專利名稱：益腎糖漿的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及中藥的檢測方法，尤其是一種益腎糖漿的質(zhì)量控 制方法。
背景技術(shù)：
益腎糖漿的主要成分為枸杞子、五味子、覆盆子、菟絲子、車前子，制備方法為 以上五味，加水煎煮兩次，每次1. 5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1. 15 1.20，加入95%乙醇至含醇為70 75%，攪勻，靜置，吸取上清液濃縮至相對密度為 1. 20 1. 25(60士5°C )加入適量蒸餾水，混勻，靜置，濾過，濾液加入單糖漿(按應(yīng)出液數(shù) IOOOml的20%)、苯甲酸鈉(按應(yīng)出液數(shù)的0.3%，并用水溶解)混勻，調(diào)整容量，測定相對 密度，靜置，吸取上清液，灌裝，即得，每支裝IOmlUOOml或120ml。功能與主治填精補髓，益腎扶陽，用于身體虛弱，腎虧陽痿，夢遺滑精，尿液渾濁。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，提供一種能夠定性檢測藥物成分的 益腎糖漿的質(zhì)量控制方法，本方法具有檢測手段簡單、檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確的特點。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的一種益腎糖漿的質(zhì)量控制方法，其方法的步驟是(1)以枸杞子為對照藥材，薄層色譜法鑒別益腎糖漿中的枸杞子成分；(2)以五味子甲素為對照品，以五味子為對照藥材，薄層色譜法鑒別益腎糖漿中的 五味子成分；(5)正丁醇提取物含量的測定。而且，所述枸杞子的薄層鑒別的方法為 ①對照藥材溶液的制備取枸杞子對照藥材，加水，加熱煮沸，放冷濾過，濾液用乙 酸乙酯振搖提取，提取液濃縮至1ml，作為對照藥材溶液；②供試品溶液的制備取益腎糖漿樣品，加入正丁醇提取合并提取液，濃縮至 lml，作為供試品溶液；③薄層層析試驗吸取上述溶液各5ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合 劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯氯仿甲酸=3 2 1為展開劑，展開，取出，晾干， 置365nm紫外光燈下檢視，檢視供試品色譜中在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上是否顯相同 的藍色熒光斑點，確定供試品中是否含有枸杞子成分。而且，所述五味子的薄層鑒別的方法為①對照品溶液的制備取五味子甲素樣品，加入氯仿溶解，制成每Iml含Img的溶 液，作為對照品溶液；②對照藥材溶液的制備取五味子對照藥材lg，加三氯甲烷20ml，加熱回流30分 鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，作為對照藥材溶液；
③供試品溶液的制備取益腎糖漿樣品，加入三氯甲烷20ml，振搖提取lh，提取液 濃縮至Iml ；④薄層層析試驗吸取上述溶液各5μ 1，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合 劑的硅膠G薄層板上，以石油醚甲酸乙酯甲酸=15 5 1的上層溶液為展開劑，展 開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視，檢視供試品色譜中在與對照品及對照藥材色譜 相應(yīng)的位置上是否均顯污綠色的熒光斑點，確定樣品中是否含有五味子成分。而且，所述正丁醇提取物含量的測定方法為精密量取益腎糖漿樣品20ml，用水飽和的正丁醇提取，合并正丁醇液，置已干燥至 恒重的蒸發(fā)皿中，蒸干，置105°C干燥5小時，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速稱定重量，計 算，即得，益腎糖漿樣品含正丁醇提取物不得少于樣品的2.2%。本發(fā)明的優(yōu)點和積極效果是本發(fā)明對益腎糖漿質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進行了提高、完善，針對枸杞子和五味子進行了薄層 鑒別方法實驗，并且對其他成分加以檢測實驗，根據(jù)實驗效果將枸杞子和五味子納入到質(zhì) 量控制的方法之中，修訂后的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，提高了藥品的質(zhì)量控制，使藥品的定性和定量檢測 更加準(zhǔn)確，質(zhì)量更加容易控制。


圖1為本發(fā)明枸杞子薄層色譜鑒別的色譜圖，從左至右依次為1、2、3為益腎糖漿 三批供試品(批號分別為0512131、0510130、0504107)、4、枸杞子對照藥材，5、枸杞子陰性
樣品；圖2為本發(fā)明五味子薄層色譜鑒別的色譜圖，從左至右依次為1、2、3為益腎糖漿 三批供試品(批號分別為0512131、0510130、0504107)、4、五味子甲素對照品，5、五味子對 照藥材，6、五味子陰性樣品；圖3為本發(fā)明菟絲子薄層色譜鑒別的色譜圖，從左至右依次為其中1、4、5為益 腎糖漿樣品批號0512131 (不同點樣量2 μ 1、5 μ 1、10 μ 1)，2、菟絲子藥材，3、菟絲子陰性樣
P
m ；圖4為本發(fā)明菟絲子薄層色譜鑒別的色譜圖，從左至右依次為1、4、5三批樣品 (批號0512131 0510130 0504107)，2、菟絲子藥材，3、菟絲子陰性樣品;圖5為本發(fā)明菟絲子薄層色譜鑒別的色譜圖，從左至右依次為1、2、3三批樣品 (批號0504107 0510130 0512131)，4、菟絲子藥材，5、菟絲子陰性樣品。圖6為本發(fā)明枸杞子薄層色譜鑒別的色譜圖，從左至右依次為1、甜菜堿對照品， 2、3、4、分別為益腎糖漿樣品(批號0504107 0510130 0512131)，5、枸杞子陰性樣品。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例，對本發(fā)明進一步說明，下述實施例是說明性的，不是限定性的， 不能以下述實施例來限定本發(fā)明的保護范圍。一種益腎糖漿的質(zhì)量控制方法，其方法的步驟是(1)枸杞子的薄層鑒別①對照藥材溶液的制備取枸杞子對照藥材2g，加水35ml，加熱煮沸15分鐘，放冷濾過，濾液用乙酸乙酯15ml振搖提取20分鐘，提取液濃縮至約1ml，作為對照藥材溶液。②供試品溶液的制備取益腎糖漿樣品20ml，加入正丁醇提取3次，每次20ml，合 并提取液，濃縮至約1ml，作為供試品溶液。③陰性樣品溶液的制備按原藥制備工藝制成枸杞子陰性樣品，按照供試品溶液 制備方法制備陰性樣品溶液。④薄層層析試驗照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)實驗，吸取 上述溶液各5ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙 酯氯仿甲酸=3 2 1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試 品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同的藍色熒光斑點，而陰性樣品無此斑點， 結(jié)果見照片1。試驗結(jié)果該法專屬性強、重現(xiàn)性好，斑點顯色清晰，易判斷，故將此法納入 標(biāo)準(zhǔn)中。(2)五味子的薄層鑒別①對照品溶液的制備取五味子甲素適量，加入氯仿溶解，制成每Iml含Img的溶 液，作為對照品溶液。②對照藥材溶液的制備取五味子對照藥材lg，加三氯甲烷20ml，加熱回流30分 鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，作為對照藥材溶液。③供試品溶液的制備取益腎糖漿樣品20ml，加入三氯甲烷20ml，振搖提取lh，提 取液濃縮至1ml。④陰性樣品溶液的制備按原藥制備工藝制成五味子陰性樣品，照供試品溶液制 備方法制備陰性樣品溶液。(5)薄層層析試驗照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)，吸取上 述溶液各5 μ 1，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚 (30-600C )甲酸乙酯甲酸=15 5 1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置 254nm紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照品及對照藥材色譜相應(yīng)的位置上均顯污綠 色的熒光斑點，而陰性樣品無此斑點，結(jié)果見照片2。以五味子對照藥材及五味子甲素為對照，均可檢出益腎糖漿中的五味子。在實際 操作中以五味子甲素為對照進行檢驗，比較簡便，故在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對五味子的定性鑒別采 用以五味子甲素為對照。經(jīng)試驗，該法重現(xiàn)性好、專屬性強，斑點顯色清晰，易判斷，故將此 法納入標(biāo)準(zhǔn)中。(3)菟絲子的薄層鑒別①按WS3-B-3973-98標(biāo)準(zhǔn)中方法進行薄層試驗，結(jié)果不同點樣量的供試品色譜中 在與菟絲子藥材色譜相應(yīng)的位置上均無明顯的斑點，結(jié)果見照片3。②將WS3-B-3973-98標(biāo)準(zhǔn)中樣品提取溶劑改為正丁醇，按照原方法檢驗，結(jié)果不 同批次的供試品色譜中在與菟絲子藥材色譜相應(yīng)的位置上均無明顯的斑點，結(jié)果見照片4。③將WS3-B-3973-98標(biāo)準(zhǔn)中的展開劑改為環(huán)己烷乙酸乙酯甲酸=5 8 3， 按照原方法檢驗，結(jié)果不同批次的供試品色譜中在與菟絲子藥材色譜相應(yīng)的位置上均無明 顯的斑點，結(jié)果見照片5。④實驗結(jié)論根據(jù)以上試驗，按照WS3-B-3973-98標(biāo)準(zhǔn)中菟絲子薄層鑒別方法無 法檢出樣品中的相應(yīng)斑點，經(jīng)更改提取溶劑及調(diào)整展開劑仍未檢出相應(yīng)斑點，而且2005年版藥典中無菟絲子對照藥材。因此，建議取消該項薄層鑒別。(4)枸杞子(甜菜堿)含量測定枸杞子主要含有多糖類及甜菜堿等成分，因本制劑為糖漿劑，測定多糖類成分有 干擾，所以只對對甜菜堿成分進行測定。根據(jù)中國藥典2005年版及文獻報道，目前其定量 測定方法為薄層掃描法，進行以下試驗。①薄層層析條件展開劑丙酮-無水乙醇鹽酸=10 6 1 ；顯色劑碘化鉍 鉀試液；薄層板硅膠G板，用前放入烘箱105°C活化Ih ；②對照品溶液制備精密稱取在105°C干燥至恒重的鹽酸甜菜堿對照品適量，加 乙醇制成3. 982mg/ml的對照品溶液。③供試品溶液制備精密吸取益腎糖漿樣品20ml，加95%乙醇至糖漿含醇量達到 80%，靜置，濾過，濾液濃縮至約1ml，轉(zhuǎn)入5ml量瓶中，加乙醇稀釋至刻度。④試驗精密吸取上述溶液各5 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，展開約10cm， 取出，晾干，噴顯色劑，結(jié)果見照片6。⑤檢測結(jié)果甜菜堿對照品溶液在薄層板上顯橘紅色斑痕，而樣品顯陰性反應(yīng)，說 明供試品中無甜菜堿成分，故甜菜堿薄層掃描實驗不能進行。(5)正丁醇提取物精密量取益腎糖漿樣品20ml，用水飽和的正丁醇提取5次 (30ml，20ml，20ml，20ml，20ml)，合并正丁醇液，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，蒸干，置105°C 干燥5小時，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速稱定重量，計算，即得。為考察各次正丁醇的提取量，以便確定提取次數(shù)，將1、2、3次正丁醇提取液合并， 第4、5、6次提取液單獨放置，分別置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，按上述方法操作，結(jié)果見下 表。表1正丁醇提取物試驗結(jié)果
提取次數(shù)，取物重(g)2提取物平均含量(％)第1、2、3次提取0.628540.639203.1694第4次提取0.103260.080200.4587第5次提取0.059170.059780.2974
第6次提取0.011350.008540.0497由上述試驗結(jié)果看出，第6次提取物百分含量很少，僅0. 497%，可忽略。故本試驗 只需提取5次即可。依上述方法對9批不同時間生產(chǎn)的益腎糖漿留樣觀察樣品做正丁醇提取物測定， 結(jié)果如下。表2正丁醇提取物試驗結(jié)果(n = 2)
權(quán)利要求
1.一種益腎糖漿的質(zhì)量控制方法，其特征在于其方法的步驟是(1)以枸杞子為對照藥材，薄層色譜法鑒別益腎糖漿中的枸杞子成分；(2)以五味子甲素為對照品，以五味子為對照藥材，薄層色譜法鑒別益腎糖漿中的五味 子成分；(5)正丁醇提取物含量的測定。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的益腎糖漿的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述枸杞子的薄層 鑒別的方法為①對照藥材溶液的制備取枸杞子對照藥材，加水，加熱煮沸，放冷濾過，濾液用乙酸乙 酯振搖提取，提取液濃縮至1ml，作為對照藥材溶液；②供試品溶液的制備取益腎糖漿樣品，加入正丁醇提取合并提取液，濃縮至1ml，作 為供試品溶液；③薄層層析試驗吸取上述溶液各5ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的 硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯氯仿甲酸=3 2 1為展開劑，展開，取出，晾干，置 365nm紫外光燈下檢視，檢視供試品色譜中在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上是否顯相同的 藍色熒光斑點，確定供試品中是否含有枸杞子成分。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的益腎糖漿的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述五味子的薄層 鑒別的方法為①對照品溶液的制備取五味子甲素樣品，加入氯仿溶解，制成每Iml含Img的溶液，作 為對照品溶液；②對照藥材溶液的制備取五味子對照藥材lg，加三氯甲烷20ml，加熱回流30分鐘，濾 過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，作為對照藥材溶液；③供試品溶液的制備取益腎糖漿樣品，加入三氯甲烷20ml，振搖提取lh，提取液濃縮 至 Iml ；④薄層層析試驗吸取上述溶液各5μ1，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的 硅膠G薄層板上，以石油醚甲酸乙酯甲酸=15 5 1的上層溶液為展開劑，展開，取 出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視，檢視供試品色譜中在與對照品及對照藥材色譜相應(yīng)的 位置上是否均顯污綠色的熒光斑點，確定樣品中是否含有五味子成分。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的益腎糖漿的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述正丁醇提取物 含量的測定方法為精密量取益腎糖漿樣品20ml，用水飽和的正丁醇提取，合并正丁醇液，置已干燥至恒重 的蒸發(fā)皿中，蒸干，置105°C干燥5小時，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速稱定重量，計算， 即得，益腎糖漿樣品含正丁醇提取物不得少于樣品的2. 2%。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種益腎糖漿的質(zhì)量控制方法，步驟是薄層色譜法鑒別枸杞子、五味子成分，再進行正丁醇提取物含量的測定。本發(fā)明對益腎糖漿質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進行了提高、完善，針對枸杞子和五味子進行了薄層鑒別方法實驗，并且對其他成分加以檢測實驗，根據(jù)實驗效果將枸杞子和五味子納入到質(zhì)量控制的方法之中，修訂后的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，提高了藥品的質(zhì)量控制，使藥品的定性和定量檢測更加準(zhǔn)確，質(zhì)量更加容易控制。
文檔編號A61P15/10GK102139012SQ20101010487
公開日2011年8月3日 申請日期2010年2月3日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月3日
發(fā)明者劉新元, 谷翠麗, 靳學(xué)海, 高學(xué)謙, 高松 申請人:天津中新藥業(yè)集團股份有限公司隆順榕制藥廠