專利名稱：藥物溶出型導(dǎo)管及制造該藥物溶出型導(dǎo)管的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通過插入血管等生物體內(nèi)的管腔中來使狹窄部或閉塞部保持開放狀 態(tài)的擴張型導(dǎo)管，特別是涉及用包封了生理活性物質(zhì)的生物相容性納米粒子包覆的藥物溶 出型導(dǎo)管及其制造方法。
背景技術(shù)：
近年來，隨著生活習(xí)慣的歐美化及高齡化，在日本，心肌梗塞、心絞痛、腦卒中、 外周血管疾病等動脈硬化性疾病越來越多。作為針對這樣的動脈硬化性疾病的切實治 療方法，廣泛采用了例如以心臟冠狀動脈的經(jīng)皮冠動脈形成術(shù)為代表的經(jīng)皮血管形成術(shù) (Percutaneous TransluminalAngioplasty,以下稱PTA)，該經(jīng)皮血管形成術(shù)以外科方式擴 大血管狹窄部或閉塞部。
所謂PTA是這樣一項技術(shù)，該技術(shù)中，將前端帶有氣囊(氣球)的細(xì)管(氣囊導(dǎo)管) 通入血管內(nèi)的狹窄部，然后使前端的氣囊膨脹，來擴張發(fā)生狹窄的血管，從而恢復(fù)血流。由 此，病變部位的血管內(nèi)腔得以擴張，從而通過血管內(nèi)腔的血流增加。除了動脈硬化性疾病之 外，所述PTA還用于血液透析患者的臂上形成的分流血管的狹窄治療等。
一般而言，實施了 PTA的血管部位會受到內(nèi)皮細(xì)胞剝離或彈性板損傷等傷害，引 起作為血管壁的愈合反應(yīng)的血管內(nèi)膜增殖，在采用PTA成功擴大狹窄病變部位后，有約 30 40%會出現(xiàn)再狹窄。
更具體地，人類的再狹窄的成因被認(rèn)為主要有PTA1 3日后發(fā)生的可見單核細(xì) 胞粘合/浸潤的炎癥過程、以及約45日后增殖性達(dá)到最高峰時的平滑肌細(xì)胞引起的內(nèi)膜肥 大形成過程。在發(fā)生再狹窄的情況下，有必要再次實施PTA，因此，其預(yù)防方法、治療方法的 確立已成為當(dāng)務(wù)之急。
因此，下述提案非常盛行通過使用在金屬或高分子材料形成的支架或氣囊導(dǎo)管 的表面負(fù)載了抗炎癥劑或平滑肌細(xì)胞增殖抑制劑的藥物溶出型裝置，使藥物在管腔內(nèi)的留 置部位長期、局部性地釋放，來嘗試降低再狹窄率。例如，專利文獻(xiàn)1、2中提出了將導(dǎo)管的 擴張部分(氣囊)用聚合物包覆、并在聚合物包覆層中摻入核酸藥物等治療藥物的藥物溶 出型導(dǎo)管。
這里，因為平滑肌細(xì)胞增殖是再狹窄的主因，所以可以判斷從通過病理學(xué)觀察確 認(rèn)到內(nèi)膜平滑肌細(xì)胞增殖的PTA后30日起至迎來增殖峰的PTA后45日期間內(nèi)，進(jìn)行平滑 肌細(xì)胞的增殖抑制處理是最有效果的。因此，可以認(rèn)為下述設(shè)計是最有效的，所述設(shè)計使得 至少在抑制炎癥過程10日以內(nèi)以及抑制平滑肌細(xì)胞增殖的30 60日這兩個期間內(nèi)保持 藥物釋放量的峰，并使得在各期間顯示藥效所必要量的藥物均勻地釋放。
但是，在專利文獻(xiàn)1、2的方法中。聚合物層在生物體內(nèi)降解后釋放出藥物，因此， 導(dǎo)管在留置初期的藥物釋放量不充分，不能有效地抑制留置后1 3日期間出現(xiàn)的炎癥過 程。此外，在如專利文獻(xiàn)1那樣使用水凝膠聚合物的情況下，諸如誘餌寡核苷酸的水溶性藥 物在短時間內(nèi)溶出，因此藥物釋放速度的控制并非容易。
此外，在專利文獻(xiàn)3中，公開了一種藥物溶出型支架(Drug-Eluting Ment，以下 簡稱為DEQ，該藥物溶出型支架通過使形成于支架表面的聚合物層中含有第1生理活性物 質(zhì)、并使其含有包封了第2生理活性物質(zhì)的生物降解性的納米級或微米級膠囊，在第1生理 活性物質(zhì)進(jìn)行初期釋放后，使膠囊內(nèi)的第2生理活性物質(zhì)緩慢釋放。根據(jù)專利文獻(xiàn)3的方 法，通過在支架本體上噴霧或涂布納米粒子的懸浮液、或?qū)⒅Ъ鼙倔w浸漬于納米粒子的懸 浮液中，可以使納米粒子附著在支架本體上，但是，采用這些方法均一地附著充分量的納米 粒子是困難的。
傳統(tǒng)的生物相容性納米粒子的結(jié)構(gòu)如圖19所示。生物相容性納米粒子(以下簡 稱為納米粒子)1的表面被用聚乙烯醇2包覆，其內(nèi)部包封生理活性物質(zhì)3，一般而言其表面 帶負(fù)電。但是，生物體內(nèi)的細(xì)胞壁也帶負(fù)電，因而，由于電斥力，諸如圖19所示的納米粒子 存在細(xì)胞粘合性變差的問題，而為了使包封的生理活性物質(zhì)局部且有效地進(jìn)入狹窄部等病 變部位，有必要進(jìn)一步提高納米粒子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的遷移性。
而且，一般而言，生物相容性聚合物是疏水性(脂溶性)的，因而能夠以高包封率 包封在納米粒子內(nèi)的生理活性物質(zhì)限于脂溶性的，所以采用專利文獻(xiàn)3的方法將核酸、基 因等親水性(水溶性)的生理活性物質(zhì)充分包覆在支架表面是困難的。
為了解決上述問題，專利文獻(xiàn)4中公開了使表面經(jīng)正電荷修飾的生物相容性納米 粒子電性附著在支架本體上而得到的DES，而且還描述了采用電泳法、超聲波霧化(mist) 法等使納米粒子附著于通電狀態(tài)的支架本體的DES制造方法。此外，專利文獻(xiàn)5中公開了具 有由治療藥、磁性或順磁性(常磁性)材料及高分子電解質(zhì)多層殼構(gòu)成的納米級膠囊(納 米粒子)的醫(yī)療裝置，并且作為醫(yī)療裝置的例子提及了導(dǎo)管。
專利文獻(xiàn)1 日本特表平9-500561號公報
專利文獻(xiàn)2 日本特表2003-521275號公報
專利文獻(xiàn)3 日本特開2004-357986公報
專利文獻(xiàn)4 日本特開2007-215620號公報
專利文獻(xiàn)5 日本特表2006-518736號公報發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明所要解決的問題
然而，在專利文獻(xiàn)4的方法中，支架本體必須用金屬等導(dǎo)電性材料形成，難以適用 于可擴張部分(氣囊部)為導(dǎo)電性小的樹脂制的氣囊導(dǎo)管。此外，專利文獻(xiàn)5中僅是簡單 描述了為了調(diào)控包封的藥物的釋放而使用可降解的高分子電解質(zhì)來形成納米粒子，而對于 包覆有表面經(jīng)正電荷修飾的生物相容性納米粒子的藥物溶出型導(dǎo)管的實施例、即實際上可 以制造怎樣結(jié)構(gòu)的納米粒子以及可以確認(rèn)到何種程度的細(xì)胞粘合性或細(xì)胞內(nèi)攝入性，均沒 有任何描述。
鑒于上述問題，本發(fā)明的目的是提供一種可擴張的藥物溶出型導(dǎo)管及該藥物溶出 型導(dǎo)管的簡便且廉價的制造方法，所述藥物溶出型導(dǎo)管通過包覆以高包封率包封有脂溶性 或水溶性生理活性物質(zhì)、且細(xì)胞遷移性良好的生物相容性納米粒子，能夠使生理活性物質(zhì) 高效地到達(dá)細(xì)胞內(nèi)，而且該藥物溶出型導(dǎo)管的操作性良好。
解決問題的方法
為了達(dá)成上述目的，本發(fā)明為用包封有生理活性物質(zhì)、且表面經(jīng)正電荷修飾的生 物相容性納米粒子包覆經(jīng)負(fù)電荷修飾的可擴張部分的表面而得到的可擴張的藥物溶出型導(dǎo)管。
根據(jù)該方案，對于樹脂制的可擴張部分，也可以使其附著表面帶正電的納米粒子。 此外，包覆在可擴張部分的納米粒子帶正電，因此納米粒子針對帶負(fù)電的細(xì)胞壁的細(xì)胞粘 合性提高，成為使得內(nèi)部包封的生理活性物質(zhì)到達(dá)細(xì)胞內(nèi)的效率提高的藥物溶出型導(dǎo)管。 而且，例如，當(dāng)構(gòu)成生物相容性納米粒子的聚合物材料為脂溶性時，脂溶性的生理活性物質(zhì) 的包封率提高，且納米粒子表面帶正電，因而能夠以高包封率包封水溶性的陰離子型生理 活性物質(zhì)，能夠包覆在可擴張部分的生理活性物質(zhì)的選擇范圍也得以擴展。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，所述可擴張部分可以通過聚 羧酸或聚羧酸衍生物進(jìn)行負(fù)電荷修飾。
根據(jù)該方案，可以容易地使可擴張部分的表面帶負(fù)電。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，所述聚羧酸可以是選自丙烯 酸、甲基丙烯酸、馬來酸、富馬酸、天冬氨酸或谷氨酸的聚合物、淀粉、纖維素或聚乙烯醇的 羧基甲基衍生物、海藻酸、果膠中的1種以上。
根據(jù)該方案，可以成為對生物體的影響少、安全方面良好的藥物溶出型導(dǎo)管。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，所述聚羧酸衍生物可以是丙 烯酸、甲基丙烯酸、馬來酸的聚合物的酸酐衍生物或酯衍生物。
根據(jù)該方案，不僅可以牢固地附著表面帶正電的納米粒子，還可以進(jìn)行對生物體 的刺激、毒性少的負(fù)電荷修飾。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，所述聚羧酸衍生物可以是馬 來酸酐的共聚物。
根據(jù)該方案，可以成為具有高安全性的藥物溶出型導(dǎo)管，且負(fù)電荷修飾時的操作 也變得容易。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，所述馬來酸酐的共聚物可以 是選自馬來酸酐-甲基乙烯基醚共聚物、馬來酸酐-苯乙烯共聚物、馬來酸酐-乙烯共聚物 中的1種以上。
根據(jù)該方案，使用獲取特別容易且操作性良好的馬來酸酐的共聚物，能夠簡單且 低成本地制造具有高安全性的藥物溶出型導(dǎo)管。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，所述生物相容性納米粒子可 以通過在其表面上附著陽離子型高分子來進(jìn)行正電荷修飾。
根據(jù)該方案，可以容易地使納米粒子表面正帶電。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，所述陽離子型高分子可以是 殼聚糖。
根據(jù)該方案，可以成為對生物體無影響的、安全性高的藥物溶出型導(dǎo)管。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，所述生物相容性納米粒子可 以由選自聚乳酸、聚乙醇酸、乳酸-乙醇酸共聚物或乳酸-天冬氨酸共聚物中的任意材料構(gòu) 成。
根據(jù)該方案，可以成為對生物體的刺激/毒性低、且能夠通過生物相容性高分子的降解緩釋生理活性物質(zhì)的藥物溶出型導(dǎo)管。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，所述生理活性物質(zhì)可以是核 酸化合物。
根據(jù)該方案，能夠在病變部位安全且有效率地導(dǎo)入核酸化合物，從而在核酸水平 進(jìn)行治療，能夠容易地制造例如當(dāng)適用于血管中的狹窄部時，發(fā)生再狹窄的可能性少的藥 物溶出型導(dǎo)管。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，所述核酸化合物可以是選自 質(zhì)粒DNA、基因、誘餌寡核苷酸、siRNA、寡核苷酸、反義寡核苷酸、核酶、適體中的1種以上。
根據(jù)該方案，能夠提供特別適合作為核酸化合物治療用工具的藥物溶出型導(dǎo)管。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，所述核酸化合物可以是 NF κ B誘餌寡核苷酸。
根據(jù)該方案，能夠提供阻礙結(jié)合于NFk B、引起炎癥的細(xì)胞因子等的生成、抑制實 施PTA時的急性期炎癥反應(yīng)，從而可有效地防止再狹窄的藥物溶出型導(dǎo)管。
此外，在本發(fā)明中，可以將上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管作為血管內(nèi)導(dǎo)管使用。
根據(jù)該方案，能夠針對防止進(jìn)行了 PTA的血管部位發(fā)生再狹窄發(fā)揮良好效果。
此外，在本發(fā)明中，上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，可以是具有氣囊作為所述可擴張 部分的氣囊導(dǎo)管。
根據(jù)該方案，在將導(dǎo)管插入至血管內(nèi)的狹窄部后使氣囊膨脹，可以容易地擴張狹 窄部。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，所述氣囊的表面可以形成有 凹坑。
根據(jù)該方案，可以在凹坑內(nèi)大量負(fù)載生物相容性納米粒子，而且，伴隨著氣囊的膨 脹，凹坑消失，從而將凹坑內(nèi)的生物相容性納米粒子擠出，可以高效地附著在狹窄部的血管壁上。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管，所述凹坑可以是圓形或橢圓 形。
根據(jù)該方案，使氣囊膨脹，能夠容易地使凹坑變形、消失。
此外，本發(fā)明提供使用上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管的、血管狹窄或透析分流狹窄 (dialysis shunt stenosis，透析用* ^ >卜內(nèi)狹窄)的治療方法。
根據(jù)該方案，能夠有效地治療進(jìn)行了 PTA的血管部位的再狹窄、形成于血液透析 患者的臂上的分流血管的狹窄。
此外，本發(fā)明提供一種藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，該制造方法包括在至少溶解 有陽離子型高分子的水溶液中，加入至少生理活性物質(zhì)的溶液與將生物相容性高分子溶解 在有機溶劑中而得到的溶液的混合液，生成所述生理活性物質(zhì)包封在所述生物相容性高分 子中且粒子表面經(jīng)正電荷修飾的生物相容性納米粒子的懸浮液的納米粒子形成步驟；對導(dǎo) 管本體的可擴張部分進(jìn)行負(fù)電荷修飾的負(fù)電荷修飾步驟；使所述生物相容性納米粒子附著 在經(jīng)負(fù)電荷修飾的所述可擴張部分，形成納米粒子層的納米粒子附著步驟；以及，對所述納 米粒子層進(jìn)行干燥的干燥步驟。
根據(jù)該方法，可擴張部分上牢固地形成均勻的納米粒子層，因此，可以簡便且低成本地制造能夠?qū)⑸砘钚晕镔|(zhì)高效地送達(dá)細(xì)胞內(nèi)、且操作性良好的可擴張的藥物溶出型導(dǎo)管。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，所述負(fù)電荷修飾 步驟可以通過將所述可擴張部分浸漬于聚羧酸或聚羧酸衍生物的溶液中來進(jìn)行。
根據(jù)該方法，能夠以簡便的方法高效地形成均勻的帶負(fù)電性的樹脂層。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，還可以在所述生 物相容性納米粒子的懸浮液中添加陰離子型生理活性物質(zhì)。
根據(jù)該方法，由于納米粒子表面的正電荷，陰離子型生理活性物質(zhì)以靜電負(fù)載的 狀態(tài)被牽引至并附著在經(jīng)負(fù)電荷修飾的可擴張部分，因而能夠制造使包覆困難的核酸、基 因等陰離子型生理活性物質(zhì)高濃度地附著在可擴張部分的藥物溶出型導(dǎo)管。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，通過將所述納米 粒子附著步驟反復(fù)多次進(jìn)行，可以在形成于所述可擴張部分的所述納米粒子層上進(jìn)一步層 疊納米粒子層。
根據(jù)該方法，可以增大包覆的納米粒子量，且可以使可擴張部分的納米粒子層整 體均勻。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，通過將所述納米 粒子附著步驟反復(fù)多次進(jìn)行，可以疊層狀或鑲嵌(mosaic)狀地形成包含包封有不同的生 理活性物質(zhì)的生物相容性納米粒子的所述納米粒子層。
根據(jù)該方法，如果將包封有生理活性物質(zhì)且該生理活性物質(zhì)在生物體內(nèi)留置后短 時間即發(fā)生溶出的納米粒子附著于外層，而將包封有生理活性物質(zhì)且該生理活性物質(zhì)經(jīng)過 長時間后發(fā)生溶出的納米粒子附著于內(nèi)層，則能夠制造可以按計劃調(diào)控2種以上生理活性 物質(zhì)的溶出時間的藥物溶出型導(dǎo)管。
此外，在本發(fā)明中，上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法可以包括在所述納米 粒子層中含浸生物降解性高分子的溶液的含浸步驟。
根據(jù)該方法，可以調(diào)控納米粒子從可擴張部分溶出的速度，還可以防止納米粒子 之間聚集形成不溶性的被膜。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，所述含浸步驟 中，還可以在所述生物降解性高分子的溶液中添加生理活性物質(zhì)。
根據(jù)該方法，能夠使包封于納米粒子外部的生物降解性高分子層中的生理活性物 質(zhì)即效地發(fā)揮作用，且能夠使包封于納米粒子內(nèi)部的生理活性物質(zhì)遲效且持續(xù)地發(fā)揮作用。
此外，在本發(fā)明中，對于上述方案的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，所述含浸步驟中 含浸于納米粒子層的生物降解性高分子在生物體內(nèi)的降解速度可以快于形成所述生物相 容性納米粒子的生物相容性高分子。
根據(jù)該方法，納米粒子因生物降解性高分子的降解而從可擴張部分溶出、并遷移 至細(xì)胞內(nèi)后，生理活性物質(zhì)因形成納米粒子的生物相容性高分子的降解而緩釋，因此，能夠 制造出下述藥物溶出型導(dǎo)管，所述藥物溶出型導(dǎo)管能夠提高生理活性物質(zhì)向細(xì)胞內(nèi)的導(dǎo)入 效率，且能夠容易地調(diào)控生理活性物質(zhì)的導(dǎo)入時機。8


[圖1]圖1為模式圖，顯示了本發(fā)明的藥物溶出型導(dǎo)管中使用的、粒子表面經(jīng)正電 荷修飾且粒子內(nèi)部包封有生理活性物質(zhì)的納米球的結(jié)構(gòu)。
[圖2]圖2為模式圖，顯示了本發(fā)明的藥物溶出型導(dǎo)管中使用的、粒子表面經(jīng)正電 荷修飾、且生理活性物質(zhì)被包封于粒子內(nèi)部并負(fù)載于粒子表面的納米球的結(jié)構(gòu)。
[圖3]顯示本發(fā)明的藥物溶出型導(dǎo)管中使用的氣囊導(dǎo)管本體的一例的側(cè)面圖。
[圖4]為截面放大圖，其顯示了在導(dǎo)管本體的氣囊部形成有納米粒子層的狀態(tài)。
[圖5]為截面放大圖，其顯示了在形成有納米粒子層的氣囊部形成有生物降解性 高分子層的狀態(tài)。
[圖6A]為截面放大圖，其顯示了在形成有凹坑的氣囊部層疊了帶負(fù)電性樹脂層 及納米粒子層的狀態(tài)。
[圖6B]顯示使氣囊部膨脹的狀態(tài)的截面放大圖。
[圖7A]顯示實施例5中的氣囊部的切開方法的圖。
[圖7B]顯示實施例5中的氣囊部的觀察部位的圖。
[圖8A]浸漬于生理食鹽水之前的氣囊部(圖7B的L)的熒光顯微鏡照片。
[圖8B]浸漬于生理食鹽水之前的氣囊部(圖7B的C)的熒光顯微鏡照片。
[圖8C]浸漬于生理食鹽水之前的氣囊部(圖7B的R)的熒光顯微鏡照片。
[圖9A]浸漬于生理食鹽水中60分鐘后的氣囊部(圖7B的L)的熒光顯微鏡照 片。
[圖9B]浸漬于生理食鹽水中60分鐘后的氣囊部(圖7B的C)的熒光顯微鏡照 片。
[圖9C]浸漬于生理食鹽水中60分鐘后的氣囊部(圖7B的R)的熒光顯微鏡照 片。
[圖10A]浸漬于生理食鹽水中60分鐘、然后再浸漬于乙腈中10分鐘后的氣囊部 (圖7B的L)的熒光顯微鏡照片。
[圖10B]浸漬于生理食鹽水中60分鐘、然后再浸漬于乙腈中10分鐘后的氣囊部 (圖7B的C)的熒光顯微鏡照片。
[圖10C]浸漬于生理食鹽水中60分鐘、然后再浸漬于乙腈中10分鐘后的氣囊部 (圖7B的R)的熒光顯微鏡照片。
[圖11A]對浸漬氣囊部(圖7B的L)60分鐘后的生理食鹽水進(jìn)行過濾后的膜濾器 的熒光顯微鏡照片。
[圖11B]對浸漬氣囊部(圖7B的C)60分鐘后的生理食鹽水進(jìn)行過濾后的膜濾器 的熒光顯微鏡照片。
[圖11C]對浸漬氣囊部(圖7B的R)60分鐘后的生理食鹽水進(jìn)行過濾后的膜濾器 的熒光顯微鏡照片。
[圖12A]實施例6中使用的表面形成有凹坑的氣囊部的側(cè)面圖。
[圖12B]圖12A中的氣囊部的A-A'截面圖。
[圖12C]圖12A中的氣囊部的B-B'截面圖。
[圖13A]實施例6中的氣囊部在加壓前的熒光顯微鏡照片。
[圖13B]實施例6中的氣囊部在IOatm加壓后的熒光顯微鏡照片。
[圖13C]實施例6中的氣囊部在20atm加壓后的熒光顯微鏡照片。
[圖14]為顯微鏡照片(拍攝倍率40倍)，顯示實施例7中的未損傷血管內(nèi)皮的 兔正常腹部大動脈的截面。
[圖15]在實施例7中，用不合NFK B誘餌寡核苷酸的PLGA納米球包覆的PTA氣 囊導(dǎo)管擦過血管內(nèi)皮，圖15為顯示該情況下的兔腹部大動脈的截面[NFk B誘餌(-)]的顯 微鏡照片(拍攝倍率40倍)。
[圖16]在實施例7中，用含NFK B誘餌寡核苷酸的PLGA納米球包覆的PTA氣囊 導(dǎo)管擦過血管內(nèi)皮，圖16為顯示該情況下的兔腹部大動脈的截面[NFk B誘餌(+)]的顯微 鏡照片(拍攝倍率40倍)。
[圖17A]對于實施例7中的NFκ B誘餌⑴組以及NF κ B誘餌㈠組，比較腹部 大動脈的內(nèi)膜面積(mm2)而得到的圖表。
[圖17B]對于實施例7中的NFκ B誘餌⑴組以及NF κ B誘餌㈠組，比較腹部 大動脈的中膜面積(mm2)而得到的圖表。
[圖17C]對于實施例7中的NFκ B誘餌⑴組以及NF κ B誘餌㈠組，比較腹部 大動脈的內(nèi)膜/中膜面積比(Ι/Μ)而得到的圖表。
[圖18Α]對于實施例8中的對照組、NFκ B誘餌⑴組以及NF κ B誘餌㈠組，比 較頸動脈的內(nèi)膜面積(mm2)而得到的圖表。
[圖18B]對于實施例8中的對照組、NFκ B誘餌⑴組以及NF κ B誘餌㈠組，比 較頸動脈的中膜面積(mm2)而得到的圖表。
[圖18C]對于實施例8中的對照組、NFκ B誘餌⑴組以及NF κ B誘餌㈠組，比 較頸動脈的內(nèi)膜/中膜面積比(Ι/Μ)而得到的圖表。
[圖19]顯示傳統(tǒng)的納米粒子的結(jié)構(gòu)的模式圖。
發(fā)明的具體實施方式
以下，針對本發(fā)明的實施方式，參照附圖進(jìn)行具體說明。本發(fā)明的藥物溶出型導(dǎo)管 的制造方法包括形成包封脂溶性或親水性生理活性物質(zhì)、且表面帶正電(正電荷修飾)的 生物相容性納米粒子的步驟；使導(dǎo)管本體的可擴張部分帶負(fù)電(負(fù)電荷修飾)的負(fù)電荷修 飾步驟；使納米粒子附著于經(jīng)負(fù)電荷修飾的可擴張部分、形成納米粒子層的納米粒子附著 步驟；以及，干燥納米粒子層的干燥步驟。
一般而言，分散于液體中的粒子大多帶正或負(fù)電，形成具有相反電荷的離子被強 力牽引并固定在粒子表面而得到的層(固定層)以及存在于其外側(cè)的層(擴散層)、即所謂 擴散電雙層，可以推定擴散層內(nèi)側(cè)的一部分及固定層隨粒子一起移動。
ζ電位(zeta potential)是以充分遠(yuǎn)離粒子的電中性區(qū)域的電位為基準(zhǔn)的、發(fā) 生上述移動的面(滑動面)的電位。如果ζ電位的絕對值增加，則粒子間的斥力增強、粒 子的穩(wěn)定性提高；相反地，隨著ζ電位接近0，粒子變得容易發(fā)生聚集。因此，ζ電位可以 用作粒子分散狀態(tài)的指標(biāo)。
因此，為了增大對帶負(fù)電的細(xì)胞壁的粘合性、使納米粒子高效地遷移至細(xì)胞內(nèi)，優(yōu) 選使納米粒子表面帶電，并使得其具有正的ζ電位。在本發(fā)明中，在納米粒子形成步驟(后 述)中將陽離子型高分子添加到不良溶劑中。由此，形成的納米粒子的表面被陽離子型高分子修飾(包覆)，粒子表面的ζ電位為正。
此外，通過使納米粒子表面帶正電，可以使納米粒子能動性地附著于導(dǎo)管本體的 經(jīng)負(fù)電荷修飾的可擴張部分，不但可以提高納米粒子的附著效率，還可以使暫時附著的納 米粒子牢固地固定在可擴張部分，因此，能夠防止在制造步驟中、插入生物體內(nèi)時以及擴張 時納米粒子發(fā)生脫離。以下，按照從將生理活性物質(zhì)包封在納米粒子內(nèi)部的步驟至向可擴 張部分附著的步驟的順序進(jìn)行說明。
(納米粒子形成步驟)
用于本發(fā)明的生物相容性納米粒子可以通過采用球形晶析法，在納米粒子的內(nèi)部 包封生理活性物質(zhì)來制造，所述球形晶析法能夠?qū)⑸砘钚晕镔|(zhì)和生物相容性高分子加工 成具有小于1，OOOnm的平均粒徑的納米單元大小的粒子(納米球)。球形晶析法是一種不 產(chǎn)生高剪切力的粒子制備方法，特別適用于生理活性物質(zhì)是不耐外部應(yīng)力的核酸化合物等 的情形。
球形晶析法是能夠通過對化合物合成的最終工藝中的結(jié)晶生成/成長工藝進(jìn)行 調(diào)控，從而設(shè)計球狀的結(jié)晶粒子、直接調(diào)控其物性來進(jìn)行加工的方法。作為球形晶析法的一 種，有乳液溶劑擴散法(ESD法)。
ESD法是基于如下所示的原理來制造納米球的技術(shù)。該方法中使用能夠溶解作為 包封生理活性物質(zhì)的基劑(基剤)聚合物的PLGA(乳酸-乙醇酸共聚物)等的良溶劑、以 及與此相反的不溶解PLGA的不良溶劑這兩種溶劑。作為良溶劑，可以使用溶解PLGA、且能 夠與不良溶劑混合的丙酮等有機溶劑。而作為不良溶劑，通?？梢允褂镁垡蚁┐妓芤旱?。
作為操作順序，首先將PLGA溶解于良溶劑中后，在良溶劑中添加混合生理活性物 質(zhì)的溶解液，并使得該PLGA不析出。攪拌下將該PLGA與生理活性物質(zhì)的混合液滴加到不 良溶劑中，則混合液中的良溶劑(有機溶劑)快速地擴散遷移至不良溶劑中。其結(jié)果是，良 溶劑在不良溶劑中發(fā)生自乳化，形成亞微米大小的良溶劑的乳滴。進(jìn)而，由于良溶劑與不良 溶劑的相互擴散，有機溶劑從乳液內(nèi)持續(xù)地向不良溶劑中擴散，乳滴內(nèi)的PLGA及生理活性 物質(zhì)的溶解度降低，最終生成作為包含生理活性物質(zhì)的球形結(jié)晶粒子的PLGA納米球。
采用上述球形晶析法能夠以物理化學(xué)方法形成納米粒子，且所得納米粒子基本上 為球形，因而可以容易地形成均質(zhì)的納米粒子，而無需考慮催化劑、原料化合物的殘留這樣 的問題。而且，在本發(fā)明中，通過在不良溶劑中添加陽離子型高分子、用陽離子型高分子包 覆納米粒子表面，來使粒子表面帶正電。這樣的納米粒子的結(jié)構(gòu)如圖1所示。納米粒子1 的表面被聚乙烯醇2包覆，且內(nèi)包有生理活性物質(zhì)3。而且，聚乙烯醇2的外表面被陽離子 型高分子4包覆，通過陽離子型高分子4而具有正的ζ電位。
此外，生物體內(nèi)的細(xì)胞壁帶負(fù)電，而采用傳統(tǒng)的球形晶析法制造的納米粒子的表 面一般具有負(fù)的ζ電位(參照圖19)，因而，存在因電斥力而使納米粒子的細(xì)胞粘合性變差 的問題。因此，如本發(fā)明這樣，使用陽離子型高分子使納米粒子表面帶電而具有正的ζ電 位，這從增大納米粒子對帶負(fù)電的細(xì)胞壁的粘合性、提高生理活性物質(zhì)的細(xì)胞內(nèi)遷移性的 觀點來看，也是優(yōu)選的。
作為陽離子型高分子，可以列舉出殼聚糖及殼聚糖衍生物、在纖維素上鍵合多個 陽離子基團(tuán)而得到的陽離子化纖維素、聚乙烯亞胺、聚乙烯基胺、聚烯丙基胺等聚氨基化合 物、聚鳥氨酸、聚賴氨酸等聚氨基酸、聚乙烯基咪唑、聚乙烯基吡啶氯化物、季胺基甲基丙烯酸燒基酉旨聚合物(alkylaminomethacrylate quaternary salt polymer) (DAM)、季胺基甲 基丙烯酸烷基酯-丙烯酰胺共聚物(DAA)等，特別適合使用殼聚糖或其衍生物。
殼聚糖是包含于蝦、蟹、昆蟲的外殼中的、由多個葡糖胺結(jié)合而形成的陽離子性天 然高分子，具有乳化穩(wěn)定性、形態(tài)保持性、生物降解性、生物相容性、抗菌性等特點，因此廣 泛用作化妝品、食品、衣料品、醫(yī)藥品等的原料，其中，所述葡糖胺是一種具有氨基的糖。通 過將該殼聚糖添加到不良溶劑中，能夠制造安全性高的納米粒子，而不對生物體產(chǎn)生影響。
而且，通過使用陽離子性更強的陽離子型高分子，ζ電位可以顯示更大的正值，因 此不但后述納米粒子附著步驟中的電吸附力增大，而且粒子間的斥力變強，懸浮液中粒子 的穩(wěn)定性提高。例如，優(yōu)選使用下述殼聚糖衍生物(陽離子化殼聚糖)通過對本來為陽離 子性的殼聚糖的一部分進(jìn)行季每t鹽化(第四級化)，使得陽離子性進(jìn)一步得到提高的氯化 N-[2-羥基-3-(三甲基銨)丙基]殼聚糖等殼聚糖衍生物。
而且，當(dāng)包封于納米粒子內(nèi)的生理活性物質(zhì)為陰離子型(在水溶液中以帶有負(fù)電 荷的陰離子分子的形式存在)時，在不良溶劑中添加陽離子型高分子，則能夠提高生理活 性物質(zhì)在納米粒子內(nèi)部的包封率。通常，可以認(rèn)為當(dāng)所包封的生理活性物質(zhì)為親水性(水 溶性)時，分散混合在良溶劑中的生理活性物質(zhì)漏出、溶解在不良溶劑中，僅形成納米粒子 的高分子發(fā)生沉積，因而生理活性物質(zhì)基本上未被包封；但當(dāng)將陽離子型高分子添加到不 良溶劑中時，吸附在納米粒子表面的陽離子型高分子與存在于乳滴表面的陰離子型生理活 性物質(zhì)相互作用，能夠抑制生理活性物質(zhì)漏出到不良溶劑中。
此外，為了提高良溶劑中的陰離子型生理活性物質(zhì)的親和性以及分散穩(wěn)定性，可 以在良溶劑中添加DOTAP (N-[1-(2，3-二油酰氧基)丙基]-N，N，N-三甲基銨鹽(N-[1-(2, 3-Dioleoyloxy)propyl]-N，N, N-trimethylammonium salts))等陽離子性脂質(zhì)，來與陰離 子型生理活性物質(zhì)形成復(fù)合體。但是，釋放出的陽離子性脂質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)可能會顯示出細(xì)胞 毒性，因此必須注意添加量。
而且，當(dāng)生理活性物質(zhì)為陰離子性時，通過在利用凍干對納米粒子進(jìn)行復(fù)合化時 添加生理活性物質(zhì)，在水溶液中成為帶負(fù)電荷的陰離子分子的生理活性物質(zhì)由于靜電相互 作用而被定量負(fù)載在納米粒子表面。這樣的納米粒子的結(jié)構(gòu)如圖2所示。生物相容性納米 粒子1的表面被用聚乙烯醇2包覆，進(jìn)一步其外表面被用陽離子型高分子4包覆，通過陽離 子型高分子4而具有ζ電位。生理活性物質(zhì)3被內(nèi)包在納米粒子1中，同時也被靜電負(fù)載 在納米粒子1的表面。
因此，即使對于極難包封在脂溶性(疏水性)納米粒子內(nèi)部的陰離子型生理活性 物質(zhì)，也能夠提高納米粒子內(nèi)部以及表面的總的含有率。此外，從納米粒子內(nèi)部緩慢釋放的 生理活性物質(zhì)與剛剛施用后即從納米粒子表面溶出的生理活性物質(zhì)分別發(fā)揮作用，從而能 夠使醫(yī)藥制劑兼具即效性與持續(xù)性。
而且，當(dāng)在凍干之前設(shè)置通過離心分離等除去剩余的聚乙烯醇的除去步驟時，有 可能將粒子表面的陽離子型高分子中的一部分與聚乙烯醇一起被除去。因此，優(yōu)選在除去 步驟之后設(shè)置將納米粒子再次浸漬于陽離子型高分子溶液中的步驟。
對于上述球形晶析法中使用的良溶劑和不良溶劑的種類沒有特殊限制，可以根據(jù) 包封于納米粒子內(nèi)的生理活性物質(zhì)的種類等來確定，但因為生物相容性納米粒子是作為插 入人體內(nèi)的藥物溶出型導(dǎo)管的材料使用，因此有必要使用對人體安全性高、且環(huán)境負(fù)荷少的溶劑。
作為這樣的不良溶劑，可以列舉出水或添加有表面活性劑的水，優(yōu)選使用例如添 加有聚乙烯醇作為表面活性劑的聚乙烯醇水溶液。作為聚乙烯醇以外的表面活性劑，可以 列舉出卵磷脂、羥基甲基纖維素、羥基丙基纖維素等。
作為良溶劑，可以列舉出作為低沸點的有機溶劑的鹵代烷類、丙酮、甲醇、乙醇、乙 酸乙酯、乙醚、環(huán)己烷、苯、甲苯等，優(yōu)選使用例如對環(huán)境、人體影響少的丙酮或丙酮與乙醇 的混合液。
對于聚乙烯醇水溶液的濃度、或者丙酮與乙醇的混合比、結(jié)晶析出時的條件沒有 特殊限制，可以根據(jù)作為目標(biāo)的生理活性物質(zhì)的種類、球形造粒結(jié)晶的粒徑(本發(fā)明中為 納米級)等適當(dāng)確定，但聚乙烯醇水溶液的濃度越高，聚乙烯醇對納米粒子表面的附著越 良好，干燥后在水中的再分散性越高；而另一方面，聚乙烯醇水溶液的濃度達(dá)到一定以上 時，不良溶劑的粘度上升，對良溶劑的擴散性產(chǎn)生影響。
因此，雖然聚乙烯醇水溶液的濃度因聚乙烯醇的聚合度、皂化度而不同，但在納米 粒子形成后蒸餾除去有機溶劑、再進(jìn)行凍干等而暫時粉末化的情況下，優(yōu)選聚乙烯醇水溶 液的濃度為0. 1重量％ 10重量％、更優(yōu)選為2%左右。而且，在從納米粒子形成后的懸浮 液中蒸餾除去有機溶劑、并將其直接用于納米粒子附著步驟的情況下，優(yōu)選0. 5重量％以 下、特別優(yōu)選0.1重量％左右。
用于本發(fā)明的生物相容性高分子優(yōu)選對生物體的刺激/毒性低、具有生物相容 性、且具有施用后被降解代謝的生物體內(nèi)降解性。此外，優(yōu)選為持續(xù)、緩慢釋放內(nèi)包的生理 活性物質(zhì)的粒子。作為這樣的材料，特別適合使用PLGA。
PLGA的分子量優(yōu)選在5，000 200，000的范圍內(nèi)，更優(yōu)選在15，000 25，000的范圍內(nèi)。乳酸與乙醇酸的組成比可以是1 99 99 1，優(yōu)選乙醇酸乳酸為0.333 1。 此外，乳酸和乙醇酸的含量在25重量％ 65重量％的范圍內(nèi)的PLGA為非晶質(zhì)、且可溶于 丙酮等有機溶劑，因此適合使用。
作為生物體內(nèi)降解性的生物相容性高分子，還可以列舉出聚乙醇酸(PGA)、聚乳 酸(PLA)、聚天冬氨酸等。此外，還可以使用作為它們的共聚物的天冬氨酸-乳酸共聚物 (PAL)、天冬氨酸-乳酸-乙醇酸共聚物(PALG)，可以具有氨基酸等帶電基團(tuán)或可官能團(tuán)化 的基團(tuán)。
而且，在所包封的生理活性物質(zhì)為親水性(水溶性)的情況下，若使用對PLGA的 表面進(jìn)行聚乙二醇(PEG)修飾而得到的材料，則親水性的生理活性物質(zhì)與PLGA之間的親和 性提高，包封變得容易，故而優(yōu)選。
作為上述以外的生物相容性高分子，可以列舉出諸如聚乙烯、聚丙烯等聚烯烴、 諸如聚乙烯醇、聚乙烯基醚和聚乙烯基酯等聚乙烯基化合物、聚酰胺、聚碳酸酯、聚乙二醇、 聚氧化乙烯、聚對苯二甲酸乙二醇酯、丙烯酸與甲基丙烯酸的聚合物、纖維素和其它多糖 類、以及肽或蛋白質(zhì)、或它們的共聚物或混合物。
其后，將所得納米粒子的懸浮液直接用于后續(xù)的納米粒子附著步驟，或者將所得 納米粒子的懸浮液視需要減壓蒸餾除去作為良溶劑的有機溶劑(溶劑蒸餾除去步驟)、再 視需要通過凍干等將納米粒子暫時粉末化后，再次分散于水中，而用于后續(xù)的納米粒子附 著步驟。在將納米粒子以懸浮液的形式直接用于后續(xù)步驟時，沒有進(jìn)行凍干等的必要，可以使制造步驟簡化，還可以減少聚乙烯醇在不良溶劑中的添加量，故而優(yōu)選。
而且，在將納米粒子暫時粉末化的情況下，如將其與粘結(jié)劑(例如海藻糖等)一起 復(fù)合化成可再分散的聚集粒子而形成復(fù)合粒子，則在使用前是納米粒子聚集而成的易于操 作的聚集粒子，而通過在使用時與水分接觸，粘結(jié)劑溶解，復(fù)原成可再分散的納米粒子，故 而優(yōu)選。
對于用于本發(fā)明的生物相容性納米粒子，沒有特殊限制，可以是具有小于1，OOOnm 的平均粒徑的粒子，但為了在導(dǎo)管留置的狹窄部導(dǎo)入生理活性物質(zhì)，有必要使納米粒子進(jìn) 入細(xì)胞內(nèi)。為了提高針對目標(biāo)細(xì)胞內(nèi)的浸透效果，優(yōu)選納米粒子的平均粒徑為500nm以下。
作為包封于生物相容性納米粒子中的生理活性物質(zhì)，可以列舉出阿司匹林、雙嘧 達(dá)莫(dipyridamole)、肝素、抗凝血酶制劑、魚油等的抗血小板藥，低分子肝素、血管緊張素 轉(zhuǎn)換酶抑制劑等平滑肌增殖抑制藥，硫酸長春新堿、硫酸長春堿、硫酸長春地辛、鹽酸伊立 替康、紫杉醇(paclitaxel)、多西紫杉醇(Docetaxel)水合物、甲氨蝶呤、環(huán)磷酰胺等抗癌 劑，絲裂霉素C等抗生素，西羅莫司(Sirolimus)、他克莫司(tacrolimus)水合物等免疫抑 制劑，類固醇等抗炎癥藥，阿托伐他汀鈣、洛伐他汀等脂質(zhì)改善藥，質(zhì)粒DNA、基因、siRNA、誘 餌型核酸醫(yī)藥(誘餌寡核苷酸)、聚核苷酸、寡核苷酸、反義寡核苷酸、核酶、適體、白細(xì)胞介 素、細(xì)胞間信息傳遞物質(zhì)(細(xì)胞因子)等核酸化合物，Glivec、PTK787等受體酪氨酸激酶抑 制劑等，但不限于這些物質(zhì)。而且，上述生理活性物質(zhì)中，可以僅包封任何1種，而如果包封 多種效能、作用機制不同的成分，則可以期待通過各成分的協(xié)同效應(yīng)促進(jìn)藥效。
特別是，當(dāng)附著包封有核酸化合物的納米粒子時，能夠利用導(dǎo)管將核酸化合物安 全且有效率地導(dǎo)入狹窄部，因而可以成為在核酸水平對狹窄部進(jìn)行治療的再發(fā)可能性少的 有效治療方法。作為核酸化合物，特別優(yōu)選質(zhì)粒DNA、基因、誘餌寡核苷酸、siRNA、寡核苷酸、 反義寡核苷酸、核酶、適體。納米粒子內(nèi)部的生理活性物質(zhì)的包封量，可以根據(jù)納米粒子形 成時添加的生理活性物質(zhì)的量、陽離子型高分子的種類和添加量的調(diào)整、形成納米粒子的 生物相容性高分子的種類來調(diào)整。
在核酸化合物之中，通過將與NFk B結(jié)合、抑制引起炎癥的細(xì)胞因子等的生成的 NFk B誘館寡核苷酸(NF κ B Decoy Oligodeoxynucleotides,以下稱為NF κ B誘館寡核苷 酸)包封在納米粒子內(nèi)部，能夠抑制施行PTA時的急性期炎癥反應(yīng)，有效地防止再狹窄。
在本說明書中，“誘餌寡核苷酸”是指具有與轉(zhuǎn)錄因子本來應(yīng)該結(jié)合的基因組上 的結(jié)合區(qū)域相似的結(jié)構(gòu)的、所謂的“誘餌分子”。在誘餌寡核苷酸的共存下，一部分轉(zhuǎn)錄因子 并不結(jié)合在本來應(yīng)該結(jié)合的基因組上的結(jié)合區(qū)域、而是與作為結(jié)合區(qū)域的“誘餌”發(fā)揮功能 的誘餌寡核苷酸結(jié)合。因此，與本來的結(jié)合區(qū)域結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子的分子數(shù)減少，轉(zhuǎn)錄因子的 活性降低。
作為誘餌寡核苷酸，一般是在結(jié)合序列的兩端連接任意的核苷酸而得到的寡核苷 酸。該結(jié)合序列兩端的核苷酸部分也稱為添加序列，其由1個以上的堿基構(gòu)成，優(yōu)選由1 20個核苷酸、更優(yōu)選由1 10個核苷酸、更優(yōu)選由1 7個核苷酸構(gòu)成。此外，對于誘餌 寡核苷酸的完整鏈長沒有限定，通常是15 35個核苷酸、優(yōu)選16 30個核苷酸、更優(yōu)選 17 25個核苷酸。
此外，NF κ B誘餌寡核苷酸是包含1個以上NF κ B的結(jié)合序列的雙鏈寡核苷酸，該 雙鏈優(yōu)選為完全互補序列。即，作為典型的NF κ B誘餌寡核苷酸的結(jié)構(gòu)，可以列舉出由具有5' -S'末端添加序列-結(jié)合序列-3'末端添加序列-3'的結(jié)構(gòu)的有義鏈寡核苷酸與其互 補反義鏈構(gòu)成的雙鏈寡核苷酸。
而且，即使包含1個以上(通常為1或2組)的非互補性堿基對，只要能夠與NF κ B 結(jié)合，就包含于本說明書中的NF κ B誘餌寡核苷酸中。而且，作為其它NF κ B誘餌寡核苷酸 的結(jié)構(gòu)，可以列舉出在5'末端添加序列與3'末端添加序列之間隨機直接連接或隔著1 個 數(shù)個核苷酸連接多個結(jié)合序列而得到的具有多個轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合部位的雙鏈寡核苷酸。
此外，所稱的帶型誘餌寡核苷酸或訂書釘型誘餌寡核苷酸盡管其本身是單鏈寡核 苷酸，但其分子內(nèi)具有結(jié)合序列及其互補序列，它們在分子內(nèi)形成雙鏈的寡核苷酸，諸如這 樣的寡核苷酸只要能夠結(jié)合NFk B，就包含在本說明書中所稱的NFK B誘餌寡核苷酸中。
這里，作為NF κ B誘餌寡核苷酸的具體例子，可以基于例如Current DrugTargets. 2003Nov ；4(8) :603-8.等的記載全新進(jìn)行分子設(shè)計，也可以使用 CircRes. 2001 Nov 9 ；89 (10) :899-906.公開的 SEQ ID NO U FASEB J. 2000Apr ； 14 (5) 815-22.公開的 SEQ ID NO :2、Journal Invest Dermatol. 2006Aug ； 126 (8) :1792-803.公 開的SEQ ID NO 3等公知的NF κ B誘餌寡核苷酸。
作為本發(fā)明中使用的NFK B誘餌寡核苷酸的制造方法，可以采用基因工程學(xué)中一 般采用的核酸合成法，例如，可以使用DNA合成裝置直接合成，也可以在合成寡核苷酸或其 一部分之后在利用PCR法或克隆載體法等進(jìn)行擴增。而且，對于通過這些方法得到的寡核 苷酸，用限制酶等切割，或者用DNA連接酶等進(jìn)行連接，也可以制造NF κ B誘餌寡核苷酸。
此外，用于本發(fā)明的NF κ B誘餌寡核苷酸可以包含1個以上的經(jīng)修飾的鍵或核 酸。作為這樣的經(jīng)修飾的鍵，可以列舉出例如硫代磷酸酯、甲基膦酸酯、二硫代磷酸酯、 氨基磷酸酯、borano phosphates、甲氧基乙基磷酸酯、嗎啉代氨基磷酸酯(morpholino phosphoroamidate)等，作為經(jīng)修飾的核酸，可以列舉出Jft核酸(peptide nucleic acid PNA)、鎖核酸(locked nucleicacid =LNA)、具有經(jīng)二硝基苯基(DNP)化和0-甲基化等修飾 的堿基的核酸等。所述鍵中，更優(yōu)選硫代磷酸酯。
DNP化和0-甲基化等通常是對核糖核苷(RNA)進(jìn)行的修飾，在本發(fā)明中，對于寡核 苷酸中的修飾的脫氧核糖核苷(DNA)，可以像RNA的情況那樣來合成寡核苷酸，從而修飾該堿基。
此外，作為誘餌寡核苷酸或誘餌寡核苷酸候選的寡核苷酸是否結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子，可 以通過結(jié)合活性試驗來確認(rèn)。對于NF κ B誘餌寡核苷酸的情形，其針對NF κ B的結(jié)合活性 試驗例如可以通過使用 TransAM NF κ B p65Transcription Factor Assay Kit (商品名， ACTIVE MOTIF公司)，按照該試劑盒附帶的資料或本領(lǐng)域技術(shù)人員日常進(jìn)行的水平的規(guī)程 進(jìn)行修飾，來容易地實施。
(負(fù)電荷修飾步驟)
下面，針對對導(dǎo)管本體的氣囊部進(jìn)行負(fù)電荷修飾的方法進(jìn)行說明。圖3為顯示用 于本發(fā)明的導(dǎo)管本體的一例的側(cè)面圖。導(dǎo)管本體5由可撓性導(dǎo)管管體(shaft)8(包括外管 6和內(nèi)插于外管6中的內(nèi)管7)與設(shè)置于導(dǎo)管管體8的一端的氣囊部(可擴張部分)9構(gòu)成。 在導(dǎo)管管體8的另一端設(shè)置有具備防止血液流出的止血閥的導(dǎo)管插孔10。
導(dǎo)管本體5通過穿刺進(jìn)入患者的手或足的管(套管)而導(dǎo)入血管內(nèi)，并通過從導(dǎo) 管插孔10插通至內(nèi)管7內(nèi)的導(dǎo)線(圖中未示出)而插入到血管內(nèi)的狹窄部。于是，通過從外管6與內(nèi)管7的間隙以指定壓力送入空氣或膨脹液，使得氣囊部9膨脹，狹窄部接近正常 的血管徑。
作為導(dǎo)管管體8、氣囊部9以及導(dǎo)管插孔10的材質(zhì)，可以使用聚乙烯、聚丙烯、乙 烯-丙烯共聚物、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、交聯(lián)型乙烯-丙烯共聚物、交聯(lián)型乙烯-乙酸 乙烯酯共聚物、聚氯乙烯等熱塑性樹脂、聚酰胺、聚氨酯、聚酯、聚亞芳基硫醚(polyarylene sulfide)等。這其中，適合使用成形容易、具有適度彈性、且不易破損的聚酰胺。而且，通過 在用X射線透過性材料制成的氣囊部9中注入造影劑而使之膨脹，可以利用監(jiān)視器確認(rèn)血 管內(nèi)導(dǎo)管本體5的位置、氣囊部9的膨脹狀態(tài)。
正如之前的納米粒子形成步驟中說明的，由于本發(fā)明中使用的納米粒子表面帶正 電，因而通過預(yù)先對氣囊部9進(jìn)行負(fù)電荷修飾，使納米粒子電附著，可以在氣囊部9上牢固 且均一地包覆納米粒子。作為對氣囊部9進(jìn)行負(fù)電荷修飾的方法，優(yōu)選在氣囊部9的表面 使用諸如聚羧酸或聚羧酸衍生物的帶負(fù)電性的樹脂形成帶負(fù)電性樹脂層的方法。
作為用于本發(fā)明的聚羧酸，可以列舉出丙烯酸、甲基丙烯酸、馬來酸、富馬酸、天冬 氨酸或谷氨酸的聚合物、淀粉、纖維素或聚乙烯醇的羧基甲基衍生物、海藻酸、果膠等，可以 單獨使用它們中的1種，也可以混合使用2種以上。
此外，作為聚羧酸衍生物，可以列舉出上述聚羧酸的酸酐或酯衍生物。這其中，通 過使用丙烯酸、甲基丙烯酸、馬來酸的聚合物的酸酐衍生物或酯衍生物，能夠進(jìn)行對生物體 刺激、毒性少的負(fù)電荷修飾。作為優(yōu)選的聚羧酸衍生物，可以列舉出容易獲得、操作性良好 的諸如馬來酸酐-甲基乙烯基醚共聚物、馬來酸酐-苯乙烯共聚物、馬來酸酐-乙烯共聚物 等馬來酸酐的共聚物，特別適合使用馬來酸酐-甲基乙烯基醚共聚物。
作為包覆帶負(fù)電性樹脂層的方法，可以列舉出在帶負(fù)電性樹脂的溶液中浸漬導(dǎo) 管本體5的氣囊部9的方法，通過超聲波霧化法、噴霧法、噴槍(air brush)法等將帶負(fù)電 性樹脂溶液的微細(xì)液滴吹到氣囊部9的表面上的方法，通過擦拭法將帶負(fù)電性樹脂溶液涂 布在氣囊部9的表面上的方法等。
(納米粒子附著步驟)
下面，對將包封有生理活性物質(zhì)的生物相容性納米粒子附著在經(jīng)負(fù)電荷修飾的氣 囊部來形成納米粒子層的方法進(jìn)行說明。作為使納米粒子附著的方法，可以列舉出將形成 有帶負(fù)電性樹脂層的導(dǎo)管本體5的氣囊部9浸漬在納米粒子的懸浮液中的方法，通過超聲 波霧化法、噴霧法、噴槍法等在氣囊部9上附著含納米粒子的液滴的方法等。
圖4為顯示在導(dǎo)管本體的氣囊部附著了納米粒子的狀態(tài)的截面放大圖。氣囊部9 的表面通過帶負(fù)電性樹脂層11進(jìn)行了負(fù)電荷修飾，帶負(fù)電性樹脂層11的表面被用帶正電 的納米粒子1完全包覆，形成了納米粒子層12。
因此，能夠防止在后續(xù)制造步驟中、插入生物體器官內(nèi)時以及導(dǎo)管擴張時納米粒 子層12從氣囊部分剝離。作為納米粒子層12對帶負(fù)電性樹脂層11的附著力增大的原因， 可以認(rèn)為其歸因于在納米粒子1之間作用的范德華力等。
作為導(dǎo)管本體的形狀，除了圖3所示的形狀之外，還可以采用傳統(tǒng)的公知的各種 形狀。此外，導(dǎo)管本體的大小可以根據(jù)適用部位適宜選擇。例如，當(dāng)用于心臟的冠狀動脈時， 通常優(yōu)選擴張前的外徑是1. 0 3. 0mm、長度是5. 0 50mm左右。
此外，在包封于納米粒子內(nèi)的生理活性物質(zhì)為陰離子性的情況下，當(dāng)在帶負(fù)電性樹脂層11的表面形成納米粒子層12時，如果在納米粒子1的懸浮液中進(jìn)一步添加生理活 性物質(zhì)，則由于納米粒子表面的正電荷，生理活性物質(zhì)會以靜電負(fù)載的狀態(tài)被牽引并附著 于帶負(fù)電性樹脂層11。因此，對于極難以高濃度包覆在氣囊部9的核酸、基因等陰離子型生 理活性物質(zhì)，能夠更高效地使之附著。
通過反復(fù)進(jìn)行多次諸如上述的浸漬法、超聲波霧化法、噴霧法、噴槍法等，還可以 在納米粒子層上進(jìn)一步層疊納米粒子層。由此，可以沿著通過帶負(fù)電性樹脂層11形成于氣 囊部9的表面上的均勻的納米粒子層12層疊新的納米粒子層，即使單位時間的納米粒子附 著量增多，也能夠均一且有效率地形成具有希望層厚的納米粒子層。
此外，可以制作包封的生理活性物質(zhì)的種類不同的多種納米粒子，并使各種納米 粒子附著形成層狀或鑲嵌狀。此時，如果包封有希望在導(dǎo)管留置后短時間內(nèi)即溶出的生理 活性物質(zhì)的納米粒子附著于外層、包封有希望在外層崩壞后溶出的生理活性物質(zhì)的納米粒 子附著于內(nèi)層，則能夠按計劃調(diào)控2種以上生理活性物質(zhì)從氣囊部溶出的時間。此外，也 可以將2種以上的生理活性物質(zhì)包封于生物相容性高分子的種類、分子量不同的納米粒子 中，來調(diào)控溶出時間。
而且，還應(yīng)該考慮形成于氣囊部9的表面的納米粒子層12直接在生物體內(nèi)留置 后，在比較短的時間內(nèi)溶出，很難控制藥效的持續(xù)性的情形。此外，還存在下述隱患如果使 納米粒子層12完全干燥，則納米粒子之間聚集得越發(fā)牢固，納米粒子層12成為不溶性的被 膜，納米粒子1不從氣囊部9的表面溶出而無法進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。因此，在通過上述納米粒子附 著步驟形成納米粒子層12之后、納米粒子層完全干燥之前，可以視需要含浸生物降解性高 分子的溶液(含浸步驟)、然后對生物降解性高分子進(jìn)行干燥來使納米粒子層12固化(干 燥步驟)。
圖5示出了通過含浸步驟以及干燥步驟在形成納米粒子層的氣囊部(參照圖4) 形成了生物降解性高分子層的狀態(tài)。如果在形成于帶負(fù)電性樹脂層11的表面的納米粒子 層12完全干燥之前，含浸生物降解性高分子的溶液，則生物降解性高分子的溶液浸透到形 成納米粒子層12的各納米粒子1的間隙內(nèi)。于是，通過將用于溶解生物降解性高分子的溶 劑以及殘存于納米粒子層12中的水分干燥，可以形成生物降解性高分子層13。由此，各個 納米粒子1保持獨立，而不通過生物降解性高分子聚集在一起，在將導(dǎo)管本體留置于生物 體內(nèi)之后，通過生物降解性高分子層13的降解，納米粒子1緩慢溶出，進(jìn)入例如血管壁細(xì)胞 內(nèi)。
作為生物降解性高分子，可以列舉出例如聚羥基丁酸酯、聚羥基戊酸酯等微生物 產(chǎn)生的高分子、膠原、乙酸纖維素、細(xì)菌纖維素、高直鏈淀粉玉米淀粉、淀粉、殼聚糖等天然 高分子等。這其中，優(yōu)選使用生物體內(nèi)降解速度比用于形成納米粒子的PLGA等生物相容性 高分子快的膠原等。通過適宜選擇這些生物降解性高分子的種類、分子量等，能夠?qū)Ω街?氣囊部表面的納米粒子的溶出速度進(jìn)行調(diào)控。而且，也可以使用PGA、PLA、PLGA、PAL等用 于形成納米粒子的生物相容性高分子來形成生物降解性高分子層，這種情況下，可以使用 小分子量的物質(zhì)以使其降解速度快于納米粒子的降解速度。
而且，通過在含浸于納米粒子層的生物降解性高分子的溶液中也添加生理活性物 質(zhì)，能夠使包封于納米粒子外部的生物降解性高分子層中的生理活性物質(zhì)即效發(fā)揮作用， 并使包封于納米粒子內(nèi)部的生理活性物質(zhì)遲效且持續(xù)發(fā)揮作用。生理活性物質(zhì)的種類和包封量可以根據(jù)生理活性物質(zhì)的作用機制、所要求的即效性、持續(xù)性的程度等來適宜設(shè)定。
S卩，對于施用后要求長時間保持效果的持續(xù)性的生理活性物質(zhì)，可以將其包封在 納米粒子內(nèi)部，而對于要求剛剛施用后即體現(xiàn)效果的生理活性物質(zhì)，可以將其包封于納米 粒子外部的生物降解性高分子層中。作為包封于生物降解性高分子層中的生理活性物質(zhì)， 可以使用作為包封于納米粒子內(nèi)部的生理活性物質(zhì)示例出的各種生理活性物質(zhì)。
此外，如果在氣囊部9 (參照圖3)的表面形成微細(xì)的凹坑，則隨著氣囊部9的膨脹 凹坑慢慢變淺，在氣囊部9完全膨脹的狀態(tài)下，凹坑消失，氣囊部9的表面成為平坦的狀態(tài)。 因此，如圖6A所示，如果在形成有凹坑15的氣囊部9的表面層疊帶負(fù)電性樹脂層11和納 米粒子層12，在凹坑15內(nèi)負(fù)載比其它部分更大量的納米粒子1。帶負(fù)電性樹脂層11和納 米粒子層12的形成方法與無凹坑15的氣囊部9相同。
于是，將導(dǎo)管插入血管內(nèi)的狹窄部后，通過使氣囊部9膨脹，凹坑15慢慢變淺，在 加壓至5 30atm氣囊部9完全膨脹的狀態(tài)下，如圖6B所示，凹坑15消失，凹坑15內(nèi)的納 米粒子1被擠出并附著在狹窄部的血管壁上。由此，納米粒子1能夠大量且有效率地附著 在血管壁上。
作為凹坑15的形狀，優(yōu)選凹坑容易因氣囊部9的膨脹而變形、消失的圓形或橢圓 形。關(guān)于凹坑的大小，在凹坑為圓形時，優(yōu)選其直徑是0. 5 5_，在凹坑為橢圓形時，優(yōu)選 其短徑為0. 5 5mm、長徑/短徑=1 5。此外，優(yōu)選地，凹坑15的深度是0. 1 1mm，凹 坑間的間隔是1 5mm，氣囊部9上設(shè)置10 100個左右的凹坑。
如上述而得到的藥物溶出型導(dǎo)管中，附著于氣囊部的納米粒子的表面帶正電，因 而從氣囊部的表面溶出的納米粒子的細(xì)胞粘合性增大。由此，與傳統(tǒng)的藥物溶出型導(dǎo)管相 比，能夠提高納米粒子針對導(dǎo)管所留置的狹窄部位細(xì)胞的導(dǎo)入效率。
此外，本發(fā)明不受上述各實施方式的限定，其可以具有各種變形，且在不同的實施 方式中分別公開的技術(shù)特征適宜組合而得到的實施方式也包含在本發(fā)明的技術(shù)范圍內(nèi)。此 外，在上述各實施方式中，僅針對插入血管內(nèi)、保持開放狀態(tài)的氣囊導(dǎo)管進(jìn)行了說明，但本 發(fā)明當(dāng)然同樣適用于插入除生物體內(nèi)的血管以外的其它管腔的擴張型導(dǎo)管。以下，通過實 施例對包封NF κ B誘餌寡核苷酸、且表面經(jīng)正電荷修飾的PLGA納米球的制備、用該PLGA納 米球包覆的藥物溶出型氣囊導(dǎo)管的制作、以及NF κ B誘餌寡核苷酸從氣囊表面的溶出行為 進(jìn)行具體說明。
[含NFκ B誘餌寡核苷酸的PLGA納米球的制備]
實施例1
將SEQ ID NO 1所示的NF κ B誘餌寡核苷酸50mg溶解于純化水6mL中。將作為 生物相容性高分子的乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA 和光純藥工業(yè)(株)制造的PLGA7520(商 品名)、分子量20，000、乳酸/乙醇酸摩爾比=75/25) Ig溶解在作為其良溶劑的丙酮43mL 中制成聚合物溶液后，添加上述NF κ B誘餌寡核苷酸的水溶液并混合，制成了混合液。此 外，在2重量％的聚乙烯醇(PVA :KURARAY公司制造的POVAL 403 (商品名)、聚合度約300、 皂化度約80mOl% )水溶液25mL中混合2重量％的陽離子化殼聚糖(MOISS CoatPX(商品 名)、片倉Chikkarin公司制)水溶液5g，作為不良溶劑。于40°C、400rpm攪拌下向該不良 溶劑中以恒定速度(4mL/分鐘)滴加上述混合液，通過良溶劑向不良溶劑中的擴散而得到 了 PLGA納米球的懸浮液。18
然后，減壓蒸餾除去丙酮后，通過離心分離操作(20，000rpm、20分鐘)除去多余的 聚乙烯醇，_45°C凍干從而粉末化，得到了在水中的再分散性良好的NFk B誘餌寡核苷酸內(nèi) 包型PLGA納米球粉末。
實施例2
將SEQ ID NO 1所示的NF κ B誘餌寡核苷酸50mg溶解于純化水6mL中。將作為生 物相容性高分子的乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA 和光純藥工業(yè)(株)制造的PLGA7520(商品 名))Ig溶解在作為其良溶劑的丙酮43mL中制成聚合物溶液后，添加上述NFk B誘餌寡核 苷酸的水溶液并混合，制成了混合液。此外，在2重量％的聚乙烯醇(PVA :KURARAY公司制造 的P0VAL403 (商品名))水溶液25mL中混合2重量％的陽離子化殼聚糖(MOISS CoatPX (商 品名)、片倉Chikkarin公司制)水溶液5g，作為不良溶劑。于40°C、400rpm攪拌下向該不 良溶劑中以恒定速度(4mL/分鐘)滴加上述混合液，通過良溶劑向不良溶劑中的擴散而得 到了 PLGA納米球的懸浮液。
然后，減壓蒸餾除去丙酮后，再向所得納米球的懸浮液中添加NFk B誘餌寡核苷 酸20mg，-45°C凍干從而粉末化，得到了納米球表面負(fù)載有NFk B誘餌寡核苷酸且納米球內(nèi) 部包封有NFk B誘餌寡核苷酸的、并且在水中的再分散性良好的NFK B誘餌寡核苷酸內(nèi)包 /表面負(fù)載型PLGA納米球粉末。
采用動態(tài)光散射法(測定裝置MICR0TRAC UPA (商品名)、H0NEYWELL公司制)對 實施例1和2中得到的PLGA納米球再分散于水中時的平均粒徑進(jìn)行了測定。并且，使用ζ 電位計(ZETASUER Nano-Z (商品名)、Malvern Instruments公司制)測定了凍干后粒子 表面的ζ電位。此外，使用紫外可見分光光度計(V_530(商品名)、日本分光公司制、測定 波長^Onm)對粒子中的NF κ B誘餌寡核苷酸含有率(NF κ B誘餌寡核苷酸/PLGA納米球的 重量比)進(jìn)行了定量。測定結(jié)果如表1所示。其中，實施例1和2中所得的納米球的結(jié)構(gòu) 如圖1和圖2所示。
[表1]
權(quán)利要求
1.一種可擴張的藥物溶出型導(dǎo)管，該藥物溶出型導(dǎo)管的可擴張部分的表面經(jīng)負(fù)電荷修 飾，且在該經(jīng)負(fù)電荷修飾的可擴張部分的表面上包覆了包封有生理活性物質(zhì)、且表面經(jīng)正 電荷修飾的生物相容性納米粒子。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述可擴張部分經(jīng)聚羧酸或聚羧酸 衍生物進(jìn)行了負(fù)電荷修飾。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述聚羧酸是選自丙烯酸、甲基丙烯 酸、馬來酸、富馬酸、天冬氨酸或谷氨酸的聚合物，淀粉、纖維素或聚乙烯醇的羧基甲基衍生 物，海藻酸，果膠中的1種以上。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述聚羧酸衍生物是丙烯酸、甲基丙 烯酸、馬來酸的聚合物的酸酐衍生物或酯衍生物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述聚羧酸衍生物是馬來酸酐的共 聚物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述馬來酸酐的共聚物是選自馬來 酸酐-甲基乙烯基醚共聚物、馬來酸酐-苯乙烯共聚物、馬來酸酐-乙烯共聚物中的1種以 上。
7.根據(jù)權(quán)利要求1 權(quán)利要求6中任一項所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述生物相容 性納米粒子是通過在其表面附著陽離子型高分子來進(jìn)行正電荷修飾的。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述陽離子型高分子是殼聚糖。
9.根據(jù)權(quán)利要求1 6中任一項所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述生物相容性納米粒 子由聚乳酸、聚乙醇酸、乳酸-乙醇酸共聚物或乳酸-天冬氨酸共聚物中的任意種制成。
10.根據(jù)權(quán)利要求1 6中任一項所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述生理活性物質(zhì)是 核酸化合物。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述核酸化合物是選自質(zhì)粒DNA、 基因、誘餌寡核苷酸、siRNA、寡核苷酸、反義寡核苷酸、核酶、適體中的1種以上。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述核酸化合物是NFKB誘餌寡核苷酸。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述NFκ B誘餌寡核苷酸是選自 SEQ ID NO :1、SEQ ID NO 2 或 SEQ ID NO :3 中的 1 種。
14.根據(jù)權(quán)利要求1 6中任一項所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其是血管內(nèi)導(dǎo)管。
15.根據(jù)權(quán)利要求1 6中任一項所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其是具有氣囊作為所述可擴 張部分的氣囊導(dǎo)管。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述氣囊的表面形成有凹坑。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的藥物溶出型導(dǎo)管，其中，所述凹坑為圓形或橢圓形。
18.血管狹窄或透析分流狹窄的治療方法，該治療方法中使用權(quán)利要求1 6中任一項 所述的藥物溶出型導(dǎo)管。
19.藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，該制造方法包括納米粒子形成步驟在至少溶解有陽離子型高分子的水溶液中加入下述混合液，所述 混合液至少包含生理活性物質(zhì)的溶液與將生物相容性高分子溶解在有機溶劑中而得到的 溶液，形成生物相容性納米粒子的懸浮液，所述生物相容性納米粒子包含所述生物相容性高分子和包封在所述生物相容性高分子中的所述生理活性物質(zhì)，且所述生物相容性納米粒 子的粒子表面經(jīng)過了正電荷修飾；負(fù)電荷修飾步驟對導(dǎo)管本體的可擴張部分進(jìn)行負(fù)電荷修飾；納米粒子附著步驟使所述生物相容性納米粒子附著于經(jīng)負(fù)電荷修飾的所述可擴張部 分，形成納米粒子層；和干燥步驟對所述納米粒子層進(jìn)行干燥。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，其中，所述負(fù)電荷修飾步驟 通過將所述可擴張部分浸漬于聚羧酸或聚羧酸衍生物的溶液中來進(jìn)行。
21.根據(jù)權(quán)利要求19所述的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，其中，還在所述生物相容性 納米粒子的懸浮液中添加陰離子型生理活性物質(zhì)。
22.根據(jù)權(quán)利要求19所述的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，其中，通過反復(fù)多次進(jìn)行所 述納米粒子附著步驟，在形成于所述可擴張部分的所述納米粒子層上進(jìn)一步層疊納米粒子 層。
23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，其中，通過反復(fù)多次進(jìn)行所 述納米粒子附著步驟，以疊層狀或鑲嵌狀形成包含包封有不同生理活性物質(zhì)的生物相容性 納米粒子的所述納米粒子層。
24.根據(jù)權(quán)利要求19 23中任一項所述的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，該制造方法包括含浸步驟使所述納米粒子層含浸生物降解性高分子的溶液。
25.權(quán)利要求M所述的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法根據(jù)，其中，在所述含浸步驟中，還 在所述生物降解性高分子的溶液中添加生理活性物質(zhì)。
26.根據(jù)權(quán)利要求M所述的藥物溶出型導(dǎo)管的制造方法，其中，與形成所述生物相容 性納米粒子的生物相容性高分子相比，所述含浸步驟中納米粒子層所含浸的生物降解性高 分子在生物體內(nèi)的降解速度更快。
全文摘要
使生物相容性納米粒子1通過帶負(fù)電性樹脂層11電性附著于導(dǎo)管本體5的氣囊部9，從而形成納米粒子層12，所述生物相容性納米粒子1包封有生理活性物質(zhì)、且其表面經(jīng)正電荷修飾。在導(dǎo)管本體5留置于生物體內(nèi)后，納米粒子1緩慢地從納米粒子層12溶出并高效地進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。
文檔編號A61L29/00GK102036696SQ20098011719
公開日2011年4月27日 申請日期2009年3月12日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月12日
發(fā)明者三宅隆, 三田村真, 中島弘明, 中神啟德, 原香織, 塚田雄亮, 松田浩明, 板東容平, 森下竜一, 水津尚央, 河野義史, 辻本廣行, 高木邦彥 申請人:安琪士摩奇株式會社, 日本美德醫(yī)療集團(tuán), 細(xì)川密克朗集團(tuán)股份有限公司