專利名稱：含有羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物的藥物組合物制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥學(xué)領(lǐng)域，尤其涉及以新穎的羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物作為有效成分與藥學(xué)上可接受的藥物載體形成的藥物組合物制劑，以及該藥物組合物制劑在治療肝癌、肺癌及其他腫瘤中應(yīng)用。

背景技術(shù)：
瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)的甲醇提取物顯示了較強(qiáng)的抗癌活性(中華腫瘤雜志1995年1月第17卷第1期)。瑞香狼毒可用于治療腫瘤性疾病，臨床報(bào)道其粗提物對(duì)治療肺癌和肝癌等有效。馮威健等以小鼠白血病為活性指標(biāo)，對(duì)瑞香狼毒進(jìn)行了分離提取，得到了一種二萜活性成份，其中尼地嗎琳具有較強(qiáng)的抗癌作用，其結(jié)構(gòu)為
尼地嗎琳對(duì)常規(guī)使用的L-1210腹水型及實(shí)體瘤Lewis肺癌、B-16和結(jié)腸癌26顯示較強(qiáng)的抗癌活性，尼地嗎琳對(duì)體外培養(yǎng)的人白血病和胃癌具有明顯的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用和克隆形成抑制作用，對(duì)小鼠體內(nèi)體外抗癌活性均較強(qiáng)，表明其抗癌機(jī)制是通過(guò)對(duì)癌細(xì)胞的直接作用而發(fā)揮的。
但尼地嗎琳的腹腔給藥劑量超過(guò)0.05mg/kg時(shí)即出現(xiàn)毒性反應(yīng)，說(shuō)明其活性劑量與毒性劑量比較接近，治療窗非常窄，臨床應(yīng)用安全性較差，對(duì)其它腫瘤細(xì)胞的抑制作用不明顯。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)尼地嗎啉治療窗非常窄，臨床應(yīng)用安全性較差等技術(shù)問(wèn)題，對(duì)尼地嗎啉的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾得到羥地嗎啉，經(jīng)過(guò)對(duì)羥地嗎啉的安全性和有效性研究，均好于尼地嗎啉，且抑瘤譜較尼地嗎啉廣、溶解度明顯增加。從而提出一種新穎的以羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物作為有效成分與藥學(xué)上可接受的藥物載體形成藥物組合物制劑，該藥物制劑可用于肺癌、肝癌及其他腫瘤的治療。
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是通過(guò)以下的技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的將具有通式(I)結(jié)構(gòu)的羥地嗎啉或羥地嗎啉與不同堿基形成的具有通式(II)結(jié)構(gòu)的羥地嗎啉藥用復(fù)合物作為有效成分和藥學(xué)上可以接受的藥物載體混合制成藥物組合物制劑。


通式(II)中，B表示C1-C8的含氮有機(jī)堿或氨基酸。
所述的藥學(xué)上可接受的藥物載體是指藥學(xué)領(lǐng)域的藥物載體，藥物載體選自稀釋劑；賦形劑；水；填充劑如淀粉、蔗糖、乳糖和/或微晶纖維素；崩解劑如羥甲基淀粉鈉、羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素、瓊脂、碳酸鈣和/或碳酸氫鈉；粘合劑如纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠和/或聚乙烯吡咯烷酮；潤(rùn)濕劑如吐溫和/或甘油；表面活性劑如十六烷醇和/或十二烷基硫酸鈉；吸附載體如高嶺土和/或皂粘土；潤(rùn)滑劑如滑石粉、硬脂酸鈣或鎂、微粉硅膠和/或聚乙二醇；增溶劑如聚氧乙烯醚蓖麻油，吐溫和/或普流羅尼F-68；助溶劑如精氨酸、葡甲胺、二乙胺、乙二胺、尿素、煙酰胺、脯氨酸、葡萄糖和/或枸櫞酸及其鈉鹽。另外還可以在組合物中加入其它輔劑如香味劑和/或甜味劑等。
本發(fā)明所述的藥物組合物制劑，其劑型可以是藥劑學(xué)上所說(shuō)的任何一種劑型，包括片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、噴霧劑、凝膠劑、凝膠氣霧劑、混懸劑、沖劑、貼劑、軟膏、丸劑、散劑、乳劑、注射劑、輸液劑、凍干注射劑、脂質(zhì)體注射劑，靶向給藥注射劑、栓劑、緩釋制劑和控釋制劑。
本發(fā)明所述的藥物組合物制劑，優(yōu)選的，羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物與填充劑和/或崩解劑組配制成片劑或膠囊劑；或者是羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物與填充劑和/或羥丙甲纖維素組配制成緩釋制劑或者膠囊劑。
本發(fā)明所述的藥物組合物制劑，優(yōu)選的，羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物與填充劑、羥丙甲基纖維酸酯、乙基纖維素、聚乙烯醇、甲基硅樹(shù)脂、羥丙基纖維素、聚乙二醇-600、丙烯酸-甲基丙烯酯樹(shù)脂、乙氧基乙基纖維素、甘油棕櫚酸硬酯酸酯、聚磷酸鈉-脫乙酰殼多糖和/或PEG1500制成緩釋制劑或控釋制劑。
本發(fā)明所述的藥物組合物制劑，優(yōu)選的，羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物與油相如大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油和/或橄欖油混合，制成注射劑或口服乳劑；在所述的油相中還可加入增溶劑或潛溶劑或抗氧劑。
本發(fā)明的藥用組合物制劑可通過(guò)口服或非腸胃給藥的方式施用于需要這種治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成常規(guī)的固體制劑如片劑、膠囊劑、粉劑或顆粒劑等，或制成液體制劑如水溶液或油懸浮劑或其它液體制劑如糖漿、口服液或酏劑等；用于腸胃外給藥時(shí)，可將其制成注射用的溶液、粉劑、水溶液或油性懸浮劑等。優(yōu)選的形式是片劑、包衣片劑、膠囊、顆粒劑、口服液和注射劑。
本發(fā)明中，羥地嗎啉及羥地嗎啉藥用復(fù)合物的制備方法包括以下步驟 1、將瑞香狼毒(Stellera chamaejasma L)干燥根部用有機(jī)溶劑提取，層析分離得到尼地嗎啉(gnidimacrin)；也可直接采用市購(gòu)的尼地嗎啉制備； 2、尼地嗎啉經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾得到羥地嗎啉(qidimacrin) 3、將羥地嗎啉溶解在合適溶劑中，與含氮有機(jī)堿或氨基酸反應(yīng)，將所制得的羥地嗎啉藥用復(fù)合物分離出來(lái)，也可以直接用來(lái)配制制劑。
以下示例性的介紹一種羥地嗎啉的制備方法，但是并不限制羥地嗎啉的制備，本領(lǐng)域的技術(shù)人員按照上述的制備原理，可以對(duì)尼地嗎啉采取不同方法的結(jié)構(gòu)修飾獲得羥地嗎啉，而本發(fā)明的意義也在于通過(guò)對(duì)尼地嗎啉的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾得到羥地嗎啉，經(jīng)過(guò)對(duì)羥地嗎啉的安全性和有效性研究，均好于尼地嗎啉，且抑瘤譜較尼地嗎啉廣、溶解度明顯增加。從而將羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物作為有效成分制備藥物組合物制劑，用于治療肝癌、肺癌及其他腫瘤。
示例性的羥地嗎啉的制備方法如下 1)將尼地嗎啉、加甲醇、三乙胺和水的混合溶液溶解，將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上劇烈攪拌，密閉反應(yīng)體系，在干燥的氮?dú)獗Ｗo(hù)下，70℃下回流20小時(shí)后停止反應(yīng)，將反應(yīng)體系于50℃下減壓濃縮蒸干得到棕黃色初產(chǎn)物，采用硅膠柱層析分離得到中間體1； 2)在中間體1加入四氫呋喃溶劑、乙酸酐和吡啶中，將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上室溫下密閉劇烈攪拌8小時(shí)后停止反應(yīng)。45℃下減壓旋出反應(yīng)瓶中四氫呋喃，加入無(wú)水乙醚，室溫下劇烈攪拌有大量白色固體析出，過(guò)濾干燥后得到中間體2； 3)在中間體2中，加溴化氫乙酸溶液和雙氧水溶液，將反應(yīng)體系密閉，置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上50℃劇烈攪拌2小時(shí)后停止反應(yīng)，反應(yīng)液在50℃下減壓濃縮至油狀棕黃色初產(chǎn)物，加入乙酸乙酯溶解，并用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，分出有機(jī)相用無(wú)水硫酸鎂干燥后濃縮，柱層析硅膠分離得到中間體3； 4)在中間體3中，加入氰化鈉和DMSO溶劑溶解，密閉反應(yīng)體系，在干燥的氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上劇烈攪拌，25℃下反應(yīng)12小時(shí)后停止反應(yīng)，將反應(yīng)液加入乙酸乙酯和水，充分震蕩分層后用分液漏斗分出有機(jī)相，并用去離子水洗有機(jī)相，分出有機(jī)相并用無(wú)水硫酸鎂干燥后，濾液在50℃下減壓濃縮，經(jīng)柱層析硅膠分離得到中間體4； 5)在中間體4中，加入疊氮化鈉、氯化鋅和甲苯溶劑，密閉反應(yīng)體系，在干燥的氮?dú)獗Ｗo(hù)下，滴加鹽酸水溶液，將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上劇烈攪拌，110℃下反應(yīng)8小時(shí)后停止反應(yīng)，將反應(yīng)液在50℃下減壓濃縮，經(jīng)柱層析硅膠分離得到中間體5； 6)在中間體5中，加入二丁基氧化錫和無(wú)水甲醇，密閉反應(yīng)體系，在干燥的氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上劇烈攪拌，70℃下回流8小時(shí)后停止反應(yīng)，將反應(yīng)液在50℃下減壓濃縮，經(jīng)柱層析硅膠分離得到具有通式(I)結(jié)構(gòu)的羥地嗎啉。

本發(fā)明藥用組合物制劑的各種劑型的制備方法是，用羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物為活性成分與以上所述的一種或多種藥學(xué)上可接受的藥物載體混合，然后將其制成所需的劑型。
片劑、膠囊劑、顆粒劑和粉末等的固形制劑中，通?？珊?.1～99％(w/w)的有效成分，優(yōu)選的是0.1～50％(w/w)的有效成分。
除了預(yù)先溶解的注射劑之外，也可作成加有粉末或適當(dāng)?shù)奶砑觿┑脑谑褂脮r(shí)溶解的形態(tài)。這些注射液通?？珊?.01～50％(w/w)的有效成分、優(yōu)選的是0.5～5％(w/w)的有效成分。
另外，經(jīng)口給藥的懸浮劑、糖漿劑等的劑型，通?？珊?.5～10％(w/w)的有效成分。
本發(fā)明化合物優(yōu)選的給藥量，可根據(jù)使用的化合物的種類(lèi)、配合的組合物種類(lèi)、適用頻度和應(yīng)該治療的特定部位、病情的輕重、患者的年齡、醫(yī)生的診斷、腫瘤的種類(lèi)等而變化，但作為大致目標(biāo)，例如每天成人的給藥量，在經(jīng)口給藥時(shí)，可在0.01～200mg范圍內(nèi)，另外，在非經(jīng)口給藥時(shí)，在靜脈注射時(shí)，優(yōu)選的是每天在0.01～50mg范圍內(nèi)。另外，給藥次數(shù)，根據(jù)給藥方法和癥狀而不同，但1天是1～3次。另外，也可使用隔日給藥、隔二日給藥等間歇給藥等給藥方法。

具體實(shí)施例方式 下面的實(shí)施例可以使本專業(yè)技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
實(shí)施例1 羥地嗎啉的制備 羥地嗎啉的結(jié)構(gòu)式如下
制備方法如下 取一個(gè)干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力攪拌棒、尼地嗎啉1.548g(2mmol)、加甲醇∶三乙胺∶水(v∶v∶v)＝5∶1∶1共21ml溶液溶解，將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上劇烈攪拌，密閉反應(yīng)體系，在干燥的氮?dú)獗Ｗo(hù)下，70℃下回流20小時(shí)后停止反應(yīng)，將反應(yīng)體系于50℃下減壓濃縮蒸干得到棕黃色初產(chǎn)物，采用硅膠柱層析分離得到中間體1，共0.46g，收率40.6％，mp 150～152℃。
取一個(gè)干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力攪拌棒、0.452g(0.8mmol)中間體1后，加入四氫呋喃溶劑10ml，乙酸酐1ml，吡啶1ml，將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上室溫下密閉劇烈攪拌8小時(shí)后停止反應(yīng)。45℃下減壓旋出反應(yīng)瓶中四氫呋喃，加入無(wú)水乙醚20ml，室溫下劇烈攪拌有大量白色固體析出，過(guò)濾干燥后得到中間體2，共0.62g，收率95.1％，mp 156～158℃。
取一個(gè)干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力攪拌棒、0.41克(0.5mmol)中間體2，加30％溴化氫乙酸溶液15ml，30％雙氧水溶液2ml，將反應(yīng)體系密閉，置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上50℃劇烈攪拌2小時(shí)后停止反應(yīng)，反應(yīng)液在50℃下減壓濃縮至油狀棕黃色初產(chǎn)物，加入乙酸乙酯30ml溶解，并用飽和碳酸氫鈉水溶液50毫升*3洗滌三次，分出有機(jī)相用無(wú)水硫酸鎂干燥后濃縮，柱層析硅膠分離得到中間體3，共0.30克，收率67.3％。
取一個(gè)干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力攪拌棒、0.27g(0.3mmol)中間體3，加入氰化鈉0.18g(0.36mmol)，加DMSO溶劑5ml溶液溶解，密閉反應(yīng)體系，在干燥的氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上劇烈攪拌，25℃下反應(yīng)12小時(shí)后停止反應(yīng)，將反應(yīng)液加入20ml乙酸乙酯，25ml水，充分震蕩分層后用分液漏斗分出有機(jī)相，并分別用25ml、25ml、10ml去離子水洗有機(jī)相，分出有機(jī)相并用無(wú)水硫酸鎂干燥后，濾液在50℃下減壓濃縮，經(jīng)柱層析硅膠分離得到中間體4，共0.19g，收率72.8％，mp 162～166℃。
取一個(gè)干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力攪拌棒、0.17克(0.2mmol)中間體4、疊氮化鈉0.14g(0.21mmol)、氯化鋅0.27g(0.2mmol)，加入甲苯溶劑20ml后，密閉反應(yīng)體系，在干燥的氮?dú)獗Ｗo(hù)下，滴加30％鹽酸水溶液1毫升，將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上劇烈攪拌，110℃下反應(yīng)8小時(shí)后停止反應(yīng)，將反應(yīng)液在50℃下減壓濃縮，經(jīng)柱層析硅膠分離得到中間體5，共0.16g，收率87.6％，mp 192～194℃。
取一個(gè)干燥的25ml的茄型瓶，加入磁力攪拌棒、0.14g(1.6mmol)中間體5、二丁基氧化錫0.08g，加入無(wú)水甲醇10ml，密閉反應(yīng)體系，在干燥的氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上劇烈攪拌，70℃下回流8小時(shí)后停止反應(yīng)，將反應(yīng)液在50℃下減壓濃縮，經(jīng)柱層析硅膠分離得到羥地嗎啉，共0.04g，收率36.5％，mp 189～191℃。
元素分析實(shí)測(cè)值C，58.52；H，7.66；N，8.66。
分子式(C31H48N4O10)計(jì)算值C，58.48；H，7.60；N，8.80。
質(zhì)譜MS(EI，70ev)m/z(％)637(M+1)。
紅外IR(KBr)cm-13432，3335，3266，2998，1659，1374，1148，856。
核磁共振氫譜1H-NMR(CDCl3)δ15.1(s，1H)，4.59(d，J＝3.0Hz，1H)，4.02-3.86(m，1H)，3.90(d，J＝11Hz，1H)，3.85(d，J＝7.4Hz，1H)，3.81(t，J＝11Hz，1H)，3.76(d，1H)，3.70(d，J＝10.0Hz，1H)，3.65(t，J＝10.0Hz，1H)，3.35(s，1H)，3.22(d，J＝3.0Hz，1H)，3.03(d，J＝12.6Hz，1H)，2.74-2.36(m，4H)，2.66(dd，J＝12.6Hz，1H)，2.42(d，J＝15Hz，1H)，2.33(m，1H)，2.05-1.56(m，18H)，2.01(d，J＝7.4Hz，1H)，1.68(s，3H)，1.64(m，1H)，1.35(d，J＝7.5Hz，3H)，1.16(d，J＝7.5Hz，3H)。
核磁共振氫譜檢測(cè)氫數(shù)為48，核磁共振碳譜檢測(cè)碳數(shù)為31，結(jié)構(gòu)分析與目標(biāo)產(chǎn)物一致。
本實(shí)施例公開(kāi)了一種羥地嗎啉的制備方法，但是并不限制羥地嗎啉的制備，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以根據(jù)羥地嗎啉的結(jié)構(gòu)，通過(guò)對(duì)尼地嗎啉采取不同方法的結(jié)構(gòu)修飾來(lái)獲得具有通式(I)結(jié)構(gòu)的羥地嗎啉，本發(fā)明的意義在于通過(guò)對(duì)尼地嗎啉的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾得到羥地嗎啉，而且經(jīng)過(guò)對(duì)羥地嗎啉的安全性和有效性研究，均好于尼地嗎啉，且抑瘤譜較尼地嗎啉廣、溶解度明顯增加。
實(shí)施例2 羥地嗎啉片劑 配方羥地嗎啉8g 微晶纖維素 30g 乳糖5g 羧甲基淀粉鈉0.5g 滑石粉 0.3g 制備分別取羥地嗎啉、微晶纖維素、乳糖、羧甲基淀粉鈉和滑石粉分別過(guò)100目篩混合均勻，壓片，即得。
實(shí)施例3 羥地嗎啉片劑 配方羥地嗎啉16g 微晶纖維素 35g 乳糖5g 羧甲基淀粉鈉0.5g 滑石粉 0.3g 制備分別取羥地嗎啉、微晶纖維素、乳糖、羧甲基淀粉鈉和滑石粉分別過(guò)100目篩混合均勻，壓片，即得。
實(shí)施例4 羥地嗎啉膠囊 配方羥地嗎啉 8g 微晶纖維素10g 乳糖 30g 羧甲基淀粉鈉 0.5g 2％羥丙基甲基纖維素水溶液 適量 滑石粉0.3g 制備分別取羥地嗎啉、微晶纖維素、乳糖和羧甲基淀粉鈉分別過(guò)100目篩混合均勻，以2％羥丙基甲基纖維素水溶液為粘合劑制軟材，過(guò)20目篩制濕顆粒，制濕顆粒于50～60℃干燥，干顆粒過(guò)20目篩整粒，與滑石粉混勻，裝膠囊，即得。
實(shí)施例5 羥地嗎啉膠囊 配方羥地嗎啉 16g 微晶纖維素35g 乳糖 5g 羧甲基淀粉鈉 0.5g 2％羥丙基甲基纖維素水溶液 適量 滑石粉0.3g 制備分別取羥地嗎啉、微晶纖維素、乳糖和羧甲基淀粉鈉分別過(guò)100目篩混合均勻，以2％羥丙基甲基纖維素水溶液為粘合劑制軟材，過(guò)20目篩制濕顆粒，制濕顆粒于50～60℃干燥，干顆粒過(guò)20目篩整粒，與滑石粉混勻，裝膠囊，即得。
實(shí)施例6 羥地嗎啉緩釋制劑 配方羥地嗎啉 16g 羥丙基甲基纖維素K15M 20g 羥丙基甲基纖維素K4M 10g 微晶纖維素5g 2％羥丙基甲基纖維素水溶液 適量 滑石粉0.3g 制備分別取羥地嗎啉、羥丙基甲基纖維素K15M、羥丙基甲基纖維素K4M、微晶纖維素分別過(guò)100目篩混合均勻，以2％羥丙基甲基纖維素水溶液為粘合劑制軟材，過(guò)20目篩制濕顆粒，制濕顆粒于50～60℃干燥，干顆粒過(guò)20目篩整粒，與滑石粉混勻，壓片，即得。
實(shí)施例7 羥地嗎啉緩釋制劑 配方羥地嗎啉 32g 羥丙基甲基纖維素K15M 20g 羥丙基甲基纖維素K4M 10g 乳糖 5g 2％羥丙基甲基纖維素水溶液 適量 滑石粉0.3g 制備分別取羥地嗎啉、羥丙基甲基纖維素K15M、羥丙基甲基纖維素K4M和乳糖分別過(guò)100目篩混合均勻，以2％羥丙基甲基纖維素水溶液為粘合劑制軟材，過(guò)20目篩制濕顆粒，制濕顆粒于50～60℃干燥，干顆粒過(guò)20目篩整粒，與滑石粉混勻，壓片，即得。
實(shí)施例8 羥地嗎啉緩釋膠囊 配方羥地嗎啉 16g 羥丙基甲基纖維素K15M 20g 羥丙基甲基纖維素K4M 10g 微晶纖維素5g 2％羥丙基甲基纖維素水溶液 適量 滑石粉0.3g 制備分別取羥地嗎啉、羥丙基甲基纖維素K15M、羥丙基甲基纖維素K4M和微晶纖維素分別過(guò)100目篩混合均勻，以2％羥丙基甲基纖維素水溶液為粘合劑制軟材，過(guò)20目篩制濕顆粒，制濕顆粒于50～60℃干燥，干顆粒過(guò)20目篩整粒，與滑石粉混勻，裝膠囊，即得。
實(shí)施例9 羥地嗎啉緩釋膠囊 配方羥地嗎啉 32g 羥丙基甲基纖維素K15M 20g 羥丙基甲基纖維素K4M 10g 微晶纖維素5g 2％羥丙基甲基纖維素水溶液 適量 滑石粉0.3g 制備分別取羥地嗎啉、羥丙基甲基纖維素K15M、羥丙基甲基纖維素K4M和微晶纖維素分別過(guò)100目篩混合均勻，以2％羥丙基甲基纖維素水溶液為粘合劑制軟材，過(guò)20目篩制濕顆粒，制濕顆粒于50～60℃干燥，干顆粒過(guò)20目篩整粒，與滑石粉混勻，裝膠囊，即得。
實(shí)施例10 羥地嗎啉緩釋微囊的制備 配方羥地嗎啉結(jié)晶粉8g 乙基纖維素0.8g 聚乙烯醇 0.5g 醋酸乙酯 適量 制備取羥地嗎啉結(jié)晶粉，混懸于乙基纖維素的醋酸乙酯溶液中，再將此混懸溶液攪拌分散于聚乙烯醇的水溶液中，加適量水稀釋，在不斷攪拌下蒸發(fā)除去醋酸乙酯，即得羥地嗎啉微囊(直徑0.6-0.8mm)。
實(shí)施例11 羥地嗎啉緩釋微囊 配方羥地嗎啉 8g 乙基纖維素 2g 二氯甲烷 適量 1％明膠水溶液 適量 制備取羥地嗎啉和乙基纖維素溶于適量二氯甲烷中，將此溶液分散于1％明膠水溶液中，連續(xù)攪拌2h，蒸發(fā)除去溶劑，即得。微囊直徑140-300μm。
實(shí)施例12 羥地嗎啉緩釋片 配方羥地嗎啉24g 硬酯酸鎂25.5g 甲基硅樹(shù)脂 5g 乙基纖維素 20g 羥丙基纖維素20g 甲苯適量 制備取羥地嗎啉與25g硬酯酸鎂混合，加甲基硅樹(shù)脂溶于25ml甲苯溶液，研和，通過(guò)30目篩制粒，50℃干燥；另取乙基纖維素(粒度為30-80目)與羥丙基纖維素(粒度為30-100目)，加于上述顆粒中，再加0.5g硬酯酸鎂做潤(rùn)滑劑，充分混勻后壓片而制得。
實(shí)施例13 丙烯酸甲基丙烯酸酯共制羥地嗎啉緩釋片 配方羥地嗎啉 32g 聚乙二醇-600 30g 乙基纖維素 30g 丙烯酸-甲基丙烯酯樹(shù)脂40g 制備將聚乙二醇-600和乙基纖維素熔融后，分別倒入加熱板上的陶瓷碟(溫度分別控制在75℃、85℃和90℃各10分鐘)中混合，加入丙烯酸-甲基丙烯酯樹(shù)脂，攪拌10分鐘。然后，在保溫下加入羥地嗎啉再攪拌10分鐘，使藥物分布均勻。將此混合物趁熱倒在玻璃板上，降溫并保持在0℃，使其凝結(jié)。將每塊凝結(jié)的固體轉(zhuǎn)入陶瓷研缽內(nèi)研磨15分鐘，過(guò)篩收集粒度小于420μm的粉粒。常規(guī)壓片法將其壓成片。體外溶出試驗(yàn)表明，藥物自片劑內(nèi)溶出速度受硬度影響較小。硬度可能使片劑骨架內(nèi)的孔道密度和孔道曲率改變，從而影響了釋藥速率。采用固體分散技術(shù)制粒和藥物微粉化可獲得相近的釋藥速率。進(jìn)行固體分散時(shí)采用較高的溫度(90℃)使聚合物內(nèi)藥物高度分散并獲得較大的表面積，因而顯著地增大了單位時(shí)間內(nèi)釋藥速率。
實(shí)施例14 羥地嗎啉骨架緩釋片 配方羥地嗎啉 32g 甘油-硬脂酸酯30g 微晶纖維素 40g 硬脂酸鎂 5g 制備羥地嗎啉以甘油-硬脂酸酯為骨架材料，微晶纖維素為致孔導(dǎo)劑，可用熔融法和溶媒蒸發(fā)法制得。
(1)熔融法將甘油-硬脂酸酯在65℃水上熔融，邊攪拌邊慢慢加入羥地嗎啉與微晶纖維素的混合物(已過(guò)60目篩)。在繼續(xù)攪拌下讓其慢慢冷卻。刮下凝結(jié)物，過(guò)14目篩制粒，加硬脂酸鎂壓片。
(2)溶媒蒸發(fā)法將甘油-硬脂酸酯溶于60℃的乙醇中，加入藥物與微晶纖維素的混合物，充分?jǐn)噭?，蒸去溶媒。干塊粉碎、制粒、壓片。
體外溶出試驗(yàn)表明，此兩種處方制備的緩釋片在一段時(shí)間內(nèi)呈控制藥物溶出的骨架型緩釋、釋藥速率隨處方中微晶纖維素與甘油-硬脂酸酯添加量的配比增大而加快；以溶媒蒸發(fā)法制備的緩釋片比熔融法制備的釋藥較快。
實(shí)施例15 羥地嗎啉緩釋片 配方羥地嗎啉 32g 乙氧基乙基纖維素(含乙氧基12％)5g 甲苯-二氯甲烷的溶液 2.5g 二甲基聚硅氧烷甲苯溶液2.5g 淀粉 30g 甘油棕櫚酸硬酯酸酯0.3g 滑石粉0.5g 微晶纖維素40g 制備取羥地嗎啉、乙氧基乙基纖維素(含乙氧基12％)溶于(1∶1)甲苯-二氯甲烷的溶液與含二甲基聚硅氧烷的甲苯溶液，加壓蒸干溶劑，與淀粉，甘油棕櫚酸硬酯酸酯，滑石粉、微晶纖維素，常法制成片劑即得。
實(shí)施例16 羥地嗎啉控釋顆粒 配方羥地嗎啉 16g 聚磷酸鈉 14g 醋酸乙酯 200ml 聚磷酸鈉-脫乙酰殼多糖的鹽酸液 適量 純化水 20ml 制備取羥地嗎啉與聚磷酸鈉分散于醋酸乙酯中，加入水，以500r/min速度攪拌得凝聚顆粒，分離、干燥，經(jīng)12～20目篩得顆粒，再分散于聚磷酸鈉-脫乙酰殼多糖的鹽酸液(0.3％～0.9％，質(zhì)量/體積)中，用轉(zhuǎn)速1400r/min攪拌20～90min，分離出包衣顆粒，用水洗滌、干燥，即得羥地嗎啉的聚磷酸鈉-脫乙酰殼多糖包衣控釋顆粒。
實(shí)施例17 羥地嗎啉控釋片 片芯配方 羥地嗎啉16g 淀粉20g 十二烷基硫酸鈉 0.2g 10％的淀粉漿7g 滑石粉 0.2g 包衣液配方醋酸纖維素 8.5g PEG1500 1.5g 聚山梨醇80 0.05g 丙酮200ml 制備(1)取羥地嗎啉、淀粉、十二烷基硫酸鈉，混勻用10％的淀粉漿制粒(40目)，于70～80℃干燥，加入滑石粉混合壓制成直徑100mm的片芯。
(2)取醋酸纖維素、PEG1500、聚山梨醇80，用丙酮溶解配成包衣液。
(3)取上述片芯置微型包衣鍋內(nèi)滾動(dòng)，噴包衣液于流動(dòng)片床上，吹熱風(fēng)干燥，再噴霧、干燥，如此反復(fù)操作至每片包衣層重25～30mg時(shí)，取出干燥即得。
實(shí)施例18 羥地嗎啉藥用復(fù)合物注射劑 配方羥地嗎啉8g 精氨酸 2g 無(wú)水乙醇20ml 氯化鈉 適量 注射用水適量 制備將羥地嗎啉、精氨酸溶于無(wú)水乙醇中，減壓蒸發(fā)除去乙醇，加入氯化鈉和注射用水混勻成澄清透明溶液，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過(guò)濾，分裝封口，與100℃流通蒸汽滅菌30分鐘，每支含羥地嗎啉8mg。
實(shí)施例19 羥地嗎啉注射劑 配方羥地嗎啉 8g 聚氧乙烯蓖麻油2g 無(wú)水乙醇 20ml 氯化鈉適量 注射用水 適量 制備將羥地嗎啉溶于無(wú)水乙醇，加入聚氧乙烯蓖麻油混勻，減壓蒸發(fā)除去乙醇，加入適量氯化鈉和注射用水混勻成澄清透明溶液，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過(guò)濾，分裝封口，與100℃流通蒸汽滅菌30分鐘，每支含羥地嗎啉8mg。
實(shí)施例20 羥地嗎啉藥用復(fù)合物注射劑 配方羥地嗎啉8g 乙二胺 0.2g 氯化鈉 適量 注射用水適量 制備將羥地嗎啉溶于乙二胺水溶液中，混勻，再加入適量氯化鈉和注射用水混勻成澄清透明溶液，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過(guò)濾，分裝封口，與100℃流通蒸汽滅菌30分鐘，每支含羥地嗎啉8mg。
實(shí)施例21 羥地嗎啉對(duì)小鼠移植性腫瘤肉瘤S180的抑制作用 實(shí)驗(yàn)方法昆明種健康小鼠，體重18～22g，均為雄性，無(wú)菌條件下吸取傳代7天的小鼠肉瘤S180腹水，用生理鹽水稀釋成密度為4×107cells/ml-1的腫瘤細(xì)胞懸液，混合均勻，每只小鼠0.2ml接種于右前肢腋窩皮下。將接種后24h的小鼠隨機(jī)分成6組，分別給予不同藥物，各組均給藥7天，第8天解剖，稱量小鼠及瘤塊重量，計(jì)算抑瘤率及體重變化情況，結(jié)果見(jiàn)表1。
按公式 抑瘤率％＝(空白對(duì)照組平均瘤重-受試樣品組平均瘤重)/空白對(duì)照組×100％ 計(jì)算各組抑瘤率，并用SPSS進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析； 表1 羥地嗎啉對(duì)小鼠移植性腫瘤肉瘤S180的抑制作用
*與空白組比較p＜0.05 **與空白組比較p＜0.01； 結(jié)果表明，羥地嗎啉對(duì)實(shí)體瘤S180有明顯的抑制作用(P＜0.01)。
實(shí)施例22 羥地嗎啉對(duì)小鼠移植性腫瘤肝癌H22的抑制作用 實(shí)驗(yàn)方法昆明種健康小鼠，體重18～22g，均為雄性，無(wú)菌條件下吸取傳代7天的小鼠肝癌H22腹水，用生理鹽水稀釋成密度為4×107cells/ml-1的腫瘤細(xì)胞懸液，混合均勻，每只小鼠0.2ml接種于右前肢腋窩皮下。將接種后24h的小鼠隨機(jī)分成6組，分別給予不同藥物，各組均給藥7天，第8天解剖，稱量小鼠及瘤塊重量，計(jì)算抑瘤率及體重變化情況，結(jié)果見(jiàn)表2. 按公式 抑瘤率％＝(空白對(duì)照組平均瘤重-受試樣品組平均瘤重)/空白對(duì)照組×100％ 計(jì)算各組抑瘤率，并用SPSS進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析； 表2 羥地嗎啉對(duì)小鼠移植性腫瘤肝癌H22的抑制作用
*與空白組比較p＜0.05 **與空白組比較p＜0.01； 結(jié)果表明，羥地嗎啉對(duì)肝癌H22有明顯的抑制作用(P＜0.01)； 實(shí)施例23 羥地嗎啉對(duì)小鼠移植性腫瘤lewis肺癌的抑制作用 實(shí)驗(yàn)方法C57小鼠健康小鼠，體重18～22g，均為雄性，選一健康的荷lewis肺癌瘤的小鼠(腫瘤生長(zhǎng)必須良好)，剝?nèi)×鰤K后用研磨器將其制備成瘤細(xì)胞懸液，過(guò)200目細(xì)胞篩，計(jì)瘤細(xì)胞數(shù)，用生理鹽水稀釋到2×106cells/0.2ml/20g，接種C57小鼠前肢腋窩皮下。將接種后24h的小鼠隨機(jī)分成6組，分別給予不同藥物，各組均隔日給藥14天，第15天解剖，稱量小鼠及瘤塊重量，計(jì)算抑瘤率及體重變化情況，結(jié)果見(jiàn)表3. 按公式 抑瘤率％＝(空白對(duì)照組平均瘤重-受試樣品組平均瘤重)/空白對(duì)照組×100％ 計(jì)算各組抑瘤率，并用SPSS進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析； 表3羥地嗎啉對(duì)小鼠移植性腫瘤lewi s肺癌的抑制作用
*與空白組比較p＜0.05 **與空白組比較p＜0.01； 羥地嗎啉對(duì)Lewis肺癌有明顯的抑制作用(P＜0.01)； 實(shí)施例24 羥地嗎啉對(duì)異種移植于裸小鼠人肝癌SMMC-7721和肺癌A549有明顯的抑制作用。
試驗(yàn)方法取生長(zhǎng)旺盛期的瘤組織剪切成1.5mm3。左右，在無(wú)菌條件下，接種于裸小鼠右側(cè)腋窩皮下。裸小鼠移植瘤用游標(biāo)卡尺測(cè)量移植瘤直徑，待腫瘤生長(zhǎng)至100-300mm3后將動(dòng)物隨機(jī)分組。使用測(cè)量瘤徑的方法，動(dòng)態(tài)觀察被試物抗腫瘤的效應(yīng)。腫瘤直徑的測(cè)量次數(shù)為每周2次，每次測(cè)量時(shí)同時(shí)稱鼠重。實(shí)驗(yàn)組每周靜脈給藥3次，陽(yáng)性對(duì)照組每周靜脈給藥3次，陰性對(duì)照組同時(shí)給等量生理鹽水。結(jié)果見(jiàn)表4、5。
腫瘤體積(tumor volume，TV)的計(jì)算公式為 TV＝1/2×a×b2 其中a、b分別表示長(zhǎng)寬。根據(jù)測(cè)量的結(jié)果計(jì)算出相對(duì)腫瘤體積(relative tumorvolume，RTV)，計(jì)算公式為RTV＝Vt/V0。其中V0為分籠給藥時(shí)(即d0)測(cè)量所得腫瘤體積，Vt為每一次測(cè)量時(shí)的腫瘤體積?？鼓[瘤活性的評(píng)價(jià)指標(biāo)為相對(duì)腫瘤增殖率T/C(％)，計(jì)算公式如下 TRTV治療組RTV；CPTV陰性對(duì)照組RTV。
表4 羥地嗎啉對(duì)異種移植于裸鼠人肝癌SMMC-7721的抑制作用 表5 羥地嗎啉對(duì)異種移植于裸鼠人肺癌A549的抑制作用 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明對(duì)異種移植裸鼠人肝癌SMMC-7721和人肺癌A549均有明顯的抑制作用(P＜0.01)，優(yōu)于環(huán)磷酰胺和紫杉醇。
實(shí)施例25 對(duì)環(huán)磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫器官質(zhì)量的影響 取昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只，分為生理鹽水對(duì)照組，環(huán)磷酰胺(CTX)模型組和QDML低、中、高劑量組，靜脈給藥，每天1次，連續(xù)7d，除生理鹽水組外，其它各組小鼠于給藥的第1、2d再腹腔注射環(huán)磷酰胺，劑量為40mg/kg.于末次給藥后1h，脫頸椎處死小鼠，摘除胸腺和脾臟稱其質(zhì)量，以胸腺質(zhì)量m1與脾臟質(zhì)量m2(mg)與體質(zhì)量m0(g)之比作為胸腺指數(shù)或脾臟指數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表6。
表6對(duì)環(huán)磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫器官重量的影響(x±s)
△P＜0.05，△△P＜0.01compared with NS group；*P＜0.05，***P＜0.001compared with model group 表6結(jié)果可見(jiàn)，QDML能增加小鼠免疫器官的質(zhì)量，增加其指數(shù)，與空白對(duì)照組比較有顯著差異(P＜0.05)；與環(huán)磷酰胺模型組相比各組胸腺指數(shù)或脾臟指數(shù)明顯增加，有顯著性差異(P＜0.01)。
實(shí)施例26 對(duì)環(huán)磷酰胺致免疫功能低下小鼠碳廊清能力的影響 昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只，分為生理鹽水對(duì)照組，環(huán)磷酰胺模型組和QDML低、中、高劑量組，灌胃給藥，每天1次，連續(xù)7天，給藥的第2天，除生理鹽水對(duì)照組外，其它各組小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺，劑量為100mg/kg.末次給藥后1h，各組小鼠尾靜脈注射按體積比1∶5稀釋的印度墨汁(0.1mL/20g)，此后在第2min(t1)和10min(t2)分鐘從眼眶后靜脈叢取血，每次20μL，分別注入盛有2mL 0.001mg/mL Na2CO3溶液的試管搖勻，用721分光光度計(jì)于680nm處吸光度值A(chǔ)1、A2，并按公式計(jì)算吞噬指數(shù)(K)及校正吞噬指數(shù)(α).K＝(lgA1-lgA2)/(t2-t1)，A1，A2分別為t1和t2時(shí)刻的吸光度值；α＝W*×3√K/WLS W為小鼠質(zhì)量，WLS為肝脾合重，結(jié)果見(jiàn)表2。
表7對(duì)環(huán)磷酰胺致免疫功能低下小鼠碳廊清能力的影響(x±s)
△△P＜0.01，△△△P＜0.001compared with NS group；*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001compared with model group. 表7結(jié)果可見(jiàn)，QDML具有顯著促進(jìn)免疫功能低下小鼠碳廊清能力，對(duì)免疫功能低下小鼠具有免疫調(diào)節(jié)作用，與空白組比較差異顯著(P＜0.01)，與環(huán)磷酰胺組比較差異非常顯著(P＜0.001)。
權(quán)利要求
1.含有羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物的藥物組合物制劑，其特征在于是將具有通式(I)結(jié)構(gòu)的羥地嗎啉或具有通式(II)結(jié)構(gòu)的羥地嗎啉藥用復(fù)合物作為有效成分，與藥學(xué)上可接受的藥物載體混合制成的藥物組合物制劑；
通式(II)中，B表示C1-C8含氮有機(jī)堿或氨基酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物制劑，其特征在于所述的藥學(xué)上可接受的藥物載體選自稀釋劑、賦形劑、水、填充劑、崩解劑、粘合劑、潤(rùn)濕劑、表面活性劑、吸附載體、潤(rùn)滑劑、增溶劑和/或助溶劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物制劑，其特征在于藥物組合物制劑的劑型包括片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、噴霧劑、凝膠劑、凝膠氣霧劑、混懸劑、沖劑、貼劑、軟膏、丸劑、散劑、乳劑、注射劑、輸液劑、凍干注射劑、脂質(zhì)體注射劑、靶向給藥注射劑、栓劑、緩釋制劑和控釋制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組合物制劑，其特征在于是羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物作為有效成分與填充劑和/或崩解劑制成片劑或膠囊劑；或者是羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物作為有效成分與填充劑和/或羥丙甲纖維素制成緩釋制劑；或者是羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物作為有效成分與填充劑、羥丙甲基纖維酸酯、乙基纖維素、聚乙烯醇、甲基硅樹(shù)脂、羥丙基纖維素、聚乙二醇-600、丙烯酸-甲基丙烯酯樹(shù)脂、乙氧基乙基纖維素、甘油棕櫚酸硬酯酸酯、聚磷酸鈉-脫乙酰殼多糖和/或PEG1500制成緩釋制劑或控釋制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組合物制劑，其特征在于是羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物作為有效成分與油相組合，制成注射劑或口服乳劑，所述的油相是大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油和/或橄欖油。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物制劑，其特征在于在油相中還可加入增溶劑或潛溶劑或抗氧劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求2或4所述的藥物組合物制劑，其特征在于所述的填充劑是蔗糖、乳糖、微晶纖維素、糊精、淀粉和/或磷酸鈣；所述的崩解劑是羥丙基甲基纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚維酮和/或交聯(lián)羧甲基纖維素。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物制劑，其特征在于所述的藥物組合物制劑可通過(guò)口服或非腸胃給藥的方式施用于患者；用于口服時(shí)，可將其制成常規(guī)的固體制劑或液體制劑，所述的固體制劑是片劑、膠囊劑、粉劑或顆粒劑，所述的液體制劑是水溶液、油懸浮劑、糖漿或酏劑；用于非腸胃給藥時(shí)，可將其制成注射用的溶液、粉劑或油性懸浮劑等。
9.以上任意權(quán)利要求所述的藥物組合物制劑在治療肝癌、肺癌及腫瘤中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有羥地嗎啉或羥地嗎啉藥用復(fù)合物的藥物組合物制劑。采用的技術(shù)方案是將具有通式(I)結(jié)構(gòu)的羥地嗎啉或具有通式(II)結(jié)構(gòu)的羥地嗎啉藥用復(fù)合物作為有效成分，與藥學(xué)上可接受的藥物載體形成的藥物組合物制劑；其劑型是藥學(xué)上所說(shuō)的任何一種劑型，本發(fā)明還公開(kāi)了該藥物組合物制劑在治療肝癌、肺癌及其他腫瘤中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P35/00GK101766599SQ20101010751
公開(kāi)日2010年7月7日 申請(qǐng)日期2010年2月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月9日
發(fā)明者陳燁, 王洋, 徐利鋒, 盧紅, 鄒廣輝 申請(qǐng)人:遼寧大學(xué)