專利名稱：用于結(jié)合磷脂酰絲氨酸的環(huán)多胺的制作方法
用于結(jié)合磷脂酰絲氨酸的環(huán)多胺本發(fā)明涉及用于體外和體內(nèi)顯像細(xì)胞死亡的化合物，以及在患者中檢測(cè)腫瘤的發(fā) 展或消退的方法。此外，本發(fā)明還涉及包含這樣的化合物的藥物組合物、適于獲得所述化合 物的前體、獲得所述化合物的方法以及用于顯像細(xì)胞死亡的藥盒。在本申請(qǐng)全文中引用了多種出版物和參考書(shū)。這些出版物和參考書(shū)的公開(kāi)內(nèi)容整 體援引加入本申請(qǐng)中，以更全面地描述本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的現(xiàn)狀。引言腫瘤的治療控制是癌癥患者隨訪中所關(guān)注的主要方面之一。這一信息目前是通過(guò) 包括形態(tài)學(xué)變化、癥狀反應(yīng)(symptomatic response)和臨床化學(xué)在內(nèi)的一系列常規(guī)研究來(lái) 獲得的。放射技術(shù)例如X射線、計(jì)算機(jī)斷層攝影(CT)、超聲檢查(UQ以及磁共振(MR)是顯 像腫塊(tumor mass)的大小和形態(tài)并在某些程度上顯像腫瘤灌注的變化的顯像技術(shù)。同時(shí)，核醫(yī)學(xué)具有一系列可任意使用的成功用于評(píng)價(jià)治療反應(yīng)的放射性藥物。在 這些藥物中，[18F]FDG代表了充當(dāng)用于顯示例如細(xì)胞穩(wěn)定藥對(duì)腫瘤中的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)和己糖 激酶活性的影響的替代標(biāo)記的主要藥物。預(yù)計(jì)示蹤劑積累的減少表示治療反應(yīng)和更好的存 活。然而，例如在放射療法后早期的炎癥反應(yīng)可能使對(duì)該信號(hào)的解釋復(fù)雜化。而且，腫瘤反 應(yīng)是通過(guò)負(fù)信號(hào)(即示蹤劑攝入的減少)來(lái)顯示的。這可能在示蹤劑在治療前適度積累的 情況下是有問(wèn)題的。在這一方面，提供正信號(hào)的示蹤劑是更加令人期望的。幾年前，提出99mTc標(biāo)記的膜聯(lián)蛋白V作為能夠體內(nèi)顯像細(xì)胞死亡的新藥物。已在 包括心肌梗塞、Fas抗體治療的肝臟和施用細(xì)胞穩(wěn)定藥物后的腫瘤在內(nèi)的數(shù)種模型系統(tǒng)中 顯像凋亡(1，2)?；谟媚ぢ?lián)蛋白V-熒光染料結(jié)合物得到的結(jié)果的99mTc標(biāo)記的膜聯(lián)蛋白 V作為凋亡的體內(nèi)顯像指示劑的用途用于在顯微鏡下顯示凋亡細(xì)胞(3)。膜聯(lián)蛋白V最初分離自人類胎盤G)，其通過(guò)抑制(除其它因素外)凝血酶原酶的 活性表現(xiàn)出抗凝效應(yīng)。這一效應(yīng)歸因于來(lái)自磷脂膜的凝血因子的置換(5)。膜聯(lián)蛋白為在鈣的存在下與磷脂結(jié)合的普遍存在的同源蛋白。膜聯(lián)蛋白V以前 也被稱作胎盤抗凝蛋白(PAP)或血管抗凝蛋白(VAC-α) (5)，其在細(xì)胞凋亡發(fā)生后的早期 與Ca2+在存在于細(xì)胞膜上的外翻(externalized)的磷脂酰絲氨酸(PS)上結(jié)合在一起。在 正常條件下，磷脂酰絲氨酸約100%存在于雙分子層細(xì)胞膜的內(nèi)小葉，在那里充當(dāng)例如參 與跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和內(nèi)攝過(guò)程的膜聯(lián)蛋白I的錨(anchor) (6)。由于在內(nèi)源性或外源性刺激 后誘導(dǎo)的效應(yīng)半胱天冬酶3、6和7的活化，發(fā)生了蛋白質(zhì)的蛋白水解失活，其在正常條件 下維持脂類在細(xì)胞膜中的不對(duì)稱分布。幾種類型的轉(zhuǎn)位酶屬于這些蛋白質(zhì)，包括廣泛存在 的選擇性催化磷脂酰絲氨酸和磷脂酰乙醇胺向內(nèi)運(yùn)輸?shù)腗g2+-ATP依賴性氨基磷脂翻轉(zhuǎn)酶 (flippase)、幾乎不具有首基(headgroup)特異性的將磷脂向外運(yùn)輸?shù)腁TP依賴性翻轉(zhuǎn)酶 (floppase)以及破壞雙分子層不對(duì)稱性的Ca2+依賴性拼接酶(scramblase) (7)。由需要能 量的凋亡過(guò)程引起的ATP消耗也可能阻礙不對(duì)稱脂分布的維持。膜聯(lián)蛋白V對(duì)暴露磷脂酰絲氨酸的細(xì)胞的高親和性(表現(xiàn)出Kd < 10-10mol/l)⑶ 是體內(nèi)檢測(cè)凋亡的基礎(chǔ)。膜聯(lián)蛋白V-磷脂酰絲氨酸的這一強(qiáng)烈相互作用的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)正被 逐漸闡明。
從X-射線結(jié)構(gòu)分析已知此類結(jié)合通過(guò)在被稱作AB、AB'和DE的Ca2+-結(jié)合位點(diǎn) 的協(xié)作下的Ca2+與羧基-磷脂首基的共絡(luò)合(co-complexation)發(fā)揮作用。這些結(jié)合位點(diǎn) 位于膜聯(lián)蛋白V的四個(gè)連續(xù)重復(fù)區(qū)段的每一個(gè)中。

圖1顯示了這些區(qū)段之一(結(jié)構(gòu)域III)與甘油磷酸絲氨酸(截短的磷脂酰絲氨 酸)在Ca2+-膜聯(lián)蛋白V結(jié)合位點(diǎn)上的相互作用(9)。一級(jí)AB和次級(jí)AB' Ca2+位點(diǎn)位于各 結(jié)構(gòu)域的A螺旋和B螺旋之間的環(huán)內(nèi)。它們也被分別稱作II型和III型Ca2+結(jié)合位點(diǎn)。應(yīng)當(dāng)注意，這三個(gè)絡(luò)合位點(diǎn)AB、AB'和DE表示具有不同穩(wěn)定性(即AB > AB，> DE)的差異配位(differently coordinated)的鈣陽(yáng)離子。第二個(gè)絡(luò)合物實(shí)體磷脂酰絲氨 酸在AB'位點(diǎn)通過(guò)絲氨酸的羧基功能以及在AB位點(diǎn)通過(guò)帶負(fù)電荷的磷酸氧(phosphate oxygen)與Ca2+配位。此外，絲氨酸的α -氨基在這一結(jié)構(gòu)域中與蘇氨酸(THr) 187相互作 用。然而，膜聯(lián)蛋白V與磷脂酰絲氨酸通過(guò)共同使用的Ca2+的相互作用不僅引起這 一強(qiáng)結(jié)合親和性。必須考慮多價(jià)結(jié)合，因?yàn)镃a2+形成穩(wěn)定常數(shù)IogK1僅在4-5范圍內(nèi)的 肽絡(luò)合物。與磷脂酰絲氨酸結(jié)合，這一數(shù)值可能由于磷脂酰絲氨酸對(duì)Ca2+的雙齒合度 (bidenticity)而在某種程度上得以增加。然而，為了滿足上文提及的小解離常數(shù)，必須有 兩個(gè)或更多個(gè)結(jié)構(gòu)域參與到膜聯(lián)蛋白V/Ca2+/磷脂酰絲氨酸首基的相互作用中。這些考慮 假設(shè)存在足夠濃度的Ca2+。通過(guò)在以低膜占用(membrane occupancy)結(jié)合的膜聯(lián)蛋白V的 存在下進(jìn)行滴定驗(yàn)證了 Ca2+依賴性，顯示這一相互作用就Ca2+而言的強(qiáng)協(xié)同性(10)。理論 上至多12個(gè)Ca2+離子可通過(guò)各結(jié)構(gòu)域中的三個(gè)結(jié)合位點(diǎn)(AB、AB'和DE)絡(luò)合。已在大鼠 膜聯(lián)蛋白V晶體結(jié)構(gòu)中定位了多達(dá)10個(gè)Ca2+離子，所述膜聯(lián)蛋白V晶體結(jié)構(gòu)均結(jié)合在蛋白 質(zhì)的向膜(membrane-facing)表面(9)。除了膜聯(lián)蛋白V/磷脂酰絲氨酸系統(tǒng)，已檢測(cè)了用于顯像由凋亡而非壞死引起的 細(xì)胞死亡的其它方法。有可能用于體內(nèi)凋亡檢測(cè)的凋亡途徑中的替代靶點(diǎn)為活化的半胱天 冬酶(11-13)。本文中檢測(cè)的兩個(gè)系統(tǒng)是基于不可逆抑制劑或底物與活化的執(zhí)行半胱天冬 酶(executioner caspase)的結(jié)合。最近總結(jié)了迄今為止所獲得的結(jié)果(14，15)。如前文所提及的，通常用熒光染料標(biāo)記膜聯(lián)蛋白V用于體外測(cè)定C3)。盡管標(biāo)記蛋 白被廣泛地用于分子生物學(xué)，但是它昂貴且不太穩(wěn)定。因此，它不方便用于藥物研發(fā)中的高 通量篩選測(cè)定。此外，完全結(jié)合需要約2. 5mmol/l的胞外Ca2+。這可以導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果，因?yàn)榇蠖?數(shù)動(dòng)物細(xì)胞具有可將磷脂酰絲氨酸轉(zhuǎn)移到細(xì)胞表面的Ca2+依賴性拼接酶(16)。此外，完全 的膜聯(lián)蛋白結(jié)合需要多達(dá)1個(gè)小時(shí)的孵育，這對(duì)于動(dòng)力學(xué)測(cè)定是有問(wèn)題的(17，18)。簡(jiǎn)言之，染料標(biāo)記的膜聯(lián)蛋白V是有用的凋亡傳感器(apoptosis sensor)，但是 其具有許多局限性，所以需要廉價(jià)、穩(wěn)定、低分子量、快速結(jié)合、膜滲透的以及Ca2+依賴性的 替代試劑。因此，本發(fā)明的根本問(wèn)題是提供作為磷脂酰絲氨酸結(jié)合劑的具有改進(jìn)特性的分 子，特別是提供作為凋亡傳感器與膜聯(lián)蛋白V相比顯示改進(jìn)特性的分子。更概括而言，本發(fā)明的目的是提供能夠體內(nèi)和體外檢測(cè)細(xì)胞死亡的改進(jìn)的分子。 所述改進(jìn)的分子是與由凋亡或壞死引起的瀕死細(xì)胞或死亡細(xì)胞特異性結(jié)合的標(biāo)記。最近的開(kāi)發(fā)之一引入圖2所示的鋅雙-(2，2_ 二吡啶甲基胺)(ZincbiS-(2， 2-dipicolylamine)) ( 2+雙-DPA)配位絡(luò)合物，其被設(shè)計(jì)用來(lái)模擬膜聯(lián)蛋白V的凋亡傳感功能(19，20)。根據(jù)圖1，一個(gè)磷脂酰絲氨酸首基與兩個(gè)橋聯(lián)Ca2+離子配位，所述橋聯(lián)Ca2+ 離子又與蛋白質(zhì)表面的四個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(canonical)結(jié)合位點(diǎn)之一配位(9)。

發(fā)明內(nèi)容
同為了提供可置換的磷脂酰絲氨酸結(jié)合位點(diǎn)，與ai配位的雜原子之一必須是水 的預(yù)期相反，發(fā)明人使用具有至少一個(gè)用于二價(jià)或三價(jià)金屬離子的絡(luò)合的環(huán)多胺(cyclic polyamine)單元的化合物，特別是四氮雜環(huán)十二烷(cyclen) (12[烷]N4)或四氮雜環(huán)十四 烷(cyclam) (14[烷]N4)來(lái)代替DPA。優(yōu)選地，所述四氮雜環(huán)十二烷為環(huán)狀亞乙基橋聯(lián)的四 胺，而所述四氮雜環(huán)十四烷為混合的亞乙基-亞丙基橋聯(lián)的四胺，二者均具有用于Si2+絡(luò)合 的四個(gè)氮原子。相對(duì)于DPA的穩(wěn)定常數(shù)IO5Oii0Vir1,此類化合物的穩(wěn)定常數(shù)為約IO15(mol/ 1廣(四氮雜環(huán)十四烷)。因此，在本發(fā)明的第一方面，通過(guò)包含或含有至少一個(gè)環(huán)多胺單元(C)的化合物 或絡(luò)合物解決所述根本問(wèn)題。這一環(huán)多胺單元(C)使得作為絡(luò)合物的中心離子的多價(jià)(特 別是二價(jià)和/或三價(jià))金屬離子的結(jié)合或絡(luò)合成為可能。在本發(fā)明的一方面，本發(fā)明的范圍不包括AMD3100(1，T _[1，4_亞苯基雙 (亞甲基)]雙[1，4，8，11_四氮雜環(huán)十四烷]-八氫溴化物-二水合物((1，1' -[1， 4-Phenylenebis(methylen)]bis[1，4，8,11-tetraazacyclotetradecan]-octohydrobr omid-dihy-drate)))及其衍生物(即取代的AMD3100)，其為具有環(huán)多胺單元的化合物。 AMD3100被設(shè)計(jì)為通過(guò)抑制病毒經(jīng)CD4/CXCR4受體組裝(receptor assembly)進(jìn)入以治療 HIV感染。然而，AMD3100用于結(jié)合磷脂酰絲氨酸和用于凋亡顯像的用途屬于本發(fā)明的范 圍。本發(fā)明不包括1，1，-[1，3_亞苯基雙-(亞甲基)]-雙-三(對(duì)甲苯磺?；?_1，4，7， 10"四氮雜環(huán)十二烷，因?yàn)樗婕翱笻IV的活性成分，即下文公開(kāi)的化合物。
R =
R /-Λ ,N N
/^VR N N、
Γ-\—
” K N ^
,C
/—\ INkl
INILI
\_f
N N
R N~/ R
,N N, FT R第一種實(shí)施方案的第一方面涉及化合物或絡(luò)合物及其藥用鹽、非對(duì)映異構(gòu)體和對(duì) 映異構(gòu)體，其特征在于所述化合物或絡(luò)合物包含至少一個(gè)用于二價(jià)或三價(jià)金屬離子的絡(luò)合或用于絡(luò)合二價(jià)或三價(jià)金屬離子的環(huán) 多胺單元(C)。任選地，本發(fā)明的化合物或絡(luò)合物還包含至少一個(gè)標(biāo)記(Tag) (T)或連接基(L)-標(biāo)記(T)，和/或至少一個(gè)橋聯(lián)單元(B)或鍵。優(yōu)選地，所述化合物或絡(luò)合物包含
至少一個(gè)用于二價(jià)或三價(jià)金屬離子的絡(luò)合或用于絡(luò)合二價(jià)或三價(jià)金屬離子的環(huán) 多胺單元(C)， 至少一個(gè)標(biāo)記(T)或連接基(L)-標(biāo)記(T)，以及至少一個(gè)橋聯(lián)單元(B)或鍵。優(yōu)選地，所述二價(jià)或三價(jià)金屬離子為非放射性二價(jià)或三價(jià)金屬離子。優(yōu)選地，所述化合物或絡(luò)合物包含至少一個(gè)用于二價(jià)或三價(jià)金屬離子的絡(luò)合或用于絡(luò)合二價(jià)或三價(jià)金屬離子的環(huán) 多胺單元(C)，以及至少一個(gè)標(biāo)記(T)或連接基(L)-標(biāo)記(T)。當(dāng)所述多價(jià)金屬離子為二價(jià)金屬離子時(shí)，該二價(jià)金屬離子選自Si2+、Ca2+、Cu2+、 Be2+、Mg2+、Sr2\ Ba2\ Cd2+、Cr2\ Mn2\ Fe2\ Co2\ Ni2+、Pb2+ 和 Hg2+。優(yōu)選地，所述二價(jià)金屬離子選自ai2+、Ca2+和Cu2+。更優(yōu)選地，所述二價(jià)金屬離子為 Zn2\當(dāng)所述多價(jià)金屬離子為三價(jià)金屬離子時(shí)，該三價(jià)金屬離子選自Al3+、Ga3\ In3\ Cr3\Mn3\Fe3\Co3\Ni3+0優(yōu)選地，所述三價(jià)金屬離子選自(ia3+、Mn3+、Fe3\ Ni3+。更優(yōu)選地，所述三價(jià)金屬離 子為fei3+。在本發(fā)明的化合物或絡(luò)合物包含多于一個(gè)環(huán)多胺單元(C)的實(shí)施方案中，不同的 金屬離子可被所述化合物或絡(luò)合物絡(luò)合。為了例如在向患者給藥后或當(dāng)用于瀕死細(xì)胞(dying cell)的體外檢測(cè)方法中時(shí) 有助于容易地檢測(cè)所述化合物或絡(luò)合物，所述化合物或絡(luò)合物還包含至少一個(gè)用于例如在 患者中檢測(cè)所述化合物或絡(luò)合物的可檢測(cè)標(biāo)記(T)(例如標(biāo)記或信號(hào)基團(tuán))。該可檢測(cè)標(biāo)記 (T)優(yōu)選地與所述化合物或絡(luò)合物共價(jià)結(jié)合。這樣的標(biāo)記(T)可選自熒光染料、酶(特別是用于ELISA檢測(cè))、蛋白質(zhì)、磁性顆 粒、納米顆粒、脂質(zhì)體、用于CT的X-射線吸收元素(例如碘、鑭系元素等)、用于MRT的改變 組織的弛豫時(shí)間的元素(例如釓、超順磁性氧化鐵(SPIO))以及放射性標(biāo)記。具體而言，所述熒光染料選自異硫氰酸熒光素(FITC)、羅丹明及衍生物、BODIPY 熒光團(tuán)(4，4- 二氟-4-硼-3a，4a- 二氮雜-對(duì)稱引達(dá)省(4，4_difluoro-4-bora_3a， 4a-diaza-s_indacene)，分子探針，Invitrogen)、Alexa Fluor 染料(分子探針， 11^行1^拙)、酞菁和部花青、4 0(518111￡1)、萘(naphtalene)衍生物(丹磺酰基(dansyl) 和氟硅酸鈉(prodan)衍生物)、吡啶基噁唑、硝基苯并噁二唑和苯并噁二唑衍生物、香 豆素衍生物、芘衍生物、俄勒R綠(Oregon green)、曙紅、德克薩斯紅、瀑布藍(lán)(cascade blue)、尼羅紅、Cy-3、Cy-5 及它們的衍生物，以及 Handbook of Fluorescent Probes R. P. Hangland，ISBN0-9652240-1-5 ；1996，第8_39頁(yè)中所列的任何其它熒光化合物。優(yōu)選 地，所述熒光染料為異硫氰酸熒光素(FITC)。所述蛋白質(zhì)選自過(guò)氧化物酶、熒光素酶(Iuziferase)、生物素、抗生物素蛋白、抗 體和/或抗體的一部分(例如Fc-片段、雙特異抗體、ScFV、F(ab' ) 2片段、Fab....)、毒 素、諸如scFv’ s的重組蛋白質(zhì)、雙特異抗體、微抗體以及技術(shù)人員已知的合適的蛋白質(zhì)。所述CT標(biāo)記可選自適用于計(jì)算機(jī)斷層攝影(CT)的包含碘或鑭系元素的絡(luò)合物。所述MRT標(biāo)記可選自適用于磁共振計(jì)算機(jī)斷層攝影(MRT)顯像的包含釓或超順磁性氧化鐵 (SPIO)的絡(luò)合物。合適的CT或MRT元素是本領(lǐng)域公知的。所述CT/MRT標(biāo)記為包含碘或鑭 系元素或釓的絡(luò)合物和/或?yàn)榕c所述化合物或絡(luò)合物共價(jià)結(jié)合的基團(tuán)或原子。所述放射性標(biāo)記可選自適用于正電子發(fā)射斷層攝影(PET)或單光子發(fā)射計(jì)算機(jī) 斷層攝影(SPECT)顯像的已知放射性同位素或它們的衍生物或包含放射性同位素的絡(luò)合 物。合適的PET放射性同位素(29)是本領(lǐng)域公知的(Handbook of Nuclear Chemistry, 第 4 卷(Vol. Ed. F. Rosch； Ed. Vertes, A. ， Nagy, S. ， Klencsar, Ζ. ， )Kluver Academic Publishers, 2003 ；第119-202頁(yè))。用于SPECT顯像的合適的包含放射性同位素的絡(luò)合 物(30)是本領(lǐng)域公知的((Handbook of Nuclear Chemistry，第 4 卷(Vol. Ed. F. Rosch； Ed. Vertes, A. , Nagy, S. , Klencsar, Ζ. , ) Kluver Academic Publishers, 2003 ；第 279-310 頁(yè))。所述放射性標(biāo)記為包含放射性同位素的絡(luò)合物和/或與所述化合物或絡(luò)合物共價(jià)結(jié) 合的基團(tuán)或原子。所述放射性同位素選自"-!^、’、"(、123〗、124〗、125〗、,、6…2+,…+、,!·、 68Ga3\67Ga3\inIn3\14C,3H,32P,89Zr 和 33P。具體而言，對(duì)于正電子發(fā)射斷層攝影(PET)，優(yōu)選18F、68fei、67CU或124I作為正電子 發(fā)射放射性同位素，更優(yōu)選18F或68Ga。對(duì)于單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層攝影(SPECT)，優(yōu)選123I、 125K111In 和 99mTc,更優(yōu)選 123I 或 99mTc。優(yōu)選地，所述標(biāo)記(T)選自
權(quán)利要求
1.化合物及其藥用鹽、非對(duì)映異構(gòu)體和對(duì)映異構(gòu)體，其特征在于所述化合物包含 至少一個(gè)用于二價(jià)或三價(jià)金屬離子的絡(luò)合或用于絡(luò)合二價(jià)或三價(jià)金屬離子的環(huán)多胺單元(C)。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述化合物還包含 至少一個(gè)標(biāo)記(T)或連接基(L)-標(biāo)記(T)，和/或 至少一個(gè)橋聯(lián)單元(B)或鍵。
3.如權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中所述環(huán)多胺單元(C)為取代或未取代的基團(tuán)， 所述基團(tuán)具有9至20個(gè)環(huán)成員，并且所述環(huán)中的3至6個(gè)胺氮被2個(gè)或更多個(gè)碳原子彼此 間隔。
4.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中所述環(huán)多胺單元(C)選自 式Ia的四氮雜環(huán)十二烷，式Ib的四氮雜環(huán)十四燒，以及 式Ic的四氮雜環(huán)十二烷_(kāi)四氮雜環(huán)十四烷混合物， R4R1R4R1\./~Λ //—\ /η — η其中Rl、R2、R3和R4各自獨(dú)立地選自鍵、氫、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或烷基-C00-、芳 基-C00-。
5.如權(quán)利要求1-4所述的化合物，其中所述二價(jià)金屬離子選自Zn2+、Ca2+、Cu2+、Be2+、 Mg2+、Sr2+、Ba2+、Cd2+、Cr2+、Mn2+、Fe2+、Co2+、Ni2+、Pb2+ 和 Hg2+。
6.如權(quán)利要求1-4所述的化合物，其中所述三價(jià)金屬離子選自Al3+、Ga3+、In3+、Cr3+、 Mn3+、Fe3+、Co3+ 和 Ni3+。
7.如權(quán)利要求1-6所述的化合物，其中所述標(biāo)記(T)或所述連接基(L)-標(biāo)記(T)基團(tuán) 的標(biāo)記為可檢測(cè)標(biāo)記，其中所述可檢測(cè)標(biāo)記與一個(gè)或多個(gè)環(huán)多胺單元(C)或橋聯(lián)單元(B) 共價(jià)結(jié)合。
8.如權(quán)利要求7所述的化合物，其中所述標(biāo)記(T)選自熒光染料、酶、蛋白質(zhì)和放射性標(biāo)記。
9.如權(quán)利要求8所述的化合物，其中-所述熒光染料選自熒光素、羅丹明、BODIPY、Cy-3、Cy-5及其衍生物； _所述蛋白質(zhì)選自過(guò)氧化物酶、熒光素酶、生物素、抗生物素蛋白和抗體，或其部分； -所述放射性標(biāo)記選自 99mTc J8FJ1CJ24L123L64Cu2^68Ga3V11In3VH32P 和 33P,優(yōu)選18F。
10.如權(quán)利要求1-9所述的化合物，其中所述標(biāo)記(T)或所述連接基(L)-標(biāo)記(T)與 環(huán)多胺單元結(jié)合或與橋聯(lián)單元(B)結(jié)合。
11.如權(quán)利要求1-10所述的化合物，其中連接基(L)選自C1-C6烷基、O-C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6亞烷基、(CH2CH2O)nCH2CH2、取代或未取代的芳基、取代或未取代的0-芳 基、取代或未取代的雜芳基、(CH2)nPK (CH2CH2CH20)nCH2CH2、CO(CH2)n、[O(CH2)n-O(CH2)Jm 或-O(CH2) n、[O(CH2)n-O (CH2)1Jm，其中Ph =苯基，并且η或m = 1、2、3、4、5、6。
12.如權(quán)利要求1-11所述的化合物，其中當(dāng)存在至少兩個(gè)環(huán)多胺單元(C)時(shí)，所述橋聯(lián)單元(B)連接所述環(huán)多胺單元(C)，或者 所述橋聯(lián)單元(B)與單個(gè)環(huán)多胺單元(C)結(jié)合。
13.如權(quán)利要求12所述的化合物，其中所述橋聯(lián)單元(B)選自下述取代或未取代的基團(tuán)
14.藥物組合物，其包含如權(quán)利要求1-13所述的化合物以及任選存在的合適的載體和 /或添加劑。
15.如權(quán)利要求1-13所述的化合物用于結(jié)合磷脂酰絲氨酸的用途。
16.如權(quán)利要求1-13所述的化合物用于細(xì)胞死亡(凋亡、壞死)顯像的用涂。
17.如權(quán)利要求1-13所述的化合物，其用于制備用于細(xì)胞死亡(凋亡、壞死)顯像的藥 物組合物。
18.如權(quán)利要求17所述的化合物和如權(quán)利要求16所述的用途，其中顯像為正電子發(fā) 射斷層攝影(PET)顯像、單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層攝影(SPECT)顯像、磁共振顯像(MRI)和/ 或光學(xué)顯像。
19.如權(quán)利要求14-15所述的用途，用于評(píng)價(jià)腫瘤、損傷、中風(fēng)、心臟病發(fā)作、炎癥、感染式III的狀態(tài)，或者患有腫瘤、患有感染和/或患有炎癥、患有損傷、患有中風(fēng)、患有心臟病發(fā)作的 患者分別對(duì)抗腫瘤療法、抗感染療法和/或抗炎療法的反應(yīng)。
20.在患者的組織中檢測(cè)腫瘤、損傷、中風(fēng)、心臟病發(fā)作、感染和/或炎癥的發(fā)展的方 法，其包括(a)向患者給藥如權(quán)利要求1-14所述的化合物，以及(b)測(cè)量該化合物在所述組織中的量或濃度。
21.方法，其用于獲得如權(quán)利要求1-13所述的化合物。
22.藥盒，其包含如權(quán)利要求1-13所述的化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于檢測(cè)細(xì)胞死亡的化合物。根據(jù)本發(fā)明，所述化合物包含用于二價(jià)或三價(jià)金屬離子的絡(luò)合的環(huán)多胺單元。本發(fā)明化合物可以包含諸如熒光素的報(bào)告標(biāo)記或包含放射性同位素的取代基。
文檔編號(hào)A61K51/04GK102137849SQ200980134006
公開(kāi)日2011年7月27日 申請(qǐng)日期2009年7月14日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月18日
發(fā)明者D·奧爾特曼斯, M·艾森胡特, S·齊茨曼-科爾貝, U·鮑德?tīng)?維斯特 申請(qǐng)人:拜耳先靈醫(yī)藥股份有限公司