專(zhuān)利名稱(chēng):用于原位腫瘤破壞療法的免疫刺激性皂苷類(lèi)的制作方法
用于原位腫瘤破壞療法的免疫刺激性皂苷類(lèi)
本發(fā)明涉及用于原位腫瘤破壞療法的藥物組合物,所述療法包括腫瘤破壞和施用免疫刺激量的免疫增強(qiáng)劑的步驟,以及涉及此類(lèi)藥物組合物在藥劑制造中的用途。癌癥是用于描述贅生性生長(zhǎng)(neoplastic growth)的一般術(shù)語(yǔ)。贅生物被認(rèn)為是通常以高于正常的速度增殖的組織的異常的、通常為去分化的形式。在大多數(shù)情況下,贅生性細(xì)胞侵入周?chē)M織并且它們還轉(zhuǎn)移至身體的其他地方并且繼續(xù)生長(zhǎng)。贅生性腫塊(neoplastic mass)即腫瘤的局部和區(qū)域治療例如手術(shù)不影響可能的轉(zhuǎn)移。因此,需要另外的療法例如利用細(xì)胞毒性藥物的治療。此類(lèi)治療通常稱(chēng)為化學(xué)療法。局部治療當(dāng)然是實(shí)體瘤的治療的第一步驟。這通常通過(guò)腫瘤切除術(shù)來(lái)進(jìn)行。另一種方法是原位腫瘤破壞。原位腫瘤破壞的的特征是不移除腫瘤而是使其壞死。原則上,輻照是原位腫瘤破壞的一種形式,但已開(kāi)發(fā)了許多其他的腫瘤破壞方式。常用方法是例如光動(dòng)力療法(該療法組合使用光敏化合物和隨后通過(guò)激光活化(利用激光、微波、電流、超聲波、高強(qiáng)度的聚焦超聲波或利用射頻波原位加熱)或冷凍療法通過(guò)冷凍使組織壞死。原位腫瘤破壞使被破壞的腫瘤塊存在于體內(nèi)。這為嘗試和建立針對(duì)腫瘤特異性抗原的免疫應(yīng)答(癌癥免疫療法)提供了可能性。對(duì)腫瘤特異性抗原的此類(lèi)免疫應(yīng)答的成功誘導(dǎo)的有利方面是其將持續(xù)一段時(shí)間并且最終消除機(jī)體內(nèi)由局部腫瘤破壞不易到達(dá)的其他部位的腫瘤。然而,與從基于非自身抗原的疫苗開(kāi)發(fā)所知的相反,針對(duì)腫瘤抗原的免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)非常困難??偟恼f(shuō)來(lái),腫瘤抗原大部分是身體的正常成分自身抗原。因此免疫系統(tǒng)就這一點(diǎn)來(lái)說(shuō)將下調(diào)自我導(dǎo)向的免疫應(yīng)答,從而導(dǎo)致對(duì)自身抗原的耐受狀態(tài)。因此,基于腫瘤破壞的癌癥免疫療法的開(kāi)發(fā)需要非常特殊的方法。實(shí)際上,非甲基化的胞苷基鳥(niǎo)苷基寡脫氧核苷酸(cytidyl guanosyloligodeoxynucleotide,CpG 0DN)目前被認(rèn)為是迄今為止最優(yōu)選的能夠誘導(dǎo)針對(duì)腫瘤特異性自身抗原的免疫應(yīng)答的免疫增強(qiáng)化合物的特定組。此類(lèi)胞苷鳥(niǎo)苷基寡脫氧核苷酸作為toll樣受體9 (TLR9)激動(dòng)劑起作用。CpG基序因它們對(duì)Thl應(yīng)答和腫瘤特異性 ⑶8+T淋巴細(xì)胞的優(yōu)先誘導(dǎo)而顯突出。TLR9主要由內(nèi)化并且直接對(duì)CpG基序起反應(yīng)的B細(xì)胞和樹(shù)突細(xì)胞(DC)表達(dá)。在觸發(fā)TLR9后,DC成熟并且遷移至引流淋巴結(jié),在引流淋巴結(jié)中它們將抗原遞呈給T和B淋巴細(xì)胞。重要地是,此類(lèi)DC獲得將捕獲的抗原呈遞給MHC I 類(lèi)分子的獨(dú)特能力,一種稱(chēng)為交叉呈遞的過(guò)程,該過(guò)程對(duì)于高效地引發(fā)腫瘤特異性CTL是至關(guān)重要的。就這一點(diǎn)而論,CpG施用已被報(bào)導(dǎo)可防止預(yù)防性情形下腫瘤的向外生長(zhǎng),并且還可根除小鼠中已建立的腫瘤。Nierkens, S.等人(Cancer Res. 68 =5390-5396(2008))和由 Roux, S.等人(Cancer Immunol. Immunoth. 57 1291-1300 (2008))。然而存在關(guān)于使用CpG ODN的一些潛在安全性考慮,即包括抗DNA抗體和自身免疫力的誘導(dǎo)。此外,當(dāng)以更大量和在更長(zhǎng)的時(shí)期中提供時(shí)它們的毒性以及其使用中涉及的花費(fèi)也是需要考慮的。
因此,存在對(duì)其他免疫增強(qiáng)化合物的需要。本發(fā)明提供了減少或克服上面提及的問(wèn)題。 鑒于TLR9和其激動(dòng)劑在原位腫瘤破壞后對(duì)腫瘤特異性抗原的免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)中的重要作用,本領(lǐng)域技術(shù)人員認(rèn)為此類(lèi)其他免疫增強(qiáng)化合物也充當(dāng)TLR9激動(dòng)劑是一個(gè)前提。令人驚訝地,現(xiàn)發(fā)現(xiàn)與TLR9-機(jī)制毫不相關(guān)的皂苷類(lèi)卻非常適合于在腫瘤破壞后誘導(dǎo)針對(duì)腫瘤特異性自身抗原的免疫應(yīng)答。甚至更出人意料地,它們的有效性(雖然通過(guò)未知的機(jī)制)似乎可與CpG的有效性相當(dāng)或甚至更好。已發(fā)現(xiàn)在腫瘤內(nèi)或其周?chē)⒃谀[瘤破壞的時(shí)刻或其先后不久施用皂苷類(lèi)在原位腫瘤破壞后誘導(dǎo)了非常顯著的針對(duì)腫瘤特異性抗原的免疫應(yīng)答。該免疫應(yīng)答是長(zhǎng)效的,從而非常適合消除轉(zhuǎn)移的細(xì)胞,即使此類(lèi)細(xì)胞已潛伏地存在于身體中。此外,即使在治療后數(shù)周以顯著量有意施用相同類(lèi)型的腫瘤細(xì)胞,該免疫應(yīng)答似乎也足夠強(qiáng)而能夠預(yù)防這種腫瘤細(xì)胞的增殖。皂苷類(lèi)到現(xiàn)在為止都只被描述為針對(duì)非自身抗原的佐劑;例如用于細(xì)菌或病毒疫苗中的佐劑。皂苷類(lèi)作為用于殺傷腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒素類(lèi)的用途已由Bachran,C.等人 (Medicinal Chemistry 8 :575_584 (2008))描述。在 PCT 申請(qǐng) WO 2008/063129 中描述了含脂質(zhì)顆粒中的皂苷類(lèi)作為細(xì)胞毒素用于殺傷腫瘤細(xì)胞的用途。然而在本發(fā)明中,它們的細(xì)胞毒性效應(yīng)是無(wú)關(guān)的,因?yàn)樵碥帐桥c已在腫瘤破壞的過(guò)程中被殺死的細(xì)胞組合使用。由于它們的細(xì)胞毒性效應(yīng)不起作用,因此預(yù)期無(wú)論如何不存在對(duì)已破壞的腫瘤的效應(yīng)。此外皂苷類(lèi)在化學(xué)療法中的細(xì)胞毒性效應(yīng)只在施用的時(shí)刻才起作用。它們不建立免疫應(yīng)答,從而它們對(duì)暫時(shí)具有低代謝活性的轉(zhuǎn)移細(xì)胞(潛伏細(xì)胞) 不起作用。皂苷類(lèi)在原位腫瘤破壞后誘導(dǎo)對(duì)腫瘤特異性自身抗原的免疫應(yīng)答的作用迄今未知并且可能因上述原因而未曾預(yù)料到。因此,本發(fā)明的第一實(shí)施方案涉及用于原位腫瘤破壞療法的藥物組合物,所述療法包括腫瘤破壞和施用免疫刺激量的免疫增強(qiáng)劑的步驟,其中所述免疫增強(qiáng)劑是皂苷。皂苷基本上是一組植物糖苷類(lèi)(glycosides)的通用名稱(chēng),其中皂樹(shù)(Quillaja saponaria)皂苷是最早和最頻繁使用的。粗制皂苷實(shí)際上是皂苷類(lèi)的混合物,它們共有相同的基本結(jié)構(gòu)但具有不同側(cè)鏈。 不同的皂苷成分主要在于它們的親水性/疏水性程度有差別。HPLC是檢測(cè)和從粗制皂苷混合物分離不同皂苷成分的優(yōu)選方法。幾種純化的提取物例如QS-7、-17、-18、-21、GPI-0100、QuilA, Qvac和BioQ可從不同來(lái)源商購(gòu)獲得。優(yōu)選地,皂苷包含下列成分的至少一種QS_7、QS-17、QS-18或QS-21。也優(yōu)選的皂苷類(lèi)是QuilA 和其成分 Vax Sap、SuperSap、GPI_0100、QP UF 1000 等。因此,該實(shí)施方案的優(yōu)選形式涉及根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物,其中皂苷包含至少一種下列成分QS_7、QS-17、QS-18、QS-21, QuilA、VaxSap, SuperSap, GPI-0100 或 QP UF 1000。皂苷的另一種有吸引力的免疫刺激形式是所謂的空免疫刺激復(fù)合物(empty immune stimulating complex,空ISCOMS)??彰庖叽碳?fù)合物制劑與皂苷的不同在于它們由皂苷、脂質(zhì)和膽固醇的混合物制成。在其制備過(guò)程中,形成甚至比皂苷本身更具有免疫增強(qiáng)作用的小膠束樣顆粒。 因此,本實(shí)施方案的另一個(gè)優(yōu)選形式涉及根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物,在所述藥物組合物中皂苷以空免疫刺激復(fù)合物的形式存在。不用說(shuō)本發(fā)明同樣適用于人和獸醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。鑒于皂苷類(lèi)和CpG ODNs的作用的不同模式,人們會(huì)預(yù)期兩者的組合施用無(wú)任何增強(qiáng)作用。然而,令人驚訝地發(fā)現(xiàn)皂苷和CpG ODN的組合使用存在強(qiáng)協(xié)同作用。這種預(yù)料之外的協(xié)同作用是有利的,因?yàn)檫@使得當(dāng)與皂苷組合施用時(shí),有可能使用亞標(biāo)準(zhǔn)量的CpG ODN0這反過(guò)來(lái)將明顯地減少上文提及的CpG ODN使用的不利方面。就此而論,只要將它們與皂苷組合提供,CpG ODN的使用將再次變得引人注目。在US專(zhuān)利US 7049302中皂苷與CpG組合的使用已被描述為用于誘導(dǎo)針對(duì)非自身抗原的免疫應(yīng)答的佐劑,但因上述原因,并不可能預(yù)料到針對(duì)自身抗原的組合效應(yīng),更不必說(shuō)協(xié)同效應(yīng)。因此,本實(shí)施方案的更優(yōu)選形式涉及此外還包含CpG ODN的根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物。自1994年(美國(guó)專(zhuān)利US6429199)以來(lái)已描述了用于免疫刺激的CpGODN。CpG 基序基本上具有結(jié)構(gòu)5' -X1-C-PG-X2-S ‘。已知CpG基序5' -Pu-Pu-CpG-Pyr-Pyr是
(Scheule, R. K. , Advanced Drug Delivery Reviews 44 119-134(2000))。它們的長(zhǎng)度基本為8至80個(gè)堿基,并且它們包含至少一個(gè)非甲基化的 CpG基序。經(jīng)常在不同動(dòng)物物種中看到小的效率差異。僅作為示例,人TLR9最優(yōu)地利用CpG 基序G-T-CpG-T-T來(lái)觸發(fā),然而小鼠TLR9最好利用G-A-CpG-T-T來(lái)觸發(fā)(Krieg,Α. Μ., Nature Medicine 9:831—835(2003)。7個(gè)獸醫(yī)和3個(gè)實(shí)驗(yàn)室物種的最佳CpG基序已由Rankin,R.等人在Antisense and Nucleic Acid Drug Development 11:333-340(2001)中進(jìn)行了描述。有效地刺激犬科和貓科動(dòng)物免疫細(xì)胞增殖的CpG基序由Wernette,CM.,等人在Veterinary Immunol. And Immunopath. 84 223-236 (2002)中進(jìn)行了描述。CpG基序在家禽中的應(yīng)用已由Ameiss, K. A.,等人在 Veterinary Immunol. And Immunopath. 110 257-267 (2006)中進(jìn)行了描述。具有不同CpG基序的CpG ODN可容易地商購(gòu)獲得,并且必要時(shí)可容易地合成它們。 可在上述出版物和實(shí)施例部分中查找到CpG ODN的適當(dāng)用量。再次地,如上文中所提及的,不用說(shuō)本發(fā)明同樣地適用于人和獸醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,雖然最好(然而非強(qiáng)制性的)還是將使用的CpG基序與本發(fā)明應(yīng)用的動(dòng)物物種匹配。這可基于上文中概述的出版物容易地進(jìn)行。原則上,可在不同的時(shí)刻或同時(shí)進(jìn)行腫瘤破壞和免疫增強(qiáng)劑的施用的步驟。然而理論上,預(yù)期在應(yīng)用腫瘤破壞之前數(shù)天或更好地一周或甚至兩周或更多周用所述免疫增強(qiáng)劑條件化腫瘤(目的在于“引發(fā)”免疫系統(tǒng))將是優(yōu)選途徑。然而令人驚訝地發(fā)現(xiàn),如果在腫瘤破壞后進(jìn)行免疫增強(qiáng)劑的施用,并且在腫瘤破壞后數(shù)天內(nèi),優(yōu)選在腫瘤破壞后一天內(nèi),更優(yōu)選12小時(shí)內(nèi),甚至更優(yōu)選6小時(shí)內(nèi),更優(yōu)選2 小時(shí)內(nèi)進(jìn)行施用,則免疫刺激的水平好于以相反的的順序進(jìn)行各步驟時(shí)產(chǎn)生的水平。
當(dāng)在腫瘤破壞之前約2小時(shí)至破壞時(shí)刻之間進(jìn)行免疫增強(qiáng)劑的施用時(shí),也獲得非常好的結(jié)果。這是因?yàn)樵谄茐暮?,贅生腫塊可能因破壞誘導(dǎo)的其結(jié)構(gòu)的改變而更難以接近或進(jìn)入。在腫瘤破壞前2小時(shí)至腫瘤破壞后2小時(shí)之間的間隔中施用疫增強(qiáng)劑被稱(chēng)為圍手 T^iTOfe用(peri-operative administration)。因此,本實(shí)施方案的一個(gè)優(yōu)選形式涉及用于原位腫瘤破壞療法的藥物組合物,所述療法包括腫瘤破壞和施用根據(jù)本發(fā)明的腫瘤增強(qiáng)劑的步驟,其中所述步驟按下列順序進(jìn)行a.腫瘤的破壞b.免疫增強(qiáng)劑的施用。本實(shí)施方案的更優(yōu)選形式涉及按上述順序進(jìn)行的步驟,其中按優(yōu)先次序,在腫瘤破壞后24小時(shí)、12小時(shí)或甚至6小時(shí)內(nèi)施用免疫增強(qiáng)劑。同樣地,本實(shí)施方案的另一個(gè)優(yōu)選形式涉及用于原位腫瘤破壞療法的藥物組合物,所述療法包括腫瘤破壞和施用根據(jù)本發(fā)明的免疫增強(qiáng)劑的步驟,其中所述步驟是a.免疫增強(qiáng)劑的圍手術(shù)期施用;b.腫瘤的破壞。關(guān)于免疫增強(qiáng)劑的施用部位,應(yīng)當(dāng)進(jìn)行下列考慮優(yōu)選,將免疫增強(qiáng)劑直接施用入贅生性腫塊。雖然稍微次優(yōu)選,但其中在一個(gè)或多個(gè)圍繞贅生性腫塊位置施用免疫增強(qiáng)劑的腫瘤旁施用也是可能的。另一個(gè)(雖然次優(yōu)選的)施用是在贅生性腫塊的引流區(qū)域的皮下施用。最后,靜脈內(nèi)施用(優(yōu)選靠近贅生性腫塊的位置)是可能的。因此,按遞增的優(yōu)先次序,通過(guò)靜脈內(nèi)施用、贅生性腫塊的引流區(qū)中的皮下施用、 腫瘤旁施用或瘤內(nèi)施用來(lái)進(jìn)行免疫增強(qiáng)劑的所述施用。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物在制備用于治療患癌癥的哺乳動(dòng)物的藥劑中的用途,其中所述哺乳動(dòng)物已經(jīng)歷腫瘤破壞。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物在制備用于圍手術(shù)期施用的藥劑中的用途,所述藥劑用于治療患癌癥的哺乳動(dòng)物,其中所述哺乳動(dòng)物將經(jīng)歷或已經(jīng)歷腫瘤破壞。
實(shí)施例實(shí)施例1小鼠和腫瘤細(xì)胞C57BL/6n 小鼠(6 至 8 周齡)購(gòu)自 Charles River Wiga (Sulzfeld, Germany)并且將其在中心動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室(Nijmegen,The Netherlands)中在無(wú)特定病原體屏障(barrier) 的條件下喂養(yǎng)。隨意提供飲水和標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室食物丸劑,使動(dòng)物在隨機(jī)分配至特定處理組之前安置至少1周。根據(jù)Mjmegen動(dòng)物實(shí)驗(yàn)委員會(huì)的動(dòng)物飼養(yǎng)指南進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將鼠黑色素瘤細(xì)胞系B16F10(ATCC)培養(yǎng)在完全培養(yǎng)基(MEM,5 %牛血清白蛋白 (Greiner Bio-one),100U/ml 青霉素 G 鈉和 100 μ g/ml 鏈霉素(Pen/Strep)、MEM 丙酮酸鈉(ImM)、NaHC03、MEM維生素、MEM非必需氨基酸(全部來(lái)自Gibco) ,20 μ M β -巰基乙醇(β -ME))中。 腫瘤模型和冷凍手術(shù)將腫瘤細(xì)胞懸浮于PBS和基質(zhì)膠(2 1)的混合物中,在右股骨皮下注射50μ1 總體積的0.5*106個(gè)細(xì)胞。在腫瘤直徑測(cè)量為6至8mm(通常在第9至10天)時(shí),將其隨機(jī)分配至處理組。在異氟烷/02/N20麻醉下,使用其尖端通過(guò)持續(xù)的循環(huán)液氮流冷卻的液氮冷凍消融術(shù)系統(tǒng)(CS76,F(xiàn)rigitronics,Shelton,CT)進(jìn)行冷凍消融術(shù)(Cryo)。在2個(gè)冷凍和消融處理循環(huán)中,肉眼可見(jiàn)地冷凍腫瘤,同時(shí)使周?chē)】到M織保持完整。為了監(jiān)控長(zhǎng)效腫瘤保護(hù)的誘導(dǎo),在冷凍消融術(shù)后40天,用15*103個(gè)B160VA或B16F10細(xì)胞再攻擊小鼠。在右肋腹于100 μ 1 PBS中皮下注射再攻擊劑。當(dāng)腫瘤體積超過(guò)IOOOmm3或當(dāng)腫瘤突破皮膚屏障時(shí),處死小鼠。佐劑注射具有完全硫代磷酸酯修飾主鏈的CpG 1668 (‘ 5-TCCATGACGTTCCTGATGCT-S ‘)購(gòu)自Sigma Genosys (Haverhill,UK)。將CpG于PBS中在腫瘤旁(p. t.,在消融的腫瘤側(cè),30 μ g 分成2次10 μ 1的注射)注射。使用下列佐劑(全部由Intervet BV, Boxmeer提供)基于礦物油(Marcol 52)的油包水乳劑(1)和基于非礦物油(Miglyol 840)的油包水乳劑(1); 使用礦物油的水包油乳劑,使用角鯊烯的油包水乳劑(2);和使用醋酸維生素E的水包油乳劑(3) ;Matrix C 750 μ g/ml (Isconova) ;Quil A 皂苷(Brenntag) 500 μ g/ml ;氫氧化鋁 (Brenntag)0. 75% (w/v);或磷酸鋁(Brenntag)0. 75% (w/v)。在本論文中,將兩種油包水乳劑以1 1的比率混合,將3種水包油乳劑以1 1 1的比率混合。將基于鋁的佐劑以 1 1的比率混合使用,但也分開(kāi)使用。腫瘤旁注射(40μ1分2次20μ1的注射,空間上與 CpG-ODN注射分開(kāi))全部非微生物佐劑(或它們的混合物)。在消融后30分鐘內(nèi)進(jìn)行所有注身寸。(1 Jansen 等人,Vaccine, 23,1053-1060, 2005, 2 :0' Hagan Expert Re. Vaccines, 6, 669-710, 2007, 3 :Ri jke 等人,in Adv. Avian Immunol. Res. Eds. T. F. Davison, N. Bumstead 和 P. Kaiser 265-271,1995)。統(tǒng)計(jì)分析使用log rank test分析卡普蘭-邁耶存活曲線(xiàn)。結(jié)果如從
圖1的圖表明確地得出的,腫瘤破壞與作為免疫增強(qiáng)劑的CpGODN的施用的組合導(dǎo)致在80天后不足50%的存活率。此外,不存在存活曲線(xiàn)的顯著變平(圖la)。聯(lián)合腫瘤破壞與施用作為免疫增強(qiáng)劑的水包油、油包水或AlOH佐劑都導(dǎo)致更小的保護(hù)作用(圖Ib和Ic)。然而,聯(lián)合腫瘤破壞與皂苷(無(wú)論其以QuilA的形式還是作為空免疫刺激復(fù)合物) 作為免疫增強(qiáng)劑的施用都導(dǎo)致在80天后超過(guò)75%的令人印象深刻的存活率。此外,在該情況下存在存活曲線(xiàn)的顯著變平(圖Ic)。聯(lián)合腫瘤破壞與CpG和皂苷(無(wú)論其以QuilA的形式還是作為空免疫刺激復(fù)合物)作為免疫增強(qiáng)劑的組合施用都導(dǎo)致在80天后超過(guò)90%的甚至更高存活率和非常強(qiáng)的存活曲線(xiàn)變平(圖Id)。圖例說(shuō)明圖1.消融術(shù)聯(lián)合基于CpG-ODN和皂苷的佐劑后有效力的抗腫瘤免疫。單獨(dú)地,與CpG組合地,或與指定的非微生物佐劑組合地使用冷凍消融術(shù)處理右股上建立的B16F10腫瘤。40天后,天然小鼠和無(wú)腫瘤小鼠在肋腹上接受利用腫瘤細(xì)胞(15.000個(gè)機(jī)6 10細(xì)胞) 的皮下再攻擊。每2至4天一次監(jiān)控腫瘤的大小。(A)顯示在單獨(dú)的消融術(shù),或與CpG-ODN組合的消融術(shù)后阻止腫瘤向外生長(zhǎng)的有限保護(hù)作用的卡普蘭_邁耶存活曲線(xiàn)。(B)顯示在單獨(dú)的消融術(shù),或與混合的水包油、油包水或鋁佐劑組合的消融術(shù)后防止腫瘤向外生長(zhǎng)的有限保護(hù)作用或無(wú)該保護(hù)作用的存活曲線(xiàn)。(C)顯示在單獨(dú)地,或與指定的(混合的)佐劑組合的消融術(shù)后免受腫瘤向外生長(zhǎng)的相對(duì)保護(hù)作用的存活曲線(xiàn)?;谠碥盏淖魟╋@示最有力的保護(hù)作用。(D)顯示當(dāng)將消融術(shù)與基于皂苷的佐劑的聯(lián)用與CpG-ODN共施用組合時(shí)額外的保護(hù)作用的存活曲線(xiàn)。* = ρ < 0. 05,與冷凍消融術(shù)相比較,** = ρ < 0. 001,與cryo/CpG相比較。在3個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)中獲得可比數(shù)據(jù)。
權(quán)利要求
1.用于原位腫瘤破壞療法的藥物組合物,所述療法包括腫瘤破壞和施用免疫刺激量的免疫增強(qiáng)劑的步驟,其特征在于所述免疫增強(qiáng)劑是皂苷。
2.權(quán)利要求1的藥物組合物,其特征在于所述皂苷包含至少一種下列成分QS-7、 QS-17、QS-18、QS-21、QuilA、Vax Sap、SuperSap、GPI-0100 或 QP UF 1000。
3.權(quán)利要求1的藥物組合物,其特征在于皂苷以空免疫刺激復(fù)合物的形式存在。
4.權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)的藥物組合物,其特征在于其還包含CpGODN。
5.用于原位腫瘤破壞療法的藥物組合物,所述療法包括腫瘤破壞和施用權(quán)利要求1至 4中任一項(xiàng)的免疫增強(qiáng)劑的步驟,其特征在于所述步驟以下列順序進(jìn)行a.腫瘤的破壞;b.免疫增強(qiáng)劑的施用。
6.權(quán)利要求5的藥物組合物,其特征在于在腫瘤破壞后M小時(shí)內(nèi)進(jìn)行免疫增強(qiáng)劑的所述施用步驟。
7.權(quán)利要求5的藥物組合物,其特征在于在腫瘤破壞后12小時(shí)內(nèi)進(jìn)行免疫增強(qiáng)劑的所述施用步驟。
8.權(quán)利要求5的藥物組合物,其特征在于在腫瘤破壞后6小時(shí)內(nèi)進(jìn)行免疫增強(qiáng)劑的所述施用步驟。
9.用于原位腫瘤破壞療法的藥物組合物,所述療法包括腫瘤破壞和施用權(quán)利要求1至 4的免疫增強(qiáng)劑的步驟,其特征在于所述步驟為a.免疫增強(qiáng)劑的圍手術(shù)期施用;b.腫瘤的破壞。
10.權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)的藥物組合物,其中免疫增強(qiáng)劑的施用的位置按遞增的優(yōu)先次序?yàn)殪o脈內(nèi)、贅生腫塊的引流區(qū)中的皮下、腫瘤旁或腫瘤內(nèi)。
11.權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)的藥物組合物在制備用于治療患癌癥的哺乳動(dòng)物的藥劑中的用途,其中所述哺乳動(dòng)物已經(jīng)歷腫瘤破壞。
12.權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)的藥物組合物在制備用于圍手術(shù)期施用的藥劑中的用途, 所述藥劑用于治療患癌癥的哺乳動(dòng)物,其中所述哺乳動(dòng)物將要或已經(jīng)經(jīng)歷腫瘤破壞。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于原位腫瘤破壞療法的藥物組合物,所述療法包括腫瘤破壞和施用免疫刺激量的免疫增強(qiáng)劑的步驟,以及涉及此類(lèi)藥物組合物在藥劑制造中的用途。
文檔編號(hào)A61K39/39GK102264373SQ200980151731
公開(kāi)日2011年11月30日 申請(qǐng)日期2009年12月22日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月23日
發(fā)明者C·C·斯徹厄, D·M·布洛克, G·阿德瑪, S·尼爾肯斯, T·J·M·魯爾斯 申請(qǐng)人:天主教大學(xué)基金會(huì),圣拉寶醫(yī)學(xué)中心大學(xué), 英特威國(guó)際有限公司