至140mg/L的 鈣含量、約0. 54mg/L至54mg/L的鎂含量、約0. lmg/L至50. Omg/L的鈉含量、約0. 03mg/L 至30. Omg/L的鉀含量，和約5. 8mg/L至580mg/L的硬度。
17.如權(quán)利要求16所述的方法，其中所述液體具有約14.3mg/L的鈣含量、約5. 4mg/L 的鎂含量、約1. 06mg/L的鈉含量、約0. 28mg/L的鉀含量和約58mg/L的硬度。
18.一種食品，其包括足以預(yù)防或減輕神經(jīng)變性疾病的劑量的珊瑚提取物，其中所述珊 瑚提取物包括約7. 0至9. 0的pH的液體，所述液體包含約1. 4mg/L至140mg/L的鈣含量、約 0. 54mg/L 至 54mg/L 的鎂含量、約 0. lmg/L 至 50. Omg/L 的鈉含量、約 0. 03mg/L 至 30. Omg/L 的鉀含量和約5. 8mg/L至580mg/L的硬度。
19.一種藥物組合物，其包括足以預(yù)防或減輕神經(jīng)變性疾病的劑量的珊瑚提取物，其中 所述珊瑚提取物包括約7. 0至9. 0的pH的液體，所述液體包含約1. 4mg/L至140mg/L的鈣 含量、約0. 54mg/L至54mg/L的鎂含量、約0. lmg/L至50. Omg/L的鈉含量、約0. 03mg/L至 30. 0mg/L的鉀含量和約5. 8mg/L至580mg/L的硬度。
20.如權(quán)利要求19所述的組合物，其中所述液體具有約14.3mg/L的鈣含量、約5. 4mg/ L的鎂含量、約1. 06mg/L的鈉含量、約0. 28mg/L的鉀含量和約58mg/L的硬度。
全文摘要
本發(fā)明涉及治療神經(jīng)變性疾病的組合物和方法。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了用于治療和預(yù)防老年性耳聾的組合物。
文檔編號(hào)A61K33/06GK101990436SQ200980112617
公開日2011年3月23日 申請(qǐng)日期2009年4月9日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月9日
發(fā)明者梁谷慎一 申請(qǐng)人:海洋生物有限公司