專利名稱：益生菌對發(fā)生環(huán)境改變及生物學改變的人和動物的作用的制作方法
益生菌對發(fā)生環(huán)境改變及生物學改變的人和動物的作用與相關(guān)申請的交叉參考本申請是2008年4月16日提交的未決的臨時申請No. 61/124，424的部分繼續(xù)申請。關(guān)于聯(lián)邦贊助研究或開發(fā)的聲明不適用。聯(lián)合研究協(xié)議方名稱不適用。涉及“序列表”、表格或計算機程序列表的附錄不適用。
背景技術(shù)：
益生菌是在人和動物的胃腸道(GI tract)中天然存在的有益微生物。已經(jīng) 表明，在對人和動物施用正確量的活微生物時，益生菌對健康有利。益生菌廣泛地用作 動物和人的營養(yǎng)補充劑。例如，將酵母用作家畜的營養(yǎng)補充劑，也經(jīng)常使用含有乳桿菌 (Lactobacillus)和/或雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)乳酸菌的酸乳。當以益生菌作為營 養(yǎng)補充劑對人和動物施用時，未顯示毒性作用。為了在動物和人中將益生菌的作用最大化， 必須施用活菌以使其到達胃腸道進行繁殖(KaiIasapatha和Chin 2000)。乳桿菌和雙歧桿 菌屬是科學文獻和商品中描述的兩種最常見的益生菌。乳桿菌和雙歧桿菌屬均為兼性厭氧 菌。乳酸菌和雙歧桿菌屬的大部分菌種(或菌株)都對接觸氧(Gomes等，1995 =Talwalkar 和KaiIasapathy，2004)和高溫敏感。很難在持續(xù)開關(guān)的操作下在室溫下維持乳桿菌和雙 歧桿菌屬的活性。因此，所描述的結(jié)果經(jīng)常變化很大，特別是對于需要長期貯存和在不同溫 度下運輸?shù)氖惺郛a(chǎn)品而言(Tuomola等，2001)。對人和動物而言，蔬菜和水果是纖維、維生素、天然抗氧化劑和礦物質(zhì)的主要來 源。例如，已表明番茄和卷心菜是維生素C的天然來源(Clayton和Borden，1942)。更重要 的是，蔬菜和水果的安全性已被廣為接受。最近，已經(jīng)表明天然漿果(如櫻桃(Acerola)) 富含抗壞血酸和多酚。櫻桃所富含的維生素C(695a 4827mg/100g)使其成為天然維生素C 的優(yōu)選來源(Mezadri等，2006)。此外，最近在大鼠中的研究證明，櫻桃作為人用食品補充 劑是安全的(Hanamura和Aoki，2008)。益生菌與新鮮蔬菜或水果的組合將提供來自益生菌 以及新鮮蔬菜或水果的益處。然而，新鮮的蔬菜和新鮮的水果是微生物繁殖的天然營養(yǎng)來 源。微生物在新鮮蔬菜和水果中的復制不但改變蔬菜或水果的營養(yǎng)組成，而且還會生成毒 性化合物，其可能是由微生物分泌的，或是作為微生物繁殖或者蔬菜或水果降解的副產(chǎn)物 而產(chǎn)生的。一旦益生菌進入活躍狀態(tài)，將很難在長期貯存中保持其存活，尤其是在室溫下?？茖W家和商業(yè)公司已經(jīng)開發(fā)了不同的干燥方法來保存蔬菜和水果。干燥蔬菜和水 果面臨的主要難題是保持蔬菜和水果的營養(yǎng)和風味。在干燥過程中盡可能多地保持蔬菜或 水果中的礦物質(zhì)、維生素、碳水化合物、蛋白和抗氧化劑十分重要，尤其是對于蔬菜或水果 的干粉而言。此外，在干燥過程和貯存中，蔬菜或水果干粉的營養(yǎng)及風味的損失應(yīng)該盡可能 低，以使其具有作為新鮮蔬菜和水果的營養(yǎng)益處。
已經(jīng)廣為人知的是，將益生菌與礦物質(zhì)或其它動物飼料添加劑混合時，益生菌的 生存力顯著降低。將益生菌與維生素和礦物質(zhì)添加劑的混合物進行包封在一起使得益生菌 喪失高于99. 79%的生存力(Zimmer，1996，專利號5501857)。這提出了一個重要的問題 向需要保留礦物質(zhì)、維生素、抗氧化劑及風味的蔬菜或水果干粉中添加益生菌，而同時保持 益生菌的生存力。人和動物在發(fā)生環(huán)境改變(如離家、旅行、住旅館或寄宿設(shè)施或溫度的變化時)或 生物學改變(如衰老、飲食改變、病原體或寄生蟲感染，或抗生素治療)時容易患病。這些環(huán) 境改變經(jīng)常顯示出激素釋放的提高。這些激素中最重要的是來自腎上腺皮質(zhì)的皮質(zhì)醇。皮 質(zhì)醇導致炎性應(yīng)答的抑制(Roberts等，2006)。皮質(zhì)醇水平增高的持續(xù)會導致引發(fā)免疫應(yīng) 答的能力發(fā)生降低(Roberts等，2006)。被抑制的免疫系統(tǒng)可從很多途徑影響主體，例如， 吞噬入侵細菌的能力變?nèi)?。血液中皮質(zhì)醇的升高影響巨噬細胞膜的流動性；當免疫系統(tǒng)被 抑制時，巨噬細胞殺死所吞噬病原體的能力降低(Mayo Clinic 2006)。醫(yī)生和獸醫(yī)經(jīng)常以 數(shù)周的抗生素或類固醇療法治療腸胃(GI)疾病。然而，廣譜抗生素的持續(xù)使用可干擾人和 動物胃腸道中的有益微生物種群，并引起消化疾病的副作用。在人和動物中使用類固醇經(jīng) 常對天然激素產(chǎn)生干擾，引起心血管疾病、肝病和皮膚病。采用益生菌消除由人和動物的環(huán) 境或生物學改變而產(chǎn)生的影響，這降低了醫(yī)生和獸醫(yī)對抗生素和類固醇的依賴。前述相關(guān)領(lǐng)域及其相關(guān)局限性的實例旨在說明而非排除。本領(lǐng)域技術(shù)人員在閱讀 本說明書后將十分清楚相關(guān)領(lǐng)域的其他局限性。發(fā)明簡述將以下實施方案及其方面與系統(tǒng)、工具和方法相結(jié)合進行描述和說明，它們旨在 示例和說明，而非限制范圍。在多個實施方案中，已經(jīng)減輕或消除了一個或多個上述問題， 而另一些實施方案則針對其它改進。一些實施方案包括含有益生菌和植物干粉的組合物。一些實施方案包括益 生性微生物，如片球菌屬(Pediococcus)、雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)、擬桿菌屬 (Bacteroides)、丙酸菌屬(Propionibacterium)、鏈球菌屬(Streptococcus)、腸球菌 屬(Enterococcus)、乳球菌屬(Lactococcus) > ff lif M (Lactobacillus)禾口酵母菌屬 (Saccharomyces)。一些實施方案包括來自蔬菜、水果、谷物和藥草的干燥植物粉末。在一 些實施方案中，組合物被包封在明膠膠囊中。一些實施方案包括緩解人或動物中由環(huán)境改變或生物學改變所引起之影響的方 法，其包括以下步驟給需要這種緩解的人或動物食用包封的益生性組合物，其含有包封起 來的活益生性微生物。環(huán)境改變定義為居住在寄宿設(shè)施、旅行、溫度變化，人或動物的直接 區(qū)域或環(huán)境中的新的和/或有害的變化。生物學改變定義為人和動物的衰老、病原體或寄 生蟲的感染、慢性生理變化以及已有機體功能的變化。一些實施方案包括緩解人或動物中由環(huán)境改變或生物學改變所引起之影響的方 法，其包括以下步驟給需要這種緩解的人或動物食用包封的益生性組合物，其含有益生性 微生物和干燥的植物粉末。除上述示例性方面和實施方案外，其他方面和實施方案在參考附圖
并研究以下描 述后將是十分明確的。附圖簡述
不適用。發(fā)明詳述以1 4的重量比將乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)發(fā)酵培養(yǎng)物與番茄 的噴霧干燥粉末混合。通過人工膠囊裝填裝置或自動膠囊裝填機，將乳酸片球菌與番茄干 粉的500mg混合物包封在0號明膠膠囊中。將明膠膠囊保存在室溫下。將明膠膠囊保存在 室溫下，并在室溫下貯存0、1、3和6個月后取出。分離膠囊后，將乳酸片球菌與番茄干粉的 1克混合物重懸在之多IOml無菌緩沖鹽水中。實施一系列標準稀釋，將IOOul 10_7或10_8 的稀釋液噴到MRS (de Man，Rogosa和Sharpe)瓊脂平板上。將平板在45°C下孵育，直到觀 察到用于定量分析的菌落。細菌生存力示于表1。表1.明膠膠囊中的乳酸片球菌發(fā)酵培養(yǎng)物與番茄干粉在室溫下的包封穩(wěn)定性
生產(chǎn)后的時間細菌數(shù)存活百分比月CFU/克02.0 Χ IO1010011.92 Χ IO109631.94 Χ IO109461.76 Χ IO1088表1表明，與噴霧干燥的番茄粉末混合的益生性微生物培養(yǎng)物可基本保持活性至 少6個月?；枷膊〉氖茉囌呤莵碜灾袊⑴_灣和美國的志愿者，根據(jù)當?shù)卦\所的建議服 用NutriTot ，其為益生性組合物，其在明膠膠囊中含有干燥蔬菜粉末(如番茄、胡蘿卜、紅 薯、卷心菜、菠菜或花椰菜)或水果粉末(如檸檬、桃、草莓或蘋果)中的乳酸片球菌發(fā)酵培 養(yǎng)物。NutriTot 的施用小于10歲的兒童，每天半個膠囊；成人和大于10歲的兒童，每天 一個膠囊。當癥狀為中度至重度或者為重度時，加倍NutriTot 的用量。結(jié)果顯示在表2 中。表2.干燥的蔬菜粉末或水果粉末中的乳酸片球菌發(fā)酵培養(yǎng)物對患有消化疾病的 人的影響
權(quán)利要求
1.益生性組合物，其包含 益生性微生物，和干燥的植物粉末。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中所述益生性微生物選自片球菌屬(Pediococcus)、雙歧桿 菌屬(Bifidobacterium)、擬桿菌屬(Bacteroides)、丙酸桿菌屬(Propionibacterium)、鏈 球菌屬(Streptococcus)、腸球菌屬(Enterococcus)、乳球菌屬(Lactococcus) lifM (Lactobacillus)禾口酵母菌屬(Saccharomyces)。
3.權(quán)利要求1的組合物，其中所述干燥的植物粉末選自干燥的蔬菜粉末、干燥的水果 粉末、干燥的谷物粉末和干燥的藥草粉末。
4.權(quán)利要求1的組合物，其中所述益生性組合物包封在明膠膠囊中。
5.權(quán)利要求1的組合物，其中所述益生性微生物為片球菌屬或酵母菌屬。
6.權(quán)利要求1的組合物，其中所述益生性微生物為乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici) sK^iif^^lii (Saccharomyces boulardii)。
7.用于緩解人或動物中由環(huán)境改變或生物學改變所導致的影響的方法，包括以下步驟給需要緩解這種影響的人或動物食用經(jīng)包封的益生性組合物，所述益生性組合物包含 經(jīng)包封的活益生性微生物。
8.權(quán)利要求7的方法，其中所述益生性微生物選自片球菌屬、雙歧桿菌屬、擬桿菌屬、 丙酸桿菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬、乳球菌屬、乳桿菌屬和酵母菌屬。
9.權(quán)利要求7的方法，其中所述益生性微生物為片球菌屬或酵母菌屬。
10.權(quán)利要求7的方法，其中所述益生性微生物為乳酸片球菌或布拉酵母菌。
11.權(quán)利要求7的方法，其中所述動物是狗或魚。
12.用于緩解人或動物中由環(huán)境改變或生物學改變所導致的影響的方法，包括以下步驟給需要對環(huán)境改變或生物學改變進行藥物治療或者緩解的人或動物食用經(jīng)包封的益 生性組合物，所述益生性組合物包含益生性微生物和干燥的植物粉末。
13.權(quán)利要求12的方法，其中所述益生性微生物選自片球菌屬、雙歧桿菌屬、擬桿菌 屬、丙酸桿菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬、乳球菌屬、乳桿菌屬和酵母菌屬。
14.權(quán)利要求12的方法，其中所述益生性微生物為片球菌屬或酵母菌屬。
15.權(quán)利要求12的方法，其中所述益生性微生物為乳酸片球菌或布拉酵母菌。
16.權(quán)利要求12的方法，其中所述干燥的植物粉末選自干燥的蔬菜粉末、干燥的水果 粉末、干燥的谷物粉末和干燥的藥草粉末。
17.權(quán)利要求12的方法，其中所述動物是狗或魚。
18.權(quán)利要求7的方法，其中所述人或動物的生物學改變是人或動物患有的炎性腸病 (IBD)。
全文摘要
一個示例性實施方案提供了一種或多種改進，包括益生性組合物，所述益生性組合物包含益生性微生物以及干燥的蔬菜、水果、谷物或藥草粉末。給發(fā)生生物學改變或環(huán)境改變的人或動物食用該益生性組合物對緩解這些改變具有有益作用。該有益作用已在人、狗和魚中得到證明。
文檔編號A61K36/06GK102112140SQ200980126096
公開日2011年6月29日 申請日期2009年4月16日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月16日
發(fā)明者希-胡·林 申請人:醫(yī)麥科技美國馬里蘭有限責任公司